JPS623381B2 - - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は体液および体排出物中の過酸化性作用
物質を検出するための安定かつ敏感な過酸化性作
用物質検出用試験片に関する。

尿、糞便または嘔吐物中の肉眼ではもはや確認
することのできない少量の血液の検出は腫瘍、潰
瘍または炎症により起こる胃、腸、腎臓等の出血
の早期診断に重要である。それと共に特定の溶血
性毒素の作用によつて尿および血漿中にヘモグロ
ビンが遊出しうる。

体液あるいは生体排泄物中の潜血の検出におい
て現在主として行なわれている方法は、ヒドロペ
ルオキシドと色原体の反応に基づくもので、ヒド
ロペルオキシドから誘離した酸素は色原体に運ば
れ、血液成分であるヘモグロビン、ミオグロビン
あるいはその分解産物などの過酸化性作用を有す
る物質が触媒として作用し色原体が酸化されて色
素となり呈色を示す。そして発現した色調から血
液成分であるヘモグロビンあるいはその分解産物
の存在を検知し出血の有無を知るものである。簡
便な試験紙として使用する場合、例えば紙等の
吸収性担体に上記の検出反応に必要な試薬を含浸
したものを使用するが、色原体と酸化剤が密接に
存在する紙上では安定性が悪く通常安定剤とそ
れだけでは呈色感度が悪いので感度をさらに高め
るために活性剤を添加する。

従来、安定剤としてリン酸モルホリド系物質を
使用した例があるが、リン酸モルホリド系物質は
融点が40℃しかなく、熱に対して不安定であり、
またこの物質は合成が困難でそれ自体不安定な物
質である。他の安定化法としてはヒドロペルオキ
シドをマイクロカプセル化する方法が知られてい
るが、この方法は試験紙上で反応が不均一になり
やすいため呈色にムラができる。また、マイクロ
カプセルの被膜は古くなると堅くなつて反応時間
が新しい時より遅くなり実質的に低下をおこす等
の欠点を有している。また、活性剤としてはキノ
リン、キニン、シンコニン、６−メトキシキノリ
ンなどが知られているが、いずれもさほど呈色感
度はよくなく尿中での赤血球の正常値と病的値と
の識別に必要であろうと思われる赤血球数にして
３〜５個／mm^３の検出は不可能である。

本発明は上記事情に鑑みなされたもので、その
目的とするところは熱、湿気等に対して安定性が
よく、尿中赤血球数３〜５個／mm^２を検出できる
敏感性を有しかつ製造が容易な試験片を提供する
ことにある。上記目的を達成するものは、ヒドロ
ペルオキシドならびに過酸化性作用物質の存在で
色変化をともなつて酸化される指示薬が含浸され
てなる担体からなる試験片において、担体が安定
剤として一般式： （式中R₁は水素、R₂は水素または を表す。）あるいはＮ，Ｎ−メチレン−ビスアク
リルアミドのいずれかひとつの化合物と、活性剤
として３−メチルイソキノリン、３−アミノイソ
キノリン、４−アミノイソキノリンのいずれかひ
とつを含有する体液または体排出物中の過酸化性
作用物質検出用試験片である。

次に、本発明を具体的に説明する。

まず、本発明の試験片は、安定剤として、一般
式： （式中R₁は水素、R₂は水素または を表す。）すなわち、アクリルアミドまたはＮ−
（１，１−ジメチル３−オキシブチル）アクリル
アミドあるいはＮ，Ｎ−メチレン−ビスアクリル
アミドを含有している。どちらも良好に使用で
き、かつ同等の結果が得られるものである。上記
物質はいずれも容易に合成あるいは入手できるも
のである。

さらに、活性剤として３−メチルイソキノリ
ン、３−アミノイソキノリン、４−アミノイソキ
ノリンのいずれかひとつを含有している。上記物
質を含有することにより、これまで達成しえなか
つた感度を有する試験片が得られたのである。さ
らに、上記物質は、活性剤としての効果を十分に
持つとともに、試験片に使用するために必要な物
性（融点が高く、昇華性のない物質）を満たして
いる。

活性剤の作用については、ヘモグロビンなどと
錯体を形成するためであろうと予測されるが明確
には解明されていない。

血液に対する迅速試験の他の成分としてはヒド
ロペルオキシド、指示薬、緩衝剤ならびに他の助
薬である。

ヒドロペルオキシドとしては有機ヒドロペルオ
キシドであるクメンヒドロペルオキシド、２，５
−ジメチルヘキサン−２，５−ジヒドロペルオキ
シドなどであり、指示薬としてはベンジジン、０
−トリジン、２，７−フルオレンジアミンなどが
挙げられる。指示薬は含浸溶液100ml当り0.2〜
1.0ｇが適当である。

緩衝剤としてはクエン酸塩、リン酸塩、フタル
酸塩、またはコハク酸塩緩衝液があげられ、その
際にPH値及び容量は、試験片を体液中に浸漬した
後で試験片上ではPH４〜７の範囲に維持できるよ
うに選択しなければならない。

本発明による試験片を製造するためには、紙
等の吸収性担体を易揮発性溶剤中の試薬の溶液で
含浸する。この場合２つの工程に分けて行なうの
が適当で、まず初めにヒドロペルオキシドを安定
剤と一緒にかつ場合により緩衝剤および湿潤剤と
ともに溶剤殊に水／アルコール混合物中で溶解し
この溶液で紙を含侵し、その後で指示薬、活性
剤を含む溶液に含浸して乾燥する。本発明では安
定剤としてアクリルアミド系物質を使用したこと
により乾燥温度を60〜80℃に高めても安定である
ため従来に比べ乾燥時間を早めることができ製造
時間を短縮できしかも試験片の安定性も増すとい
う利点を有している。

以下、本発明を実施例をもつて詳説する。

実施例 １ 紙を下記溶液で順次含浸し、60℃で乾燥す
る。

溶液１ 0.8モルクエン酸緩衝溶液 100ml エチレンジアミン四酢酸ジナトリウム塩
0.2ｇ ジオクチルスルホコハク酸ナトリウム 0.4ｇ アクリルアミド 15ｇ ２，５−ジメチルヘキサン− ２，５−ジヒドロペルオキシド ４ｇ エタノール 50ml 蒸留水 全量200ml 溶液２ ０−トリジン 0.2ｇ ３−メチルイソキノリン 0.2ｇ トルエン 全量100ml 一般的貯蔵で変色しない白色試験片が得られ
る。これは血尿中に浸漬すると15〜20秒後に青〜
緑色に変色する。赤血球が完全である場合には斑
点として着色し、溶血が起こるかまたは最初から
遊離ヘモグロビンとして存在する場合には一様に
着色する。感度は赤血球３〜５個／mm^３であるか
または相応するヘモグロビン量である。

実施例 ２ 実施例１の溶液１のアクリルアミドの代わりに
当モル量のＮ，Ｎ−メチレン−ビスアクリルアミ
ドを用い実施例１と同様に試験片を作成する。感
度、安定性において実施例１とほぼ同程度の特性
を有する試験片が得られる。

実施例 ３ 紙を下記溶液で順次含浸し、80℃で乾燥す
る。

溶液１ 0.8モルクエン酸緩衝溶液 100ml エチレンジアミン四酢酸ジナトリウム塩
0.2ｇ ジオクチルスルホコハク酸ナトリウム 0.4ｇ アクリルアミド 60ｇ ２，５−ジメチルヘキサン− ２，５−ジヒドロペルオキシド 3.2ｇ エタノール 50ml 蒸留水 全量200ml 溶液２ ０−トリジン 0.25ｇ ３−アミノイソキノリン 0.25ｇ トルエン 全量100ml 実施例 ４ 紙を下記の溶液で順次含浸し、80℃で乾燥す
る。

溶液１ 0.8モルクエン酸緩衝溶液 100ml エチレンジアミン四酢酸ジナトリウム塩
0.2ｇ ジオクチルスルホコハク酸ナトリウム 2.0ｇ アクリルアミド 40ｇ ２，５−ジメチルヘキサン− ２，５−ジヒドロペルオキシド 3.2ｇ ポリビニルアルコール ２ｇ エタノール 50ml 蒸留水 全量200ml 溶液２ ０−トリジン 0.25ｇ ３−メチルイソキノリン 0.25ｇ ベンゼン 全量100ml 実施例 ５ 紙を下記の溶液で順次含浸し、80℃で乾燥す
る。

溶液１ 0.8モルクエン酸緩衝溶液 100ml エチレンジアミン四酢酸ジナトリウム塩
0.2ｇ ジオクチルスルホコハク酸ナトリウム ２ｇ Ｎ−（１，１−ジメチル３−オキシブチル）
アクリルアミド 40ｇ ２，５−ジメチルヘキサン− ２，５−ジヒドロペルオキシド 3.2ｇ ゼラチン ２ｇ エタノール 50ml 蒸留水 全量200ml 溶液２ ０−トリジン 0.25ｇ ４−アミノイソキノリン 0.25ｇ ベンゼン 全量100ml 以上実施例３ないし実施例５によつて得られる
試験片は一般的貯蔵で変色しない試験片である。
これらは血尿中に浸漬すると20秒後に青〜緑色に
変色する。

赤血球が完全である場合には、斑点として着色
し、溶血が起こるかまたは最初から遊離ヘモグロ
ビンとして存在する場合には一様に着色する。感
度は赤血球３〜５個／mm^３であるかまたは相応す
るヘモグロビン量である。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １ ヒドロペルオキシドならびに過酸化性作用物
   質の存在で色変化をともなつて酸化される指示薬
   が含浸されてなる担体からなる試験片において、
   担体が安定剤として一般式： （式中R₁は水素、R₂は水素または を表す。）あるいはＮ，Ｎ−メチレン−ビスアク
   リルアミドのいずれかひとつの化合物と、活性剤
   として３−メチルイソキノリン、３−アミノイソ
   キノリン、４−アミノイソキノリンのいずれかひ
   とつを含有することを特徴とする体液または体排
   出物中の過酸化性作用物質検出用試験片。