JPS6317079B2 - - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】

本発明は、バツカリス・メガポタミカ
（Baccharis megapotamica）から分離される新
規な抗白血病作用を有するエポキシド類化合物
（anti―leukemic epoxides）に関するものであ
る。この新規な化合物は、ジエン性巨大エステル
側鎖（dienic macrolide ester side chain）がま
たがつている12，13―エポキシトリコセン（12，
13―epoxy―trichothecene）中央環システムに
その特徴を有する。この活性化合物は、Ａ―環に
於ける酸素原子の存在に特徴を有し、その酸素原
子は、その９＝10位に於ける不飽和結合と共にそ
の８位に於けるβ―水酸基の形で存在するか、あ
らいはまた９および10位に存在するエポキシド基
の形で存在する。これらの基のいずれかが欠ける
ような化合物は、上記抗白血病作用を有しない。 本発明かゝる活性化合物は、二十日ネズミの生
体実験に於てＰ―388リンパ細胞の白血病に対し
て優れた驚くべき抗白血病作用を有する。 本発明は米国厚生省（The Department of
Health，Edncation and Welfare）の許可もし
くは認可の下での研究中になされたものである。 バツカリス・メガポタミカ・スプレング（アス
トラセアエ）〔Baccharis megapotamica
Sprens （Asteraceae）〕のエタノール抽出物を
一連の抽出、クロマトグラフイによる精製にかけ
てジエン性巨大エステル側鎖を有する９，10，
12，13，12′，13′―トリエポキシトリコセセンを
得た。このトリエポキシドはバツカリン
（baccharin）と命名され、高度の抗白血病作用
を示す。このバツカリンの精製過程に於て、他の
構造上類似する化合物も単離され、バツカリノイ
ド類（baccharinoids）と命名された。これらバ
ツカリノイド類のうち、９種は抗白血病作用を有
することが見出された。 これらの活性な化合物は、ある共通の構造上の
特徴を有する五つの異つた構造群に属する。すな
わち、これら全てが、ジエン性巨大エステル側鎖
がまたがつている12，13―エポキシトリコセセン
中央環システムを有している。抗白血病作用を有
さないいくつかのバツカリノイドも分離された
が、抗腫瘍活性（anti―neoplastic activity）を
有する化合物は、トリコセセンシステムのＡ環に
於ける酸素原子の存在に特徴を有し、その酸素原
子は次の二つのうちのいずれかの形で見出され
る。すなわち、９，10位に於ける炭素―炭素二重
結合と共にその８位に於けるβ―水酸基の形か、
あるいはまた前述の９，10位にまたがつたβ―エ
ポキシ基の形で酸素が見出される。第１グループ
（８―β―OH）に属する化合物は、バツカロー
ル（baccharol）（B1）、イソバツカロール
（isobaccharol）（B2）、バツカリノール
（baccharinol）（B4）、イソバツカリノール
（isobaccharinol）（B6）、イソバツカリゾール
（isobaccharisol）（B7）およびバツカリゾール
（baccharisol）（B3）である。第２のグループ
（９，10―β―エポキシ）に属する化合物は、バ
ツカリン（baccharin）（B5）、イソバツカリン
（isobaccharin）（B8）およびバツカレン
（baccharene）（B9）である。これらの化合物の
特定の構造を以下に示す。 本発明は、一般式 （ただし、式中R₁はＨまたは結合する炭素と
一まとめにして考えられるR₁とＣ―９はエポキ
シ環を形成し、R₂はOR′または水素であり： R₃は〓、ＨまたはOHまたは結合する炭素と一
まとめにして考えられるR₃とＣ―3′はエポキシ環
を形成し； R₄およびR₅はＨまたはOHであり；OR′はOH
であり； R″は

【式】であり； 若し結合する炭素と一まとめにして考えられる
R₁とＣ―９がエポキシドを形成すると、炭素―
炭素二重結合が９，10位に存在し、炭素―炭素二
重結合が９，10位に存在する場合にはR₁はＨで
あり； 若しR₃がＨまたはOHまたは結合する炭素と一
まとめにして考えられるR₃とＣ―3′とがエポキシ
ドを形成すると、炭素―炭素一重結合は2′，3′位
に存在し、炭素―炭素二重結合は2′，3′位に存在
する場合にはR₃は〓であり；R₄がＨのときR₅は
OHであり、R₄がOHときR₅はＨであり、但し、
該化合物がせいぜい１個の二重結合を９，10また
は2′，3′位に有し、さらに該化合物がバツカリン
ではないという条件である。）で示される化合物。
であり具体的には次の式［］〜［］で示され
る化合物である。 式〔〕で示される化合物 但し または 式〔〕の化合物には、バツカリン（B5）〔Ｃ
―2′：（Ｓ），Ｃ―3′：（Ｒ），Ｃ―4′：（Ｓ），
Ｃ―
6′：（Ｒ），Ｃ―13′：（Ｒ）〕およびイソバツカリ
ン（B8）〔Ｃ―2′：（Ｓ），Ｃ―3″：（Ｒ），Ｃ―
4′：（Ｓ），Ｃ―6′：（Ｒ），Ｃ―13′：（Ｓ）〕が
含ま
れる。 式〔〕で示される化合物 但し または 式〔〕の化合物には、バツカリノール（B4）
〔Ｃ―2′：（Ｓ），Ｃ―3′：（Ｒ），Ｃ―4′：（Ｓ
），Ｃ
―6′：（Ｒ），Ｃ―13′：（Ｒ）〕およびイソバツカ
リノール（B6）〔Ｃ―2′：（Ｓ），Ｃ―3′（Ｒ），Ｃ
―4′：（Ｓ），Ｃ―6′：（Ｒ），Ｃ―13′：（Ｓ）〕
が含
まれる。 式〔〕で示される化合物 但し 式〔〕で示される化合物 但し 式〔〕で示される化合物 但し または 式〔〕の化合物にはバツカリゾール（B7）
〔Ｃ―2′：（Ｒ），Ｃ―3′：（Ｒ），Ｃ―6′：（Ｒ
），Ｃ
―13′：（Ｒ）〕およびイソバツカリゾール（B3）
〔Ｃ―2′：（Ｒ），Ｃ―3′：（Ｒ），Ｃ―6′：（Ｒ
），Ｃ
―13′：（Ｓ）〕が含まれる。 本発明は、 (a) バツカス・メガポタミカ植物原料をエタノー
ルで抽出し、該抽出物を分離し、かつ該抽出物
から溶媒を除去して残留物を得る工程、 (b) (a)工程からの残留物を水および酢酸エチルで
分別して酢酸エチル抽出物を採り、かつ該抽出
物から溶媒を除去して残留物を得る工程、 (c) (b)工程からの残留物を石油エーテルおよび水
性メタノールで分別してエタノール抽出物を採
り、かつ溶媒を除去して残留物を得る工程、お
よび (d) (c)工程からの残留物をアルミナカラムで濾過
し、濾液から溶媒を除去して所望のバツカリノ
イド類を含む残留物を得る工程 からなることを特徴とするバツカリス・メガポタ
ミカから一般式 （ただし、式中R₁はＨまたは結合する炭素と
一まとめにして考えられるR₁とＣ―９はエポキ
シ環を形成し、R₂はOR′または水素であり： R₃は〓、ＨまたはOHまたは結合する炭素と一
まとめにして考えられるR₃とＣ―3′はエポキシ環
を形成し； R₄およびR₅はＨまたはOHであり；OR′はOH
であり； R″は

【式】であり； 若し結合する炭素と一まとめにして考えられる
R₁とＣ―９がエポキシドを形成すると、炭素―
炭素一重結合が９，10位に存在し、炭素―炭素二
重結合が９，10位に存在する場合にはR₁はＨで
あり； 若しR₃がＨまたはOHまたは結合する炭素と一
まとめにして考えられるR₃とＣ―3′とがエポキシ
ドを形成すると、炭素―炭素一重結合は2′，3′位
に存在し、炭素―炭素二重結合は2′，3′位に存在
する場合にはR₃は〓であり；R₄がＨのときR₅は
OHであり、R₄がOHときR₅はＨであり、但し、
該化合物がせいぜい１個の二重結合を９，10また
は2′，3′位に有し、さらに該化合物がバツカリン
ではないという条件である。）で示される化合物
の単離方法である。 単離方法は以下の通りである。植物原料をソツ
クスレー抽出器で、好ましくは95％エタノールで
抽出した。エタノール抽出物を減圧下に濃縮し、
酢酸エチルと水とで分別した。酢酸エチル層はそ
のまゝ濃縮してＡ留分を得、Ａ留分を10％メタノ
ール水溶液と石油エーテルとで分別した。メタノ
ール層を減圧下濃縮してＢ留分を得、Ｂ留分を20
％メタノール／酢酸エチル中に溶解してアルミナ
層を透過させた後、減圧下濃度してＣ留分を得
た。 Ｃ留分をエーテル中のアルミナ上でカラムクロ
マトグラフイにかけ、メタノール量を増しつつメ
タノール含有エーテルで溶出した。バツカリンお
よびバツカリノイド類（B1〜B9）は、10％メタ
ノール／エーテルおよび純メタノール溶出分中に
溶出した。しかしながら、アルミナ上でのカラム
クロマトグラフイでは、各成分を分離することは
できなかつた。各成分の分離は、シリカゲル上の
クロマトグラフイによる溶出と実験室的規模の薄
層クロマトグラフ板による溶出との組合せによつ
て行なわれた。 B1からB9の全ての活性物質を、良く知られて
いるテスト方法に従つて、実験動物腫瘍システム
に於けるＰ―388リンパ細胞白血病に対する抗腫
瘍作用についてテストした。本発明にかかる全て
の物質はミリグラム／キログラムのレベル（この
レベルでは、哺乳動物系での毒性そのものは重要
な問題とならない）で秀れた抗白血病作用を示し
た。 本発明の方法において、バツカリス・メガポタ
ミカの小枝および葉からエタノール、好ましくは
95％エタノールを用いて大容量のソツクスレー抽
出器で抽出する。小枝および葉が好ましいが、上
記植物の他の部分を用いて同様の操作を行つても
良い。好ましくはおよそ100Kgずつバツチでおよ
び100の抽出溶媒で約６，15および24時間の連
続時間上記植物原料から抽出する。 抽出物を集め、減圧下濃縮し、濃縮物を水と酢
酸エチルで分別する。水の容量とほぼ等しい容量
の酢酸エチルを使用して数回、好ましくは３〜５
回分別を繰り返すのが好ましい。酢酸エチル層を
採り、減圧下に濃縮し、残留分を水性メタノー
ル、好ましくは10％水性メタノールと石油エーテ
ルで分別する。メタノールとほぼ同容量の石油エ
ーテルを用いて数回抽出を行うのが好ましい。石
油エーテル抽出は２〜４回、特に３回行うのが好
ましく、水性メタノール層を採り、減圧下に濃縮
して留分Ｂを得る。 留分Ｂを20％メタノール／酢酸エチルに溶解
し、アルミナカラムで過する。この方法は、次
のステツプに進めるべき原料の重量を大幅に減少
させ、しかもバツカリノイド類の収率に影響を与
えないことが判明した。 54Kgの小枝および葉から最初のエタノール抽出
物に対して、得られる留分Ｂを溶媒２〜５好ま
しくは３中に取出し、２〜５Kg好ましくは４Kg
のアルミナ上で過し、次いで６〜８の溶媒で
溶出する。溶出物を減圧下に濃縮して留分Ｃを
得、アルミナ、好ましくは５〜８Kg、好ましくは
およそ6.5Kgのアルミナ（エーテル中に充填）上
でクロマトグラフイにかける。次いで、カラムを
エーテル、３％メタノール／エーテルおよび６％
メタノール／エーテルで溶出するが、この間バツ
カリノイド類は溶出されない。10％メタノール／
エーテルで溶出し、単離可能のバツカリノイド類
の約27％を収得する。溶出物は、およそカラム容
量の1/3の容量の留分で集めるのが好ましい。第
１の留分はB3とB7を含み、第２の留分はB1と
B2および少量のB3とB7を含み、第３の留分は
B1，B2，B5，B8とB9および少量のB4を含む。 およそ１カラム容量のメタノールで溶出し、主
としてB4とB6および少量のB2から成る残りのバ
ツカリノイド類（73％）を収得する。 10％メタノール／エーテル溶出分を夫々留分
Ｄ，Ｅ，Ｆと名付け、メタノール溶出分を留分Ｇ
と名付ける。これまで述べた第一次精製法を第１
表に示す。 留分Ｄ，Ｆ，ＧおよびＥの精製法を夫々第２表
〜第５表に示す。

【表】
る留分と合わせて

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １ 一般式 （ただし、式中R₁はＨまたは結合する炭素と
   一まとめにして考えられるR₁とＣ―９はエポキ
   シ環を形成し、R₂はOR′または水素であり： R₃は〓、ＨまたはOHまたは結合する炭素と一
   まとめにして考えられるR₃C―3′はエポキシ環を
   形成し； R₄およびR₅はＨまたはOHであり；OR′はOH
   であり； R″は【式】であり； 若し結合する炭素と一まとめにして考えられる
   R₁とＣ―９がエポキシドを形成すると、炭素―
   炭素一重結合は９，10位に存在し、炭素―炭素二
   重結合が９，10位に存在する場合にはR₁はＨで
   あり； 若しR₃がＨまたはOHまたは結合する炭素と一
   まとめにして考えられるR₃とＣ―3′とがエポキシ
   ドを形成すると、炭素―炭素一重結合は2′，3′位
   に存在し、炭素―炭素二重結合は2′，3′位に存在
   する場合にはR₃は〓であり；R₄かＨのときR₅は
   OHであり、R₄がOHのときR₅はＨであり、但
   し、該化合物がせいぜい１個の二重結合を９，10
   または2′，3′位に有し、さらに該化合物がバツカ
   リンではないという条件である。）で示される化
   合物。 ２ 前記一般式が次式 （但し、式中R″は【式】である。）で示 される特許請求の範囲第１項に記載の化合物。 ３ 前記一般式が次式 （但し、式中、R₁はＨであり、またR″は
   【式】または【式】である。）で示 される特許請求の範囲第１項に記載の化合物。 ４ 前記式において13′の炭素が（Ｒ）配列の中
   にある特許請求の範囲第３項に記載の化合物であ
   るバツカリノール。 ５ 前記式において13′の炭素が（Ｓ）配列の中
   にある特許請求の範囲第３項に記載の化合物であ
   るイソバツカリノール。 ６ 前記一般式が次式 （但し、式中R″は【式】である。）で示 される特許請求の範囲第１項に記載の化合物。 ７ 前記一般式 （但し、式中、R₁Hであり、R″は【式】 である。）で示される特許請求の範囲第１項に記
   載の化合物。 ８ 前記一般式が次式 （但し、式中、R₁はＨであり、またR″は
   【式】または【式】である。）で示 される特許請求の範囲第１項に記載の化合物。 ９ 前記式において13′の炭素が（Ｒ）配列の中
   にある特許請求の範囲第８項に記載の化合物であ
   るバツカリゾール。 １０ 前記式において13′の炭素が（Ｓ）配列の
   中にある特許請求の範囲第８項に記載の化合物で
   あるイソバツカリゾール。 １１ (a) バツカス・メガポタミカ植物原料をエ
   タノールで抽出し、該抽出物を分離し、かつ該
   抽出物から溶媒を除去して残留物を得る工程、 (b) (a)工程からの残留物を水および酢酸エチルで
   分別して酢酸エチル抽出物を採り、かつ該抽出
   物から溶媒を除去して残留物を得る工程、 (c) (b)工程からの残留物を石油エーテルおよび水
   性メタノールで分別してエタノール抽出物を採
   り、かつ溶媒を除去して残留物を得る工程およ
   び (d) (c)工程からの残留物をアルミナカラムで濾過
   し、濾液から溶媒を除去して所望のバツカリノ
   イド類を含む残留物を得る工程からなることを
   特徴とするバツカリス・メガポタミカから一般
   式 （ただし、式中R₁はＨまたは結合する炭素と
   一まとめにして考えられるR₁とＣ―９はエポキ
   シ環を形成し、R₂はOR′または水素であり： R₃は〓、ＨまたはOHまたは結合する炭素と一
   まとめにして考えられるR₃とＣ―3′はエポキシ環
   を形成し； R₄およびR₅はＨまたはOHであり；OR′はOH
   であり； R″は【式】であり； 若し結合する炭素と一まとめにして考えられる
   R₁とＣ―９がエポキシドを形成すると、炭素―
   炭素一重結合が９，10位に存在し、炭素―炭素二
   重結合が９，10位に存在する場合にはR₁はＨで
   あり； 若しR₃がＨまたはOHまたは結合する炭素と一
   まとめにして考えられるR₃とＣ―3′とがエポキシ
   ドを形成すると、炭素―炭素一重結合は2′，3′位
   に存在し、炭素―炭素二重結合は2′，3′位に存在
   する場合にはR₃は〓であり；R₄がＨのときR₅は
   OHであり、R₄がOHのときR₅はＨであり、但
   し、該化合物がせいぜい１個の二重結合を９，10
   または2′，3′位に有し、さらに該化合物がバツカ
   リンではないという条件である。）で示される化
   合物の単離方法。 １２ (a) 特許請求の範囲第１１項記載の方法に
   おける(d)工程で得られる残留物をアルミナ上の
   カラムクロマトグラフイにかけ、エーテル、エ
   ーテル／メタノールおよびメタノールで引続い
   て溶出し、所望の成分を10％メタノール／エー
   テルおよびメタノール溶留分中へ溶出させ、 (b) 該溶出留分から溶媒を除去し、かつ (c) 該留分を再度クロマトグラフイにかけて、バ
   ツカリン、イソバツカリン、バツカロール、イ
   ソバツカロール、バツカレン、バツカリノー
   ル、イソバツカリノール、バツカリゾールおよ
   びイソバツカリゾールを単離することを特徴と
   する特許請求の範囲第１１項に記載の方法。