JPS6140784A - 微生物菌体の分離方法 - Google Patents
微生物菌体の分離方法Info
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Landscapes
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
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Description
【発明の詳細な説明】
（産業上の利用分野）
発酵工業において発酵液より製品を回収するに際し、一
般的に発ＩＳ＃液より微生物菌体な除去する操作が必要
となる。また、菌体自体が主生産物である場合、あるい
は、菌体内成分、例えば、菌体内酵素が主生産物である
場合には、微生物菌体を分離回収する操作が必要となる
。本発明はこのような微生物菌体の分離方法に関するも
のである。
般的に発ＩＳ＃液より微生物菌体な除去する操作が必要
となる。また、菌体自体が主生産物である場合、あるい
は、菌体内成分、例えば、菌体内酵素が主生産物である
場合には、微生物菌体を分離回収する操作が必要となる
。本発明はこのような微生物菌体の分離方法に関するも
のである。
（従来の技術）
発酵液より微生物菌体を分離するには、従来、ろ過、遠
心分離によって分離されていた（例えば、合葉修−１Ａ
、Ｅ、ハンフクー、Ｎ、Ｆ、ミクス「生物化学工学Ｊ（
ｔ９７２年３月ｌＯ日）、東京大学出版会、第１１章）
。
心分離によって分離されていた（例えば、合葉修−１Ａ
、Ｅ、ハンフクー、Ｎ、Ｆ、ミクス「生物化学工学Ｊ（
ｔ９７２年３月ｌＯ日）、東京大学出版会、第１１章）
。
しかし、ろ過では、かび、担子菌のような比較的大きな
微生物菌体は分離できるが、酵母、細ωクロレラなどの
１〜６ミクロン程Ｉ（の大きさであり、比爪が水に近い
ものは分離することができない。かび、（！ｉ子菌め分
離においても、ろ過が進むにつれて圧力損失が非常に大
きくなり、ろ液量も少なくなる。一方、遠心分離では一
度の遍心分離操作では完全に自体を分離することは難し
く、何度も繰り返す必要がある。さらｒこ、ろ過に比較
して屯カコストが高くつく欠点がある。これらの欠点を
改善するために四塩化−あるいは三塩化チタン、カルシ
ウム塩が凝集剤として使用されているが、四塩化−ある
いは三塩化チタンは重金属であり安全性の点で問題があ
る。また、上記凝集剤のいずれも満足するほどの効果を
あげることができ゛ていない。
微生物菌体は分離できるが、酵母、細ωクロレラなどの
１〜６ミクロン程Ｉ（の大きさであり、比爪が水に近い
ものは分離することができない。かび、（！ｉ子菌め分
離においても、ろ過が進むにつれて圧力損失が非常に大
きくなり、ろ液量も少なくなる。一方、遠心分離では一
度の遍心分離操作では完全に自体を分離することは難し
く、何度も繰り返す必要がある。さらｒこ、ろ過に比較
して屯カコストが高くつく欠点がある。これらの欠点を
改善するために四塩化−あるいは三塩化チタン、カルシ
ウム塩が凝集剤として使用されているが、四塩化−ある
いは三塩化チタンは重金属であり安全性の点で問題があ
る。また、上記凝集剤のいずれも満足するほどの効果を
あげることができ゛ていない。
（発明が、解決しようとする問題点）
−上記のようにろ過、遠心分離では発酵液より微生物菌
体を効率良く分離することができず、効果的な凝集剤も
見出されていないのが現状である。
体を効率良く分離することができず、効果的な凝集剤も
見出されていないのが現状である。
本発明は微生物懸濁液より微生物菌体を効率良く分離す
ることを百的とするものである。
ることを百的とするものである。
ｃ問題点を解決するための手段）
本発明は微生物懸濁液より微生物菌体を分離するに際し
、凝集剤として右手オン性高分子、特に微 力千オン変性澱粉を添加することな特朶とする微生物菌
体の分層方法である。
、凝集剤として右手オン性高分子、特に微 力千オン変性澱粉を添加することな特朶とする微生物菌
体の分層方法である。
本発明で使用するカチオン性高分子としては、馬ル著、
甘藷、トウモロコシ、タピオカ、小麦その他の澱粉に２
−ジエ千ルアミノエチルクロライド、３−ジエチルＴミ
ノー１．２−エポキシプａパン、３−ジブ千ルアミノー
１．２−エポキシプロパンなどを作用させて得られる３
級カチオン変性澱粉、２−クロロ二チルトリ〆チルアン
モニウムクロライド、グリシジルトリメチルアンモニウ
ムクロライド、３−りＣロー２−ヒドロキンプロピルト
リエチルアンモニウムクロライド、３−クロロ−２−ヒ
ドロキンプロピルトリエチルアンモニウムクロライドな
どを作用させて得られる４級カチオン変性澱粉、ジメチ
ルアミノエチルアクリレート、ジメチルアミノエチルメ
タクリレート、ジエチルアミノエチルアクリレート、ジ
エチルアミンエチルメタクリレート、２−ヒドロキシ−
３−アクリルオキンプロピルトリメチルアンモニウムク
ａライド、２−ヒドロキシ−３−メタクリルオキシプロ
ピルトリメチルアンモニウムクロライド、γクリａキン
エチルトリメチルアンモニウムクロライド、メタクロキ
シエチルトリメチルアンモニウムクロライドなどをグラ
フト基は合化させて得られる３４＆および４級右手オン
グラフト変性−扮およびこれらな組み合わせたものが特
１こ好ましく≧仙にポリビニルビａリドン、ポリアジリ
ジン、ボ１７アクリルアミドポリエチレンイミンなどの
カチオン性合成高分子、右手オン性セルロース誘導Ａ体
、キトサンなどが挙げられる。
甘藷、トウモロコシ、タピオカ、小麦その他の澱粉に２
−ジエ千ルアミノエチルクロライド、３−ジエチルＴミ
ノー１．２−エポキシプａパン、３−ジブ千ルアミノー
１．２−エポキシプロパンなどを作用させて得られる３
級カチオン変性澱粉、２−クロロ二チルトリ〆チルアン
モニウムクロライド、グリシジルトリメチルアンモニウ
ムクロライド、３−りＣロー２−ヒドロキンプロピルト
リエチルアンモニウムクロライド、３−クロロ−２−ヒ
ドロキンプロピルトリエチルアンモニウムクロライドな
どを作用させて得られる４級カチオン変性澱粉、ジメチ
ルアミノエチルアクリレート、ジメチルアミノエチルメ
タクリレート、ジエチルアミノエチルアクリレート、ジ
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３−アクリルオキンプロピルトリメチルアンモニウムク
ａライド、２−ヒドロキシ−３−メタクリルオキシプロ
ピルトリメチルアンモニウムクロライド、γクリａキン
エチルトリメチルアンモニウムクロライド、メタクロキ
シエチルトリメチルアンモニウムクロライドなどをグラ
フト基は合化させて得られる３４＆および４級右手オン
グラフト変性−扮およびこれらな組み合わせたものが特
１こ好ましく≧仙にポリビニルビａリドン、ポリアジリ
ジン、ボ１７アクリルアミドポリエチレンイミンなどの
カチオン性合成高分子、右手オン性セルロース誘導Ａ体
、キトサンなどが挙げられる。
これらのカチオン性高分子のなかでも３級カチオン変性
、４′Ｒカチオン変性、３＃＆カチオングラフト変性、
４級カチオングラフト変性およびこれらを組み合わせた
カチオン変性澱粉がとりわけ凝集力に優れており、置換
度〔エーテル化度な表し、グルコース残基１個当りの置
換水酸基の平均値である。） ０．０１〜０．５、グラ
フト率３〜２０鴫のものが用いられ、添加量は微生物懸
濁液の成分菌体のｆ［類、濃度、カチオン性高分子の種
類などにより異なるが微生物懸濁液に対して０．０１〜
０゜１呪添加される。
、４′Ｒカチオン変性、３＃＆カチオングラフト変性、
４級カチオングラフト変性およびこれらを組み合わせた
カチオン変性澱粉がとりわけ凝集力に優れており、置換
度〔エーテル化度な表し、グルコース残基１個当りの置
換水酸基の平均値である。） ０．０１〜０．５、グラ
フト率３〜２０鴫のものが用いられ、添加量は微生物懸
濁液の成分菌体のｆ［類、濃度、カチオン性高分子の種
類などにより異なるが微生物懸濁液に対して０．０１〜
０゜１呪添加される。
（作用）
微生物懸濁液（発酵液）中において微生物１体はアニオ
ン性であるため、上記のカチオン住萬分子は凝集剤とし
て作用すると考えられる。
ン性であるため、上記のカチオン住萬分子は凝集剤とし
て作用すると考えられる。
発へｊ ｇ １−上記右手オン性高分子を凝集剤として
添加し、デカンテーション、ろ過、遠心分離などの方法
により効４Ｉ良く凝集した微生物菌体な分離することが
できる。
添加し、デカンテーション、ろ過、遠心分離などの方法
により効４Ｉ良く凝集した微生物菌体な分離することが
できる。
（実施例Ｉ）
バチルス・マセランス（Ｂａｏｉｌｌｕｓ ｍａｃｅｒ
ａｎｓ ） ＩＦＯ３４９０（発酵研究所より入手）
をポリペプトン２０ｙ１塩化ナトリウム５ｙを水に加え
て１ｊとした液体培地（ｐ Ｈ７，０オ一トクレーブ中
１２０℃２０分間滅Ｉ！ｉ）１ｏｏｍｒを収容した５０
０ｍ／容三角フラスコに植菌し、３０′ｃで２日間振と
う培養した。培養液１００ｍｊに添加量を変えて、ジエ
チルアミノエチル化澱粉（置換度０．０５ ） １（水
溶液を加え、撹拌後３０分子ＪＪ静置し、沈殿物分の量
と上澄す液の渇ｒｆｔ（植菌していない培地を対照とす
る。これは菌体財と比例する）全６６０ｎＷｌで測定（
７た。結果をｄｇ１表に示す。
ａｎｓ ） ＩＦＯ３４９０（発酵研究所より入手）
をポリペプトン２０ｙ１塩化ナトリウム５ｙを水に加え
て１ｊとした液体培地（ｐ Ｈ７，０オ一トクレーブ中
１２０℃２０分間滅Ｉ！ｉ）１ｏｏｍｒを収容した５０
０ｍ／容三角フラスコに植菌し、３０′ｃで２日間振と
う培養した。培養液１００ｍｊに添加量を変えて、ジエ
チルアミノエチル化澱粉（置換度０．０５ ） １（水
溶液を加え、撹拌後３０分子ＪＪ静置し、沈殿物分の量
と上澄す液の渇ｒｆｔ（植菌していない培地を対照とす
る。これは菌体財と比例する）全６６０ｎＷｌで測定（
７た。結果をｄｇ１表に示す。
第１表
（実施例２）
グレブシェラ・ニューモニアエ（Ｋｌｅｂｓｉθｌｌａ
Ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ ） Ｉ Ｆ Ｏ３３１７（発酵
イｄ＋究所より入手〕を実施例１と同様に培養し、培養
液１００ｗ＋ｌに添加ｒ１ｔえて、トリメチル−２−ヒ
ドロキシプロピル化澱粉のクロル塩（置換度０．０５
） １呪水粉 ｔ８液を加え、撹拌後３０分１１＋’ｌ静ｄし、沈殿論
の口と上澄み液の濁度を測定した。結果を第２表に示す
。
Ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ ） Ｉ Ｆ Ｏ３３１７（発酵
イｄ＋究所より入手〕を実施例１と同様に培養し、培養
液１００ｗ＋ｌに添加ｒ１ｔえて、トリメチル−２−ヒ
ドロキシプロピル化澱粉のクロル塩（置換度０．０５
） １呪水粉 ｔ８液を加え、撹拌後３０分１１＋’ｌ静ｄし、沈殿論
の口と上澄み液の濁度を測定した。結果を第２表に示す
。
（発明の効Ｍｋ）
実施例１および２の結果より明らかなごとくカチオン変
性澱粉は菌体を凝集する効果が非常Ｃ優れている。
性澱粉は菌体を凝集する効果が非常Ｃ優れている。
Claims (2)
- （１）微生物懸濁液より微生物を分離するに際し、カチ
オン性高分子を凝集剤として添加することを特徴とする
微生物菌体の分離方法。 - （２）該カチオン性高分子がカチオン変性澱粉である特
許請求の範囲第（１）項記載の微生物菌体の分離方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP59162746A JPH0716399B2 (ja) | 1984-07-31 | 1984-07-31 | 微生物菌体の分離方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP59162746A JPH0716399B2 (ja) | 1984-07-31 | 1984-07-31 | 微生物菌体の分離方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS6140784A true JPS6140784A (ja) | 1986-02-27 |
| JPH0716399B2 JPH0716399B2 (ja) | 1995-03-01 |
Family
ID=15760471
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP59162746A Expired - Lifetime JPH0716399B2 (ja) | 1984-07-31 | 1984-07-31 | 微生物菌体の分離方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH0716399B2 (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2013063605A1 (en) * | 2011-10-28 | 2013-05-02 | Utah State University | Methods for harvesting biomass |
| JP2019017355A (ja) * | 2017-07-21 | 2019-02-07 | 合同酒精株式会社 | 酵素の製造法 |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5129116A (ja) * | 1974-09-04 | 1976-03-12 | Japan Broadcasting Corp | Dejitarukirokuyojikisaiseihetsudo |
| JPS5325027A (en) * | 1976-08-18 | 1978-03-08 | Kenzou Irie | Method of making fireeresistant wall containing steel fibers |
-
1984
- 1984-07-31 JP JP59162746A patent/JPH0716399B2/ja not_active Expired - Lifetime
Patent Citations (2)
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| JPS5129116A (ja) * | 1974-09-04 | 1976-03-12 | Japan Broadcasting Corp | Dejitarukirokuyojikisaiseihetsudo |
| JPS5325027A (en) * | 1976-08-18 | 1978-03-08 | Kenzou Irie | Method of making fireeresistant wall containing steel fibers |
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2013063605A1 (en) * | 2011-10-28 | 2013-05-02 | Utah State University | Methods for harvesting biomass |
| JP2019017355A (ja) * | 2017-07-21 | 2019-02-07 | 合同酒精株式会社 | 酵素の製造法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0716399B2 (ja) | 1995-03-01 |
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