JPS6156027A - 遺伝的に無臭である大豆の生産方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明線、大豆特有ＯＴ臭与りない無臭大豆訴品抽υ生
酋方法に関する。

（１）　　本発明の背景 大豆掘子中には、大豆油の構成々分であるリノール酸や
リルイン酸などの不飽和脂肪酸の叡化を促遇する９木リ
ボキシグナーセか多址Ｋｔまれている。

本酵素の作用は非電に強く、乾燥種子か粉砕され、酵素
と大豆油とｒｌ！素（空気中■）が混合、接触されるよ
うな条注でさえ酸化が起こる◎虫取した飲化嶺物（ヒド
ロペルオキシド）はさらに分解して中鎖アルデヒドやア
ルコールか１などを生じ、これらが青共い豆臭やにが与
などの不快な味覚となるため、大豆油製造や大豆蛋白食
品を製造する上で大きな１０ｊ題となっている。

そして、普通の大豆包子は前記リポキシゲナーゼとして
Ｌ−１、Ｌ−２及びり、−３υ３徳類を有している。そ
のそれぞれの理化学的性質はつざのとおシでちる。

Ｌ−１１）Ｐ’に４９付ｍＦＣ至＠ＰＨｔｕｌ、、中性
付近ではいずれの恭賀に対し ても活性が低い。

１１）　　リノール酸などの遊随脂肪＃ばによく作用し
、トリグリセリドなど 中憔脂肋に＃′ｉあまりｒト用しない。

１ｌｌ）　　Ｌ　−２、Ｌ−３と比較して熱に比較的安
定である。

Ｌ−２１）Ｐ”７ｆｔ近に至ａＰＨ’ｋｉす。

Ｉｆ）　　Ｌ−１，Ｌ−３１Ｃ較べて、アラキドン酸に
対する活性がはるかに 高い。またトリグリセリドなど中 性脂肪にもよく作用する。

Ｌ−３ｉ）Ｌ−２と同９Ａｐ　Ｈ７付近に至適ｐＨを示
す。

１１）リノール酸などの遊離脂肪酸、 及び、リノール酸エステルやトリ グリセリドなど■中性脂肪にも比 較的良く作用する。

（２）　　従来技術 これまで、リポキシゲナーゼによる大豆油Ｏ敵化や不快
臭発生を低く抑えるために１王として加熱によるリポキ
シゲナーゼの不古性化が竹われて釆た。また生成した不
快臭を除去するために、蒸煮や有機浴媒による抽出、あ
るいはアルデヒド脱水木口′Ｆ累による分解などの処理
が試与られて釆だ。しかしながら、過激な処理過程によ
る大豆止白Ｔ４０食品素材として■機能性畏失や、但和
な処理方法では必ずしも脱臭が完全でないことなど間へ
点が少なくない。

（３）　　本発明の門番 本発明者は、上記■ような大豆脱臭に関する従来技術■
欠点のない無兵大ＸＬの生泣方法について種々研究の結
果、肯抽的手法によってきわめて効果的かつ一実に上記
目的金述底しうることを知シ発明を完成するに至った〇
中　交配Ｒの迫択 前記Ｏように１大豆の竹°兵与やにが与にリポキシゲナ
ーゼＬ−１、Ｌ−２及びＬ−３が関与することは知られ
ていたが、こυうらいずれの＃素が肯くさ不発生に酸も
関与しているか知られていなかった〇 本発明者は、これまで見出されたＬ−１欠失大豆、Ｌ−
２欠失大豆及びり、−３欠失大豆を生υまｔＫ食（味わ
って）してｔ工、Ｌ−１欠失大豆の背くさ与はらまシ低
下していないが、Ｌ−２欠失とＬ−３欠失大豆の青くさ
与はかなシ低下していることを発見し、これら＝ａｉ類
■酵素を同時に欠失させた大豆をつくれば青くさ与の発
生がほとんど抑えられる■ではないかということに思い
至った〇 そして、本発明者は公知の大豆品ｔｉｌｌ’Ｄなかから
、Ｌ−２欠失大豆品桟としてＰ、１゜８６０２３を、Ｌ
−３欠失大豆品種として早生風を交配親として選択した
。なお、Ｐ。

Ｌ８６０２３はアメリカｍ彷省北部研究所から、また早
生風は我が国の最林水注省東北農榮試駁場からそれぞれ
正式手続をとれば入手９膓である。

＋Ｉ）　　Ｐ、Ｌ８６０２３ｃＤＬ−２欠失性支配逍臥
子及び早生風のＬ−３欠失性支配逍臥子の分留 Ｐ、　１．８６０２３と早生風とＯ交配に先立ち、両者
υＬ欠失性支配遺伝子の仕上［葡付つた。

スズユタカｘ　Ｐ、　１．８６０２３　Ｏ）”２種子及
びＦ、種子のＬ−２欠失性に関する分Ｆｊｔｌ比を解析
した結果、Ｐ、１．８６０２３のＩ、−２欠失性は劣性
単一遺伝子ｔｘ２によって支配されていることを、また
、ライデンＸ早生皮、Ｃｅｎｔｕｒｙ　Ｘ早生夏ノＦ２
Ｊｉ子ｖＬ−ａｉｘ失性に関する分離比を解析した結果
早生反ＱＬ−３欠失性は劣性単一遺伝子ｔｘ　５によっ
て支配されていることをそれぞれ確認した。

１）育種過程（表１参照） 農水省東北最試（刈和封試駄地）から人手したＬ−３欠
失品種早生反を母方に、米国農務省北部研究所から入手
したＬ−２欠失品ａＰ、１．８６０２３を父方として交
配し、Ｆ１抽子を得た。１１個体を自殖さ＋！：１１’
２抽子を得、各種子の胚軸と反対側の子葉切片１０〜２
０ｍｇ？＋？分析して、Ｌ−２、Ｌ　　３１’ｊ７素四
時欠失祝子を２粒迫抜した。迅ｔｈ　Ｌ、たＦ’ｚ２１
固体を自殖し、得られたＦｓ４虫子から、黄皮枕子を５
０粒選び、子葉切片１０１０−２ｏ　を分析して、Ｌ−
２、Ｌ−３ｆ！Ｐ！素四時欠失性を＃ｉ認した後、Ｆ３
４１！物体を育成した。良好な育成を示し、個体当シの
着生種子数の多い５個体を選抜した。連接個体に着生し
た１１種子を再び系統栽培し、以下常法（系統育種法）
Ｋ従って、選抜と固定度確認１０返すことによシ、１９
８４年８月１ｃＦＪｋ子を得て、新品８ＩＡの育成が完
了した。

（表ｔ）Ｉｉ品沖Ａ　Ｄ　旨ｔ＋ｉｉ過炸（年・月）　
　　（世　代）　　　　　　　（育成地）１９８２．１
　　　　　　Ｆ。

↓ １９８３、　４　　　　　　　　Ｆ２　　ＣＬｖ・Ｌ久
独子、２粒ン↓ １９８３、９　　　　Ｆ４（：；′乏察″）↓　　・良
好個体選抜 １９８３．１２　　　　　　　　　Ｆ。

？　　　　　＋＋ ＱＶ）　　交配親及び新品ｔｉｌＡのりボキシゲナーゼ
欠失性以外Ｏ主な容性は表２のとおりでらるＯ （表２） 朱 し−１，１７−２及びＬ−３０いずれも有する普通品槁
ライデン、Ｌ−１欠失大豆Ｐ、１．４０８２５１、Ｌ−
２欠失大豆Ｐ、１．８６０２３、Ｌ−３欠失大豆早生夏
及びＬ−２、Ｌ−３四時欠失大豆である新品種Ａのそれ
ぞれについて１０人のパネラ−が生大豆のまま食するこ
とにより１゛能テストを行った結果を表３及び表４に示
す。

（表３） を感じなかった （表４） （江）　数字は谷大豆品種の青果さの程庇を示した人数
を表わしている。

表３及び表４に示した官能検変結果から明らかなように
、新品種Ａは普通品種及びＬ−１、Ｌ−２、Ｌ−３Ｃ）
各欠失大豆Ｑいずれよシも抑臭効釆が秀れていて、実買
上無典である。

（Ｖｌ）　　盾品１１ｍＡＦ）電気泳動結果ディビス（
Ｄａマｉｓ）系也気泳動法の泳動ゲル作成用緩衝液饅煕
を常法の１７３とし、かつ７Ｍ尿素を重加して７チＯポ
リアクリルアミドゲルを作成した０大豆品ｔＩ＋Ｉ　Ｐ
。

１．４０８２５１．森林２号、東北７４＠、ライデン、
Ｐ、１．８６０２３、早生絖及び新品ａｌＡ５粒Ｏそれ
ぞれにつき、大豆ｌＯ〜２０ｍｇに対して、８Ｍ尿素及
び０．１　Ｍ　２−メルカプトエタノールを含む０．０
５　Ｍ　トリス塩酸緩衝液（ｐＨ８，０）　ｔ−２ｍＬ
（６５加して試料とした。

試＃ｉｒ２０〜３０　、Ｊ　　を用いて（−）ＩＮを陰
型としく＋）側を降臨として２００ＶｃＤ定通圧で１気
泳動した結果を図１に示す。

図１中０番号１．２．３．４．５、（５Ｆｉそれぞれ大
豆品種Ｐ、１．４０８２５１、農林２号、東北７４号、
ライデン、Ｐ、１．８６０２３、早生夏を、また７、８
．９．１０．１１はｔｌａＡ（５粒）ｏｔｔｔ気泳動Ｒ
ｊ　ａ　テある。

Ａ、及びＡ６はそれぞれ、大豆グリシニン、蛋白質ＯＡ
、及びＡ６サブユニツトを、またＴｌ＋、Ｔｉ２及びＴ
ｉ３はそれぞれ大豆キュニクットリプシンインヒビター
（Ｋｕｎｉｔｚ　Ｔｒｙ−ｐａｉｎ　１ｎｈｉｂｉｔｏ
ｒ）蛋白質ｏＴｔ’ｍ。

Ｔｉ２１＄１　及Ｑ’　Ｔｉ’型を示している。

表５は図１におけるＡ３．４両サブユニットの有無及び
キエニツットリズシンインヒビター０　（Ｔｉ１　、Ｔ
ｉ２、Ｔｉ”）各型のいずれに属しているか０結果をま
とめたもＯである。

（表５） なお、新品ｆｌｋＡ■栽培方法は晋ａＯ大豆品株と１町
様の栽培方法で差しつかえない〇＆１１　　本発明にお
けるＬ−２、Ｌ−３欠失大豆Ｏ選抜方法 Ｌ−２、Ｌ−３の存在■有無は、種子の胚軸と反対ｆａ
Ｄ子葉を１０〜２０　ｍｇ安全カミソリで削シ・取プ、
以下Ｏ各方法で分析することＫよシ確認できる口胚軸を
含む残シの種子は必要に応じて発芽させ生青さきること
が可能である■ ａ）　本発明者等が開発し九改良された５ＤＳ−ポリア
クリルアミドゲル電気永動によシ、Ｌ−１、Ｌ−２、Ｌ
−３を分離できるｏで、Ｉ、−２、Ｌ、　−３Ｏ存＆Ｏ
Ｖｍｔ−確認できる。

ｂ）抗Ｌ−２血清をウサギを用いて調良し、オクタＯニ
ーの免疫二重拡散法Ｖこより、Ｌ−２、Ｌ−３存在Ｏ有
無ｔ−ｍｍできる。

ｅ）ＤＥＡＥ−セファセルカラムクロマトグラフィーに
よシ、Ｌ−１、Ｌ、−２、Ｌ−３を分画できるＯで、そ
０各活性ｔ−測定することＫよシ、Ｌ−２とＩ、−３存
在の有無を確認できる。

尚こＯ方法は少なくとも５００　ｍｇ以上Ｑ大豆粉が必
要なので、柚子琳位Ｑ選抜には不向きである口 尚、ｂ）、Ｃ）法はａ）の方法で選抜後必要に応じてｉ
ｉ認υために用いた。

ナオ、ａ）ｏ方法ｔｉＸ体的にハ、Ｌａａｍｌ　ｉ系５
ＤＳ−ゲル電気泳動法の電亀槽浴液０８ＤＳ１１度を常
法ＯＯ，１％から０．１２５−Ｋｌ、、かつ７−アクリ
ルアミドゲルを用い、１５０ｖで長時間（７〜８時間）
泳動することＫよシ、Ｌ−２、Ｉ、−３蛋白質■分屋を
行うものである。

（４）　　本発明Ｏ王致な特徴点を以下に列記する。

■　従来は大豆Ｏ肯臭与等を除くためにそＯ都［理化学
的な脱臭処理を行わなければならず、しかもこＯ処理に
は徨々Ｏ欠点があったが、本発明は、無＾大豆」品ｍ’
ｔｗｇすることによシ、脱臭処理を不要とした。

■　」品種Ｏ育成に轟シ、大豆Ｏ實臭与等に関与するり
ボキシゲナーゼＬ−１、Ｌ−２及びＬ−３のうち、Ｌ−
２及びＬ−３の二極ｆＡｔ−同時に欠失させた大豆を育
成すれば青くさ与の発生が殆んど抑えられるという新知
見に基づいて交配親を選択した。

■　前記Ｌ−２及びＬ−３欠失大豆として、それぞれＬ
−２欠失性を支配する導因子方性遺伝子Ａｘ２を有する
大豆品ＩＰ、１．８６０２３及びＬ−３欠失性を支配す
る導因子方性遺伝子ｔｘ、を有する大豆品種早生夏を選
択することＫよ）、Ｌ−２、Ｌ−３同時欠失０大豆品ａ
１０育成が可能となった＠■　本発明によって得られた
大豆品種Ａは実質上青臭与が全く無くなるという、両親
それぞれの抑具効果からは予測し難い顕著な抑具効果が
ある。

【図面の簡単な説明】

図１は本発明の大豆品槙人及び池の公知凸極の大豆全蛋
白質θ弱アルカリ側尿素系電気泳動０対比図 手　　続　補　　正　　書　　（方式）： ム　発明の名称　無臭大豆新品種の生産方法３６　　補
正をする者 事件と■関係　　特許出願人 住　　所　青森県三戸郡三戸町大字用守田字沖中６８番
地４、代理人〒１０５ ５、補正命令Ｏ日付　　昭和５９年１１月７　日（発送
日　昭和５９年１１月２７日） 補　　正　　Ｄ　　内　　容 １）　明細書第１２員第１２行ないし第１３員第５行「
定電圧でＳ〜１１１ＡＳ％Ａ−サブユニツ」を次θよう
に補正する。 「定電圧で電気泳動を行ない、大豆グリシニン蛋白質と
大豆キュニツットリックンインヒビｆｉ　−（Ｋｕｎｉ
ｔｚ　Ｔｒｙｐｓｉｎ　１ｎｈｉｂｉＬｏｒ）蛋白質に
ついて比較を行なった。 表５は、それに基づき各試料つへ、Ａ６両サすユニツ」 ２）　同＠１６員＠１７行ないし末行「４　図面の簡暎
な１〜１１１対比図」を削除する。 ３）図面を削除する。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. リポキシゲナーゼＬ−３欠失性を支配する単因子劣性遺
   伝子ｌｘ＿３を有する大豆品種早生夏とリポキシゲナー
   ゼＬ−２欠失性を支配する単因子劣性遺伝子ｌｘ＿２を
   有する大豆品種Ｐ・Ｉ・８６０２３とを交配して、前記
   遺伝子ｌｘ＿２及びｌｘ＿３を共有し、前記リポキシゲ
   ナーゼＬ−２及びＬ−３を欠失することによつて、大豆
   特有の青臭みのない無臭大豆新品種Ａを育成し、これを
   適宜プロセスで増殖することを特徴とする無臭大豆新品
   種の生産方法。