JPS62277395A - オリゴヌクレオチド又はオリゴデオキシヌクレオチドから構成されている化学化合物、その合成方法及びその利用方法 - Google Patents

オリゴヌクレオチド又はオリゴデオキシヌクレオチドから構成されている化学化合物、その合成方法及びその利用方法

Info

Publication number
JPS62277395A
JPS62277395A JP61208814A JP20881486A JPS62277395A JP S62277395 A JPS62277395 A JP S62277395A JP 61208814 A JP61208814 A JP 61208814A JP 20881486 A JP20881486 A JP 20881486A JP S62277395 A JPS62277395 A JP S62277395A
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
chemical
group
formulas
radical
tables
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
JP61208814A
Other languages
English (en)
Inventor
グエン　タン　ツオン
クロード　エレーヌ
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Centre National de la Recherche Scientifique CNRS
Original Assignee
Centre National de la Recherche Scientifique CNRS
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=9322620&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=JPS62277395(A) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Centre National de la Recherche Scientifique CNRS filed Critical Centre National de la Recherche Scientifique CNRS
Publication of JPS62277395A publication Critical patent/JPS62277395A/ja
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/22—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains four or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
    • C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
    • C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
    • C07H19/06—Pyrimidine radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H21/00—Compounds containing two or more mononucleotide units having separate phosphate or polyphosphate groups linked by saccharide radicals of nucleoside groups, e.g. nucleic acids

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)
  • Enzymes And Modification Thereof (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は新しい化学化合物及びその適用、特にある塩基
配列に特異的な合成ヌクレアーゼとしての適用に関する
。
本発明は更に、遺伝子表現の選択的阻害のための該化合
物の適用に関する。
遺伝子に関しては、内因性遺伝子（例えばオンコ遭伝子
）ばかりでなく、外因性遺伝子（例えばビールス、奇生
物あるいはバクテリアのＤＮＡ。
ＲＮＡ）が知られている。
本発明の化学化合物は、オリゴヌクレオチドあるいはオ
リゴデオキシヌクレオチドから構成されている。これは
天然おるいは修飾ヌクレオチド配列を持ち、直接的ある
いは間接的にヌクレオチド鎖と反応する少なくとも一つ
の基を持つ化学ラジカル及びインターカレートなラジカ
ルと、共有結合している。（以下、ラジカルは「反応性
化学ラジカル」と表わす。）この反応性化学ラジカルが
。
同時にインターカレートなラジカルを兼ねていてもよい
。
これらの化合物のうら、特に、（Ａ）の化学式を持つ化
合物について説明する。
（Ａ）において 複数のラジカルＢは同一のものでも異なっているもので
もよく、各々天然あるいは修飾核酸塩基を示す。
複数のラジカルＸもまた同一のものでも異なっているも
のでもよく、各々酸素陰イオン〇−、イオウ陰イオンＳ
−、アルキル基、アルコキシ基あるいはアワールオキシ
基、含窒素複素環で置換されているアルコキシ基あるい
はアルキル基、アミノアルキル基、アミノアルコキシ基
、チオアルキル基あるいは−Ｙ−Ｚ基を示す。
ＲとＲ−は同一でも異なっていてもよく、各々−Ｙ−Ｚ
基と−Ｙ−−Ｚ−基を示す。ここでＹとＹ′は直線ある
いは分校アルキレンラジカルＯ０ −ａＱＫ（ここでＥはＸと同様のものである）。
ラジカル−ａΩに−０−ａ　ＱＫ−、ラジカルＺとＺ−
は各々インターカレートなラジカル必るいは直接的また
は間接的にヌクレオチド鎖と反応する少なくとも一つの
基を持つラジカルを示す。
反応性化学ラジカルが同時にインターカレートなラジカ
ルである場合には、ＲとＲ′のどちらが一つは水素でも
よい。
化合物（Ａ＞が少なくとも一つのインターカレートなラ
ジカルと反応性化学ラジカルを持つ条件下で、Ｚあるい
はＺ−が反応性化学ラジカルを兼ねるインターカレート
なラジカルである場合には。
ＺとＺ−は同一のものでもよいし、あるいはＲとＲ−の
どちらか一つが水素でもよい。
Ｌは、酸素原子、イオウ原子あるいは−ＮＨ−基を示す
。
Ｊは、水素原子あるいは水酸基を示す。
ｎはＯを含む整数である。
ヌクレオチドは以下のような簡略化された式で表わされ
る。
これは次の構造式を示している。
０−（３’） この式には３−末端と５′末端が示されている。
化学式（Ａ＞は複数のヌクレオチド配列（これは同一の
ものでも異なったものでもよい）の一つを示している。
ｎは分子中に含まれるヌクレオチドの数を示す。このｎ
は１から５０の間、ざらに言えば１から２５の間が好ま
しい。
インターカレーｌ−なラジカルは、核酸を含む。
技術分野で周知の化合物であるインターカレートな試薬
に相当する。このような化合物はＤＮＡあるいはＲＮＡ
の構造にインターカレートし１昂る。
上記のインターカレートな試薬は一般に多環式化合物で
あり、アクリジン、フロクマリン、ドゥノマイシン、１
．１０−フェナントロリン、フエナントリジニウム、ポ
ルフィリン、ジピリド［１゜２−ａ　　：３”、　２−
−ｄ　］イミダゾール誘導体。
エリブチシンあるいはエリブチジニウム及びその２つの
誘導体のような平面構造を持つ化合物である。
反応性化学ラジカルは分裂させる化学ラジカルであるこ
とが望ましい。すなわち、これらラジカルは、直接的あ
るいは間接的に、ヌクレオチド鎖を分断するよう反応す
る。これらの反応性化学ラジカルは１例えば、化学的も
しくは光化学的に活性化され１ｑる。
活性化され得る分裂用の反応基は１例えば次のような化
合物の誘導体でおる。
エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ） ジエチレントリアミン五酢１ｍ　（ＤＴＰＡ＞ポルフィ
リン １．１０−フェナントロリン（Ｐｈｅ）あるいは、近紫
外と可視範囲で放射を吸収する他の芳香族の誘導体でも
よい。
金属イオン、酸素と還元剤（ＥＤＴＡ、ＤＴＰＡ、ポル
フィリン、フェナントロリン）の存在下で活性化される
化学基は、それに近接している核酸配列に分裂を生じさ
せる。
可視あるいは紫外の範囲での放射によりこれらの放射を
吸収する誘導体が活性化され、光活性される基を持つオ
リゴヌクレオチドに結合している核酸上で光分解反応が
進む。
ラジカルＺと７−の中で、特に下記のものを挙げておく
。
ＥＤＴＡ誘導イ本ラジカう ＥＤＴＡ　：　Ｒ＝Ｈ，あるいは Ｍｅ　　　　ＥＤＴＡ：Ｒ＝Ｍｅ メ チルピロポルフィリン フェナントロリン誘導体ラジカル ラジカルＢは，望ましくは，天然核酸塩基，例えばチミ
ン、アデニン、シトシン、グアニンあるいはウラシル、
から成る。しかし、修飾核酸塩基を使ってもかまわない
。これは例えば２−アミノアデニン及びそのＮ６が例え
ばアミノアルキレン基あるいはアジドフェニルアルキレ
ン基で置換されているその誘導体，あるいは、その０６
が例えば９−（ω−アルキレン）アクリジン基で置換さ
れているグアニン誘導体，おるいは、８−（ω−アミノ
アルキル）アミノアデニン及びそのω−Ｎ町がアクリジ
ン基で置換されている誘導体，あるいは、５−ブロモウ
ラシル、８−アジドアデニン等のハロゲン化あるいはア
ジ化誘導体である。
ざらに、光活性される塩基の誘導体を使うこともできる
。
ラジカルＸは，好ましくは，酸素陰イオンであるが，イ
也のものでもよい。ラジカルＸがアルキル基でおる場合
には，Ｃ１からＣ７の低級アルキル基であることが好ま
しい。例えば、エチル基，メチル基，プロピル基等であ
る。ラジカルＸがアルコキシ基でめる場合には，メトキ
シ基，エトキシ基等のＣ１からＣ７の低級アルコキシ基
であることが望ましい。ラジカルＸがアミノアルキル基
あるいはアミノアルコキシ基である場合には，−置換市
るいは二置換アミノアルキル基であってもＪ：いし、第
４級アンモニウム塩の形のアミンラジカルであってもよ
い。このような条件下では，＠換基は上記で規定された
ような低級アルキルラジカルが望ましい。アミンラジカ
ルを燐（Ｐ）につなぐアルキル鎖おるいはアルコキシ鎮
に関していえば，これは１から１０個の炭素原子を含む
直線あるいは分枝鎖が望ましい。アルキルあるいはアル
カキシラジカルが含窒素複素環で置換されている時には
，これは、特に第４級である，窒素原子を含む飽和五員
環あるいは六員環でおる。ラジカルＸがチオアルキルラ
ジカルである時には，低級チオアルキル基，すなわ・ち
１個から７個の炭素原子を含むものでおることが望まし
い。
本発明の化合物は，すでに知られている方法で化学的に
合成することができる。特にフランス特許出願Ｎｏ．８
３１０１．２２３　（１９８３年１月２７日）と８４／
１１．７９５　（１９８４年７月２５日）に詳しく書か
れている。
本発明によれば，その誘導体は充分に保護されて合成可
能であり，かつ、その保護基を合成後。
除去することが可能である。
本発明の化合物は，遺伝子工学法により合成されたＤＮ
ＡあるいはＲＮＡフラグメントを使用し。
これにインターカレートな試薬及び反応性化学基を結合
させるという半合成法によっても作られる。
本発明はまた，上記の化合物の酸あるいは塩基を有する
塩の形への，またラセミ型あるいは精製または混合Ｒあ
るいはＳ光学異性体の形への適用に関する。
本発明の化合物は，インターカレートな試薬及び化学反
応基と，あるいは化学反応基を兼ねているインターカレ
ートな試薬と，共有結合しているオリゴヌクレオチド鎖
から成っている。これらの新しい物質中においては，オ
リゴヌクレオチドは相補的核酸配列を認識し，インター
カレートな試薬は混成錯体の安定性を非常に増加ざぜ，
反応基は活性化により相補的核酸鎖の加水分解を導く。
この系は、それ故、核Ｖ、鎖を予め選択された位置で分
断させるのに大変有効である。
この化合物の、相補的核酸配列への強い選択的親和力に
より１本発明の化学式（Ａ）で表わされる化合物は、Ｅ
ＤＴＡ基を有する周知のオリゴヌクレオチド［ＦＥＢＳ
　　Ｌｅｔｔｅｒｓ、　１７２　（１９８４）　、　４
３−４６．　Ｐｒｏｃ　、　Ｎａｔ、Ａｃａｄ　、　Ｓ
Ｃｉ、　ＵＳＡ、迂２　（１９８５）、９６８−９７２
　：Ｐｒｏｃ　、　Ｎａｔ、　Ａｃａｄ　、Ｓｃｉ、　
ＵＳＡ、　８２　（１９８５）、９６３−９６７］の何
れよりも優れている。これらの周知のオリゴヌクレオチ
ドの相補的核酸配列に対する親和力は本発明の化合物よ
りもかなり低い（後）ホの例■参照）。ざらに、　ＥＤ
ＴＡ基に結合しているインターカレートな試薬を含む化
合物［［３ｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　、　２３　（１９
８４）　。
３９３４−３９４５］よりも優れている。また。
与えられた核酸配列に対して特異性をもたないポルフィ
リン［Ｊ、　Ｃｈｅｍ　、　Ｓｏｃ、　、　Ｃｏｍｍｕ
ｎ　１９８２、１２９８−１３００：Ｔｅｔｒａｈｅｄ
ｒｏｎ　　Ｌｅｔｔｅｒｓ、２４　（１９８３）、１５
２３−１５２６］よりも優れている。
本発明の化合物は相補的核酸配列と強く結合し。
その位置で核酸鎖を分断するので、これはある塩基配列
に特異的な合成ヌクレアーゼとして使用され得る。分子
生物あるいは遺伝子工学における試薬としても使える。
この化合物はまた。核酸フラグメント、特に、ある塩基
配列に特異的なヌクレアーゼが存在しないＲＮＡのフラ
グメントを得るのに使うこともできる。
本発明のテーマの一つは、化学式（Ａ＞で表わされる化
合物を、細胞質遺伝子あるいは予め選択された病原体（
ビールス、バクテリア、奇生物）を特異的に阻害するた
めに使用することである。
本発明の化合物は、それ故、好ましくない遺伝子の、こ
れは外因性遺伝子（ビールス、バクテリア、奇生物）で
も内因性遺伝子（オンコ遭伝因子の細胞質遺伝子等）で
もよいのであるが２選択的破壊のための薬剤として、有
用である。遺伝子情報を有するＤＮＡやＲＮＡに直接働
きかけることにより、あるいは遺伝子から複製されるメ
ツセンジｐ−ＲＮＡにＳきかけて、目標として選ばれた
メツセンジャ、−ＲＮＡを分断して、その翻訳を妨害す
ることにより、遺伝子表現が阻害される。
その塩基配列が、ＤＮＡあるいはＲＮＡの錯形成されて
いない部分、そしてメツセンジャーＲＮＡの塩基配列と
相補的である化学式（Ａ＞の化合物を用いて、この阻害
が実行される。これらの物質によるメツセンジャーＲＮ
Ａの分裂を伴う混成により、相当するタンパク質の合成
が阻害される。
このタンパク質がビールス、バクテリアあるいは奇生物
に必須のものである時には、化学式（Ａ＞の化合物は抗
ビールスｉ生物質、抗生物質必るいは抗奇生物質として
動く。
このタンパク質が有機体に必須なものでないときには、
その影響を選択的に除去し１ｑる。この場合には、化学
式（Ａ）の化合物は２例えば２問題の遺伝子（あるいは
そのメツセンジャーＲＮＡ）が形質転換タンパク質の暗
号を有している時には。
抗腫瘍性物質として動く。あるいは、暗号に直されたタ
ンパク質が抗生物質、抗ビールス性物質。
抗寄生物質を不活性化している場合には、抗生物質、抗
ビールス性物質及び抗奇生物質に対する耐性を除去させ
ることができる物質として働く。
以下の例は２本発明の他の特徴と長所を説明することを
意図する。例の中で、以下の省略が使われる。
Ａ　　　　　２−一デオキシアデノシンｂｚＡ　　　Ｎ
−ベンゾイル−２−一デオキシアデノシン ＢＨＡ　　　ベンゾヒドロキサム酸 Ａｒ　　　パラ−クロロフェニル ＣＮＥｔ　　β−シアノエチル ＤＢＵ　　　１．８−ジアザ“ビシクロ［５，４゜Ｏ］
−ウンデス−７−エン Ｍｅ　　　メチル ＤＭＴｒ　　ジメトキシトリチル ＭＭＴｒ　　モノメトキシトリチル ＭＳＴ　　　メシチレンスルフオニルテトラゾリド Ｔ　　　　チミジン 化学式（ＤＭＴｒ　）（Ｔ＋）、Ｔ−Ａｒにおいて、リ
ン酸二エステル結合をダッシュによって表わし、リン酸
三エステル結合を、記号（＋）により表わす。
各々のリン酸塩はｐ−クロロフェニル（Ａｒ　）基によ
って保護されている。
ＥＤＴＡ　　　　（Ｒ＝トＩ） Ｍｃ３ＥＤＴＡ　　（Ｒ＝Ｍｅ〉 Ｕ　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　Ｕ
ＭＰＰＯメチルピロポルフィリンＸＸＩエチレンジアミ
ン四酢酸テトラメチルエステル１当量、６−アミノ−１
−ヘキサノール１当量と２−ヒドロキシピリジン０．５
当量とを１００℃。
窒素大気中で、１時間反応さ−せる。得られた生成物は
溶媒として、ＣＨ２Ｃｕ２　／Ｍｅ　ＯＨ＜９８　：２
から９５　：　５．　ｖ／ｖ　）を使ったシリカクロマ
トグラフィーで精製する。収率：約４０％。
メチルパラクロロフェニルクロロリン！！塩３当量を、
−２０℃で攪拌しながら無水ピリジンに加える。加え終
わった後、空温で１時間攪拌を続ける。次に、ヘキサヌ
クレオチド＜Ｔ＋＞６　　（ＣＨ２＞５ＡＣｒ１当量（
フランス国特許ＮＯ，８３１０１，２２３に従い合成さ
れる）の溶液を、−１０℃で加える。室温で１時間反応
後、０℃前後の冷水を加え、化合物Ａｒ　−＜Ｔ＋）６
　（ＣＨ２）５−Ａｃｒを、ジクロロメタンで抽出する
。化合物の吸口は、実質上定量的である。
メシチレンスルフォニルテ１〜ラゾリド（ＭＳＴ）２．
５当量を、空温で攪拌しながら、Ｍｅ３ＥＤＴＡ−ＮＨ
−（ＣＨ２−＞６０８　３当ｉト、　Ａｒ　−＜Ｔ＋）
６　（ＣＨ２）５　Ａｃｒ　　１当量を含む無水ピリジ
ン溶液に加える。室温で１時間攪拌後。
０℃前後の冷水を加えて過剰なカップリング試薬をこわ
し、生成物をジクロロメタンで抽出する。
その後、溶媒としてＣＨ２ＣＱ　２　／Ｍｅ　ＯＨ（８
５：１５．ｖ／ｖ）を使ったシリカゲルクロマトで精製
する。
４）　例■−３）により合成され、充分に保護されたヘ
キサヌクレオチドを２ｍ拌しつつ、２４時間、空温にお
いて、ペンゾヒドロキザムＷ（ＢＨＡ）と１．８−ジア
ザビシクロ［５，４，０１−ウンデス−７−エン（ＤＢ
Ｕ）を含む無水ピリジンモル溶液で処理する。アリール
化されたリン酸エステル１当量に対し、ＢＨＡ／ＤＢＵ
１０当量が、保護基をはずすために使われる。０．７Ｍ
（ｍｏｌ　／ｄｍ３）水酸化ナトリウム溶液２休積を。
この反応混合物に加え、室温で４時間攪拌する。
反応混合物を塩酸で中和した後、水相をエーテルで洗浄
する。保護基をはずされたオリゴヌクレオチドを、液体
クロマトグラフィーにより、まずイオン交換により１次
に逆相中で、精製する。Ｐｏ１ｙａｎｉｏｎ　　ＨＲ５
１５カラム（Ｐｈａｒｍａｃｉａ）　、流速１雇／分、
溶媒１０−２ＭＮａ　ＣＱ及び１．５ＭＮａＣＱ、２０
分間に、１．５ＭＮａ　ＣＱをＯから１００％まで、直
線的に階調する。リテンションタイム（保持時間）：１
１分４２秒。Ｃ１８カラムでのリテンションタイムを第
１表に示す。
例■ ＭＰＰｏ−ＮＨ−（ＣＨ２−）６０−１−１ピリジン中
でメチルピロポルフィリンＸＸＩエチルエステル１当量
、６−アミノ−１−ヘキサノール１０当量と２−ヒドロ
キシピリジン２当量を１００℃、窒素大気中で光を遮断
して、５時間反応させる。ピリジンを減圧下で除き、残
留物を。
メチレンクロライドに溶かし、ＮＨＣＱで酸化する。そ
の有機相を水で洗浄し、減圧下で蒸発させる。得られた
生成物を、溶媒としてＣＨ２ＣＱ２／Ｍｅ　ＯＨ（９８
：　２から９５　：　５．　ｖ／ｖ　）を使ったシリカ
ゲルクロマトグラフィーで精製する。
収率：約７０％。
ＤＭＴｒ　（Ｔ＋）　７（Ｃ）（２）６ＮＨＭＰＰ。
例ニー３〉と同様の方法で、ＤＭＴｒ　　＜Ｔ＋）６Ｔ
Ａｒ１当量（フランス国特許ＮＯ，８３１０１，２２３
に従い合成される）、ＭＰＰｏ　ＮＨ（ＣＩ−１２＞６
０）−１１，５当量とＭＳ７３当量から。
充分に保護されたヘプタヌクレオチドを合成する。
この生成物を溶媒としてＣＨ２ＣＱ２／Ｈ２０／アセト
ン（５４：１：４５から３８　：　２　：　６０゜Ｖ／
Ｖ　）を使ったシリカクロマトグラフィーにより。
精製する。収率：約６０％。
３）　例ｎ−２＞により合成され、保護されたヘプタヌ
クレオチド１当量を、空温で２４時間。
ＢＨＡ／ＤＢＵ　（モル溶液＞７０当量で処理する。
反応ｔｓ質をＤＯＷＥＸ５０　（ピリジニウム系）で中
和し、減圧下で蒸発させる。残留物を８０％酢酸に溶か
し、室温で２時間放置する。酢酸を、減圧下でエタノー
ルで数回蒸発させることにより。
取り除く。残留物を水に溶かし、水相をエーテルで洗浄
する。保護基をはずされた生成物を液体クロマトグラフ
ィー（イオン交換により２次いで逆相中で）で精製する
。第１表に、得られた生成物のリテンションタイムを示
す。
例■ 無水アセトニトリル中で、５−−モノメトキシ１〜リチ
ルチミジン１当量、メチルブロモアビテート１．１当ｉ
、ＤＢＵ２．５当門を、空温で１時間反応させる。溶媒
を減圧下で蒸発させた後、残留物をクロロホルムに溶か
ず。クロロホルム相を５ｏ％炭酸水素ナトリウム（Ｎａ
　ＨＣＯ３）溶液で洗浄し、溶媒を減圧下で除く。その
生成物を。
溶媒としてＣＨ２ＣＱ２　／Ｍｅ　ＯＨ（９８：　２か
ら９５　：　５．　ｖ／ｖ　）を使ったシリカクロマト
グラフィーにより精製する。収率：約９０％。
無水ピリジン中の例■−１〉により合成された化合物１
当量、エチレンジアミン５当量、２−ヒドロキシピリジ
ン２当量の混合物を窒素大気下で１００℃まで１時間半
、加熱する。揮発成分を減圧下でとり除き、生成物を溶
媒としてＭｅ○トｌ／Ｃ０ｎＣＮＨ４０Ｈ（１００：　
Ｏから９５　：　５．　ｖ／ｖ　）を使ったシリカゲル
クロマトグラフィーで精製する。収率：約８０％。
無水ピリジン中で例ｌｌｌ−２＞により合成された化合
物１．３当量、メチルピロポルフィリンＸ×エビリジニ
ウム塩（メチルピロポルフィリンＸＸ■エチルエステル
の加水分解により作られる）１当因、ジシクロへキシル
カルボジイミド１０当量を、空温で２４時間反応させる
。過剰なジシクロへキシルカルボジイミドを水を加えて
こわし、沈澱を濾過する。得られた生成物をクロロホル
ムで抽出し、溶媒としてＣＨ２ＣＯ２／Ｍｅ　ＯＨ（９
８：２から９４　：　６．　ｖ／ｖ　）を使ったシリカ
クロマトグラフィーにより精製する。収率：約９０％。
例ｌｌｌ−３＞によって合成された化合物１当量を。
０℃で３０分から１時間、ベンゼンスルフォン酸［２％
のクロロホルム／メタノール＜７．３．ｖ／■）溶液］
で処理する。混合物をクロロホルムに溶かし、５％Ｎａ
ｌ」ＣＯ３水溶液で洗浄してＮａ２ＳＯ４を除き、減圧
下で濃縮する。ＤＭＴｒ（Ｔ乎）５丁−Ａｒ　１当量を
この残留物に加え。
その中の微量の水を、ピリジンで３回蒸発させることに
より、とり除く。ＭＳＴ２．５当量をこの溶液に加え１
例Ｉ−３＞と同様に、溶媒としてＣＨ２ＣＯ２／［」２
０／アレトン＜５４：１：４５；４６：２：５２と３８
：２：６０．　Ｖ／Ｖ　）を使ったシリカゲルクロマト
グラフィーで精製する。
５〉　例■−３）と同様の方法で、ＢＨＡ／ＤＢＵ溶液
６０当量を使い、オリゴヌクレオチドの保護基をはずす
。そのリテンションタイムを第１表に示す。
例ＩＶ 例■と同様の方法で合成される。例■のエチレンジアミ
ンの部分を１．４−ジアミノブタンで置きかえたオリゴ
ヌクレオチドが得られる。リテンションタイムを第１表
に示す。
無水ピリジン中で、メチルピロポルフィリンＸＸＩ！導
体１当量（例■−１）により合成される）、ヘキサヌク
レオチドＡｒ　−（Ｔ壬）６ＣＨ２０町ＣＮ　　１当量
（フランス国特許ＮＯ，８３１０’１，２２３により合
成される）、ＭＳ７３当量を。
室温で１時間かきまぜながら反応させる。過剰なＭＳＴ
を０℃前後の冷水を加えてこわした後、生成物をクロロ
ホルムで抽出し、溶媒としてＣＨ２０Ｑ２　／１．１．
２０／アセトン（５４二１：４５と４６：２：５２．ｖ
／ｖ）を使ったシリカゲルクロマトで精製する。
例ｖ−１）の化合物（１当団）を、空温で２時間、ピリ
ジン／トリエチルアミン（２：　１．　ｖ／ｖ　）溶液
で処理する。溶媒を減圧下で除き、得られた固形物を、
エーテルで洗浄する。王手（ＣＨ２〉５Ａｃｒ１当量（
フランス国特許Ｎｏ、８３１０１．２２３により合成さ
れる）をこの生成物に加える。混合物をピリジンを使い
、蒸発させ、かわかす。ＭＳＴ２．５当量をこの溶液に
加え１例ニー３）と同様に、シリカゲル［分取用プレー
ト。
１ＷｃＨ２ＣＯ２／Ｍｅ　ＯＨ（８５：　１５．　ｖ／
ｖ　）］のクロマトグラフィーによって化合物を精製す
る。　　　・ ３）　例Ｖ−２）によって合成され、保護されたヘプタ
ヌクレオチド（１当量）を、４０時間。
空温でＢＨＡ／ＤＢＵ　（７０当量〉のモル溶液で処理
する。反応媒質を、ＤＯＷＥＸ５０　（ピリジニウム系
）で中和し、濾過し、溶媒を減圧下で除く。残留物を水
に溶かし、水相をエーテルで洗浄する。得られた生成物
を、液体クロマトグラフィーにより（イオン交換によっ
て２次いで逆相中で）精製する。第１表に合成されたオ
リゴヌクレオチドのリテンションタイムを示す。
ＤＭＴｒ　　（Ｔ王）５　Ｔ　　Ａｒ　１．３当量。
１当量、ＭＳＴ３当量から１例ニー３）の場合と同様の
方法により、保護されたヘキサヌクレオチドが得られる
。
保護基をはずした後１例■−３）と同様の方法で生成物
を精ＷａＶる。精製された化合物のりテンションタイム
を第１表に示ず。
例■ １）ｄＴｗＴｖｖ王ｖ壬Ｔ苓ｂｚＡ　Ｔ　ｂｚＡ　寥Ｔ
苓Ｔ　Ｔ　Ｔ　＄　（ＣＨ２）５Ａｃｒこの化合物はフ
ランス国特許Ｎｏ、８３１０１゜２２３により以下の反
応機構で合成される。
・　　　　　　　　　ド ３　　ス 例Ｉ−２＞と工’−３＞の場合と同様の方法で充分に保
護された土量体ヌクレオチドが合成される。
ただし、　■−２＞のくＴ不＞６（ＣＩ−１２＞５△ｃ
ｒ及びニー３）のＡｒ　−＜Ｔ手）６　（ＣＨ２）５Ａ
ｃｒは、それぞれｄ（Ｔ＋＞５　　（ｂＺＡ＋＞２　　
＜Ｔ±）　３　　（ＣＨ２＞　５　Ａｃｒ及びｄＡｒ　
−（Ｔ王）５（ｂＺ　Ａ＋＞　　（Ｔ手）　３　（ＣＨ
２＞　５　Ａｃｒで置きかえられる。
ＨＦｆｉｒクロマトグラフィーニジリカゲル６０Ｆ２５
４：溶媒ＣＨ２ＣＱ２　／Ｍｅ　ｏＨ（９：　１　、　
ｖ／ｖ　）、Ｒｆ約０．１゜ ３）　上記（例■−２〉）で合成された充分に保護され
た土量体ヌクレオチドを使って１例ニー４〉と同様の方
法で１士量体の保１１Ｍをはずず。
ＨＰＬＣのリテンションタイムは以下のとおりである。
ｐｏｌｙａｎｉｏｎＨＲ５／　５カラム（Ｐ　ｈａｒｍ
ａｃ　ｉａ）、流速１厩／分、溶媒１０−２ＭＮａ　Ｃ
Ｑと２ＭＮａ　ＣＱ、１２分間に２ＭＮａ　ＣＱを０％
から１００％まで直線的に階調させる。リテンションタ
イム：１０分８秒。
Ｌ　ｉ　Ｃｈｒｏｓｏｒｂ　ＲＰ　−１８カラム（Ｍｅ
ｒｃｋ）　。
流速１．２戒／分、溶媒Ｃ）−１３ＯＮ／トリエチル酢
酸アンモニウム（１０重量％水溶液）／水（１５，８：
９．４７　：　７４，７２．ｖ／ｖ　）（１）Ｈ５゜９
）、均一濃度、リテンションタイム：３分５１秒。
第１表 （第１表の注釈） ＨＰＬＣ，Ｌｉ　Ｃｈｒｏｓｏｒｂ　ＲＰ−１８カラム
（Ｍ　ｅｒｃｋ）　；流速１．２ｄ／分Ａ　：　ＣＨ３
ＯＮ　、　ＡＡｃ　、水（２：１０：８８゜ｖ／ｖ　）
　　（ｐ　Ｈ５，９＞ （第゛１表の注釈の続き〉 Ｂ：ＣＨ３ＣＮ、　　ＡＡｃ　　、　　水　（４８：１
０：４２、ｖ／ｖ　）（ｐＨ５，９） Ｂ　＝　：　ＣＨ３ＣＮ、　ＡＡｃ　、水（２４：１０
：６６、　　ｖ／ｖ　　）　　　（Ｄ　　Ｈ５，９＞Ａ
Ａｃ　：酢酸アンモニウム水溶液、１０重凹％（ｐ　ト
１５．　９＞ 例■　　化合物によるｐｏｌｙ（ｄＡ）の特異的なその
３−末端がターミナルトランスフエラーげと［α−３２
’　］　ｄＡＴＰでラベルされたｐｏｌｙ（ｄＡ）に、
ラベルされていないポリヌクレオチドを加える。この時
、全体のポリヌクレオチドの濃度が、ラベルされたもの
の１０〜５０倍になるようにする。それ故、全体の濃度
は、ラベルされていないポリヌクレオチドのもので近似
される。
上記ポリヌクレオチド溶液に、Ｆｃ　　（ＮＨ４）２　
（Ｓ０４）２の新しい溶液、過酸化水素、トリス緩衝液
ｐＨ８，３，塩化すｌ〜ツリウム加える。
複数の試験管の中に凍結乾燥させたオリゴヌクレオチド
を分配し、総体積が４．５μΩになるようにする。分裂
反応は、５０ｍＭジチ第１〜レイトー／Ｉ／　（ＤＴＴ
＞０．５μΩを加えることにより始まる。最終濃度は［
Ａ］＝５０μＭ、［ＥＤＴＡ−Ｆｅ　Ｊ＝２０μＭ、［
Ｎａ　ＣΩ］　＝１６０ｍ　Ｍ。
ＬＴｒｉｓ　（Ｄ　Ｈ８，３）　］　＝８ｍ　Ｍ、　［
１−１２０２］＝１ｍ　Ｍと［ＤＴＴ］　＝５ｍ　Ｍ。
分裂反応は第３級ブタノール２μΩを加えると止まる。
第３級ブタノールは分裂反応の媒体である水醒基を！−
ラップする。試料を凍結乾燥し、フォルムアミド３μΩ
中で再懸濁し、アクリルアミド８％（１／２０架措）と
尿素５０％の割合で配列しているゲル上に加える。
電気泳動時間は２時聞半＜１３００Ｖで）である。ゲル
は２０℃でコダック（登録商標）フィルムを用いて自動
放射撮影をされる。第１図はボリアクリルアミドゲル上
での電気泳動の結果を表し。
異なった添加剤存在下で、１′４０分間１９℃で。
ｐｏｌｙ（ｄＡ）をインキュベートした効果を示してい
る。使用された濃度は、上記に記しである。
［Ａ：Ｈ２０２＋Ｆｅ　（ＩＩ）　：Ｂ：町０２＋Ｆｅ
　（ＩＩ）　＋ＤＴＴ　：Ｃ：Ｈ２ｏ２＋Ｆｅ　（ＩＩ
）　＋ＤＴＴ＋ＥＤＴＡ　（エチレンジアミン四酢酸）
；Ｄ　：Ｈ２０２＋Ｆｅ　（ＩＩ）　＋ＤＴＴ＋　（Ｔ
Ｐ＞、７（ＣＩ−１２）　６Ｎ）−１−ＥＤＴＡ　：　
Ｅ　：　ｔ−＋２０□十Ｆｅ　　（ＩＩ＞＋ＤＴＴ＋Ｅ
ＤＴＡ　　ＮＨ（ＣＨ２＞６ｐ（ＴＩ））６　（ＣＨ２
）　５　Ａｃｒｌ。
オリゴヌクレオチドＥＤＴＡ−ＮＨ（ＣＨ２）６１）　
（ＴＩ））６　　（ＣＨ２）　５　Ａｃｒは、たいへん
効果的に、ｐｏｌｙ（ｄＡ）を完全な形にしている主結
合を消滅させ、様々な大きさのフラグメント（たいへん
短いフラグメントも含む）に相当する結合を形成させる
ように、ｐＯＩＶ（ｄＡ＞を加水分解する。
オリゴヌクレオチド＜ＴＰ＞７　（ＣＨ２）６　ＮＨ−
ＥＤＴＡはほとんど効果をもたない。エチレンジアミン
四酢酸のみでは同じ条件下でｐｏｌｙ（ｄＡ）に対し実
質的に効果はもたない。ｐｏｌｙ（ｄＡ）が１）ＯＩＹ
（ｄＴ）に置換された場合は、ＥＤＴＡ−ＮＨ（ＣＨ２
）　６　ｐ（Ｔｐ）６　　（ＣＨ２＞　５　Ａｃｒの存
在下で、加水分解は、おこらない。この実験は。
反応がヘキサチミジル塩に相補的な塩基配列に対して特
異的であることを実証している。
例■　　例■の化合物によるｐｏｌｙ（ｄＡ）の特異的
な分裂 例■と同様に、ラベルされたｐｏｌｙ（ｄＡ）　　＜１
μ度１９μＭ）を、化合物Ｖｌ（５μＭ）、フェナント
ロリン（５μＭ＞、Ｃｕ　　（ＩＦ＞（５μＭ＞及びジ
チオトレイトール（１ｍＭ＞存在下の、０．１ＭＮａ　
ＣＱ含有リン酸バッファー　（５０ｍ　Ｍ＞中で、２０
℃でインキュベートする。ｐｏｌｙ（ｄＡ）は、これら
の条件下で１選択的に減成される。ｐＯＩｙ（ｄＴ）や
二重らせんの１）０１’！／（ｄＡ）・ｐｏｌｙ（ｄＴ
）には、効果を及ぼさない。反応混合物の成分の一つで
も欠如すると、この分裂反応は起こらない。化合物■が
同温度（５μＭ）で遊離フェナントロリンにより置換さ
れた場合には、　ｐｏｌｙ（ｄＡ）、二重らせんのｐｏ
ｌｙ（ｄＡ）・Ｑｌｉｇ。
（６丁）８及びｐｏｌｙ（ｄＡ）・ｐｏｌｙ（ｄＴ）に
分裂反応はおこらない。
【図面の簡単な説明】
第１図は本発明の第８の実施例において行われた。ポリ
アクリルアミドゲル上での電気泳動の結果を表わす自動
放射影像写真である。

Claims (1)

  1. 【特許請求の範囲】 １　天然又は修飾ヌクレオチド配列を有し、インターカ
    レートなラジカル及び反応性化学ラジカルに、又は反応
    性化学ラジカルを兼ねるインターカレートなラジカルに
    、共有結合している、オリゴヌクレオチド又はオリゴデ
    オキシヌクレオチドから構成されている化学化合物。 ２　一般式が ▲数式、化学式、表等があります▼（Ａ） で示される化合物であって、この一般式（Ａ）において
    、 複数のラジカルＢは同一のものでも異なっているもので
    もよく、各々天然又は修飾核酸塩基を示し、 複数のラジカルＸもまた同一のものでも異なっているも
    のでもよく、各々酸素陰イオンＯ＾−、イオウ陰イオン
    Ｓ＾−、アルキル基、アルコキシ基又はアリールオキシ
    基、含窒素複素環で置換されているアルコキシ基又はア
    ルキル基、アミノアルキル基、アミノアルコキシ基、チ
    オアルキル基又は−Ｙ−Ｚ基を示し、 ＲとＲ′は同一でも異なっていてもよく、各々−Ｙ−Ｚ
    基と−Ｙ′−Ｚ′基を示し（ここでＹとＹ′は直線又は
    分枝アルキレンラジカル−ａｌＫ−、▲数式、化学式、
    表等があります▼及び▲数式、化学式、表等があります
    ▼（ここでＥはＸと同様のものである。）、ラジカル−
    ａｌＫ−Ｏ−ａｌＫ−、▲数式、化学式、表等がありま
    す▼ 、▲数式、化学式、表等があります▼ 又は▲数式、化学式、表等があります▼ を示し、ＺとＺ′は各々インターカレートなラジカル又
    は直接的または間接的にヌクレオチド鎖と反応する少な
    くとも一つの基を持つラジカルを示す。反応性化学ラジ
    カルが同時にインターカレートなラジカルである場合に
    は、ＲとＲ′のどちらか一つは水素でもよく、一般式（
    Ａ）で示される化合物が、少なくとも一つのインターカ
    レートなラジカルと反応性化学ラジカルを持つ条件下で
    Ｚ又はＺ′が反応性化学ラジカルを兼ねるインターカレ
    ートなラジカルである場合には、ＺとＺ′は同一のもの
    でもよいし、又はＲとＲ′のどちらか一つが水素でもよ
    い。）、 Ｌは酸素原子、イオウ原子又は−ＮＨ−基を示し、 Ｊは水素原子又は水酸基を示し、 ｎはＯを含む整数であるところの特許請求の範囲第１項
    に記載されたオリゴヌクレオチド又はオリゴデオキシヌ
    クレオチドから構成されている化学化合物。 ３　上記インターカレートなラジカルが平面構造を有す
    る多環式化合物から誘導されるところの特許請求の範囲
    第２項に記載されたオリゴヌクレオチド又はオリゴデオ
    キシヌクレオチドから構成されている化学化合物。 ４　上記インターカレートなラジカルがアクリジン、フ
    ロクマリン、ドゥノマイシン、１，１０−フェナントロ
    リン、フェナントリジニウム、ポルフィリン、ジピリド
    ［１，２−ａ：３′、２′−ｄ］イミダゾール誘導体、
    エリプチシン又はエリプチシニウム及びこれらのインタ
    ーカレートな試薬の誘導体から誘導されるところの特許
    請求の範囲第３項に記載されたオリゴヌクレオチド又は
    オリゴデオキシヌクレオチドから構成されている化学化
    合物。 ５　上記反応性化学基がエチレンジアミン四酢酸の誘導
    体、ジエチレントリアミン五酢酸の誘導体、ポルフィリ
    ンの誘導体及び１，１０−フェナントロリンの誘導体の
    うちの一つであるところの特許請求の範囲第１項から第
    ４項のいずれかに記載されたオリゴヌクレオチド又はオ
    リゴデオキシヌクレオチドから構成されている化学化合
    物。 ６　上記ラジカルＢがチミン、アデニン、２−アミノア
    デニン、そのＮ＾６が例えばアミノアルキレン基又はア
    ジドフェニルアルキレン基で置換されている２−アミノ
    アデニン誘導体、シトシン、グアニン又はそのＯ＾６が
    例えば９−（ω−アルキレン）アクリジン基で置換され
    ているグアニン誘導体又は８−（ω−アミノアルキル）
    アミノアデニン及びそのω−ＮＨ＿２がアクリジン基で
    置換されている８−（ω−アミノアルキル）アミノアデ
    ニンの誘導体、ウラシル、５−ブロモウラシル、８−ア
    ジドアデニン又は光活性される塩基の誘導体に相当する
    ラジカルであるところの特許請求の範囲第１項から第５
    項のいずれかに記載されたオリゴヌクレオチド又はオリ
    ゴデオキシヌクレオチドから構成されている化学化合物
    。 ７　以下の化学式（Ｂ）〜（Ｈ）のいずれかにより示さ
    れるところの特許請求の範囲第１項に記載されたオリゴ
    ヌクレオチド又はオリゴデオキシヌクレオチドから構成
    されている化学化合物。 ▲数式、化学式、表等があります▼・・・（Ｂ） ▲数式、化学式、表等があります▼・・・（Ｃ） ▲数式、化学式、表等があります▼・・・（Ｄ） ▲数式、化学式、表等があります▼・・・（Ｅ） ▲数式、化学式、表等があります▼・・・（Ｆ） ▲数式、化学式、表等があります▼・・・（Ｇ） ▲数式、化学式、表等があります▼・・・（Ｈ） ８　保護基により充分に保護された誘導体が合成され、
    最後に該保護基が外されるという工程を含む、オリゴヌ
    クレオチド又はオリゴデオキシヌクレオチドから構成さ
    れている化学化合物の合成方法。 ９　リボ核酸及びデオキシリボ核酸配列に特異的な合成
    ヌクレアーゼとして適用する、オリゴヌクレオチド又は
    オリゴデオキシヌクレオチドから構成されている化学化
    合物の利用方法。 １０　リボ核酸及びデオキシリボ核酸から特異的な核酸
    フラグメントを得ることに適用される、オリゴヌクレオ
    チド又はオリゴデオキシヌクレオチドから構成されてい
    る化学化合物の利用方法。 １１　リボ核酸及びデオキシリボ核酸の第２級及び第３
    級構造を、目標となる塩基配列及びそれに近接した配列
    の選択的分断により、分析するための試薬として適用す
    る、オリゴヌクレオチド又はオリゴデオキシヌクレオチ
    ドから構成されている化学化合物の利用方法。 １２　核酸、特に生体中のメッセンジャーＲＮＡ、を選
    択的に分断し、減成させることへ適用する、オリゴヌク
    レオチド又はオリゴデオキシヌクレオチドから構成され
    ている化学化合物の利用方法。 １３　遺伝子又はそのメッセンジャーＲＮＡを選択的に
    分断することにより、該遺伝子の表現を選択的に阻害す
    る、特許請求の範囲第１２項に記載されたオリゴヌクレ
    オチド又はオリゴデオキシヌクレオチドから構成されて
    いる化学化合物の利用方法。 １４　薬剤として使用するオリゴヌクレオチド又はオリ
    ゴデオキシヌクレオチドから構成されている化学化合物
    の利用方法。
JP61208814A 1985-09-04 1986-09-03 オリゴヌクレオチド又はオリゴデオキシヌクレオチドから構成されている化学化合物、その合成方法及びその利用方法 Pending JPS62277395A (ja)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FR8513132 1985-09-04
FR8513132A FR2586704B1 (fr) 1985-09-04 1985-09-04 Nouveaux composes comportant une sequence d'oligonucleotide liee a un agent d'intercalation et a un groupe chimique activable, leur synthese et leurs applications a titre de nucleases artificielles specifiques de sequences. centre national de la recherche scientifique (cnrs)

Publications (1)

Publication Number Publication Date
JPS62277395A true JPS62277395A (ja) 1987-12-02

Family

ID=9322620

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP61208814A Pending JPS62277395A (ja) 1985-09-04 1986-09-03 オリゴヌクレオチド又はオリゴデオキシヌクレオチドから構成されている化学化合物、その合成方法及びその利用方法

Country Status (6)

Country Link
EP (1) EP0214908B1 (ja)
JP (1) JPS62277395A (ja)
AT (1) ATE58143T1 (ja)
CA (1) CA1279024C (ja)
DE (1) DE3675481D1 (ja)
FR (1) FR2586704B1 (ja)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AU619823B2 (en) * 1988-04-16 1992-02-06 Mitsui Chemicals, Inc. Process for production of aromatic carbonate compound
WO2007094218A1 (ja) * 2006-02-16 2007-08-23 Gifu University 修飾オリゴヌクレオチド

Families Citing this family (23)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0266099A3 (en) * 1986-10-28 1990-09-19 The Johns Hopkins University Oligonucleoside alkyl or arylphosphonate derivatives capable of crosslinking with or cleaving nucleic acids
US5789155A (en) 1987-10-30 1998-08-04 California Institute Of Technology Process for identifying nucleic acids and triple helices formed thereby
US5874555A (en) * 1987-10-30 1999-02-23 California Institute Of Technology Triple helices and processes for making same
DE3738460A1 (de) * 1987-11-12 1989-05-24 Max Planck Gesellschaft Modifizierte oligonukleotide
US5567687A (en) * 1989-03-06 1996-10-22 University Of Texas Texaphyrins and uses thereof
US6358931B1 (en) 1990-01-11 2002-03-19 Isis Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for modulating RNA
US5514786A (en) * 1990-01-11 1996-05-07 Isis Pharmaceuticals, Inc. Compositions for inhibiting RNA activity
US5210015A (en) 1990-08-06 1993-05-11 Hoffman-La Roche Inc. Homogeneous assay system using the nuclease activity of a nucleic acid polymerase
US6136601A (en) * 1991-08-21 2000-10-24 Epoch Pharmaceuticals, Inc. Targeted mutagenesis in living cells using modified oligonucleotides
US5595726A (en) * 1992-01-21 1997-01-21 Pharmacyclics, Inc. Chromophore probe for detection of nucleic acid
US5565552A (en) * 1992-01-21 1996-10-15 Pharmacyclics, Inc. Method of expanded porphyrin-oligonucleotide conjugate synthesis
US5607924A (en) * 1992-01-21 1997-03-04 Pharmacyclics, Inc. DNA photocleavage using texaphyrins
US6403302B1 (en) 1992-09-17 2002-06-11 California Institute Of Technology Methods and compositions for triple helix formation
FR2697254A1 (fr) * 1992-10-22 1994-04-29 Genset Sa Conjugués constitués par un oligonucléotide lié à des dérivés de métalloporphyrine cationique, leur préparation et leur utilisation.
US5798491A (en) * 1993-06-09 1998-08-25 Board Of Regents, The University Of Texas System Multi-mechanistic chemical cleavage using certain metal complexes
DE4418691A1 (de) * 1994-05-28 1996-02-22 Boehringer Mannheim Gmbh 3'-(4'-) nicht-radioaktiv markierte Nukleoside und Nukleotide mit Aminocarbonsäure-, Peptid- oder Carbonsäure-Spacer
US5837866A (en) * 1994-09-21 1998-11-17 Board Of Regents, The University Of Texas Phosphoramidite derivatives of macrocycles
US5633354A (en) * 1994-09-21 1997-05-27 Pharmacyclics, Inc. Phosphoramidite derivatives of texaphyrins
US5714328A (en) * 1995-06-07 1998-02-03 Board Of Regents, The University Of Texas System RNA photocleavage using texaphyrins
US6017700A (en) * 1995-08-04 2000-01-25 Bayer Corporation Cationic oligonucleotides, and related methods of synthesis and use
US6022959A (en) * 1996-08-20 2000-02-08 Pharmacyclics, Inc. Nucleic acids internally-derivatized with a texaphyrin metal complex and uses thereof
JP4207258B2 (ja) * 1998-08-31 2009-01-14 東ソー株式会社 特定核酸配列の切断方法
DE102004043155A1 (de) * 2004-09-03 2006-03-23 TransMIT Gesellschaft für Technologietransfer mbH Hochspezifisch mit DNA interagierende Enzym-Konjugate mit programmierbarer Spezifität

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2540122B1 (fr) * 1983-01-27 1985-11-29 Centre Nat Rech Scient Nouveaux composes comportant une sequence d'oligonucleotide liee a un agent d'intercalation, leur procede de synthese et leur application

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AU619823B2 (en) * 1988-04-16 1992-02-06 Mitsui Chemicals, Inc. Process for production of aromatic carbonate compound
WO2007094218A1 (ja) * 2006-02-16 2007-08-23 Gifu University 修飾オリゴヌクレオチド
JPWO2007094218A1 (ja) * 2006-02-16 2009-07-02 国立大学法人岐阜大学 修飾オリゴヌクレオチド

Also Published As

Publication number Publication date
CA1279024C (fr) 1991-01-15
FR2586704A1 (fr) 1987-03-06
FR2586704B1 (fr) 1987-12-18
ATE58143T1 (de) 1990-11-15
EP0214908B1 (fr) 1990-11-07
DE3675481D1 (de) 1990-12-13
EP0214908A1 (fr) 1987-03-18

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JPS62277395A (ja) オリゴヌクレオチド又はオリゴデオキシヌクレオチドから構成されている化学化合物、その合成方法及びその利用方法
US6534639B1 (en) Guanidinium functionalized oligonucleotides and method/synthesis
JP3535519B2 (ja) Ｎ−２置換プリン類
Garegg et al. Nucleoside H-phosphonates. IV. Automated solid phase synthesis of oligoribonucleotides by the hydrogenphosphonate approach
US5457195A (en) Sapphyrin derivatives and conjugates
Taylor et al. A building block for the sequence-specific introduction of cis-syn thymine dimers into oligonucleotides. Solid-phase synthesis of TpT [c, s] pTpT
US5292873A (en) Nucleic acids labeled with naphthoquinone probe
CA2386221C (en) Compounds for protecting hydroxyls and methods for their use
US5962674A (en) Synthesis of oligonucleotides containing alkylphosphonate internucleoside linkages
AU692143B2 (en) Oligonucleotides modified to improve stability at acid pH
US6005094A (en) Oligonucleotide analogues having improved stability at acid pH
FR2687679A1 (fr) Oligothionucleotides.
IL104965A (en) Coupled oligonucleotides cross-linked
FR2607507A1 (fr) Nouveaux derives a-d-oligonucleotides, leur preparation et leur emploi
Praseuth et al. Sequence-targeted photosensitized reactions in nucleic acids by oligo-. alpha.-deoxynucleotides and oligo-. beta.-deoxynucleotides covalently linked to proflavin
EP0290583B1 (fr) OLIGONUCLEOTIDES $g(a)
US20030153737A1 (en) Oligonucleotide and nucleotide amine analogs, methods of synthesis and use
KR960004931B1 (ko) Rna의 5' 캡 구조의 변형을 통하여 rna 활성을 조절하는 조성물 및 방법
Li et al. Site-specific photomodification of DNA by porphyrin− oligonucleotide conjugates synthesized via a solid phase H-phosphonate approach
JPH06500322A (ja) 慢性骨髄性白血病の治療剤としての、ソラーレンと結合したメチルりん酸オリゴヌクレオチド
AU664883B2 (en) Dual action 2',5'-oligoadenylate antiviral derivatives and uses thereof
US5643780A (en) Compositions and methods for modulating RNA activity through modification of the 5' cap structure of RNA
Kachalova et al. Methods for the synthesis of oligonucleotides containing reactive electrophilic groups
JPH05501418A (ja) オリゴヌクレオチドの官能化方法
Hwang et al. Transcription inhibition using modified pentanucleotides