JPS6229517A - 肝機能改善剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は肝機能改善剤に関する０さらに詳しくは、ドリ
コールおよび／またはそのエステルを有効成分とする肝
機能改善剤に関し、該肝機能改善剤は、副作用が少なく
、毒性も低く、かつ穏やかな生理作用を有するので、と
くに老人や重症疾病患者のごとく体力の低下した人の肝
機能を改善するための治療、処置に有用である０ 従来の技術 近年、老齢化入口の増加に伴い、各株老人病めるいは成
人病が顕在化し、その対策が重要視されている。肝臓の
機能として解毒作用、糖質代謝、蛋白質代謝、脂質代謝
、胆汁・の生成と分泌、ホルモンの調節、血液凝固作用
物質プロトロンビンの生成、肝細胞の再生、各種生体構
成要素（脂肪、グリ？ゲン、蛋白質、ビタミンなど）の
貯蔵などが知られているが、これらの機能も老齢化に伴
い次第に低下し、ま念アルコール、栄養不良、ウィルス
、薬物、毒物、胆管閉墓、肝循環系の障害など種々の因
子によって急性的又は慢性的に障害を受けることがあり
、それは脂肪肝、薬物中毒性肝臓疾患、アルコール性肝
炎、ウィルス肝炎、うつ崩肝、胆汁うつ滞による肝障害
、黄痘、それらの終末像としての肝硬変などの病気とし
て現われる。

しかしながら、これら肝臓疾患の発生機構は充分には解
明されていない。

従来、肝臓疾患の治療剤としてプトレシン又はジイソプ
ロピル　１．３−ジチオール−２−イリデン　マロネー
ト（一般名：マロチレート、商品名；カンチック）、ジ
イソプロピル　１．３−ジチェタン−２−イリデン　マ
ロネートなどのマロン酸エステルなどが有用であると報
告されている（％公昭５６−１８５７８号公報、＠公昭
５６−１８５７９号公報１％公昭５８−５１６８号公報
など参照）。

−万、１９６０年にＪ、　Ｆ、Ｐｅｎｎｏｃｋらに！　
ツテにニドの腎ｓ、ブタの肝臓々どから初めてドリコー
ルが単離され（Ｎａｔｕｒｅ　（Ｌｏｎｄｏｎ　）　、
　　１８６．４７０（１９６０）参照〕、のちに該ドリ
コールは一般式％式％ （式中、　　−ＣＨｚ−Ｃ＝Ｃ−ＣＨ２−はトランス−
イソブレ単位を表わす。本明細書において以下同様。）
で示される構造を持つポリブレノール同族体の混合物で
あって、上記式中のシス−イソプレン単位の数（ｎ）は
一般［１２から１８まで分布し、ｎ＝１４、ｎ＝１５お
よびｎ＝１６の３種の同族体が主体となっていることが
明らかにされ穴〔分子構造に関してはＪ、Ｂｕｒｇｏａ
ら、Ｂｉｏｃｈｅｍ、　Ｊｏｕｒｎａｌ、　８ｇ。

４７０（１９６３）、同族体分布に関してＦｉｇ、ｗ。

Ｋｅｅｎａｎ　ラ、　　Ｂｉｏｃｈｅｍ、Ｊｏｕｒｎａ
ｌ、　１６５　＋　４０５（１９７７）を参照のこと〕
。

ドリコールはヒトの腎臓、ブタの肝臓などに限らず、唾
乳動物体内に広く分布しており、生体の生命維持のうえ
で極めて重要な機能を果していることが知られている。

とくに、糖蛋白合成における糖鎖形成に対して重要々役
割を担っており、例えはＷ、　Ｊ　、　Ｌｅｎｎａｒｚ
らはウニの細胞が分化して腸胚形成を始めるに際して細
胞内でのドリコールの合成能力が尤進し、細胞内ドリコ
ール含量が著しく増大することを紹めている。また、こ
のとき細胞培養系にコンパクチンを加えてドリコールの
生合成を阻害すると上記分化が達成されないことと併せ
て、ウニの細胞が腸胚形成分化を行うに際してドリコー
ルの存在が密接に関係していることを示唆しｚ　（Ｐｒ
ｏｃ、　Ｎａｔｉｏｎａｌ　Ａｃａｄｅｍｙ　ｏｆ　５
ｃｉｅｎｃｅ、　Ｕ。

Ｓ、Ａ９．７６、５７０９（１９７９）およびＪ、　Ｂ
ｉｏｌｏｇｉｃａｌＣｈａｍｉｓｔｒｙ、　２５６．４
６７９（１９８１）参照〕０　さらに、Ｓ　、Ｓ　、　
Ｍｏｏｋｅｒｊｅａらはラットノ皮下ニターヘンテンを
接種してその部位に炎症を生せしめたときに、ラットの
肝臓での糖蛋白合成が活発化し、同時に肝臓でのドリコ
ール類の合成能力が著しく増強されることを認め、ドリ
コール類が肝臓での糖蛋白合成と密接な関係を有するこ
とを示唆しく　Ｊ。

Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、　２５６
．４５２９　（１９８１）参照〕、また赤松らはマウス
の再生肝中のドリコール類を定量し、その量が通常の肝
中よりも著しく減少しており、肝組織での糖蛋白の合成
能が低下していること、および外因性ドリコール類を加
えると糖蛋白の合成能が改善されることをｉｎ　ｖｉｔ
ｒ。

試験で見い出し、ドリコール類が肝臓での糖蛋白合成と
密接な関係を有することを示唆した〔日本生化学会１９
８１年学会にて発表〕。

しかしながら、ドリコールの入手に関しては、これまで
動物臓器からの抽出による方法しか手段がなかったため
、多量のドリコールを確保することは至難の技であり、
従ってドリコールの薬理効果など、ドリコールを生体内
へ投与したときの効果は殆ど検討されておらず、前述の
肝臓の機能にどのような影響を与えるかについては全く
検討きれていなかった。

発明が解決しようとする問題点 現在、肝臓疾患治療剤として使用されている上記のマロ
チレートは、各棟の誘発肝臓障害モデルにおける数樵の
肝機能を有効に改善するものであるが、後述の試験例の
結果から明らかなように。

例えばＤ−ガラクトブミンにより誘発される肝臓障害に
伴って発生する血中でのビリルビンの増加を抑制する作
用を有していない。臨床例からも。

肝障害には数多くの病因や症状が見出されており。

それらの病因や症状に対してそれぞれ有効な肝臓疾患治
療剤がその臨床的見地から切望されているが、現在のと
ころ、かかる観点からの有効な化合物は少ない。

前述のとおりｍ々の因子によって障害を受け。

機能低下した肝臓を蘇生させるために、またとくに老人
や重症疾病患者の肝臓機能を改善さぜる六めに￥Ｓｔ、
副作用が少なく、毒性が低く、かつ穏かな肝機能改善作
用を有する薬剤が必要であり、かかる薬剤の開発が望ま
れているのが現状である。

しかして、本発明の目的は、副作用が少なく。

毒性が低く、かつ穏かな肝機能改善作用を有する薬剤を
提供することにある。

問題点を解決するための手段 本発明によれば、上記目的は、一般式 （式中、ｎは１２〜１８の整数を表わす）で示される化
合物および／ま次はその薬理学的に許容されるエステル
を有効成分として含有する肝機能改善剤を提供すること
によって達成される〇−一般式１）で示される化合物（
すなわちドリコール）は前述のととく哨乳動物の臓器か
ら抽出することにより得ることができ（例えば、　Ｊ、
ＢｕｒＨｏｓｔ、）、　　Ｂｉｏｃｈｅｍ、　Ｊｏｕｒ
ｎａｌ、　８８．４７０（１９６３）　；　　Ｒ，−Ｗ
、　Ｋｅｅｎａｎら、　　Ｂｉｏｃｈｅｍ、　Ｊｏｕｒ
ｎａｌ　、　　１６５　＊　　４０５（１９７７）等参
照〕、また。米国Ｓｉｇｍａ社から市販されており入手
可能であるが、好ましくは本発明者の一人とその共同研
究者らによって先−に見い出された例えば特開昭５８−
８３６４３号公報に記載の方法に従い、イテヨウ（Ｇｆ
ｎｋｇｏ　　ｂｉｌｏｂａ）　、　ヒ−ｖう、ヤスキ（
Ｃｅｄｒｕｓ　　ｄｅｏｄａｒａ　）などの植物の葉カ
ラ抽出されるポリプレニル画分を０５伸長することによ
シ多量かつ純粋に合成することもできる０　ドリコール
は哺乳動物体内ではｎＯ値に関して１２から１８１で分
布して存在するが１本発明において一般式（１）で示さ
れる化合物を有効成分として用いる場合、該化合物は生
体内におけるとほぼ同様の分布を有する混合物として、
または２ｍもしくはそれ以上の任意の割合の混合物とし
て使用することができ、あるいはざらに必要に応じて１
分子量ごとに単離して使用することも可能である。分子
量ごとの単品への分離は例えば上記特開昭５８−８３６
４３号公報に記載されているようにシリカゲルカラムク
ロマトグラフィーによって行うことができる。

一般式（１）で示される化合物の薬理学的に許容される
エステル類としては１例えは、酢酸、プロピオン酸など
の低級脂肪酸のエステル；バルミチン酸、オレイン酸な
どの高級脂肪酸のエステル；リン酸、モノマンノシルホ
スフェードなどのエステルなどが挙げられる。これらの
エステル類の合成は従来から知られている高級アルコー
ルをエステル化するそれ自体公知の方法に準じて実施す
るコトカテきる〔例えばり、　Ｌ、　Ｄａｎｉｌｏｖ　
ａｎｄ　　’ｊＣｈｏｊｎａｃｋｉ、　Ｆｅｂｓ　Ｌｅ
ｔｔｅｒｓ、　１３Ｌ　３１０　（１９８１）　；特開
昭５８−８３６４３号公報；特開昭５９−６２５９９号
公報など参照〕０例えば、ドリコールをヘキサン溶媒中
ピリジンの存在下に無水酢酸と反応させることにより容
易にドリコールの酢酸エステルを得ることができる。

前記一般式（１）で示される化合物およびその薬理学的
に許容されるエステル類（以下特にことわらない限υこ
れらを「ドリコール類」と総称する）はヒトま念は動物
の肝機能を高める作用がロシ、ヒトまｆｃは動物の肝機
能を改善する薬剤として有用である。

一般に肝機能の検査は血清中のグルタミン酸オキザロ酢
酸トランスアミナーゼ（ＧＯＴ）、グルタミン酸ピルビ
ン酸トランスアミナーゼ（ＧＰＴ）。

乳酸デヒドロゲナーゼ（ＬＤＨ）およびコリンエステラ
ーゼ（ＣｈＥ　）などの酵素活性を測定することにより
行うことができる。血清中のＧＯＴ、ＧＰＴおよびＬＤ
ＩＥｉの酵素活性は肝臓に障害が生じ。

その機能が低下した際に上昇する。これは正常な肝臓に
おいては肝細胞内に存在している上記の酵素が肝臓障害
の進行とともに血中に逸脱することによる。また、Ｃｈ
Ｅの酵素活性は肝臓障害時に低下する。これらの酵素活
性値を測定する以外に血中の総ビリルビン量ヲ測ること
によっても肝機能を検査することができる。ビリルビン
はヘムから誘導された最終伏線産物であり、正常な肝臓
においてはビリルビンはグルクロン酸、グルコース。

キシロースなどと抱合したのち、胆汁中に排泄される。

うっ血肝、肝硬変などの肝臓障害時には、ビリルビンの
胆汁中への排泄が抑制される結果、一度細胆管に分泌さ
れたビリルビンが流血中に逆流するため、血中総ビリル
ビン量が増加する。

ドリコール類による崩中総ビリルビン量の増加を抑制す
る作用は以下に述べるｉｎ　ｖｉｖｏ試験によって立証
することができる。

試験例 Ｄ−ガラクトサミン（以下、これをＧａｌと略記する）
訪発肝障害に対するドリコールの作用をラットを用いて
検討した。対照化合物としてマロチレートを用いた。

１、試料の調製 後述の参考例７に従って調製したドリコール含有リボン
ームに所定量の注射用生理食塩水を加え、水冷下に超音
派砕器で十分に懸濁させ、ドリコール濃度が６．７　Ｑ
／ゴおよび２０　ｍ９／ｒｎｌの２種の試料を調製した
。マロチレートはオリーブ油に溶解して１０　Ｑ／Ｉｌ
ｌの試料とした。また、　Ｇａｌは生理食塩水に溶解し
て５０　ｍ９／ｒｎｌの試料とした。

２、試験材料 〔１〕　　供試動物および群の構成 静岡系実験動物農業協同組合よシ購入゛したＳｐｒａｇ
ｕｅ　Ｄａｗｌｅｙ系雄性ラット（ＳＰＦ、７週齢。

２３０１前後）を１週間予備飼育し、健常なものを試験
に供した。

使用時に動物（１８時間絶食後体重：２３６〜２７６Ｆ
）をランダムに１群９匹とし、下記に示した４群を設定
した。

（＋）　　コントロール群 後述の実施例７においてドリコールを除いた他は同じ操
作により得られたレシチンのみ力・ら成るリボソームの
所定量を投与する群。

（１１）　　ドリコール５９１１９／１ｑの試料投与群
ドリコールを６．７１１１７ｍ１含有するリボンーム懸
濁液の所定量を投与する群。

（ｉｉ＋）　　ドリコールｌ　５０　ＪＩ９／ｋｆの試
料投与群ドリコールを２０１１９／ｒａｔ含有するリボ
ンーム懸濁液の所定量を投与する群。

（１ψ　対照群 マロテレートｌ　００　ｍｇ／輪投与群。

なお、飼育は温度２３±１℃、湿度５０±５俤の恒温恒
湿とし、換気回数５回／時、午前７時点灯、午後７時消
灯の粂件下で固型飼料（オリエンタル酵母、ＭＦ）と水
通水を自由に摂取させた。また、実験は同一室内で実施
した。

〔２〕　　試薬および器具 Ｇａｌの塩酸塩は和光純薬株式会社製の生化学用を、注
射用生理食塩液は大塚製薬株式会社製を用いた。

超音波破砕器を用いて試料液を調製し、冷却遠心器（久
保田商事株式会社、ＫＰ−７０２型）を用いて血清を分
離した。

３、試験方法 （１）方法 コントロール群および試料投与群では、試料懸濁液をラ
ット体重１００ｆ当、？０．７５−の割合で試験実施０
，４．１０および２４時間目に合計４回腹腔内投与し、
対照群ではマロチレートのオリーブ油溶液を体重１００
ｇ当り１．　Ｏ＊１の割合で同様Ｏ時間目に１口軽口投
与した。

肝障害誘発剤Ｇａｌけ、２５０シ〜（ラット体ｆｆ１ｌ
ｏｏｒ当り０．５　ｒｔｔｌの割合）で試験実Ｍ４．１
０．２４時間目に合計３回背部皮下に投与した０ 試験実施２８時間目に、エーテル軽麻酔下で頚動脈を切
断して全採血を行い、以下常法にょシ血清を採取した。

なお、採血後の全操作は４℃で実施した。

（２）血清生化学的検査および解析方法血清中の総ビリ
ルビン（これをＢＩＬと略記する）量を安定化ジアゾニ
ウム塩法により測定した。

各動物毎の検査値について、群毎に平均値士様準誤差を
求め、コントロール群との有意差検定を常法に従いｔ−
検定に工り行い、同時にコントロール群に対する抑制率
を求め、併せて示した。

４、結果 試験結果は群毎のラットの血清中の総Ｂ　Ｉ　Ｌｉを平
均値上標準誤差として表−１に示し、またこれらの総１
３ＩＬｉをコントロール群との有意差検定および抑制率
として表−１に併記した〇＊　ｐ＜０．１　　　＊＊＜
０．０５ Ｇａｌは２肝のウリジンニリン酸（ＵＤＰ　）−グルコ
ースの減少とそれに続く肝グリコーゲンの減少、ざらに
ＲＮ’Ａ合成能および蛋白質合成能の低下を惹起するこ
とが知られている（　Ｄ、　Ｋｅｐｐｌｅｒら。

Ｅｕｒｏｐｅａｎ　Ｊ、Ｂｉｏｃｈｅｍ、、　ｌＯ＋　
２１９（１９６７）参照〕０その結果として、肝実質細
胞の壊死および炎症性変化を伴う広範な肝障害が生起す
る。一方、ビリルビンは前述のとおシヘムから誘導され
る最終代謝産物であり、肝において酵素の作用によりグ
ルクロン酸、グルコースキシロースなどト抱合しマイク
ロビリ（ｍ１ｃｒｏｖｉｌｌｉ）を経て胆管から胆汁へ
排泄される（　Ｊ、　Ｓ、　Ｊｕｇｇｉら、　　Ｂｉｏ
ｃｈｅｍｏＭｅｄ、、”旦。

２８５（１９７８）参照〕。従って、胆管の炎症および
胆汁うつ滞により胆汁の排泄が抑制されると血中濃度が
上昇し、高ビリルビン血症を引き起こす。

Ｇａｌ投与群では無処置に比べ有意に血中の総ＢＩＬ量
が増加しており、上記の試験系においては肝機能に障害
の生じていることが明らかである。

一方、Ｇａｌと共にドリコールを投与した群では。

５０〜１５０　Ｑ／１ｗの用量範囲で用量依存的に血中
ｍＢＩＬ量の有意な抑制が認められ、ドリコールが肝機
能障害に対して緩かな治療効果を有することが示された
。

また、ドリコール類は副作用が極めて少なく。

かつ毒性も低いので薬剤として極めて有利である。

この副作用のないことは後述の参考例１で合成したドリ
コールを用いた以下の実験によシ確認することができる
。

なお、使用薬物は水に不溶な油状の液体であるため、実
験においては、経口投与の場合にはゴマ油に溶解し、腹
腔内投与およびｉｎ　ｖｉｔｒｏの場合は非イオン界面
活性剤であるＨＣＯ−６０（日光ケミカル社　商品名）
を用いて、懸濁液として使用した。

また、本実験には、ｄｄＹ系雄性マウス、Ｗｉｓｔａｒ
系雄性ラット（静岡実験動物）１日本臼色雄性ウサギ（
ケアリー）およびＨａｒｔｌｅｙ系雄性モルモット（日
本タレア）を使用した。動物は温度２３±ｌ″Ｃ１湿度
５５±ｉｏ％、照明時間（７：００ＡＭ〜９　：　００
ＰＭ）、換気回数１５回／時間の条件下で飼育し、餌は
マウス、ラットの場合。

固型飼料ＭＦ（オリエンタル酵母）を１モルモットおよ
びウサギの場合は固型飼料ＧＭ−３およびＲＭ−１（船
橋農場）を、水は水道水を自由摂取させた。なお、動物
は一週間以上予備飼育し、−膜状態の健康なものを使用
した。

（１）　　マウスを用いた神経薬理学的試験ｄｄＹ系雄
性マウスを１群６匹として使用し。

Ｉｒｗｉｎの多次元観察力に準じてマウスのｂｅｈａｖ
ｉｏｒの変化、神経症状、自律神経症状および中毒症状
などを多角的に観察分析し記録した。ドリコールを１５
０．３００，６００　ｍｙ／ｋｙ腹腔内投与した。

ドリコールの１５０．３００．６００１ｇ／吻投与では
、マウスの行動、神経症状、自律神経症状および中毒症
状などに全く影響は認められなかつｆＣ。

（２）摘出臓器を用いた末梢作用試験 １　モルモット摘出回腸標本 Ｈａｒｔｌｅｙ系雄性％にモット（３５０〜４０（１）
を１群３匹として使用した。摘出した回腸を空気を通じ
たＴｙｒｏｄｅ液（液温３２℃）中に懸垂した。

回腸の収縮はアイソトニック・トランスジュウサ−（日
本光電ＴＤ−１１２８）を介して、インク書オシログラ
フ（日本光電ＥＭＰ−３００４）にて記録した。ドリコ
ールの１０　．１０　　、　１ｏ−４ｔμにおける直接
作用およびアセチルコリン、ヒスタミン、ニコチンに対
する拮抗作用の有無を検討した。

ドリコールは１０ｒ／ｙまでモルモット摘出回腸標本に
対して直接作用および各アゴニストに対する拮抗作用は
認められなかった。

１１　　ラット摘出輸精管標本 Ｗｉｓｔａｒ系雄性ラット（１８０〜２００？）を１群
３匹として使用した。摘出した輸精管を空気を通じたＬ
ｏｃｋｅ　−Ｒｉｎｇｅｒ液（液温３２℃）中に懸垂し
た。輸精管の収縮は前項と同様の方法で記録しｆｔｏ　
トリ：Ｉ−ル（２）１０　　、　１０　　、　１０　　
ｆ／ｒｌｌニオける直接作用およびノルアドレナリンに
対する拮抗作用の有無を検討した。

ドリコールは１０２／Ｉｎｌまでラット摘出輸精管標本
に対して直接作用およびノルアドレナリンに対する拮抗
作用は認められなかった０ １１　　モルモット摘出心房標本 Ｈａｒｔｌｅｙ系雄性モルモット（３５ｏ　〜＋ｏｏｒ
　）を１群３匹として使用した。左右両心房からなる心
房標本を作成し、９５％０２＋５％ＣＯ２の混合ガスを
通じたＫｒｅｂｓ　−Ｈｅｎ５ｅｌｅｉｔ液（液温３０
℃）中に懸垂した。心房の収縮はＦＤピックアップ（日
本光ｔＴＢ−６１１Ｔ）を介して、インク書オシログラ
フ（日本光［ＥＭＰ−３００４）にて記録した。ドリコ
ールの１０　、１０　、１０　　ｔ／ｒｎｌ投与におけ
る変力作用および変時作用を検討したδドリコールはｌ
Ｏｆ／ａ／″１でモルモット摘出心房標本に対して変力
作用および変時作用は認められなかった。

ｉｖ　　モルモット摘出気管標本 Ｈａｒｔｌｅｙ系雄性−Ｅ−ルモット（３５０〜４００
　ｆ　）を１群３匹として使用した。摘出し穴気管を空
気を通じ−ｐ　Ｌｏｃｋｅ　−Ｒｉｎｇｅｒ　Ｗ　（液
温３７℃）中に懸垂し次。気管の収縮は摘出回腸の項と
同様の方法で記録した。ドリコールの１０　、　１０　
　、　１０−’１舅投与における直接作用およびイソプ
ロテレノールに対する拮抗作用の有無を検討した〇ドリ
コールは１０９／１ｔｉｌまでモルモット摘出気管標本
に対して直接作用およびインプロテレノールに対する拮
抗作用は認められなかった。

（８）　　ラットにおける血液凝固系におよぼす影響Ｗ
ｉｓｔａｒ系雄性ラット（１８０〜２１０　？）を１群
６匹として使用した。ドリコールの投与後２時間に腹部
大静脈から採崩し、　Ｑｕｉｃｋ−膜性にてプロトロン
ビン時間を測定した。

ドリコールの１５０．３００．６００寞ｇ／橡投与群で
は対照群と比較して延長する傾向がみられたが、有意差
は認められなかった。

（４）　ラットにおける崩糖値低下作用Ｗｉｓｔａｒ系
雄性ラット（１８０〜２１０２）を１群６匹として使用
した。ドリコールの投与後２時間に腹部大静脈から採血
し、グルコ−２・オキシダーゼ法にて血糖値を測定した
。

ドリコールの１５０．３００．６００１１ｇ／ｋｑ投与
群では対照群と比較して有意差は認められなかった。

（５）　　ラットにおける利尿作用 Ｗｉａｔａｒ系雄性ラット（ｓｏ　〜９ｏｂ）を１群６
匹として使用した。ドリコール投与直後に生理食塩水を
２．５ｍｌ／　１００　ｆ経口投与し、１匹ずつ代謝ケ
ージに入れ、検体投与後６時間に尿を採取し。

その尿量を測定した。

ドリコールの１５０．３００．６００Ｊ１ｇ／橡投与群
では対照群と比較して有意差は認められなかった。

（６）　　マウスにおける鎮痛作用（酢酸ｗｒｉｔｈｉ
ｎｇ法）ｄｄＹ系雄性マウス（２７〜３０２）を１群６
匹として使用した。ドリコール投与後１時間にマウスに
０．６％酢酸を０．１ｄ／１０Ｆ腹腔内投与し、その１
０分後から１０分間観察し、酢酸ｗｒｉｔｈｉｎｇに対
する抑制作用を検討した。

ドリコールの１５０．３００．６００２ｇ／ｋｆ投与群
では対照群と比較して有意差は認められなかった。

（γ）　マウスにおけるレセルピン拮抗作用ｄｄＹ系雄
性マウス（２７〜３０ｖ）を１群６匹トシて使用した。

レセルピン４　ｍｙ／４を腹腔内投与し、その３時間後
にドリコールを投与し、さらに１時間後におけるマウス
の眼瞼下垂の程度をＲｕｂｉｎの判定基準（０：正常な
目の開き、１：１／４眼瞼下垂、２：１／２眼瞼下垂、
３　：　３／４眼瞼下垂、４：完全な眼瞼下垂）に従っ
て観察記録した。

ドリコールの１５０．３００．６００〜／ｋｆ投与群で
は対照群と比較してレセルピン訪発による眼瞼下垂に対
する拮抗作用は認められなかった。

（８）マウスにおける抗痙景作用（最大電撃前景作用） ｄｄＹ系雄性マウス（２７〜３０？）を１群６匹として
使用した。ドリコール投与後１時間にマウ／ｌ）角膜に
４　Ｑ　ｍＡ、　Ｑ、４ｍ５ｅｃ、　５９Ｈｚ、Ｑ、５
ｓｅｃ　Ｏ：）条件で通電を行い、強直性伸展症ＩＩ　
（Ｔ、Ｅ、）の持続時間を測定した。

ドリコールの１５０，３００．６００η／助投与群では
対照群と比較して有意差は認められなかった。

（９）モルモットにおける局所麻酔作用Ｈａｒｔｌｅｙ
系雄性モ／ｌ／モット（３７０〜４４０ｆ）を１群３匹
として使用した。ドリコールの各濃度（０，００１％、
０．０１％、０，１％）を点眼し、投与前、投与後１．
２．３，４．５，１０，１５．２０分に刺激毛による角
膜反射の有無を観察した。

ドリコール類０．１％までモルモットにおいて、角膜反
射の消失はみられず、局所麻酔作用は認められなかつ六
。

〔急性毒性〕

（１）後記参考例１で合成したドリコールを経口投与の
場合にはゴマ油に溶解し九液を、腹腔内投与の場合には
非イオン活性剤であるＨＣＯ−６０（日光ケミカル社１
ｉｔ）を用いて懸濁液として使用した。

ｄｄＹ系マウス（２１〜２７ｖ１雄）を一群６匹として
使用した。経口投与の場合には５．０００■／−、腹腔
内投与の場合には１．０００　ｒＩＩｆ／ｋｔマウスに
それぞれ投与し、中毒症状、生死の有無を投与後７日目
まで観察した。体重は投与前、投与１日目および７日目
に測定した。また、対照群にはそれぞれの溶媒であるゴ
マ油およびＨＣＯ−６０を投与し、検体投与群と同様の
観察および測定を行った。投与７日目に全動物を解剖し
、肉眼的観察を行った。

金側において死亡例はなく、体重変化についても対照群
と比較して有意差は認められなかった。

投与７日目の解剖所見においても異常を認めたものはな
かった。

（２）後記参考例３で合成したドリコールリン酸を同量
のゴマ油にて溶解した後、１チーカルボキシメチルセル
ロースナトリウム水溶液中にドリコールリン酸が５４ｗ
／ｖの濃度となるようにして加え分散乳液化して用いた
。

ＢＤＦｒ系マウス（２０〜２３１、雌）を一群６匹とし
て使用した。ドリコールリン酸を１，０００■／梅およ
び２，０００η／　ｋｐの投与量で腹腔内投与し、投与
後２日目に生死の有無を観察した。金側において死亡例
はなかった。

以上に述べたとおり、ドリコール類は優れた肝機能改善
作用を有するのみならず、副作用も少なくかつ毒性も低
く、肝機能改善のための薬剤として有用である。

ドリコール類を上記の如き疾病に使用するに際して、そ
の投与量は、投与の方法、投与すべき患者の症状、体重
、年令、性別、治療処置にあたる医師の判断等に応じて
広範にわたシ変えることができるが、一般には０．０５
Ｗ／陽／日〜１，０００岬／吟／日、好ましくは０．１
η／にり／日〜１００岬／呻／日、さらに好ましくは０
．２■／神／日〜５０■／珍／日の範囲とすることがで
き、この投与量を１日１回または数回に分けて投与する
ことができる。

投与の方法は経口または非経口のいずれの方法であって
もよく、非経口投与法としては静脈内、動脈内などの血
管内投与、筋肉内投与、腹腔内投与、骨髄内投与、直腸
投与などの方法を用いることができる。

ドリコール類は上記投与方法に適しだ剤型、例えば、錠
剤、顆粒剤、粉末剤、コーテング剤、硬カプセル剤、軟
カプセル剤、経口用液体製剤などの種々の網形の経口投
与に適した形態であることができる。さらに１例えば懸
濁液剤、溶液剤、油性もしくは水性乳液剤などの注射投
与に適した網形であることができる。

ドリコール類は、種々の製薬的に許容し得る液体もしく
は固体の稀釈剤もしくは担体を含有することができる。

このような稀釈剤屯しくは担体の例としては、例えばシ
ロップ、アラビアゴム、ゼラチン、ソルビット、トラガ
カント、ポリビニルピロリドン、ステアリン酸マグネシ
ウム、タルク、ポリエチレングリコール、シリカ、乳糖
、砂糖、とうもろこし殿粉、リン酸カルシウム、グリシ
ン、馬鈴薯殿ｙ、カルボキシメチルセルロースカルシウ
ム、ラウリル硫酸ナトリウム、水、エタノール、グリセ
リン、マンニトール、リン酸緩衝液などを例示すること
ができる。

本発明の肝機能改善剤は上記例示の如き製薬的に許容し
得る稀釈剤もしくは担体の他に、調剤分野において慣用
の他の補助剤、例えば着色剤、矯臭剤、矯味剤、防腐剤
、溶解補助剤、懸濁化剤、分散剤などの如き他の補助剤
を、さらに含有することができる。

本発明の肝機能改善剤は前記例示の如き錠剤、カプセル
剤、コーテング剤、アンプル剤などの如き一定量投与形
態の網形であるほかに、多投４量容器に収容した形態で
あることができる。

実施例 以下、参考例および実施例により本発明をさらに説明す
る。

参考例１ 特開昭５８−８３６４３号公報に記された方法に準じて
合成した。１１月に倉敷市内で採取した黄葉した銀杏の
葉１ｏｏＫｆ（未乾燥１Ｘ量）を約４０℃で１０時間熱
風乾燥１−念のち、室温（約１５℃）でクロロホルム５
ｏｏｔ中に浸漬して１週間抽出した。この抽出液からク
ロロホルムを留去して得た濃縮物中にヘキサン５０ｔを
加えて不溶性成分を戸別し、Ｆ液を濃縮後、ヘキサン／
酢酸エチル混合液を展開溶剤として用いたシリカゲルカ
ラムクロマトグラフィーにより、ヘキサン／酢酸エチル
＝９／１（容量比）の混合液を用いたシリカゲル薄層ク
ロマトグラフィー（メルク社ｆｉＴＬｃｐｌａｔｅ　５
ｉｌｉｃａ　５　Ｑ　Ｆ２５４、ｐｒｅｃｏａｔｅａ、
層厚０．２５ｆｉを使用して１０ｃＩＭ展開）番ておい
てＲｆ＝０．５２となルフラクションを分離して約２７
５Ｆの液状物を得た。

このものをメタノール２１．水２００ｍ＋７および水酸
化カリウム１５０ｆと共に２時間６５℃に加熱したのち
へキチン２ｔを加えて有機層を抽出し、水で５回水洗し
たあと無水硫酸マグネシウムで乾燥し、溶剤を留去して
得た液状物をヘキサン／酢酸エチル混合液を展開溶剤と
して用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより
精製して、約２２７２のポリプレノールを得意。次いで
、このものをピリジン２５ｆおよび無水酢酸５０？と共
に５ｔのヘキサンに溶解し、室温で１２時間撹拌した。

得られた反応混合物を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マ
グネシウムで乾燥し之のち濃縮して２２８ｔのポリプレ
ニルアセテートを得之。

アルゴン置換した三つロフラスコにマグネシウム細片（
３，１６ｆ、　　１３０　ｍｍｏｌ　　）と無水テトラ
ヒドロフラン（５１１１）および１，２−ジブロモエタ
ン（０，８４）を入れ、これをドライヤーで激しく泡立
つまで加熱した。次に（Ｒ）−２−Ｃ４−プロモー３−
メチルブトキシツーテトラヒドロ−２Ｈ−ビラン（２ｓ
、　１　ｙ、１００　ｍｍｏｌ、　（α）甘＝−３，６
１’、Ｃ＝４．０、ＣＨＣｌ３）の無水テトラヒドロフ
ラン（３゜ｄ）溶液を、この活性化されたマグネシウム
に溶媒が丁度沸騰するような速さで滴下した。滴下終了
後との混合物を７０℃にて１５分間攪拌した０これに無
水テトラヒドロフラン（６００ｔＪ）を加えてグリニア
ール溶液とした。

別にアルゴン置換した三つロフラスコに先に１作成した
ポリプレニルアセテ−）（６４，２ｆ、５０ｍｍｏｌ）
の無水テトラヒドロフラン（１ｓ　ｏｙ）溶液とＬｉｚ
ＣｕＣｌ＜の無水テトラヒトミフラン溶液（０，１モル
溶液、２００　ｙｔｌ　）を入れた０これに先にｇ４１
！！ｌｌしたグＩＪ　二アール溶液を０℃で４時間かけ
て滴下し、さらに０℃で４時間反応を続けた。そののち
、この反応混合物に飽和塩化アンモニウム水を加えて加
水分解し、エーテル抽出した。エーテル層を飽和食塩水
で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥したのち回転蒸
発器を用いて溶媒留去して淡黄色液状物を得意。次いで
、このものをヘキサン（４００ｍ）に啓かし、これにｐ
−）ルエンスルホン酸ピリジン（１，３ｆ、　　５ｍｍ
ｏｌ　）とエタノール（２０ｏｔｇ）を加えた。この溶
液を５５℃で３時間加熱攪拌した。電源に冷却後、炭酸
ナトリウム（２，５Ｆ）を加えて中和し、飽和食塩水で
洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、溶媒を留去し
た。残った液状物を０．５　Ｔｏｒｒ、　１５０℃で３
０分間加熱して低沸成分を除去し、残渣をヘキサン／酢
酸エチル混合液を展開液としたシリカゲルカラムクロマ
トグラフィーによシ精製して５６．８Ｆの無色透明な液
状物を得た。このものはＩＲおよびＮＭＲ分析により先
述の一般式（Ｉ）で示されるドリコールでるることが確
認された。このドリコールについてμｍＢｏｎｄａｐａ
ｋ−Ｃｔｓ　（Ｃｔｓ　Ｏ炭化水素系化合物で表面処理
されたシリカゲル）を充填剤とし、アセトン／メタノー
ル＝　９０／１０（容量比）を展開液とし、示差屈折計
を検出器として用いた高速液体クロマトグラフィーによ
り得られたクロマトグラムにおける各ピークの面積比率
を求め、一般式（１）におけるｎの値に関する含量比と
し、以下に記すＯ ｎ冨１２　　　　　１．２チ １３　　　　　６．７ １４　　　　　　　　２４．６ １５　　　　　　　　４０．４ １６　　　　　　　　２０．０ １７　　　　　　　　　　５．９ １８　　　　　　　　　　１．２ 参考例２ 参考例１の方法により合成した一般式（１）においてｎ
＝１２から１８までに分布するドリコール１０２をメル
ク社製セミ分取用高速液体クロマトカラム（Ｃ１８タイ
プ）ＲＰ１８−１０を用い、アセトン／メタノール＝９
０７’１０（容量比）の混合溶剤を展開液として用いて
ｎの値ごとの各成分に分離し以下のものを得之。

ｎ−１２０，Ｉ　　Ｐ １３　　　　　　　　０．６５ １４　　　　　　　　　２．６ １５　　　　４．０ １６　　　　１．９ １７　　　　　　　　０．６ １８　　　　０．１ これらの分離物は全て’Ｈ−ＮＭＲ，１３Ｃ−ＮＭＲお
よびＦＤ−ＭＡＳＳ分析の結果により、一般式（１）に
おいてｎの値がそれぞれ１２から１８にめたる化学構造
を有することが確認され念。

参考例３（リン酸エステル化） Ｌ、　Ｌ、　Ｄａｎｌｌｏｕらの方法（Ｆｅｂｓ　Ｌｅ
ｔｔｅｒｓ、１３１巻、３１０頁、１９８１年）に準じ
て行った。

オキシ三塩化リン（１，９２ｍ／）のヘキサン（７５ｄ
）溶液にトリエチルアミン（２，８７ｄ）を加え攪拌し
たのち、室温で、参考例１で合成したドリコール（５ｆ
）のヘキサン（７５４）溶液を？１１Ｎ下し、３０分間
攪拌した。反応液をアセトン／メタノール／水＝８８／
１０／２　（容量比）の混合液中に注ぎ、電源で一夜攪
拌後、分液ロートに入れ、上層を分離し、飽和食塩水で
洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下に溶媒
を留去し、得られた黄色液状物をＤＥＡＥ−セルロース
（酢酸エステル型セルロースイオン交換体ｓ　　３．５
＋ｙ＋１ｄＸ１２　ｃｍ　）を用い、クロロホルム／メ
タノール＝２／１（容量比）の混合液に少量の酢酸アン
モニウムを加えた液をｉ開成とし九カラムクロマトグラ
フィーによりドリコールリン酸を含むフラクションを得
た。次いで、このものを５ｅｐｈａｄｅｘ　ＬＨ−２０
（デキストランゲル、４０ｆ’）１用い、クロロホルム
／メタノール＝２／１　（容量比）を展開液としたゲル
口過にＬり酢酸アンモニクムを除去し、得られた溶液ｔ
″濃縮してドリコールリン酸（３，Ｏｆ）を得た。この
ものをＮＭＲ分析したところ原料ドリコールの−ＣＨ＋
ＯＨに起因するシグナル（δナル（ｔ５＝３．９０）が
認められた以外は原料とほぼ同じ７グナルが認められた
。このことから、この化合物がドリコールリン酸で、ら
ることが確認された。

参考例４（酢酸エステル化） 参考例１で得られたドリコール（１３，１Ｆ、１０ｍｍ
ｏｌ　）を無水塩化メデレｙ（１００１Ｌｌ）に溶解し
、ピリジン（３，２Ｆ、４０ｍｍｏｌ）オよび４−ジメ
チルアミノピリジン（ｓＯｑ）を加えて水冷下攪拌しな
がら無水酢酸（２，０４ｆ、　２０　ｍｍｏＬ）を滴下
した。室温で３０分間攪拌後、氷水中に注ぎ、塩化メチ
レンで抽出した。有機層を希塩酸水および水で洗浄した
のち無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下に溶媒を留
去し、黄色液状物を得た。

このものをヘキサン／酢酸エチル＝９９／１　（容量比
）を展開液として使用したシリカゲルカラムクロマトグ
ラフィーにより精製して無色透明な液状物（１２，２ｆ
）を得た。このものをＮＭＲ分析したところ、原料ドリ
コールの−（Ｊ（２０Ｈに起因するシグナル（δ＝３．
６６）が消失し、−ＣＨ２，−Ｑ３ＣＨｓおよび−ＣＨ
２０δＣＩｊｓに起因するシグナル　（δ＝４．０４お
よび１．９７）が認められた以外は原料とほぼ同じシグ
ナルが認められた。ＩＲ分析により以下の結果を得た。

３０３０．２９５０，２９１０，２８４５．１７４０．
１６６０．１４４０．１３７０％１２３０，１０２０．
８３０個　。

以上のことから、このものがドリコール酢酸であること
か確認された。

参考例５（バルミチン酸エステル化） 参考例１で得られたドリコール（１，３１？、Ｉｍｍｏ
ｌ　　）を無水ジエチルエーテル（２−）にｍｍし、ピ
リジン（８０η、Ｉｍｍｏｌ）を加えて室温で攪拌しつ
つバルミチン酸クロリド（２７５１９，’１ｍｍｏｌ　
）を加えた。３時間攪拌後水中に注ぎジエチルエーテル
で抽出し、希塩酸水および水で洗浄し、無水硫酸マグネ
シウムで乾燥し、減圧下に溶媒を留去して１．４ｔの黄
色液状物を得た。このものをヘキサンを展開液としたシ
リカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し無色透
明な液状物１．３ｆを得た。このものをＮＭＲ分析した
ところ、原料ドリコールの−ＣＨ２０Ｈに起因するシグ
ナル偶 （δ＝３．６６）が消失し、−Ｃ杜２−０−Ｃ−ＣＨ２
（Ｃ杜２）１３に起因するシグナル（δ−４，０４及び
δ＝１．２８）が認められた。ＩＲ分析によシ以下の結
果を得た。

ＩＲ分析＝３０４０．２９７０，２９３５．２８６０．
１７４０．１６６５、！４５０，１３８０，１１７０゜
８３５譚　。

以上のことから、このものがドリコールノくルミチン酸
であることが確認された。

実施例１（製剤例：注射剤） 参考例１で得たドリコール　　　　　１０ｍｇポリオキ
シエチレン硬化ヒマシ油７０ｍ９ソルビタントリオレエ
ート５．０〜 プロピレングリコール　　　　　　　　２０■注射用蒸
留水　　　　　　　　　　　約１ｍポリオキシエチレン
硬化ヒマシ油とソルビタントリオレエートをそれぞれ秤
取し、加温して溶解し、別に秤取した参考例１で得たド
リコールを加え、温時しばらく急速に攪拌した。今後、
プロピレングリコールと注射用蒸留水を加え全量をｌ　
ｍｌとし、次に注射剤製法の常法通り濾過し、１ｄ容の
褐色アンプルに充填、窒素を封入した０滅菌は流通蒸気
法によシ１００℃、４０分間行なった０実施例２（製剤
例：錠剤） 参考例１で得たドリコール　　　　　１０２ミツロウ　
　　　　　　　　　　　　　　１２ヒドロキシプロピル
セルロース　　　　３ｆ水　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　３０ｄ結晶セルロース　　
　　　　　　　　　３０２乳糖　　　　　　　　　　　
　　　　３０？とうもろこし澱粉　　　　　　　　　２
０２カルボキシメチルセルロースカルシウム　５ｆ参考
例１で得たドリコール、ミツロウおよびヒドロキシプロ
ピルセルロースをそれぞれ秤取し、水を加えて約７０℃
に加温し乳化液とした。結晶セルロース、乳！＞よびと
うもろこし澱粉を混合し、これに前記乳化液を加えて吸
着させた。乾燥後整粒しカルボキンメチルセルロースカ
ルシウムを混合して直径６順、厚さ３．３１ｆｌｌ、１
錠１００９の錠剤に圧縮成形した。

実施例３（製剤例：注射剤） 参考４？ＡＪ　２で得たｎ＝１５（７）　ｌ”’Ｊ　１
．ｆｆ−ル１　Ｆポリオキ／エチレン硬化ヒマシ油７２ プロピレングリコール　　　　　　　　１０Ｆブドウ＄
１１　　　　　　　　　　　　　　　２．５を注射用蒸
留水　　　　　　　　　　約１００ｄ参考例２で得たｎ
＝１５であるドリコール、ポリオキシエチレン硬化ヒマ
シ油、プロピレングリコールをそれぞれ秤取し、加温し
て溶解し、しばらく急速に攪拌した。今後、注射用蒸留
水を加え全量を１００−とし、次に注射剤製法の常法通
り戸遇し、各１−容の褐色アングルに充填し、窒素を対
人した。滅菌は流通蒸気法により１００℃、４０分間行
なった。

実施例４（製剤例：注射剤） 参考例３で得たドリコールリン酸　　　１２参考例３で
得たドリコールリン酸とポリオキシエチレンソルビタン
モノオレエートとを混合し、更に、トリブチリンで希釈
して１ｏｏｙの容積にした。次に注射剤製法の常法通り
Ｐ遇し、各１ｄ容の褐色アンプルに充填し、窒素を封入
した。滅菌は流通蒸気法により１００℃、４０分間行な
った０ 実施例５（＃剤例：散剤） 参考例１で得たドリコール　　　　　　５？微結晶セル
ローズ　　　　　　　　　　４０ノトウモロコシデンプ
ン　　　　　　　　５５９参考例１で得たドリコールを
アセトンに溶解し、次いでこれを微結晶セルローズに吸
着させたのち、乾燥した。これをトウモロコシデンプン
と混合し、常法により散剤として生薬の２０倍散を調灸
した。

実施例６（製剤例：カプセル剤） 参考例１で得たドリコール　　　　　　５ノ微結晶セル
ローズ　　　　　　　　　　８ｏタトウモロコシデンブ
ン　　　　　　　　２０Ｆ乳［２２ｙ ポリビニルピロリドン　　　　　　　　　３１上記成分
を常法により顆粒化したのち、ゼラチン硬カプセル１，
０００カプセルに充填した０１カプセル中にドリコール
５〜を含有する。

実施例７（リボノーム製剤） 参考例１で得たドリコール　　　　　４５９卵黄レシチ
ン　　　　　　　　　　　１３５■参考例１で得たドリ
コール４５〜と卵黄レシチン１３５＃ｖを谷Ｍｋ５００
１Ｌｌのナス型フラスコに計り取り、クロロホルム３０
１１Ｊｔ−加え、充分に溶解を混合した。このナス型フ
ラスコを予め雰囲気を窒素ガスで置換しておいたロータ
リーエバポレーターに取付け、水流アスピレータ−減圧
下、約４０℃でクロロホルムを留去させることにより、
該フラスコ内面に薄膜を形成させた。フラスコ系内金窒
素ガス雰囲気下に常圧に戻し、該フラスコをロータリー
エバポレーターから取外し、ついで真空ポンプを用いて
約Ｑ、ｌ　ｉｍｌ“ｒｙの減圧下に残存クロロホルムを
完全に留去させた。内面に薄膜を有するフラスコ中に蒸
留水２Ｑｄを加え、水冷下に超音波破砕器で６０分間激
しく攪拌し、水乳化液を得た。この水乳化液中に窒素ガ
スをバブリングすることにより溶存酸素を除去したのち
、約４℃で１２時間放置した。この水乳化液を再び超音
波破砕器で水冷下に５分間攪拌したのち、凍結乾燥し、
白色海綿状物１８０■を得た。

発明の効米 本発明により提供されるドリコールおよび／またはその
薬理学的に許容されるエステルを有効成分として含有す
る肝機能改善剤は該ドリコールおよび／またはその薬理
学的に許容されるエステルが有する緩かな肝機能改善作
用を効果的に発現きせる。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 一般式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、▲数式、化学式、表等があります▼はトランス
   −イソプレ ン単位であり、▲数式、化学式、表等があります▼はシ
   ス−イソ プレン単位であり、ｎは１２〜１８の整数を表わす） で示される化合物および／またはその薬理学的に許容さ
   れるエステルを有効成分として含有することを特徴とす
   る肝機能改善剤。