JPS62289517A

JPS62289517A - リポソ−ム製剤

Info

Publication number: JPS62289517A
Application number: JP13454186A
Authority: JP
Inventors: Hiroyuki Kaneki; 宏之鹿子木; Michihiro Yamaguchi; 山口　道広; Etsuhisa Sato; 悦久佐藤
Original assignee: Shiseido Co Ltd
Current assignee: Shiseido Co Ltd
Priority date: 1986-06-10
Filing date: 1986-06-10
Publication date: 1987-12-16

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】３、発明の詳細な説明〔産業上の利用分野〕本発明は新規なリポソーム製剤に関するものであり、更
に詳しくは、複合脂質を用いて製造されるリポソームに
Ｎ−（２，３−キシリル）アンスラニル酸ピリジルアル
キルエステル誘導体を配合してなる抗炎症作用に優れた
リポソーム製剤に関する。

〔従来の技術〕

従来Ｎ−（２，３−キシリル）アンスラニル酸は抗炎症
、抗リウマチ、解熱沈痛剤として広範囲に使用されてい
るが、水、アルコール、油分等に極めて溶けに（＜、専
ら散剤、錠剤、カプセル剤の投薬形態で経口剤として用
いられている。

ところが、公知のＮ−（２，３−キシリル）アンスラニ
ル酸を経口適用すると胃腸障害や腎臓障害、眩量等の副
作用を起こすことが知られている。

本発明者等は上記副作用の問題を解決するためにＷＥ　
究ヲ行い、Ｎ−＜２．３−キシリル）アンスラニル酸の
カルボキシル基にアルキルピリジル基を導入することに
より、該アンスラニル酸の経皮吸収性および皮ｉ親和性
を増大し皮膚外用剤としての有用性を開発することに成
功して、先に特許出願を行った。

〔本発明が解決しようとする問題点〕

ところが、従来の皮膚外用剤、すなわちクリーム、軟膏
、乳液等の基材を用いた場合には、皮膚角質層のバリア
ー機能のために未だ薬剤の吸収量が少なく、薬効が充分
に発揮されているとはいいがたい。また、各種の吸収促
進剤を用いることも考えられるが、これらは皮膚の不可
逆的変性や皮膚刺激性等の問題があり、有効な解決策に
ならないのが現状である。

本発明者は、上記問題点を解決すべ（鋭意研究を行った
結果、Ｎ−（２，３−キシリル）アンスラニル酸ピリジ
ルアルキルエステル誘導体をリポソームに配合すること
により、皮膚の変性や刺激等が生ずることなく、かつ優
れた経皮吸収性を示す等該薬剤の効力が充分に発揮され
る製剤を得るに至った。

〔問題点を解決するための手段及びその作用〕すなわち
本発明は、下記一般式＜１）で表されるＮ−（２，３−
キシリル）アンスラニル酸ピリジルアルキルエステル誘
導体を含有することを特徴とするリポソーム製剤である
。

［式中Ｒはピリジンで置換された炭素数１〜３のアルキ
ル基を示す〕かかる製剤は、Ｎ−（２，３−キシリル）アンスラニル
酸ピリジルアルキルエステル誘導体の経皮吸収量を増し
、抗炎症作用を大巾に向上させる。

以下、本発明の構成について詳述する。

本発明でいうリポソーム製剤は、複合脂質を用いて製造
されるリポソーム中に上記薬剤を配合してなるリポソー
ム製剤である。該リポソームとは複合脂質のラメラ層に
より形成された小胞体であり、水溶性物質及び脂溶性物
質のいずれでもその中に含有することができる。すなわ
ち、水溶性物質はリポソーム内の水相中に、脂溶性物質
はリポソームを形成するラメラ相中に含有される。その
他に、これらの物質はラメラ相表面に化学的および物理
的に吸着されることもあり、本発明では上記３通りの場
合と併せて「含有」と称する。

リポソームの調製法は、常法のいずれを用いてもよく、
例えばポルチクスイング法、ソニケーション法、プレベ
シクル法、エタノール注入法、フレンチプレス押出法、
コール酸除去法、トリトンＸ　−１００バツチ法、Ｃａ
２融合法、エーテル注入法、アニーリング法、凍結融解
融合法、Ｗ１０／Ｗエマルジョン法、逆相蒸発法等多く
の方法があげられるが、これらのいずれの調製法を用い
てもよく、これらに限定されるものではない。

本発明のリポソーム製剤の製造に用いられる複合脂質と
しては、例えばレシチン、ケファリン、ホスファチジル
セリン、スフィンゴミエリン、プラスマロゲン等の天然
リン脂質、シミリストイルレシチン、ジパルミトイルレ
シチン、ジステアロイルレシチン、ジセチルホスフエー
ト、ステアリルアミン等の合成リン脂質、ジガラクトシ
ルジグリセリド、６−スルホキツボシルジグリセリド、
ガラクトシルセラミド、グルコシルセラミド等の天然糖
胞質、グルコシルジパルミトイルグリセロール、セルビ
オシルジパルミトイルグリセロール、マルトシルジパル
ミトイル等の合成糖脂質あるいは天然由来のレシチンの
不飽和炭素鎖を水素により飽和とした水添レシチン等が
挙げられる。本発明においてはこれらの内から任意の一
種又は二種以上が選ばれて用いられる。

リポソームの分散安定性を高めるたるに複合脂質ラメラ
相に荷電を持たせることが望ましい。この場合、負電荷
を持たせるときは上記のホスファチジルセリン、ジセチ
ルホスフェートなどの負電荷を持つ脂質を、正電荷を持
たせるときは上記のステアリルアミンなどの正電荷を持
つ脂質を用いればよい。

本発明のリポソーム製剤の安定化のために、さらにリポ
ソーム中にスチロールを配合することができる。かかる
スチロールとしては、例えばコレスチロール、β−シト
スチロール、スチグマスチロール、カンペスチロールま
たは植物材料から抽出されるスチロールの混合物等が挙
げられる。

本発明で用いるＮ−（２，３−キシリル）アンスラニル
酸ピリジルアルキルエステル誘導体は下記一般式（１）
で表される化合物である。

［式中Ｒはピリジンで置換された炭素数１〜３のアルキ
ル基を示ず］式中、Ｒで示されるピリジルアルキル基のアルキル部分
は、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピルであ
るが、炭素数が増大するに従って抗炎症作用が減じる。

メチルまたはエチルが好ましい。

本発明のＮ−（２，３−キシリル）アンスラニル酸ピリ
ジルアルキルエステル誘導体の具体例を次に挙げる。

２−ピリジルメチル−Ｎ−（２，３−キシリル）アンス
ラニレート３−ピリジルメチル−Ｎ−（２，３−キシリル）アンス
ラニレート４−ピリジルメチル−Ｎ−（２，３−キシリル）アンス
ラニレート２−（２−ピリジル）エチル−Ｎ−＜２．３−キシリル
）アンスラニレート２−（３−ピリジル）エチル−Ｎ−（２，３−キシリル
）アンスラニレート２−（４−ピリジル）エチル−Ｎ−（２，３−キシリル
）アンスラニレート２−（２−ピリジル）プロピル−Ｎ−（２，３−キシリ
ル）アンスラニレート２−（３−ピリジル）プロピル−Ｎ−（２，３−キシリ
ル）アンスラニレート２−（４−ピリジル）プロピル−Ｎ（２，３−キシリル
）アンスラニレート３−（２−ピリジル）プロピル−Ｎ−（２，３−−ｔ−
シリル）アンスラニレート３−（３−ピリジル）プロピル−Ｎ−（２，３−−ｔ−
シリル）アンスラニレート３−（４−ピリジル）プロピル−Ｎ−（２，３−キシリ
ル）アンスラニレートリポソーム製剤中のＮ−（２，３−キシリル）アンスラ
ニル酸ピリジルアルキルエステル誘導体の配合量は特に
限定しないが、一般的には製剤全量中の０．００１〜２
０重量％配合することが望ましい。

また、概当量の薬剤をリポソームに安定包埋させるため
には、複合リン脂質は製剤全量中の０．００２〜４０重
量％を占めるのが好ましい。

また、リポソーム製剤の安定化のために、必要に応じて
さらに配合されるスチロールの配合量は、上限３０重量
％程度までで、好ましくは０．００１〜２０重量％であ
る。

本発明のリポソーム製剤はリポソームの形態を破壊しな
い成分であれば、通常の医薬品、化粧品等に配合される
一般的な成分を配合できる。

〔発明の効果〕

本発明のリポソーム製剤は、これを皮膚表面に塗布する
ことにより、リポソーム自体は経皮吸収されることはな
いが、Ｎ−（２，３−キシリル）アンスラニル酸ピリジ
ルアルキルエステル誘導体の吸収を高め、局所における
薬剤濃度の増大をもたらし充分な薬効が発揮される。

本発明により、より少ない薬剤量で従来と同様の効果が
期待できるので、薬剤による副作用の低減も達成できる
。また、リポソーム製剤自身の安全性も高い。

〔実施例〕

次に本発明の一層の理解のために、Ｎ−（２゜３−キシ
リル）アンスラニル酸ピリジルアルキルエステル誘導体
の製造例およびリポソーム製剤の実施例をあげて説明す
る。本発明はこれらの製造例、実施例によって限定され
るものではないことはいうまでもない。

製造例ＩＮ−（２，３−キシリル）アンスラニル酸ナトリウム２
．３６ｇをジメチルホルムアミド２０ｄに溶解した後、
２−クロロメチルピリジン１．２５ｇを加え、９０℃に
て３時間反応させた。反応終了後、減圧下にて溶媒を留
去し、残渣に水を加えエーテルで抽出した。エーテルを
親水後に留去して得た残渣をメタノールより再結晶し、
淡黄色の２−ピリジルメチル−Ｎ−（２，３−キシリル
）アンスラニレート３．００ｇを得た。

融点：６３〜６４℃ 元素分析：　Ｃ２１）（２００２Ｎ２計算値（％）Ｃ７５，８８Ｈ６，０７Ｎ　８．４３実測
値（％）　Ｃ７６，０２Ｈ５，９２Ｎ　８．３９マスス
ペクトル視イオン（ｍ／ｅ）＝３３２製造例２Ｎ−（２，３−キシリル）アンスラニル酸２．４１ｇお
よび塩化チオニル３．６ｇをベンゼン２〇−中で混合し
、還流下３時間反応させた。ついで、減圧下にて溶媒お
よび過剰の塩化チオニルを留去し、得られた残渣にテト
ラヒドロフラン５０−と３−（４−ピリジル）プロパツ
ール１．３７ｇを加えた後、室温で徐々にトリエチルア
ミン１．５ｇを加えて３０分間攪拌し、さらに還流下に
１時間反応させた。

反応終了後、減圧下に溶媒を留去し、残渣に水を加えエ
ーテルで抽出した。得られた油状残渣をメタノールより
再結晶し、淡黄色の３−（４−ピリジル）プロピル−Ｎ
−（２，３−キシリル）アンスラニレート　３．２ｇを
得た。

融点：５６〜５７℃ 元素分析：　Ｃ２３Ｈ２４０２Ｎ２計算値（％）　Ｃ７６，６４Ｈ６，７１Ｎ　７．７７実
測値（％）　Ｃ７６，５１８６，４３Ｎ　７．５８マス
スペクトル親イオン（ｍ／ｅ）＝３６０製造例３〜６製造例１および２の方法に準じて表−１に示す化合物を
合成した。

化合物の物性を表−１に示す。

（以下金　白）表−１製造例　　　　化合物　　　　融点（℃）　　＊実施例
１５０−ナス型フラスコ中でジパルミトイルレシチン０．
６３ｇ　、コレスチロール０．３２ｇ、ジセチルホスフ
ェート５０■および２−ピリジルメチル−Ｎ−（２，３
−キシリル）アンスラニレート２５■をクロロホルム１
０−にン容解した（麦、ロータリーエバポレーターを用
いてクロロホルムを留去し、フラス底壁に複合脂質膜を
得た。

これを真空デシケータ中で２時間乾燥しクロロホルムを
完全に留去した。これにリン酸緩衝液（ｐＨ７，４）　
１０−を加え、５０℃で３０分水和させた後、ポルテッ
クスミキサーにより激しく振とうすることによりフラス
コ底壁に形成した上記複合脂質膜を完全に分散せしめて
リポソームを形成させ、リポソーム分散液とした。

実施例２５０−ナス型フラスコ中で卵黄レシチン１．０ｇ　。

ジセチルホスフェート５０ｍｇおよび３−ピリジルメチ
ル−Ｎ（２，３−キシリル）アンスラニレート２５ｍｇ
をジエチルエーテル６− ン酸緩衝液２−を加え、これに超音波を照射することに
よりＷ１０エマルジョンを得た。これをロータリーエバ
ポレーターを用いてジエチルエーテルを留去してゲル化
させ、軽く振とうした後、残ったジエチルエーテルを留
去して濃厚なリポソーム分散液を得た。本分散液は、こ
れを適度に希釈することができる。

実施例３実施例１に従って、後述表−１に示す各種Ｎ−（２，３
−キ、シリル）アンスラニル酸ピリジルアルキルエステ
ル誘導体０．２５％を含有するリポソーム製剤を調製し
た。

比較例１実施例３と同濃度（０，２５％）の各種Ｎ−（２゜３−
キシリル）アンスラニル酸ピリジルアルキルエステル誘
導体のオリーブ油混液を調製した。

実施例３で得たリポソーム製剤と、比較例１のオリーブ
油混液との抗炎症効果を紫外線紅斑法により評価した。

薬物の外皮適用による抗炎症作用を測定する試験として
は、紫外線紅斑法が通している。すなわち、ハートレイ
系アルピノモルモット（体重４５０〜５００　ｇ、１群
１０匹）の背部皮膚を刈毛、刷毛したのち、正中線を対
照にゴム板を用いて背部皮膚に１．４１Ｘ　１．４１ｃ
ｍの区画を設け、中波長紫外線（２８０〜３２０ｎｍ、
λｌ＋Ｉａｘ　＝　３０５ＭＬ）を２．ＯＪ／−照射し
て紅斑を誘導した。紫外線照射後、一区画に試料の各種
Ｎ−（２，３−キシリル）アンスラニル酸ピリジルアル
キルエステル誘導体のリポソーム製剤およびオリーブ油
混液を適量塗布して、経時的に紅斑の形成を判定した。

薬剤を塗布した部位の紅斑の平均値（Ｅｌ）と無塗布部
位の紅斑の平均値（Ｅｏ）を求め、紫外線紅斑抑制質（％）＝（Ｅｏ−Ｅｌ）　／Ｅｏ　Ｘ　　１００の計算式式によ
り、紫外線紅斑抑制質く％）を算出して抗炎症活性とし
た。この値が大きい程、抗炎症活性が高いことを示す。

紫外線照射後３時間目の判定値を表−２に示す。

（以下余白）表−２ −Ｈ３２，８〜 −ＣＨ２−４７，６６４，３ −Ｃｆｔ２５１．３　　　　５８．７ −Ｃ１１２−４３，１５５，７ −Ｃ１１２ＣＨ２−３５，４５０，４ −Ｃ１１，２Ｃ１１，２Ｃ１１２−３３，２４５，２表
−２中の試料は、前述の一般式（Ｉ）に示されるＲをも
って表した。また、Ｒ＝Ｈは公知のＮ−（２，３−キシ
リル）アンスラニルｍを表ｔ。

塗布量はいずれも薬剤量で２５Ｎｇ／ｃＩ１１とした。

表−２から明らかなように、本発明によるリポソーム製
剤は、オリーブ油混液による薬剤単独塗布より強い紅斑
抑制率を示し、外用消炎製剤としても優れた作用を有す
ることが判明した。

実施例４実施例２に従って、後述表−３に示す各種Ｎ−（２，３
−４シリル）アンスラニル酸ピリジルアルキルエステル
誘導０．２５％を含有するリポソーム製剤を調製した。

比較例２実施例４と同濃度（０，２５％）の各種Ｎ−（２゜３−
キシリル）アンスラニル酸ピリジルアルキルエステル誘
導体のエタノール溶液を調製した。

実施例４で得たリポソーム製剤と、比較例２のエタノー
ル溶液との鎮痛作用をランダルセリット法により評価し
た。

鎮痛作用を測定する試験法としては、非麻酔性鎮痛剤の
外皮通用を評価する際に標準試験法として用いられてい
るランダルセリフト法（Ｒａｎｄａｌｌ。

Ｌ、０．ａｎｄ　５ｅｌｉｔｔｏ、Ｊ、Ｊ、、Ａｒｃｈ
ｉｖｅｓ　ｏｆ　　Ｉｎｔｅｒｎａｔｉ。

ｎａｌ　Ｐｈａｒｍａｃｏｄｙｎａｍｉｃｓｓ　　１１
１巻、　４０９頁、１９５７）を準用した。すなわち、
ウィスター系雄性ラット（体重１００〜２００ｇ、１群
１０匹）の後肢両足随に、リポソーム製剤及びエタノー
ル溶液を適量塗布した。１時間後に再び同量塗布し、直
ちに起炎物質として５％ビール酵母／生理食塩液を該ラ
フトの片側足疏に０．１−皮下投与した。起炎物質投与
後の一定時間に、水平天秤型加圧機を用いて発癌重量を
測定し、疼痛闇値の低下率（Ｐｌ）を求めた。

対照群として、薬剤を含有しないリポソームおよび溶媒
のみを塗布したラットに、同様にビール酵母を注入した
際の疼痛闇値の低下率（ＰＯ）を求めビール酵母疼痛闇値上昇率（％）＝（Ｐｏ−Ｐｌ）　／Ｐｏ　Ｘ　　１００の計算式により
ビール酵母疼痛闇値上昇率（％）を算出して鎮痛活性と
した。この値が大きい程、鎮痛作用が高いことを示す。

ビール酵母注入後５時間口の測定値を表−２に示す。

（以下余白）表−３試　　　料　　　　　闇値上昇率（％）比較例２　実施
例４（以下余　白）塗布量はいずれも薬剤量で２．５ｍｇ／　ｐａｗとした
。

表−３から明らかなように、本発明によるリポソーム製
剤は高い鎮痛作用を示し、外用鎮痛剤としても優れた作
用を有することが判明した。

Claims

【特許請求の範囲】

（１）下記一般式（ I ）で表されるＮ−（２，３−キ
シリル）アンスラニル酸ピリジルアルキルエステル誘導
体を含有することを特徴とするリポソーム製剤。 ▲数式、化学式、表等があります▼（ I ）［式中Ｒはピリジンで置換された炭素数１〜３のアルキ
ル基を示す］
（２）リポソームが複合リン脂質からなるリポソームで
ある特許請求の範囲第１項記載のリポソーム製剤。
（３）複合リン脂質が天然リン脂質、合成リン脂質、天
然糖胞質または合成糖脂質である特許請求の範囲第２項
記載のリポソーム製剤。
（４）さらにスチロールを配合してなる特許請求の範囲
第１項ないし第３項のいずれかに記載のリポソーム製剤
。