JPS62255434A

JPS62255434A - オリゴペプチド輸液

Info

Publication number: JPS62255434A
Application number: JP61097411A
Authority: JP
Inventors: Kunio Tagawa; 田川　邦夫; Wahei Kurosawa; 黒沢　和平
Original assignee: Fuji Oil Co Ltd
Current assignee: Fuji Oil Co Ltd
Priority date: 1986-04-26
Filing date: 1986-04-26
Publication date: 1987-11-07
Anticipated expiration: 2009-07-27
Also published as: JPH0655678B2

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】（産業上の利用分野）本発明はオリゴペプチド輸液に関する。更に詳しくは、
分子量５００〜５０００の比較的大きな水溶性オリゴペ
プチド混合物を必須構成成分とするオリゴペプチド輸液
を提供するものである。例えば、大豆蛋白等の植物性蛋
白酵素氷解物を分画して得る分子量５００〜５０００の
水溶性オリゴペプチド混合物の輸液を提供するものであ
る。

（従来技術）従来から、消化器官への栄養補給（経管栄養補給）とし
て、蛋白質、蛋白質の加水分解物、低分子ペプチド（デ
ィ、トリペプチド）、アミノ酸ｌ昆合物等が報告されて
いる。（Ｐｅｐｔｉｄｅ　Ｔｒａｎｓｐｏｒｔａｎｄ　
ｔ（ｙｄｒｏ１ｙｓｉ９．’７７、Ｅｌｓｅｖｉｅｒ−
Ｅｘｃｅｐｔａ　Ｍｅｄｉａ−Ｎ。

ｒｔ−！Ｉｏ１１ａｎｄ発行、特願昭５５−９４１６８
、特願昭５５−９４１６９等）ところが、消化器官が損傷を受ける等して、経口、経管
等による栄養補給が困難な場合、アミノ酸混合物輸液の
静脈注入により蛋白補給が行われてきた。近年、アミノ
酸に代わり主に合成によるディ、トリペプチド等の低分
子ペプチド輸液の静脈注入により蛋白補給も試みられて
おり（Ｍｅｔａｂ。

１１５ｍ　２２．（２）、１０３−１０５．　’　８３
）　、アミノ酸混合物に対する優位性が開示されている
。又、蛋白の酵素氷解物に関してはカゼインのベプチド
リンチな氷解物「アミゲン」の静脈注入の報告（Ｊ、Ｂ
ｉｏ、Ｃｈｃｍ、、１６６．６４９−６５２．’４６　
　、Ｃｌ１ｎ、Ｂｉｏｃｈｅｍ、、６．（１）、４６−
５２．７３等）が幾つかなされている。

しかし、本発明のような比較的高分子のペプチド、特に
植物性蛋白の水溶性氷解物の分画物の輸液は知られてい
ない。

（発明が解決しようとする問題点）従来から行われているアミノ酸輸液の静脈注入による蛋
白補給においては、■多く補給しようとすると、輸液の
浸透圧が高くなり血管を損傷したり、■沈澱を生じやす
いアミノ酸（ロイシン、チロシン等）や不安定なアミノ
酸（トリプトファン等）の補給が困難であったり、■い
くつかのアミノ酸は塩酸塩の状態で使用され輸液のｐＨ
を下げ、静脈注入した場合アシド−シスを起こしやすく
、■経済的に高価である等の問題を有する。又、ディ、
トリペプチド等の低分子ペプチドの輸液においても未だ
■から■の問題が十分に解決されたとは言えず、更に改
善が要求されている。

又、アミゲンのようなカゼインの氷解物を静脈注入する
と、０）氷解物のｐＨが低くアシド−シスを起こしやす
い、（ｂｌ遊離アミノ酸、ディペプチド等の低分子ペプ
チドを多く含む為浸透圧が高くなり血管損傷を起こしや
すい等の問題点を有する。

（問題を解決する為の手段）本発明者等は前記■から■及び（ａ）、（ｂ）の問題を
解決すべく鋭意研究するなかで、意外にも従来検討され
なかったトリペプチド以上の比較的高分子のペプチドを
含む分子１５０００以下の水溶性オリゴペプチド混合物
が（ａ）遊離アミノ酸やディ、トリペプチド等の低分子
物質を殆ど含まず、輸液の浸透圧を著しく高くすること
なく、（ｂｌ沈澱を生じやすいアミノ酸や不安定なアミ
ノ酸をペプチドの中に含んでも、沈澱や分解を生ずるこ
となく、（Ｃ）輸液のｐＨを下げることが極めて少なく
アシド−シスを起こす恐れが殆ど無＜　、（ｄｌ天然蛋
白、特に植物性蛋白から酵素分解により安価に得ること
ができ、ｔｅｌ静脈栄養補給において速やかに吸収され
、尿中排泄も認められない知見を得て本発明を完成する
に到った。

叩ち、本発明は分子量５００〜５０００の水溶性オリゴ
ペプチド混合物を必須構成成分とするオリゴペプチド輸
液である。

本発明輸液のオリゴペプチド混合物は水溶性であり、分
子量が５００〜５０００、好ましくは５００〜３０００
が適当である。

オリゴペプチド混合物が不溶性であると輸液の静脈注入
の隙に詰る等して好ましくない。

又、分子量が５ｏｏｏを越えると生体内で抗原抗体反応
を起こし好ましくない。

従来知られているアミノ酸混合物やディ、トリペプチド
輸液は静脈注入の際その浸透圧が高いことから、静脈注
入できる蛋白量に限界があったものを、本発明の輸液利
用による栄養補給法においては、アミノ酸やディ、トリ
ペプチド以上の分子量（通常５０′Ｏ以上）を有するオ
リゴペプチド混合物を用いることにより、血管内に於け
る浸透圧を比較的低く保ったままで大量の蛋白質を生体
に栄養補給できる効果を有する。

本発明輸液のオリゴペプチド混合物は合成によるもので
なく蛋白の酵素分解物が適当である。合成によるものは
、トリペプチド以上の合成は工業的にも困難を伴い高価
である。蛋白は自然に存在する蛋白原料、例えば、卵白
、カゼイ°ン等の動物性蛋白、大豆蛋白、小麦蛋白等の
植物性蛋白、微生物蛋白等、或いはこれらのプラスティ
ン等の修飾蛋白等を用いることができる。原料の入手の
容易性、経済性等から植物性蛋白特に大豆蛋白は好適で
ある。

蛋白の酵素分解法は公知の方法を用いることができる。

即ち、蛋白を公知の酵素を用いて、酵素分解し、分子量
分画して分子量５００〜５０００の水溶性画分をえるこ
とができる。例えば、特願昭６０−２８１６８５　、特
願昭６０−９５１６６等の方法が好ましい。

例えば、大豆蛋白（大豆から得られる蛋白量てを含み、
アルブミン系、グロブリン系等を含む）を用いるオリゴ
ペプチド混合物の製造法の一例を示すと次のようになる
。

大豆蛋白を酵素分解し、氷解物を分子量分画して分子量
５００〜５０００のオリゴペプチド混合物を得ることが
できる。

酵素分解に用いる酵素の種類は特に限定しないが、遊離
アミノ酸の生成の少ないエンド型プロテアーゼが、又中
和による塩生成や得られるペプチド混合物を中性に保つ
等の観点より中性プロテアーゼが好ましい。

酵素分解の態様は、用いる酵素に作用温度、作用ｐＨ域
でよく、２種以上の酵素を組み合わせたり、多段酵素分
解したり、固定化酵素による連続氷解等公知の氷解法を
用いることができる。

得られる酵素分解物を分子量分画することが重要である
。分子量分画することにより遊離アミノ酸やディ、トリ
等の低分子ペプチドを除去し、輸液として利用するペプ
チド混合物の浸透圧を低（することができる。分子量分
画はゲル濾過、限外濾過、ＲＯ（逆浸透圧濃縮）等の物
理化学的手段、エタノール、アセトン等の有機溶剤によ
る手段等公知の分画手段を用いて分子量５００〜５００
０のオリゴペプチド混合物を得ることができる。

得られるオリゴペプチド混合物を必須構成成分とする輸
液を静脈へ注入することができる。オリゴペプチド混合
物の濃度は、輸液の浸透圧が２０００ｍＯｓｍ／ｆｆ以
下の濃度になる９用いることができる。

例えば、分子量５００〜３０００の大豆蛋白酵素分解ペ
プチドの場合約２０９４溶液もの高濃度でもその浸透圧
を３００ｍＯｓｍ／　１程度と低く保つことができる。

因にアミノ酸混合物の場合約３％溶液で約３００！＠Ｏ
ｓｍ／ｅの浸透圧となる。従って、本発明のオリゴペプ
チド混合物を必須構成成分とするオリゴペプチド輸液は
高濃度静脈注入が可能な利点を有する。

又輸液のｐ旧よ、血液のｐＨ程度が適当であり通常６．
５〜７．５程度がアシド−シスを起こしにくり適当であ
る。

又輸液の利用態様は注射、点滴等の静脈注入が好ましい
。勿論、静脈注入の際糖やビタミン等の栄養源、その他
の薬剤等と併用することは自由である。又、アミノ酸パ
ターンを關節する台のアミノ酸やディ、トリペプチド等
を必要量併用することは自由である。アミノ酸混合物単
独やディ、トリペプチド単独等の低分子輸液に比べ、本
発明の輸液は浸透圧が低いので比較的大量の蛋白を補給
できる。又、沈澱性アミノ酸や不安定なアミノ酸もオリ
ゴペプチドのなかに含んで補給できる効果がある。

又、本発明の輸液は分子ｆｉ５００〜５０００の水溶性
オリゴペプチド混合物を粉体等の固体状で用いて使用時
に輸液の形にしたり、適当な濃度の輸液の形にしたりし
て用いる等、その利用態様は自由である。

（実施例）以下実施例により本発明の実施態様を説明する。

実施例１（オリゴペプチド混合物の調製）分離大豆蛋白製造工程で得られた大豆ホエー（水分９６
．８％、蛋白１９．３％）をｔｌＦ膜（分画分子量２０
０００）を用いて濃縮して得た大豆ホエー蛋白（蛋白８
５％／乾物）の１０％溶液ＩＩｌを塩酸を用いてｐ）１
１．５に調製し、ペプシン０．１ｇを加え３７℃で５時
間酵素分解し、中和後８０℃で１０分加熱し酵素失活さ
せＵＰ膜（旭化成側製５ＥＰ１０１３膜：分画分子量３
０００ＭＷ）を用いて高分子蛋白をカットし、得られた
濾液をＲＯ膜（ダイセル化学■製ｌ？Ｏ膜二分画分子量
５００）を用いて低分子蛋白をカットして得られた濃縮
液を噴霧乾燥して２６ｇのオリゴペプチド混合物を得た
。

（得られたオリゴペプチド混合物の静脈注入）健常ＳＯ
系雌ラット（麻酔下）（体重：　２００ｇ、年齢：１０
週齢）に前記オリゴペプチド混合物の５％溶液を輸液と
して用い、１３５分間に計９ｍ２になるように点滴によ
る静脈注入し、点滴開始後より０〜３０分の間、３０〜
６０分の間、６０〜１２０分の間、１２０〜３００分の
間に分けて採尿を行った。又、点滴終了直後及び１５分
後の２回採血し血清を分離した。

次ぎに、逆相高速液体クロマトグラフィー（ＳＨＩＭＰ
ＡＣＫ　ＣＬＣＯＤＳ　　：φ６ｍｍ　Ｘ　１５ｃｍ　
：島津製）を用いて前記採取各床及び血清中のオリゴペ
プチド量を測定した。

（尚、逆相高速液体クロマトグラフィーの条件は、トリ
フルオロ酢酸ニアセトニトリル系において３％−２７％
１ｉｎｅｒ　ｇｒａｄｉｅｎｔ　ｃｈｒｏｍａｔｏ　　
：流速１ｍｌ／分：検出２２０ｎｍの条件にて行った。

）以上より、第１図にオリゴペプチド混合物輸液の逆相
高速液体クロマトグラフィーパターン（以下！１ＰＬＣ
パターン）を示す。

第２図に血清の１１　Ｐ　Ｌ　Ｃパターンを示す。

第３図にオリゴペプチド混合物輸液静脈注入終了後１５
分後の採取血清のＨＰＬＣパターンを示す。

第６図に５％オリゴペプチド混合物輸液１ｍｌと血液４
ｍｌを混合し３７°Ｃで６０分１ｎｃｕｂａｔｅしたと
きの血清ＨＰＬＣパターンを示す。オリゴペプチドが血
液中で分解されないことがわかる。

第１図、第２図及び第３図より、オリゴペプチド混合物
輸液が静脈注入された後吸収され血液中に殆ど検出され
ないことがわかった。

第４図に尿のＨＰＬＣパターンを示す。

第５図にオリゴペプチド混合物輸液静脈注入開始後６０
分−１２０分間の採取尿のＨＰＬＣパターンを示す。

これらＩＩＰＬＣパターンを利用して尿中に排泄された
オリゴペプチドを計算した結果を表−１に示す。

（以下余白）表−１尿中ペプチド排泄量（単位：　ｍｇ）※ｌ　Ｏ〜
３０３０〜６０６０〜１２０最終回収％５％Ｐ　　　０
　　１２．３　　２７．１　　　９．５％但し、※１は
点滴開始後の時間の間隔（分）を示す。５９４Ｐは、オ
リゴペプチド混合液５％輸液を注入したときの尿中ペプ
チド排泄量（単位二ｍ８）を表す。

表−１より、静脈注入されたオリゴペプチド混合物輸液
のわずか９．５％が尿中に排泄されたにすぎないことが
わかる。従って、比較的高分子のオリゴペプチドが腎臓
において殆ど排泄されず生体内に速やかに吸収されるこ
とが分かった。

（効果）以上説明したように、従来せいぜいトリペプチド程度の
低分子オリゴペプチド輸液までの静脈注入による栄養補
給しか知られてなかったものを、本発明によりテトラペ
プチド以上のオリゴペプチドを含む分子量５０００以下
の水溶性オリゴペプチド混合物を必須構成成分とするオ
リゴペプチド輸液の静脈注入による栄養補給が可能にな
ったものであり、従来アミノ酸混合輸液、低分子オリゴ
ペプチド輸液の持つ諸問題を解決し、■輸液の浸透圧を
高くすることなく、■血中で分解や沈澱を生ずることな
く、■安定して栄養補給が可能になったものであり、又
■経済的に安価なオリゴペプチドを利用することが可能
になったものである。

又、カゼインの氷解物（例えばアミゲン）に比べても前
記■他の優位性を有し、植物性蛋白原料も利用できるこ
とよりより経済的である。

【図面の簡単な説明】

第１図はオリゴペプチド混合物輸液の逆相高速液体クロ
マトグラフィーパターン（以下ＨＰＬＣパターン）を示
す図面である。第２図は血ｌｎのＨＰＬＣパターンを示す図面である。第３図はオリゴペプチド混合物輸液静脈注入終了後１５
分後の採取血液のＩＩＰＬＣパターンを示す図面である
。第４図は尿のＨＰＬＣパターンを示す図面である。第５図はオリゴペプチド混合物輸液静脈注入開始後６０
−１２０分間の採取尿のＩＩＰＬｃパターンを示す図面
である。第６図は５％オリゴペプチド混合物輸液１ｍｊ２と血液
４ｍｌを混合し３７℃で６０分１ｎｃｕｂａ　ｔｅ　Ｌ
／たときの血清のＨＰＬＣパターンを示す図面である。手続補正書（自発）昭和６１年０５月０１日２、発明の名称　オリゴペプチド輸液３、補正をする者事件との関係　　特許出願人住　所　大阪市南区へ幡町６番１名　称　不二製油株式会社代表者　久　本　浩一部４、代理人　８５３２大阪市淀用区東三国１丁目３２番１２号５、補正により
増加する発明の数　　　　無し温度・・」と訂正する。「別紙」２、特許請求の範囲（１）分子１５００〜５０００の水溶性オリゴペプチド
混合物を必須構成成分とするオリゴペプチド輸液。（２）オリゴペプチド混合物が蛋白の酵素分解物である
特許請求の範囲第（１１項記載のオリゴペプチド輸液。（３）蛋白が植物性蛋白である特許請求の範囲第（３）
項記載のオリゴペプチド輸液。（４）植物性蛋白が大豆蛋白である特許請求の範囲第赳
に記載のオリゴペプチド輸液。手続補正書（方式）％式％２、発明の名称オリゴペプチド輸液３、補正をする者事件との関係　　特許出願人住　所　大阪市南区へ幡町６番１名　称　不二製油株式会社代表者　久　本　浩一部４、代理人住所　大阪市淀用区東三国１丁目３２番１２号７、補正
の内容願書に最初に添付した図面（企図）を別紙の通り（内容
に変更なし）鮮明に描いて補正する。

Claims

【特許請求の範囲】

（１）分子量５００〜５０００の水溶性オリゴペプチド
混合物を必須構成成分とするオリゴペプチド輸液。
（２）オリゴペプチド混合物が蛋白の酵素分解物である
特許請求の範囲第（１）頂記載のオリゴペプチド輸液。
（３）蛋白が植物性蛋白である特許請求の範囲第（３）
項記載のオリゴペプチド輸液。
（４）植物性蛋白が大豆蛋白である特許請求の範囲第（
３）項又は第（４）項に記載のオリゴペプチド輸液。