JPS6159261A - アレルゲン含有室内塵の検出方法 - Google Patents
アレルゲン含有室内塵の検出方法Info
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- JPS6159261A JPS6159261A JP60181928A JP18192885A JPS6159261A JP S6159261 A JPS6159261 A JP S6159261A JP 60181928 A JP60181928 A JP 60181928A JP 18192885 A JP18192885 A JP 18192885A JP S6159261 A JPS6159261 A JP S6159261A
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- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
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- Investigating Or Analyzing Materials By The Use Of Electric Means (AREA)
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
室内塵ダニ（Ｄ ｅｒｖａｔｏｐｈａｇｏｉｄｅｓ
ｐｔｅｒｏｎｙｓｓｉ’ −ｎｕｓ、ｆａｒｉｎａｅな
ど）は、近年増大する注目を引くようになってきた［Ｇ
、ホフマン者゛密閉空間中の空気の品質（Ｌｕｆｔｑｕ
ａｌｉｔＭｔ、 ｉｎ Ｉｎｎｅｎｒｉｕｍｅｎ）
″ゲスタフフィッシャー、シュドウッドポルト−ニュー
ヨーク刊、１９８２年３８５〜４０１ＴＸ１．その理由
は、人口のがなりの割合（約５％とｉ！ｔＷ、されてい
る）が室内のちりの成分に帰因する喘息症状に苦しんで
いることが認められていることによる。
ｐｔｅｒｏｎｙｓｓｉ’ −ｎｕｓ、ｆａｒｉｎａｅな
ど）は、近年増大する注目を引くようになってきた［Ｇ
、ホフマン者゛密閉空間中の空気の品質（Ｌｕｆｔｑｕ
ａｌｉｔＭｔ、 ｉｎ Ｉｎｎｅｎｒｉｕｍｅｎ）
″ゲスタフフィッシャー、シュドウッドポルト−ニュー
ヨーク刊、１９８２年３８５〜４０１ＴＸ１．その理由
は、人口のがなりの割合（約５％とｉ！ｔＷ、されてい
る）が室内のちりの成分に帰因する喘息症状に苦しんで
いることが認められていることによる。
これらの成分は主として上記の室内塵グエの排泄物（ｆ
ｅｅｅｓ）及び死んだダニの残片（ｆｒａｇｍｅｎｔｓ
）である、生息しているダニ及び死んだグエの腸管は、
健康の障害を誘発するアレルゲンを含有する［Ｅ。
ｅｅｅｓ）及び死んだダニの残片（ｆｒａｇｍｅｎｔｓ
）である、生息しているダニ及び死んだグエの腸管は、
健康の障害を誘発するアレルゲンを含有する［Ｅ。
ベトリら、７レルゴロノー（Ａ Ｉｌｅｒｇｏｌｏｇｉ
ｅ）、第５巻、第３号（１９８２）、１０９〜１１９頁
Ｊ。
ｅ）、第５巻、第３号（１９８２）、１０９〜１１９頁
Ｊ。
生息するダニ自体は、それが生きている闇に生産するア
レルゲンの量の約１０００分の１を含有するに過ぎない
、排泄物自体には菌類が繁殖することが多く、一方、そ
れが同様にアレルゲンを生じさせる可能性がある。アレ
ルゲンの大部分の量は、初めのダニの集団個体数を抑制
処置により駆除し又は低下させる場合にすら、ちりの堆
積物中に認められる。
レルゲンの量の約１０００分の１を含有するに過ぎない
、排泄物自体には菌類が繁殖することが多く、一方、そ
れが同様にアレルゲンを生じさせる可能性がある。アレ
ルゲンの大部分の量は、初めのダニの集団個体数を抑制
処置により駆除し又は低下させる場合にすら、ちりの堆
積物中に認められる。
おおいを付けた家具、ベッド、未成ｖ壁中には、待にそ
れらがａ維材料で覆われている場合には、室内塵ダニが
生息する０面域に関しては、じゅうたんの寄与がもっと
も大きいらのと思われる。
れらがａ維材料で覆われている場合には、室内塵ダニが
生息する０面域に関しては、じゅうたんの寄与がもっと
も大きいらのと思われる。
歩いたり使用したりすることによって床や布張りの家具
からきわめて細かいほこりが立ち、それがほとんど通気
のない近付！難い場所、たとえば食器棚の裏に集まるこ
とが多くある。実際に電気掃除機の使用中にすら一部の
このようなきわめて細かいほこりが立ち、か（してそれ
がダニ自体は生息していない場所に到達する。何れにし
ても、はこりが立つことが多ければ多いほど、影響を受
ける室中の者にとって悩みは大きい。
からきわめて細かいほこりが立ち、それがほとんど通気
のない近付！難い場所、たとえば食器棚の裏に集まるこ
とが多くある。実際に電気掃除機の使用中にすら一部の
このようなきわめて細かいほこりが立ち、か（してそれ
がダニ自体は生息していない場所に到達する。何れにし
ても、はこりが立つことが多ければ多いほど、影響を受
ける室中の者にとって悩みは大きい。
室内ＪＩＥ７レルギーの原因の除去は、その原因が既知
であることを前提とする。たとえば花粉に上るアレルギ
ー（花粉症）のような、他のアレルギーもまた存在する
。しかじな“がら、室内塵アレルギーは、ダニの排泄物
やダニの残留物（ｒｅｓｉｄｕｅｓ）がほとんど断える
ことなく存在していることから、それに冒されでいる者
にとって年間を通じての苦しみである。かくして、医者
と患者は、ダニの蔓延（ｉｎｆｅｓＬａｔｉｏｎ）があ
るかどうかの問題に絶えず直面している。
であることを前提とする。たとえば花粉に上るアレルギ
ー（花粉症）のような、他のアレルギーもまた存在する
。しかじな“がら、室内塵アレルギーは、ダニの排泄物
やダニの残留物（ｒｅｓｉｄｕｅｓ）がほとんど断える
ことなく存在していることから、それに冒されでいる者
にとって年間を通じての苦しみである。かくして、医者
と患者は、ダニの蔓延（ｉｎｆｅｓＬａｔｉｏｎ）があ
るかどうかの問題に絶えず直面している。
特願昭５９−２４８８３６号（Ｐ３３４４０８７．５）
及び特願昭５９−２７３５０３号（Ｐ３４０４８２１．
９）においては、アレルゲン含有ダニ残蕾物の検出のた
めの簡単な方法を見出すという目的を達成するための方
策が記されている。芳昏族りアゾ化合物、たとえばクア
ゾスル７アニル酸はダニの排泄物の存在において赤煉瓦
色の発色を生じ、そのＳ％度は、本出願人が確認したよ
うに、ちり試料中に存在するダニの排泄物の濃度に比例
する。
及び特願昭５９−２７３５０３号（Ｐ３４０４８２１．
９）においては、アレルゲン含有ダニ残蕾物の検出のた
めの簡単な方法を見出すという目的を達成するための方
策が記されている。芳昏族りアゾ化合物、たとえばクア
ゾスル７アニル酸はダニの排泄物の存在において赤煉瓦
色の発色を生じ、そのＳ％度は、本出願人が確認したよ
うに、ちり試料中に存在するダニの排泄物の濃度に比例
する。
この研究の！１続として、主特許中に記されたダニ排泄
物の濃度の評価方法は、ちり試料の全体的なアレルギー
学的活性の評価に対しても適していることが、ここに明
らかとなった。かくして、呈色反応によりアレルデレ含
有室内塵の定性的及び半定量的検出の進行が可能である
ばかりでな（、その室内塵中に含まれるアレルゲンによ
る汚染についでの情報を取得することもまた可能である
。
物の濃度の評価方法は、ちり試料の全体的なアレルギー
学的活性の評価に対しても適していることが、ここに明
らかとなった。かくして、呈色反応によりアレルデレ含
有室内塵の定性的及び半定量的検出の進行が可能である
ばかりでな（、その室内塵中に含まれるアレルゲンによ
る汚染についでの情報を取得することもまた可能である
。
それは、本発明の方法による測定結果を、技術の現状に
従って、現在もつとも効果的であるとみなされている試
験方法、すなわち放射性アレルゴ吸収剤試験［ｒａｄｉ
ｏａｌｌｅｒｇｏｓｏｒｂｅｎｔ ｔｅｓｔ（ＲＡＳ
Ｔ）］と比較することによって確認される。
従って、現在もつとも効果的であるとみなされている試
験方法、すなわち放射性アレルゴ吸収剤試験［ｒａｄｉ
ｏａｌｌｅｒｇｏｓｏｒｂｅｎｔ ｔｅｓｔ（ＲＡＳ
Ｔ）］と比較することによって確認される。
ＲＡＳＴ法及びここに記す方法（呈色反応の使用）の両
者により同一ちり試料に対して得た試験結果の統計的分
析、及び顕微鏡によって調べたグーの集団個体数に対す
るそれらの関係は、統計的分析をスピアマンの相関係数
方法［シトニーシーデルＭ″ノンパラメトリック統計学
”、マツフグローヒルインターナシ１ナルブツクカンパ
ニー、オークランド（１９５６月によって行なうときに
、全体的なアレルギー学的活性の評価における高度の一
致を示した。
者により同一ちり試料に対して得た試験結果の統計的分
析、及び顕微鏡によって調べたグーの集団個体数に対す
るそれらの関係は、統計的分析をスピアマンの相関係数
方法［シトニーシーデルＭ″ノンパラメトリック統計学
”、マツフグローヒルインターナシ１ナルブツクカンパ
ニー、オークランド（１９５６月によって行なうときに
、全体的なアレルギー学的活性の評価における高度の一
致を示した。
本発明による方法は、当該ちり試料を単に抽出する必要
があるのみで、次いで抽出物について直接に色濃度を測
定することが可能であることから、ＲＡＳＴ法と比較し
て著しく簡単に遂行することがでさる、ＲＡＳＴ法の手
順は比較的複雑であり、且つその各段階はそれぞれ個有
の問題をかかえている。それ故、指示のための放射性物
質の使用を要しない方法の試みが行なわれている［この
点に関しては、Ｄ、／ルテ、″アレルギーのｔａ”（Ｉ
ｌｅｒｇｉｅ−ｃｌｉａｇｏｎｏｓｔｉｋ”）、ダスト
リ７エルラークカール７フイストル、ミュンヘン−グイ
七ンホー７エン（１９８１）、特に２９頁以下；及びＭ
、ウニルナ−及１■、ラッパート、“アレルギーの実際
的診断″（Ｐｒａｋｔｉｓｃｈｅ Ａｌｌｅｒｇｉｅ
ｄｉａｇｎｏｓｔｉｋ）、デオルグチーメ、シュトウ２
ト〃ルト（１９７９）。
があるのみで、次いで抽出物について直接に色濃度を測
定することが可能であることから、ＲＡＳＴ法と比較し
て著しく簡単に遂行することがでさる、ＲＡＳＴ法の手
順は比較的複雑であり、且つその各段階はそれぞれ個有
の問題をかかえている。それ故、指示のための放射性物
質の使用を要しない方法の試みが行なわれている［この
点に関しては、Ｄ、／ルテ、″アレルギーのｔａ”（Ｉ
ｌｅｒｇｉｅ−ｃｌｉａｇｏｎｏｓｔｉｋ”）、ダスト
リ７エルラークカール７フイストル、ミュンヘン−グイ
七ンホー７エン（１９８１）、特に２９頁以下；及びＭ
、ウニルナ−及１■、ラッパート、“アレルギーの実際
的診断″（Ｐｒａｋｔｉｓｃｈｅ Ａｌｌｅｒｇｉｅ
ｄｉａｇｎｏｓｔｉｋ）、デオルグチーメ、シュトウ２
ト〃ルト（１９７９）。
９６頁以下、参照］。
呈色反応の評価についての本出願人によるこれらの新し
い知見は、主特許の本発明による拡張、すなわち定量的
な測定を思いつかせた。
い知見は、主特許の本発明による拡張、すなわち定量的
な測定を思いつかせた。
本発明による方法のいくつかの好適実施態様を以下に説
明する： 検査すべきちり試料中において検出を妨害する成分は、
あらかじめ加熱した水−アルコール溶剤混合物を用いる
処理によって除去することが好ましい。
明する： 検査すべきちり試料中において検出を妨害する成分は、
あらかじめ加熱した水−アルコール溶剤混合物を用いる
処理によって除去することが好ましい。
検出に関係する成分は残留するちり試料からアルカリ金
属水酸化物の水−アルコール溶液を用いる抽出によって
取り出される。この手順についてＡ の詳細は、主特
許、すなわち特願昭５９−２４８８３６号に記されてい
る。
属水酸化物の水−アルコール溶液を用いる抽出によって
取り出される。この手順についてＡ の詳細は、主特
許、すなわち特願昭５９−２４８８３６号に記されてい
る。
たとえば特願昭５９−２７３５０３号による試験紙の使
用による試ａ紙の使用によって、上記のようにして得た
抽出物の試料に対する予備試験においで、予想される色
濃度を確認することが可能である。詳細はこの特許願中
に記されている。
用による試ａ紙の使用によって、上記のようにして得た
抽出物の試料に対する予備試験においで、予想される色
濃度を確認することが可能である。詳細はこの特許願中
に記されている。
濃度に依存して、１乃至１０ｍｇの抽出物の部分試料を
採取しで、炭酸ナトリウム溶液、次いで芳香族ノ７ゾ化
合物、たとえばノアシスルアアニル酸を加える。芳香族
ジアゾ化合物についでの詳細は主特許中に記さ八でいる
。
採取しで、炭酸ナトリウム溶液、次いで芳香族ノ７ゾ化
合物、たとえばノアシスルアアニル酸を加える。芳香族
ジアゾ化合物についでの詳細は主特許中に記さ八でいる
。
顕色のための約２０分の後に、水−アルコール溶剤混合
物を加え、かくしで得た呈色、溶液を、規準としてブラ
ンク試料を用いて、分光光度計により測定する。
物を加え、かくしで得た呈色、溶液を、規準としてブラ
ンク試料を用いて、分光光度計により測定する。
測定結果をグアニン検定曲線を用いて評価する。
上記の手順についての詳細な設計は、この分野の分析の
専門家によって容易に遂行することができよう、限定的
なものではない単なる一例として、以下のようにして本
発明を実施することができる。
専門家によって容易に遂行することができよう、限定的
なものではない単なる一例として、以下のようにして本
発明を実施することができる。
実施例
１、秤量
測定重量：２５０ａ＋Ｈのアレルゲン含有室内塵２、清
浄化 ちり試料を、容量１０１１１の遠心分離管中で、６０℃
に予熱しである“溶液（”５＋ｏｒによって浸出する。
浄化 ちり試料を、容量１０１１１の遠心分離管中で、６０℃
に予熱しである“溶液（”５＋ｏｒによって浸出する。
遠心分離及び傾瀉後に、この工程を繰返す。
３、抽出
なお湿っている予備洗浄したちり試料を、遠心分離管中
で３ａｔの′溶液■”と混合し、次いで遠心分離する。
で３ａｔの′溶液■”と混合し、次いで遠心分離する。
３ａｔの“溶ＸＫＩ″′を用いて洗浄を行なう。
４、発色
このようにして得た、洗液をも含む、検出溶液をが遇し
たのち、メスフラスコ中で蒸留水によっテ全体テ１００
ａｔ ｊニーｔ ル、 ：、ｆ）ｆＦＩＷｌｆ） １〜
１０ｓｌ（予備試験に基づいて予想される色ａｉ１度に
依存する）をピペットにより２５鶴ｌのメスフラスコ中
に計り入れ、３−ｌの濃度２０％の炭酸ナトリウムｆｆ
ｊＷ１．ト２１１１１の濃度０．０５％のノアシスルア
７ ニル［ｆ＃液を加える。２０分後ニ１０１１Ｉｅ）
“溶［Ｉ″を加え、次いで混合物を蒸留水によって正確
に２５−１に仕上げる。
たのち、メスフラスコ中で蒸留水によっテ全体テ１００
ａｔ ｊニーｔ ル、 ：、ｆ）ｆＦＩＷｌｆ） １〜
１０ｓｌ（予備試験に基づいて予想される色ａｉ１度に
依存する）をピペットにより２５鶴ｌのメスフラスコ中
に計り入れ、３−ｌの濃度２０％の炭酸ナトリウムｆｆ
ｊＷ１．ト２１１１１の濃度０．０５％のノアシスルア
７ ニル［ｆ＃液を加える。２０分後ニ１０１１Ｉｅ）
“溶［Ｉ″を加え、次いで混合物を蒸留水によって正確
に２５−１に仕上げる。
５、色の測定
測定はブランク試料を基準として４９０ナノメートルに
おいて行なう、グアニンによる検定曲線（°“溶液■”
中に２０〜１００μｇの種々の濃度のグアニンを含有す
るｍｎを２５１１１１のメスフラスコ中で調製し、上記
４．に記した方法に従りて発色を行なうことによって求
めたもの）を用いて評価を行なう。
おいて行なう、グアニンによる検定曲線（°“溶液■”
中に２０〜１００μｇの種々の濃度のグアニンを含有す
るｍｎを２５１１１１のメスフラスコ中で調製し、上記
４．に記した方法に従りて発色を行なうことによって求
めたもの）を用いて評価を行なう。
溶液■：容量で２０部のメタ／−ル及び容量でｉｏｏ部
の水 溶？（ＩＩＩ ：２００＋ｏｉｆ）”ｊｌｊ＊ ｌ ”
中ｆ） １．９ｇノＫＯＨ ンクテル・ハ７ツング
の水 溶？（ＩＩＩ ：２００＋ｏｉｆ）”ｊｌｊ＊ ｌ ”
中ｆ） １．９ｇノＫＯＨ ンクテル・ハ７ツング
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １、家屋内に存在するちりの試料をアルカリ金属水酸化
物の水−アルコール溶液中に十分に懸濁させ、且つそれ
によって得た抽出物について芳香族ジアゾ化合物を用い
る呈色反応を行い、呈色の濃度に基づいてダニの残留物
の濃度を評価する、室内塵ダニ発生時又は発生後の結果
としての、アレルゲン含有室内塵の存在を確認するため
の方法にして、色濃度を定量的に測定するような具合に
して色濃度の評価を行なうことから成る該方法。 ２、色の測定は分光光度計を使用して行なう、特許請求
の範囲第１項記載の方法。 ３、使用するちり試料は（清浄化のために）あらかじめ
水−アルコール混合物によって予備処理してある、特許
請求の範囲第１又は２項記載の方法。 ４、強アルカリ性であることが（検出に関係する成分の
抽出のために）有利である溶液の量を、引続く発色のた
めに最低の量に限定する、特許請求の範囲第１〜３項の
何れかに記載の方法。 ５、特許請求の範囲第４項記載のようにして得た強アル
カリ性抽出物のアルカリ性を測定濃度への希釈（水によ
る）によって著しく低下させることによりアゾ染料の生
成に対する条件を炭酸ナトリウム溶液（過剰であること
が有利）の添加によって最適化する、特許請求の範囲第
１〜４項の何れかに記載の方法。 ６、ちり試料の処理のために本発明より行なうような方
法で規定量のグアニンを溶解し、且つちり試料から取得
した抽出物に対して本発明に述べられた方法と同様にし
て、これらの検定溶液に対して呈色反応を行なうことに
よって取得した、検定曲線を使用して測定結果を評価す
る、特許請求の範囲第１〜５項の何れかに記載の方法。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE19843430896 DE3430896A1 (de) | 1984-08-22 | 1984-08-22 | Verfahren zum nachweis von allergenhaltigem hausstaub |
| DE3430896.2 | 1984-08-22 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS6159261A true JPS6159261A (ja) | 1986-03-26 |
| JPH0464591B2 JPH0464591B2 (ja) | 1992-10-15 |
Family
ID=6243637
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP60181928A Granted JPS6159261A (ja) | 1984-08-22 | 1985-08-21 | アレルゲン含有室内塵の検出方法 |
Country Status (8)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0174448B1 (ja) |
| JP (1) | JPS6159261A (ja) |
| AT (1) | ATE41059T1 (ja) |
| AU (1) | AU584916B2 (ja) |
| CA (1) | CA1256006A (ja) |
| DE (1) | DE3430896A1 (ja) |
| DK (1) | DK377785A (ja) |
| ES (1) | ES8700757A2 (ja) |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE4233565A1 (de) * | 1992-09-30 | 1993-06-17 | Crabiell Peter | Analyse- und reduzierungsverfahren von allergenen und deren ursachen |
| GB9913487D0 (en) * | 1999-06-11 | 1999-08-11 | Pirzad Ramin | Dust mite detection |
| DE10327327A1 (de) * | 2003-06-16 | 2005-01-27 | Hofmann, Frieder, Dipl.-Biol. | Verfahren zum Aufbereiten einer aus Partikeln bestehenden Probe |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS6435293A (en) * | 1987-07-30 | 1989-02-06 | Nippon Butsuri Tanko Kk | Wave motion generating method and device therefor |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR2502786B1 (fr) * | 1981-03-24 | 1985-06-21 | Stallergenes Laboratoire | Procede de fixation d'antigenes et d'anticorps sur support de polysaccharides, et utilisation du produit ainsi obtenu pour les dosages immunologiques |
| DE3344087C1 (de) * | 1983-12-06 | 1985-04-11 | Werner & Mertz Gmbh, 6500 Mainz | Verfahren zum Nachweis von allergenhaltigem Hausstaub |
| DE3404821A1 (de) * | 1984-02-10 | 1985-08-14 | Werner & Mertz Gmbh, 6500 Mainz | Verfahren zum nachweis von allergenhaltigem hausstaub |
-
1984
- 1984-08-22 DE DE19843430896 patent/DE3430896A1/de active Granted
-
1985
- 1985-06-19 EP EP85107570A patent/EP0174448B1/de not_active Expired
- 1985-06-19 AT AT85107570T patent/ATE41059T1/de not_active IP Right Cessation
- 1985-08-20 DK DK377785A patent/DK377785A/da not_active Application Discontinuation
- 1985-08-20 AU AU46477/85A patent/AU584916B2/en not_active Expired
- 1985-08-21 CA CA000489187A patent/CA1256006A/en not_active Expired
- 1985-08-21 ES ES546303A patent/ES8700757A2/es not_active Expired
- 1985-08-21 JP JP60181928A patent/JPS6159261A/ja active Granted
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS6435293A (en) * | 1987-07-30 | 1989-02-06 | Nippon Butsuri Tanko Kk | Wave motion generating method and device therefor |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP0174448B1 (de) | 1989-03-01 |
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| CA1256006A (en) | 1989-06-20 |
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