JPS62120370A - 新規なアミノ酸誘導体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 （１）発明の目的 〔産業上の利用分野〕 本発明の目的は医薬品として有用な一般式（式中のＲ１
はカルバモイル基または低級アルコキシカルボニル基で
あり、ＨｉｓはＬ−ヒスチジル基であり、ｎはＯまたは
１であり、Ｙは一〇−また；、４シーＮＨ−であり　Ｒ
２は炭素数１〜７の直鎖状または枝分かれ状のアルキル
基である）で表される新規ｔ）−アミノ酸誘導体および
それらの薬理学的に許容−１・・【・きる酸付加塩を提
供することである。さらに詳ｌ。

くいえば、ヒトレニン（ｈｕｍａｎ　ｒｅｎｉｎ）阻害
作用・１（５有し、経口投与可能な高血圧症の治療剤と
してイ：′用な前記一般式で表される新規なアミ、）酸
誘導１／におよびそれらの薬理学的に許容できる酸付加
塩４提供することである。

〔従来の技術〕

レニンは腎臓の傍系球体細胞から遊離する蛋白分解酵素
である。このものは血漿のα２グロブリン分画中にある
レニン基質と反応し、アンジオテンシ：／　Ｉ　　（ａ
ｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ　　Ｉ　）を生成させる。生成し
たアンジオテンシン■・はアンジオテンシン変換酵素に
よりアンジオテンシン［（ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ　■
）に変換される。このアンジオテンシン■は血管収縮作
用を有するとともに、副腎皮質に働き、ナトリウムや水
の代謝に影響するアルドステロン（ａｌｄｏ−ｓｔｅｒ
ｏｎｅ）を分泌させる高血圧症の一つの因子である。

このような、レニンとレニン基質との反応を阻害し、ア
ンジオテンシンＨの生成を抑制する化合物は新しい作用
機作による高血圧治療剤として注目されており、その開
発が強く要望されている。

金塩にレニンとレニン基質との反応を阻害、すなわち、
レニン活性阻害作用を有する化合物として、多くのペプ
チド誘導体が知られている（日本特許公告公報昭５８−
３９１４９号、日本特許公開公報昭５９−１１０６６１
号、同昭和５９−１５５３４５号、同昭５９−２２７８
５１号、ヨーロッパ特許公開公報７０７０２９号、同７
７０２８号、同８１７８３　号） これらの特許出願の中で、特に日本特許公開公報昭５９
−１５５３４５号には一般式 く式中のＡは水素原子、フェニル基、１０．１１−ジヒ
ドロ−５８−ジベンゾ［：ａ、　ｄ　、］　シシフへブ
テニル基すどであり、Ｂは一〇−１−ＣＨ＝ＣＨ−１−
Ｃ）ｌ、−などで示される結合のいずれかであり、ｐお
よびｑは同じでも異なっていてもよくそれぞれＯまたは
１〜３の整数であり、Ｄは水素原子、低級アルキル基、
低級アルケニル基、フェニル基、フェニルアルキル基な
どであり、Ｅはフェニル基、シクロヘキシル基、イソプ
ロピル基などであり、ＨｉｓはＬ−ヒスチジル基であり
、Ｆはアミノ酸残基、例えば、Ｌ−ロイシル基、Ｌ−イ
ソロイシル基、Ｌ−ロイシル−し−フェニルアラニル基
、Ｌ−フェニルアラニル−し−フェニルアラニル基、Ｌ
−アラニル−Ｌ−フェニルアラニル基などであり、Ｇは
アミノ酸Ｃ末端の保護基、例えばアミノ基、アルキルア
ミノ基、アリルアルキルアミノ基、アルコキシ基などで
ある）で表されるペプチド誘導体を開示している。

また、日本特許公開公報昭５９−２２７８５１号には、
一般式 （式中のＲ３Ｃ０−はＮ−置換アミノ酸のアシル基、例
えばベンジルオキシカルボニル基、ｔ−ブトキシカルボ
ニル基、α〜ナフトキシアセチル基、フェニルブチリル
！、３−（３−ニトロ−２−ピリジンスルフェニル）チ
オプロピオニル基、９−フルオレニルメチロキシカルボ
ニル基などでてミノ基が置換されたアミノ酸、たとえば
し−フェニルアラニル基、し−トリプトフィル基、し−
チロシル基、し−シスチル基、３−（１−ナフチル）−
Ｌ−アラニル基、１．−フェニルグリシル基、１−アミ
ノ−４−フェニルブチリル基、１．２゜３．４−テトラ
ヒドロ−β−カルボリン−３−ジ−カルボ基、またはホ
ルミル基であり　Ｒ５は水素原子、アルキル基、置換基
として水酸基、メルカプト基、アミノ基、カルバモイル
基、ホルミル基、アリール基または異項環基を有してい
る置換アルキル基を示す）で表されるペプチド誘導体を
開示している。

〔発明が解決しようとする問題〕

前記の特許出願等に開示されている化合物群はほとんど
ポリペプチドでその合成が厄介であり、かつ、体内の蛋
白分解酵素、例えば、キモトリプシン（ｃｈｙｍｏｔｒ
ｙｐｓｉｎ）で分解され、経口投与においてはその薬理
効果を発揮することが期待できない。

前記一般式（ＩＩ）で表されるペプチド誘導体はトリま
たはテトラペプチド誘導体であり、他のポリペプチド誘
導体に比べ製造が比較的容易ではあるが、この化合物も
前記の特許出願等に開示されているポリペプチド誘導体
と同様、蛋白分解酵素に対し不安定で経口投与によって
その薬効を発揮することが期待し難い。

また、前記式（ＩＩＩ）で表される化合物は他のペプチ
ド誘導体に比べ製造が容易ではあるが、この化合物も前
記の特許出願等に開示されているポリペプチド誘導体と
同様、蛋白分解酵素に対し不安定で経口投与によってそ
の薬効を発揮することが期待し難い。

本発明者らはこのような問題を解決すべく種々検討した
結果、前記一般式（１）で表されるアミノ酸誘導体およ
びそれらの薬理学的に許容できる酸付加塩が比較的簡易
に製造することができ、強いレニン活性阻害作用を示し
、かつ低毒性で経口投与が可能なものであり、前述の問
題点を解決しうるものであることを見出した。

（２）発明の構成 〔問題点を解決するだめの手段および作用〕本発明の前
記一般式（Ｉ）で表されるアミノ酸誘導体およびそれら
の薬理学的に許容できる酸付加塩はヒトレニン−羊レニ
ン基質系およびヒト高レニン血漿で強いレニン活性阻害
作用を示し、さらにキモトリプシン、ペプシンのような
蛋白分解酵素に安定である。また、このものは高レニン
状態のサルにおいて経口または静脈内注入で明らかな降
圧効果を発揮する。

このことは本発明の前記一般式（１）で表されるアミノ
酸誘導体およびそれらの薬理学的に許容できる酸付加塩
が強いレニン活性阻害作用を有し、しかも低毒性で経口
投与可能な高血圧症治療剤として有用であることを示し
ている。

本発明の前記一般式（１）で表されるアミノ酸誘導体は
、一般式 （式中のＲ１は前記と同じ意味を持つ）で表される化合
物と、一般式 （式中のＣはし一装置を示し、Ｘは酸残基を示し、Ｙお
よびＲ２は前記と同じ意味を持つ）で表される化合物と
をジフェニルリン酸アジドを用いて縮合させることによ
り製造することができる。

この反応で出発原料として用いられる前記一般式（Ｉ’
Ｖ）で表されるカルボン酸は文献記載の方法またはその
類似方法によって製造することができる。例えば、■−
ナフトアルデヒドとコノ＼り酸ジエチルとを反応させ、
次いでこれを水酸化す）　ＩＪウムで加水分解して、式 で表される化合物を得、これを無水酢酸で閉環させて、
式 で表される無水コハク酸誘導体を得る。この式（■）の
無水コハク酸誘導体にアンモニアまたは低級アルコール
類を反応させて、式 ％式％ （式中のＲ１は前記と同じ意味を持つ）で表される化合
物を得、これをパラジウム炭素の存在下に水添すること
により製造することができる。

本発明の製造方法でもう一方の出発原料として用いられ
る一般式（Ｖ）の化合物は、アミ７基を適当な保護基で
保護したし一ヒスチジンメチルエステルをメタノール溶
液中ヒドラジンと反応させて一般式 （式中のＺはアミノ基の保護基であり、Ｃは前記と同じ
意味を持つ）で表される化合物を得る。この化合物を亜
硝酸イソアミルと反応させた後、一般式 （式中のｎＳＹおよびＲ２は前記と同じ意味を持つ）で
表される化合物と反応させ、次いで保護基を離脱させる
ことにより製造することができる。

前記一般式（Ｘ）で表される化合物は文献記載の方法ま
たはその類似方法により製造することができる。例えば
、一般式（Ｘ）の化合物でｎが０である化合物は、ザ　
ジャーナル　オブ　オルガニックケミストリー［Ｊ、Ｏ
ｒｇ、　Ｃｈｅｍ、　　）　４５巻、２２８８〜２２９
０ページ（１９８０年）、ケミカル　アンドファルマシ
ューティ力ルブレタ７　（Ｃｈｅｍ、　Ｐｈａｒｍ。

Ｂｕｌｌ、　）　１６巻４９２〜４９７ページ（１９６
８年）および３０巻１９２１〜１９２４ページ（１９８
２年）に記載された方法と同様な方法により３−アミノ
−２−ヒドロキシ−５−メチルヘキサン酸を得、これを
常法によりエステル化またはアミド化することにより製
造される。また、一般式（Ｘ）の化合物でｎが１である
化合物は、例えばスタチンまたはＮ−（ｔｅｒｔ−ブチ
ルオキシカルボニル）スタチンを常法によりエステル化
またはアミド化することにより製造される。

本発明の前記一般式（ＩＶ）で表される化合物と一般式
（Ｖ）で表される化合物との反応は常法に従って行うこ
とができる。本反応を好適に実施するには一般式（ＩＶ
）で表される化合物およびこれと等モルの一般式（Ｖ　
’）で表される化合物とをＮ。

Ｎ−ジメチルホルムアミドに溶解し、これに水冷攪拌下
ジフェニルリン酸アジドおよびトリエチルアミンを加え
一夜攪拌する。反応物を常法に従い処理、精製し、目的
物を得ることができる。

本発明の一般式（Ｉ）で表されるアミノ酸誘導体にはし
一ヒスチジン部分の不斉炭素を含め４個の不斉炭素があ
り、個々の不斉炭素における置換基の立体配置により種
々の異性体が存在する。これらの不斉炭素における置換
基の立体配置は一般式（Ｉ）で表される化合物のもつレ
ニン阻害活性に対し影響を与えるが、本発明においては
これらの異性体についてし−ヒスチジン部分以外の不斉
炭素の立体配置を特に限定するものではない。

本発明の一般式（Ｉ）で表されるアミノ酸誘導体中、一
般式（Ｘ）で表される化合物部分においてアミノ基が置
換されている炭素原子の立体配置はＳ配置であることが
好ましい。また、水酸基が置換されている炭素原子の立
体配置も活性に影響を与え、Ｒ配置が好ましいが、Ｓ配
置とＲ配置の混合物でもよい。

一般式（１’Ｖ）で表されるカルボン酸の立体構造も本
発明の一般式（Ｉ）で表される化合物のもつレニン阻害
活性にある程度影響を与える。このアシル部分の中でα
−ナフチルメチル基が置換されている炭素原子の立体配
置はＳ配置、Ｒ配置のいずれか一方に強い阻害活性が認
められるが、その混合物でもよい。

このような光学活性化合物の製造に用いられる光学活性
出発原料は常法により光学分割するか、または光学活性
な化合物を用いることにより製造される。

例えば前記一般式（Ｘ）で表される化合物のアミノ基で
置換されている炭素原子の立体配置がＳ配置である化合
物はし一ロイシンまたはスタチンを用いることにより製
造される。

本発明の前記一般式（１）で表される化合物は常法に従
い、薬理学的に許容できる酸付加塩とすることができ、
これらの塩としては塩酸塩、スルホン酸塩、ｐ−トルエ
ンスルホン酸塩、酢酸塩、クエン酸塩等をあげることが
できる。これらの酸付加塩も強いレニン活性阻害作用を
有し、蛋白分解酵素に安定であり、経口投与によって高
レニン状態のサルの血圧を明らかに下降させる。

本発明の一般式（Ｉ）で表されるアミノ酸誘導体および
その薬理学的に許容できる酸付加塩は常法に従い医薬品
組成物とすることができる。そのような医薬品組成物と
して例えば、錠剤、カプセル剤、頚粒剤、注射剤をあげ
ることができる。

前記一般式（Ｉ＞で表されるアミノ酸誘導体および薬理
学的に許容できる酸付加塩は強いレニン活性阻害作用を
有し、ヒトレニン−羊レニン基質系またはヒト高レニン
血漿での５０％阻害活性値（ＩＣｓａ＞はそれぞれ５．
２　Ｘｌ０−１〜２．５　Ｘｌ０−’モル濃度および６
．９　Ｘｌ０−７〜５．６　Ｘｌ０−’モル濃度であす
、高レニン状態のコモンマーモセットの血圧を明らかに
下降せしめ、かつ低毒性である。この一般式（Ｉ）で表
されるアミノ酸誘導体またはその薬理学的に許容できる
酸付加塩を含有する医薬品組成物を治療に用いる場合、
その投与量は疾病の程度、患者の性、年齢、体重等によ
り調整されるが、経口投与では概ね成人１日当たり５　
ｍｇ〜５０００ｍｇ、非経口投与では１日当たり１　ｍ
ｇ　−１０００ｍｇの範囲内で投与することができる。

〔実施例〕

本発明をさらに詳述するために以下に参考例および実施
例をあげる。なお、各参考例および実施例中の化合物の
融点は未補正である。また、各化合物のＮＭＲスペクト
ルは日本電子ＪＮＭ　ＧＸ２７０型高分解能核磁気共鳴
装置を用いて測定した。Ｍ　ａ　ｓ　ｓスペクトルは日
本電子ＪＭＳ−ＤＸ３００型マススペクトロメーターを
用いてＦＡＢ法により測定した。薄層クロマトグラフィ
ーはメルク社のプレコートプレートシリカゲル（ｐｒｅ
ｃｏａｔｅｄ　ｐｌａｔｅｓ　５ｉｌｉｃａ　ｇｅｌ　
　）６０Ｆ２Ｓ４を、カラムクロマトグラフィーはメル
ク社のキーゼル・ゲル（Ｋｉｅｓｅｌｇｅｌ）　６０　
（２３０−４００メツシユ）を用いて行った。また薄層
クロマトグラフィーの展開溶媒はクロロホルム／メタノ
ール／水＝８／３／１の混合液の下層およびクロロホル
ム／メタノール＝５／１の混合液の２種類を用いへＲｆ
値（Ｒｆ、およびＲ［ハを算出した。

参考例　１ コハク酸エチル３２．３ｇと１−ナフトアルデヒド２９
．０ｇを無水エタノール３２０　ｍｌに溶解し、氷冷下
に５０％水素化ナトリウム（油性Ｈ０，７ｇを加えたの
ち、３０分間加熱還流する。この溶液に１規定水酸化す
）　ＩＪウム水溶液２３０　ｍｌ２を加え、１時間加熱
還流する。減圧下に溶媒を留去し、残留物に水を加え中
性部をエーテルで抽出除去したのち、水層に濃塩酸を加
え酸性とし、エーテルで抽出する。

エーテル層を飽和食塩水で洗ったのち、無水硫酸マグネ
シウムで乾燥する。減圧下に溶媒を留去し、残留物に、
ベンゼンを加え、析出結晶をろ取し、黄色結晶の２−（
１−ナフチルメチレン）コハク酸２６．５ｇを得る。

２−（１−ナフチルメチレン）コハク酸２４．５ｇｉ：
無水酢酸２６０　ｍｌを加え、６０℃で１時間加熱する
。減圧下に溶媒を留去し、残留物にベンゼン／ヘキサン
＝１／１の混液を加え、析出結晶をろ取し、橙黄色結晶
の２−り１−ナフチルメチレン）無水コハク酸１６．０
ｇを得る。

２−（１−ナフチルメチレン）無水コハク酸３００　ｍ
ｇとメタノール１８ｍＪ２を乾燥塩化メチレン３０−に
溶かし、５時間加熱還流する。この溶液を希塩酸および
水で洗い、無水硫酸マグネシウムで乾燥する。

減圧下に溶媒を留去し、白色粉末状の３−メトキシカル
ボニル−２−（１−ナフチルメチレン）プロピオン酸３
３６　ｍｇを（辱る。このプロピオン酸　２５１ｍｇヲ
メタノール１０ｍｊ２に溶解し、１０％パラジウム炭素
３０ｍｇを加え常圧で水添する。触媒をろ去後減圧下に
溶媒を留去し、白色粉末状の３−メトキシカルボニル−
２−（１−ナフチルメチル）プロピオン酸２５０　ｍｇ
を得る。

Ｒｒ、　　：　　　０．６ｇ 融　　点：　　１１１〜１１２℃ ＩＲ（ＫＢｒ）：　　Ｌ／Ｃｏ　　１７３０．　１６９
０　　ｃｍ−’参考例　２ 参考例１と同様にして次のカルボン酸を合成した。

白色粉末 Ｒｆ、：　　０．６３ 融　　点　二　　３９〜４３℃ ＩＲ（ＫＢｒ）　：　　ｖｃｏ　　１７１Ｑ　　ｃｎｒ
’３〜（カルバモイル）−２−（１−ナフチルメチル）
プロピオン酸 Ｒｆ、：　　　０．４２ 融　　点　：　　１７９〜１８１℃ ＩＲ（ＫＢｒ）：　　ｖｃｏ　　１７００．　１６４０
　　ｃｍ−’参考例　３ （２Ｒ３，３Ｓ）−３−アミノ−２−ヒドロキシ−５−
メチルヘキサン酸イソプロピル塩酸塩 Ｎ−カルボベンゾキシ−し−ロイシン１０　ｇを乾燥テ
トラヒドロフラン６０ｍ１２に溶かし、この混合物を一
１５℃（内温）に冷却し、乾燥トリエチルアミン６．８
症を加える。攪拌下にクロル炭酸エチル４．８−の乾燥
テトラヒドロフラン１０献溶液を、内温で−１０〜−１
５℃を保ちつつ滴下し、そのまま１時間攪拌する。析出
するトリエチルアミン塩酸塩を速やかにろ去し、反応溶
液を１弄る。

一方、水素化ホウ素す）　ＩＪウム５．８ｇを水／テト
ラヒドロフラン（１：１）混合溶媒８０ｍＡに溶かし１
５〜２０℃（内温）で激しく攪拌しながら、この溶液に
先の反応溶液を約３０分かけてゆっくり滴下し、そのま
ま１時間攪拌する。反応液の有機層を分取し、これに酢
酸エチルを加え、この溶液を飽和炭酸水素ナトリウム水
溶液、飽和食塩水で洗い、硫酸マグネシウムで乾燥後、
減圧下に溶媒を留去する。残留オイルをシリカゲルカラ
ムクロマトグラフィー（溶出溶媒：クロロホルム／メタ
ノール＝２０／１）　　で精製し、Ｎ−カルボベンゾキ
シ−し−ロイシノール６．７ｇを得る。

Ｎ−カルボベンゾキシ−し−ロイシノール６．６８ｇと
乾燥トリエチルアミン１８．５ｍｊ２を乾燥ベンゼン１
０ｍＡに溶かす（Ａ液）。

一方、乾燥ピリジン１１．８ｍｆｌの乾燥ジメチルスル
ホキシド１８．９ｄ溶液を水冷攪拌下、無水硫酸５．４
−を滴下する（Ｂ液）。Ｂ液を２０〜２５℃に冷却後Δ
液を滴下し、そのまま１０分間攪拌する。反応液を水に
あけ、酢酸エチルを加える。酢酸エチル層を分取し、飽
和炭酸水素す）　ＩＪウム水溶液、水で洗い、硫酸マグ
ネシウムで乾燥後、減圧下に溶媒を留去して、Ｎ−カル
ボベンゾキシ−Ｌ−ロイシナール６．１６ｇを得る。

Ｎ−カルボベンゾキシ−Ｌ−ロイシナール２．８１ｇに
亜硫酸水素ナトリウム３．４３ｇの水２０ｍ１．溶液を
加え水冷下に１４時間攪拌する。この反応液にシアン化
カリウム１．４１ｇの水５０ｍｊ２溶液と酢酸エチル２
００　ｄを加え室温で４時間攪拌する。酢酸エチル層を
飽和食塩水で洗ったのち、無水硫酸マグネシウムで乾燥
する。減圧下に溶媒を留去し、無色油状の３−カルボベ
ンゾキシアミ／−２−ヒドロキシ−５−メチルヘキサン
ニトリル２．５４ｇを得る。

このニトリル２．５ｇに２３％塩酸５０ｍｇを加え、１
４時間加熱還流する。反応液をベンゼンで洗い、水層を
減圧下に濃縮し白色粉末状の（２Ｒ５，３Ｓ）−３−ア
ミノ−２−ヒドロキシ−５−メチルヘキサン酸１．６ｇ
（２Ｒ：　２Ｓの比が約７二３の混合物）を得る。次い
で、（２Ｒ３，３Ｓ）−３−アミノ−２−ヒドロキシ−
５−メチルヘキサン酸１．６ｇをインプロパツール１２
−に溶解し、水冷攪拌下に塩化水素ガスを吹き込み、乾
燥ベンゼン２５−を加えて、生成する水を除去しながら
、１０分間加熱還流する。反応液を減圧下に濃縮乾固し
、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出
溶媒：クロロホルム／メタノール＝１５／１）で精製し
、塩酸酸性とした後濃縮乾固し、１色粉末状の（２Ｒ５
，３Ｓ）−３−アミノ−２−ヒドロキシ−５−メチルヘ
キサン酸イソプロピル塩酸塩０．５５ｇを得る。

ＩＲ（ＫＢｒ）＋　　ｌ／ＣＯ１７２５ｃｍ−’ＮＭＲ
（Ｄ２０） δ：　　０．８〜１．１（ｍ、　　６Ｎ）、　　１．２
９（ｄ、　　６）ｔ、　　Ｊ＝６．６Ｈｚ）、　　１．
５〜２．０（ｍ、　　３Ｈ）、　　３．６〜３．７５（
ｍ、　　ＩＨ）、　　４Ｊ　〜４．７（ｍ、　　ＩＨ）
、　　５．０〜５．２（ｍ、　　ＬＨ） 参考例　４ スタチルイソアミルアミド塩酸塩 Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル）スタチン（
市販ＨＯＯｍｇとイソアミルアミン４２ｍｇをテトラヒ
ドロフラン３ｍｌとＮ、　Ｎ−ジメチルホルムアミド３
ｄの混液に溶解し、水冷攪拌下に１−ヒドロキシベンゾ
トリアゾール７９ｍｇ、続いてジシクロへキシルカルボ
ジイミド８３ｍｇを加え、そのまま１６時間攪拌する。

析出結晶をろ去したのち、減圧下に溶媒を留去し、残留
物に酢酸エチルを加え、水冷後さらに析出した結晶をろ
去する。酢酸エチル層を５％炭酸水素ナトリウム水溶液
、飽和食塩水で洗ったのち、無水硫酸マグネシウムで乾
燥する。減圧下に溶媒を留去し、残留物をシリカゲルフ
ラッシュカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：クロロ
ホルム／メタノール＝４０／１）で精製し、無色粘性油
状のＮ−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル）スタチ
ルイソアミルアミド１２５　ｗ；を得る。〔ＩＲ（液膜
）ニジｃｏ　　１６８５．　１６４０　　ｃｍ−’　〕
このアミド１２０　ｍｇをメタノール５ｍｊ２に溶解し
、２規定塩酸３．６ｒｎｌを加え、６０℃で１時間加熱
する。

減圧下に溶媒を留去し、無色粘性油状のスタチルイソア
ミルアミド塩酸塩１１２　ｍｇを得る。ＣＩＲ（液膜）
；νＣｏ　１６４０　ｃｎｒ’） 参考例　５ 参考例４と同様にして次のアミドを合成した。

白色粉末 ＩＲ（ＫＢｒ）　：　　！／Ｃｏ　　１６４０　　Ｃ［
１１−’参考例　６ （２Ｒ３，３Ｓ）−３−（Ｌ−ヒスチジル）アミノ−２
−ヒドロキシ−５−メチルへキサン酸イソプロピル２塩
酸し−ヒスチジンメチルエステル２塩酸塩１０．０ｇを
乾燥クロロホルム２００　ｍＮに懸濁し、冷却下トリエ
チルアミン１８．４ｍＡと４−メトキシベンジルオキシ
カルボニルアジド１０．２ｇを加え、０℃で１６時間攪
拌する。減圧下に溶媒を留去し、残留物に５％炭酸水素
ナトリウム水溶液を加え、酢酸エチルで抽出し、水で洗
ったのち、無水硫酸マグネシウムで乾燥する。減圧下に
溶媒を留去し、残留物をシリカゲルフラッシュカラムク
ロマトグラフィー（溶出溶媒：クロホルム／メタノール
＝１０／１）で精製し、黄色油状のＮ−（４−メトキシ
ベンジルオキシカルボニル）＝シーヒスチジンメチルエ
ステル１１．０ｇを得る。このエステル１０．９ｇをメ
タノール１１２−に溶解し、ヒドラジン１永和物９，９
ｍｊ！を加え、室温で４時間攪拌する。減圧下に溶媒を
留去し、残留物をエタノールで洗浄後、減圧下に４０℃
以下で乾燥し、白色粉末状のＮ−（４−メトキシベンジ
ルオキシカルボニル）＝し一ヒスチジンヒドラジド４．
９ｇｔ−得る。

このヒドラジド４８５　ｍｇをＮ、Ｎ−ジメチルホルム
アミド５ｍｌに懸濁し、−２０℃で攪拌下に５．１規定
乾燥塩化水素／Ｎ、Ｎ−ジメチルホルムアミド０．９０
ｍｇ。

続いて亜硝酸イソアミル０．２３ｍＮを加える。ヒドラ
ジドの消失を確認した後、反応液の温度を一３０℃まで
下げてトリエチルアミン０．６７ｍＡで中和し、Ｎ−（
４−メトキシベンジルオキシカルボニル）−シーヒスチ
ジンアジド冷溶液を調整する。別に（２Ｒ３，３Ｓ）−
３−アミノ−２−ヒドロキシ−５−メチルヘキサン酸イ
ソプロピル塩酸塩３５０　ｍｇとトリエチルアミン０．
４６−の乾燥Ｎ、Ｎ−ジメチルホルムアミド８ｒｎｌ溶
液に氷冷下、先のアジド冷溶液を滴下し、１６時間攪拌
する。減圧下に溶媒を留去し、残留物に５％炭酸水素ナ
トリウム水溶液を加えて酢酸エチルで抽出し、次いで飽
和食塩水で洗った後、無水硫酸マグネシウムで乾燥する
。減圧下に溶媒を留去し、残留物をシリカゲルフラッシ
ュカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：クロロホルム
／メタノール＝２０／１）で精製し、白色粉末状の（２
Ｒ５，３Ｓ）−３−ＣＮ−（４−メトキシベンジルオキ
シカルボニル）−Ｌ−ヒスチジル〕アミノー２−ヒドロ
キシ−５−メチルヘキサン酸イソプロピル３２５　ｍｇ
を得る。このヘキサン酸イソプロピル３２０　ｍｇをメ
タノール２０ｄに溶解し、２規定塩酸塩２．６ｍＡおよ
び１０％パラジウム炭素４８ｍｇを加え、常圧で水添す
る。触媒をろ失投、減圧下に溶媒を留去し、白色粉末状
の（２Ｒ３，３Ｓ）−３−（Ｌ−ヒスチジル）アミノ−
２−ヒドロキシ−５−メチルヘキサン酸イソプロピル２
塩酸塩２７５　ｍｇを得る。

Ｒｆ、＋　　０．０９ ＩＲ（ＫＢｒ）：　　ｖｃｏ　　１７２０．　１６８０
　　ｃｍ−’参考例　７ 参考例６と同様にし次のアミノ酸誘導体を合成した。

２塩酸塩 白色粉末 Ｒｒ、：　　　０．１６ ＩＲ（ＫＢｒ）　：　　ｖ　ｃｏ　　１６６０　　ｃｎ
ｒ　’し一ヒスチジルースタチルイソアミルアミド２塩
酸塩 白色粉末 ＲｒＩ：　　０．２９ ＩＲ（ＫＢｒ）　：　　ｖｃｏ　　１５８Ｑ　　ｃｍ−
’実施例　１ ３−メトキシカルボニル−２−（１−ナフチルメチル）
ブロヒオン酸２８ｍｇと　（２Ｒ３，３Ｓ）−３−（Ｌ
−１：、　スチリル）アミノ−２−ヒドロキシ−５−メ
チルヘキサン酸イソプロピル２塩酸塩５０ｍｇをＮ、Ｎ
−ジメチルポルムアミド３ｍ１ｌ！に溶かし、水冷攪拌
下にジフェニルリン酸アジド０．０２６−およびトリエ
チルアミン０．０４６　ｍｌを加え、そのまま−夜攪拌
する。減圧下に溶媒を留去し、残留物に５％炭酸水素す
）　ＩＪウム水溶液を加え、酢酸エチルで抽出する。水
洗後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下に溶媒を
留去する。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィ
ー（溶出溶媒：クロロホルム／メタノール＝２０／１）
で精製し、白色粉末状の（２Ｒ３，３Ｓ）−３−（３−
（メトキシカルボニル）−２−（１−ナフチルメチル）
プロピオニル−し＝ヒスチジルコアミノ−２−ヒドロキ
シ−５−メチルヘキサン酸イソプロピル２０＋ｎｇを得
る。

融　　点　：　　７５〜７８℃ Ｒｆ、　：　　０．５８ Ｒｆ２：　　０．５２ Ｍ５　　：　　ＭＨ”、　　５９５ 実施例　２ 実施例１と同様にして次の化合物を合成した。

ナフチルメチル）プロピオニル〕−し一ヒスチジル）プ
ロピル 白色粉末 融　　点　：　　９６〜１０２℃ Ｒｆ、　：　　０．５９ Ｒｆ２：　　０．５２ Ｍ５　　＋　　Ｍｌ（”、　５８０ 白色粉末 融　　点：　　７２〜７５℃ Ｒｆｌ：　　０．６９ Ｒｆ２：０．６９ Ｍ５　　：　　ＭＨ”、６２３ 実施例　３ ３−（メトキシカルボニル）−２−（１−ナフチルメチ
ル）プロピオン酸１６ｍｇとＬ−ヒスチジルースタチル
イソアミルアミド２塩酸塩２７ｍｇをＮ、Ｎ−ジメチル
ホルムアミド３７２に溶かし、水冷攪拌下にジフェニル
リン酸アジド０．０１５　ｄおよびトリエチルアミン０
．０２７　ｍＡを加え、そのまま−夜攪拌する。減圧下
に溶媒を留去し、残留物に５％炭酸水素ナトリウム水溶
液を加え、酢酸エチルで抽出する。抽出液を水洗後、無
水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下に溶媒を留去する
。残留物をプレパラティブシリカゲル薄層クロマトグラ
フィー（展開溶媒：クロロホルム／メタノール＝５／１
）で、Ｒｆ２が０．６６に相当する部分を単離精製し、
白色粉末状のＮ−［３−メトキシカルボニル−２−（１
−ナフチルメチルプロピオニル〕−シー　ヒスチジルー
スタチルイソアミルアミド１０ｍｇを得る。

融　　点　：　　７０〜７４℃ Ｒｆ、：　　　０．６５ Ｒｆ２　：　　　０．６５ Ｍ５　　　：　　　Ｍｌｌ”　、　６３６実施例　４ 実施例３と同様にして次の化合物を合成した。

融　　点　：　　７２〜７５℃ Ｒｆ、　：　　０．６１ Ｒｆ、：　　０．５３ Ｍ５　　：　　ＭＨ”、　６２２ 実施例　５ ヒトレニン−羊レニン基質でのレニン活性阻害作用 ｐＨ７，４の１２５ｍＭ　　ピロフォスフェート緩衝液
（ｐｙｒｏｐｈｏｓｐｈａｔｅ　ｂｕｆｆｅｒ）　２Ｑ
Ｑ、ｉとアンジオテンシン変換酵素阻害剤として２０ｍ
Ｍのし一フェニルアラニルーＬ−アラニル−し−プロリ
ンの水溶液２５ｄ、２０００ｎｇアンジオテンシン１当
量／ｍｇの部分精製羊レニン基質５０成、脱イオン水１
５０ｄと本発明の化合物のジメチルスルホキシド溶液５
０ｄまたはコントロール群としてジメチルスルホキシド
５０成の溶液中に２０〜３０　ｎｇアンジオテンシンＩ
　／ｍｅ／時間の精製ヒトレニン２５ＩＪＪ２を加え、
３７℃の水浴中で１５分間インキュベー）　（ｉｎｃｕ
ｂａｔｅ）　したのち、この反応液を１００℃の水浴中
に５分間入れ、反応を停止する。

冷却後２００通を分取し、レニン添加によって生成され
たアンジオテンシン■の量をラジオイムノアッセイ　（
ｒａｄｉｏｉｍｍｕｎｏ　ａｓｓａｙ）法で定量し、下
式により阻害活性を求めた。

阻害活性（％）＝ コントロール　　　本発明の化合物 口ンｉロール■ 上式により求められた阻害活性から５０９６阻害活性モ
ル濃度（ＩＣ５゜）を求め、その結果を表１に示す。な
お、各記号の意味は下記のとおりである。

Ｈ 実施例　６ ヒト高レニン血漿におけるレニン活性阻害作用ヒト高し
ニン血４１５００　ｄに１４　ｍＭ　ＥＤＴＡ　２　Ｎ
ａ　と０．３％ネオマイシン硫酸を含むｐＨ７，０の０
．５Ｍ　　ＩＪン酸緩衝液（ｐｈｏｓｐｈａｔｅ　ｂｕ
ｆｆｅｒ）　３５０ｍ、アンジオテンシン変換酵素阻害
剤として２０　ｍＭのし一フェニルアラニルーＬ−アラ
ニル−し−プロリンの水溶１５０成、および本発明の化
合物のジメチルスルホキシド溶液１００　ｄまたはコン
トロール群としてジメチルスルホキシド１００　ｄを加
える。この反応液のうち、２００Ｊｌｌを４℃の水浴中
に入れ、残った８００μを３７℃の水浴中で６０分間イ
ンキュベートする。３７℃でインキスペードした反応液
より２００　ｄを分取し、ただちに氷冷し水浴中でイン
キュベートした反応液と共にアンジオテンシンＩ量をラ
ジオイムノアッセイ法で定量する。

血漿レニン活性は３７℃でインキスペードした反応液中
のアンジオテンシン■量から４℃でインキュベートした
反応液中のアンジオテンシンＩｉｔを差し引くことによ
り算出する。阻害活性（％）は下式により求めた。

阻害活性（％）− コントロール　　　本発明の化合物 上式により求められた阻害活性から５０％阻害活性モル
濃度（ｌｃｓｏ　）を求め、その結果を表２に示す。な
お、各記号の意味は下記のとおりである。

Ｈ 実施例　７ コモンマーモセツトに対する血圧下降作用ホフバウア−
（に、　Ｇ、　）Ｉｏｆｂａｕｅｒ）らによりクリニカ
ル　アンド　エクスベリメンタル　ハイパーテンション
（（ＣＩｉｎ、εｘｐ、　Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓ、）　Ａ
５巻、７〜８号、１２３７〜１２４７ページ、１９８３
年〕に報告されているコモンマーモセット（ｃｏｍｍｏ
ｎ　ｍａｒｍｏｓｅｔ）　　を用い、経口的にフロセミ
ド１５　ｍｇ　／　ｋｇ　／　ｄａｙを１日おきに３回
投与して人為的な高レニン状態を作り出す。フロセミド
投与中止後３臼目に有意識下に血圧を測定する。

測定方法 体重３９０ｇおよび３６５ｇの雄性コモンマーモセット
を小型サル用の固定台に有意識下に固定し、態動脈圧を
非観血的血圧測定装置を用いて測定する。本発明の化合
物は希塩酸に溶かし、胃ゾンデを用いて経口的に投与す
る。１００■／　ｋｇ投与例の結果を以下に示す。

ｍｇ　／　ｋｇ経口投与（例数２） 平均血圧（ｍｍＨｇ） コントロール　　　　　　９０．９ 投与後１時間　　　　　　７８．６ ２時間　　　　　　７６．９ ３時間　　　　　　６９．４ ５時間　　　　　　７６．０ ７時間　　　　　　７７．８ ９時間　　　　　　８５．３ 〔発明の効果〕 本発明の一般式（Ｉ）で表されるアミノ酸誘導体および
それらの薬理学的に許容できる酸付加塩はヒトレニン−
羊レニン基質系でのレニン活性阻害試験において５０％
阻害活性値（ＩＣｓａ　）が５．２×１０−７〜２．５
　Ｘｌ０−”モル濃度であり、さらにヒト高レニン血漿
おけるレニン阻害試験においても５０％阻害活性値（Ｉ
Ｃ５゜）が６．９　Ｘｌ０−’〜５．６　Ｘ　１０−８
モル濃度という強いレニン活性阻害作用を示し、かつ低
毒性である。また、本発明の一般式（Ｉ）で表されるア
ミノ酸誘導体およびそれらの薬理学的に許容できる酸付
加塩は、蛋白分解酵素、たとえばキモトリプシン、ペプ
シンのような酵素に対し安定であり、経口投与により高
レニン状態のサルの血圧を下降させることができる。

したがって、本発明の一般式（Ｉ）で表されるアミノ酸
誘導体およびそれらの薬理学的に許容できる酸付加塩は
経口投与可能な高血圧症治療剤として有用である。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １）一般式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中のＲ＾１はカルバモイル基まはた低級アルコキシ
   カルボニル基であり、ＨｉｓはＬ−ヒスチジル基であり
   、ｎは０または１であり、Ｙは−Ｏ−または−ＮＨ−で
   あり、Ｒ＾２は炭素数１〜７の直鎖状または枝分かれ状
   のアルキル基である）で表されるアミノ酸誘導体および
   それらの薬理的に許容できる酸付加塩。 ２）一般式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中のＣ＾＊はＳ配置を示し、Ｒ＾１、Ｈｉｓ、ｎ、
   ＹおよびＲ＾２は前記と同じ意味を持つ）で表される特
   許請求の範囲第１項記載のアミノ酸誘導体およびそれら
   の薬理学的に許容できる酸付加塩。 ３）一般式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中のＲ＾１、Ｈｉｓ、Ｃ＾＊、ＹおよびＲ＾２は前
   記と同じ意味を持つ）で表される特許請求の範囲第２項
   記載のアミノ酸誘導体およびそれらの薬理学的に許容で
   きる酸付加塩。 ４）一般式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中のＲ＾１、Ｈｉｓ、Ｃ＾＊、ＹおよびＲ＾２は前
   記と同じ意味を持つ）で表される特許請求の範囲第２項
   記載のアミノ酸誘導体およびそれらの薬理学的に許容で
   きる酸付加塩。 ５）式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中のＨｉｓおよびＣ＾＊は前記と同じ意味を持つ）
   で表される特許請求の範囲第３項記載のアミノ酸誘導体
   およびその薬理学的に許容できる酸付加塩。 ６）式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中のＨｉｓおよびＣ＾＊は前記と同じ意味を持つ）
   で表される特許請求の範囲第３項記載のアミノ酸誘導体
   およびその薬理学的に許容できる酸付加塩。 ７）式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中のＨｉｓおよびＣ＾＊は前記と同じ意味を持つ）
   で表される特許請求の範囲第３項記載のアミノ酸誘導体
   およびその薬理学的に許容できる酸付加塩。 ８）式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中のＨｉｓおよびＣ＾＊は前記と同じ意味を持つ）
   で表される特許請求の範囲第３項記載のアミノ酸誘導体
   およびその薬理学的に許容できる酸付加塩。 ９）式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中のＨｉｓおよびＣ＾＊は前記と同じ意味を持つ）
   で表される特許請求の範囲第４項記載のアミノ酸誘導体
   およびその薬理学的に許容できる酸付加塩。