JPS6173065A - 分泌物産生能検出装置 - Google Patents
分泌物産生能検出装置Info
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- JPS6173065A JPS6173065A JP19593384A JP19593384A JPS6173065A JP S6173065 A JPS6173065 A JP S6173065A JP 19593384 A JP19593384 A JP 19593384A JP 19593384 A JP19593384 A JP 19593384A JP S6173065 A JPS6173065 A JP S6173065A
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- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M23/00—Constructional details, e.g. recesses, hinges
- C12M23/02—Form or structure of the vessel
- C12M23/12—Well or multiwell plates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M33/00—Means for introduction, transport, positioning, extraction, harvesting, peeling or sampling of biological material in or from the apparatus
- C12M33/04—Means for introduction, transport, positioning, extraction, harvesting, peeling or sampling of biological material in or from the apparatus by injection or suction, e.g. using pipettes, syringes, needles
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
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- C12M41/00—Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation
- C12M41/30—Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation of concentration
- C12M41/36—Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation of concentration of biomass, e.g. colony counters or by turbidity measurements
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- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M41/00—Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation
- C12M41/30—Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation of concentration
- C12M41/38—Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation of concentration of metabolites or enzymes in the cells
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M41/00—Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation
- C12M41/48—Automatic or computerized control
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N35/00—Automatic analysis not limited to methods or materials provided for in any single one of groups G01N1/00 - G01N33/00; Handling materials therefor
- G01N35/02—Automatic analysis not limited to methods or materials provided for in any single one of groups G01N1/00 - G01N33/00; Handling materials therefor using a plurality of sample containers moved by a conveyor system past one or more treatment or analysis stations
- G01N35/028—Automatic analysis not limited to methods or materials provided for in any single one of groups G01N1/00 - G01N33/00; Handling materials therefor using a plurality of sample containers moved by a conveyor system past one or more treatment or analysis stations having reaction cells in the form of microtitration plates
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- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
〔産業上の利用分野〕
本発明は分泌物例えば抗体全産生する抗体産生細胞のう
ち、増殖力が強く、抗体産生力の強い細胞の選別に用い
る分泌物産生検出装置に関するものである。
ち、増殖力が強く、抗体産生力の強い細胞の選別に用い
る分泌物産生検出装置に関するものである。
分泌物例えば単クローン抗体は、抗体化学、抗原化学に
おける研究に、薬理学におけるホルモン、神経伝達物質
の受容体の研究に、その池つィルス学、寄生虫学、細菌
学において利用される。また診断において、免疫不全症
の分子生化学的解析或は抗原（悪性腫瘍等）の検出など
に、更に始原においては、臓器移植（組織適合性）への
応用、受曹免疫（抗体の注射）、悪性腫瘍に対する治療
などに広く使用される。
おける研究に、薬理学におけるホルモン、神経伝達物質
の受容体の研究に、その池つィルス学、寄生虫学、細菌
学において利用される。また診断において、免疫不全症
の分子生化学的解析或は抗原（悪性腫瘍等）の検出など
に、更に始原においては、臓器移植（組織適合性）への
応用、受曹免疫（抗体の注射）、悪性腫瘍に対する治療
などに広く使用される。
単クローン抗体等の分泌物はその産生細胞から得られる
ものであるが、従来、単クローン抗体産生細胞に選別す
る方法として、例えば以下の方法が採られている。
ものであるが、従来、単クローン抗体産生細胞に選別す
る方法として、例えば以下の方法が採られている。
牌細胞（２，５ｘ １０ｓ個）、腫瘍細胞（２，５Ｘ１
０７個）などをポリエチレングリコールに融合促進剤と
し細胞融合し、遠心接融合液に捨てて、ＨＡＴ培養液（
Ｈｙｐｏｘａｎｔｈｉｎｅ Ａｍ１ｎｏｐｆｅｒｉｎ
及びＴｈｙｍｉｄｉｎｅ ’ｃ含む培養液）′Ｊｔ加え
て細胞全分散させる。然る後、分散して得られた細胞液
全トレイに複数設けられたウェルに各々例えば０．２
ｍｌｌ ずつ分注し、次いでＣ０２インキユベータ（培
養器）内に２週間培養する。この培養によって、融合し
ていない細胞は死滅し、融合細胞は増殖される。
０７個）などをポリエチレングリコールに融合促進剤と
し細胞融合し、遠心接融合液に捨てて、ＨＡＴ培養液（
Ｈｙｐｏｘａｎｔｈｉｎｅ Ａｍ１ｎｏｐｆｅｒｉｎ
及びＴｈｙｍｉｄｉｎｅ ’ｃ含む培養液）′Ｊｔ加え
て細胞全分散させる。然る後、分散して得られた細胞液
全トレイに複数設けられたウェルに各々例えば０．２
ｍｌｌ ずつ分注し、次いでＣ０２インキユベータ（培
養器）内に２週間培養する。この培養によって、融合し
ていない細胞は死滅し、融合細胞は増殖される。
融合細胞が増殖しているかどうかは、顕微鏡下にトレイ
の各ウェルを置き、コロニーの有無を観察することによ
って判断される。融合細胞が増殖していると認められた
ウェルについて、その培養液の上Ｆ４ｆマイクロピペッ
トによって分取して、抗体検出用のトレイの各ウェルに
分圧する。各ウェルが培養上清液によって満たさＣた抗
体検出用のトレイを抗体検出部に装着して、上清液に含
まれる抗体量を測定する。この謂定は通常エライザ（Ｅ
ＬＩＳＡ ： Ｅｎｚｙｎｅ １ｉｎｋｅｄ ｉｍｍｕ
ｎｏ ５ｏｒｂｅｎｔａｓｓａｙ ）により行なわれ、
各ウェルに含まれていた細胞の抗体産生量を知ることが
できる。このとき、前記細胞液が分注されたウェルが例
えば４８０個であったものが、目的の抗体を産生じてい
るのは、通常、５ウ工ル程度になる。
の各ウェルを置き、コロニーの有無を観察することによ
って判断される。融合細胞が増殖していると認められた
ウェルについて、その培養液の上Ｆ４ｆマイクロピペッ
トによって分取して、抗体検出用のトレイの各ウェルに
分圧する。各ウェルが培養上清液によって満たさＣた抗
体検出用のトレイを抗体検出部に装着して、上清液に含
まれる抗体量を測定する。この謂定は通常エライザ（Ｅ
ＬＩＳＡ ： Ｅｎｚｙｎｅ １ｉｎｋｅｄ ｉｍｍｕ
ｎｏ ５ｏｒｂｅｎｔａｓｓａｙ ）により行なわれ、
各ウェルに含まれていた細胞の抗体産生量を知ることが
できる。このとき、前記細胞液が分注されたウェルが例
えば４８０個であったものが、目的の抗体を産生じてい
るのは、通常、５ウ工ル程度になる。
培養後のトレイの各ウェル全一々顕徽鏡下に置いて、細
胞コロニーを観察し、また培養液の上清液も一々マイク
ロピペットｔでよって分取し、抗体検出用のトレイの各
ウェルに分注し、そのトレイを抗体検出部に装着して、
上清液に含まれる抗体量全測定するという従来の抗体産
生検出方法ではその作業に高度の技術と膨大な手間が必
要であり無菌環境外の外気に触れ雑菌混入の危険性が大
きく、培養に用いたトレイの各ウェルと抗体検出用のト
レイの各ウェルとに対応ずけることが繁雑であった。
胞コロニーを観察し、また培養液の上清液も一々マイク
ロピペットｔでよって分取し、抗体検出用のトレイの各
ウェルに分注し、そのトレイを抗体検出部に装着して、
上清液に含まれる抗体量全測定するという従来の抗体産
生検出方法ではその作業に高度の技術と膨大な手間が必
要であり無菌環境外の外気に触れ雑菌混入の危険性が大
きく、培養に用いたトレイの各ウェルと抗体検出用のト
レイの各ウェルとに対応ずけることが繁雑であった。
本発明は、上述の問題点を解決するために為されたもの
で、トレイ搬送部、分取分注部、アッセイ部及びコント
ローラから成る分泌物産生能検出装置であって、前記ト
レイ搬送部は複数のウェルが設けられたトレイに乗せる
トレイ台と該トレイ台？前記分取分注部、アッセイ部に
おける各所定位置に搬送するための駆動手段からなり、
前記分取分注部はピペットｔ−把握し該ピペット全前記
トレイ台上のトレイに設けられた複数の各ウェル上方に
位置せしめるマニピュレータと前記ピペットより液体を
一定量吸引吐出するためのポンプから成り、コントロー
ラは入力された各部の作動条件に従い前記各部と制御す
る装置であることと特徴とする分泌物産生能検出装置に
存する。
で、トレイ搬送部、分取分注部、アッセイ部及びコント
ローラから成る分泌物産生能検出装置であって、前記ト
レイ搬送部は複数のウェルが設けられたトレイに乗せる
トレイ台と該トレイ台？前記分取分注部、アッセイ部に
おける各所定位置に搬送するための駆動手段からなり、
前記分取分注部はピペットｔ−把握し該ピペット全前記
トレイ台上のトレイに設けられた複数の各ウェル上方に
位置せしめるマニピュレータと前記ピペットより液体を
一定量吸引吐出するためのポンプから成り、コントロー
ラは入力された各部の作動条件に従い前記各部と制御す
る装置であることと特徴とする分泌物産生能検出装置に
存する。
本発明の作用全、図面に従って説明する。第１図は本発
明の実施例を示す斜視図である。細胞液が各ウェル１に
入れられ、ＣＯ２インキューベータで培養された後のト
レイ２ｒ＋−レイ搬送部３のトレイ台４上に置く。コロ
ニーの救、大きさｔ′観察したい場合は、特に、トレイ
搬送部３の駆動手段５により、トレイ台１５−）レイ２
に設けた各ウェルｌがコロニー観察部６の下方に位置す
るように移動させる。トレイ搬送部３の駆動手段５は第
１図に示すようｔζステッピングモータ７、ｑ’、送す
ねじ８及び基礎部材９から溝成され、ステッピングモー
タ７への入力パルス数で培養に用いたトレイ（培養用ト
レイ）２の位置に決定する。駆動手段５としてエア盟動
或ワイヤ駆動に用いることもできる。トレイ台４上には
トレイ２に把持するトレイチャック１０を設けてもよく
、該トレイチャック１０は、第２図（（イ）はトレイ台
の平面図、（ロ）はトレイ台の側面図）に示すように、
モータ、駆動によりθ方向の開閉動作、ｘ、ｚ方向の移
動が可能である。モータ駆動に代りエア駆動に用いるこ
ともできる。尚、第２図において１１ 、１１はモータ
、１２はボールねじ、１３はビーオンラックである。
明の実施例を示す斜視図である。細胞液が各ウェル１に
入れられ、ＣＯ２インキューベータで培養された後のト
レイ２ｒ＋−レイ搬送部３のトレイ台４上に置く。コロ
ニーの救、大きさｔ′観察したい場合は、特に、トレイ
搬送部３の駆動手段５により、トレイ台１５−）レイ２
に設けた各ウェルｌがコロニー観察部６の下方に位置す
るように移動させる。トレイ搬送部３の駆動手段５は第
１図に示すようｔζステッピングモータ７、ｑ’、送す
ねじ８及び基礎部材９から溝成され、ステッピングモー
タ７への入力パルス数で培養に用いたトレイ（培養用ト
レイ）２の位置に決定する。駆動手段５としてエア盟動
或ワイヤ駆動に用いることもできる。トレイ台４上には
トレイ２に把持するトレイチャック１０を設けてもよく
、該トレイチャック１０は、第２図（（イ）はトレイ台
の平面図、（ロ）はトレイ台の側面図）に示すように、
モータ、駆動によりθ方向の開閉動作、ｘ、ｚ方向の移
動が可能である。モータ駆動に代りエア駆動に用いるこ
ともできる。尚、第２図において１１ 、１１はモータ
、１２はボールねじ、１３はビーオンラックである。
本発明において細胞の増殖度全知りたい場合はコロニー
観察部と設けることができる。
観察部と設けることができる。
コロニー観察部６により各ウェル１内のコロニーの数、
大きさと観察し、各々の増殖度に決定する。コロニー観
察部６は溶液透過光の強度を開学るものであっても、増
殖度全決定することができる。
大きさと観察し、各々の増殖度に決定する。コロニー観
察部６は溶液透過光の強度を開学るものであっても、増
殖度全決定することができる。
細胞の増殖度が決定された培養用トレイ２上の各ウェル
の培養上清液は、分取分注部１４におけるピペットマニ
ピュレータ１５により移動されたピペツ）１６によって
一定量分取され、抗体検出用トレイの対応する各ウェル
に分注される。ピペットマニピュレータ１５は、水平釜
［１７−ム、直交型アーム等が使用できる。ポンプ１６
は圧力、加圧時間により吸入量、吐出量にコントロール
する。培養上清液の分取に際し、ピペット１６の先端は
コンタミネーション音道けるため、一度使用し、液に触
れたものは、ピペット交換部１７の立ｉｔでピペットマ
ニピュレータ１５によって移動させ、脱着全行うことに
よって、祈念なピペットと交換する。
の培養上清液は、分取分注部１４におけるピペットマニ
ピュレータ１５により移動されたピペツ）１６によって
一定量分取され、抗体検出用トレイの対応する各ウェル
に分注される。ピペットマニピュレータ１５は、水平釜
［１７−ム、直交型アーム等が使用できる。ポンプ１６
は圧力、加圧時間により吸入量、吐出量にコントロール
する。培養上清液の分取に際し、ピペット１６の先端は
コンタミネーション音道けるため、一度使用し、液に触
れたものは、ピペット交換部１７の立ｉｔでピペットマ
ニピュレータ１５によって移動させ、脱着全行うことに
よって、祈念なピペットと交換する。
培養用トレイ２の各ウェルから採取され、対応する各ウ
ェルに分注された抗体検出用トレイは、アッセイ部１８
におけるトレイ台１９に置かれ、駆動モータによって動
作する送りねじ２１から成る駆動手段或はエア詔勅から
なる駆動手段によって、アッセイ部１８の内部の抗体検
出位置まで搬送され、各々のウェルの上清液中に含まれ
る抗体量が測定される。アッセイ部１８における検出装
置としてエライザ測定装置又は液体クロマトグラフなど
全周いることができる。
ェルに分注された抗体検出用トレイは、アッセイ部１８
におけるトレイ台１９に置かれ、駆動モータによって動
作する送りねじ２１から成る駆動手段或はエア詔勅から
なる駆動手段によって、アッセイ部１８の内部の抗体検
出位置まで搬送され、各々のウェルの上清液中に含まれ
る抗体量が測定される。アッセイ部１８における検出装
置としてエライザ測定装置又は液体クロマトグラフなど
全周いることができる。
以上のプロセス？経て、各ウェルの細胞増殖度と抗体量
を測定し、これらの位置から各々のウェルに含まれる細
胞の抗体産生能（−抗体量測定値／増殖度測定値）を自
動的に検出する。
を測定し、これらの位置から各々のウェルに含まれる細
胞の抗体産生能（−抗体量測定値／増殖度測定値）を自
動的に検出する。
コントローラ（２２）は、例えば入力装置（２３）と制
御装置（２４）からなる装置で、入力装置（２３）によ
り入力された上記各部及び各部間の作動条件に従い、各
部を制御するものである。
御装置（２４）からなる装置で、入力装置（２３）によ
り入力された上記各部及び各部間の作動条件に従い、各
部を制御するものである。
単クローン抗体産生細胞の選別には、抗体産生能の大き
い細胞を選ぶことが必要である。本発明の装置によって
、人手によっていたのでは処理できない膨大な量の細胞
の培養液から、短時間のうちに増殖度の強い、また抗体
産生力の強い細胞が含まれるウェルと確実に検出するこ
とが１げ能である。また、細胞の取扱いが無菌環境であ
る装置内で行われるため、雑菌混入の危険性は少なく、
安定に目的とする細胞？検出でき、それにより選別する
ことが可能である。
い細胞を選ぶことが必要である。本発明の装置によって
、人手によっていたのでは処理できない膨大な量の細胞
の培養液から、短時間のうちに増殖度の強い、また抗体
産生力の強い細胞が含まれるウェルと確実に検出するこ
とが１げ能である。また、細胞の取扱いが無菌環境であ
る装置内で行われるため、雑菌混入の危険性は少なく、
安定に目的とする細胞？検出でき、それにより選別する
ことが可能である。
以上より、単クローン抗体が効率よく得られるようにな
り、単クローン抗体の応用に大きく寄与することは明ら
かである。
り、単クローン抗体の応用に大きく寄与することは明ら
かである。
この装置は、抗体産生能の検出に用いることは勿論であ
るが、抗体検出部を他の検出装置に交換することにより
、目的物質が分泌される微生物の目的物質産生能の検出
においても用いることが可能である。
るが、抗体検出部を他の検出装置に交換することにより
、目的物質が分泌される微生物の目的物質産生能の検出
においても用いることが可能である。
第１図は本発明の抗体産生能検出装置の斜視図、第２図
（イ）はトレイ搬送部におけるトレイ台の平面図、第２
図（ロ）はその側面図である。
（イ）はトレイ搬送部におけるトレイ台の平面図、第２
図（ロ）はその側面図である。
Claims (1)
- （１）トレイ搬送部、分取分注部、アッセイ部及びコン
トローラから成る分泌物産生能検出装置であって、前記
トレイ搬送部は複数のウェルが設けられたトレイを乗せ
るトレイ台と該トレイ台を前記分取分注部及びアッセイ
部における各所定位置に搬送するための駆動手段からな
り、前記分取分注部はピペットを把持し該ピペットを前
記トレイ台上のトレイに設けられた複数の各ウェル上方
に位置せしめるマニピュレータと前記ピペットより液体
を一定量吸引吐出するためのポンプからなり、コントロ
ーラは入力された前記各部の作動条件に従い前記各部を
制御する装置であることを特徴とする分泌物産生能検出
装置。
Priority Applications (5)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP19593384A JPS6173065A (ja) | 1984-09-18 | 1984-09-18 | 分泌物産生能検出装置 |
| DE8585904852T DE3586892T2 (de) | 1984-09-18 | 1985-09-18 | Vorrichtung zum trennen von zellen. |
| EP85904852A EP0195088B1 (en) | 1984-09-18 | 1985-09-18 | Apparatus for sorting cells |
| PCT/JP1985/000519 WO1986001824A1 (fr) | 1984-09-18 | 1985-09-18 | Installation de triage de cellules |
| US07/437,287 US5106584A (en) | 1984-09-18 | 1989-11-16 | Cell selecting apparatus |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP19593384A JPS6173065A (ja) | 1984-09-18 | 1984-09-18 | 分泌物産生能検出装置 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS6173065A true JPS6173065A (ja) | 1986-04-15 |
| JPS6260071B2 JPS6260071B2 (ja) | 1987-12-14 |
Family
ID=16349383
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP19593384A Granted JPS6173065A (ja) | 1984-09-18 | 1984-09-18 | 分泌物産生能検出装置 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS6173065A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1309660C (zh) * | 2003-04-21 | 2007-04-11 | 住友钛株式会社 | 金属盐的精制方法和钛材料的脱氧方法及制造方法 |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS557090A (en) * | 1978-05-03 | 1980-01-18 | Axford Herbert George | Microbe sample simultaneous compound planting method and its device and method of simultaneously discriminating plurality of microbe samples and its device |
| JPS5569057A (en) * | 1978-11-20 | 1980-05-24 | Toshiba Corp | Automatic chemical analyzing method |
| JPS56163458A (en) * | 1980-05-22 | 1981-12-16 | Toshiba Corp | Pipetting apparatus |
-
1984
- 1984-09-18 JP JP19593384A patent/JPS6173065A/ja active Granted
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS557090A (en) * | 1978-05-03 | 1980-01-18 | Axford Herbert George | Microbe sample simultaneous compound planting method and its device and method of simultaneously discriminating plurality of microbe samples and its device |
| JPS5569057A (en) * | 1978-11-20 | 1980-05-24 | Toshiba Corp | Automatic chemical analyzing method |
| JPS56163458A (en) * | 1980-05-22 | 1981-12-16 | Toshiba Corp | Pipetting apparatus |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1309660C (zh) * | 2003-04-21 | 2007-04-11 | 住友钛株式会社 | 金属盐的精制方法和钛材料的脱氧方法及制造方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS6260071B2 (ja) | 1987-12-14 |
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