JPS63201198A - 合成ｇｈｒｈ類似化合物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 （産業上の利用分野） 本発明は、ヒトまたは他の動物の下垂体機能に影響を及
ぼすペプチドに関する。特に、本発明は、下垂体より成
長ホルモン放出を促進するペプチドに関する。

（従来の技術および発明が解決しようとする課題）生理
学者達は、長い間、視床下部がそれぞれの下垂体ホルモ
ン分泌を刺激または阻害する特殊な物質を産み出す視床
下部とともに腺下垂体の分泌機能をコントロールするこ
とを認めていた。視床下部放出因子は、下垂体ホルモン
甲状腺刺激ホルモン（トリペプチドＴＲＦ）、下垂体性
腺刺激ホルモン黄体ホルモンと小胞刺激ホルモン（デカ
ペプチドＬＲＦ、ＬＨ−ＲＨまたはＧｎＲＨ）および下
垂体ホルモンとアデノコルチコトロビン（４１番アミノ
酸ポリペプチドＣＲＦ）によって特徴づけられる。ソマ
トスタチンと称される抑制因子も、成長ホルモン（ＧＨ
）分泌を抑制するテトラデカペプチド形態で特徴づけら
れる。ＧＨ放出因子（ＧＲＦｓ）は、ヒト膵臓腫瘍と同
様にラット、豚、牛、羊、ヤギおよびヒト視床下部から
単離された。ラットを除いて、全てはアミド化カルボキ
シ末端を有する４４アミン酸を含むＧ　ＲＦ　ｓを特徴
づけた。これらの下垂体親和性因子の各々は、全合成に
より再生産された。天然構造類似化合物は、構造と活性
との関係を解明するため、そして最終的には増強された
ホルモン活性および／または代謝安定性等の改良された
特性を有する合成コンゴナ−（ｃｏｎｇｏｎｅｒｓ）を
提供するためにも合成されな。合成ヒト成長ホルモン放
出因子に関する研究［ｈＧＲＦとその類似化合物（エフ
。リング等、バイオケミカル　アンド　バイオフィジカ
ル　リサーチ　コミュニケーションズ、１９８４年、第
１２２巻、３０４〜３１０頁；第１２３巻、８５４〜８
６１頁；ブイ、エイ、ランセ等、バイオケミカル　アン
ドバイオフィジカル　リサーチ　コミュニケーションズ
　１９８４年第１１９巻　１６５〜２１２頁（Ｎ、　Ｌ
ｉｎｇ、　。

ｅｔ　ａｔ、、　Ｂ１０Ｃｈｅ１１．５ｔｏｐｈｙｓ、
　ＲｅＳ、　Ｃｏｍｍｕｎ、、　（１９８４）、　ｖｏ
ｌ、　１２２．　ｐｐ、　３０４−３１０；　ｖｏｌ、
　１２３．　Ｄｐ、　８５４−８６１；　Ｖ、　Ａ、　
Ｌａｎｃｅ、　ｅｔ　ａｌ、、　Ｂｉｏｃｈｅｍ、　Ｂ
ｉｏｐｈｙｓ、　Ｒｅｓ、　Ｃｏｕｕｎ、、　１９８４
．　ｖｏｌ、　１１９．　ｐｐ、　１６５−２７２）Ｊ
は、次の事実を明らかにしな。

ａ）ｈＧＲＦのＮＨ２−末端チロジン残基の除去は、そ
の活性を０．１％に低下させる。この残基のＮ−アセチ
ル化またはＬをＤ異性体へ置換する変更はｈＧＲＦ　（
１−４０）−ＯＨのインビトロバイオ活性を２〜３％に
下げ、そしてｈＧＲＦ（１−２９＞−ＮＨ２のインビボ
効力を１０−１２倍上昇させる。これらの発見は、かが
るＴ７！ｉ基の存在が高バイオ活性を有するｈＧＲＦ分
子を分は与えることに必須であることを示す。

ｂ〉最初の２９残基、少なくとも、例えばｈＧＲＦ　（
１−２９）−ＮＨ２とｈＧＲＦ　（１−３７＞−ＮＨ２
を有するフラグメントは、ｈＧＲＦの効力の少なくとも
５０％を有する。加えてアミノ酸削除は、バイオ活性の
顕著な減少を生ぜしめる。

例えば、ｈＧＲＦ　（１−２７）−ＮＨ２とｈＧＲＦ　
（１−２３）　−ＮＨ２は、それぞれｈＧＲＦ効力の１
２％および０．２４％を示す。これらの発見は、ｈＧＦ
？、Ｆの２９位におけるアルギニン残基の重要性を示す
。同様に、アグマチン（Ａｇｍ）残基と称される４−グ
アニジノ−ブチルアミノ基は、あるペプチドにおいてア
ルギニン残基の役割を果し、そして酵素分解の耐性供与
において影響を与えることも判る［ニス、バジュスズ等
、イン；ペプチドス、１９８２年（ゲイ、プラムとビー
、メロン、イブ−ニス）、つオルター　グリュイター、
ベルリン−ニューヨーク、１９８３年、　６４３−６４
７頁（Ｓ、　　Ｂａｊｕｓｚ、　　ｅｔ　　ａｌ、、　
　ｉｎ：　　ＰＥＰ丁ＩＤＥＳ、　　１９８２．　　（
に。

Ｂｌａｈａ　ａｎｄ　Ｐ、　　）ｔｅｌｏｎ、　　ｅｄ
ｓ）、　　Ｗａｉｔｅｒ　Ｇｒｕｙｔｅｒ、　　Ｂｅｒ
ｌｉｎ−Ｎｅｖ　Ｙｏｒｋ、　１９８３．　ｐｐ、　６
４３−６４７）。］古典的（解決）方法は、今日までア
グマチンペブチド調製に用いられてきた。ＧＲＦＳとそ
の頭領化合物の調製に好適なことが証明されたペプチド
合成技術を採用して、ペプチド固相合成法の方法論を提
供することが好ましい。

（課題を解決するための手段） ペプチドの末端２８位におけるオメガ−グアニジノ低級
アルキル基の供給に鑑みて、体内酵素分解に耐えるヒト
を含む動物の下垂体ＧＨ放出を極めて刺激する、新規な
一連の合成ペプチドが提供される。同様に、前記オメガ
−グアニジノアルキル基を支持体相に付着させる方法、
メリフィールド（ＭｅｒｒｉｆｉｅｌＳ）固相合成法で
前記ペプチドを合成する方法および前記ペプチドを前記
支持体相から開裂する方法が提供される。本発明の最終
生成物は、次配列を有するペプチド（短縮形［ＰｅＰ］
）である。

Ｑ　’　−Ｃｏ−Ｒ２−Ｒ３−Ａｌａ４−Ｉｌｅ５−Ｐ
ｈｅＢ　−Ｔｈｒ７−ＲＢ−Ｓｅｒ９　　−Ｒｔｏ−Ａ
ｒ（Ｉ１１−Ｒｘ２−Ｒｌｉ−Ｒｘ４−Ｒｘ５−Ｇｌｎ
ｔ６−Ｒｘ７−Ｒｓ　ｓ−Ａ　Ｉａ　ｔ　＊−Ａｒ　ｇ
２ｏ−ＬｙＳｚ　ｔ−Ｌｅｕ２２−Ｒｚ３−Ｒ２４−Ｒ
ｚｓ−Ｉ　ｆｅｚｓ−Ｒ２７−Ｒｔｏ−ＮＨ−Ｑ　２Ｉ
。

［但し、Ｑｌは、 「但し、Ｘ＝Ｈまたは０Ｈ Ｙ＝Ｈ，ＯＨ，ＮＨ２または ＣＨ３Ｃ０ＮＨ１ Ｗ＝低級アルキルまたはハロアルキル （但し、ハロは塩素またはフッ素、アルキル基の炭素数
は１〜５である。） ハロアルキルである） ｍ＝１または２ ｎ＝ｏ、１まなは２ ０＝０．ｔなは１を示す。］ の構造のオメガまたはアルファーオメガ置換アルキル、 Ｒ２はＡｌａ、Ｄ−ＡｌａまたはＤ−Ｎ−メチル−Ａｌ
ａ、 Ｒ３はＡｓｐ、Ｄ−Ａｓｐ、ＧｌｕまたはＤ−Ｇｌｕ、 Ｒ８はＡｓｎ、Ｄ、−Ａｓｎ、ＳｅｔまたはＤ−３ｅ　
ｒ　。

Ｒ１０はＴｙｒまたはＤ−Ｔｙｒ、 Ｒ１２はＬｙｓ、Ｄ−Ｌｙｓ、ＡｒｇまたはＯｒｎ。

Ｒ１３はＶａｌまたは、Ｉｌｅ。

Ｒ１４はＬｅｕまたはＤ−Ｌｅｕ。

Ｒ１５はＧｌｙ、Ｎ−メチル−０１ｙまなはＤ−Ａｌａ
。

Ｒ１７はＬｅｕまたはＤ−Ｌｅｕ。

Ｒｔｓは’１’　ｙ　ｒまたはＳｅｔ。

Ｒ２３はＬｅｕまたはＤ−Ｌ、ｅｕ。

Ｒ２４はＧｉｎまたはＨｉｓ。

Ｒ２５はＡｓｐ、Ｄ−Ａｓｐ、Ｇｌ　ｕまたはＤ−ＧＩ
ｕ。

Ｒ２７はＭｅｔ、Ｄ−Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｎｌｅ、ＩＩｅ
、Ｖａｌ、ＮＶａ、Ｌｅｕ。

Ｒ２８はＡｓｎまたはＳｅｒ。

Ｑ２は次式で示される低級オメガ−グアニジノアルキル
基 （ＣＨ２）Ｐ、ＮＨ，Ｃ，ＮＨ２。

１ｉ Ｑ２　’は−（ＣＨ）Ｐ、ＮＨ，Ｃ，ＮＨ，−［但し、
ｐ＝２〜６を表わす。コ および薬学上供与される有機または無機塩基および有機
または無機酸を有するそれらの薬学上許容される塩付加
物。

本発明のペプチド［ＰｅＰ］は、炊方法に従って合成さ
れる。

第１の方法において、ＮＨ２−Ｑ２部分のＱ２セグメン
トのアミン樹脂およびヒドロキシ型樹脂から成る群から
選ばれた支持体用［ＳＰ］へは、塩基の存在下にｔ−ブ
トキシカルボニル化剤とＮＨ２、Ｑ２とを反応させテＢ
ｏｃ　−ＮＨ，Ｑ　２　　（Ｖ）を形成し、水性アルカ
リの存在下水溶性エーテル中で一５〜１０℃において前
記Ｂｏｃ−Ｎ）ｆ、Ｑ２とアリールスルホニルハライド
、好ましくは次式８式％（） ［但し、式中、Ｈａｌは塩素または臭素、そして＜０＞
は（明細書を通じて）非置換ベンゼン環を示す。コで表
わされるものと反応させて、ジ低級アルキルカルボジイ
ミドの作用で支持体用［ＳＰＪにカップルし Ｂｏｃ−Ｎ１１−Ｑ”−３ｏ　　２　−＜Ｏ＞−０−Ｃ
Ｈ２−Ｃｏ−［ＳＰｌ　　　　　　（’Ｖｌｌｌ）を形
成する、対応する Ｂｏｃ−ＮＨ−Ｑ２−３Ｏ２−＜０＞−０ＣＨ２−ＣＯ
ＯＩＩ　　　　　　　　　　　（Ｖｌｌ　）を形成させ
る一連の段階から成る。

一般に、支持体用［ＳＰ］は、次式 ８式％（） （但し、式中、［Ｐ　ｍ　」は、重合体基質である。）
のアミノ樹脂であることが好ましい。

この解決法では、下記に詳細に議論されるＢ。

Ｃプロトコールによりペプチド配列を形成することが期
待される。

同様に、Ｂｏｃプロトコールの使用を期待する他の実施
態様において、Ｂｏｃ−ＮＨ−Ｑ２とＨａｔ　　　　ｓ
ｏ２−＜Ｑ＞　　　　ＯＣＨ２ＣＯ［ＳＰ］（Ｘ）［但
し、式中、Ｈａｔは臭素または塩素である。］とを反応
させて ８ｏｃ−Ｎｔｆ−Ｑ２　２−８Ｏ２−＜０＞−０−Ｃｌ
　　２　−ＣＯ−［ＳＰ］（ＸＩ）を形成する。

さらに、他実施悪様は、グアニジノアルキル基を支持体
用に付着できる。この方法は、塩基の存在下にＮ−ベン
ジロキシ　カルボニル　クロリドとＮＨ２・Ｑ２　とを
反応させてＣｂｚ−ＮＨ，Ｑ２を形成し、強水性塩基の
存在下に前記Ｃｂｚ−ＮＨ，Ｑ２と Ｈａｌ　　−３０２−＜Ｏ＞　　−０−Ｃ１２−Ｃｏｏ
ｌ　　　　　　（ＸＩＩ）［但し、式中Ｈａｌは塩素ま
たは臭素であり、Ｍは炭素数１〜５の低級アルキルまた
は低級アルコキシ、そしてＳ＝ｔ〜３を表わす。］で表
わされなる置換アリールスルホニル　クロリドとを反応
させ、そして接触水素化によりＣｂｚ基を除去して、 ＨＮＨ−０２′−３Ｏ２＜Ｑ＞　　−ｏｃＨ２−ＧＯＯ
Ｎ　　　（ＸＩＩＩ）を生成させ、塩基の存在下に前記
生成物と９−フルオレニルメトキシ　カルボニル　クロ
リドとを反応させて、 Ｆｍ０Ｃ−ＮＨ−〇　　”　−３０２−＜０＞−０ＣＲ
，−ＣＯＯＨ（ｘｔｖ）ｓ を生成し、この生成物を前記支持体用［ＳＰ］にカップ
ルして、 Ｆｍｏｃ−８８−Ｑ２′−３ｏ　　２　−＜Ｏ＞−〇−
ＣＩ　　２　−Ｃｏ−［ＳＰｌ　　　（ＸＶ）ｓ を生成させる一連の段階からなる。

以上のように、この方法は、下記に詳細に示されるＦｍ
ｏｃプロトコロールを使用しようとする場合に好ましい
。

末端に前述の保護アミノーアルキルーグアニジノ　スル
ホフェノキン−アセチル−支持体相を利用すると、所定
のペプチド自身は、下記に詳細に示される保護基と特異
法を利用する同和合成法によって従来法で形成される。

合成が完成するとペプチドのグアニジノアルキル端は、
−又は二つの方法により付着しているスルホニル基から
開裂される。Ｂｏｃプロトコロールが利用されるならば
、開裂剤は無水フッ化水素酸、一方Ｆｍｏｃプロトコー
ルの場合には、開裂剤は、トリフルオロ酢酸である。

本発明による製薬組成物は、薬学上または獣医学上許容
可能な液体または固体担体に分散された式Ｉのペプチド
またはそれらのいずれかの非毒性塩を含有する。かかる
製薬組成物は、治療目的の投与用としてヒトおよび動物
の両者の臨床医薬及び診断用に使用し得る。更に、それ
ら製薬組成物は、ニワトリを含む混血動物の成長促進、
そして塩、ウナザ等の冷血動物用にアクイバルチャー（
ａｑｕｉｖｕｌｔｕｒｅ）に使用し得る。

（作用） ペプチドを規定するために使用される命名法は、Ｎ・末
端アミノ基が左側にあり、そしてＣ・末端カルボキシ基
が右側にある従来の表現法による工ＵＰＡＣ−ＩＵＢコ
ミッション　オン　バイオケミカル　ノーメンクレヘチ
−？　−（ＩＵＰＡＣ−ＩＵＢ　Ｃｏｍｍ１ｓｓｉｏｎ
　Ｏｎ　Ｂ１０ＣｈｅｌｌｉＣａｌ　ＮＯｍｅｎＣｌａ
ｔｕｒｅ）　　［ニーＴ：７ビアン　ジャーナル　オン
　バイオケミストリー１９８４年、１３８巻　９〜３７
頁（Ｅｕｒｏｐｅａｎ　Ｊ、　Ｂｉｏｃｈｅｍ、　１９
８４．１３８．９−３７）　］　（７）特定によるもの
である。

天然アミノ酸によってＧｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ。

Ｌｅｕ、Ｉ　ｌｅ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、
Ａｓｐ、Ａｓｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｎ、Ｃｙｓ。

Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｐｒｏ、ＴｒｐおよびＨｉｓ
からなるタンパク質中に見い出された普通の天然に生ず
るアミノ酸の一つが表わされる。Ｎｌｅによってノルロ
イシン、Ｎｖａによってノルバリン、ＭｅＡｌａによっ
てＮ−メチル−アラニンが表わされる。アミノ酸残基が
異性体を有する場合に、他に表示がなければアミノ酸の
Ｌ形である。

使用される他の重縮形は次のようである。

ＡｃＯＨ酢酸 Ａｃ０Ｅｔ　　　　エチルアセテート Ａｃ２０　　　　　無水酢酸 Ｂｏｃ−ｔ　　−ブチロキシカルボニル−ＤＩＣジイソ
アロビルカルボジイミド ＤＩＥＡ　　　　　　　　　　ジイソプロピルエチルア
ミンＤＭＦ　　　　　　　　　　　　ジメチルホルムア
ミドＨＯＢｔ　　　　　　　　　１　　−　ヒドロキシ
ベンぞントリアゾールへイＹレートＨＰＬＣ真性ｔｉ体
クロマトグラフ（−Ｆｍｏｃ　−フルオレニルメトキシ
カルボニル−Ｍ　ｅ　ＯＨメチルアルコール ＴＥＡ　　　　　トリエチルアミン ＤＣＣＩ　　　　　　　　　　ジシクロへキシルカルボ
ジイミド２−ＣＱ−２２−クロロ　−ペンジロ今ジカル
ボニルＤＣＢ　　　　　　　　　　　　２．６　−　ジ
クＵＵベンジルＴｏｓ　　　　　　　　　　　　Ｄ−）
ルエンスルホニルＴＦＡ　　　　　　）ルフルオロ酢酸 Ｃｂｚ　　　　　　ベンジロキシカルボニル本発明の方
法は、多くの支持体相を使用して実施されるであろう。

これら支持体相は、アミノメチル樹脂（好ましくは１％
架橋）、ベンズヒドリルアミン樹Ｎ（好ましくは２％架
橋）、ｐ−メチルベンズヒドリルアミン樹脂（好ましく
は２％架橋）等のアミノまたはヒドロキシ樹脂であって
もよい。

この方法の出発原料としては、アルキル部分の炭素数が
２〜６、好ましくは３〜５の多くのアミノ低級アルキル
グアニジンが使用できるであろう。

しかし、特に好ましくはアグマチンまた４−グアニジノ
　ブチルアミンである。

本発明を成功に導く鍵は、グアニジノ部分と支持体相間
に安定であるが簡単に開裂可能な橋グループを供給する
ことにある。かかる橋は、スルホニル　フェノキシ　ア
セチル成分により簡単に与えられることが見い出された
。

合成例の一つの実施態様において、アグマチンの主要な
アミン基は、好ましくは塩基の存在下常温における反応
により、ｔ−ブトキシカルボニル化剤、好ましくはジ［
−ブチル　ジカルボネートで保護され、そしてスルホニ
ル　クロリドまたはスルホニル　プロミドであるアリー
ル　スルホニル　ハライド（ＶＩ）と同様な溶媒系にお
いて反応させられる保護物質（Ｖ　）を提供する。最終
合成配列は、Ｂｏｃプロトコールに従うけれども、アリ
ール　スルホニル　ハライドの芳香環は、かかる位置が
中間脱保護剤としてトリフルオロ酢酸そして樹脂支持体
相からの最終開裂剤としてフッ化水素の使用を可能とす
るから、置換されない。

このようにして得られた保護スルホアミノフェノキシ酸
１（ＶＩＩ）は、その後、支持体相にカップルされる。

好適な方法では、カップリングは、いずれの既知のジア
ルキルカルボジイミド　カップリング法を使用しても実
施される。例えば、常温でジメチルホルムアミド中にお
いて１−ヒドロキシベンゼントリアゾールハイドレート
の存在下にジイソプロピル　カルボジイミドが利用され
るであろう。また、Ｎ、Ｎ　’ジシクロへキシル　カル
ボジイミドも使用されるであろう。この方法で、前記Ｂ
ｏｃ−スルホンアミノ　フェノキシ酢酸（Ｖｌｌ）は、
２：１のモル比でカルボジイミドと混合され、Ｎ、Ｎ　
’ジシクロヘキシル尿素が形成され、濾過され、そして
生じた溶液は、支持体相、好ましくはアミノメチル樹脂
に加えられる。この反応は、樹脂アミノ成分：Ｂｏｃ−
アミノ酸ニジシクロへキシル　カルボジイミドを１：６
：３の比率で利用して行なうことが好ましい。

この方法の他の修正法では、カルボキシ　メトキシ　フ
ェニル　スルホン酸は、前記カルボジイミド法に従って
アミノメチル樹脂とカップルさせられ、生成物のスルホ
ン酸基は、ジメチルホルムアミド中でチオニル　クロリ
ドとの反応で対応するスルホニル　クロリドに変化させ
られ、そして得られた生成物は、好適な有機溶媒、例え
ばクロロホルム中のテトラメチルグアニジン中で有機塩
基の存在下に保護アミノ　アルキル　グアニジン（Ｖ）
とカップルさせられ所定のカップル化生成物を生ずる。

前記のように、保護基がＢｏｃならば、スルホンアミド
橋のアリール部は置換されない。しかしながら、Ｆｍｏ
ｃプロトコールに基づいて進められるならば、メチルま
たはメトキシ基がスルホンアミド基を弱め、そしてトリ
フルオロ酢酸により開裂可能とするなめに、前記フェニ
ル部を３個までのメチルまたはメトキシ基で置換するこ
とが好ましい。

アミノ　アルキル　グアニジン部保護のためＢｏｃを利
用する第３実施悪様において、水性アルカリ、好ましく
は水酸化ナトリウムの存在下に、好ましくは約４Ｎで攪
拌しながら、Ｎ−ベンジロキシ　カルボニル　クロリド
が利用され、そして約５・〜約１５℃で冷却される。酸
性化すると保護化生成物が沈降し、その後前記のように
アリールスルホニル　クロリド（ＸＩＩ）と反応させら
れる。しかしながら、前記のように、この場合にアリー
ル　スルホニル　クロリド（ＸＩＩ）は、アルキルまた
は低級アルコキシ、好ましくはメチルまたはメトキシで
あろう１〜３置換体に好ましくはなるべきである。この
反応は、強いが希釈水性塩基、好ましくは約ＩＮ水酸化
ナトリウムの存在下で実施される。反応混合物は酸性に
され、そして、生成物は、好ましくはエチルアセテート
のような水と混合しない有機溶媒で抽出される。その後
、抽出物は濃縮され、そして還元性不活性溶媒中で活性
炭上のパラジウムのような触媒の存在下において、好ま
しくは常温常圧で、水素化される。エチルアセテートが
抽出剤として使用されると、水素化溶媒としても使用さ
れるだろう。ｃｂ２基の除去後、生成物（Ｘ　ＩＩＩ　
＞は、塩基の存在下でＦｍｏｃ−（１１と反応させて、
前述の方法で支持体相にカップルさせられる、対応Ｆｍ
ｏｃ保護スルホンアミド　アリーロキシ酢酸（Ｘ　ＶＩ
　’）を生成する。

ペプチドは、専用固相技術、部分固相技術、フラグメン
ト濃縮または古典的液相合成法等の好適な方法で合成さ
れる。最近開発された組換型ＤＮＡ技術を使用すると、
天然アミノ酸残基だけを含有する類似化合物の一部分を
調整できるであろう。

例えば、専用固相合成技術は、次の教科書に示されてい
る［「ソリッド　フェース　ペプチド　シンセシス」ジ
ェイ、エム、ステワードとジエイ。

ディー、ヤング、ピアース　ケミカル　カンパニー、ロ
ックフォード、■１１１．１９８４年（第２版）、ジー
、バラニーとアール、ビー、メリフィールド「ザ　ペブ
チドス」シーエッチ　１　、１−２８５頁１９７９年、
アカデミツク　プレス、インコーホレーテッドとエム、
ボダンスズキー「プリンシプルズオン　ペプチド　シン
セシス」スプリングーフェアラーク　１９８４年（”５
ｏｌｉｄ　Ｐｈａｓｅ　Ｐｅｐｔｉｄｅ　５ｙｎｔｈｅ
ｓｉｓ”、　Ｊ、Ｍ、　５ｔｅｖａｒｔ　ａｎｄ　Ｊ、
　Ｄ、　Ｙｏｕｎｇ、　ＰｉｅｒｃｅＣｈｅｍ、　Ｃｏ
ｍｐａｎｙ、　Ｒｏｃｋｆｏｒｄ、　Ｉｌｌ、、　１９
８４　（２ｎｄ、　ｅｄ、）、　　　Ｇ、　　Ｂａｒａ
ｎｙ　ａｎｄ　　Ｒ，Ｂ、　　）ｌｅｒｒｉｆｉｅｌｄ
、　　”丁ｈｅ　　ｐｅｐｔｉｄｅｓ”、　　Ｃｈ、　
　１．　１−２８５．　　ｐｐ、　　１９７９．　　Ａ
ｃａｄｅｍｉｃ　　Ｐｒｅｓｓ、　Ｉｎｃ、、　ａｎｄ
　Ｈ，Ｂｏｄａｎｓｚｋｙ、　”Ｐｒ１ｎｃｉｐｌｅｓ
　ｏｆＰｅｐｔｉｄｅ　５ｙｎｔｈｅｓｉｓ”、　Ｓｐ
ｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ、　１９８４．月。

古典溶液合成法は、次の論文に詳細に記載されている「
「メソーテン　デル　オーガニツシエンケミ−（オーベ
ンーヴエイル）：シンセーゼ　フォノ　ペブティデン」
　イー、“ヴユンシエ（１ｉ集者）　　（１９７４年）
ジョージ　シーン　フェアラーク、シュットガルト　ウ
エストジャーマニー（°Ｈｅｔｈｏｄｅｎ　ｄｅｒ　Ｏ
ｒｇａｎｉｓｃｈｅｎ　Ｃｈｅｍｉｅ　（Ｈｏｕｂｅｎ
−Ｗｅｙｌ）：　５ｙｎｔｈｅｓｅ　ｖｏｎ　Ｐｅｐｔ
ｉｄｅｎ”、　Ｅ、　Ｗｕｎｓｃｈ　（ｅｄｉｔｏｒ）
（１９７４）Ｇｅｏｒｐ　　丁ｈｉｅｍｅ　　Ｖｅｒｌ
ａｐ、　　Ｓｔｕｔｔｇａｒｔ、　　Ｗ、　　Ｇｅｒｍ
ａｎｙ、月。

かかる合成法に共通することは、多くのアミノ酸部分の
反応性側鎖官能基を、詰碁が最終的に除去されるまでそ
の部位において生ずる化学反応から保護する好適な保護
基で、保護することである。

同様に、共通することは、アミノ酸のα−アミン基また
はアルボキシ基における全反応の間フラグメントを保護
することであり、続いてα−アミン保護基を選択的に除
去し、その位置においてその後の反応を起こさせること
である。従って、合成段階において、適当な残基にリン
クされた側鎖保護基を有するペプチド鎖の所定の配列に
位置したアミノ酸残基の各々を含む中間化合物が生産さ
れることは一般的である。

次式の中間体は、本発明の範囲内であると考えられる。

即ち［ＰＲ］　　［ＰｅＰ］は、アミノ樹脂およびヒド
ロキシ型樹脂から成る群から選ばれた支持体相［ＳＰ］
に付着し、前記組合せは次構造を有し、［ＰＲ］［Ｐｅ
Ｐ］　　　３０２　　　　＜０＞　　−ＯＣＨ２ＣＯ［
３１）］ｓ ［但し、式中、Ｍは水素、炭素数１〜５の低級アルキル
また低級アルコキシ、好ましくはメチルまたはメトキシ
、Ｓは０，１．２または３、［ＳＰコはアミノまたはヒ
ドロキシ型樹脂を表わす。］好ましくは、［ＰＲ］　　
［ＰｅＰ］は次構造を有するＸ　Ｉ　−Ｑｌ　−ＣＯ−
Ｒ２−Ｒ３（Ｘ３　）−＾１ａ　４−ＩＩｅ！Ｊ−ｐｈ
ｅ＠−ｒｈｒ７　（Ｘ７　）−ＲＢ　（Ｘ７　　ｏｒ旧
−５ｅｒ９　（Ｘ７）−Ｒｔ。

（Ｘ１０）　−Ａｒｇｔｔ（Ｘ”）　−Ｒ１２（Ｘ”、
　Ｘ　”）　−Ｒ１３−Ｒ１４−Ｒｘ、−Ｇｌｎｔ６−
Ｒ１７−Ｒｔｓ（Ｘ７ｏｒ　Ｘ　１０＞　−Ａｌａｔｓ
−ＡｒＱｚ。

（Ｘ”）−Ｌｙｓ　２１（Ｘ”）　−Ｌｅｕｚｚ−Ｒｚ
ｉ−Ｒｚ４（ＨＯｒ　Ｘ２４）−Ｒ２５（Ｘ　３）−Ｉ
ｌｅ　２６−Ｒ２７−Ｒ２８（ＨＯｒ　Ｘ　７）　−Ｎ
Ｈ−Ｑ２′ ■ ［但し、式中、Ｘｌは、水素またはα−）保護基のいず
れかを表わす。］。ＸＩで意図されるα−アミン保護基
は、ポリペプチド段階（ｓｔｅｐ−ｗｉ　ｓｅ）合成法
において有効であることが知られているものである。Ｘ
ｌとして使用されるα−アミノ保護基には、（１）フル
オレニルメチロキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）、ベンジロ
キシカルボニル（ｃｂ２）およびｐ−クロロベンジロキ
シカルボニル。

ｐ−ニトロベンジロキシカルボニル、ｐ−ブロモベンジ
ロキシカルボニルおよびｐ−メトキシベンジロキシカル
ボニル等の置換Ｃｂｚのような芳香族ウレタン型保護基
、（２）ｔ　−ブチロキシカルボニル（Ｂｏｃ）、ジイ
ソプロピルメトロキシカルボニル、アリロキシカルボニ
ルのような脂肪族ウレタン保護基、そして（３）シクロ
ペンチロキシカルボニル、アダマンチロキシカルボニル
およびシクロへキシロキシカルボニルのようなシクロア
ルキルウレタン型保護基がある。２種類の好適な合成経
路があり、１つは好ましいα−アミノ保護基がＢｏｃで
あり、他は、前記保護基がＦｍ。

Ｃの場合である。

ベンジル（ＯＢｚ　１　）　、２．６−ジクロロベンジ
ルおよびｔ−ブチルのようなＸ３は、ＡｓｐまたはＧｌ
ｕのカルボキシ基用の好適なエステル形成保護基である
。ＢｏｃプロトコロールにおいてＯ−シクロヘキシルお
よびＯ−ベンジルが好ましくＦｍｏｃプロトコールでは
℃−ブチルが好ましい。

ｔ−ブチル、Ｂｚｌおよび２，６−ジクロロ−ベンジル
のようなＸ７は、ＴｈｒまたはＳｅｒのヒドロキシ基用
の好適な保護基であろう。Ｂｏｃプロトコールの好適な
保護基はＢｚＬであり、Ｆｍ０Ｃプロトコロールにおい
てはｔ−ブチルである。

ｔ−ブチル、Ｂｚｌ、４Ｂｒ−Ｃｂｚおよび２゜６−ジ
クロロベンジル（ＤＣＢ）のようなＸ１０は。

Ｔｙｒのフェノール性ヒドロキシ基用の好適な保護基で
あろう。好適な保護基は、Ｂｏｃプロトコールでは２，
６−ジクロロベンジル、Ｆｍｏｃプロトコールではｔ−
ブチルである。

ニトロ、Ｔｏｓ、メチル−（ｔ−ブチルベンゼン）−ス
ルホニル、４−メトキシ−２，３，６−）リメチルベン
ゼンスルホニルのようなＸ１１は、Ａｒｇのグアニジノ
基用の好適な保護基である。Ｂｏｃプロトコロールにお
いてＴｏｓは好適な基であり、そしてＦｍｏｃプロトコ
ールでは４−メトキシ−２，３，６−トリメチルベンゼ
ンスルホニルである。

Ｘ１２は、はＬｙｓの側鎖アミノ基用の好適な保、　　
護基である。好ましい側鎖アミノ保護基の例としては２
−クロロ−ベンジロキシカルボニル（２−Ｃρ−Ｚ）、
Ｔｏｓ、ｔ　−アミロキシカルボニルが挙げられ、Ｂｏ
ｃプロトコールでは２−クロロ−ベンジロキシカルボニ
ルが好ましい保護基であり、そしてＦｍｏｃプロトコロ
ールではＢｏｃもこのように利用される。

ｘ”は、水素または、Ｔｏｓのような、Ｈｉｓのイミダ
ゾール窒素用保護基である。

側鎖アミノ保護基の選択は、合成中にα−アミノ基の脱
保護化の間に除去される一般的なあるものの選択を除い
ては、臨界的ではない。

ペプチド合成において使用される特別はＩｆＪｊＭ保護
基の選択において、次の一般則が示される。

（ａ）保護基は、好ましくは保護特性を有し、カップリ
ング条件では分離されない。（ｂ）保護基は、試薬に対
し安定であるべきであり、好ましくは合成の各段階にお
いてα−アミノ保護基の除去用に選ばれた反応条件下で
も安定である。そして（Ｃ）側頭保護基は、ペプチド鎖
を変更しないであろう反応条件下で所定アミノ酸配列を
含む合成が完成すると、移動しなければならない。

ペプチドは組換型ＤＮＡ技術を使用して調整されないと
、前述のようにその技術分野における既知の他の等価化
学合成法も同様に使用されるけれども、メリフィルド［
ジャーナル　オン　アメリカン　ケミカル　ソサイヤテ
ィ−８５巻　２１４９頁１９６３年　（）ｆｅｒｒｉｒ
ｉｅｌｄ、　　Ｊ、　　八ｍ、　　Ｃｈｅｍ、　　ＳＯ
Ｃ，、８５工Ｐ、２１４９（１９６３）　）コにより一
般的に示されたように同相合成法を用いて調製すること
が好ましい。

ＢＯＣ−または　Ｆｍ０Ｃ−ＮＨ−Ｑ　”−３Ｏ２−＜
０＞−０−ＣＨ２−ＣＤ−［Ｓｒ１ は、上記のように調製され、そして合成配列用の出発物
質を構成する。

α−アミノ保護基の除去後、残りのα−アミノ−および
ｍ鎖保護アミノ酸は、前述の中間化会物得るため、また
は、代りに各アミノ酸を別々に合成法で加えるように段
階的に所定オーダーでカップルさせられ、固相反応器に
加える前にいくらかは互いにカップルさせられるだろう
。適切なカップリング試薬の選択は、本技術の範囲内で
ある。

特に、カップリング剤としては、Ｎ、Ｎ　’　　−ジイ
ソプロピルカルボジイミド（ＤＩＣ）が好ましい。

同相合成法で使用される活性化剤は、ペプチド技術にお
いて十分に知られている。好ましい活性化反応の例とし
ては、Ｎ、Ｎ　’　　−ジイソプロピルカルボジイミド
とＮ、Ｎ　’　　−ジシクロへキシルカルボジイミド（
ＤＣＣＩ）のようなカルボジイミドが挙げら九る。他の
活性化剤およびペプチドカップリングにおける使用法は
、工り、ボダンスズキー（）１．　Ｂｏｄａｎｓｚｋｙ
）により既述されている「「プソンシズルズ　オン　ペ
プチド　シンセシスＪスプリンガー−フェアシー２１９
８４年（”Ｐｒ１ｎｃｉｐｌｅｓ　ｏｒＰｅｐｔｉｄｅ
　５ｙｎｔｈｅｓｉｓ”　Ｓｐｒｊｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌ
ａｇ、　１９８４月。

各保護アミノ酸またはアミノ酸配列は、約３倍過剰固相
反応器に導入され、そしてカップリングは、媒溶中また
はジメチルホルムアミド（ＤＭＦ＞：ＣＨ２ＣΩ２　　
（１：１）若しくはＤＭＦまたはＣＨ２Ｃ９２単独溶液
中で実施されるであろう。

反応が不完全な場合には、カップリング工程は、次のア
ミノ酸カップリングに先立ちα−アミン保護基の除去前
に繰り返される。合成法の各段階における　カップリン
グ反応の好結果は、イー、カイザー等の文献に示される
ようにニンヒドリン反応で確認することが好ましい［イ
ー、カイザー等アナリティカル　バイオケミストリー　
３４巻５９５頁　１９１０年（Ｅ、　Ｋａｉｓｅｒ、ｅ
ｔ　ａｔ、、　Ａｎａｌ、　８ｉ。

ｃｈｅｍ、、　３４５９５（１９７０月。

所定のアミノ酸配列の完成後、中間体ペプチドは、樹脂
からペプチドを開裂するばかりでなく全残留側鎖保護基
Ｘ３　、Ｘ７　、Ｘ”、Ｘ”、Ｘ”そしてＸ２４および
固定スルホンアミド結合そして同様にα−アミノ保護基
Ｘ１をも開裂する、液体フッ化水素またはトリフルオロ
酢酸のような試薬処理により樹脂支持体から除去し得る
。前述のようにこれらの基は、ＢｏｃまなはＦｍｏｃプ
ロトコールが使用されるかに依存して異なる価値を持ち
、遊離酸形態のペプチドを確保する。Ｍｅｔが配列中に
存在すると、Ｂｏｃ保護基は、好ましくはポテンシャル
Ｓ−アルキル化を鎌＜なめＨＦで樹脂からペプチドを開
裂することに先立ちトリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）／エタ
ンジチオールを用いて最初除去される。開裂にフッ化水
素が使用されると、アニソールと硫化メチルエチルは、
反応容器の掃去剤として含まれる。

（実施例） 次の実施例は、固相技術によるペプチド合成用の好まし
い方法を示す。

実施例Ｉ Ｂｏｃ−アグマチン（■　のム成） アグマチン　スルフェート（２，２８ｇ、１０ａ＋Ｍ）
を水（１０ｍｌ）に懸濁させ、そしてトリエチルアミン
（２，８ｍｌ、　２０ｍＭ＞を加えた。その後、このよ
うに得られた溶液をジオキサン（１０ｍｌ）で希釈し、
ジ−ｔ−ブチル　ジカーボネート（２゜４ｍｌ、　　１
０ｍＭ）を、水浴上（氷上で冷却）で攪拌しながら混合
物に加えた。混合物は、その後常温に暖められた。５時
間後、トリエチルアミン（１゜４ｍＬ　　１０１７１）
１）の２番目の部分を常温で一夜攪拌しながら加えた。

その混合物をｒ過し、減圧下で蒸発した。残留物をクロ
ロホルム（５００１１）に溶解し、その溶液を硫酸ナト
リウム上で乾燥し、クロロホルム／アセトンから結晶化
し得るオイルに減圧下で濃縮した。Ｂｏｃ−アグマチン
は、トリエチルアミン−スルフェート−塩として分離し
た。

収量：３．２５ｇ　（７５％〉、融点６０〜６５℃、分
析：計算値（Ｃ１０Ｈ２２０２Ｎ４　）（Ｃ６Ｈ１５Ｎ
＞（Ｈ２３０４） Ｃ＝４４．７３％、Ｈ＝９．１５％、 Ｎ＝１６．３０％、Ｓ＝７．４６％ 実測値：Ｃ＝４４．８％、Ｈ＝９．２％、Ｎ＝１６．２
％、Ｓ＝７．５％、 ＴＬＣ，シグマＦ２５４分析プレート、検出　ＵＶ２５
４ｎｍ、３５５ｎｍおよび板目試薬（グアニジン部分を
示す） 溶媒系、エチルアセテート−ピリジン−酢酸−水（６０
：２０：６：１１） Ｒｔ、Ｎ−Ｂｏｃ−アグマチン　　０．４３Ｒｔ　、ア
グマチン　　　　　　　　Ｏ実施例２ ４−　ロロスルホニルフェノ　シ　　のム或２５０ｍ）
ｌ（７，６ｔｒ＞のフェノキシ酢酸をクロロホルム７５
ｍ１に溶解し、水浴で冷却して攪拌したクロロホルム２
５ｍ１中のクロロスルボン酸１６゜５ｍ１を１０〜１５
分間で滴下した。温度は、０°Ｃで２０分間保持し、そ
の後さらに３０分間常温で保持した。二相の液体を約３
００ｇの砕いた氷を入れたビーカーに注いだ。分離しな
水相をエーテル５０ｍ１で２度抽出し、その後混合有機
相を無水硫酸ナトリウム上で乾燥した。溶媒を真空で除
き、残留物貰をエーテル−ヘキサン混合物から再結晶さ
せた。収量、９．７５ｇ　（７７，８％）、融点１５５
〜１５７℃（未補正） ＴＬＣ，シグマＦ２５４分析プレート 検出、　ＵＶ　　２５４ｎｍ、３５５ｎｍ溶離剤Ａ）エ
チルアセテート−酢酸（９：　ｌｖ／ｖ）溶離剤Ｂ）エ
ーテル−ヘキサン（２：　ＩＶ／Ｖ）に１０ｍ１の溶離
剤に酢ａｔ滴を加えたものＲｔ、フェノキシ酢酸　シス
テムＡ、０．８５システムＢ、０．３４ Ｒｒ　、４−クロロスルホニル　フェノキシ酢酸システ
ムＡ、０．７７ システムＢ、０．１７ フェノキシ酢酸の代わりに２．３．５−トリメチルフェ
ノキシ酢酸と２．３．６−トリメチルフェノキシ酢酸を
使用して前記方法に従うと、対応する４−クロロスルホ
ニル−２，３，５（または２．３．６）−トリメチルフ
ェノキシ酢酸が得られる（Ｒｆ値、シグマＦ　２５４　
Ｔ　Ｌ　Ｃプレート上でエーテル−ヘキサン−酢酸混合
物（８：４：０１０５（ｖ／ｖ））でそれぞれ０．７８
および０．７５＞。

実施例３ Ｂｏｃ−ア　マチン−ＳＰＡ　　　Ｖｌ＋Ｂｏｃ−アグ
マチン（４，２９ｇ、１０ｍｔ４）をアセトン（５０ｍ
ｌ　）とＩＮ水酸化ナトリウム（５０ｍＭ）との混合物
に攪拌しながら投入し、水浴中で冷却して４−クロロス
ルホニルフェノキシ酢酸（３，８ｇ、１５ｍＭ）をその
溶液に加えた。３時間攪拌して反応混合物のｐ）（を４
Ｎ水酸化ナトリウムを加えながら１１〜１２に保持する
。反応混合物を１０％クエン酸溶液で酸性とし、減圧下
でその容積の半分に濃縮してエチルアセテート（３Ｘ　
５０　ｍｌ　＞で抽出する。混合抽出物を飽和塩化ナト
リウム溶液で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥して減圧
下で脱水する。Ｂｏｃ−アグマチンースルホニルーフェ
ノキシ酢酸（省略形ＢｏＣ−アグマチン［ＳＰＡ］　）
は、濃厚油として得られる（３．６ｇ、８１％）。Ｒｔ
＝シグマＦ２５４ＴＬＣプレート上でエチルアセテート
−酢酸の９：１（Ｖ／Ｖ）混合物で０．５゜ Ｂｏｃ−アグマチンの代りにＣｂｚ−アグマチンそして
４−クロロスルホニルフェノキシ酢酸の代りに４−クロ
ロスルホニル−２，３，５−トリメチルフエノキシ酢酸
または４−クロロスルホニル２゜３、Ｂ−トリメチルフ
ェノキシ酢酸を用いて前記方法に従うと、対応するＣｂ
ｚ−アグマチン−２，３゜５−トリメチル−［ＳＰＡ］
およびＣｂｚ−アグマチンー２．３．６１−リメチル−
［ＳＰＡコが得られる。

実施例４ ＤＭＦ５０ｍ＋中のＢｏｃ−アグマチン−［５ＰＡＩ　
３．１１　ｇ　（７ｍＨ）を室温で３０分間ＨＯＢｔ１
．８９ｇ　（１４ｍ）ｌ）とＤ　Ｉ　Ｃ１、１ｍｌ　（
７ｍ）４）に反応させ、この方法で生じた活性エステル
溶液をジクロロメタンの底に沈めたアミノエチル樹脂５
ｇ（０，７ｍ当量／ｇ能力）に加え、１０％ジイソプロ
ピルエチルアミンクロロホルム混合物中で脱プロトン化
してＤＭＦで２度洗浄した。反応は、９０分で完全であ
り、ニンヒドリン反応で試験した。最終的に、カップル
した樹脂をＤＭＦ、ジクロロメタンで洗浄し、再びＤＭ
Ｆで洗浄した。

犬旌豊至 アグマチン　スルフェート（２，２８ｇ、１０ｍ１４）
とナトリウムヒドロジエンカーボネート（２゜５２ｇ、
３０ｍＭ）とを水２０ｍ１とジオキサン２０ｍ１の混合
物に溶解した。混合溶液を水浴上で冷却したジオキサン
１０ｍ１中のベンジロキシカルボニルクロリド（１，８
５ｍ１，１３ｍＭ＞を１５分間で滴下した。０℃で１時
間攪拌し、そして室温で１夜攪拌した。反応混合物を脱
水して乾燥し、残留固形物をクロロホルム２　Ｘ　５０
　ｍｌで攪拌混合してその溶液を減圧下で蒸発した。油
状化合物は、さらに精製することなく使われた。Ｒｆ、
シグマ２５４プレート上でエチルアセテート−ピリジン
−酢酸−水（４５：　２０　：　６　：　１１　（ｖ／
ｖ））混合液で０．６６゜ 検出、ＵＶ線のもとて板目試薬 実施例６ アグマチンースルホニルー２．３．５（および２，３．
６）　−トリメチルフェノキシ酢酸の合成法 Ｃｂｚ−アグマチン（２，８５ｇ、１０ｍＭ）と４−ク
ロロスルホニル−２，３，５−トリメチルフェノキシ酢
酸（または４−クロロスルホニル−２，３゜６−トリメ
チルフェノキシ酢酸’）（４，３９ｆ。

１５ｍＭ＞とを実施例３の記載のごとく反応させた。

得られたＣｂｚ−アグマチンースルホニル−２，３゜５
（または２，３．６）−トリメチルフェノキシ酢酸をエ
タノール（５０ｍｌ　）に溶解させてパラジウム活性炭
触媒（０，５ｇ＞上で水素化しな。触媒を沢別し、溶媒
を減圧下で除去しな。残留物をエタノール水混合物から
再結晶させてアグマチンースルホニル−２，３，５（ま
たは２，３．６）ｌリメチルフェノキシ酢酸を得な（そ
れぞれ２．７０ｇ、７０％および２．７ｓ、、、７２％
）。

両化合物のＲ，値は、同一であり、シグマＦ２５４ＴＬ
Ｃプレート上でｎ−ブタノール−酢酸−水の混合物（４
：　１　：　１　（ｖ／ｖ））で０．２８である。

実施例７ Ｆｍｏｃ−アグマチンースルホニル−２３５および２３
．６）−トリメチルフェノ　シ　　の　、柾さ＠立二二
旦Ｚグ アグマチンースルホニル−２，３，５（または２，３゜
６）−トリメチルフェノキシ酢酸（２，７０ｇ、７ｍＭ
）をすｌ−リウムカーボネート（１８，６ｍｌ　）の１
０％溶液に溶解させてジオキサン（１１ｍｌ＞を加えた
。その溶液を攪拌し、氷−水浴中で冷却して９−フルオ
レニ！レメチルクロロカーボネート（１，８２ｇ、７ｍ
Ｍ）を少量加えた。水浴温度で４時間そして室温でさら
に８時間攪拌した。その混合物を水４００ｍ１に注ぎ、
エーテル２Ｘ１００ｍ１で抽出した。水性相を１：１塩
酸溶液で酸性とし、エチルアセテート３Ｘ１００ｍｌで
抽出した。

無水硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒を減圧下で除去した
。得られたＦｍｏｃ−アグマチンースルホ　　　゛ニル
ー２．３．５　　（または２，３．６）−トリメチルフ
ェノキシ酢酸をＤＭＦ　（５０ｍｌ＞に溶解させ、実施
例４の記載の如くアミノメチル樹脂５ｇにカップルした
。

アミノメチル樹脂の代りにベンズヒドリルアミン、ｐ−
メチルベンズヒドリルアミンおよびｐ−アルコキシベン
ジルアルコール樹脂（必要なｐ−ジメチルアミノビリジ
ンの触媒量の存在下）を使用し、前記方法に従うと類似
カップル生成物が得られる。

実施例８ 次式のｈｐＧＲＨ類似化合物の合成法。

３−（４−ヒドロキシフェニル）プロピオニル−〇−Ａ
ｌａ　　２　−ＡＳＤ３　−＾１ａ４−Ｉｌｅ５　−Ｐ
ｈｅＢ　　−Ｔｈｒ７　−八Ｓｒｌ＄　　−ｓｅｒｇ　
−Ｔｙｒｔｏ−Ａｒｇｔｔ−ＬｙＳｔｚ−Ｖａｌｔ３−
Ｌｅｆｔ４−ＧＩｙｔｓ−Ｇｌｎｔ　６−Ｌｅｆｔ　７
−３ｅｒｔａ　−Ａ　ｆａｔ９−ＡｒＯｚｏ−ＬｙＳｚ
ｔ−ＬｅＵ２ｚ−ＬｅＵｚｓ−Ｇｌｎｔ４−ＡＳｐ２ｓ
−Ｉｌｅｚｓ−Ｎｌｅｚｔ−３ｅｒ＊５−ＮＨ−（ＣＨ
２）　４−　ＮＨ，Ｃ，（Ｎ）ｌ）、　ＮＨ２ は下記に示す方法に従って、適当な り０Ｃ−８８−（ＣＨ２）　４−ＮＨ，Ｃ，（Ｎｉｌ）
−Ｎｉｌ−３０２−＜０＞−□ＣＨ２−Ｃ０−［ＳＰ）
から初めて、ベックマン９９０シンセサイザーの段階法
で実施した。

ａ）脱遮断と付着 脱遮断は、次のスケジュールＡに従って行なう。

スケジュールＡ １、　　ＴＦＡ／）ルエン１２”　　　　　　　　　　
　　　　　　　　２２、　　ＴＦＡ／）ルエン１：２″
　　　　　　　　　　　　　　　　２８３゜ＣＨｔ　Ｃ
Ｊｔ　　　　　　　　　　　　２４、　Ｍｅａｌ　　　
　　　　　　　　　　２５、　ＣＨ＊　Ｃｊ１２＆２ ６、　　ＣＨ２Ｃｊｔ中ｆ）ＤＩＥＡ　（ＩＯＸ）　　
　　　　　　　　　　　２＆８７、　ＭｅＯＨ２ ８、ＣＨ２Ｃｈ　　　　　　　　　　　　２カップリン
グは、次のスケジュールＢに従って行なう。

スケジュールＢ ｊ　　　　　薬　　　　　　　　人　、７　　　）９Ａ
、　　ＤＩＣ＜２当量＋＋）ｔＯＢｔ　（４当量）　　
　　　　　　　　　−１０Ａ、　　Ｂｏｃアミノ！（２
当量）ｌ　　　　　　　　　　　　　　６０−９０また
は ９Ｂ、　　ＤＩＧ（２当量）十− １０Ａ、　　Ｂｏｃ　　アミノｌ（４当量）　　＠　　
　　　　　　　　　　６Ｏ−９０１１Ａ、　ＤＭＦ　　
　　　　　　　　　　　　２または １１Ｂ、　ＣＨｌＣｌｔ　　　　　　　　　　　　　２
１２、　　ＣＨｚ　Ｃ１ｔ　　　　　　　　　　　　２
＆２＃予めＤＭＦ中で３０分間調製し、９Ａと１ＯＡを
混合する。

＠予めＣＨ２ＣΩ２で３０分間調製して９Ｂと１０Ａを
混合する。

簡単に言うと、ＤＭＦ中のＢｏｃ−保護アミノ酸１〜２
ミリモルを樹脂１ｇ当り使用する。ＢＯｃ−Ａｒｇ　（
Ｔｏｓ）がカップリングされると５０％ＤＭＦとメチレ
ンクロリドの混合物を使用する。Ｂｚｌエーテルは、Ｓ
ｅｒおよびＴｈｒ用のヒドロキシ０！ｌ　鎖保護基とし
て使用され、２−クロロベンジロキシカルボニル（２Ｃ
ρ−Ｃｂｚ）は、Ｌｙｓ側鎖用保護基として使用される
。Ｔｏｓは、Ａｒｇのグアニジノ基保護に使用され、Ｇ
ｌｕとＡｓｐ側鎖カルボキシ基はＯＢｚ　Ｉまたは○ｃ
ｈＸで保護される。Ｔｙｒのフェノール性ヒ１′−ロキ
シ基は、２，６−ジクロロベンジル（ＤＣＢ＞で保護さ
れる。　次化合物が得られる。

３−（４−ヒドロキシフェニル）プロピオニル−Ｄ−Ａ
ｌａ　２−ＡＳＩ）３　　（Ｘ　３）−Ａｌａ　４−Ｉ
ｌｅ５−ＰｈｅＢ　−Ｔｈｒ７（Ｘ７　　）−Ａｓｎ　
　Ｂ　　−５ｅｒ９　　（Ｘ７　　）−丁ｙｒ　　ｔｏ
（Ｘ”）−八ｒｇ　　１１（Ｘ１１）−１ｙ３１．２　
（Ｘ　１２）−Ａｌａ　ｔｓ−ＬｅｔＪｔ４−ＧＩｙｔ
５−Ｇｌｎｔｇ−ＬｅＬ１１７−３ｅｒ１ｓ（Ｘ’　）
−八１ａ　ｘ９−Ａｒ０２ｏ（Ｘ”）−［ｙＳ　２１　
（Ｘ１２）−ｔｅｕ　ｚ２−ＬｅｌＪ２ｓ−Ｇｌｎ２４
−ＡＳｐｚ５（Ｘ　３）−Ｉｌｅ　２６−ＮＩｅ２７−
３ｅｒｚｓ（Ｘ７）−ＮＨ−（ＣＨ２）　４　−　ＮＨ
，Ｃ，（ＮＨ）、ＮＨ。

３０２　−＜０＞（Ｈ９）−ＯＣＲ２−ＣＯ−［Ｓｒ１
［但し、式中、Ｘ３はＯ−シクロヘキシルエステル、ｘ
７は０−ベアジルＩ−チル、Ｘ”Ｃ，ｔ　Ｏ−２゜６−
ＣＱＢｚエーテル、Ｘ１１はトシルそしてＸ１２は２−
Ｃｂｚを表わす。］。

ｂ）開裂および脱保護 （この方法は、実質的にタム等の方法に従う。）［タム
等、ジャーナル　オン　アメリカン　ケミカル　ソサイ
ヤティ　１０５巻　６４４２頁１９８３年（Ｔａｍ　ｅ
ｔ　ａｌ、、　Ｊ、　Ａｍｅｒ、　Ｃｈｅｍ、　Ｓｏｃ
、　１０５．６４４２゜（１９８３）　］。

上記のように生産された保護ペプチドは、出発原料とし
て利用される。

保護ペプチドは、ＨＦ処理前に（２＋２８分間）の２段
処理でＴＦＡ−トルエン処理されＣＨ２ＣΩ２で３Ｘ洗
浄される。

ＨＦ試薬とペプチド樹脂またはペプチドとの混合が不充
分であると、次の順序の試薬の添加により簡単に軽減し
得る。

（ａ）ペプチドまたはペプチジル樹脂（Ｂ）暖かいペプ
チドによる樹脂頂上に注意深く溶融形態のｐ　−クレゾ
ール、ｐ−チオクレゾールまたは両者、（Ｃ）冷却し、
ρ−クレゾール混合物を固化した後、マグネット攪拌バ
ーそして（ｄ）硫化ジメチル。

ａ）低濃度ＨＦステップ 試薬（硫化ジメチル６．５ｍｌ、ｐ　−クレゾールＱ、
７４ｍ１．Ｄ−千オクレゾール０．２５ｍ１）全Ｊｔ７
．５ｍｌとペプチド樹脂（１，０ｇ）とを反応容器に投
入してＨＦ配管を連結しな。反応容器を一７８℃で０．
５時間（大容量の試薬には長時間冷却）冷却した。ＨＦ
配管を簡単に０，５分間排気し、ＨＦをす速く排気した
反応容器の１０ｍ１標線（またはいずれかの所定容量）
まで流し込んだ。

その後、反応容器は、水浴によりす速く０℃に達し、２
時間激しく撹拌した（たえず攪拌をチェックする）。こ
の点においてＨＦ−ジメチルスルフィド−ｐ−クレゾー
ル混合物は、無色から淡黄色であった。２時間後、混合
物は、反応容器からアスピレータへのバルブを少し明け
て水アスビレー夕（突沸に注意）で最初に排気した。大
部分の試薬が除かれた後に、機械式ポンプで少し着色し
た液体になるまでさらに排気した（通常的０．５ｍｌ標
線）。

ｂ）高湯度ＨＦステップ 前記低濃度ステップからの蒸発反応容器を、再度−７８
℃に冷却し、排気し、そして再びＨＦを１０ｍ１容量の
標線まで加えた。（注意、もし第１段階後のＨＦと硫化
ジメチルの除去が不完全であると、ＨＦ　５　ｍｌの再
導入は、９０％未満の最高ＨＦ濃度となる。かかる条件
では、ベンズヒドリル樹脂のような耐酸性樹脂またはト
シルまたは２゜６−ジクロロベンジルのような多くの耐
酸性保護基を有するペプチドが増加するに従って完全に
脱保護されないだろう。もし、蒸発段階の完全性につい
て疑問があるならば、ＨＦを７．５または１０ｍ１の全
容量加えるべきであり、それによって最終ＨＦ濃度は確
かに少なくとも９０容量％に達するであろう。９５％Ｈ
Ｆと５％のクレゾールと千オクレゾールとの最終混合物
は十分に満足できることが見い出された。］反反応器は
、その後Ｏ℃に達し、４５〜６０分間反応させた。ＨＦ
を、その後前記の如く除いた。

開裂工程後、残留固形塊をエーテルと数回混合して無極
性付加物と少量のＨＦを含む無極性副産物を除いた。粗
製ペプチドを１０％酢酸混合溶液で樹脂粒子床端から抽
出して凍結乾燥した。

粗製ペプチドを半調製または調製用逆相クロマトグラフ
ィーカラムを用いてＨＰＬＣ法で精製した（バイダック
Ｃ１８，１１０Ｘ２５０＋ｎ、粒径５μｍまたはグイナ
マックスＣ１８マクロＨＰＬ。

Ｃカラム２１．４Ｘ２５０ｍｍ、粒径１２μｍ）。

ポンプ、ベックマン１１４Ｍ　ソルベントデリバリ−モ
ジュール 検出機、ベックマン１６０Ａ　アブソーバンスディテク
ター グラジェント　コントローラー、 ベックマン４２０　グラジェエント コントローラー インゼクター、　アルテックス２１０Ａ検出波長、　　
２１４順 溶離剤、Ａ、水中の０．１％ＴＦＡ　（高純度）Ｂ、水
−アセトニトリル３ニア（容量）混合中の０．１％ＴＦ
Ａ 実施例９ 次式で表わされるｈｒ）ＧＲＨ類似化合物の合成法。

３−（４−ヒドロキシフェニル）プロピオニル−Ｄ−Ｎ
−Ｈｅ−＾１ａ２−＾Ｓｐ３−Ａｌａ４−Ｉｌｅ５−ｐ
ｈｅａ　−ｒｈｒ７−ＡＳｎＢ　−５ｅｒ９−Ｔｙｒｔ
ｏ−＾ｒｇｔｔ−ＬＶＳｔｚ−Ｖａｌｔ３−Ｌｅｕｔ４
−ＧＩＶｔ５−Ｇ　Ｉ　ｎｘ　６−ＬｅｔＪｔ　７−３
ｅｒｘｓ−Ａ　ｌ　ａｌｓ−Ａｒｇｚｏ−ＬｙＳｚｔ−
Ｌｅｕ２２−ＬｅＵｚｓ−Ｇｌｎｚ４−ＡＳｐ２ｓ−Ｉ
ｌｅｚｇ−Ｎｌｅｚｙ−３ｅｒｚｓ−ＮＨ−（Ｃ１１　
２　）４　−ＮＨ，Ｃ，（ＮＨ）、ＮＨ２ を下記方法に従って適当な Ｆｍ０Ｃ−ＮＨ−（ＣＨ２）　　４　−ＮＨ，Ｃ，（Ｎ
Ｈ）、ＮＨ−３０２−＜０＞（Ｈｓ）−０ＣＨ２−ＣＯ
−［ＳＰ］ からベックマン９９０シンセサイザーで段階的に合成し
た。

ａ）脱遮断と付着 脱遮断は、次スケジュールＡに従って行なう。

スケジュールＡ １、　ピペリジン／ＤＭＦ１：４”　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　３２、　ピペリジン／ＤＭＦ
Ｉ：４°　　　　　　　　　　　　　　　　　　　７３
、　Ｉ）ＭＦ　　　　　　　　　　　　　　２４、　Ｍ
ｅＯＨ２ ５、ＣＨ２Ｃｌ、　　　　　　　　　　　　２＆２６、
ＤＭＦ ７、　ＤＭＦ　　　　　　　　　　　　　　２カップリ
ングは、次のスケジュールＢに従って行なう。

スケジュールＢ 試　　　？　　　　　２人、４ ８Ａ、　　ＤＩＣ（２当量１＋ＨＯＢｔ（４当量）　　
　　　　　　　　　−９Ａ、　　Ｆｍｏｃアミノｌ＜２
当量）　　＃　　　　　　　　　　　　６０−９０また
は ８Ｂ、　　Ｄｉｅ（２当量）＋− ９Ａ、　　Ｆｍｏｃアミノｌ（４当量）　　＠　　　　
　　　　　　　　６Ｏ−９０１０Ａ、　ＤＭＦ　　　　
　　　　　　　　　　２または １０Ｂ　、　ＣＨｙＣｌｔ　（２劃　　　　　　　　　
　　２１１、　　Ｃ）ＩｔＣＩｔ　　　　　　　　　　
　　Ｚ＆２＃予めＤＭＦ中で３０分間調製し、８Ａと９
Ａを混合する。

＠予めＣＨ２ＣΩ２で３０分間調製して８Ｂと９Ａを混
合する。

簡単に言うと、ＤＭＦ中のＦｍｏｃ−保護アミノ酸（１
〜２ミリモル）を樹脂１．当り使用する。

Ｆｍｏｃ　−Ａｒｇ　（４−ＭｅＯ−２，３，６−トリ
ベンゼンスルホニル）をカップリングする場合には５０
％ＤＭＦとメチレンクロリドとの混合物が使用される。

【−ブチルエーテルは、ＳｅｒとＴｈｒ用のヒドロキシ
側頭保護基として使用される。

４−ＭｅＯ−２，３，Ｅ）　−トリベンゼンスルホニル
は、Ａｒｇのグアニジノ基保護要に使用され、Ｇｌｕと
ＡＳＰ！＠鎖カルボキシ基は、ｔ　−ブチルエステルで
保護される。Ｔｙｒのフェノール性ヒドロキシ基は、同
様に【　−ブチルエーテルで保護される。

次化合物がこのように得られる。

３−（４−ヒドロキシフェニル）プロピオニル−Ｄ−Ｎ
−Ｈｅ−Ａｌａ２−ＡＳｐ３　　（Ｘ　３）−Ａｌａ　
４−Ｉｌｅ５−Ｐｈｅ６−Ｔｈｒ７　　（Ｘ７　　）−
ＡＳｎ　　３　−ｓｅｒｇ　　（Ｘ７　　）−丁Ｖｒ　
　ｔｏ（Ｘ１０）−Ａｒ（ＩＩｔｔ（Ｘ”）−ＬｙＳ　
１２　（Ｘ　１２）−八＋ａ　ｔｉ−ＬｅｌＪｔａ−Ｇ
ＩＶｔ５−Ｇｌｎｓ６−Ｌｅｕｔｙ−３ｅｒｘｓ（Ｘ７
　）−Ａｌａ　　１９−Ａｒ（１２ｏ（Ｘ”）−Ｌｌ／
Ｓ　　２１（Ｘ　　１２）−ｔｅｕ　　ｚ２−Ｌｅｕｚ
ｓ−Ｇｌｎ２４−八３１）２５　　（Ｘ　　３　）−Ｉ
ｌｅ２６−Ｎｌｅｘｔ−５ｅｒｘｓ（Ｘ７）−Ｎ）ｌ−
（Ｃ）１２　）　４　−　ＮＨ，Ｃ，（ＮＨ）。

ＮＨ，３０２−＜Ｏ〉（Ｈｓ　　）−ＯＣＲ２−ＧＯ−
［ＳＤ］［但し、式中Ｘ３は０−ブチルエーテル、Ｘ７
は０−ブチルエーテル、ｘｌｏは、Ｏ−ブチルエーテル
、ｘ”は４−メトキシ−２，３，６−）リメチルベンジ
ルスルホニル、そしてＸ１２はＢｏｃを表わす。］ｂ）
開裂と脱保護 上記の如く生産された保護ペプチドは、出発原料として
利用される。固形支持体からのペプチドの開裂と側鎖保
護基の除去は、温度２５〜３０℃で２〜３時間保護ペプ
チド樹脂とＴＦＡ−チオアニソール（５％）との反応に
より同時に行なった（樹脂の各々のダラムあたり１０ｍ
１の液体が使用された）。反応完了後試薬を室温におい
て真空で除いた。残留物質を最初にエーテルで抽出しく
無極性副産物を除く）、そして粗製ペプチドを１０％酢
酸でフィルターケーキから抽出して枦液を凍結乾燥した
。

実施例１０ 次のｈｐＧＲＨ類似化合物の合成法 Ｈ−Ｔｙｒ−Ｄ−Ｎ−メチル−Ａｌａ２−ＡＳＩ）３−
八ｌａ４−Ｉｌｅ５−Ｐｈｅ６　−Ｔｈｒ７　−ＡＳｎ
＄　　−ｓｅｒｇ　　−丁Ｖｒ１０−Ａｒｇ１１−ＬＶ
Ｓｘ２−ＶａｌＬ　３−ＬｅＵ１４−ＧＩ’１１５−Ｇ
Ｉ　ｆｉｔ６−ＬｅｌＪｔｙ−３ｅｒｔｓ−Ａ　Ｉａ　
ｔ　９−Ａｒｇ２゜−ＬｙＳｚｘ−Ｌｅ（Ｉｚ２−ＬＩ
３ＬＩ２３−ＧＩ　ｎ２４−ＡＳｐ２ｓ　−１ｆｅ２６
−Ｎ　ｌ　Ｃ２７−３ｅｒｚｓ−Ｎｌｌ−（Ｃ８２）　
４　−　ＮＨ，Ｃ，（ＮＨ）、ＮＨ２は、実施例８の方
法に従って適当な りＯＣ−ＮＨ−（ＣＨ２）４　−ＮＨ，Ｃ，（８Ｎ）、
ＮＨ−３０２−＜０＞（Ｍｓ　）−０ＣＨ２ＣＯ−［Ｓ
Ｆ３ から初めてベックマン９９０シンセサイザーで段階的に
合成された。サンプルは、ＴＬＣとＨＰＬＣを用いて実
質的に純粋であると評ｈＴｔされた。

実施例１１ 次式のｈｐＧＲＨ類似化合物の合成法。

ＤＬ−３−（４−ヒドロキシフェニル）ラクトイル−Ｄ
−Ａｌａ２−八５ｔ）３　−八ｌａ、、　　−Ｉｌｅ５
　−Ｐｈｅ、３　−Ｔｈｒ７−八Ｓｒｔ８−ｓｅｒｇ　
−Ｔｙ１’ｔｏ−Ａｒｇｘｔ−ＬｙＳｔｚ−Ｖａｌｔｉ
−Ｌｅｕｔ４−ＧＩｙｔ５−Ｇｌｎ１６−ＬｅｔＪｔｙ
−３ｅｔ’　ｔ８−Ａ　ｆａｔ　９−Ａｒｇ２ｏ−Ｌｙ
Ｓ２ｔ−ＬｅＵ２２−ＬｅｌＪ２ｓ−Ｇｌｎｚ４−＾５
ｔ）２５−Ｉ　ｆｅｚ６−Ａｌａ２７−３ｅｒ２ｓは、
実施例８または９の方法に従って適当なりＯＣ−または
Ｆｍ０Ｃ−ＮＨ−（ＣＨ２）　４−ＮＨ−Ｃ（ＮＨ）−
ＮＨ−３０２−＜０＞−（）Ｉ　ｓ　）−０ＣＨ２−Ｃ
ｏ−［ＳＦ３から始めてマベックマン９９０シンセサイ
ザーで段階的に合成された。サンプルは、ＴＬＣおよび
ＨＰＬＣを使用して実質的に純粋であると評価された。

実施例１２ 次式のｈｐＧＲＨ類似化合物の合成法。

Ｈ−＋１ｉｓ−Ｄ−Ａｌａ　２−＾Ｓｐ３−Ａｌａ４−
Ｉｌｅ５−ｐｈｅ６−Ｔｈｒ７−Ａｓｎ１３−５ｅｒ９
−Ｔｙｒｔｏ−Ａｒｇｔｔ−ＬＶＳｔｚ−Ｖａｌｔｉ−
Ｌｅｕｔ４−Ｇｌ’１ｘ５−Ｇｌ　ｎｘ６−ＬｅＵｔフ
−３ｅｒ１ｓ−Ａｌａｔ９−ＡｒＱｚｏ−ＬＶＳｚｘ−
ｔ、ｅｕ２２−ｔｅｕ　２３−Ｇ　Ｉ　ｎ２４−ＡＳＩ
）＊　５−Ｉ　Ｉ　８２ｇ−Ｎ　ｌ　Ｃ２７−３ｅｒｚ
ｓ−ＮＨ−（ＣＨ２）４　−ＮＨ，Ｃ，（ＮＨ）、ＮＨ
２は実施例８または９の方法に従って適当な りＯＣ−またはＦｍｏｃ−ＮＨ−（ＣＨ２）　４−ＮＨ
，Ｃ，（ＮＨ）、ＮＨ−３０２−＜Ｏ＞（Ｍｓ　）−０
ＣＨ２−ＣＯ−［Ｓｒ１から始めてベックマン９９０シ
ンセサイザーで段階的に合成された。

サンプルは、ＴＬＣとＨＰＬＣを用いて実質的に純粋で
あると評価された。

実施例１３ 次のｈｐＧＲＨ類似化合物の合成法。

１ト〇−丁ｙｒ−Ｄ−Ｎ−メチｌレー＾１ａ２−Ａｓｐ
３−Ａｌａ４−Ｉｌｅ５−ｐｈｅＱ　−■ｈｒ７−ＡＳ
ｎｓ　−３ｅｒｇ　−ＴＶｒｔｏ−＝Ａｒｇｔｔ−ＬＶ
Ｓｔｚ−Ｖａ　Ｉ　ｘ９−ＬｅＬＩｘ４−Ｇ　Ｉ　Ｖｘ
　ｓ−Ｇｌｎｌｇ−Ｌｅｕｔ７−ｓｅｒ　ｔｓ−Ａ　Ｉ
ａｔ、−Ａｒｇ２０−ＬＶＳｚｘ−ＬａＩ２２−Ｌｅｕ
　２３−Ｇ　ｌ　ｎ２４−ＡＳｐ２ｓ−Ｉ　ｌ　８２ｇ
−Ｎ　Ｉ　Ｃ２７−３ｅｒｚｓ−ＮＨ−（Ｃ８２）　４
　−　ＮＨ，Ｃ，（ＮＨ）、ＮＨ２は、実施例８また′
は９の方法に従って適当な りｏｃ−またはＦｍｏｃ−ＮＨ−（ＣＨ２）　４−Ｎ１
１．Ｃ，（Ｎｉｌ）、ＮＨ−３゜２−＜ｏ＞（Ｎ９　）
−０ＣＨ２−ＣＯ−［Ｓｒ１から始めてベックマン９９
０シンセサイザーで段階的に合成された。

サンプルは、ＴＬＣとＨＰＬＣを用いて実質的に純粋で
あると評価された。

実施例１４ 次のｈｐＧＲＨ類似化合物の合成法。

Ｈ−Ｄ−Ｔｙｒ−Ｄ−Ａｌａ　２−ＡＳｐ３−Ａｌａ４
−Ｉｌｅ５−Ｐｈｅａ　−Ｔｈｒ７−ＡＳｎ６−３ｅｒ
ｇ　−Ｔｙｒｔｏ−＾ｒｇｔｔ−ＬＶＳｔｚ−Ｖａｌ　
ｔｔ−ＬａＩ１４−ＧＩＶｘ　５−Ｇ　ｌ　ｎｘ６−Ｌ
ｅＵｘ７−３ｅｒ　１ｓ−Ａ　Ｉａｔ９−ＡｒＱｚｏ−
Ｌｙｓ２１−ＬｅＵ２ｚ−ＬｅＵ２ｔ−Ｇ　Ｉ　ｎ２４
−ＡＳｐ２ｓ−Ｉ　１　Ｃ２６−Ｎ　ｌ　ｅ２□−３ｅ
ｒ　２ｇ−Ｎｌ（ＣＨ２）４　−ＮＨ，Ｃ，（Ｎｉｌ）
、ＮＨ２は実施例８または９の方法に従って適当な りｏｃ−またはＦｍｏｃ−ＮＨ−（ＣＩ−１２）　４−
ＮＨ，Ｃ，（Ｎ１１）、ＮＨ−３゜２−＜ｏ＞（）ｔｓ
　）　−０ＣＮ２−ＣＯ−［３Ｐ］がら始めてベックマ
ン９９０シンセサイザーで段階的に合成された。

サンプルは、ＴＬＣとＨＰＬＣを用いて実質的に純粋で
あると評価された。

実施例１５ 次式のｈｐＧＲＨ類似化合物の合成法。

Ｈ−Ｔｙｒ−［）−Ａｌａ　２−Ａｓｐ３−Ａｌａ４−
Ｉｌｅ５−Ｐｈｅ６−Ｔｈｒ７−Ａｓｎ、３−５ｅｒ９
−Ｔｙｒｔｏ−ＡｒＯｔｔ−ＬｙＳｔ２−Ｖａｌｔｓ−
Ｌｅｕｔ４−ＧＩｙｔ　５−Ｇ　ｌ　ｎｔ６−ＬｅＵ□
７−３ｅｒｘｓ−Ａ　ｌ　ａｔｓ−ＡｒＱｚｏ−ＬＶＳ
ｚｘ−Ｌｅｕ　２□−ＬａＩ２３−Ｇ　Ｉ　ｎ２４−Ａ
Ｓｐ２．−Ｉ　ｌ　８２ｇ−Ｎ　１ｅ２７−３ｅｒ　２
ｇ−ＮＨ−（ＣＨ２）　４−　ＮＨ，Ｃ，（ＮＨ）、Ｎ
Ｈ２は、実施例８または９の方法に従って適当な りｏｃ−またはＦｍｏｃ−ＮＨ−（ＣＨ２）　４−ＮＨ
，Ｃ，（ＮＨ）、ＮＨ−３０２−＜Ｏ＞（）Ｉｓ　）　
−０ＣＨ２−ＣＯ−［Ｓｒ１から始めてベックマン９９
０シンセサイザーで段階的に合成された。

サンプルは、ＴＬＣとＨＰＬＣを用いて実質的に純粋で
あると評価された。

実施例１６ 次式のｈｐＧＲＨ類似化合物の合成法。

（ｐ−ヒドロキシフェニル）ピルボイル−〇−＾１ａ２
−ＡＳｐ３　−八ｌａ４　−Ｉｌｅ５　−Ｐｈｅ６　−
ｒｈｒ７　−ＡｓｎＢ　　−３ｅｒｇ　　−Ｔｙｒ　ｔ
ｏ−ＡｒＣＩ　ｔ　ｔ−ＬｙＳｔ２−Ｖａ　Ｉ　ｔ　３
−Ｌｅｕ　１４−ＧＩ　Ｖ　１５−Ｇｌｎｔｇ−ＬａＩ
３フ−３ｅｔ’１ｓ−Ａｌａｔｓ−Ａｒｇｚｏ−ＬＶＳ
ｚｘ−ＬｅｌＪ２２−ＬａＩ２３−Ｇｌｎ２４−ＡＳＩ
）ｚｇ−Ｉｌｅ２ｇ−ＮｌＣ２７−３ｅｒ２ｓ−ＮＨ−
（Ｃｌ　２　　＞　４　−　Ｎ１１、Ｃ、（ＮＨ）、　
ＮＨ２は実施例８または９の方法に従って適当な りｏｃ−またはＦｍｏｃ−Ｎｌ−１−（ＣＭ　２　）　
４−ＮＨ，Ｃ，（ＮＨ）、Ｎ１１　２−３０２−＜０＞
（Ｈｓ　）−０ＣＨ２−Ｃｏ−［Ｓｒ１がら始めてベッ
クマン９９０シンセサイザーで段階的に合成された。サ
ンプルは、ＴＬＣとＨＰＬＣとを用いて実質的に純粋で
あると評価された。

実施例１７ 次式のｈｐＧＲＨ類似化合物の合成法。

４−ヒドロキシフェニルアセチル− −＾ｌａ４　−Ｉｌｅ５　−ｐｈｅａ−ｒｈｒ７−＾Ｓ
ｎＢ　−Ｓｅｒｇ　−ＴＶｒｔｏ−Ａｒｇｔｔ−ＬｙＳ
ｔ２−ＶａＩ　ｔｉ−ＬａＩ１４−ＧＩＶｌｓ−Ｇｌｎ
ｔｓ−Ｌｅｕｔフ−Ｓｅｒ１８　−Ａ　ｌａｌｅ−ＡＩ
’ｇ２ｏ−ＬｙＳｚｔ　−　ＬａＩ２２−ＬｅＵｚ３−
Ｇ　Ｉ　ｎ２４−ＡＳｐ２　５−Ｉｌｅ２ｓ−Ｎ　ＩＣ
２７−Ｓｅｒ　２８は、実施例８または９の方法に従っ
て適当な りｏｃ−またはＦｍｏｃ−Ｎ１１−（Ｃｌ　２　）　４
　−ＮＨ−Ｃ（Ｎｌ−ＮＨ−ＳＯ２−＜０＞（Ｍｓ）−
０−ＣＨ２　−ＣＯ−［Ｓｒ１から始めてベックマンシ
ンセサイザー９９０で段階的に合成された。

サンプルは、ＴＬＣとＨＰＬＣとを用いて実質的に純粋
であると評価された。

実施例１８ 次式のｈｐＧＲＨ類似化合物の合成法。

３−ヒドロキシフェニルアセチル−Ｄ−Ａｌａ２−＾５
ｐ３−八ｌａ４　−Ｉｌｅ５　−Ｐｈｅ、　　−Ｔｈｒ
７　−＾ＳｎＢ　　−５ｅｒ９　−Ｔｙｒｔｏ−Ａｒｇ
ｔ　ｔ−ＬｙＳ１２−Ｖａ　Ｉ　ｔ　３−Ｌｅｕ　１４
−ＧＩ　Ｖ　ｔ　５−Ｇｌ　ｎｔ　５−ＬｅＬＩ　ｘｙ
−３ｅｒ１ｓ−Ａ　ｌ　ａ１９−Ａｒｑｚｏ−［ｙＳｚ
ｘ−ＬｅｌＪｚ２−Ｌｅｕｚ３−Ｇ　ｌ　ｎ２４−ＡＳ
ｐｚｓ−Ｉｌｅ２６−Ｎｌｅｚ）−３ｅｒｚｇは実施例
８または９の方法に従って適当な りＯＣ−またはＦｍｏｃ−ＮＨ−（ＣＭ　２　）−Ｎ１
１−Ｃ（Ｎｌｌ）−３ｏ　２−＜０＞（Ｍ、　）−０−
ＣＨ２−ＧＯ−［ＳＰ］から始めてベックマンシンセサ
イザー９９０で段階的に合成された。サンプルは、ＴＬ
ＣとＨＰＬＣとを用いて実質的に純粋であると評価され
た。

実施例１つ 実施例１６において（ｐ−ヒドロキシフェニル）ピルボ
イル基の代りに末端部に３−アミノＴｙｒ１を用いると
対応するオリゴペプチドが得られる。

ＪＧ−５５３−アミノ　一丁Ｖｒ＋　　−ＪＧ−５６３
，５−ジアミへ丁Ｖｒ＋　　−ＪＧ−５７Ｎ−アセチル
−３，５−ジアミノ−丁Ｖｒ＋　　−ＪＧ−５８Ｄ−丁
ｙｒ０、−Ｇｈ／。

ＪＧ−５９０−丁１／ｒ０、−Ａｌａ−ＪＧ−６００−
丁ｙｒｏ　、ＧＡＢＡ　　＋　　−ＪＧ−６１２−ヒド
ロキシフェニル　−　アセチル−ＪＧ−６３４−ヒドロ
キシベンゾイル ＪＧ−６４４−ヒドロキシフェニルグリシン　−ＪＧ−
６５４−しドロキシシンナミル−ＪＧ−６６３，４−ジ
ヒドロキシフェニル−アセチル−ＪＧ−６７３，４−ジ
しドロキシシンナミル　−ＪＧ−６８３，４−ジヒドロ
キシ−しドロシンナミル−ＪＧ−７０Ｓ−トリチルメル
カプト１０ピオニル　一丁Ｖｒ＋　　−ＪＧ−７１３−
メルカプトプロピオニル　一丁Ｖｒ＋　　−ＪＧ−７２
３−トリチルメルカプト１０ピオニル　−〇−丁Ｖｒ＋
う１≧（Ｊ二）ｋ 本発明の化合物をインビトロのラット細胞媒養およびラ
ット（インビボ）の両者においてＧＨＲＨ活性測定のた
めに試験した。プロトコールは次のようである。

実施例２０ ２４匹の成人オスまたはメスのスプラグ−ドウレイスト
レインラット（Ｓｐｒａｑｕｅ−Ｄａｗｌｅｙ　５ｔｒ
ａｉｎｒａｔ）は、各実験用に祈願された。後葉を除去
した後に、下垂体前葉を小片に裁断し、３７°Ｃで４５
分間、デュブノーフ（Ｄｕｂｎｏｆｆ）インキュベータ
ー中の０．５％コラ−ゲナーゼ（シグマ　タイプ１）、
０．２５％ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）（シグマＲＩ
Ａグレード）および５μｇ　／　ｍｌゲンタマイシン　
スルフェート（シグマ）を含む酸化媒体１９９　（ＧＩ
ＢＣＯ）の１０ｍ１中でインキュベートした。インキュ
ベーション後、組織外観に明白な変化はなかった。しか
しながら、フラグメントは、反復吸引およびギルマンピ
ペットマンがらの排除により、簡単に単細胞に分散し得
た。３０〜６０ピペツトマン処理後、組織はばらばらに
落ちた。第２コラゲノーゼインキユベーシヨンは、通常
不必要であった。細胞懸濁液は、室温で１０分間１００
×きて遠心分離にかけられた。その後細胞ペレットを、
１．０ｍｌの媒体中で再懸濁した。

少量のアリコートを細胞計数のために希釈し、懸濁液残
部を等容積の２つに分けた。各容積（約５×１０６セル
、通常３，５〜７．０Ｘ１０６セルを含有する）を予め
酸化された媒体で平衡にされた０、５ｍｌのセファデッ
クスＧ−１５と混合した。

下垂体細胞とセファデックスとの混合物をそそぎかけ装
置の２室に移し、媒体とともに潅流した。

その媒体は、酸素分散で使用される方法と類似方法であ
るが、コラゲナーゼを除いて常に新たに調製され、ミリ
ポアフィルタ−を通過させられ、そして実験中０２（９
５％）とＣ０２（５％）との混合物で連続的にガスの供
給を受けた。

え土工友豆芸！ そそぎかけ装置は、多くの１ｍｌプラスチックシリンジ
円筒（末端部を切断して変形した）から成り、水を攪拌
することにより３７℃に保持されている。プレツクジグ
ラスホルダー（ｐｌｅｘｉｃ＋ｌａｓ　ｈ。

１ｄｅｒ）中に垂直に保持されている、ユニットは、我
々の実験作業場で組立てられた。適正なグリース付○−
リングは、シリンジ円筒周りの循環水の漏れを防止する
。各円筒は、両端においてプランジャーを有する。プラ
ンジャーにドリルで六を開け、プラスチックチューブを
適応した。落下するプランジャーを小片の３０ＵＩ１１
−ボアナイロン網で覆ってセファデックスビーズが漏れ
ることを防止した。ビーズ間の細孔は、下垂体細胞の漏
れを妨ぐのに十分に小さく、かつ媒体の実質的な非制限
流を細胞カラムに許容する十分な大きさである。

上部プランジャーチューブは、媒体胛蔵器から室に向う
流れを導くように使用されていた。系（０゜５ｍ１分）
を通る流れはそそぎかけ室の後に置かれたマルチチャン
ネルぜん動性ポンプ（ギルソン）ミニパルスタイプＨＰ
−８で制御された。落下するプランジャーのチューブは
、ポンプとポンプからの４−チャンネルフラクションコ
レクターに接続された（修正グリソンタイプアナコール
５Ｃ３０）。このように、系は、流速においてわずかな
動揺を得るために負圧で操作された。室からの媒体は、
中性またはアルカリ性ｐＨ（１４，３４゜３８）におけ
るＡＣＴＨ活性損失を妨げるなめに濯出液を中間で酸性
とするために３０μｐのＩＮＨＣρを含む配列された珪
硼酸ガラスチューブに集められた。

放肚区免災迭笈羞 ＡＣＴＨ放射線免疫検定法は、他で記載されたように（
１４）　、本質的に１００μΩアルコールの未希釈そそ
ぎ媒体で実施された。しかしながら、結合と遊離のＡＣ
ＴＨの分離は、ポリエチレングリコール促進第２抗体で
達成された。ラットＧＨは、アリコートの非希釈または
希釈潅流液で基底または刺激性分泌について測定された
。抗血清（ａ　−ｈ　Ａ　ＣＴ　ＨバッチＮｏ、２．ａ
−ｒＧＨ８−４）とＡＣＴＨとＧＨＲＩＡ用のホルモン
（ｒＧＨＲＰ−１とＩ−４，ｈＡＣＴＨ）は、ＮＨＰＰ
　（ＮＩＡＤＤＫ、ＮＩＨ）から供給された。

多くの活性化合物からの結果は、第１表に示される。

１−く ３分間投与された。

放出ＧＨレベル／　　　　　　効　力 積　　　準　　　　　６２．５０　　　４０．００　　
１００％４２．５０ ２０、５０ ３４．５０ 実施例　７　　　　　Ｂ９．００　　１０５．７５　　
２６４％１２２．５０ 実施例１０　　　　９９．００　　　８５．７５　　２
１４％７２．５０ 実施例１２　　　　６０．００　　　５９．００　　１
４８％５８．００ 実施例１５　　　　７５．００　　　７０．２５　　１
７６％６５．５０ 実施例１４　　　　２９．５０　　　３５．５０　　８
９％４１．５０ 実施例１３／２　　２２．５０　　　１９．００　　４
８％１５．５０ 実施例１３／１　　２２．００　　　１Ｂ、５０　　４
６％１５．００ 実施例９　　　　　９．００　　　８．２５　　２１％
７．５０ 実施例２１ 成人メスラットを使用し、ベンドパルビタール（６■／
　１００　ｇ、ｂ、ｗ、）で麻酔をかけ、ベントバール
ビタール注射２０分後に腹腔的注射した。血液サンプル
は、頚静脈から採取され（予め処理されたレベル）、直
ちにｈｐＧＨ−ＰＲ’−”（対照として）またはＧＨ−
ＲＨ類似化合物を静脈注射した。血液サンプルは、注射
後５，１５．６０分に頚静脈から採取された。血液サン
プルは、遠心分離され、結晶が除かれて、ＧＨレベルは
、ＲＩＡで測定された。

結果は第２表に表として示され、第１図に要約する。

続いて起こる合成ＧＨＲＨ類似化合物の下垂体ＧＨ放出
のインビボ効果 実施例１５３６％　１９０％　２４７％　３３％相対効
力 （実測時おけるｈｐＧＨＲＨの効果に基づく）実施例　
７１０１％　２７０％　５４０％１７９％実施例１２　
　　　　　１２８％　１６１％　２１１％１８２％絶対
効力 実施例１２　　　　　　１３４％　６２９％　４５６％
　８３％合成ペプチドと天然ＧＨＲＨの類似比率で注射
された生体雌牛の実験において、実施例１５の合成ペプ
チドは天然物質の３〜４倍活性であることが見い出され
た。

角ｌにＵ オス　テストステロン感作ラットにおける合成ＧＨＲＨ
類似化合物のＧＨ放出のインビボ効果結果は、４点検定
法で計算された。

注射服用量は、静脈内にμｇ／１００ｇｂ、ｗ。

である。

表は、血漿Ｇｈレベル（ｎｏ・ｍｌ　）を示す。

注射５分後 標準 （ＧＩＩＲＨ１−”）夾旌皿Ｌ　火旌呵旦　　失旌呵卦
服用量 ０．０５　０．２　０．０２５０．１　０．０２５０．
１　０．０２５０．１実施例７．サンプル効力、１９６
％、 効力範囲、１０７−３５９％、 実施例１０、サンプル効力、８８％、 効力範囲、４５−１７４％、 実施例１５、サンプル効力、１４６％、効力範囲、４６
−３３１％ 工肚よ至欠蓋 標準 脂肪り二竺）火監医Ｌ　寒旌広迎　夾旌伝且服用量 ０．０５　０．２　０．０２５０．１　０．０２５０．
１　０．０２５０．１２４１　２８０　　９０　５１０
　１０９　１７Ｂ　　　７０　８０実施例７．ｖンプル
効力、１６９％、 効力範囲、７７−３６９％、 実施例１０、サンプル効力、１６５％、効力範囲、８６
−３１５％、 実施例１５、サンプル効力、５３％、 効力範囲、１２−２２６％

【図面の簡単な説明】

第１図は、ラットの時間に関する血漿ＧＨレベル図を示
す。 特許出願人　　ジ、アドミニストレイターズ、オン、ザ
、チューレン、 エディケイショナル、ファント

Claims (15)

【特許請求の範囲】
1. （１）次式で表わされるポリペプチドおよび薬学上許容
   される有機または無機塩基および有機または無機酸を有
   する薬学上許容される前記塩付加物。 Ｑ＾１−ＣＯ−Ｒ＿２−Ｒ＿３−Ａｌａ＿４−Ｉｌｅ＿
   ５−Ｐｈｅ＿６−Ｔｈｒ＿７−Ｒ＿８−Ｓｅｒ＿９−Ｒ
   ＿１＿０−Ａｒｇ＿１＿１−Ｒ＿１＿２−Ｒ＿１＿３−
   Ｒ＿１＿４−Ｒ＿１＿５−Ｇｌｎ＿１＿６−Ｒ＿１＿７
   −Ｒ＿１＿８−Ａｌａ＿１＿９−Ａｒｇ＿２＿０−Ｌｙ
   ｓ＿２＿１−Ｌｅｕ＿２＿２−Ｒ＿２＿３−Ｒ＿２＿４
   −Ｒ＿２＿５−Ｉｌｅ＿２＿６−Ｒ＿２＿７−Ｒ＿２＿
   ８−ＮＨ−Ｑ＾２ I 、［但し、Ｑ＾１は、 ▲数式、化学式、表等があります▼II、 または▲数式、化学式、表等があります▼III、 （但し、Ｘ＝ＯＨ、 Ｙ＝Ｈ、ＯＨ、ＮＨ＿２または ＣＨ＿３ＣＯＮＨ、 Ｗ＝低級アルキルまたはハロアルキル （但し、ハロは塩素またはフッ素、そして アルキル基の炭素数は１〜５である） ｍ＝１または２ ｎ＝０、１または２ Ｏ＝０または１を表わす。） で表わされるオメガまたはα−オメガ置換アルキル、 Ｒ＿２はＡｌａ、Ｄ−ＡｌａまたはＤ−Ｎ−メチル−Ａ
   ｌａ、 Ｒ＿３はＡｓｐ、Ｄ−Ａｓｐ、ＧｌｕまたはＤ−Ｇｌｕ
   、 Ｒ＿８はＡｓｎ、Ｄ−Ａｓｎ、ＳｅｒまたはＤ−Ｓｅｒ
   、 Ｒ＿１＿０はＴｙｒまたはＤ−Ｔｙｒ、 Ｒ＿１＿２はＬｙｓ、Ｄ−Ｌｙｓ、ＡｒｇまたはＯｒｎ
   、Ｒ＿１＿３はＶａｌまたは、Ｉｌｅ、 Ｒ＿１＿４はＬｅｕまたはＤ−Ｌｅｕ、 Ｒ＿１＿５はＧｌｙ、Ｎ−メチル−ＧｌｙまたはＤ−Ａ
   ｌａ、 Ｒ＿１＿７はＬｅｕまたはＤ−Ｌｅｕ、 Ｒ＿１＿８はＴｙｒまたはＳｅｒ、 Ｒ＿２＿３はＬｅｕまたはＤ−Ｌｅｕ、 Ｒ＿２＿４はＧｌｎまたはＨｉｓ、 Ｒ＿２＿５はＡｓｐ、Ｄ−Ａｓｐ、Ｇ１ｕまたはＤ−Ｇ
   ｌｕ、 Ｒ＿２＿７はＭｅｔ、Ｄ−Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｎｌｅ、Ｉ
   ｌｅ、Ｖａｌ、ＮＶａ、Ｌｅｕ、 Ｒ＿２＿８はＡｓｎまたはＳｅｒ、 Ｑ＿２は▲数式、化学式、表等があります▼を有する低
   級オメガ −グアニジノ−アルキル基 （IV） （但し、式中、ｐ＝２〜６を表わす。）を表わす。］
2. （２）ｐ＝４である特許請求の範囲第１項に記載の化合
   物。
3. （３）Ｑ＾１が２−（４−ヒドロキシフェニル）エチル
   、３−ヒドロキシベンジルまたは４−ヒドロキシベンジ
   ル、Ｒ＿２がＡｌａ、Ｄ−ＡｌａまたはＤ−Ｍｅ−Ａｌ
   ａそしてＲ＿２＿７がＮｌｅである特許請求の範囲第２
   項に記載の化合物。
4. （４）Ｑ＾１が１−アミノ−２−（４−ヒドロキシフェ
   ニル）−エチルまたは１−アミノ−２−（１−Ｈ−イミ
   ダゾール−４−イル）−エチル、Ｒ＿２がＡｌａ、Ｄ−
   ＡｌａまたはＤ−Ｎ−メチル−ＡｌａそしてＲ＿２＿７
   がＮｌｅである特許請求の範囲第２項の化合物。
5. （５）Ｑ＾１が２−（４−ヒドロキシフェニル）エチル
   、Ｒ＿２がＤ−ＡｌａそしてＲ＿２＿７がＮｌｅである
   特許請求の範囲第２項に記載の化合物。
6. （６）次の一連のステップから成る、特許請求の範囲第
   １項で規定されたＮＨ＿２−Ｑ＾２部分のＱ＾２セグメ
   ントをアミノ樹脂とヒドロキシ型樹脂とからなる群から
   選ばれた支持体相［ＳＰ］に固定する方法、 ・塩基の存在下、ｔ−ブトキシカルボニル化剤とＮＨ．
   Ｑ＿２とを反応させてＢｏｃ−ＮＨ．Ｑ＾２を形成し、
   そして・水性アルカリ存在下、水溶性エーテル中で−５
   〜１０℃の温度において、前記Ｂｏｃ−ＮＨ．Ｑ＾２と
   次式Ｈａｌ−ＳＯ＿２−〈Ｏ〉−Ｏ−ＣＨ＿２−ＣＯＯ
   Ｈ（但し、式中、Ｈａｌは塩素または臭素を表わす。）
   で表わされるアリールスルホニルハライドとを反応させ
   、ジ低級アルキルカルボジイミドの作用で支持体相［Ｓ
   Ｐ］にカップルして Ｂｏｃ−ＮＨ−Ｑ＾２′−ＳＯ＿２−〈Ｏ〉−Ｏ−ＣＨ
   ＿２−Ｃ−［ＳＰ］を生成する、対応する Ｂｏｃ−ＮＨ−Ｑ＾２′−ＳＯ＿２−〈Ｏ〉−ＯＣＨ＿
   ２−ＣＯＯＨを形成すること。
7. （７）Ｂｏｃ−ＮＨ−Ｑ＾２′−ＳＯ＿２−〈Ｏ〉−Ｏ
   −ＣＨ＿２−ＣＯ．ＮＨ．ＣＨ＿２−〈Ｏ〉−［Ｐｍ］ （但し、式中、［Ｐｍ］は支持体相の重合部を表わす。 ）を生成するために、支持体相［ＳＰ］が次式Ｈ＿２Ｎ
   −ＣＨ＿２−〈Ｏ〉−［Ｐｍ］のアミノ樹脂からなる群
   から選ばれる特許請求の範囲第６項に記載の方法。
8. （８）次の一連のステップから成る特許請求の範囲第１
   項で規定された−ＮＨ−Ｑ＾２部分をアミノ樹脂とヒド
   ロキシ型樹脂とから成る群から選ばれた支持体相［ＳＰ
   ］に固定する方法、 ・塩基の存在下、ベンジロキシカルボニルクロリドとＮ
   Ｈ＿２．Ｑ＾２とを反応させてＣｂｚ−ＮＨ．Ｑ＾２を
   形成し、 ・強水性塩基の存在下で前述のＣｂｚ−ＮＨ．Ｑ＾２と
   次式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （但し、式中、Ｈａｌは塩素または臭素、Ｍは炭素数１
   −５の低級アルキルまたは低級アルコキシ、そしてＳ＝
   １−３を表わす。） の置換アリールスルホニルクロリドとを反応させ、接触
   水素化反応によりＣｂｚ基を除いて ▲数式、化学式、表等があります▼ を生成し、 ・塩基の存在下でこの生成物と９−フルオレニルメトキ
   シカルボニルクロリドとを反応させて▲数式、化学式、
   表等があります▼ （但し、式中、Ｓ＝１−３である。）を生成し、そして ・この生成物と前記支持体相［ＳＰ］と反応させて ▲数式、化学式、表等があります▼ を生成すること。
9. （９）▲数式、化学式、表等があります▼ （但し、式中、［Ｐｍ］は支持体相の重合部を表わす。 ）を生成するために、支持体相［ＳＰ］が次式 Ｈ＿２Ｎ−ＣＨ＿２−〈Ｏ〉−［Ｐｍ］ のアミノ樹脂からなる群から選ばれる特許請求の範囲第
   ８項に記載の方法。
10. （１０）ブチルオキシカルボニル化剤とＮＨ＿２−Ｑ＾
    ２とを反応させてＢｏｃ−ＮＨ−Ｑ＾２を生成し、Ｂｏ
    ｃ−ＮＨ−Ｑ＾２と ▲数式、化学式、表等があります▼ （但し、式中、Ｈａｌは臭素または塩素を表わす。）と
    を反応させて ▲数式、化学式、表等があります▼ を生成する一連のステップからなる、特許請求の範囲第
    １項で規定したＮＨ−Ｑ＾２部分をアミノ樹脂とヒドロ
    キシ型樹脂とからなる群えら選ばれた支持体相［ＳＰ］
    に固定する方法。
11. （１１）Ｂｏｃ−ＮＨ−Ｑ＾２−ＳＯ＿２−〈Ｏ〉−Ｏ
    −ＣＨ＿２−ＣＯ．ＮＨ．ＣＨ＿２−〈Ｏ〉−［Ｐｍ］ （但し、式中［Ｐｍ］は支持体相の重合部を表わす。）
    を生成するために、支持体相［ＳＰ］が次式 Ｈ＿２Ｎ−ＣＨ＿２−〈Ｏ〉−［Ｐｍ］ のアミノ樹脂から成る群から選ばれる特許請求の範囲第
    １０項に記載の方法。
12. （１２）次構造 ▲数式、化学式、表等があります▼ （但し、式中、［ＰｅＰ］は、次構造 Ｑ＾１−ＣＯ−Ｒ＿２−Ｒ＿３−Ａｌａ＿４−Ｉｌｅ＿
    ５−Ｐｈｅ＿６−Ｔｈｒ＿７−Ｒ＿８−Ｓｅｒ＿９−Ｒ
    ＿１＿０−Ａｒｇ＿１＿１−Ｒ＿１＿２−Ｒ＿１＿３−
    Ｒ＿１＿４−Ｒ＿１＿５−Ｇｌｎ＿１＿６−Ｒ＿１＿７
    −Ｒ＿１＿８−Ａｌａ＿１＿９−Ａｒｇ＿２＿０−Ｌｙ
    ｓ＿２＿１−Ｌｅｕ＿２＿２−Ｒ＿２＿３−Ｒ＿２＿４
    −Ｒ＿２＿５−Ｉｌｅ＿２＿６−Ｒ＿２＿７−Ｒ＿２＿
    ８−ＮＨ−Ｑ＾２′ I 、［但し、Ｑ＾１は次式 ▲数式、化学式、表等があります▼II、 ▲数式、化学式、表等があります▼III、 ［但し、Ｘ＝ＯＨ、 Ｙ＝Ｈ、ＯＨ、ＮＨ＿２または ＣＨ＿３ＣＯＮＨ、 Ｗ＝低級アルキルまたはハロアルキル （但し、ハロは塩素またはフッ素、そして アルキル基の炭素数は１〜５を表わす。） ｍ＝１または２ ｎ＝０、１または２ Ｏ＝０または１を表わす。）、 Ｒ＿２はＡｌａ、Ｄ−ＡｌａまたはＤ−Ｎ−メチル−Ａ
    ｌａ、 Ｒ＿３はＡｓｐ、Ｄ−Ａｓｐ、ＧｌｕまたはＤ−Ｇｌｕ
    、 Ｒ＿８はＡｓｎ、Ｄ−Ａｓｎ、ＳｅｒまたはＤ−Ｓｅｒ
    、 Ｒ＿１＿０はＴｙｒまたはＤ−Ｔｙｒ、 Ｒ＿１＿２はＬｙｓ、Ｄ−Ｌｙｓ、ＡｒｇまたはＯｒｎ
    、Ｒ＿１＿３はＶａｌまたは、Ｉｌｅ、 Ｒ＿１＿４はＬｅｕまたはＤ−Ｌｅｕ、 Ｒ＿１＿５はＧｌｙ、Ｎ−メチル−ＧｌｙまたはＤ−Ａ
    ｌａ、 Ｒ＿１＿７はＬｅｕまたはＤ−Ｌｅｕ、 Ｒ＿１＿８はＴｙｒまたはＳｅｒ、 Ｒ＿２＿３はＬｅｕまたはＤ−Ｌｅｕ、 Ｒ＿２＿４はＧｌｎまたはＨｉｓ、 Ｒ＿２＿５はＡｓｐ、Ｄ−Ａｓｐ、ＧｌｕまたはＤ−Ｇ
    ｌｕ、 Ｒ＿２＿７はＭｅｔ、Ｄ−Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｎｌｅ、Ｉ
    ｌｅ、Ｖａｌ、ＮＶａ、Ｌｅｕ、 Ｒ＿２＿８はＡｓｎまたはＳｅｒ、 Ｑ２′は次式 ▲数式、化学式、表等があります▼IV （但し、式中、ｐは２〜６である。） を有する低級オメガ−グアニジノ−アルキル基を表わす
    。） Ｍはメチルまたはメトキシ、Ｓは１〜３、［ＰＲ］はｔ
    −ブチルエステル基で保護された鎖側カルボキシ基を表
    わし、そのフェノール性とアルコール性側鎖はｔ−ブチ
    ルエーテルからなる群から選ばれたトリフルオロ酢酸感
    応性基で、アミノ基はｔ−ブトキシカルボニル、そして
    グアニジノ側鎖は置換ベンゼルスホニル基で保護される
    。）を有する組合せの保護ペプチドをトリフルオロ酢酸
    処理することを特徴とするアミノ樹脂とヒドロキシ型樹
    脂とから成る群から選ばれた支持体相［ＳＰ］に付着し
    た保護ペプチド［ＰＲ］［ＰｅＰ］を開裂する方法。
13. （１３）支持体相［ＳＰ］が次式 Ｈ＿２Ｎ−ＣＨ＿２−〈Ｏ〉−［Ｐｍ］ （但し、式中、［Ｐｍ］は支持体相の重合部を表わす。 ）のアミノ樹脂からなる群から選択される特許請求の範
    囲第１２項に記載の方法。
14. （１４）次構造 ▲数式、化学式、表等があります▼ （但し、式中、［ＰｅＰ］は、次構造 Ｑ＾１−ＣＯ−Ｒ＿２−Ｒ＿３−Ａｌａ＿４−Ｉｌｅ＿
    ５−Ｐｈｅ＿６−Ｔｈｒ＿７−Ｒ＿８−Ｓｅｒ＿９−Ｒ
    ＿１＿０−Ａｒｇ＿１＿１−Ｒ＿１＿２−Ｒ＿１＿３−
    Ｒ＿１＿４−Ｒ＿１＿５−Ｇｌｎ＿１＿６−Ｒ＿１＿７
    −Ｒ＿１＿８−Ａｌａ＿１＿９−Ａｒｇ＿２＿０−Ｌｙ
    ｓ＿２＿１−Ｌｅｕ＿２＿２−Ｒ＿２＿３−Ｒ＿２＿４
    −Ｒ＿２＿５−Ｉｌｅ＿２＿６−Ｒ＿２＿７−Ｒ＿２＿
    ８−ＮＨ−Ｑ＾２′ I 、［但し、Ｑ＾１は次式 ▲数式、化学式、表等があります▼II、 または▲数式、化学式、表等があります▼III、 ［但し、Ｘ＝ＯＨ、 Ｙ＝Ｈ、ＯＨ、ＮＨ＿２または ＣＨ＿３ＣＯＮＨ、 Ｗ＝低級アルキルまたはハロアルキル （但し、ハロは塩素またはフッ素、そして アルキル基の炭素数は１〜５を表わす。） ｍ＝１または２ ｎ＝０、１または２ Ｏ＝０または１を表わす。） Ｒ＿２はＡｌａ、Ｄ−ＡｌａまたはＤ−Ｎ−メチル−Ａ
    ｌａ、 Ｒ＿３はＡｓｐ、Ｄ−Ａｓｐ、ＧｌｕまたはＤ−Ｇｌｕ
    、 Ｒ＿８はＡｓｎ、Ｄ−Ａｓｎ、ＳｅｒまたはＤ−Ｓｅｒ
    、 Ｒ＿１＿０はＴｙｒまたはＤ−Ｔｙｒ、 Ｒ＿１＿２はＬｙｓ、Ｄ−Ｌｙｓ、ＡｒｇまたはＯｒｎ
    、Ｒ＿１＿３はＶａｌまたは、Ｉｌｅ、 Ｒ＿１＿４はＬｅｕまたはＤ−Ｌｅｕ、 Ｒ＿１＿５はＧｌｙ、Ｎ−メチル−ＧｌｙまたはＤ−Ａ
    ｌａ、 Ｒ＿１＿７はＬｅｕまたはＤ−Ｌｅｕ、 Ｒ＿１＿８はＴｙｒまたはＳｅｒ、 Ｒ＿２＿３はＬｅｕまたはＤ−Ｌｅｕ、 Ｒ＿２＿４はＧｌｎまたはＨｉｓ、 Ｒ＿２＿５はＡｓｐ、Ｄ−Ａｓｐ、ＧｌｕまたはＤ−Ｇ
    ｌｕ、 Ｒ＿２＿７はＭｅｔ、Ｄ−Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｎｌｅ、Ｉ
    ｌｅ、Ｖａｌ、ＮＶａ、Ｌｅｕ、 Ｒ＿２＿４はＡｓｎまたはＳｅｒ、 Ｑ＾２′は次式 ▲数式、化学式、表等があります▼IV （但し、式中、ｐは２〜６である。） を有する低級オメガグアニジノアルキル基を表わす。） Ｍは水素、［ＰＲ］はベンジリックエステル基で保護さ
    れた鎖側カルボキシ基を表わし、そのフェノール性とア
    ルコール性側鎖はベンジリックまたは置換ベンジリック
    エーテルからなる群から選ばれたトリフルオロ酢酸耐性
    基で、アミノ側基はベンジロキシカルボニルまたはハロ
    ベンジロキシカルボニル基、そしてグアニジノ側鎖はｐ
    −トルエルスルホニル基で保護される。）を有する組合
    せの保護ペプチドをふっ化水素酸処理することを特徴と
    するアミノ樹脂とヒドロキシ型樹脂とから成る群から選
    ばれた支持体相［ＳＰ］に付着した保護ペプチド［ＰＲ
    ］［ＰｅＰ］を開裂する方法。
15. （１５）支持体相［ＳＰ］が次式 Ｈ＿２Ｎ−ＣＨ＿２−〈Ｏ〉−［Ｐｍ］ （但し、式中、［Ｐｍ］は支持体相の重合部を表わす。 ）のアミノ樹脂からなる群から選択される特許請求の範
    囲第１４項に記載の方法。