JPS6193120A - 播種性血管内凝固症候群の予防及び治療剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ［産業上の利用分野］ 本発明は播種住血管内凝固症候群の予防及び治療剤に関
する。

播種住血管内凝固症候群（以下。

ＤＩＧと記す）とは何らかの原因で、 全身の、主に微小血管内に血栓が多発 する病的状態で、いったん凝固系が活 性化されると凝固亢進、線溶亢進状態 となり、消費性凝固障害をおこし、著 しい出血傾向が現われる。

この原因としては、１）内因性凝血機 序活性化、または血管内膜障害による もの、２）外因性凝血機序、または、 さらに短いバイパスを通じての凝固活 性化によるもの、３）内栓多発による 防御載量の障害によるもの、などが考 えられている。

［従来の技術］ ＤＩＣに対して今迄抗凝固剤としてヘパリン、トラネキ
サム酸、抗線溶剤としてアプロチニンなどが使用されて
来たが、充分な効果を期待することが出来ず、殊に ＤＩＣの予防を目的とする治療は全く不充分であった。

［発明が解決しようとする問題点］ 本発明者はＤＩＣの治療特に予防に有効な薬剤について
種々検討した結果本発明に到達した。即も本発明者はＤ
ｒＣの予防と治療には、過度に活性化された、凝固・線
溶系の機能を抑制する事が必要で、そのためには、先づ
凝固抑制および血小板凝集抑制の二つの作用を有する薬
剤が見出せれば極めて有利であると云う考えに基き、ア
デノシン−３＝、５′−環状リン酸（以下。

ＣＡＭＰと記す）の誘導体２０４種を合成し、その中よ
り、１ｎ−ＶｉｔｒＯの研究で７種の化合物をスクリー
ニングし、更に１ｎ−ｖ’＋ｖｏの研究でエンドトキシ
ンによるＤＩＣ病態モデルを用いて、それらのＤｒＣ予
防効果をスクリーニングし、現在、実際にＤＪＣの治療
剤として用いられているヘパリン、トラネキサム酸、ア
プロチニンなどより強力な２種の化合物を見出し、本発
明を完成した。

［問題点を解決するための手段］ 従って、本発明は一般式（１） （式中、Ｘは塩素又は臭素である）で表わされる２−置
換アデノシン−３”、５′−環状リン酸（以下、２−Ｃ
Ｉ　−ｃＡＭＰおよび２−Ｂｒ−ＣＡＭＰと記す）又は
その製剤上許容しうる塩を含有するＤｆＣの予防及び治
療に関する。

本発明に用いられる式（１）の化合物は当業者に良く知
られた方法で製造することが出来る。その方法としては
種々の方法があるが、例えば２−クロロ又はプロモーア
デノシン−５′−リン酸を直接脱水してそのリン酸部分
を３′、５−一環状化する（ＤＱ水剤として例えばジシ
クロへキシルカルボジイミド、シクロヘキシルイソシア
ナートを用いる）か又は２−クロロ又はプロモーアデノ
シン−５′リン酸をそのホスホノ基における活性エステ
ル体に導ぎ、これを塩基で処理して説エステル化するこ
とにより得ることが出来る。

本発明に用いられる式（１）の化合物は次の理化学的性
質を有する。

（１）　２−ＣＩ　−ｃＡＭＰ　　　　　　（２）　２
−Ｂｒ−ｃＡＭＰ性状　　　　　　　　白色粉末状　　
　　　白色粉末状分子団　　　　　　　３３３．９　　
　　　３７８．１”１Ｎ”’（ｌＥＸｌｏ”＞　　２６
４．５１１μ（１４，Ｑ）　　２６５．０（１４，３１
紫外線吸収　λ□、８ スペクトル　　”Ｎ−Ｎａ０Ｈ（εｘ１０’）　　２６
４．５ｅμ（＋５．９）　　２６５，５（１５，９）λ ａｘ 融点（’Ｃ）　　　　１９７〜１９９　　　　　　　　
１９５〜１９７元素分析値：　　ＣｎＨｕＣＩＮｓＯｇ
Ｐｉ、５ｌ−ｌｚｏ　　ＣｎＨｕＢｒＮｓＯ＠Ｐ・０．
５ｌ−１ｚ。

Ｃａ１ｃ、　Ｃ３Ｌ４ｊ　ｌｌ　　３．４１　　Ｎ　１
８．３５　　Ｃａ１ｃ、　０２８．７８　　Ｈ２，８８
Ｎ　１６１９ＦａＩＩＩＩＩ、Ｑ３１．７２Ｈ３，３３
Ｎ、＋８．３８「ｏｕｍ、Ｑ２１１１８Ｈ３，Ｏ＋Ｎ＋
７．＋１：）本発明においては式（１）の化合物のみな
らずその製剤上許容しうる塩、例えば塩酸塩、臭化水素
酸塩、くえん酸塩、酒石酸塩なども用いることが出来る
。

本発明薬剤は経口又は非経口で投与可能である。その形
は錠剤、カプセル、散剤、顆粒剤、トローチ、層剤、等
で可能であり、注射剤、懸濁注射剤等の剤形でも使用し
うる。

有効母は式（１）の化合物又はその製剤上許容しうる塩
の相対的有効性、治療される疾患の程度及び患者の重囲
などに依存する。′Ａ（発明の薬剤の単位投与物は有効
成分を１〜１００ｍ（］そしてより普通には２〜５０ｍ
ｇ含む。投与は１日６回より普通には１日２〜４回行わ
れ１日当りの投与量は７０ｋｇの成人に対して５〜４０
０　＋ｎｏである。

本発明の薬剤に用いられる式（１）の 化合物又はその製剤上許容しうる塩の毒性は極めて低い
。例えば急性毒性はマウス（ｆｃＲ系、！５週令）を用
い Ｌ　１ｔｃｈｆｉｃｌｄ　−Ｗ　１ｌｃｏｘｏｎ法で算
出したＬＤ　　は両化合物とも５５０＋１１！＋／ｋ（
＋であった。

［本発明の効果］ 本発明の薬剤の有効成分である２−２−Ｃ１−ＣＡ及び
２−２−８ｒ−ｃＡに関する薬理効果を次に説明する。

１、ＤＩＣ病態改迫作用の薬理学的パラメーター １）血小板凝集 ラットの血小板過剰プラズマ（以下。

ＰＰＰと記ず）におけるコラーゲン、ＡＤＰ、トロンビ
ン、カルシウムイオンフォアＡ−の各凝集に対する検討
で はコラーゲン、トロンビン凝集に対して強い抑制作用を
示した。（実施例１参照）２）放出反応 ラッ１〜ＰＰＰにおいて、コラーゲン及びトロンビン１
ＦＪＦｉによる放出反応の検討では両凝集による放出反
応に対して強い抑制効果を示した。（実施例２参照） ３）マロンジアルデヒド ウサギＰＰＰにおいて、アラキドン酸カスケードの最終
産物であるマロンジアルデヒド〈以下、ＭＤＡと記す）
生成に対する影響の検討では、凝集放出を抑制し、脂質
の代謝のみを起すといわれているＮ−エチルマレイミド
（以下、ＮＥＭと記す〉及びコラーゲンによるＭＤＡの
生成に対し強い抑制作用を示した。（実施例３参照） ４）プロトロンビン時間 ラットのクエン酸加血よりＰＲＰを分 取後、残有の遠心後の上清（以下、クエン酸相血漿と記
す）を用いたプロトロンビン時間（以下、ＰＴと記す）
の延長の検討では顕著な凝固時間の延長が認められ、外
因性凝固系の抑制作用のあることが確認された。（実施
例４参照） ５）活性化部分トロンボプラスチン時間ラットのクエン
酸相血漿を用いた活性 化部分トロンボプラスチン時間（Ｌ′１．下、ａＰＴＴ
と記す）の延長の検討では強い延長が認められ内因性凝
固系の抑制作用のあることが確認された。（実施例５参
照） ２、ＤＩＣ病態モデルに対する予防効果２−ＣＩ−ｃＡ
ＭＰ又は２−Ｂｒ−ｃ ＡＭＰをＳＤ系雌雄ラット尾静脈より投与し、その１時
間後、エンドトキシン （以下、ＬＰＳと記す）を尾静脈より注射して４時間後
に得たＤ■ｃ病態モデルの心臓より採血したＰＰＰを用
いた凝血学的パラメーター（血小板数、面小板凝集能、
Ｐ−ｒ、ａＰＴＴ、フィブリン分解物濃度（以下、ＦＤ
Ｐと記す））の検討では血小板数、ＰＴ、ａＰＴＴ、Ｆ
ｂｇ。

ＦＤＰは正常値に近づき顕著な予防効果が認められた。

また、本発明の化合物投与によって、 どれだけ正常値に近づくかという予防効果判定から第７
表に示ず顕著な予防効果を示す結果が得られた。（実施
例６参照）３．　　ＤＥＣ病態モデルに対する市販同効
治療剤、抗血小板剤の予防効果 前記２．と同一条件での市販同効治療 剤（ヘパリン、トラネキサム酸、アプロチン）並びに抗
血小板剤（プロスタグランディンＥ１、ジビリダモール
、インドメタシン、ジルチアゼム）との予防効果の比較
検討では、第１０表に示寸ごとく、ヘパリンはＰＴにわ
ずかな予防効果しか認められなかった。

トラテキサム駿については予防効果は ＦＤＰだけであって他のパラメーターには予防効果がな
かった。

アプロチニンではＦｂＱについてのみ 若干の効果が認められた。

プロスタグランディンＥ　１ジビリダモール、インドメ
タシンについては血小板数、Ｆｂｃ＋、ａＰＴＴに予防
効果がわずかに認められたが、ＰＴ、ＦＤＰには効果が
認められなかった。

ジルチアゼムには全く効果が認められなかった。（実施
例７参照） 上述から明らかな様に本発明薬剤の有効成分である２−
ＣＩ−ｃＡＭＰ及び２−Ｂｒ−ｃＡＭＰはＤＩＣに対し
て従来の薬剤に比べ遥かに優れた効果を有する。

次に実施例を示す。

実施例１．　血小板凝集 ＳＤ系誰ラットの心臓血より調製したＰＰＰに２−ＣＩ
−ｃＡＭＰ及び２Ｂｒ−ｃＡＭＰを添加してインキュベ
イトし、次に凝集惹起物質（コラーゲン、ＡＤＰ、トロ
ンビン、カルシウムイオノフオアＡ−２３１８７）を添
加し、ＮＫＫへ７トレーサーを用い透過率を測定した。

この値を凝集能とし、次式により閉害率を求めた。

２−ＣＩ−ｌ−０Ａ及び２−Ｂｒ−ｃＡＭＰはコラーゲ
ン凝集、トロンビン凝集に対し強い抑制作用を示したが
、その他の凝集惹起物質の凝集にはほとんど抑制作用を
示さなかった。第１表はその阻害率を示したものである
。

実施例２．　放出反応 ＳＤ系ｊ１ラットの心臓血より調製したＰＰＰに３Ｈ−
セロトニン（以下、 ３Ｈ−５ＨＴと記ず）をインキュベイトして得られた標
識ＰＲＰに２−ＣＩ　− ｃＡＭＰ又は２−２−Ｂｒ−０Ａを添加して３７℃で１
時間インキュベイトし、次に凝集惹起物質を添加し、再
び、３７℃で１５分間インキュベイトした。反応を終え
た反応液を遠心分離し、その上清をトリトン−トルエン
シンチレータ−で３８−５ＨＴ量を測定し、次式により
阻害率を求めた。

２−ＣＩ−ｃＡＭＰＪ′３よび２−２−Ｂｒ−０Ａはコ
ラーゲン凝集、トロンビン凝集による放出反応に対して
強い抑制効果を示した。第２表はその阻害率を示したも
のである。

実施例３．　　ＭＤＡ ウサギの心麿血より調製したＰＰＰに２−ＣＩ−ＣＡＭ
Ｐ又は２−２−Ｂｒ−０Ａを加えて３７℃で１時間イン
キュベイトし、次に凝集惹起物質（コラーゲン、ＡＤＰ
、トロンビン、アラキドン酸、カルシウムイオノフオア
Ａ−２３１８７、Ｎ−エチルマレイミド）を添加し、３
７℃で６０分間インキュベイ１−後、２％トリクロル酢
酸を加えて反応を止めた。その上清液に２％チオバルビ
ッール酸を加え、沸とう水浴中で１５分間加温し、放冷
後、○Ｄ５３２ｎｍでＭＤ△を定石し、次式により阻害
率を求めた。

２−ＣＩ−ｌ−０Ａ及び２−Ｂｒ−ｃＡＭＰは、ＮＥＭ
やコラーゲンによるＭＤＡ生成に対し強い抑制作用を示
した。第３表はその阻害率を示したものである。

第　　３　　表　　（％　　Ｉ　ｎｈｉｂｉｔｉｏｎ　
　）実施例４．　　ＰＴ ラットのクエン酸相血漿に２−ＣＩ−ＣＡＭＰ又は２−
２−８ｒ−ｃＡ及びトロンボプラスチンＣ（以下、ＴＰ
−Ｃと記ず）を強く吹き込み、ＮＫＫへマドレーサーを
用い、凝固するまでの時間を測定した。

２−ＣＩ−ｃＡＭＰ及び２−２−Ｂｒ−０Ａには顕著な
凝固時間の延長が認められ、外因性凝固系の抑制作用が
示唆された。第４表はその凝固時間の延長を示したもの
である。

実施例５．　　ａＰＴＴ ラットのクエン酸相血漿に２−ＣＩ−ｃＡＭＰ又は２−
Ｂ　ｒ−ｃＡＭＰ並び、Ａ、ｃｔｉｎを添加し、３７℃
で２分間インキュベイトし、塩化カルシウム溶液を強（
吹き込み、ＮＫＫへマドレーサーを用い、凝固するまで
の時間を測定した。２−ＣＩ　−ｃＡＭＰ及び２−Ｂ　
ｒ−ｃＡＭＰには強い凝固時間の延長が認められた。第
５表はその凝固時間の延長を示したものである。

実施例６．　ラットＤＥＣ病態モデルに対する予防効果 ＳＤ系雄ラットに２−ＣＩ−ｃＡＭＰ又は２−Ｂｒ−ｃ
ＡＭＰを投与し、その１ｒＪ′￥間後にＬＰＳを尾静脈
より注射し、４時間後に心臓より採血したＰＰＰを用い
凝血学的検査（血小板数、血小板凝集能、ＰＴ、ａＰＴ
Ｔ１フィブリン分解産物濃度（以下、ＦＤＰと記す））
を行なった。

２−ＣＩ−ｃＡＭＰ及び２−Ｂｒ−ｃＡＭＰはラットＤ
ＩＧ病態モデルに対して、顕著な予防効果が認められた
。第６表は凝血学的検査結果を示したものである。

また、これらの凝血学的検査値がら、２−Ｃ１−ＣＡＭ
Ｐ又は２−２−Ｂｒ−０Ａの投与によって、どれだけ正
常値に近づくがという予防率を次式により締出し、→−
９−印にて、第７表に示した。

予防率（９６）　　”””””　　ｘ　１０１００ｎｏ
ｒ　ｌの値 ２−ＣＩ−ｃＡＭＰ及び２−Ｂｒ−ｃＡＭＰは顕著イｒ
予防効果を示している。

第７表 次に予防効果の発現と２−ＣＩ−ｌ−０Ａ又は２−２−
１３ｒ−ｃＡの投与時間の関係を確認づ゛るため、ＬＰ
Ｓ投与２時間前、１時間前、同時、１時間後、２時間後
ならびに３時間後の凝血学的検査値から予防効果の発現
と投与時間の関連性を前述と同様な方法で検討した。第
８表に示すごと＜ＬＰＳ投与前に２−ＣＩ−ｌ−０Ａ又
は２−２−Ｂｒ−０Ａを投与しておくと顕著な予防効果
を示し、２−ＣＩ　−ｃＡＭＰ及び２−Ｂｒ−ＣＡＭＰ
は治療効果より予防効果の優れていることが確認された
。

実施例７．　ラットＤＩＣ病態モデルに対する市販同効
治療剤、 抗血小板剤の予防効果 現在、市販されている同効治療剤であるヘパリン、トラ
ネキサム酸、アプロチニンならびに抗血小板剤であるプ
ロスタグランディンＥ１１ジビリダモール、インドメタ
シンについて、実施例つと同様な方法で予防効果の比較
研究を行なった。

ヘパリンはＰＴ、ａＰＴＴ、ＦＤＰにわずかな予防効果
しか認められなかった。１−ラネキサム酸、アプロチニ
ンについてはＦＤＰだけに予防効果が認められたが、他
のパラメーターにはあまり予防効果はなかった。

また、プロスタグランディンＥＩ、ジビリダモール、イ
ンドメタシンについては血小板数、Ｆｂｃ＋、ａＰＴＴ
に予防効果が認められたが、ＰＴ、ＦＤＰには効果が認
められなかった。ジルチアゼムには全くその効果がなか
った。第９表はその凝血学的検査結果を示したものであ
る。

第９表

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 一般式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中Ｘは塩素又は臭素である）で表わされる２−置換
   アデノシン−３′，５′−環状リン酸又はその製剤上許
   容しうる塩を含有する播種性血管内凝固症候群の予防及
   び治療剤。