JPS6232891A - シアノ酢酸の製造方法 - Google Patents
シアノ酢酸の製造方法Info
- Publication number
- JPS6232891A JPS6232891A JP17178485A JP17178485A JPS6232891A JP S6232891 A JPS6232891 A JP S6232891A JP 17178485 A JP17178485 A JP 17178485A JP 17178485 A JP17178485 A JP 17178485A JP S6232891 A JPS6232891 A JP S6232891A
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- JP
- Japan
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- genus
- cyanoacetic acid
- ethylene cyanohydrin
- spp
- acid
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- Granted
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
（産業上の利用分野）
本発明はエチレンシアンヒドリンから微生物を用いるこ
とによりシアン酢酸を製造する方法に関するものである
。
とによりシアン酢酸を製造する方法に関するものである
。
（従来の技術とその問題点）
シアノ酢酸はそのエステル例えばエチルエステルなどと
して接着剤、農薬、医薬などの有機薬品の中間原料とし
て有用な化合物であり、従来工業的にはモノクロル酢酸
をシアン化ソーダを用いてシアン化を行なう化学的合成
法が行なわれている。
して接着剤、農薬、医薬などの有機薬品の中間原料とし
て有用な化合物であり、従来工業的にはモノクロル酢酸
をシアン化ソーダを用いてシアン化を行なう化学的合成
法が行なわれている。
しかしこの方法において、取扱上危険なシアン化ソーダ
を使用しなければならないなどの操作上に大＠な問題点
がある。又、ピチア属、ノカルディア属、プレタノマイ
セス属、コリネバクテリウム属、シュードモナス属、ブ
レビバクテリウム属の微生物を用いてエチレンシアンヒ
ドリンからシアノ酢酸に変換させることはすでに知られ
ているが活性は高くはない。
を使用しなければならないなどの操作上に大＠な問題点
がある。又、ピチア属、ノカルディア属、プレタノマイ
セス属、コリネバクテリウム属、シュードモナス属、ブ
レビバクテリウム属の微生物を用いてエチレンシアンヒ
ドリンからシアノ酢酸に変換させることはすでに知られ
ているが活性は高くはない。
（問題点を解決するための手段）
本発明者らは、この様な従来の製造法に対しより効率の
よい方法を見い出すべく研究した結果、ある種の微生物
に石油化学工業薬品として安価なエチレンシアンヒドリ
ンを酸化してシアン酢酸に変換する能力を有することを
見い出した。従来、アエロバクタ−属、アグロバクテリ
ウム属、アルカルゲネス属、アエロバクター属、バチル
ス属、エンテロバクタ−属、フラボバクテリウム属、マ
イクロコツカス属、プロテウス属、サルシナ属、セラチ
ア属の微生物がエチレンシアンヒドリンをシアノ酢酸に
変換する能力を有することは知られておらず、この発明
はこの知見に基いて更に研究した結果、完成するに至っ
たものである。
よい方法を見い出すべく研究した結果、ある種の微生物
に石油化学工業薬品として安価なエチレンシアンヒドリ
ンを酸化してシアン酢酸に変換する能力を有することを
見い出した。従来、アエロバクタ−属、アグロバクテリ
ウム属、アルカルゲネス属、アエロバクター属、バチル
ス属、エンテロバクタ−属、フラボバクテリウム属、マ
イクロコツカス属、プロテウス属、サルシナ属、セラチ
ア属の微生物がエチレンシアンヒドリンをシアノ酢酸に
変換する能力を有することは知られておらず、この発明
はこの知見に基いて更に研究した結果、完成するに至っ
たものである。
すなわち本発明は水性媒体中にてエチレンシアンヒドリ
ンをシアノ酢酸に変換する能力を有する種々の微生物例
えばアエロバクタ−属、アグロバクテリウム属、アルカ
リ土類金属、アースロバクター属、バチルス属、エンテ
ロバクタ−属、フラボバクテリウム属、マイクロコツカ
ス属、プロテウス属、サルシナ属、セラチア属に属する
微生物の培養液、菌体又は菌体処理物を接触させてシア
ン酢酸に変換させることを特徴とするシアン酢酸の製造
方法である。
ンをシアノ酢酸に変換する能力を有する種々の微生物例
えばアエロバクタ−属、アグロバクテリウム属、アルカ
リ土類金属、アースロバクター属、バチルス属、エンテ
ロバクタ−属、フラボバクテリウム属、マイクロコツカ
ス属、プロテウス属、サルシナ属、セラチア属に属する
微生物の培養液、菌体又は菌体処理物を接触させてシア
ン酢酸に変換させることを特徴とするシアン酢酸の製造
方法である。
本発明の目的のために使用されつる微生物は自然界に存
在する野生株及び公的な微生物保存機関（て保存されて
いる微生物が用いられる。
在する野生株及び公的な微生物保存機関（て保存されて
いる微生物が用いられる。
エチレンシアンヒドリンをシアノ酢酸に変換する能力を
有する微生物の検定としては、例えば次の様な方法を採
用しつる。検定微生物の培養液５ｍｌを採取し遠心分離
によって集菌した後、この集菌菌体を同容量の殺菌した
生理食塩水で洗滌後、エチレンシアンヒドリンｓ ｍｌ
７１ｋ 含ｔｒハソファ溶液（ｐＨ＝７．５）に菌体
を分散させ５２℃、２４時間反応させる。ついで反応液
を遠心分離にて菌体を分離して得た上澄み液を薄層クロ
マトグラフィ（展開液ｎ−ブタノール：酢酸：水＝４：
１：１）又は高速液体クロマトグラフィにてシアノ酢酸
を測定する。
有する微生物の検定としては、例えば次の様な方法を採
用しつる。検定微生物の培養液５ｍｌを採取し遠心分離
によって集菌した後、この集菌菌体を同容量の殺菌した
生理食塩水で洗滌後、エチレンシアンヒドリンｓ ｍｌ
７１ｋ 含ｔｒハソファ溶液（ｐＨ＝７．５）に菌体
を分散させ５２℃、２４時間反応させる。ついで反応液
を遠心分離にて菌体を分離して得た上澄み液を薄層クロ
マトグラフィ（展開液ｎ−ブタノール：酢酸：水＝４：
１：１）又は高速液体クロマトグラフィにてシアノ酢酸
を測定する。
本発明に用いられるアエロバクタ−属、アグロバクテリ
ウム属、アルカリ土類金属、アースロバクター属、バチ
ルス属、エンテロバクタ−属、フラボバクテリウム属、
マイクロコツカス属、グロブウス属、サルシナ属、セラ
チア属に属する微生物は前記の検定に合格したものであ
る。
ウム属、アルカリ土類金属、アースロバクター属、バチ
ルス属、エンテロバクタ−属、フラボバクテリウム属、
マイクロコツカス属、グロブウス属、サルシナ属、セラ
チア属に属する微生物は前記の検定に合格したものであ
る。
本発明の微生物をエチレンシアンヒドリンに作用させる
方法には本発明の微生物の菌体及び菌体処理物を水溶液
中で接触させる方法がある。
方法には本発明の微生物の菌体及び菌体処理物を水溶液
中で接触させる方法がある。
本微生物の培養に用いられる培地は通常資化しうる炭素
源、窒素源及び微生物の生育に必要な無機栄養素を含有
させる通常の培地である。培養条件は好気的条件下にて
ｐＨ＝４〜９、温度２０〜５０℃の適当な範囲に制御し
つつ行なえばよい。
源、窒素源及び微生物の生育に必要な無機栄養素を含有
させる通常の培地である。培養条件は好気的条件下にて
ｐＨ＝４〜９、温度２０〜５０℃の適当な範囲に制御し
つつ行なえばよい。
酵素反応における反応基質の濃度は０１〜５重量％の濃
度で行なうことが可能であり、反応温度及び反応液中の
ｐＨは使用する微生物のエチレンシアンヒドリンからシ
アン酢酸への変換する能力を持つ酵素の至適温度及びｐ
Ｈが採用されるが、反応温度は通常２０〜６０℃の範囲
で、反応液中のｐＨは通常５〜９の範囲にある。
度で行なうことが可能であり、反応温度及び反応液中の
ｐＨは使用する微生物のエチレンシアンヒドリンからシ
アン酢酸への変換する能力を持つ酵素の至適温度及びｐ
Ｈが採用されるが、反応温度は通常２０〜６０℃の範囲
で、反応液中のｐＨは通常５〜９の範囲にある。
生成するシアン酢酸を分離回収するには、通常シアン酢
酸の分離・回収に用いられる任意の手段を用いることが
出来る。
酸の分離・回収に用いられる任意の手段を用いることが
出来る。
例えば培養物または反応液を硫酸酸性にして遊離のシア
ン酢酸とした後、遠心分離また（ζ濾過により菌体など
の不溶物を分離除去する。Ｐ液あるいはその乾燥残査を
有機溶剤、例えば酢酸エチルエステル、メチルエチルケ
トンなどでシアン酢酸を抽出し、抽出液より溶剤を減圧
除去してシアン酢酸を得ることかでさる。
ン酢酸とした後、遠心分離また（ζ濾過により菌体など
の不溶物を分離除去する。Ｐ液あるいはその乾燥残査を
有機溶剤、例えば酢酸エチルエステル、メチルエチルケ
トンなどでシアン酢酸を抽出し、抽出液より溶剤を減圧
除去してシアン酢酸を得ることかでさる。
（発明の作用及び効果）
本発明は微生物を用いることによりエチレンシアンヒド
リンから容易にシアン酢酸を取得出来るので、シアン酢
酸の製造に際し有利な方法である。
リンから容易にシアン酢酸を取得出来るので、シアン酢
酸の製造に際し有利な方法である。
（実施例）
以下の例により本発明を具体的に説明するが本発明はこ
れらの例のみに限定されるものでない。
れらの例のみに限定されるものでない。
実施例−１
グルコース５ｔ７ｔ、ペプトン５？／ｌ、肉エキス５１
ｉＩ／ｌ、 （ＮＨ４）２Ｓｏ、 ３ ｔ／ｌ、
ＫＨ２Ｐ０．１グ／ｌ、 Ｋ２ＨＰ０．１ ？／Ｌ、
Ｍｇ５Ｏ，−７Ｈ２００，５Ｐ／ｌ、 Ｆｅ５０
．−７Ｈ２００，０１？／’Ｌ、 Ｍｎ５Ｏ，・４Ｈ
２０００１グ／１、酵母エキス５２／ｌ、エチレンシア
ンヒドリン０．５９／ｌを含む培地（ｐＨ＝７．０）を
２５０ ｍｅ三角フラスコに２０ｍ１入れ、１２０℃で
１５分間殺菌した。これに、ブイヨン寒天培地で２８℃
２４時間培養した。アルカリゲネス・フェカリス（Ａｌ
ｃａｌｉｇｅｎｅｓ ｆａｅｃａｌｉｓ ） ＡＴＣＣ
−８７５０を１白金耳接種し、２８℃で２４時間培養し
た。この培養液より遠心分離により菌体を採取し、培養
液と同量の殺菌した生理食塩水で１回洗滌し、菌体を集
めた。
ｉＩ／ｌ、 （ＮＨ４）２Ｓｏ、 ３ ｔ／ｌ、
ＫＨ２Ｐ０．１グ／ｌ、 Ｋ２ＨＰ０．１ ？／Ｌ、
Ｍｇ５Ｏ，−７Ｈ２００，５Ｐ／ｌ、 Ｆｅ５０
．−７Ｈ２００，０１？／’Ｌ、 Ｍｎ５Ｏ，・４Ｈ
２０００１グ／１、酵母エキス５２／ｌ、エチレンシア
ンヒドリン０．５９／ｌを含む培地（ｐＨ＝７．０）を
２５０ ｍｅ三角フラスコに２０ｍ１入れ、１２０℃で
１５分間殺菌した。これに、ブイヨン寒天培地で２８℃
２４時間培養した。アルカリゲネス・フェカリス（Ａｌ
ｃａｌｉｇｅｎｅｓ ｆａｅｃａｌｉｓ ） ＡＴＣＣ
−８７５０を１白金耳接種し、２８℃で２４時間培養し
た。この培養液より遠心分離により菌体を採取し、培養
液と同量の殺菌した生理食塩水で１回洗滌し、菌体を集
めた。
この菌体をエチレンシアンヒドリン５？／１ｆｉａむ０
．１Ｍリン酸バッファ（ｐＨ＝７．０）に３０１ｉｌ／
１）Ｉｃなるように添加し、その５ｍｇを３０℃ ４０
時間反応させた。
．１Ｍリン酸バッファ（ｐＨ＝７．０）に３０１ｉｌ／
１）Ｉｃなるように添加し、その５ｍｇを３０℃ ４０
時間反応させた。
生成したシアン酢酸の分析は反応液中の菌体を分離除去
した後、高速液体クロマトグラフィーで定量した。分析
に使用したカラムはＫＣ−８１１（昭和電工製）、検出
計はショーデノクス（昭和電工製）である。分析結果は
表−１に示す。
した後、高速液体クロマトグラフィーで定量した。分析
に使用したカラムはＫＣ−８１１（昭和電工製）、検出
計はショーデノクス（昭和電工製）である。分析結果は
表−１に示す。
表−１
実施例−２
実施例−１と同様に調整した第２衣に示す微生物ヲ、エ
チレンシアンヒドリン５ ？／を含む０１Ｍリン酸バッ
ファ（ｐＨ＝７．０）に３０ ｙ／ＬＶＣなるように添
加し、その５ｍｌを３０℃４０時間反応させた。
チレンシアンヒドリン５ ？／を含む０１Ｍリン酸バッ
ファ（ｐＨ＝７．０）に３０ ｙ／ＬＶＣなるように添
加し、その５ｍｌを３０℃４０時間反応させた。
反応後も実施例−１と同様に分離・精製し、分析した結
果を第２表に示す。
果を第２表に示す。
第２表に例示の微生物はいずれも公知のものであり、保
存機関より容易に入手することが出来る。
存機関より容易に入手することが出来る。
第２表
つ￥２．ム（っ）・・コ）
Claims (1)
- 水性媒体中にてエチレンシアンヒドリンにアエロバクタ
ー（Ａｅｒｏｂａｃｔｅｒ）属、アグロバクテリウム（
Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）属、アルカリゲネス（Ａ
ｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ）属、アースロバクター（Ａｒｔ
ｈ−ｒｏｂａｃｔｅｒ）属、バチルス（Ｂａｃｉｌｌｕ
ｓ）属、エンテロバクター（Ｅｕｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ
）属、フラボバクテリウム（Ｆｌａｖｏｂａｃｔｅｒｉ
ｕｍ）属、クレブシェラ（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ）属、
マイクロコッカス（Ｍｉｃｒｏｃｏｃｃｕｓ）属、プロ
テウス（Ｐｒｏｔｅｕｓ）属、サルシナ（Ｓａｒｃｉｎ
ａ）属、セラチア（Ｓｅｒｒａｔｉａ）属、に属する微
生物の培養液、菌体又は菌体処理物を接触させてシアノ
酢酸に変換させることを特徴とするシアノ酢酸の製造方
法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP17178485A JPS6232891A (ja) | 1985-08-06 | 1985-08-06 | シアノ酢酸の製造方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP17178485A JPS6232891A (ja) | 1985-08-06 | 1985-08-06 | シアノ酢酸の製造方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS6232891A true JPS6232891A (ja) | 1987-02-12 |
| JPH0556953B2 JPH0556953B2 (ja) | 1993-08-20 |
Family
ID=15929618
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP17178485A Granted JPS6232891A (ja) | 1985-08-06 | 1985-08-06 | シアノ酢酸の製造方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS6232891A (ja) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP2998562B1 (en) * | 2013-05-08 | 2018-08-08 | Toyota Jidosha Kabushiki Kaisha | Internal combustion engine with supercharger |
-
1985
- 1985-08-06 JP JP17178485A patent/JPS6232891A/ja active Granted
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0556953B2 (ja) | 1993-08-20 |
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