JPS62126199A - ペプチドおよび該ペプチドを含有する医薬組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は、一般的には後に記載する式Ｉを有し、細胞介
在性細胞障害を増加させる能力を有する、興味があり且
つ驚くべき薬理特性を示す新規ペプチドに関する。それ
故、本発明はまた、これらのペプチドの少なくとも１種
類を有する医薬組成物、薬剤、例えば抗癌剤または抗ウ
ィルス剤としてのそれらの使用およびヒトおよびその他
の補乳頚における細胞障害を増加させる方法にも関する
。

特許請求の範囲および以下の明細書において、用いられ
る命名法は、Ｊ、Ｂｉｏｌ、Ｃｈｅｍ、　２４７（Ｉ９
７２）。

９７７および以下に記載の文献に述べられている命名法
に従う。

〔従来の技術および発明が解決しようとする問題点〕

癌およびウィルス感染症は重大な状況であり、また今日
までのところ副作用なしに総ての癌またはウィルス感染
症に用いることが出来る薬剤は見い出されていない。ナ
チュラル・キリング（以後ＮＫと表す）および抗体依存
性の細胞介在性細胞障害（以後ＡＤＣＣと表す）は、癌
およびウィルス感染症に対する免疫学的防御機構の周知
例である。

幾つかの文献では、これらの型の細胞介在性細胞障害反
応と癌並びにウィルス感染症に対する防御機構との関係
が指摘されている。それ故、生体内におけるＮＫおよび
／またはＡＤＣＣ作用並びに細胞介在性細胞障害（以後
、まとめて細胞キリング（Ｋ細胞作用）と表す）の昂進
は、癌およびウィルス感染症の治療に極めて好適である
と考えられている。

タンパク質の一群、すなわちインターフェロンはこれら
の型の反応を刺激することが明らかにされている。また
、成る種の他のペプチドおよびタンパク質もに細胞作用
を刺激することも知られている。リンホカイン・インタ
ーロイキン−２は、Ｋ細胞作用の刺激に特に重要である
ことが明らかにされており、リンホカインによる３〜５
日間の昂進後のに細胞作用の増加はリンホカイン活性化
キリング（以後ＬＡＫと表す）として表されることがあ
り、刺激された細胞はリンホカイン活性化キラー細胞（
以後ＬＡＫ細胞と表す）として表される。

ｉ１辺りお匹ｙ匹犯１　ａｔ扛旦凹−からのタンパク質
Ａはに細胞作用を刺激することが知られている。

Ｓ、ａｕｒｅｕｓのタンパク質Ａ（以後ＳｐＡと表す）
は補体の活性化、ＢおよびＴリンパ級のポリクローン刺
激、抗体合成のポリクローン活性化およびインターフェ
ロン誘導のような多数のその他の免疫学的特性を有する
ことも知られている。

これらのＳｐＡの特性により、ＳｐＡの免疫学的試薬と
しての使用において大きな注目を集めており、ＳｐＡタ
ンパク質の余り好ましくない特性を誘導することなく　
ＳｐＡの有用な特性を開発する方法を見い出すことが極
めて望ましい。

ＳｐＡは、（多分、それが免疫グロブリンのＦｃ部分に
結合した後、補体を活性化するなどにより）過感作反応
を起こすことがあるので、生体内に直接には用いること
が出来ない。しかしながら、完全なＳｐＡ分子の各種製
剤が免疫錯体中の免疫グロブリンとの相互作用によると
解釈されている体外の大規模血漿吸着（Ｊ、Ｂａ１ｉｎ
ｔ　Ｊｒ、等のＣａｎｃｅｒＲｅｓｅａｒｃｈ、　４４
（Ｉ９８４）、７３４−７４３）または動物での静脈内
注入（Ｈ，Ｄ、１（ａｒｐｅｒ等のＣａｎｃｅｒ、　５
５（Ｉ９８５）、１８６３−１８６７）に用いられてお
り、有利な結果を得ている。

Ｓ、　ａｕｒｅｕｓからのタンパク質Ａは、Ｎｌｌ□末
端部分がそれぞれ５６〜６１個のアミノ酸配列からなる
５個の同族単位を有し、Ｃ００Ｉ＋末端部分はオクタペ
プチドの幾つかの繰り返しを含むタンパク質である（Ｌ
Ｉｈ１６ｎ　Ｍ、等のＪ、Ｂｉｏｌ、Ｃｈｅｍ、、　２
５９　３（Ｉ９８４）、１６９５〜１７０２を参照され
たい）。

Ｎ末端部分における５個の同族領域は通常はＥ、Ｄ、Ａ
、ＢおよびＣ領域と命名されており、Ｃ末端部分はＸ領
域と命名されている。

ＳｐＡの構造は広汎に研究されており、上記の文献の他
に、何れもＰｈａｒｍａｃｉａ　ＡＨに対するＷＯ第８
４００７７３号、ＷＯ第８４００７７４号、ＷＯ第８４
０３１３０号明細書およびＲｅｐｌＬｇｅｎ　Ｃｏｒｐ
、に対する欧州特許第Ａ２　１０７．５０９号明細書の
ような多数の出版物に記載されており、それらを参照さ
れたい。

Ｊ、５ｊ６ｄａｈｌ　　とＧ、Ｍ６１１ｅｒ（Ｓｃａｎ
ｄ、Ｊ、Ｉｍｍｕｎｏｌ、　１０（Ｉ９７９）　、　５
９３−５９６）および０１１ｎｅｓｃｕ等（Ｉｍｍｕｎ
ｏｌ。

Ｌｅｔｔｅｒｓ、　６　（Ｉ９８３）、２３１−２３７
）によって行われた研究で得られた結果は、ＳｐＡ分子
の活性部分はいわゆるｘ　９９域である分子のＣ末端に
位置した部分にあることを示すものであると解釈されて
いる。

〔問題点を解決するための手段、作用、発明の効果〕

驚（べきことには、後記の式Ｉを有するペプチドはに細
胞刺激作用を有することを見い出した。

式■の多くの化合物は、ＳｐＡのタンパク質分解開裂お
よび免疫グロブリンには全く或いは低い結合性しか示さ
ない（すなわち、実質的に免疫グロブリン架橋作用を欠
いている）フラグメントの単離から同定されている。こ
れらのフラグメントは、試験管内でＮＫ感受性および不
感受性標的細胞に対してに細胞刺激作用を有することが
示されている。

上記のように、本発明のペプチドは、いわゆるＥ領域の
アミノ酸配列の連続部分から成るフラグメントであって
、Ｅｆｆｌ域の全アミノ酸配列からの４から５５までの
アミノ酸残基から成るものとしてＳｐＡから誘導するこ
とが出来る（Ｕｈ１６ｎ　Ｍ、等のＪ、Ｂｉｏｌ、Ｃｈ
ｅｍ、　２５９．３（Ｉ９８４）、１６９５−１７０２
を参照されたい）。

一つの観点では、本発明は一般式Ｉ： Ｒ’−）１ｉｓ−Ａｓｐ−Ｇｌｕ−Ａｌａ−Ｒ（Ｉ）（
式中、Ｒ１はＡｌａ−Ｇｌｎであり、ＲはＧｌｎ−Ｇｌ
ｎ−＾５ｎ−Ａｌａ−Ｐｈｅ−Ｔｙｒ−Ｇｌｎ−Ｖａｌ
−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｍｅｔ−Ｐｒｏ−＾５ｎ−Ｌｅｕ−
Ａｓｎ−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ｇｌｎ−＾ｒｑ−Ａｓｎ−Ｇ
ｌｙ−１’ｈｅ−１１ｅ−Ｇｌｎ−Ｓｅｒ−Ｌｅｕ−Ｌ
ｙｓ−Ａｓｐ−Ａｓｐ−Ｐｒｏ−５ｅｒ−Ｇｌｎ−３ｅ
ｒ−Ａｌａ−＾５ｎ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ
−へ１ａ−Ｇｌｎ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ−八５ｎ−Ａｓｐ−
５ｅｒ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｌｙｓであり、Ｒ１
および／またはＲ中のアミノ酸残基の少なくとも１個以
上または総ては独立に除かれる）のペプチドおよび生理
学的に相溶性のそれらの塩またはエステルに関する。

本発明に係るペプチドのサブクラスは、式■（但しＲ１
およびＲは上記定義の通りであり、Ｒ１のアミノ酸配列
の連続的部分を構成するＲ１の一部分がＮ末端から除か
れ、Ｒのアミノ酸配列の連続的部分を構成するＲの一部
分がＣ末端から除かれる）を有するペプチドである。

式Ｉの特定且つ好ましいペプチドの例としては、次のも
のを上げることが出来る： Ａｌａ−Ｇｌｎ−旧５−Ａ５ｐ−Ｇｌｕ−Ａｌａ−Ｇｌ
ｎ−Ｇｌｎ−八５ｎ−Ａｌａ−Ｐｈｅ−Ｔｙｒ−Ｇｌｎ
−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｍｅｔ−Ｐｒｏ−八５ｎ−
Ｌｅｕ−ＡｓｎへＡｌａ−Ａｓｐ−Ｇ　Ｉｎ−Ａｒｑ−
Ａｓｎ−Ｇ　１ｙ−Ｐｈｅ−１１ｅ−Ｇ　Ｉｎ−５ｅｒ
−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ　−Ａｓｐ−Ａｓｐ−Ｐｒｏ−Ｓｅｔ
−Ｇｌｎ−Ｓｅｒ−Ａｌａ−Ａｓｎ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−
Ｇｌｙ−Ｇｌｕ−Ａｌａ−Ｇｌｎ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ−Ａ
ｓｎ−Ａｓｐ−３ｅｒ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ｐｒｏ＋、ｘ
−３７ （ＳｐＡの領域における５５個のＮ末端アミノ酸残基に
対応する）、 Ａｌａ−ＧｌｎＪＩｉｓ−Ａｓｐ−Ｇｌｕ−Ａｌａ−Ｇ
ｌｎ−Ｇｌｎ−Ａｓｎ−Ａｌａ−Ｐｈｅ−Ｔｙｒ−Ｇｌ
ｎ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｍｅｔ−Ｐｒｏ−Ａｓｎ
−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−八ｌａ−Ａｓｐ−Ｇｌｎ−Ａｒｑ＋
　ｐｘ−１’（領域Ｅにおける最初の２５個のアミノ酸
残基に対応する）、 Ａｌａ−Ｇｌｎ−Ｈ４ｓ−八５ｐ−Ｇｌｕ−Ａｌａ−Ｇ
ｌｎ−Ｇｌｎ−Ａｓｎ−Ａｌａ−Ｐｈｅ−Ｔｙｒ−Ｇｌ
ｎ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｍｅｔ−Ｐｒｏ−Ａｓｎ
−Ｌｅｕ、　　ｐｘ−２’（領域Ｅにおける最初の２０
個のアミノ酸残基に対応する）、 （領域Ｅにおける２から２０までのアミノ酸残基に対応
する）および Ｇ　］　ｎ　−ＩＩ　ｉ　ｓ−八５ｐ−Ｇｌｕ−Ａｌａ
−Ｇｌｎ−Ｇｌｎ−へｓｎ−へｌａ−Ｐｈｅ−Ｔｙｒ−
Ｇｌｎ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｍｅｔ−Ｐｒｏ−Ａ
ｓｎ−Ｌｅｕ＋　ｐｘ−４’（領域Ｅにおける３から２
０までのアミノ酸残基に対応する）。

もう一つの観点では、本発明は一般式■の少なくとも１
個のペプチドを不活性担体または付形剤と組合せて有す
る医薬組成物に関する。

更に別の観点では、本発明は、動物細胞におけるに細胞
作用を増加させるのに有用な組成物であって、ＳｐＡの
Ｅ領域に対応するアミノ酸配列を有するペプチドまたは
そのフラグメントから成り、そのペプチドが実質的に免
疫グロブリン結合活性を欠いていることを特徴とするも
の、およびそれらの生理学的に受け入れられる塩または
エステルと生理学的に受け入れられる担体とから成る組
成物に関する。

本発明の組成物は、更に１種類以上の他の活性物質、例
えばインターフェロン、リンホカインおよび／またはモ
ノ力インを含んでいてもよい。

更にもう一つの観点では、本発明は、ヒトを含む哺乳類
の癌またはウィルス感染症の各種症状を、少なくとも１
種類の上記組成物の治療上有効量を癌またはウィルス感
染症に侵されている被験動物に投与することによって改
善する方法に関する。

更に別の観点では、本発明は、式Ｉのペプ゛チドまたは
ＳｐＡのＥ？Ｊ域に対応するアミノ酸配列を有するペプ
チドまたはそのフラグメントを、ヒトを含む哺乳類に投
与する薬剤として使用することに関する。

さらにもう一つの観点では、本発明は、少なくとも１種
類の式Ｉのペプチドのに細胞作用を増加させるのに十分
な量の有効量を投与することによって、哺乳類の細胞障
害を増加させる方法に関する。

は明らかにＥ領域またはそのフラグメントにあるという
驚くべき知見に基づくものである。

更に、Ｅ領域またはそのフラグメントの免疫グロブリン
に対する親和性は全くないかあっても低いので、補体の
活性化は実質的にないという驚くべき知見も得た。

問題としているこれらのフラグメントは総て、アノミ酸
残基１１ｉｓ−八５ｐ−Ｇｌｕ−Ａｌａを有する。

第１図には、領域Ｅのアミノ酸配列を本発明の好ましい
ペプチドを示すマーカーと共に示している。

本発明は、ＳｐＡのＥｊｉ域のアミノ酸配列から誘導す
ることが出来る多数のペプチドを提供する。

これらの一つはＳｐＡのプラスミン消化から誘導され、
次のようなアミノ酸配列を有していた。

１５２〇 八５ｐ−Ｇｌｎ−＾ｒｇ　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　（ｐｘ−１’　　）もう一つ
は、次のようなものとして合成された。

これらのペプチドは何れも試験され、Ｋ細胞作用の増加
についての試験管内試験法において細胞障害を増加させ
ることが観察された。

ｐｘ−１′およびｐ、　　２　Ｊのアミノ酸配列は、そ
れぞれＳｐＡにおける最初の２５個および２０個のアミ
ノ酸残基のアミノ酸配列に対応し、ＳｐＡの最初の５６
個のアミノ酸から成る領域ＥのＮ末端部分に対応するも
のである。

本発明のペプチドは、当業者に周知の何れかの方法によ
って合成することが出来る。かかる方法の要約は、Ｊ、
Ｍ、ＳｔｅｗａｒｔとＪ、Ｄ、ＹｏｕｉＨ著、５ｏｌｉ
ｄＰｈａｓｅ　Ｐｅｐｔｉｄｅ　５ｙｎｔｈｅｓｉｓ　
、　Ｗ、ｔｌ、Ｆｒｅｅｍａｎ　、サンフランシスコ、
１９６９年およびＪ、Ｍｅｉｅｎｈｏｆｅｒ著、＋１ｏ
ｒ−ｍｏｎａｌ　Ｐｒｏｔｅｉｎｓ　ａｎｄ　Ｐｅｐｔ
ｉｄｅｓ　、第１巻１（Ｉ９７３年）、４６頁、Ａｃａ
ｄｅｍｉｃ　Ｐｒｅｓｓ、ニューヨ−りでは、固相合成
について、またＥ、５ｃｈｒｏｄｅｒとに、Ｌｕｂｋｅ
著、Ｔｈｅ　Ｐｅｐｔｉｄｅｓ、第１巻、（Ｉ９６５年
）、Ａｃａｄｅｍｉｃ　　Ｐｒｅｓｓ　、ニューヨーク
では、古典的溶液合成について記載されている。

一般的には、これらの方法は、成長するペプチド鎖に１
個以上のアミノ酸または好ましく保護されたアミノ酸を
遂次的に付加させることから成る。

通常は、最初のアミノ酸のアミノまたはカルボキシル基
の何れかは、適当な保護基によって保護されている。保
護されたまたは誘導体にしたアミノ酸を次に不活性な固
形支持体に付着させ、またはアミド結合を形成するのに
好適な条件下で溶液中で、保護される適当な補足的（ア
ミノまたはカルボキシル）基を有する配列中の次のアミ
ノ酸を添加させることによって用いる。次いで、保護基
を、この新たに付加したアミノ酸残基から外して次に（
適当に保護された）次のアミノ酸を加えるなどを行うの
である。総ての所望なアミノ酸を適正な配列に結合させ
た後、残っている保護基（および固形物支持体）を逐次
的または同時に外して、最終のペプチドを生成させる。

この一般的方法を若干修正することにより、例えば、（
不整中心をラセミ化しない条件下で）保護されたトリペ
プチドを適当に保護されたジペプチドとカップリングさ
せて、保護基を外してペンタペプチドを生成させること
によって、成長する鎖に同時に１個以上のアミノ酸を付
加させることが可能である。

更に、主題のポリペプチドは組換えＤＮＡ技術、例えば
Ｓ、ａｕｒｅｕｓタンパク質Ａを暗号化するＤＮＡ配列
の一部分を修正して用いることによって調製することが
出来る。

本発明のペプチドは、ＳｐＡをタンパク質分解的にまた
は化学的に開裂させ、次いでＳｐＡフラグメントを分画
して単離することによっても生成させることが出来る。

この消化のためには、トリプシン、プラスミン、八ｒｍ
ｉｌｌａｒｉａ　ｍｅｌｌｅａプロテアーゼまたはクロ
トリパイン、キモトリプシン、カルボキシペプチダーゼ
またはＳ、ａｕｒｅｕｓＶ８プロテアーゼのような各種
のタンパク質分解酵素を用いることが出来る。化学的開
裂には、酸または塩基を用いることが出来る。

ペプチドの単離は、高圧液体クロマトグラフィー　（Ｈ
ＰＬＣ）のような当業者に周知の適当な方法によって行
うことが出来る。

式■のペプチドまたはＳｐＡのＥＳＩ域またはそのフラ
グメントに対応するアミノ酸配列を有するペプチドを、
医薬組成物に変換して、周知の方法と同様にして好まし
くはヒトに投与する。このペプチドおよびその塩または
エステルは経口的、局部的、経直腸的、経膣的、静脈的
、筋肉内、鞘内または皮下的に約１〜１０００μｇ　／
　ｋｇ体重の範囲で投与することが出来るが、更に低い
または高い投与量を投与することが出来る。所要な投与
量は、患者の症状の重さ、用いられるペプチド、投与法
および治療期間によって代わる。

これらの組成物は徐放性またはデポット（ｄｅｐｏｔ）
製剤の形に配合することが出来る。

非経口的投与には、上記ペプチドを無菌の等偏食塩水溶
液に溶解する。

上記ペプチドの塩の例としては、例えばナトリウム、カ
リウム、マグネシウム、カルシウムおよび亜鉛塩および
ギ酸、メタンスルホン酸、塩酸および硫酸のような有機
または無機酸との酸付加塩を上げることが出来る。好ま
しい上記ペプチドの塩は、生理学的および製薬学的に受
け入れられる塩である。

上記ペプチドまたはそれらの塩またはエステルの他に、
医薬組成物は製薬学的に受け入れられる担体、希釈剤、
好ましくは等偏食塩水溶液および／または付形剤を有す
ることが出来る。

本発明を以下の実施例で更に詳細に説明するが、これら
の実施例は特許請求の範囲に記載の発明の範囲を制限す
ることを意図するものではない。

〔実施例〕

ａ）プラスミンを用いる消化 Ｐｈａｒｍａｃｉａ　％ウプサラ、スエーデン製の精製
したＳｐＡ　　１５ｍｇを０．１モルギ酸アンモニウム
（ｐｌ＋　７．５　）　　６００μ２に溶解させ、同じ
緩衝液に溶解したプラスミン６００μｌ　（Ｉ４力ゼイ
ン単位（ＣＵ）に相当）を加えた。混合物を３７℃で２
０５分間培養した。３６ｐｈａｒｏｓｅ　（登録商標）
４Ｂにカンプリングさせたアプロチニンを添加した後、
室温で更に１５分間培養することによって、反応を停止
させた。次いで、反応混合物を遠心分離して、上清液を
吸引して抜き取った。０．１モルギ酸アンモニウム１．
０ｍＡを、ベレット（固定されたアプロチニンおよび残
りの反応混合物を含む）に加え、試料を混合して、遠心
分離し、上清液を吸引によって抜き取った。後の処理を
２回繰り返した。

最後に、総ての上清液をまとめて、繰り返し凍結乾燥し
た。

ｂ）精　製 上記処理から得られるペプチドを、以下の装置を用いて
、逆相カラム（Ｎｕｃｌｅｏｓｉｌ（登録商標）５ｃ、
Ｉｌ）上で高圧クロマトグラフィー（ＩＩＰＬＣ）によ
り精製した：　２　ＬＫＢ　２１５０　＋１ＰＬＣポン
プ、ＬＫＢ２１５１可変波長モニター、ＬＫＢ　２１５
２　ＨＰＬＣコントローラー、［、ＫＢ　２２２０記録
積分計およびＬＫＢスーパーラック。

精製は、次の条件で行った： 緩衝液Ａ　：　０．０２モルギ酸アンモニウム（ｐｌ＋
　６．５　）　；緩衝液８２４０％０．０５モルギ酸ア
ンモニウム（ｐＨ６，５）および６０％エタノール；流
速二０．５ｍβ／分；分取容積：　０．２５ｍｊ２゜分
画１５０〜１５２中の物質を、同定のために選択した。

！１ＰＬｃ精製の結果を第２図に示すが、図中には選択
された分画を示している。

生成物は、以下のプロトコールに準じて配列された２個
のペプチドを含んでいた： 文献（Ｒ，Ｍ、Ｈｅｗｉｃｋ、Ｍ、Ｗ、ｌ１ｕｎｋａｐ
ｉｌｌｅｒ、Ｌ、Ｅ、ＩＩｏｏｄとＷ、Ｊ、Ｄｒｅｙｅ
ｒ著、Ｊ、Ｂｉｏｌ、Ｃｈｅｍ、　２５６（Ｉ９８１）
７９９０−７９９７　；門、Ｗ、Ｈｕｎｋａｐｉｌｌｅ
ｒ、　Ｒ，Ｍ、Ｈｅｗｉｃｋ、　Ｗ、Ｊ、Ｄｒｅｙｅｒ
とり、Ｅ、ｌ１ｏｏｄ著、Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｅｎｚｙｍ
ｏｌ、　９Ｈ１９８３）３９９−４１３）記載の方法に
幾つかの修正を加えて、ＡｐｐｌｉｅｄＢｉｏｓｙｓｔ
ｅｍｓ４７０Ａ型気相シークエンサーを用いて、ペプチ
ドのエドマン分解を行った。フヱニルイソチオシアネー
ト（ＰＩＴＣ）とカップリングさせた後、４番目の溶媒
（Ｓ１＝ｎ−へブタン）を用いてフィルターを３０秒間
洗浄した。ＡｓｐとＧｌｕのメチル化誘導体を得るため
に、アミノ酸アニリノチアゾリノンを、２５％トリフル
オロ酢酸（ＴＦＡ）の代わりにＩＮメタノール性ＨＣｌ
を用いて、フェニルチオヒダントインに変換した。乾燥
時間を短くすることが必要であるので、シークエンサー
のプログラムをこの試薬に調整した。フェニルチオヒダ
ントインアミノ酸（ＰＴＩＩ−ａ、ａ、）を約０．２５
ｍ１のメタノールに溶解して、サーバント真空遠心分離
機中で４５°Ｃで１０分間乾燥した。

乾燥したＰＴＩＩ−ａ、ａ、を、内部標準としてメチル
チオヒダントイン−（ＭＴＨ）−チロシンを含むメタノ
ール０．０２ｍ／！に再溶解した。ＰＴｔｌ−ａ、ａ、
を、可変ＵＶ検出器７９８７５型を備えたＩｌｅｗｌ−
１ｅｔ；　ＰａｃｋａｒｄＬｉｑｕｉｄ　Ｃｈｒｏｍａ
ｔｏｇｒａｐｈ　１０８４型において、５　ｃｍ　Ｘ０
１４６ｃｍのＰｅｒｍａ−ｐｈａｓｅ（登録商標）ＥＴ
Ｈシアノ・ガード・カラム（ＤｕＰｏｎｔ）を備えた２
　５　ｃｎ　Ｘ　Ｏ，４６ｃ＋＋＋のＩＢＭシアノ・カ
ラム上で逆相ＩＩ　Ｐ　Ｌ　Ｃによって同定および定量
を行った（Ｍ、　Ｗ、　１ｌｕｎｋａｐ　ｉ　Ｉ　Ｉｅ
ｒとり、　Ｅ。

１１　ｏ　ｏ　ｄ著のＭｅｔｈｏｄｓ　Ｅｎｚｙｍｏｌ
、９１（Ｉ９８３）　４８６−４９３）。

Ａ溶媒は１６ミリモル酢酸ナトリウム、ｐＨ５，６０で
あり、Ｂ溶媒はアセトニトリル／メタノール、９：１（
ｖ／ｖ）であった。カラムをＢを１５％で平衡にして、
１５％〜５１．４％のＢの線形勾配で、０〜１５．３０
分間？容出した。ＰＴＨ−ａ、ａ、を、２６３ｒ＋ｍで
１、５　ｍＡＵＦｓ（フル・スケール吸収単位）で検出
した。

アミノ酸配列データーを、以下の表−１に示す。

試料二分画１５０〜ｌ５２（第２図参照）平均反復収量
：　９５．７％ １　　　　　　　　八ｓｐ　　　　　　　　　　３９１
　　　　　　　　Ａｌａ　　　　　　　　　８５３２＊
　　　　Ｇｌｎ　　　　（Ｉ５００）　　　　Ｇｌｎ　
　　　（７５０）３　　　　　Ｇｌｎ　　　　　１４０
５　　　１１ｉｓ　　　　　２６６４　　　　　Ｓｅｒ
　　　　　　５９　　　　Ａｓｐ　　　　　１６８５　
　　　　　　八Ｉａ　　　　　　　　　８７０　　　　
　　　Ｇｌｕ　　　　　　　　４２４５　　　　　　Ｐ
ｈｅ　　　　　　　７１５　　　　　Ａｌａ　　　　　
　５０５７　　　　　　Ｔｙｒ　　　　　　１０６２　
　　　　Ｇｌｎ　　　　　　７４９８本　　　　　　　
Ｇｌｎ　　　　　　　　　（８５０）　　　　　　　Ｇ
ｌｎ　　　　　　　　（４２５）９　　　　　１１ｅ　
　　　　　　７４６　　　　　　Ａｓｎ　　　　　　６
６５１０　　　　　　Ｌｅｕ　　　　　　　６２４　　
　　　　Ａｌａ　　　　　　３６０１１　　　　　　Ａ
ｓｎ　　　　　　５３１　　　　　Ｐｈｅ　　　　　　
２９８１２　　　　　　Ｍｅｔ　　　　　　　５７５　
　　　　Ｔｙｒ　　　　　　４５４１３　　　　　　Ｐ
ｒｏ　　　　　　　５１９　　　　　Ｇｌｎ　　　　　
　５６０１４　　　　　　Ａｓｎ　　　　　　　８２０
　　　　　νａ　１　　　　　３８３１５＊　　　　　
Ｌｅｕ　　　　　　（４８３）　　　　　Ｌｅｕ　　　
　　（２４１）１６本　　　　　　　Ａｓｎ　　　　　
　　　　（７３７）　　　　　　　Ａｓｎ　　　　　　
　　（３６８）１７　　　　　　Ｇｌｕ　　　　　　　
１９８　　　　　　Ｍｅｔ　　　　　　３２３１８　　
　　　　Ａｌａ　　　　　　　２８８　　　　　Ｐｒｏ
　　　　　　１７６１９　　　　　　Ｇｌｎ　　　　　
　　５４０　　　　　　Ａｓｎ　　　　　　４１９２０
　　　　　　Ａｒｇ　　　　　　　１４０　　　　　Ｌ
ｅｕ　　　　　　３９２２１　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　Ｙ＋　　　　　　　　−２
２Ａｌａ　　　　　　２８０ ２３　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
ｈ　　　　　　　−２４Ｇｌｎ　　　　　　　７９ ＊　ここでは、同じアミノ酸残基が両方のペプチドに現
れ、従って測定された量は両ペプチド間で比例的に分け
る。

表−１から、精製したプール物質は２個のペプチドの混
合物を含むことが分かる。同定されていないアミノ酸残
基Ｙ、およびＹ２は、配列をＳ。

ａｕｒｅｕｓ　（Ｕｈｌｅｎ等の上記文献）からのタン
パク質Ａの配列と比較することによって、それぞれＡｓ
ｎおよびＡｓｐを当てることが出来る。

従って、生成物は、３３％はＳｐＡのＮ末端における最
初の２５個のアミノ酸残基に対応する式！のペプチド、
ｐｘ−１’であり、Ｒ１がＡｌａ−Ｇｌｎであり、Ｒが
Ｇｌｎ−Ｇｌｎ−Ａｓｎ−Ａｌａ−Ｐｈｅ−Ｔｙｒ−Ｇ
ｌｎ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｍｅｔ−Ｐｒｏ−＾５
ｎ−Ｌｅｕ−へ５ｎ−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ｇｌｎ−八ｒｇ
（ＩＩＩ）であり、領域ＥのＮ末端部分における最初の
２５個のアミノ酸残基でもあり、６７％は領域りにおけ
るアミノ酸残基１１〜３０に対応するペプチドである。

生成物は、以下に詳細に説明される分析法において、Ｋ
細胞活性増加作用を有することが示される。

ａ）プラスミンを用いる消化 精製した５ｐＡ１５０μｇを、３７℃で６０分間０．３
ＣＵ（ガゼイン単位）プラスミン（ＫＡＢＴ）で消化し
た。

５ｅｐｈａｒｏｓｅ　（登録商標）４Ｂにカップリング
したアボチニンを添加して、室温で１５分間培養するこ
とにより、反応を停止した。遠心分離の後、上清液を除
去して、以下の実験に用いた。

ｂ）Ｋ細胞刺激作用の分析 試験管内でのに細胞作用の刺激における非Ｆｃ結合性ペ
プチドの重要性を評価するため、上記から得られるタン
パク質分解性消化物（ＳｐＡ　８μｇに対応する）　！
１ｔｅｐｈａｒｏｓｅ　４　Ｂにカップリングしたヒト
ＩｇＧとまたは対照５ｅｐｈａｒｏｓｅ　４　Ｂと共に
、室温で３０分間培養した。精製したＳｐＡを対照物と
同じ条件下で培養した。反応混合物を遠心分離し、上清
液を以下に詳述するようにに細胞分析法において直接使
用した。例えば、正常な末梢血液の白血球（ＰＢＬ）、
を１　）　ＩｇＧ−５ｅｐｈａｒｏｓｅ　４　Ｂで吸収
したＳｐＡ、２）対照５ｅｐｈａ−ｒｏｓｅ　４　Ｂで
吸収したＳｐＡ、３　）　　ＩｇＧ−３ｅｐｈａｒｏｓ
ｅ　４　Ｂで吸収したプラスミンで消化したＳｐＡおよ
び４）対照５ｅｐｈａ−ｒｏｓｅで吸収したプラスミン
で消化したＳｐＡと共に培養した。媒質のみで培養した
ＰＢＬを、対照物として用いた。キル百分率（Ｋｉｌ１
％）として表される結果を、第３図に示す。精製したｓ
ｐＡのタンパク質分解性開裂によって、＋ｇＧ結合性は
ないまたは低くに細胞刺激作用を有するペプチドを得る
ことが可能であることが分かる。

ａ）８Ｕ域ＥのＮ未満の最初の２０個のアミノ酸残基に
対応するＡｌａ−Ｇｌｎ−１１ｉｓ−Ａｓｐ−Ｇｌｕ−
Ａｌａ−Ｇｌｎ−Ｇｌｎ　　−Ａｓｎ−Ａｌａ−Ｐｈｅ
−Ｔｙｒ−Ｇｌｎ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｍｅｔ−
Ｐｒｏ−八５ｎ−Ｌｅｕ　、　ｐｘ　−’ｌ　’を、上
記のように合成的に調製した。

ｐｘ−２’は、以下の分析法においてに細胞活性増加作
用を示した。

分五迭 に細胞活性は、本明細書では、標的細胞から誘導される
主要に対する正常な末梢血白血球の細胞障害の増加とし
て定義される。ＰＢＬは、Ｆｉ−ｃｏｌｌ−Ｈｙｐａｑ
ｕｅ　（登録商標）（Ｐｈａｒｍａｃｉａ　％ウプサラ
、スエーデン）上で健康な供与者からのヘパリン付加し
た血液を遠心分離することにより、Ｂｏｙｕｍ法（Ｓｃ
ａｎｄ、Ｊ、Ｃｌ１ｎ、Ｌａｂ、　Ｉｎｖｅｓｔ、２２
（Ｉ９６８）７７）で単離した。多くの実験では、付着
性細胞は、ＰＢＬを無菌のガラス容器中で３７°Ｃで１
〜２時間培養することによって除去した。標的細胞とし
ては、ＮＫ感受性のに５６２（Ｃ，Ｂ、およびＢ、Ｂ、
Ｌｏｚｚｉｏｓ　Ｊ。

Ｎａｔ、Ｃａｎｃｅｒ　Ｉｎ５ｔ、５０（Ｉ９７３）　
５３５−５３８）および比較的ＮＫ耐性の口ａｕｄｉ（
Ｅ、Ｋｌｅｉｎ等、Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓ、　２８（Ｉ
９６８）　１３００−１３１０）およびＲａｊｉ（Ｒ，
Ｊ、Ｖ、Ｒｕ１ｖｅｒｔａｆｔ　。

Ｊ、Ｃｌ１ｎ、Ｐａｔｈｏｌ、１８（Ｉ９６５）　２６
１−２７３）細胞系をＳｐＡのタンパク質分解性消化に
よって得られたペプチドに対して用い、Ｒａｊｉおよび
Ｄａｕｄｉ細胞系は合成ペプチドに用いた。

細胞系をＲＰＭ１１６４０（Ｇｉｂｃｏ、Ｐａ１ｓｌｅ
ｙ、５ｃｏｔｌａｎｄ　。

商品番号０４１−１８７５）中で培養を続け、これに３
７℃で死亡した仔牛血清（Ｉ０％Ｖ／Ｖ）（Ｆｅ２）と
ペニシリン（Ｉ００ＩＵ／ｍｊ２　）およびストレプト
マイシン（Ｉ００μｇ／ｍｊりおよび空気中の二酸化炭
素を加えた。

標的細胞を”Ｃｒ（Ｎｅｗ　Ｅｎｇｌａｎｄ　Ｎｕｃｌ
ｅａｒ、Ｄｒｅｉｅｉｃｈ。

西ドイツ）で標識した。

一攻廁１υ’ｊＪｆｈ汰 ＰＢＬを精製したペプチドまたはＳｐＡと共に６％ＣＯ
□／空気を用いて３７℃で２４時間培養した。使用した
媒質は、ＲＰＭ１１６４０に１０％のＦ″、Ｃ８゜ペニ
シリン（Ｉ００ＩＵ／ｍ１）およびストレプトマイシン
（Ｉ００μｇ／ｍｊりを加えたものであった。

培養後、細胞密度を調整して、細胞を丸底マイクロタイ
ター・プレート（ＮＣＮＣ＋　Ｒｏｓ　ｋ　ｔ　ｌｄｅ
　１デンマーク）に分布させた。Ｃｒ標識したに５６２
標的細胞を、効果器（Ｅ）および標的（Ｔ）細胞が所望
な比率（Ｅ／Ｔ＝　１０　：　１）になるまで加えた。

６％ＣＯ□／空気を用いて３７℃で更に４時間培養した
後、プレートをＴｉｔｅｒｔｅｋ　（登録商標）マイク
ロタイター・プレート・シェーカー（Ｆｌｏｗ　Ｌａｂ
ｏｒａｔｏｒｉｅｓＬｔｄ、、　Ａｙｒｓｈｉｒｅ、ス
コツトランド）上に置いた。マイクロタイター・プレー
トを遠心分離して、既知容積の上清液を吸引して取り出
して、計数した（”Ｃｒ　　ｔＪ、料）。最大値（Ｓ　
Ｉ　Ｃｒ−最大（Ｍ）として、サポニンと共に培養した
に５６２からの上清液を使用した。エフェクター細胞な
しで５１Ｃｒ　−Ｋ５６２を培養することによって、Ｓ
ＩＣ，の自然放出（ＳＩＣｒ−自発）を測定した。キリ
ングの比百分率（Ｋｉｌ１％）を以下の方程式を用いて
計算した（総ての値は直接に比較可能な上清液中の５Ｉ
Ｃｒに関するものである）。

Ｋ１１１％：　１００　　（”Ｃｒ試料）　　５１Ｃ，
自発）／　（”Ｃｒ試料−５Ｉ　Ｃｒ自発） 用いた方法は実際上は、Ｄａｕｄｉおよびｌ１ａｊｉ標
的についてのものと同じであった。唯一の実質的差異は
、５１Ｃｒで標識した標的細胞の添加前に予備培養を行
わなかったことであり、エフェクターおよび標的細胞は
２４時間で完全に培養された。Ｋ１１１％は上記のよう
に計算した。

ペプチドの活性についての上記の分析法を、最終的同定
法並びに幾つかのスクリーニング試験において用いた。

スクリーニング試験は１（ＰＬＣ精製の各種段階からの
分画について直接に行い、殆どの場合に分画は最初に凍
結乾燥した。２種の異なる標的細胞（Ｋ５６２および口
ａｕｄｉ）を、スクリーニング試験に用いた。再試験法
において陽性であった分画のみを用いて、更に精製して
、同定した。

−ｙ１畳　。ＮＫ、： ４Ｘ１０’個の単球枯渇単核細胞を、４Ｘ１０’個の１
１にｒ標識Ｒａｊｉ細胞と共に培養した。総容積は８０
０μβであった。これに、それぞれ１．５，６．２５ま
たは１００μｇのペプチド／ｍｌを加えた。対照物は、
未刺激エフェクター細胞に５ｐＡ（２０℃ｇ／ｍｌ）で
刺激した。Ｃｒ標識Ｒａｊｉおよびエフェクター細胞を
加えたものであった（２個）。

２時間の培養後に、３Ｘ２００μｌを採取して、丸底マ
イクロタイター・トレーで培養した。培養は３７℃で、
７％ＣＯ２で、１８時間行った。

−葬試。ＬＡＫ＋活 ４Ｘ１０６個の卓球枯渇単核細胞を、垂直に懸垂したフ
ァルコン・フラスコ（Ｆａｌｃｏｎ　Ｐｌａｓｔｉｃｓ
＋０ｘｎａｒｄ、カリフォルニア、米国、商品番号第３
０１３号）中で６ｍｌのＩ’ｌＰｌ’１ｌ１６４０に５
％ＦＣ３とペニシリン（Ｉ００、ＩＬＩ／　ｍＪ　）と
ストレプトマイシン（Ｉ００μｇ／ｍりを加えたものの
中で培養した。

短期試験の場合と同様に、それぞれ１．５，６．２５ま
たは１００μｇ／ｍｌのペプチドを加えた。対照物は、
未刺激エフェクター細胞とエフェクター細胞に５ｐＡ（
２０μｇ／ｍｉりを加えたものであった。培養は、７％
ＣＯ２で３７℃で７２時間行った。

細胞数を計数し、密度を調整して、細胞を５ＩＣｒ標識
ＲａｊｉおよびＤａｕｄｉ標識細胞と共に培養した。Ｅ
ＺＴ比は１０：１および２０：１であった。Ｄａｕｄｉ
試験では、培養は１６時間継続し、Ｒａｊｉ試験では：
培養は１８時間ｗＥ続した（上記と同じ丸底マイクロタ
イター・プレート）。

上記分析法の結果を、ＳｐＡペプチドについては以下の
表−２に、合成ペプチドについては表−３に示す。

表二盗 末梢血液リンパ球（ＰＢＬ）をＳｐＡのタンパク質分解
性消化物または完全なＳｐＡから単離されたペプチドと
培養することによって誘発されるナチュラル・キラー（
ＮＫ）様活性 対照物　　　　　　　　　　　　　　１５４６プール（
ｐｘ−１”″）約１００　ｐｍｏｌ／ｍｌ　　２７　　
７５２０　ｐｍｏｌ／ｍｌ　　２７　　７２４　ｐｍｏ
ｌ／ｍ１　２４　　６８ ＊　　Ｅ／Ｔ比＝エフェクター／標的細胞比−１０：１
、 ＊＊ｐｘｌ’の濃度は計算値である。

ｌ二重 ＰＢＬのＮＫおよびＬＡＫｍ活性についての合成ペプチ
ドの効果 １１００ｕ／ｍｌ　　　Ｏ，７９ｎ、ｄ、　、””　　
ｎ、ｄ、　　ｎ、ｄ、　　ｎ、ｄ。

２５　　　　１．１５　　１．４１　１．４８　１．１
５　１．０？６　　　　１．２３　　１．０２　１．１
２　１．０５　１．０３１．５　　　　０．９７　　０
．９４　０．９７　１．００　０．９９傘　　（試料の
活性）／（対照物の活性）＊＊　　Ｅ／Ｔ比＝エフェク
ター／標的細胞比本率本実施せず 表−２から、標的細胞としてＤａｕｄｉ細胞を用いると
、（ｐｘ−１’に基づいて計算した）　１００　ｐｍｏ
ｌ／ｍｌという計算量での物質は、完全なＳｐＡ１２５
〜２５０ｐｍｏ　Ｉ　／　ｍβと同じＮＫ細胞刺激活性
を示したが、Ｒａｊｉ細胞の場合にはその活性は幾分低
いことが分かる。

表−３から、ｐｘ−２’は総ての試験において完全なＳ
ｐＡの活性と同等の活性を有することが分かる。

訓潜！８旧１化 本発明の化合物の補体系に対する影響を検討するため、
試験を行い、補体の開裂生成物Ｃ５ａの生成を補体の活
性化の目安として用いた。

試験は、正常人血清をＳ　ｐ　Ａ　（Ｐｈａｒｍａｃｉ
ａ　ＦｉｎｅＣｈｅｍｉｃａｌｓ＋ウプサラ、スエーデ
ン）またはｐｘ　　２　＋と共に６０分間培養すること
によって行った。０゜３０および６０分後に一部を採取
して、市販のＲＩＡキット（Ｕｐｊｏｈｎ　Ｃｏｍｐａ
ｎｙ）によって、生成したＣ５ａ　ｄｅｓ−八ｒｇを定
量した。

結果を第４図に示すが、ｐｘ−２’は活性化効果を完全
に欠いているが、ＳｐＡは課なりのＣ５ａ生成能力を有
し、Ｃ５ａ−ｄｅｓ−Ａｒｇ　（Ｃ５ａの安定な代謝物
）は当量に依存して増加することは明らかである。

モルモット・モデル 更に試験を行って、本発明のペプチドとＳｐＡを、麻酔
をかけて人工呼吸を行っているモルモットに静脈内投与
すると、アナフィラキシ一様反応を誘発する能力を有す
ることについて検討を行った。

Ｄｕｎｋｉｎ−Ｈａｒｔｌｅｙ株のモルモット　（約５
００　ｇ　）をベントパルビタールナトリウムで麻酔し
て、手術によって頚静脈にカテーテルを配して、薬剤を
注入した。血圧を頚動脈から記録した。動物を、１１ａ
ｒｖａｒｄ小動物呼吸器によって、毎分３８回の通気の
サイクルで１　ｍＡ　／　１００ｇ動物の容積で人工呼
吸を行った。

タンパク質Ａおよびｐｘ−２’を静脈内に投与したとこ
ろ、タンパク質Ａでは静脈内投与後初期の気管支収縮お
よび高血圧（後では低血圧）によって示されるアナフィ
ラキシ一様反応を投与量に依存して（Ｉ０〜１００μｇ
　／　ｍ　ｌ静脈内）生じるが、ｐｘ−２′ではかかる
反応は生起しなかった。

以下余白 犬１ｕ生先 １ｍ１当り１■の式Ｉのペプチドを含む非経口投与用の
製剤を以下のようにして調整することが出来る。

式■のペプチド１ｇおよびラクトース９９ｇを蒸留水１
リツトルに溶解し、ｐＨを約７．０に調整する。この溶
液を無菌濾過する。無菌溶液を、１０ｍ１バイアル瓶に
充填して、各バイアル瓶が溶液１、Ｑｍｆｆを含むよう
にする。溶液を凍結乾燥し、バイアル瓶を無菌条件下で
封印する。

１個のバイアル瓶に入っている製剤は、投与前に無菌等
張食塩水溶液１．０ｍｌに溶解するのである。

ス４１江ｉ 式Ｉのペプチド１ｍｇをココアバター４ｇと混合するこ
とによって調製する。

【図面の簡単な説明】

ｉ１図は、Σ勤正す上にシ匹且り互ジ旦す−株８３２５
−４からのタンパク質Ａの領域Ｅのアミノ酸配列を示す
図であり（Ｕｌｅｎ等の上記文献を参照）、第２図は、
本発明に係るペプチドの単離で得られた溶出パターンを
示す図であり、 第３図は、ＳｐＡおよび非１ｇＧ結合性フラグメントと
の比較試験の結果を示すグラフであり、第４図は、Ｓｐ
Ａおよび本発明に係るペプチドとによる補体活性化の試
験の結果を示すグラフである。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、一般式 I Ｒ＾１−Ｈｉｓ−Ａｓｐ−Ｇｌｕ−Ａｌａ−Ｒ（ I ）
   （式中、Ｒ＾１はＡｌａ−Ｇｌｎであり、Ｒは【アミノ
   酸配列があります】 であり、Ｒ＾１および／またはＲのアミノ酸残基の少な
   くとも１個以上が独立に省略されるものとする）を有す
   るペプチドおよび生理学的に受け入れられるそれらの塩
   またはエステル。 ２、Ｎ−末端からＲ＾１のアミノ酸配列の連続的部分を
   構成するＲ＾１の一部だけが省略され、Ｃ−末端からＲ
   のアミノ酸配列の連続的部分を構成するＲの一部だけが
   省略される、特許請求の範囲第１項記載の式 I のペプ
   チド。 ３、Ｒ＾１が上記定義の通りであり、Ｒが式IIIＧｌｎ
   −Ｇｌｎ−Ａｓｎ−Ａｌａ−Ｐｈｅ−Ｔｙｒ−Ｇｌｎ−
   Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｍｅｔ−Ｐｒｏ−Ａｓｎ−Ｌ
   ｅｕ−Ａｓｎ−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ｇｌｎ−Ａｒｇ（III
   ）を有する特許請求の範囲第１項または第２項記載のペ
   プチドおよび生理学的に受け入れられるそれらの塩また
   はエステル。 ４、Ｒ＾１が上記定義の通りであり、Ｒが式ＶＧｌｎ−
   Ｇｌｎ−Ａｓｎ−Ａｌａ−Ｐｈｅ−Ｔｙｒ−Ｇｌｎ−Ｖ
   ａｌ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｍｅｔ−Ｐｒｏ−Ａｓｎ−Ｌｅ
   ｕ（Ｖ） を有する、特許請求の範囲第１項または第２項記載のペ
   プチドおよび生理学的に受け入れられるそれらの塩また
   はエステル。 ５、Ｒ＾１が上記定義の通りであり、Ｒが式VIＧｌｎ−
   Ｇｌｎ−Ａｓｎ−Ａｌａ−Ｐｈｅ−Ｔｙｒ−Ｇｌｎ−Ｖ
   ａｌ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｍｅｔ−Ｐｒｏ−Ａｓｎ（VI） を有する、特許請求の範囲第１項または第２項記載のペ
   プチドおよび生理学的に受け入れられるそれらの塩また
   はエステル。 ６、Ｒ＾１が上記定義の通りであり、Ｒが式VIIＧｌｎ
   −Ｇｌｎ−Ａｓｎ−Ａｌａ−Ｐｈｅ−Ｔｙｒ−Ｇｌｎ−
   Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｍｅｔ−Ｐｒｏ（VII） を有する、特許請求の範囲第１項または第２項記載のペ
   プチドおよび生理学的に受け入れられるそれらの塩また
   はエステル。 ７、Ｒ＾１が上記定義の通りであり、Ｒが式VIIIＧｌｎ
   −Ｇｌｎ−Ａｓｎ−Ａｌａ−Ｐｈｅ−Ｔｙｒ−Ｇｌｎ−
   Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｍｅｔ（VIII） を有する特許請求の範囲第１項または第２項記載のペプ
   チドおよび生理学的に受け入れられるそれらの塩または
   エステル。 ８、Ｒ＾１が上記定義の通りであり、Ｒが式IXＧｌｎ−
   Ｇｌｎ−Ａｓｎ−Ａｌａ−Ｐｈｅ−Ｔｙｒ−Ｇｌｎ−Ｖ
   ａｌ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ（IX） を有する、特許請求の範囲第１項または第２項記載のペ
   プチドおよび生理学的に受け入れられるそれらの塩また
   はエステル。 ９、Ｒ＾１が上記定義の通りであり、Ｒが式ＸＧｌｎ−
   Ｇｌｎ−Ａｓｎ−Ａｌａ−Ｐｈｅ−Ｔｙｒ−Ｇｌｎ−Ｖ
   ａｌ−Ｌｅｕ（Ｘ）を有する、特許請求の範囲第１項ま
   たは第２項記載のペプチドおよび生理学的に受け入れら
   れるそれらの塩またはエステル。 １０、Ｒ＾１が上記定義の通りであり、Ｒが式Ｘ I Ｇ
   ｌｎ−Ｇｌｎ−Ａｓｎ−Ａｌａ−Ｐｈｅ−Ｔｙｒ−Ｇｌ
   ｎ−Ｖａｌ（Ｘ I ）を有する、特許請求の範囲第１項
   または第２項記載のペプチドおよび生理学的に受け入れ
   られるそれらの塩またはエステル。 １１、Ｒ＾１が上記定義の通りであり、Ｒが式ＸIIＧｌ
   ｎ−Ｇｌｎ−Ａｓｎ−Ａｌａ−Ｐｈｅ−Ｔｙｒ−Ｇｌｎ
   （ＸII）を有する、特許請求の範囲第１項または第２項
   記載のペプチドおよび生理学的に受け入れられるそれら
   の塩またはエステル。 １２、Ｒ＾１が上記定義の通りであり、Ｒが式ＸIIIＧ
   ｌｎ−Ｇｌｎ−Ａｓｎ−Ａｌａ−Ｐｈｅ−Ｔｙｒ（ＸI
   II）を有する、特許請求の範囲第１項または第２項記載
   のペプチドおよび生理学的に受け入れられるそれらの塩
   またはエステル。 １３、Ｒ＾１が上記定義の通りであり、Ｒが式ＸIVＧｌ
   ｎ−Ｇｌｎ−Ａｓｎ−Ａｌａ−Ｐｈｅ（ＸIV）を有する
   、特許請求の範囲第１項または第２項記載のペプチドお
   よび生理学的に受け入れられるそれらの塩またはエステ
   ル。 １４、Ｒ＾１が上記定義の通りであり、Ｒが式ＸＶＧｌ
   ｎ−Ｇｌｎ−Ａｓｎ−Ａｌａ（ＸＶ） を有する特許請求の範囲第１項または第１項記載のペプ
   チドおよび生理学的に受け入れられるそれらの塩または
   エステル。 １５、Ｒ＾１が上記定義の通りであり、Ｒが式ＸVIＧｌ
   ｎ−Ｇｌｎ−Ａｓｎ（ＸVI） を有する、特許請求の範囲第１項または第２項記載のペ
   プチドおよび生理学的に受け入れられるそれらの塩また
   はエステル。 １６、Ｒ＾１が上記定義の通りであり、ＲがＧｌｎ−Ｇ
   ｌｎである、特許請求の範囲第１項または第２項記載の
   ペプチドおよび生理学的に受け入れられるそれらの塩ま
   たはエステル。 １７、Ｒ＾１が上記定義の通りであり、ＲがＧｌｎであ
   る、特許請求の範囲第１項または第２項記載のペプチド
   および生理学的に受け入れられるそれらの塩またはエス
   テル。 １８、アミノ酸配列が￥スタフィロコッカス・アウレウ
   ス￥（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓｓ　ａｕｒｅｕｓ
   ）からのタンパク質Ａの連続的部分と同一であり且つア
   ミノ酸残基Ｈｉｓ−Ａｓｐ−Ｇｌｕ−Ａｌａを有して成
   るペプチド。 １９、ＳｐＡのＥ領域に対応するアミノ酸配列またはそ
   のフラグメントを有するペプチドであって、実質的に免
   疫グロブリン結合活性を欠いていることを特徴とするペ
   プチドおよび生理学的に受け入れられるその塩またはエ
   ステル。 ２０、少なくとも１種類の特許請求の範囲第１項〜第１
   ９項の何れか１項記載のペプチドまたはその塩或いはエ
   ステルを製薬上受け入れられる担体または付形剤と組合
   せて有する、医薬組成物。 ２１、１種類以上の他の活性物質をも有する、特許請求
   の範囲第２０項記載の製薬上受け入れられる医薬組成物
   。 ２２、その他の活性物質がインターフェロン、リンホカ
   インおよび／またはモノカインである、特許請求の範囲
   第２１項記載の医薬組成物。 ２３、哺乳類の疾患の治療用薬剤としての、特許請求の
   範囲第１項〜第２２項の何れか１項に記載のペプチドま
   たは医薬組成物の使用。 ２４、哺乳類の細胞介在性細胞障害の増加法であって、
   特許請求の範囲第１項〜第２２項の何れか１項記載の少
   なくとも１種類のペプチドまたは医薬組成物の有効量を
   投与して、被験動物の細胞介在性細胞障害を増加させる
   ことを特徴とする方法。 ２５、哺乳類における癌の各種条件における治療法であ
   って、癌に侵されている被験動物に特許請求の範囲第１
   項〜第２２項の何れか１項記載のペプチドまたは医薬組
   成物の治療上有効量を投与することを特徴とする治療法
   。 ２６、哺乳類におけるウィルス感染症の治療法であって
   、ウィルス感染症に侵されている被験動物に特許請求の
   範囲第１項〜第２２項の何れか１項記載のペプチドまた
   は医薬組成物の治療上有効量を投与することを特徴とす
   る治療法。