JPS6318703B2 - - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 発明の背景 技術分野 本発明は、尿、糞便または嘔吐物などに含まれ
ている潜血を検出するための潜血検出用試験片に
関する。 先行技術 尿、糞便又は嘔吐物等の体液中に血液もしくは
過酸化性作用を示すヘモグロビンが含まれている
場合、胃、腎臓、腸、その他泌尿器系において炎
症、潰瘍、腫瘍等の何らかの疾病が進行している
ものと想定し得る。従つて、それらの疾病に対し
て速やかに診断、治療を施すことは臨床上極めて
重要なことであり、そのためには体液中の血液も
しくは過酸化性作用物質を正確に検出する必要が
ある。 従来、一般に用いられている試料中潜血の検出
方法のほとんどは過酸化活性作用を利用したもの
である。 例えば紙等の担体に過酸化物と色原体である
有機発色指示薬を含浸させ、これに過酸化性作用
を有する血液もしくは遊離のヘモグロビンが接触
した場合、前記過酸化物を分解し、酸素を発生さ
せ、これにより有機発色指示薬が酸化され、呈色
する。 また安定剤としてリン酸モルホリド系物質が挙
げられ、また他の安定化方法として有機ヒドロペ
ルオキシドをゼラチンのような膠質物質でマイク
ロカプセル化する方法が知られている。 従来技術の欠点 このような従来技術によると、潜在的に相入れ
ない反応性成分（有機ヒドロペルオキシドおよび
有機発色指示薬）が早々と混じり合わないように
試薬を安定させることを目的としているが、特に
熱に対しては、安定剤自体の安定性がなく感度も
悪く、その結果試験片の安定性を維持できなかつ
た。さらに、有機ヒドロペルオキシドをカプセル
化した場合にはカプセルの被膜は古くなると、堅
くなつて反応の迅速性が低下し、かつ試験片上で
反応が不均一になりやすいため呈色にムラができ
やすかつた。 以上のように試薬及び試験片が不安定であるた
め判定の際、呈色の色別を認識し難いことがあつ
た。 発明の目的 本発明はかかる事情に鑑みて従来の欠点を除去
するためになされたものであつて、その目的とす
るところは、試験片の安定性を高めるために安定
剤を改良した潜血検出用試験片を提供することに
ある。 また他の目的は、検出時の呈色感度を高めた潜
血検出用試験片を提供することにある。 上記目的を達成するものは、有機ヒドロペルオ
キシド、色原体、緩衝剤、湿潤剤、活性剤および
安定剤を含有する担体からなり、さらに前記安定
剤が、Ｎ，N′−ジベンゾイル−Ｎ，N′−ジメチ
ルヒドラジン、Ｎ，N′−ジベンゾイル−Ｎ，
N′−ジエチルヒドラジン、Ｎ，N′−ジベンゾイ
ル−Ｎ，N′−ジエチルエチレンジアミン、Ｎ，
N′−ジベンゾイル−Ｎ，N′−ジエチルヘキサメ
チレンジアミン、Ｎ，N′−ジトルオイル−Ｎ，
N′−ジエチレンジアミン、ｐ−トルエンスルホ
ニル−Ｎ−ジエチルアミド、ｐ−メトキシベンゼ
ンスルホニル−Ｎ−ジエチルアミドの群から選ば
れた少なくとも一つの化合物である潜血検出用試
験片である。 発明の具体的説明 本発明において使用し得る安定剤はアルコール
または水に可溶な物質である。望ましくは耐熱性
を持たすため融点が45℃以上である。本発明に用
いられる安定剤としては、Ｎ，N′−ジベンゾイ
ル−Ｎ，N′−ジメチルヒドラジン、Ｎ，N′−ジ
ベンゾイル−Ｎ，N′−ジエチルヒドラジン、Ｎ，
N′−ジベンゾイル−Ｎ，N′−ジエチルエチレン
ジアミン、Ｎ，N′−ジベンゾイル−Ｎ，N′−ジ
エチルヘキサメチレンジアミン、Ｎ，N′−ジト
ルオイル−Ｎ，N′−ジエチレンジアミン、ｐ−
トルエンスルホニル−Ｎ−ジエチルアミド、ｐ−
メトキシベンゼンスルホニル−Ｎ−ジエチルアミ
ドが用いられる。 次に本発明による安定剤の一つであるN.N′−
ジベンゾイル−N.N′−ジエチルエチレンジアミ
ンの製造方法を下記の如く示す。 塩化ベンゾイル11.5mlをクロロホルム50mlに加
えた。N.N′−ジエチルエチレンジアミン7.1mlを
クロロホルム50mlに加えた。両液を冷却しておだ
やかに混合した後20％炭酸ナトリウム水溶液25ml
を前記混合液に加えて、この液を１時間、60℃で
加熱した。前記反応液をエバポレーターによつて
減圧乾燥した後、塩を除くためにクロロホルムに
再び生成物を溶解し、エバポレーターで乾燥して
最終的に目的物質を得た。 有機ヒドロペルオキシドとしては、2.5−ジメ
チルヘキサン−2.5−ジヒドロペルオキシド、ク
メンヒドロペルオキシド、ジイソプロピルベンゼ
ンヒドロペルオキシドが選ばれる。 また色原体は、酸化されて呈色することより酸
化指示薬と呼ばれるものであり、例えば、オルト
トリジン、ベンジジン、ロイコマラカイトグリー
ンが使用し得る。 さらに、試験片上のPHを一定に保つ為に緩衝剤
が使用され、例えばクエン酸塩、リン酸塩、コハ
ク酸塩が挙げられ、試験片を体液中に浸漬した際
のPH値が４〜８の範囲に維持できるように選択す
る必要がある また、試験片を体液中に浸したとき、該体液が
均一に浸潤すべく湿潤剤が使用され、例えばラウ
リル硫酸ナトリウム、ドデシルベンゼンスルホン
酸ナトリウム、ジオクチルスルホコハ酸ナトリウ
ム等の界面活性剤から選ぶことができる。 さらにまた、試験片上での反応の感度を高める
為に活性剤を添加し、ベンゾ〔ｆ〕キノリン、キ
ニン、イソキノリンが使用し得る。 また、試験片から薬剤の流出を防止するために
粘稠剤が使用され、ポリビニルアルコール、ポリ
ビニルピロリドン、ポリエチレングリコール等の
重合物及びゼラチン、アラビアゴムから選択でき
る。 一方、試験片として好適なものは紙、ガラス
繊維、プラステイツク素材から成る不織布等であ
り、含浸液と反応したり、含浸液に溶解したりせ
ず、かつ吸収性を有しているものであれば良い。
また溶剤については薬剤の混合物が容易に溶ける
ものであればよく、有利にはベンゼン、トルエ
ン、クロロホルム等が挙げられる。 次に本発明をいくつかの実施例で詳細に説明す
るが、それによつて本発明は制限されるものでは
ない。 実施例 １ 溶液 ２，５−ジメチルヘキサン− ２，５−ジヒドロペルオキシド 1.5ｇ ジオクチルスルホコハク酸 ナトリウム 1.0ｇ Ｎ，N′−ジベンゾイル−Ｎ，N′ −ジメチルヒドラジン 10ｇ メタノール 100ml 紙を溶液に十分浸潤させた後、40℃の乾燥
オーブンで20分間乾燥させた。 溶液 ゼラチン 2.0ｇ クエン酸 2.5ｇ クエン酸ナトリウム 7.5ｇ 水 100ml 上記の溶液を浸潤、乾燥させた紙を、溶液
に十分浸潤して、40℃の乾燥オーブンで50分間
乾燥させた。 溶液 オルトトリジン 0.3ｇ ３−アミノキノリン 0.3ｇ ベンゼン 100ml 上記の溶液を浸潤、乾燥させた紙を、溶液
に十分浸潤して、50℃の乾燥オーブンで10分間
乾燥させた。これを実施例１の試験片とする。 実施例 ２ 実施例１における安定剤Ｎ，N′−ジベンゾイ
ル−Ｎ，N′−ジメチルヒドラジンをＮ，N′−ジ
ベンゾイル−Ｎ，N′−ジエチルヒドラジンに代
えた以外は実施例１と同様とした試験片を作成し
た。これを実施例２の試験片とする。 実施例 ３ 実施例１における安定剤Ｎ，N′−ジベンゾイ
ル−Ｎ，N′−ジメチルヒドラジンをＮ，N′−ジ
ベンゾイル−Ｎ，N′−ジエチルエチレンジアミ
ンに代えた以外は実施例１と同様とした試験片を
作成した。これを実施例３の試験片とする。 実施例 ４ 実施例１における安定剤Ｎ，N′−ジベンゾイ
ル−Ｎ，N′−ジメチルヒドラジンをＮ，N′−ジ
ベンゾイル−Ｎ，N′−ジエチルヘキサメチレン
ジアミンに代えた以外は実施例１と同様とした試
験片を作成した。これを実施例４の試験片とす
る。 実施例 ５ 実施例１における安定剤Ｎ，N′−ジベンゾイ
ル−Ｎ，N′−ジメチルヒドラジンをＮ，N′−ジ
トルオイル−Ｎ，N′−ジエチレンジアミンに代
えた以外は実施例１と同様とした試験片を作成し
た。これを実施例５の試験片とする。 実施例 ６ 実施例１における安定剤Ｎ，N′−ジベンゾイ
ル−Ｎ，N′−ジメチルヒドラジンをｐ−トルエ
ンスルホニル−Ｎ−ジエチルアミドに代えた以外
は実施例１と同様とした試験片を作成した。これ
を実施例６の試験片とする。 実施例 ７ 実施例１における安定剤Ｎ，N′−ジベンゾイ
ル−Ｎ，N′−ジメチルヒドラジンをｐ−メトキ
シベンゼンスルホニル−Ｎ−ジエチルアミドに代
えた以外は実施例１と同様とした試験片を作成し
た。これを実施例７の試験片とする。 発明の具体的作用 実施例で示したようにして得られた試験片を体
液中に１秒間浸漬させる。前記試験片を判定まで
の60秒間空中に放置したのち、呈色を所定の色調
表と照らし合わせて色調表に記された判定符号を
読みとる。前記色調表によつて呈色の度合から体
液中潜血の濃度を判定できる。 発明の具体的効果 以上のように、本発明による実施例を掲げた
が、本発明による効果を従来使用されている方
法、例えば、以下のとおり示した参考例と対比し
つつ説明する。 参考例 乳鉢にアラビアゴム・ムチレージ（熱湯500ml
にアラビアゴム200ｇを加えて調製した）100ml、
次いでジオクチル・ソジウム・スルホサクシネー
ト（５％ｗ／Ｖ）２mlを加える。そしてキユメン
ヒドロ過酸化物５mlを加え、そして混合物を５分
間研磨して原乳剤を形成せしめる。次に水1500ml
を加熱沸騰せしめ、そしてこれをクエン酸ナトリ
ウム163ｇ及びクエン酸37ｇの混合物に加えてク
エン酸塩緩衝液を調製する。次にクエン酸塩緩衝
剤をゼラチン0.7ｇと混合し、そして緩衝剤−ゼ
ラチン混合物50mlを原乳剤に加え、そしてよく撹
拌する。次にジアルデヒド澱粉の１％分散液１ml
を充分撹拌しながら加える。次いでラウリル硫酸
ナトリウムの５％溶液12ml量を混合物に加える。
得られた組成物を手動式ホモジナイザーで均質化
し、そして水500ml、クエン酸ナトリウム163ｇ及
びクエン酸37ｇを使用して前述の如く調製した緩
衝液50mlを撹拌しながら加える。でき上つた乳剤
を浸漬して細長い紙片に適用させ、そして次に含
浸した細長い紙片を24時間75〜80℃で炉で乾燥す
る。最後に、クロロホルム16mlにオルトトリジン
320mgを溶解しそして浸漬によつて乾燥した細長
い紙片に適用する。ゆるやかに加熱して過剰のク
ロロホルムを紙片から蒸発させる。 前記実施例１ないし実施例７と参考例から得ら
れた各試験片を37℃中に放置して外観の経時変化
を調べた結果を下記の表に示す。これらの結果よ
り経時変化に対する試験片の安定性を比較するこ
とができる。

【表】

【表】 表より、本発明による実施例１ないし７に於て
は３週間経過まで試験片に全く変化は見られなか
つた。しかし、従来の方法によると、すでに２週
間経過に於て黒色に変化した。このことより、本
発明による実施例１ないし７に於ては安定性の優
れた試験片であることがわかる。 一方、試験液に例えば尿を使つて尿中の潜血を
本発明による試験片で実施した場合も前記結果と
同様に安定した呈色結果が得られた。 しかして、本発明によれば体液中の潜血を検出
する際、有機ヒドロペルオキシド、色原体、緩衝
剤、湿潤剤、活性剤といつしよに一般式で示した
少くとも一つの化合物を試験片に含浸させること
により経時変化に対する試験片の安定性を高め、
しかも感度も高い為、常に安定で正確な呈色反応
を得ることができ潜血を敏感かつ確実に検出する
ことができる。 従つて、本発明による潜血検出用試験片を使用
することによつて、体液中の血液及び他の過酸化
性作用物質を安定にしかも確実かつ敏速に検出す
ることができるため、正確に判定しやすい。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. １ 有機ヒドロペルオキシド、色原体、緩衝剤、
   湿潤剤、活性剤および安定剤を含有する担体から
   なり、さらに前記安定剤が、Ｎ，N′−ジベンゾ
   イル−Ｎ，N′−ジメチルヒドラジン、Ｎ，N′−
   ジベンゾイル−Ｎ，N′−ジエチルヒドラジン、
   Ｎ，N′−ジベンゾイル−Ｎ，N′−ジエチルエチ
   レンジアミン、Ｎ，N′−ジベンゾイル−Ｎ，
   N′−ジエチルヘキサメチレンジアミン、Ｎ，
   N′−ジトルオイル−Ｎ，N′−ジエチレンジアミ
   ン、ｐ−トルエンスルホニル−Ｎ−ジエチルアミ
   ド、ｐ−メトキシベンゼンスルホニル−Ｎ−ジエ
   チルアミドの群から選ばれた少なくとも一つの化
   合物であることを特徴とする潜血検出用試験片。