JPS62273A - ウリ科植物の組織培養物の抽出物を配合した化粧料 - Google Patents
ウリ科植物の組織培養物の抽出物を配合した化粧料Info
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- JPS62273A JPS62273A JP60138360A JP13836085A JPS62273A JP S62273 A JPS62273 A JP S62273A JP 60138360 A JP60138360 A JP 60138360A JP 13836085 A JP13836085 A JP 13836085A JP S62273 A JPS62273 A JP S62273A
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は、ウリ科植物の組織培養により、増殖の迷いカ
ルスを誘導し、培養物を製造する方法および得られた組
織培養カルスの抽出物を配合したことを特徴とする化粧
料に関するものである。
ルスを誘導し、培養物を製造する方法および得られた組
織培養カルスの抽出物を配合したことを特徴とする化粧
料に関するものである。
従来から、ウリ科植物の果実の絞り汁または茎から浸出
する液汁を用いて化粧水にすることは、よく知られてい
る。特に、ヘチマの茎から浸出する液汁はヘチマ水とし
て、そのまま化粧水として使用されていた。その他、ウ
リ科植物の化粧料への利用については種々行なわれてお
り、例えば、ウリ科植物の果実や種子から採取した油の
利用（特公昭５５−４６８９２ ）、果実抽出粗苦味エ
キスにチロシナーゼ活性阻害効果が見られること（特開
昭５７−７７６１０ ）等が挙げられる。
する液汁を用いて化粧水にすることは、よく知られてい
る。特に、ヘチマの茎から浸出する液汁はヘチマ水とし
て、そのまま化粧水として使用されていた。その他、ウ
リ科植物の化粧料への利用については種々行なわれてお
り、例えば、ウリ科植物の果実や種子から採取した油の
利用（特公昭５５−４６８９２ ）、果実抽出粗苦味エ
キスにチロシナーゼ活性阻害効果が見られること（特開
昭５７−７７６１０ ）等が挙げられる。
しかしながら、化粧料基材として優れているウリ科植物
の栽培は、季節、気候、温度等の自然環境の制約を受は
易いため、栽培品からの採取では安定した供給が得られ
ないという問題があった。
の栽培は、季節、気候、温度等の自然環境の制約を受は
易いため、栽培品からの採取では安定した供給が得られ
ないという問題があった。
また、ウリ科植物のなかでも特にメロン類の果実は高価
であるとともに、果汁中に、果糖等の糖含量力ζ多いた
め、化粧料に配合した場合、使用感としてべたつくとい
う問題もあった。
であるとともに、果汁中に、果糖等の糖含量力ζ多いた
め、化粧料に配合した場合、使用感としてべたつくとい
う問題もあった。
最近、植物成分を生産する手段として、植物細胞培養の
研究が行なわれている。植物細胞培養は、天然植物、栽
培植物に比べ、生育速度が速く、短期間に目的とする成
分を生産することができ、ま、た、天然栽培とは異なり
気象条件等に左右されず、しかも工業的に計画生産する
ことができるという利点を有している。
研究が行なわれている。植物細胞培養は、天然植物、栽
培植物に比べ、生育速度が速く、短期間に目的とする成
分を生産することができ、ま、た、天然栽培とは異なり
気象条件等に左右されず、しかも工業的に計画生産する
ことができるという利点を有している。
本発明者らは、つ１ｊ科植物の組織培養によって、化粧
料基材として優れているウリ科植物の果汁または茎から
浸出する液汁に相当する組織培養カルス抽出物を製造す
ることを検討した結果一本発明を完成した。
料基材として優れているウリ科植物の果汁または茎から
浸出する液汁に相当する組織培養カルス抽出物を製造す
ることを検討した結果一本発明を完成した。
本発明で使用するウリ科植物は、ウリ科（Ｏｕ−ｃｕｒ
ｂｉｔａｃｅａｅ ） Ｓキュウリ属（Ｏｕｃｕｍｉａ
）のメロン（Ｃｕｃｕｍｉｓ ｍｅｌｏ Ｌ＋）およ
びヘチマ属（Ｌｕｆｆａ）のヘチマ（Ｌｕｆｆａ ｃｙ
ｌｉｎｄｒｉａａ Ｒｏｅｍ、）が例示される。さらに
、メロンとしては、ネットメロン〔Ｏｕｃｕｍｉｓ
ｍｅｌｏ Ｌ、（ｒｅｔｉｃｕｌａｔｕｓ ｇｒｏ
ｕｐ））、マクワウリ（Ｏｕｃｕｍｉｓ’ ｍｅｌｏ
Ｌ、 （ｍａｋｕｗａ ｇｒｏｕｐ）〕、ウィンターメ
ロン［Ｏｕｃｕｍｉｓ ｍｅｌｏ Ｌ、 （ｉｎ −０
ｄＯｒＯｕ８ ｇｒｏｕｐ）］ ％シロウリ［： Ｏｕ
ｃｕｍｉｓ ｍｅｌ。
ｂｉｔａｃｅａｅ ） Ｓキュウリ属（Ｏｕｃｕｍｉａ
）のメロン（Ｃｕｃｕｍｉｓ ｍｅｌｏ Ｌ＋）およ
びヘチマ属（Ｌｕｆｆａ）のヘチマ（Ｌｕｆｆａ ｃｙ
ｌｉｎｄｒｉａａ Ｒｏｅｍ、）が例示される。さらに
、メロンとしては、ネットメロン〔Ｏｕｃｕｍｉｓ
ｍｅｌｏ Ｌ、（ｒｅｔｉｃｕｌａｔｕｓ ｇｒｏ
ｕｐ））、マクワウリ（Ｏｕｃｕｍｉｓ’ ｍｅｌｏ
Ｌ、 （ｍａｋｕｗａ ｇｒｏｕｐ）〕、ウィンターメ
ロン［Ｏｕｃｕｍｉｓ ｍｅｌｏ Ｌ、 （ｉｎ −０
ｄＯｒＯｕ８ ｇｒｏｕｐ）］ ％シロウリ［： Ｏｕ
ｃｕｍｉｓ ｍｅｌ。
Ｌ、 （ｃｏｎｏｍｏｎ ｇｒｏｕｐ）） ％ およ
び交配種のプリンスメロン等が挙げられる。上記の分類
は、牧野富太部著「原色牧野植物大国鑑Ｊ ５４１−５
頁、１９８２年、北隆館発行、同続編１９０−１頁、１
９８３年、北隆館発行および高嶋四部著「原色日本野菜
図鑑」１４３−１６２頁、１９８２年、保育社発行によ
るものである。
び交配種のプリンスメロン等が挙げられる。上記の分類
は、牧野富太部著「原色牧野植物大国鑑Ｊ ５４１−５
頁、１９８２年、北隆館発行、同続編１９０−１頁、１
９８３年、北隆館発行および高嶋四部著「原色日本野菜
図鑑」１４３−１６２頁、１９８２年、保育社発行によ
るものである。
本発明で使用する植物組織培養カルスは、上述のウリ科
キュウリ属のメロンまたはウリ科ヘチマ属のヘチマを原
料とし、これから常法に従って誘導することにより得ら
れる。カルスを誘導する場合について、メロンを例にと
り、具体的な操作手順を示す。
キュウリ属のメロンまたはウリ科ヘチマ属のヘチマを原
料とし、これから常法に従って誘導することにより得ら
れる。カルスを誘導する場合について、メロンを例にと
り、具体的な操作手順を示す。
先ず、メロン種子を１晩水道水に浸漬後、２．５％沈亜
塩素酸す） ＩＪウム溶液に１０〜１５分間浸漬して表
面に付いている雑菌を殺菌した後、無菌蒸留水で洗浄す
る。ペーパータオルで水を吸い取った後、０，８％寒天
上で無菌的に発芽させる。暗所、２８℃で培養し、発芽
して５ｗ程度の大きさになったところで、１００Ｍ１の
ムラシゲ−スクーグ培地（Ｍｕｒａｓｈｉｇｅ ａｎｄ
Ｓｋｏｏｇ培地あるいはＭＳ培地）を入れた３００ゴ
のトールビーカーに移し、明所にて育てる。発芽１０〜
２ｏ日目の植物体を材料とする。次に、植物体を適当な
大きさに滅菌メスで切断して小片（例えば、子葉、胚軸
は３ｇ角程度、根は３〜５ｆｉ程度の長さ）とし、α−
ナフタレン酢酸などのオーキシン類およびカイネチンな
どのサイトカイニン類を含む合成培地（ＭＳ培地）上に
置床し培養する。培養は、２０〜３５℃の一定条件下の
明所または暗所において、好ましくは２８℃前後の明所
で行なうのがよい。
塩素酸す） ＩＪウム溶液に１０〜１５分間浸漬して表
面に付いている雑菌を殺菌した後、無菌蒸留水で洗浄す
る。ペーパータオルで水を吸い取った後、０，８％寒天
上で無菌的に発芽させる。暗所、２８℃で培養し、発芽
して５ｗ程度の大きさになったところで、１００Ｍ１の
ムラシゲ−スクーグ培地（Ｍｕｒａｓｈｉｇｅ ａｎｄ
Ｓｋｏｏｇ培地あるいはＭＳ培地）を入れた３００ゴ
のトールビーカーに移し、明所にて育てる。発芽１０〜
２ｏ日目の植物体を材料とする。次に、植物体を適当な
大きさに滅菌メスで切断して小片（例えば、子葉、胚軸
は３ｇ角程度、根は３〜５ｆｉ程度の長さ）とし、α−
ナフタレン酢酸などのオーキシン類およびカイネチンな
どのサイトカイニン類を含む合成培地（ＭＳ培地）上に
置床し培養する。培養は、２０〜３５℃の一定条件下の
明所または暗所において、好ましくは２８℃前後の明所
で行なうのがよい。
かかる培養により、−週間目には、切断面からカルスが
形成されるので、無菌的にこれを新しい合成寒天培地上
に移植し、前記と同様な培養法により、継代培養を行な
うと、生育速度がしだいに高まり安定したカルスが得ら
れる。
形成されるので、無菌的にこれを新しい合成寒天培地上
に移植し、前記と同様な培養法により、継代培養を行な
うと、生育速度がしだいに高まり安定したカルスが得ら
れる。
カルスの培養に用いられる培地組成としては、通常の植
物組織培養において多く用いられる前記のＭＳ培地、ホ
ワイト培地、ヒルデブランド培地、リンスマイヤー−ス
クーグ培地（ＬＳ培地）等いずれの培地でも良いが、Ｍ
Ｓ培地の様な比較的高濃度の培地が好ましい。このよう
な基本培地に、ビタミン、アミノ酸等の有機物、炭素源
、植物ホルモン、および天然抽出物を添加したものを用
いる。
物組織培養において多く用いられる前記のＭＳ培地、ホ
ワイト培地、ヒルデブランド培地、リンスマイヤー−ス
クーグ培地（ＬＳ培地）等いずれの培地でも良いが、Ｍ
Ｓ培地の様な比較的高濃度の培地が好ましい。このよう
な基本培地に、ビタミン、アミノ酸等の有機物、炭素源
、植物ホルモン、および天然抽出物を添加したものを用
いる。
上記有機物としては、チアミン塩酸塩、ニコチン酸、ピ
リドキシン、ビオチン等のビタミン、グルタミン、アス
パラギン、アラニン等のアミノ酸力２挙げられるが、こ
れら微量有機物は必ずしも培地に添加する必要はない。
リドキシン、ビオチン等のビタミン、グルタミン、アス
パラギン、アラニン等のアミノ酸力２挙げられるが、こ
れら微量有機物は必ずしも培地に添加する必要はない。
炭素源としては、シラ糖、ブドウ糖、麦芽糖、ソルビト
ール等の糖類が挙げられ、糖類を添加したほうが生育も
早く望ましい。特に、ショ糖の添加が好ましく、培地に
１〜６％（Ｗ／Ｖ ）添加するのが良い。
ール等の糖類が挙げられ、糖類を添加したほうが生育も
早く望ましい。特に、ショ糖の添加が好ましく、培地に
１〜６％（Ｗ／Ｖ ）添加するのが良い。
植物ホルモンとしては、α−ナフタレン酢酸（ＮＡＡ）
、２．４−ジクロロフェノキシ酢酸（２，４−Ｄ）、２
，４．５−）リクロロフヱノキシ酢酸（２゜４．５−Ｔ
）、インドール−３−酢酸（ＩＡＡ）、ピクロラム（ｐ
ｉｃ）等のオーキシン、カイネチン（ｘｉｎ）、ベンジ
ルアデニン（ＢＡ）等のサイトカイニンが挙げられ、こ
れらは単独または組合せて用いる。培地ｔこオーキシン
０．００１〜Ｉ Ｄ ｐｐｍ１サイトカイニン０〜１［
］ ｐｐｍ程度添加するのが好ましい。
、２．４−ジクロロフェノキシ酢酸（２，４−Ｄ）、２
，４．５−）リクロロフヱノキシ酢酸（２゜４．５−Ｔ
）、インドール−３−酢酸（ＩＡＡ）、ピクロラム（ｐ
ｉｃ）等のオーキシン、カイネチン（ｘｉｎ）、ベンジ
ルアデニン（ＢＡ）等のサイトカイニンが挙げられ、こ
れらは単独または組合せて用いる。培地ｔこオーキシン
０．００１〜Ｉ Ｄ ｐｐｍ１サイトカイニン０〜１［
］ ｐｐｍ程度添加するのが好ましい。
天然抽出物としては、ココナツツミルク（０〜２５％
Ｗ／Ｖ）、カゼイン加水分解物（０〜２％Ｗ／Ｖ）、酵
母エキス（０〜２％Ｗ／Ｖ ）等カアリ、これらは単独
または組み合せて使用することができる。なお、寒天固
型培地での培養では、上記の培地組成成分の他、寒天（
０，５〜２％Ｗ／Ｖ）を加え、培地を固めるのが好まし
い。
Ｗ／Ｖ）、カゼイン加水分解物（０〜２％Ｗ／Ｖ）、酵
母エキス（０〜２％Ｗ／Ｖ ）等カアリ、これらは単独
または組み合せて使用することができる。なお、寒天固
型培地での培養では、上記の培地組成成分の他、寒天（
０，５〜２％Ｗ／Ｖ）を加え、培地を固めるのが好まし
い。
培地は、最終的に、０，１〜１Ｎの水酸化す） ＩＪウ
ム（または水酸化カリウム）と塩酸によりｐＨ５、４−
６，０の間に調整する。
ム（または水酸化カリウム）と塩酸によりｐＨ５、４−
６，０の間に調整する。
明所培養は、１００〜１０，０００ルツクスの光照射下
において行なうのが好ましく、光源としては螢光灯、水
銀灯、白熱電灯、太陽光等を用いることができる。
において行なうのが好ましく、光源としては螢光灯、水
銀灯、白熱電灯、太陽光等を用いることができる。
なお、工業的にカルスを得るには、上記カルスを一般微
生物の培養と同じ操作で静置培養法、液体培養法（振盪
培養、通気培養）などを用いて大量増殖させれ−ばよい
。
生物の培養と同じ操作で静置培養法、液体培養法（振盪
培養、通気培養）などを用いて大量増殖させれ−ばよい
。
本発明によれば、前記のように植物体の外植片から直接
カルス化する方法の他、まず、植物体から酵素処理によ
ってプロトプラストを単離した後、このプロトプラスト
からカルス化する方法も用いることができる。
カルス化する方法の他、まず、植物体から酵素処理によ
ってプロトプラストを単離した後、このプロトプラスト
からカルス化する方法も用いることができる。
このようにして培養したカルスから、化粧料基材として
優れている成分を分離採取するには、公知の方法、例え
ば溶媒抽出法によって行なうことができる。
優れている成分を分離採取するには、公知の方法、例え
ば溶媒抽出法によって行なうことができる。
すなわち、本発明で用いるウリ科植物の組織培養カルス
の抽出物は、ウリ科植物の組織培養カルスヲ、例エバ、
水、エタノール、メタノール、プロピレングリコール等
の水溶性溶媒、あるいは、これらの混合溶媒で抽出した
ものであり、必要に応じて濃縮あるいは希釈して化粧料
基材として用いることができる。抽出操作は、通常、熱
水で、好ましくは、加圧条件下で、例えば、１２０〜２
００℃の温度で約３０〜１２０分熱水抽出する方法がよ
い。また、低温での抽出法も用いることができる。抽出
溶媒の使用量には特別な制約はないが、通常、ウリ科植
物の組織培養カルスの重量に対して、約１〜１００倍量
の溶媒を使用して抽出を行なうとよい。また、抽出は繰
り返し行なうことも可能である。
の抽出物は、ウリ科植物の組織培養カルスヲ、例エバ、
水、エタノール、メタノール、プロピレングリコール等
の水溶性溶媒、あるいは、これらの混合溶媒で抽出した
ものであり、必要に応じて濃縮あるいは希釈して化粧料
基材として用いることができる。抽出操作は、通常、熱
水で、好ましくは、加圧条件下で、例えば、１２０〜２
００℃の温度で約３０〜１２０分熱水抽出する方法がよ
い。また、低温での抽出法も用いることができる。抽出
溶媒の使用量には特別な制約はないが、通常、ウリ科植
物の組織培養カルスの重量に対して、約１〜１００倍量
の溶媒を使用して抽出を行なうとよい。また、抽出は繰
り返し行なうことも可能である。
本発明者らは、ウリ科植物の組織培養カルスの抽出物カ
ニ、保湿性に優れており、かつ、皮膚に対して優れた美
肌効果を与えることを見出した。さらに化粧料に配合し
たとき、皮膚の色つやを良くし、小シワの防止および改
善等の優れた整肌効果が得られるとともに保湿性が向上
することが見出された。また、皮膚に刺激を与えず、安
全性の高い化粧料となる。
ニ、保湿性に優れており、かつ、皮膚に対して優れた美
肌効果を与えることを見出した。さらに化粧料に配合し
たとき、皮膚の色つやを良くし、小シワの防止および改
善等の優れた整肌効果が得られるとともに保湿性が向上
することが見出された。また、皮膚に刺激を与えず、安
全性の高い化粧料となる。
さらに本発明のウリ科植物の組織培養カルスの水抽出成
分について、平井らの報告〔生薬学雑誌、旦、３７４−
３８０ ＜１９８３１］ に従ってラット腹腔内から採
取した肥満細胞に対するヒスタミン遊離抑制作用を測定
した。いずれもヒスタミン遊離作用は認められず、逆に
、フンカナバリンＡ（Ｃ’ｏｎＡ）あるいはフジパウン
ド４８ ／ ８０ （Ｃａｍｐ ４８／８０）によるヒ
スタミン遊離を抑制する作用が認められ、抗炎症剤（消
炎剤）としても優れていることを見出した（表１．２）
。
分について、平井らの報告〔生薬学雑誌、旦、３７４−
３８０ ＜１９８３１］ に従ってラット腹腔内から採
取した肥満細胞に対するヒスタミン遊離抑制作用を測定
した。いずれもヒスタミン遊離作用は認められず、逆に
、フンカナバリンＡ（Ｃ’ｏｎＡ）あるいはフジパウン
ド４８ ／ ８０ （Ｃａｍｐ ４８／８０）によるヒ
スタミン遊離を抑制する作用が認められ、抗炎症剤（消
炎剤）としても優れていることを見出した（表１．２）
。
※ １
表１． メロンのヒスタミン遊離抑制効果※２．乾燥
品５．Ｏｇを熱水抽出（９５℃、３時間、３００ｇｔ）
、移、濾過し、Ｐ液を凍結乾燥したもの。
品５．Ｏｇを熱水抽出（９５℃、３時間、３００ｇｔ）
、移、濾過し、Ｐ液を凍結乾燥したもの。
表２ ヘチマのヒスタミン遊離抑制効果 ※１※１．
遊離阻止率２％ ※２．乾燥品５．Ｏｇを熱水抽出（９５℃、５時間、３
０（ｌｌ＋／）後、ｐ過し、Ｐ液を凍結乾燥したもの。
遊離阻止率２％ ※２．乾燥品５．Ｏｇを熱水抽出（９５℃、５時間、３
０（ｌｌ＋／）後、ｐ過し、Ｐ液を凍結乾燥したもの。
※６ メンブランフィルタ−を用いて除菌後、凍結乾燥
したもの（収量１ｇ／６）。
したもの（収量１ｇ／６）。
表１．２からも明らかなように、本発明のメロンおよび
ヘチマの組織培養カルスの水抽出物は、メロンおよびヘ
チマの果実または全草の水抽出物、ヘチマ水等と同様な
抗炎症作用が認められた。
ヘチマの組織培養カルスの水抽出物は、メロンおよびヘ
チマの果実または全草の水抽出物、ヘチマ水等と同様な
抗炎症作用が認められた。
本発明によれば、ウリ科植物の組織培養カルスの抽出物
は、種々の化粧料基材とともに、基礎、メイクアップ、
頭髪化粧料等に用いることができる。また、これらの化
粧料は常法により製造できる０ 本発明で用いるウリ科植物の組織培養カルスの抽出物は
、化粧料基材に対して、０．００１〜２０．０％（Ｗ／
Ｗ ’）使用するのが好ましい。配合量が、０、００１
％（Ｗ／Ｗ ）より少ない量では充分な効果が得られず
、また、２０．０％（Ｗ／Ｗ ）を超える量では、効果
の増強がないので不経済である。
は、種々の化粧料基材とともに、基礎、メイクアップ、
頭髪化粧料等に用いることができる。また、これらの化
粧料は常法により製造できる０ 本発明で用いるウリ科植物の組織培養カルスの抽出物は
、化粧料基材に対して、０．００１〜２０．０％（Ｗ／
Ｗ ’）使用するのが好ましい。配合量が、０、００１
％（Ｗ／Ｗ ）より少ない量では充分な効果が得られず
、また、２０．０％（Ｗ／Ｗ ）を超える量では、効果
の増強がないので不経済である。
上記のウリ科植物の組織培養カルスの抽出物の使用量は
、抽出物を凍結乾燥、濃縮等により得られた乾燥品（粉
末またはエキス）を用いた場合の配合量である。抽出液
をそのまま使用するならば、１００％配合することも可
能である。
、抽出物を凍結乾燥、濃縮等により得られた乾燥品（粉
末またはエキス）を用いた場合の配合量である。抽出液
をそのまま使用するならば、１００％配合することも可
能である。
次に実施例を示しつつ本発明の培養法と化粧料の有効性
について説明する。なお、本発明の内容は、これらに限
定されるものではない。
について説明する。なお、本発明の内容は、これらに限
定されるものではない。
実施例１． メロンの組織培養
メロン種子を１晩水道水に浸漬後、２．５％次亜塩素酸
ナトリウム溶液に１０〜１５分間浸漬して表面に付着し
ている雑菌を殺菌した後、無菌蒸留水で洗浄する。ペー
パータオルで水を吸い取った後、０．８％（Ｗ／Ｖ ）
寒天上で無菌的に発芽させる。２８℃の暗所で培養し、
発芽後５間程度の大きさになったところで、ＭＳ培地１
００Ｎｌを入れた３００ｓ＋ｌ）−ルビーカーに移し、
白色帯光灯をつけた室内で育てる。発芽１０〜２０日目
の芽白目を適当な大きさに滅菌メスで切断して小片（子
葉、胚軸は３酩角程度、根は３〜５鰭程度の長さ）とし
、ショ糖３％、ＮＡＡＯ１５ｐｐｍｑ カイネチン１
．Ｏｐｐｍを含有し、寒天０８％加えたＭＳ培地ＣｐＨ
５，７、オートクレーブ（１２０℃、１．２ｋｇ ／
ｃｒｌ ）で２０分間滅菌したもの〕に置床し、２８℃
、４週間培養室内（明所）で静置培養してカルスを誘導
する。さらに得られたカルスを細かく分割し、前記培養
条件で、カルスの増殖を行なう。このような操作を４〜
６週間毎に繰り返す。
ナトリウム溶液に１０〜１５分間浸漬して表面に付着し
ている雑菌を殺菌した後、無菌蒸留水で洗浄する。ペー
パータオルで水を吸い取った後、０．８％（Ｗ／Ｖ ）
寒天上で無菌的に発芽させる。２８℃の暗所で培養し、
発芽後５間程度の大きさになったところで、ＭＳ培地１
００Ｎｌを入れた３００ｓ＋ｌ）−ルビーカーに移し、
白色帯光灯をつけた室内で育てる。発芽１０〜２０日目
の芽白目を適当な大きさに滅菌メスで切断して小片（子
葉、胚軸は３酩角程度、根は３〜５鰭程度の長さ）とし
、ショ糖３％、ＮＡＡＯ１５ｐｐｍｑ カイネチン１
．Ｏｐｐｍを含有し、寒天０８％加えたＭＳ培地ＣｐＨ
５，７、オートクレーブ（１２０℃、１．２ｋｇ ／
ｃｒｌ ）で２０分間滅菌したもの〕に置床し、２８℃
、４週間培養室内（明所）で静置培養してカルスを誘導
する。さらに得られたカルスを細かく分割し、前記培養
条件で、カルスの増殖を行なう。このような操作を４〜
６週間毎に繰り返す。
このようにして増殖したメロンの組織培養カルスを固形
培地から分離し、凍結乾燥する。収量１５ｇ。
培地から分離し、凍結乾燥する。収量１５ｇ。
上記培養条件では、子葉、胚軸、根切片のいずれもから
増殖の速いカルスを得ることができた。
増殖の速いカルスを得ることができた。
また、工Ａ Ａ、 ２．４− Ｄ％ビクロラムとカイネ
チンの組み合せでは、特に胚軸切片からのカルス誘導が
良好であった。さらに、胚軸由来のカルスを０．８％寒
天のみを含まない前記ＭＳ培地で１細胞懸濁培養を行な
ったところ、寒天を含む前記ＭＳ培地のときと同様、増
殖の迷いカルスが得られた。
チンの組み合せでは、特に胚軸切片からのカルス誘導が
良好であった。さらに、胚軸由来のカルスを０．８％寒
天のみを含まない前記ＭＳ培地で１細胞懸濁培養を行な
ったところ、寒天を含む前記ＭＳ培地のときと同様、増
殖の迷いカルスが得られた。
実施例２． メロンプロトプラストからの組織培養実
施例１と同様にしてメロンの種子を無菌的に発芽させ、
発芽１０〜２０日目の芽白目の子葉（生型０．２〜０．
３ ｇ ）を、０１％ペクトリアーゼＹ−２３，１，５
％セルラーゼオノヅカＲ−１０、Ｑ、 ４ Ｍ Ｔ ン
ニ）−ル、０．５％デキストラン硫酸カリウム、および
０．１％塩化カルシウムを加えた酵素液中に入れ、１〜
１．５時間、３０℃で振盪（５０回／分）シた。得られ
たプロトプラストを、５０μのナイロンメツシュで一過
後、８１１０ ｒｐｍ ％２分間遠心分離を行なって酵
素液を除き、０．４Ｍマンニトール液に懸濁した。この
条件では、子葉１ｇ（生型）当り約５Ｘ１０’のプロト
プラストカ単離された。得られたプロトプラストを、２
ゴの液体培地に懸濁し、３５闘のファｉコン（０１０８
）プラスチックシャーレに入れて培養した。培地として
は、１％（ｗ／ｖ）シ、糖、０．４ Ｍ マンニトール
、０．５ ｐｐｍ Ｎ Ａ Ａ ％ １ ｐｐｍカイネ
チンを加えたＭＳ培地を用いた。この培地で、１×１０
５個／ ｇｔのプロトプラストを２８℃での静置培養す
ると、培養５日以内に、生存しているプロトプラストの
８０％以上が細胞壁を再生する。培養１４〜２０日目に
マ白目トール濃度を０．４Ｍから０．２Ｍに下げ、約１
カ月後に約０．５〜１．０鴎のコロニーを形成したとこ
ろで、マンニトールを含まない寒天培地にコロニーを移
す。６〜５關の大きさｔこなったコロニーを３％シジ糖
、０．５ｐｐｍ ＮＡＡ％ ｌｐｐｍカイネチンを加え
たＭＳ培地に置床し、２８℃、４週間培養室内で静置培
養してカルスを誘導する。さらに、実施例１と同様にし
て、メロンプロトプラストからのカルスを得た。収１ｋ
５．０ ｇ （凍結乾燥品）。
施例１と同様にしてメロンの種子を無菌的に発芽させ、
発芽１０〜２０日目の芽白目の子葉（生型０．２〜０．
３ ｇ ）を、０１％ペクトリアーゼＹ−２３，１，５
％セルラーゼオノヅカＲ−１０、Ｑ、 ４ Ｍ Ｔ ン
ニ）−ル、０．５％デキストラン硫酸カリウム、および
０．１％塩化カルシウムを加えた酵素液中に入れ、１〜
１．５時間、３０℃で振盪（５０回／分）シた。得られ
たプロトプラストを、５０μのナイロンメツシュで一過
後、８１１０ ｒｐｍ ％２分間遠心分離を行なって酵
素液を除き、０．４Ｍマンニトール液に懸濁した。この
条件では、子葉１ｇ（生型）当り約５Ｘ１０’のプロト
プラストカ単離された。得られたプロトプラストを、２
ゴの液体培地に懸濁し、３５闘のファｉコン（０１０８
）プラスチックシャーレに入れて培養した。培地として
は、１％（ｗ／ｖ）シ、糖、０．４ Ｍ マンニトール
、０．５ ｐｐｍ Ｎ Ａ Ａ ％ １ ｐｐｍカイネ
チンを加えたＭＳ培地を用いた。この培地で、１×１０
５個／ ｇｔのプロトプラストを２８℃での静置培養す
ると、培養５日以内に、生存しているプロトプラストの
８０％以上が細胞壁を再生する。培養１４〜２０日目に
マ白目トール濃度を０．４Ｍから０．２Ｍに下げ、約１
カ月後に約０．５〜１．０鴎のコロニーを形成したとこ
ろで、マンニトールを含まない寒天培地にコロニーを移
す。６〜５關の大きさｔこなったコロニーを３％シジ糖
、０．５ｐｐｍ ＮＡＡ％ ｌｐｐｍカイネチンを加え
たＭＳ培地に置床し、２８℃、４週間培養室内で静置培
養してカルスを誘導する。さらに、実施例１と同様にし
て、メロンプロトプラストからのカルスを得た。収１ｋ
５．０ ｇ （凍結乾燥品）。
実施例３． ヘチマの組織培養
ヘチマの種子を実施例１のメロンの場合と同様にして、
乾燥カルス２１ｇを得た。
乾燥カルス２１ｇを得た。
なお、添加する植物ホルモンは、どの部位においても、
２．４−Ｄのみか、あるいは、２．４−’Ｄとカイネチ
ンを添加した培地が特に適しており、増殖の迷いカルス
が得られた。それらのホルモンの最適濃度を表３に示す
。
２．４−Ｄのみか、あるいは、２．４−’Ｄとカイネチ
ンを添加した培地が特に適しており、増殖の迷いカルス
が得られた。それらのホルモンの最適濃度を表３に示す
。
表３． ヘチマ切片からのカルス誘導に最適な植物ホル
モンの濃度 実施例４． メロン子葉カルスの水抽出物メロン子葉カ
ルス（凍結乾燥品）５．０ｇを粉砕した後、水３００
ｇｌを用いて、９５℃、３時間抽出する。加熱後、残渣
を戸別し、ついで＼ｐ液を凍結乾燥して淡白色〜淡黄色
のメロン子葉カルスの抽出物（粉末）２．ｓｇを得た。
モンの濃度 実施例４． メロン子葉カルスの水抽出物メロン子葉カ
ルス（凍結乾燥品）５．０ｇを粉砕した後、水３００
ｇｌを用いて、９５℃、３時間抽出する。加熱後、残渣
を戸別し、ついで＼ｐ液を凍結乾燥して淡白色〜淡黄色
のメロン子葉カルスの抽出物（粉末）２．ｓｇを得た。
同様な操作により、メロン胚軸カルス、５．０ ｇ Ｊ
：リメロン胚軸の水抽出物２．８ｇｓメロン根カルス５
、Ｏｇよりメロン根カルスの水抽出物２．７ｇ、および
メロン子葉プロトプラストから誘導したカルス５．Ｏｇ
よりメロン子葉プロトプラストから誘導したカルスの水
抽出物２．８ｇを得た。
：リメロン胚軸の水抽出物２．８ｇｓメロン根カルス５
、Ｏｇよりメロン根カルスの水抽出物２．７ｇ、および
メロン子葉プロトプラストから誘導したカルス５．Ｏｇ
よりメロン子葉プロトプラストから誘導したカルスの水
抽出物２．８ｇを得た。
実施例５． ヘチーマ子葉カルスの水抽出物ヘチマ子葉
カルス（凍結乾燥品） ５．０ ｇを粉砕した後、水３
００ ｍｌを用いて、９５℃、３時間抽出する。加熱後
、残遺を戸別し、ついでｐ液を凍結乾燥して淡白色〜淡
黄色のヘチマ子葉カルスの抽出物（粉末） １．７ ｇ
を得た。
カルス（凍結乾燥品） ５．０ ｇを粉砕した後、水３
００ ｍｌを用いて、９５℃、３時間抽出する。加熱後
、残遺を戸別し、ついでｐ液を凍結乾燥して淡白色〜淡
黄色のヘチマ子葉カルスの抽出物（粉末） １．７ ｇ
を得た。
同様な方法により、ヘチマ胚軸カルス５． Ｄ ｇより
ヘチマ胚軸カルスの抽出物１．７ ｇ ％ヘチマ根カル
スよりヘチマ根カルスの抽出物１，８ｇを得た。
ヘチマ胚軸カルスの抽出物１．７ ｇ ％ヘチマ根カル
スよりヘチマ根カルスの抽出物１，８ｇを得た。
実施例６．化粧水
処方 配合量Ａ）メロ
ン子葉カルスの水抽出物 ０，７部１．３−ブチレ
ングリコール ８．０グリセリン
２．０キサンダンガム ０，２
精製水 ４４．６Ｂ）エタノー
ル ５．０防腐剤
適量ポリオキシエチレン（４０）硬化ヒ
マシ油香料 適量精製水
１００製造方法：成分Ａおよび
成分Ｂをそれぞれ均一に溶解後、混合し製品とする。
ン子葉カルスの水抽出物 ０，７部１．３−ブチレ
ングリコール ８．０グリセリン
２．０キサンダンガム ０，２
精製水 ４４．６Ｂ）エタノー
ル ５．０防腐剤
適量ポリオキシエチレン（４０）硬化ヒ
マシ油香料 適量精製水
１００製造方法：成分Ａおよび
成分Ｂをそれぞれ均一に溶解後、混合し製品とする。
実施例Ｚ 化粧水
メロン子葉カルスの水抽出物の代わりに、ヘチマ子葉カ
ルスの水抽出物を用いて、実施例６と同様にして、化粧
水を得た。
ルスの水抽出物を用いて、実施例６と同様にして、化粧
水を得た。
実施例８、化粧水
メロン子葉カルスの水抽出物の代わりに、メロン子葉プ
ロトプラストから誘導したカルスの水抽出物を用いて、
実施例６と同様にして、化粧水を得た。
ロトプラストから誘導したカルスの水抽出物を用いて、
実施例６と同様にして、化粧水を得た。
比較例１． 化粧水
実施例６からメロン子葉カルスの水抽出物を除いた処方
で、化粧水を調製した。
で、化粧水を調製した。
実施例９ スキンクリーム
処方
Ａ）ステアリン酸 ４．０セチルア
ルコール ３．０ステアリルアルコール
１．０流動パラフイン
６．５ワセリン ｉｏ、。
ルコール ３．０ステアリルアルコール
１．０流動パラフイン
６．５ワセリン ｉｏ、。
ソルビタンモノステアレート１．５
ホ＋）オキシエチレン（２５）モノステアレート３０
Ｂ）１．３−ブチレングリコール ５．０水酸化
カリウム ０．１ヘチマ胚軸カルスの
水抽出物 ０．８防腐剤
適量精製水 ６５．１０）香
料 適量製造方法：油相成
分Ａおよび水相成分Ｂをそれぞれ７０〜７５℃に加熱溶
解した後、成分Ａに成分Ｂを加えて乳化し、冷却途上で
成分Ｃを加えて混合し、３０℃まで冷却し製品とする。
カリウム ０．１ヘチマ胚軸カルスの
水抽出物 ０．８防腐剤
適量精製水 ６５．１０）香
料 適量製造方法：油相成
分Ａおよび水相成分Ｂをそれぞれ７０〜７５℃に加熱溶
解した後、成分Ａに成分Ｂを加えて乳化し、冷却途上で
成分Ｃを加えて混合し、３０℃まで冷却し製品とする。
実施例１０． 乳液
処方
Ａ）ステアリン酸 ５・０セチルア
ルコール ５．０流動パラフイン
２．０グリ七リンモノステアレート１．６ ソルビタンモノオレート １．５ポリオキシエ
チレン（１０）ソルビタンモノオレート
０．８Ｂ）グリセリン
６．０メロン胚Ｍカルスの水抽出物ａ、ｓ 防腐剤 適量精製水
７７９Ｃ）香料
適量製造方法：実施例９と同様にして、製品と
する。
ルコール ５．０流動パラフイン
２．０グリ七リンモノステアレート１．６ ソルビタンモノオレート １．５ポリオキシエ
チレン（１０）ソルビタンモノオレート
０．８Ｂ）グリセリン
６．０メロン胚Ｍカルスの水抽出物ａ、ｓ 防腐剤 適量精製水
７７９Ｃ）香料
適量製造方法：実施例９と同様にして、製品と
する。
実施例１１． パック
処方
グリセリン １５．０１．３−ブチレ
ンゲリコール １０．０ポリオキシエチレン（４０
）硬化ヒマシ油０．５ メロン根カルスの水抽出物 ２． Ｃｌクエン酸
０．１クエン酸ナトリウム
０．３防腐剤
適量香料 適量精製水
７２．１製造方法：各成分を均
一に溶解し製品とする。
ンゲリコール １０．０ポリオキシエチレン（４０
）硬化ヒマシ油０．５ メロン根カルスの水抽出物 ２． Ｃｌクエン酸
０．１クエン酸ナトリウム
０．３防腐剤
適量香料 適量精製水
７２．１製造方法：各成分を均
一に溶解し製品とする。
本発明のウリ科植物カルスの抽出物の安全性を明らかに
するため、人体に対する一次刺激性試験を閉塞パッチテ
ストにより行なった。すなわち、フィンチャンバー（大
正製薬）を用い、健康人３０名に対し、前腕層側部に４
８時間閉塞貼布を行ない、パッチテスト用絆創膏除去後
、１時間後、２４時間後、および４８時間後の判定の平
均値を行いて判定した。ウリ科植物カルスの抽出物のい
ずれの場合も、明らかな紅斑は認められず、−次刺激性
が低いことが確認された。なお、試料はそれぞれ１０％
（Ｗ／Ｗ ）水溶液のものを用いて試験を行なった（表
４）。
するため、人体に対する一次刺激性試験を閉塞パッチテ
ストにより行なった。すなわち、フィンチャンバー（大
正製薬）を用い、健康人３０名に対し、前腕層側部に４
８時間閉塞貼布を行ない、パッチテスト用絆創膏除去後
、１時間後、２４時間後、および４８時間後の判定の平
均値を行いて判定した。ウリ科植物カルスの抽出物のい
ずれの場合も、明らかな紅斑は認められず、−次刺激性
が低いことが確認された。なお、試料はそれぞれ１０％
（Ｗ／Ｗ ）水溶液のものを用いて試験を行なった（表
４）。
表４ 人体閉塞貼布試験結果
さらに本発明化粧料の効果を明らかにするため２５〜５
０才の一般女性３０名を対象に使用試験ヲ行すい、ダブ
ルブラインド法により、整肌効果を中心にアンケート調
査を行なった。メロン子葉カルスの水抽出物配合の化粧
水（実施例６）、ヘチマ子葉カルスの水抽出物配合の化
粧水（実施例７）、メロン子葉プロトプラストから誘導
したカルスの水抽出物配合の化粧水（実施例８）、およ
びメロンまたはヘチマカルスの水抽出物を全く含まない
従来の化粧水（比較例１）を１ケ月間使用した結果を表
５にまとめて示す。なお、使用期間中の皮膚トラブルは
１件も発生しなかった。
０才の一般女性３０名を対象に使用試験ヲ行すい、ダブ
ルブラインド法により、整肌効果を中心にアンケート調
査を行なった。メロン子葉カルスの水抽出物配合の化粧
水（実施例６）、ヘチマ子葉カルスの水抽出物配合の化
粧水（実施例７）、メロン子葉プロトプラストから誘導
したカルスの水抽出物配合の化粧水（実施例８）、およ
びメロンまたはヘチマカルスの水抽出物を全く含まない
従来の化粧水（比較例１）を１ケ月間使用した結果を表
５にまとめて示す。なお、使用期間中の皮膚トラブルは
１件も発生しなかった。
表５． 整肌効果のアンケート結果
表５でも明らかなように、メロンまたはヘチマカルスの
水抽出物を添加することにより、優れた整肌効果が得ら
れた。また、メロンまたはヘチマカルスのエタノール抽
出物においても同様な効果が認められた。
水抽出物を添加することにより、優れた整肌効果が得ら
れた。また、メロンまたはヘチマカルスのエタノール抽
出物においても同様な効果が認められた。
Claims (6)
- （１）ウリ科植物の組織培養により、増殖の速いカルス
を誘導し、培養物を製造する方法。 - （２）ウリ科植物が、ウリ科キュウリ属のメロンである
特許請求の範囲第（１）項記載の方法。 - （３）ウリ科植物が、ウリ科ヘチマ属のヘチマである特
許請求の範囲第１項記載の方法。 - （４）ウリ科植物の組織培養によって誘導したカルスの
抽出物を配合したことを特徴とする化粧料。 - （５）ウリ科植物が、ウリ科キュウリ属のメロンである
特許請求の範囲第（４）項記載の化粧料。 - （６）ウリ科植物が、ウリ科ヘチマ属のヘチマである特
許請求の範囲第（４）項記載の化粧料。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP60138360A JPS62273A (ja) | 1985-06-25 | 1985-06-25 | ウリ科植物の組織培養物の抽出物を配合した化粧料 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP60138360A JPS62273A (ja) | 1985-06-25 | 1985-06-25 | ウリ科植物の組織培養物の抽出物を配合した化粧料 |
Related Child Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP62009609A Division JPS62190075A (ja) | 1987-01-19 | 1987-01-19 | ウリ科植物の組織培養物の製造法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS62273A true JPS62273A (ja) | 1987-01-06 |
| JPH0421641B2 JPH0421641B2 (ja) | 1992-04-13 |
Family
ID=15220111
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP60138360A Granted JPS62273A (ja) | 1985-06-25 | 1985-06-25 | ウリ科植物の組織培養物の抽出物を配合した化粧料 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS62273A (ja) |
Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH01242509A (ja) * | 1988-03-22 | 1989-09-27 | Ichimaru Pharcos Co Ltd | 野菜類抽出溶液配合化粧料 |
| JPH0429919A (ja) * | 1990-05-25 | 1992-01-31 | Sunstar Inc | 保湿化粧料 |
| KR100637342B1 (ko) * | 2003-10-30 | 2006-10-23 | 윤성용 | 천연 화장품 개발을 위한 캘러스의 용도 |
| KR101107871B1 (ko) | 2009-06-08 | 2012-01-25 | 주식회사 바이오에프디엔씨 | 벼 캘러스 추출물을 함유하는 화장료 조성물 |
| JP2014034537A (ja) * | 2012-08-08 | 2014-02-24 | Nippon Menaade Keshohin Kk | 皮膚のしわ形成防止・改善剤及び創傷治癒促進剤 |
| CN107873417A (zh) * | 2017-11-07 | 2018-04-06 | 朱卫东 | 一种丝瓜的种植方法 |
-
1985
- 1985-06-25 JP JP60138360A patent/JPS62273A/ja active Granted
Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH01242509A (ja) * | 1988-03-22 | 1989-09-27 | Ichimaru Pharcos Co Ltd | 野菜類抽出溶液配合化粧料 |
| JPH0429919A (ja) * | 1990-05-25 | 1992-01-31 | Sunstar Inc | 保湿化粧料 |
| KR100637342B1 (ko) * | 2003-10-30 | 2006-10-23 | 윤성용 | 천연 화장품 개발을 위한 캘러스의 용도 |
| KR101107871B1 (ko) | 2009-06-08 | 2012-01-25 | 주식회사 바이오에프디엔씨 | 벼 캘러스 추출물을 함유하는 화장료 조성물 |
| JP2014034537A (ja) * | 2012-08-08 | 2014-02-24 | Nippon Menaade Keshohin Kk | 皮膚のしわ形成防止・改善剤及び創傷治癒促進剤 |
| CN107873417A (zh) * | 2017-11-07 | 2018-04-06 | 朱卫东 | 一种丝瓜的种植方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0421641B2 (ja) | 1992-04-13 |
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