JPS6210022A - モノクロ−ナル抗体 - Google Patents
モノクロ−ナル抗体Info
- Publication number
- JPS6210022A JPS6210022A JP14782085A JP14782085A JPS6210022A JP S6210022 A JPS6210022 A JP S6210022A JP 14782085 A JP14782085 A JP 14782085A JP 14782085 A JP14782085 A JP 14782085A JP S6210022 A JPS6210022 A JP S6210022A
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- JP
- Japan
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- pseudomonas aeruginosa
- monoclonal antibody
- igg
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- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
産業上の利用分野
本発明はシュードモナス・エルギノーザ（緑膿菌）感染
症の予防、治療に有用なモノクローナル抗体に関する。
症の予防、治療に有用なモノクローナル抗体に関する。
従って本発明は医薬の産業分野で有用な細菌感染症の予
防および治療用製剤を提供する。
防および治療用製剤を提供する。
従来の技術
緑膿菌に対するモノクローナル抗体を用いて緑膿菌の実
験的腹腔内感染症の治療を行った報告は、特開昭５９−
２９６２２およびジャーナル・オブ・インフエクシャス
・ディシーズ（Ｊ、 Ｉｎｆｅｃｔ、 Ｄｉｓ、）。
験的腹腔内感染症の治療を行った報告は、特開昭５９−
２９６２２およびジャーナル・オブ・インフエクシャス
・ディシーズ（Ｊ、 Ｉｎｆｅｃｔ、 Ｄｉｓ、）。
１５０、５７０−５７６ （１９８４）などにある。
前者には、緑膿菌Ａ−Ｅ群それぞれについてモノクロー
ナル抗体が採取されたとの記載はあるが、感染治療実験
の結果が示されているのはＡ、Ｆ。
ナル抗体が採取されたとの記載はあるが、感染治療実験
の結果が示されているのはＡ、Ｆ。
ＧおよびＬ群についてモノクローナル抗体を菌感染時よ
り前に腹腔的投与法で投与した場合の予防効果が示され
ているのみであり、Ｅ群については何の性質も示されて
いない。後者には、）ｌｏｍｍａｓｅｒｏｔｙｐｅ ７
、すなわちＢ群に対するモノクローナル抗体を同じくＢ
群の実験的腹腔内感染症に腹腔的投与法で予防的に投与
した場合の予防効果について記載されているのみである
。両報告とも得られたモノクローナル抗体を菌感染後に
投与した場合の治療効果、モノクローナル抗体を実験的
腹腔的感染症に静脈内投与で投与した場合の防御効果な
らびに抗生物質と併用した場合の効果については全く言
及されていない。
り前に腹腔的投与法で投与した場合の予防効果が示され
ているのみであり、Ｅ群については何の性質も示されて
いない。後者には、）ｌｏｍｍａｓｅｒｏｔｙｐｅ ７
、すなわちＢ群に対するモノクローナル抗体を同じくＢ
群の実験的腹腔内感染症に腹腔的投与法で予防的に投与
した場合の予防効果について記載されているのみである
。両報告とも得られたモノクローナル抗体を菌感染後に
投与した場合の治療効果、モノクローナル抗体を実験的
腹腔的感染症に静脈内投与で投与した場合の防御効果な
らびに抗生物質と併用した場合の効果については全く言
及されていない。
発明が解決しようとする問題
細菌感染症の治療には、抗生物質をはじめとする化学療
法剤が広く使用され、大きな治療効果をあげてきた。し
かしながら、宿主免疫機能の低下した患者などに見られ
る難治感染症は化学療法剤での治療が困難で根治不能で
あった。
法剤が広く使用され、大きな治療効果をあげてきた。し
かしながら、宿主免疫機能の低下した患者などに見られ
る難治感染症は化学療法剤での治療が困難で根治不能で
あった。
難治感染症に対し、健康人の血液から精製した免疫グロ
ブリンＧ（以下ＩｇＧと略す）を抗生物質と併用して使
用する治療方法が開発されている。
ブリンＧ（以下ＩｇＧと略す）を抗生物質と併用して使
用する治療方法が開発されている。
この方法は従来皮下投与法でしか用いられなかった■ｇ
Ｇ製剤が、静脈内投与が可能であるように改良されてか
らさらに普及が進んだ。
Ｇ製剤が、静脈内投与が可能であるように改良されてか
らさらに普及が進んだ。
緑膿菌は元来弱毒性の細菌として知られている。
しかし、近年抗生物質による化学療法の普及に伴い、菌
交代現象の結果としてこの緑膿菌が頻繁に分離されるよ
うになってきた。また、免疫低下宿主、たとえば癌患者
あるいは免疫抑制剤被投与者においても緑膿菌による感
染症は非常に多い。ひとたび緑膿菌に感染すると、抗生
物質による化学療法が困難で、難治性の感染症となるこ
とが多い。
交代現象の結果としてこの緑膿菌が頻繁に分離されるよ
うになってきた。また、免疫低下宿主、たとえば癌患者
あるいは免疫抑制剤被投与者においても緑膿菌による感
染症は非常に多い。ひとたび緑膿菌に感染すると、抗生
物質による化学療法が困難で、難治性の感染症となるこ
とが多い。
緑膿菌は、その菌体成分の抗原性の差異により、第１表
に示すようにＡ ＝ Ｍ群の１３の血清型に分類される
。本明細書では、緑膿菌研究会主催の型別検討委員会の
決定に従って、緑膿菌を分類することとした。なお、参
考のために水量（Ｈｏｍｍａ）らの分類およびフィッシ
ャー（Ｆｉｓｈｅｒ ）の分類をあわせて対比した。
に示すようにＡ ＝ Ｍ群の１３の血清型に分類される
。本明細書では、緑膿菌研究会主催の型別検討委員会の
決定に従って、緑膿菌を分類することとした。なお、参
考のために水量（Ｈｏｍｍａ）らの分類およびフィッシ
ャー（Ｆｉｓｈｅｒ ）の分類をあわせて対比した。
第 １ 表
緑膿菌１１
菌 株 研究会 Ｈｏｍｍａ Ｆｉｓｈｅｒ
＋１０１００１ Ａ １１１０１０２１
Ｃ３６ １１０１００４Ｄ ４ １１０１１３０ Ｅ ５ ２１１
０１００６ Ｆ ６１１０１０２０
Ｇ ８ １＋１０１００９ ８
９ ５ＩＩＤ１（１１０１１０４ ［１０１０１１Ｊ １１ ＋＋０１０１２ Ｋ １２Ｉ
Ｉロ ５１４１ Ｌ １４１
１０５０１８ Ｍ １５本１ 緑膿菌研究
会主催型別検討委員会の決定（１９７５年）緑膿菌感染
症は従来、生体の液性免疫（具体的には免疫グロブリン
などを指す）により、良く防御されることが知られてい
る。この免疫グロブリンによる防御は、同一血清型に属
する菌株の間にほぼ特異的に成立することも知られてい
る。すなわち、Ａ群に属する緑膿菌は、Ａ群の緑膿菌に
対して特異的に反応する免疫グロブリンによって非常に
良く防御される。
＋１０１００１ Ａ １１１０１０２１
Ｃ３６ １１０１００４Ｄ ４ １１０１１３０ Ｅ ５ ２１１
０１００６ Ｆ ６１１０１０２０
Ｇ ８ １＋１０１００９ ８
９ ５ＩＩＤ１（１１０１１０４ ［１０１０１１Ｊ １１ ＋＋０１０１２ Ｋ １２Ｉ
Ｉロ ５１４１ Ｌ １４１
１０５０１８ Ｍ １５本１ 緑膿菌研究
会主催型別検討委員会の決定（１９７５年）緑膿菌感染
症は従来、生体の液性免疫（具体的には免疫グロブリン
などを指す）により、良く防御されることが知られてい
る。この免疫グロブリンによる防御は、同一血清型に属
する菌株の間にほぼ特異的に成立することも知られてい
る。すなわち、Ａ群に属する緑膿菌は、Ａ群の緑膿菌に
対して特異的に反応する免疫グロブリンによって非常に
良く防御される。
Ａ−Ｍ群の血清型に属する緑膿菌は各群均等に存在する
ものではない。感染症患者より分離される緑膿菌の血清
型の頻度には偏りが存在する。Ｅ群の緑膿菌は分離頻度
が最も高く、しかもＥ群の ・緑膿菌では熱傷局所療法
剤もしくは抗生物質に対する耐性株の発現頻度が極めて
高い〔ケモセラピイ （（：ｈｅ＋ｎｏｔｈｅｒａｐ
ｙ） 、 ３２． ４３９〜４４７ （１９８４
）） 。
ものではない。感染症患者より分離される緑膿菌の血清
型の頻度には偏りが存在する。Ｅ群の緑膿菌は分離頻度
が最も高く、しかもＥ群の ・緑膿菌では熱傷局所療法
剤もしくは抗生物質に対する耐性株の発現頻度が極めて
高い〔ケモセラピイ （（：ｈｅ＋ｎｏｔｈｅｒａｐ
ｙ） 、 ３２． ４３９〜４４７ （１９８４
）） 。
また、Ｅ群の緑膿菌は近年増加傾向にある〔第１９会緑
膿菌研究会抄録、１２頁（１９８５） ）。従って、緑
膿菌感染症の効率的予防もしくは治療には、Ｅ群の緑膿
菌に対して感染予防効果もしくは感染治療効果を有する
免疫グロブリンを使用するのが効果的である。
膿菌研究会抄録、１２頁（１９８５） ）。従って、緑
膿菌感染症の効率的予防もしくは治療には、Ｅ群の緑膿
菌に対して感染予防効果もしくは感染治療効果を有する
免疫グロブリンを使用するのが効果的である。
ヒトの血液中には、Ｅ群の緑膿菌に対する免疫グロブリ
ンが検出されることもあるが、これは極めて微量であっ
て、血液からの採取には限度があり、治療効果を期待す
るのに充分な量を供給することはできない。
ンが検出されることもあるが、これは極めて微量であっ
て、血液からの採取には限度があり、治療効果を期待す
るのに充分な量を供給することはできない。
従って、該緑膿菌に対して高い抗体価を有し、予防的投
与ばかりでなく菌感染後に治療的に投与しても高い治療
効果を示し、かつ腹腔的投与ばかりでなく静脈内投与法
で投与しても優れた防御効果を示し、しかも従来から使
われている抗生物質と併用した場合に著しい併用効果を
示すモノクローナル抗体を入手することが大きな問題で
ある。
与ばかりでなく菌感染後に治療的に投与しても高い治療
効果を示し、かつ腹腔的投与ばかりでなく静脈内投与法
で投与しても優れた防御効果を示し、しかも従来から使
われている抗生物質と併用した場合に著しい併用効果を
示すモノクローナル抗体を入手することが大きな問題で
ある。
問題を解決するための手段
本発明者は、８群緑膿菌による感染症に対して腹腔的投
与または静脈内投与で感染防御効果を示す薬剤で、かつ
緑膿菌Ｅ群による感染症を効率良く予防もしくは治療す
ることができ、さらに抗生物質と併用した場合に高い併
用効果を示す薬剤を得る目的で研究を行った。
与または静脈内投与で感染防御効果を示す薬剤で、かつ
緑膿菌Ｅ群による感染症を効率良く予防もしくは治療す
ることができ、さらに抗生物質と併用した場合に高い併
用効果を示す薬剤を得る目的で研究を行った。
本発明者が、天然界から採取した８群緑膿菌に属するシ
ュードモナス・エルギノーザ３７２７（ＦＥＲＭ Ｉ
Ｐ−ｇ３２乙 ）の菌体を免疫抗原として用いて得られ
るリンパ球とミエローマ細胞との融合細胞（ハイブリド
ーマ）が生産するモノクローナル抗体が８群緑膿菌に特
異的に反応し、かつ腹腔的投与または静脈内投与で同型
緑膿菌感染症の予防および治療に著効を示すこと、さら
に抗生物質との併用によって相乗的効果が得られること
を見出し本発明を完成した。
ュードモナス・エルギノーザ３７２７（ＦＥＲＭ Ｉ
Ｐ−ｇ３２乙 ）の菌体を免疫抗原として用いて得られ
るリンパ球とミエローマ細胞との融合細胞（ハイブリド
ーマ）が生産するモノクローナル抗体が８群緑膿菌に特
異的に反応し、かつ腹腔的投与または静脈内投与で同型
緑膿菌感染症の予防および治療に著効を示すこと、さら
に抗生物質との併用によって相乗的効果が得られること
を見出し本発明を完成した。
発明の構成
本発明は、緑膿菌８群微生物に特異的に結合し、ＩｇＧ
に属し、静脈内投与によってマウスの緑膿菌による感染
症を予防および治療し得るモノクローナル抗体ならびに
これを有効成分とする緑膿菌感染予防、治療用薬剤を提
供する。
に属し、静脈内投与によってマウスの緑膿菌による感染
症を予防および治療し得るモノクローナル抗体ならびに
これを有効成分とする緑膿菌感染予防、治療用薬剤を提
供する。
本発明モノクローナル抗体は、緑膿菌に対する抗体を産
生ずる細胞とミエローマ細胞とのノ＼イブリドーマを培
養することによって得られる。
生ずる細胞とミエローマ細胞とのノ＼イブリドーマを培
養することによって得られる。
本発明のハイブリドーマは、緑膿菌菌体の自家融解液で
マウスを免疫し、そのリンパ球をミエローマ細胞と融合
させることによる通常の方法〔ネイチ＋ −（Ｎａｔｕ
ｒｅ）、 ２６６、５５０−５５２ （１９７７）
〕によって調製できる。たとえば、緑膿菌菌体の自家融
解液をフロイントの完全アジュバントに懸濁し、これを
ＢＡＬＢ／ｃマウスに腹腔的投与（ｉｐ）し免疫する。
マウスを免疫し、そのリンパ球をミエローマ細胞と融合
させることによる通常の方法〔ネイチ＋ −（Ｎａｔｕ
ｒｅ）、 ２６６、５５０−５５２ （１９７７）
〕によって調製できる。たとえば、緑膿菌菌体の自家融
解液をフロイントの完全アジュバントに懸濁し、これを
ＢＡＬＢ／ｃマウスに腹腔的投与（ｉｐ）し免疫する。
充分に免疫されたマウスの膵臓を取り出し、肺細胞を単
離する。一方、あらかじめマウスのミエローマ細胞を標
準培養液で培養しておき、これを上記肺細胞と培養液中
で混合し、たとえばポリエチレングリコール（ＰＥＧ）
を添加して両細胞を融合させる。ハイブリドーマのみが
生育できる培地中で、ハイブリドーマを選択する。
離する。一方、あらかじめマウスのミエローマ細胞を標
準培養液で培養しておき、これを上記肺細胞と培養液中
で混合し、たとえばポリエチレングリコール（ＰＥＧ）
を添加して両細胞を融合させる。ハイブリドーマのみが
生育できる培地中で、ハイブリドーマを選択する。
その後、緑膿菌８群微生物に対する抗体を生産するハイ
ブリドーマのみを選択する。選択培地としては、たとえ
ば後記ＨＡＴ培地を使用する。具体的には・マイクロプ
レートの１ウエルに数個のノ翫イブリドーマが出現でき
るような濃度に細胞浮遊液を調整し、これをマイクロプ
レートに分注し、ＨＡＴ培地でハイブリドーマを増殖さ
せる。ＨＡＴ培地中の抗体価をたとえば、酵素免疫法（
ＥＩＡ）で測定し、所望の抗体を産生ずるハイブリドー
マを単クローン化する。
ブリドーマのみを選択する。選択培地としては、たとえ
ば後記ＨＡＴ培地を使用する。具体的には・マイクロプ
レートの１ウエルに数個のノ翫イブリドーマが出現でき
るような濃度に細胞浮遊液を調整し、これをマイクロプ
レートに分注し、ＨＡＴ培地でハイブリドーマを増殖さ
せる。ＨＡＴ培地中の抗体価をたとえば、酵素免疫法（
ＥＩＡ）で測定し、所望の抗体を産生ずるハイブリドー
マを単クローン化する。
以上のようにして確立された単クローン性ハイブリドー
マを通常のハイブリドーマの培養法、たとえば固体培地
または液体培地を用いる培養ならびにマウス腹腔内など
を利用する生体内培養によって培養し、生成するモノク
ローナル抗体を採取する。
マを通常のハイブリドーマの培養法、たとえば固体培地
または液体培地を用いる培養ならびにマウス腹腔内など
を利用する生体内培養によって培養し、生成するモノク
ローナル抗体を採取する。
培養物からのモノクローナル抗体の採取は、培養物から
細胞を分離して得られる上清を抗マウス免疫グロブリン
−セファロース４Ｂなどを用いるカラムクロマトグラフ
ィーなどの常法により行うことができる。
細胞を分離して得られる上清を抗マウス免疫グロブリン
−セファロース４Ｂなどを用いるカラムクロマトグラフ
ィーなどの常法により行うことができる。
本発明のモノクローナル抗体は緑膿菌８群微生物に特異
的に反応し、ＩｇＧクラスに属する。
的に反応し、ＩｇＧクラスに属する。
モノクローナル抗体の具体例は、１０６３゜２０７９お
よび４２０３と番号をつけたもので、それぞれＩｇＧ、
、ＩｇＧ１およびＩｇＧｚｂに属する。
よび４２０３と番号をつけたもので、それぞれＩｇＧ、
、ＩｇＧ１およびＩｇＧｚｂに属する。
本発明のモノクローナル抗体の適当量を若齢マウスに腹
腔内または静脈内投与しておくと、その後の５０％致死
量（ＬＤ５０）〜５倍最小致死量（５ＭＬＤ）の緑膿菌
の攻撃に耐過する。
腔内または静脈内投与しておくと、その後の５０％致死
量（ＬＤ５０）〜５倍最小致死量（５ＭＬＤ）の緑膿菌
の攻撃に耐過する。
さらに、本発明のモノクローナル抗体と抗生物質との併
用は、感染予防および治療に相乗的効果を与える。抗生
物質としてはアストロマイシン。
用は、感染予防および治療に相乗的効果を与える。抗生
物質としてはアストロマイシン。
ミクロノマイシンなどのアミノ配糖体抗生物質ならびに
ラタモキセフ、セフォペラゾンなどのβ−ラクタム抗生
物質などが好適に使用される。本発明モノクローナル抗
体の投与方法は、ヒト静注用ＩｇＧの用法に準じて行う
ことができる。抗体価が高いため投与量はヒト静注用Ｔ
ｇＧに比べて大幅に少なくできる。
ラタモキセフ、セフォペラゾンなどのβ−ラクタム抗生
物質などが好適に使用される。本発明モノクローナル抗
体の投与方法は、ヒト静注用ＩｇＧの用法に準じて行う
ことができる。抗体価が高いため投与量はヒト静注用Ｔ
ｇＧに比べて大幅に少なくできる。
実施例１、
（１）培 地
（ａ） 標準培地：ＲＰＭｌ１６４０培地（フロー・
ラボラトリーズ社製）に炭酸水素ナトリウム（２ｇ／ｆ
ｆ）、ピルビン酸（１ｍＭ）、ぺ；、ンリン（５０単位
／ｍ＋）、ストレプトマイシン（５０■／ｍ１）および
２−メルカプトエタノール（２Ｘ １０−５Ｍ）を溶解
シタ後、炭酸ガスを吹き込みｐＨを中性に調整し、これ
に１０％になるようにウシ胎児血清（フロー・ラボラト
リーズ社製）を添加したもの。
ラボラトリーズ社製）に炭酸水素ナトリウム（２ｇ／ｆ
ｆ）、ピルビン酸（１ｍＭ）、ぺ；、ンリン（５０単位
／ｍ＋）、ストレプトマイシン（５０■／ｍ１）および
２−メルカプトエタノール（２Ｘ １０−５Ｍ）を溶解
シタ後、炭酸ガスを吹き込みｐＨを中性に調整し、これ
に１０％になるようにウシ胎児血清（フロー・ラボラト
リーズ社製）を添加したもの。
（ｂ）ＨＡＴ培地二上記標準培地中にチミジン。
ヒポキサンチンおよびアミノプテリンをそれぞれ１６μ
Ｍ、１００μＭおよび４μＭとなるように溶解したもの
。
Ｍ、１００μＭおよび４μＭとなるように溶解したもの
。
（Ｃ）ＨＴ培地：上記標準培地中にチミジンおよびヒポ
キサンチンをそれぞれ１６μＭおよび１００μＭとなる
ように溶解したもの。
キサンチンをそれぞれ１６μＭおよび１００μＭとなる
ように溶解したもの。
（２）抗原の調製
緑膿菌診断用免疫血清（東芝化学社製）を用いてＥ群と
決定された臨床分離株シュードモナス・エルギノーザ３
７２７をハートインツユジョン寒天斜面培地（栄研化学
社製）（ｐＨ７，４）で３７℃で一夜培養した。斜面よ
り１白金耳の菌体をとり１０ Ｑｍｌの完全合成培地〔
グルタミン酸ソーダ２０ｇ、グルコース５ｇ、リン酸２
ナトリウム５．６ ｇ 、 リン酸カリウム０．２５
ｇ 。
決定された臨床分離株シュードモナス・エルギノーザ３
７２７をハートインツユジョン寒天斜面培地（栄研化学
社製）（ｐＨ７，４）で３７℃で一夜培養した。斜面よ
り１白金耳の菌体をとり１０ Ｑｍｌの完全合成培地〔
グルタミン酸ソーダ２０ｇ、グルコース５ｇ、リン酸２
ナトリウム５．６ ｇ 、 リン酸カリウム０．２５
ｇ 。
硫酸マグネシウム０．１ ｇ 、硝酸カルシウム１０ｍ
ｇおよび硫酸第一鉄５０■を蒸留水に溶かしてｌβにし
た培地（ｐ Ｈ７，４） 〕を含む坂ロフラスコ１０本
（合計ｌｌ２）に接種した。これを３７℃で１８時間振
盪培養した。その後、１１、ｏｏＯｘｇの遠心分離によ
り集菌し、菌体にトルエン４ Ｑｍｌを加えて攪拌した
。トルエン処理菌体を３７℃で４８時間静置し、その後
２０．０００ｘｇの遠心分離を行い、遠心チューブの管
底より沈澱層、水層、トルエン層の３層に分離させた。
ｇおよび硫酸第一鉄５０■を蒸留水に溶かしてｌβにし
た培地（ｐ Ｈ７，４） 〕を含む坂ロフラスコ１０本
（合計ｌｌ２）に接種した。これを３７℃で１８時間振
盪培養した。その後、１１、ｏｏＯｘｇの遠心分離によ
り集菌し、菌体にトルエン４ Ｑｍｌを加えて攪拌した
。トルエン処理菌体を３７℃で４８時間静置し、その後
２０．０００ｘｇの遠心分離を行い、遠心チューブの管
底より沈澱層、水層、トルエン層の３層に分離させた。
水層のみを採取して、緑膿菌の自家融解液とした。な右
上記の完全合成培地右よび自家融解液の調製については
、たとえば、ジャーナル・オブ・バタテリオロジイ（Ｊ
。
上記の完全合成培地右よび自家融解液の調製については
、たとえば、ジャーナル・オブ・バタテリオロジイ（Ｊ
。
Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ、）、 ８７．６３０−６４０
（１９６４）を参照することができる。この自家融解液
と等量のフロイントの完全アジュバントをともに懸濁し
て免疫原とした。免疫操作に用いた緑膿菌の自家融解液
は、以下「抗原液」と呼ぶこともある。
（１９６４）を参照することができる。この自家融解液
と等量のフロイントの完全アジュバントをともに懸濁し
て免疫原とした。免疫操作に用いた緑膿菌の自家融解液
は、以下「抗原液」と呼ぶこともある。
（３）免 疫
５〜８週令のＢＡＬＢ／Ｃ雄マウス（日本チャールスリ
バ株式会社）の腹腔内に上記のように調製した抗原液０
．２ｍｌをアジュバント（ディフコラボラトリーズ社製
）０．２ｍｌとともに注射し、その３週間後およびさら
にその１０日後に抗原液をＱ、２ｍｌずつ追加免疫した
。
バ株式会社）の腹腔内に上記のように調製した抗原液０
．２ｍｌをアジュバント（ディフコラボラトリーズ社製
）０．２ｍｌとともに注射し、その３週間後およびさら
にその１０日後に抗原液をＱ、２ｍｌずつ追加免疫した
。
（４）肺細胞の採取
最終免疫後４日のマウスを断頭放血し、無菌的に膵臓を
取り出した。これをウシ胎児血清を含まない標準培地で
充分に洗浄し、無菌プラスチックシャーレ内でピンセッ
トを用いて肺細胞を標準培地に浮遊させた。粗大な細胞
塊を無菌ガーゼで濾過して除いた。ｐ液を１．３００
ｒｐｏｎ。
取り出した。これをウシ胎児血清を含まない標準培地で
充分に洗浄し、無菌プラスチックシャーレ内でピンセッ
トを用いて肺細胞を標準培地に浮遊させた。粗大な細胞
塊を無菌ガーゼで濾過して除いた。ｐ液を１．３００
ｒｐｏｎ。
５分間遠心分離し、沈渣の肺細胞をｌ Ｑｍｌの無血清
標準培地に再浮遊させた。同じ操作をもう一度くり返し
、最終的に４．２Ｘ１０’個の肺細胞を得た。
標準培地に再浮遊させた。同じ操作をもう一度くり返し
、最終的に４．２Ｘ１０’個の肺細胞を得た。
（５） ミエローマ細胞
ｐ３−Ｕｌ（カレント・トピックス・イン・ミクロバイ
オロジイ・アンド・イムノロシイ（Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｔ
ｏｐｉｃｓ ｉｎ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ ａｎｄ
Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ８１、１−７ （１９７８））
のマウスミエローマ細胞１×１０６個を標準培地３０
Ｑｍｌで３７℃、７２時間培養し、対数増殖期の該細胞
をｌＸ１０３個採取した。
オロジイ・アンド・イムノロシイ（Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｔ
ｏｐｉｃｓ ｉｎ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ ａｎｄ
Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ８１、１−７ （１９７８））
のマウスミエローマ細胞１×１０６個を標準培地３０
Ｑｍｌで３７℃、７２時間培養し、対数増殖期の該細胞
をｌＸ１０３個採取した。
〔６）細胞融合
上記ミエローマ細胞を無血清標準培地で１回洗浄し、上
記の操作で調製しておいた４、２Ｘ１０８個のマウス牌
細胞と混合した。これをただちに１．３０Ｏｒｐｍ、５
分間遠心分離して上清を捨てた。沈渣となった細耳訓ご
５０％ポリエチレングリコール４．０００（メルク社製
）を４ｍ１滴下した。３分間細胞とポリエチレングリコ
ールとを攪拌混合した後、１．５００ｒｐｍ、６分間遠
心分離した。上清のポリエチレングリコールを吸引除去
して、さらに無血清標準培地４ｍｌを注入し、細胞を浮
遊させた。再度１．５００ｒｐｍ５分間遠心分離して、
上清を捨て沈渣をＨＡＴ培地２０ Ｑｍｌに浮遊させた
。なお、このＨΔＴ培地には２ＸＩＱ’個／＋ｎｌの濃
度になるように５週令のＢＡＬＢ／Ｃマウスの胸腺より
無菌的に採取した胸腺細胞を混入しておいた。
記の操作で調製しておいた４、２Ｘ１０８個のマウス牌
細胞と混合した。これをただちに１．３０Ｏｒｐｍ、５
分間遠心分離して上清を捨てた。沈渣となった細耳訓ご
５０％ポリエチレングリコール４．０００（メルク社製
）を４ｍ１滴下した。３分間細胞とポリエチレングリコ
ールとを攪拌混合した後、１．５００ｒｐｍ、６分間遠
心分離した。上清のポリエチレングリコールを吸引除去
して、さらに無血清標準培地４ｍｌを注入し、細胞を浮
遊させた。再度１．５００ｒｐｍ５分間遠心分離して、
上清を捨て沈渣をＨＡＴ培地２０ Ｑｍｌに浮遊させた
。なお、このＨΔＴ培地には２ＸＩＱ’個／＋ｎｌの濃
度になるように５週令のＢＡＬＢ／Ｃマウスの胸腺より
無菌的に採取した胸腺細胞を混入しておいた。
（７）ハイブリドーマの形成
上記細胞浮遊液２０ Ｑｍｌを４８穴平底プレー、ト（
コースタ−社製）に分注して３７℃、１０％炭酸ガス、
９０％空気、相対湿度１００％にて培養した。その後４
日ＨＡＴ培地を交換しつつ、続けて培養した。培養開始
後１４日に顕微鏡下に観察し、増殖陽性ウェルの培養上
清を得て抗体スクリーニングを行った。
コースタ−社製）に分注して３７℃、１０％炭酸ガス、
９０％空気、相対湿度１００％にて培養した。その後４
日ＨＡＴ培地を交換しつつ、続けて培養した。培養開始
後１４日に顕微鏡下に観察し、増殖陽性ウェルの培養上
清を得て抗体スクリーニングを行った。
（８）抗体のスクリーニング
抗体のスクリーニングはＥＩＡ法〔ジャーナル・オブ・
イムノロジカル・メソッド（Ｊ。
イムノロジカル・メソッド（Ｊ。
１ｍｍｕｎｏｌ、 Ｍｅｔｈ、 ）、 ５３． １８７
−１９４ （１９８２））で行った。たとえば、９６穴
ポリ塩化ビニールプレート（ヌンク社製）に抗原液を１
００ＩＩＪｌずつ分注し、４℃で４８時間放置した。ウ
ェルの抗原液を吸引除去し、リン酸１ナトリウム１３．
１１ｇ、リン酸２ナトリウム３０．６６ｇ、塩化ナトリ
ウム８５． ＯＯｇをｌＯｌになるように蒸留水に溶か
したリン酸緩衝化生理的食塩水（ｐＨ７，４、以下ＰＢ
Ｓと略す）０．２ｍｌでウェルを３回洗浄した。洗浄し
た各ウェルにハイブリドーマ増殖陽性ウェルの培養液を
１００４注入し、室温で３時間放置した。ウェルの培養
液を吸引除去し、ＰＢＳで３回洗浄した。ついで、この
ＰＢＳを吸引除去し、さらにウレアーゼで標識した抗マ
ウスウサギ抗体（コモンウエルス・シーラム・ラボラト
リ−社製）を１００４注入した。室温で３時間反応させ
、反応後ＰＢＳで３回洗浄し、さらに蒸留水０．２１１
１１で３回洗浄して基質液を１００ＩＩｊｌ注入した。
−１９４ （１９８２））で行った。たとえば、９６穴
ポリ塩化ビニールプレート（ヌンク社製）に抗原液を１
００ＩＩＪｌずつ分注し、４℃で４８時間放置した。ウ
ェルの抗原液を吸引除去し、リン酸１ナトリウム１３．
１１ｇ、リン酸２ナトリウム３０．６６ｇ、塩化ナトリ
ウム８５． ＯＯｇをｌＯｌになるように蒸留水に溶か
したリン酸緩衝化生理的食塩水（ｐＨ７，４、以下ＰＢ
Ｓと略す）０．２ｍｌでウェルを３回洗浄した。洗浄し
た各ウェルにハイブリドーマ増殖陽性ウェルの培養液を
１００４注入し、室温で３時間放置した。ウェルの培養
液を吸引除去し、ＰＢＳで３回洗浄した。ついで、この
ＰＢＳを吸引除去し、さらにウレアーゼで標識した抗マ
ウスウサギ抗体（コモンウエルス・シーラム・ラボラト
リ−社製）を１００４注入した。室温で３時間反応させ
、反応後ＰＢＳで３回洗浄し、さらに蒸留水０．２１１
１１で３回洗浄して基質液を１００ＩＩｊｌ注入した。
３７℃で４０分間インキュベートして発色を観察し、ブ
ルーに発色したものを抗体陽性とした。
ルーに発色したものを抗体陽性とした。
（９）抗体産生ハイブリドーマのクローニング抗体陽性
と判定されたハイブリドーマを限界希釈法によりクロー
ニングした。すなわち、ハイブリドーマ（０，５個／ｍ
１）とフィーダー用の胸腺細胞（２ＸＩＯ６個／ｍｌ
）との細胞浮遊ＨＡＴ培地をＱ、２ｍｌずつ９６穴の平
底マイクロプレートに分注した。３７℃で２週間培養し
、１穴に１個のコロニーのみが形成され、かつ抗体陽性
を示す穴の細胞を目的のモノクローン化ハイブリドーマ
とした。
と判定されたハイブリドーマを限界希釈法によりクロー
ニングした。すなわち、ハイブリドーマ（０，５個／ｍ
１）とフィーダー用の胸腺細胞（２ＸＩＯ６個／ｍｌ
）との細胞浮遊ＨＡＴ培地をＱ、２ｍｌずつ９６穴の平
底マイクロプレートに分注した。３７℃で２週間培養し
、１穴に１個のコロニーのみが形成され、かつ抗体陽性
を示す穴の細胞を目的のモノクローン化ハイブリドーマ
とした。
α１ ハイブリドーマの大量培養
モノクローン化したハイブリドーマを９６穴プレート（
ヌンク社製）から２Ｘ１０５個を４８穴プレート（コー
スタ−社製）へ移し、さらに９６時間培養してｌＸｌ０
’個を２４穴プレート（ヌンク社製）へ移した。２４穴
プレートで４８時間培養後２Ｘ１０６個のハイブリドー
マを５０ｍ１のＨＴ培地を含む８０ｃｎ！のフラスコ（
ヌンク社製）に移し７２時間培養してこの培養上清を採
取した。以上の培養はＣＯ２インキュベーターで行い、
３７℃、１０％炭酸ガス。
ヌンク社製）から２Ｘ１０５個を４８穴プレート（コー
スタ−社製）へ移し、さらに９６時間培養してｌＸｌ０
’個を２４穴プレート（ヌンク社製）へ移した。２４穴
プレートで４８時間培養後２Ｘ１０６個のハイブリドー
マを５０ｍ１のＨＴ培地を含む８０ｃｎ！のフラスコ（
ヌンク社製）に移し７２時間培養してこの培養上清を採
取した。以上の培養はＣＯ２インキュベーターで行い、
３７℃、１０％炭酸ガス。
９０％空気、相対湿度１００％の条件であった。
さらに、ハイブリドーマのｉｎ ｖｉｖｏでの大量培養
も行った。すなわち、ＢＡＬＢ／ｃの雄マウスの８１令
のものにブリスタン（アルドリッチ社製）０．５ｍｌを
腹腔内投与し、その１４日後にハイブリドーマをマウス
１匹あたり１０７個腹腔内投与した。１４日後に腹水を
採取した。
も行った。すなわち、ＢＡＬＢ／ｃの雄マウスの８１令
のものにブリスタン（アルドリッチ社製）０．５ｍｌを
腹腔内投与し、その１４日後にハイブリドーマをマウス
１匹あたり１０７個腹腔内投与した。１４日後に腹水を
採取した。
０υ モノクローナル抗体の精製
ハイブリドーマ培養上清（ＨＴ培地）よりアフィニティ
ー・クロマトグラフィーによりモノクローナル抗体を精
製した。すなわち、抗マウス免疫グロブリンウサギ抗体
２００ｍｇを調製し、これをセファロース４Ｂ（ファル
マシア・ファイン・ケミカル社！！！＞ （１重１４
０ｇ）に固定化した。これを用い、抗マウス免疫グロブ
リンウサギ抗体−セファロース４Ｂカラムを作成した。
ー・クロマトグラフィーによりモノクローナル抗体を精
製した。すなわち、抗マウス免疫グロブリンウサギ抗体
２００ｍｇを調製し、これをセファロース４Ｂ（ファル
マシア・ファイン・ケミカル社！！！＞ （１重１４
０ｇ）に固定化した。これを用い、抗マウス免疫グロブ
リンウサギ抗体−セファロース４Ｂカラムを作成した。
なお、抗マウス免疫グロブリンウサギ抗体は、まずマウ
ス免疫グロブリン２００ｍｇをセファロース４Ｂ（湿重
量４０ｇ）に固定化したカラムを作成し、これにマウス
免疫グロブリンを３９ｍｇ筋肉内投与して免疫したウサ
ギの血清２５ Ｑｍｌを負荷し、アフィニティクロマト
グラフィーにより特異精製したものである。このカラム
にハイブリドーマ培養上清５０ Ｑｍｌを流下させ、カ
ラム内に培養上清中のモノクローナル抗体を結合させた
。カラムをＰＢＳ５００ｍｌで洗浄後、３ＭのＮａ５Ｃ
Ｎ ２００ｍ１を用いて、カラム内に吸着されたモノ
クローナル抗体を溶出した。このようにして取ｉ尋した
モノクローナル抗体溶液には、非特異的に混入する培養
上清由来の微量のウシ胎児血清蛋白が検出されたので、
抗ウシ胎児血清蛋白ウサギ抗体１１００ｔｎをセファロ
ース４Ｂ（湿重量２０ｇ）に固定化したカラムを用いて
混入する微量のウシ胎児血清蛋白を吸着除去した。なお
、抗ウソ胎児血清蛋白ウサギ抗体は、まずウシ胎児血清
Ｉ Ｑｍｌをセファロース４Ｂ（湿重量２０ｇ）に固定
化したカラムを作成し、これにウシ胎児血清１ｍｌを筋
肉内投与して免疫したウサギの抗血清１００ｍ１を負荷
して、アフィニティークロマトグラフィーにより特異精
製したものである。以上の操作で精製されたモノクロー
ナル抗体溶液は、該モノクローナル抗体の所属する免疫
グロブリンのクラスもしくはサブクラス以外の免疫グロ
ブリンを含まず、かつ、ウシ胎児血清を含有しないこと
がオフタロニー法〔プログレス・アレルギー（Ｐｒｏｇ
ｒｅｓｓ Ａｌｌｅｒｇｙ） 、 ５．１−５ （１９
５８） 〕により確認された。さらに免疫電気泳動によ
れば、抗マウス血清蛋白ウサギ抗血清との間に１本の鋭
利な沈降線を示し、精製モノクローナル抗体であること
が確認された。なお、精製モノクローナル抗体の蛋白債
はＥ。、２８゜−の値を１３．５として求めたが、５０
Ｑｍｌの培養土清まり５ｍｇのモノクローナル抗体を
得た。また、モノクローナル抗体のクラスもしくはサブ
クラスの決定は抗マウス免疫グロブリンウサギ抗血清（
マイルス）を用い、オフタロニー法により決定した。
ス免疫グロブリン２００ｍｇをセファロース４Ｂ（湿重
量４０ｇ）に固定化したカラムを作成し、これにマウス
免疫グロブリンを３９ｍｇ筋肉内投与して免疫したウサ
ギの血清２５ Ｑｍｌを負荷し、アフィニティクロマト
グラフィーにより特異精製したものである。このカラム
にハイブリドーマ培養上清５０ Ｑｍｌを流下させ、カ
ラム内に培養上清中のモノクローナル抗体を結合させた
。カラムをＰＢＳ５００ｍｌで洗浄後、３ＭのＮａ５Ｃ
Ｎ ２００ｍ１を用いて、カラム内に吸着されたモノ
クローナル抗体を溶出した。このようにして取ｉ尋した
モノクローナル抗体溶液には、非特異的に混入する培養
上清由来の微量のウシ胎児血清蛋白が検出されたので、
抗ウシ胎児血清蛋白ウサギ抗体１１００ｔｎをセファロ
ース４Ｂ（湿重量２０ｇ）に固定化したカラムを用いて
混入する微量のウシ胎児血清蛋白を吸着除去した。なお
、抗ウソ胎児血清蛋白ウサギ抗体は、まずウシ胎児血清
Ｉ Ｑｍｌをセファロース４Ｂ（湿重量２０ｇ）に固定
化したカラムを作成し、これにウシ胎児血清１ｍｌを筋
肉内投与して免疫したウサギの抗血清１００ｍ１を負荷
して、アフィニティークロマトグラフィーにより特異精
製したものである。以上の操作で精製されたモノクロー
ナル抗体溶液は、該モノクローナル抗体の所属する免疫
グロブリンのクラスもしくはサブクラス以外の免疫グロ
ブリンを含まず、かつ、ウシ胎児血清を含有しないこと
がオフタロニー法〔プログレス・アレルギー（Ｐｒｏｇ
ｒｅｓｓ Ａｌｌｅｒｇｙ） 、 ５．１−５ （１９
５８） 〕により確認された。さらに免疫電気泳動によ
れば、抗マウス血清蛋白ウサギ抗血清との間に１本の鋭
利な沈降線を示し、精製モノクローナル抗体であること
が確認された。なお、精製モノクローナル抗体の蛋白債
はＥ。、２８゜−の値を１３．５として求めたが、５０
Ｑｍｌの培養土清まり５ｍｇのモノクローナル抗体を
得た。また、モノクローナル抗体のクラスもしくはサブ
クラスの決定は抗マウス免疫グロブリンウサギ抗血清（
マイルス）を用い、オフタロニー法により決定した。
得られたモノクローナル抗体は３つのサブクラス、すな
わちＴｇＧｚ、ＩｇＧ＋ およびＩ ｇ Ｇ ｚｂに分
類され、１０６３．２０７９および４２０３と番号をつ
けたものがその代表例である。
わちＴｇＧｚ、ＩｇＧ＋ およびＩ ｇ Ｇ ｚｂに分
類され、１０６３．２０７９および４２０３と番号をつ
けたものがその代表例である。
■ モノクローナル抗体の特異性
第１表に示した菌株を用いてＥｉＡ法により、取得した
モノクローナル抗体の特Ａ性を検討した。すなわち、取
得したモノクローナル抗体の一部、たとえば、１０６３
．２０７９．４２０３は第２表に示すように、それぞれ
Ｅ群の菌株とのみ反応し、高度の特異性を示した。
モノクローナル抗体の特Ａ性を検討した。すなわち、取
得したモノクローナル抗体の一部、たとえば、１０６３
．２０７９．４２０３は第２表に示すように、それぞれ
Ｅ群の菌株とのみ反応し、高度の特異性を示した。
第 ２ 表
実施例２゜
モノクローナル抗体の感染予防効果
精製モノクローナル抗体およびモノクローナル抗体を含
む腹水での感染予防効果の実験は下記のとおりである。
む腹水での感染予防効果の実験は下記のとおりである。
ａｃｔｙ系マウス（雄、２０±１ｇ）（静岡実験動物）
に精製モノクローナル抗体、もしくはモノクローナル抗
体を含む腹水を生理的食塩水で希釈したものＱ、２ｍｌ
を静脈内もしくは腹腔的投与した。
に精製モノクローナル抗体、もしくはモノクローナル抗
体を含む腹水を生理的食塩水で希釈したものＱ、２ｍｌ
を静脈内もしくは腹腔的投与した。
対照マウスには生理的食塩水を投与した。
９０分後に５０％致死量ないし５倍の最小致死量（ＬＤ
、、Ｑ−５ＭＬＤ＞の緑膿菌を２５％ムチンに懸濁させ
、これを腹腔内接種して１週間後のマウスの生存数を調
べた。結果の一部を第３表、第４表および第５表に示し
たが、精製モノクローナル抗体もしくはモノクローナル
抗体を含む腹水は（′１ずれも強い感染予防効果を示し
た。
、、Ｑ−５ＭＬＤ＞の緑膿菌を２５％ムチンに懸濁させ
、これを腹腔内接種して１週間後のマウスの生存数を調
べた。結果の一部を第３表、第４表および第５表に示し
たが、精製モノクローナル抗体もしくはモノクローナル
抗体を含む腹水は（′１ずれも強い感染予防効果を示し
た。
第３表
第 ４ 表
本 モノクローナル抗体は腹腔的投与とした。
木本 生存マウス数／供試マウス数
第 ５ 表
実施例３゜
モノクローナル抗体の緑膿菌感染後投与による感染治療
効果 ｄｄｙ系マウス（静岡実験動物、雄２体重２０±Ｉｇ）
に緑膿菌３１２１＜Ｅ型）またはｌＩＤ１１３０（Ｅ型
）をそれぞれ２．７ Ｘ Ｉ Ｏ’ＣＰＵ／マウスまた
は３． Ｉ Ｘ １０ ’ＣＦＩＪ／マウスになるよう
２５％−ムチンに懸濁して腹腔内に接種した。菌接種後
１時間目に精製モノクローナル抗体１０６３ （ＩｇＧ
ｓ）を生理的食塩水で希釈したちの０．２ｍｌを静脈内
もしくは腹腔内に投与した。１週間後のマウスの生存率
を第６表に示したが、この結果から明らかなように精製
モノクローナル抗体１０６３は緑膿菌感染後に投与して
も高い感染治療効果を示した。
効果 ｄｄｙ系マウス（静岡実験動物、雄２体重２０±Ｉｇ）
に緑膿菌３１２１＜Ｅ型）またはｌＩＤ１１３０（Ｅ型
）をそれぞれ２．７ Ｘ Ｉ Ｏ’ＣＰＵ／マウスまた
は３． Ｉ Ｘ １０ ’ＣＦＩＪ／マウスになるよう
２５％−ムチンに懸濁して腹腔内に接種した。菌接種後
１時間目に精製モノクローナル抗体１０６３ （ＩｇＧ
ｓ）を生理的食塩水で希釈したちの０．２ｍｌを静脈内
もしくは腹腔内に投与した。１週間後のマウスの生存率
を第６表に示したが、この結果から明らかなように精製
モノクローナル抗体１０６３は緑膿菌感染後に投与して
も高い感染治療効果を示した。
第 ６ 表
実施例４゜
モノクローナル抗体と抗生物質との併用効果ｄｄｙ系マ
ウス（雄、２０±Ｉｇ）に精製モノクローナル抗体（Ｎ
α１０６３ ； ＩｇＧｚ ） ０．８Ｊｉｇを生理的
食塩水１ｍｌに溶解したちの０．２１１１１を静脈内投
与した。９０分後にＭＬＤＯ緑１１１ｅを２５％ムチン
とともに腹腔内投与し、ついでその６０分後に抗生物質
（アストロマイシン；５０ｍｇ／ｋｇ）を皮下投与した
。マウスは一部１０匹として、そノ生存率をパーセント
で求めた。結果の一部を第１図に示したが、薬剤もしく
はモノクローナル抗体の単独投与群では１０％の生存率
を示す条件下でも、この両者を併用すると７０％にも達
する著聞な生存率の上昇を認めた。この生存率は、モノ
クローナル抗体と抗生物質との併用が相乗的効果を有し
ていることを示す。
ウス（雄、２０±Ｉｇ）に精製モノクローナル抗体（Ｎ
α１０６３ ； ＩｇＧｚ ） ０．８Ｊｉｇを生理的
食塩水１ｍｌに溶解したちの０．２１１１１を静脈内投
与した。９０分後にＭＬＤＯ緑１１１ｅを２５％ムチン
とともに腹腔内投与し、ついでその６０分後に抗生物質
（アストロマイシン；５０ｍｇ／ｋｇ）を皮下投与した
。マウスは一部１０匹として、そノ生存率をパーセント
で求めた。結果の一部を第１図に示したが、薬剤もしく
はモノクローナル抗体の単独投与群では１０％の生存率
を示す条件下でも、この両者を併用すると７０％にも達
する著聞な生存率の上昇を認めた。この生存率は、モノ
クローナル抗体と抗生物質との併用が相乗的効果を有し
ていることを示す。
発明の効果
本発明によれば、緑膿菌による感染症の予防、治療に優
れた効果を有するモノクローナル抗体を工業的に安価に
供給することができる。さらに本発明は、該モノクロー
ナル抗体を有効成分とし、所望によりこれと抗生物質を
併用してより有効な緑膿菌感染症の予防、治療用薬剤を
提供する。
れた効果を有するモノクローナル抗体を工業的に安価に
供給することができる。さらに本発明は、該モノクロー
ナル抗体を有効成分とし、所望によりこれと抗生物質を
併用してより有効な緑膿菌感染症の予防、治療用薬剤を
提供する。
第１図は、本発明モノクローナル抗体と抗生物質との併
用による緑膿菌感染に対する併用効果を示す。 図中、記号は下記の意味を有する。 ・□・アストロマイシン５０■／ｋｇ。 モノクローナル抗体８ ｕ ／ ｋｇ併用投与群ム−ム
アストロマイシン５０ｍｇ／ｋｇ単独投与群−モノクロ
ーナル抗体８■／ｋｇ単独投与群ｏ −ｏ無処置群
用による緑膿菌感染に対する併用効果を示す。 図中、記号は下記の意味を有する。 ・□・アストロマイシン５０■／ｋｇ。 モノクローナル抗体８ ｕ ／ ｋｇ併用投与群ム−ム
アストロマイシン５０ｍｇ／ｋｇ単独投与群−モノクロ
ーナル抗体８■／ｋｇ単独投与群ｏ −ｏ無処置群
Claims (5)
- （１）シュードモナス・エルギノーサＥ群微生物に特異
的に結合し、ＩｇＧに属し、静脈内投与によって緑膿菌
による感染症を予防および治療し得るモノクローナル抗
体。 - （２）ＩｇＧ＿１、ＩｇＧ＿２ｂまたは ＩｇＧ＿３の
サブクラスに属する特許請求の範囲第１項記載のモノク
ローナル抗体。 - （３）シュードモナス・エルギノーサＥ群微生物に特異
的に結合し、ＩｇＧに属し、静脈内投与によって緑膿菌
による感染症を予防および治療し得るモノクローナル抗
体を有効成分とする緑膿菌感染の予防および治療用製剤
。 - （４）該製剤が、さらに抗生物質と併用されることを特
徴とする特許請求の範囲第３項記載の製剤。 - （５）該抗生物質がアストロマイシン、ミクロノマイシ
ンなどのアミノ配糖体抗生物質ならびにラタモキセフ、
セフォペラゾンなどのβ−ラクタム抗生物質であること
を特徴とする特許請求の範囲第３項記載の製剤。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP14782085A JPS6210022A (ja) | 1985-07-05 | 1985-07-05 | モノクロ−ナル抗体 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP14782085A JPS6210022A (ja) | 1985-07-05 | 1985-07-05 | モノクロ−ナル抗体 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS6210022A true JPS6210022A (ja) | 1987-01-19 |
Family
ID=15438964
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP14782085A Pending JPS6210022A (ja) | 1985-07-05 | 1985-07-05 | モノクロ−ナル抗体 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS6210022A (ja) |
-
1985
- 1985-07-05 JP JP14782085A patent/JPS6210022A/ja active Pending
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