JPS6124519A - 抗腫瘍剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 産業上の利用分野 本発明は医薬として有用な抗腫瘍剤に関する。

さらに詳しくは本発明は式 ％式％ 〔式中、Ｒ１はアルキル基を、Ｒ２は式０Ｒ６ （式中、Ｒ６は低級アルキμ基、低級１μカノイμ基、
低級１μコキシカルボ＝ｙ基また社低級アルキルで置換
されていてもよいカルバモイル基を示す）で表わされる
基または式 −ＮＨＣＯＲ７ （式中、Ｒ７は水素、低級アルキル基または低級アルコ
キシ基を示す）で表わされる基を示し、Ｒ３塩と ■　リン脂質 を含有してなる抗腫瘍剤に関する。

従来の技術 本発明者らは式（Ｉ）で示される化合物についてｉクロ
ファージ活性化作用や腫瘍壊死作用を含む抗腫瘍作用を
有することを見出した。しかしながらこれらの合成リン
脂質化合物は血小板活性化因子（ＰＡＤ’）に類似の副
作用、たとえば血小板活性化作用、好中球活性化作用、
組織障害作用、血管透過性７を遺作用、血圧下降作用な
どの副作用を持つため医薬としての使用が制約されてい
た。

本発明で使用される化合物と構造が異なるリゾリン脂質
（天然由来）について副作用とくに溶血性を低減させよ
うとする試みが報告されている〔特開昭５６−４９３２
２号公報〕。リゾレシチンは１位アシμ基が生体内で容
易に酵素的に加水分性強度や持続性において劣る。事実
、リゾレシチンはＰＡＦの約１０００倍の濃度において
もマクロファージを活性化せず、かつまた、抗体産生能
（ＰＦＣ）やｉｎ　ｖｉｔｒｏ　およびｉｎ　ｖ１ｖｏ
抗腫瘍活性は対応する１μキμ工−テル化合物、即ち、
リゾＰＡＦに比べ著しく劣ることが知られている。

一方、（１）式で示される化合物はこのような酵素的分
解、不活化をうけにくく、抗腫瘍作用は持続的であシ、
強力であシ担がん動物に対し顕著な治療効果を示すこと
が見出された。しかしこれら化合物はりゾレシチンのそ
れとは異質の副作用を有する。即ち、構造上の差にもと
づく強弱の差はあるが、概して血小板活性化作用、血圧
下降作用、血管透過性充進作用９組ｍ障害作用等の副作
用を有する。

これら化合物は、抗腫瘍効果を発揮しうる有効投与量と
副作用発現量とが極めて接近しているため、このま＼で
は制がん剤として使用することが難しい。本発明者らは
、薬物治療係数、即ち、副作用発現薬物ｔ　（ｇｒ／ｍ
ａｎ　）　／治療有効投与量（ｇｒ／ｍａｎ　）を高め
る手段を求めて鋭意、研究を重ねた。本発明者らは式（
Ｉ）で示される化合物とリン脂質を用いて脂質小胞体と
なすことによシ、意外にも式（Ｉ）で表わされる化合物
の抗ｒＦ４＋瘍活性が顕著に増大するとともに、副作用
を著しく弱めることができることを見出し、薬物治療係
数の飛躍的に向上した組成物の調製に成功し、本発明を
完成した。

問題点を解決するための手段 本発明は式 ％式％ 〔式中、Ｒ１はアルキル基を、Ｒ２は式０Ｒ６ （式中、Ｒ６は低級アルキ〃基、低級アルヵノイ／ｌ’
基、低級アルコキシカルボニル基または低級アルキμで
Ｒ換されていてもよい力μパモイμ基を示す）で表わさ
れる基ま九は式 ％式％ （式中、Ｒ７は水素、低級アルキル基または低級アルコ
キシ基を示す）で表わされる基を示し、Ｒ３塩と ■　リン脂質 を含有してなる抗腫瘍剤を提供するものである。

上記式（Ｉ）に関し、Ｒ１で示されるアルキル基として
は、たとえばテトフデシル、ペンタデシル、ヘキサデシ
／Ｌ／、ヘプタデシμ、オクタデシル、ノナデシμなど
のアルキル基があげられ、なかでも炭素数１４〜１９程
度の直鎖状アルキル基が好ましい。

Ｒ６またはＲ７で示される低級アルキル基として社、た
とえばメチル、エチル、プロピル、ブチルなどの炭素＠
１〜４程度のアルキル基があげられる。

Ｒ６で示される低級アルカノイ／ｌ’基としては、タト
エばホルミル、アセチル、プロピオニル、ブチリルなど
の炭素数１〜４程度のアルカノイμ基があげられる。

Ｒ６で示される低級アルコキシカルボニル基としては、
たとえばメトキシカルボニル、エトキン力μボニμ、デ
田ボキシカルボニルなどの炭素数２〜４程度のアルコキ
シカルボニル基があげられＲ６で示される低級アルキル
で置換されていてもよいカルバモイル基／基としてハ、
たとえば力！パモイμ、Ｎ−メチルカルパモイμ９Ｍ−
工ｆｋ’カルバモイル、Ｗ−プロピル力μパモイＡ／、
Ｎ−プチルカルパモイ７に、Ｎ　、Ｈ−ジメチμカルパ
モイ〜、Ｈ、Ｎ−ジエチルカ〃バモイル、Ｎ−メチル−
Ｎ−エチル力μバモイμなどのカルバモイル基、１ｔた
は２個の炭素数１〜４程度の低級アルキル基でＩｆｆ摸
されたカルバモイル基があげられる。

Ｒ７で示される低級ア〃コキＶ基としては、たとえばメ
トキン、エトキシ、プロポキン、ブトキシなどの炭素数
１〜４程度のア〃コキＶ基があげられる。

Ｒ３，Ｒ４ｔたはＲ５で示される低級アルキル基として
は、たとえばンチル、エチルなどの炭素数１〜２程度の
アルキル基があげられ、なかでもメチル基が好ましい。

Ｒ３，Ｒ４およびＲ５は同一の基であっても相異なる基
であｔてもよいが、とシわけＲ３，Ｒ４およびＲ５のう
ちの２つの基がメチμであシ、残シの１つの基が水素ま
たはメチルでばチアゾリオ、オキサゾリオ、ピリジニオ
、Ｎ−メチルピロリジニオ、Ｎ−メチルモρホリニオ。

Ｎ−メチルピペリジニオなどの複素環基があげられる。

化合物（Ｉ）を具体的に開示すると ３−ヘキサデシルオキＶ　２−アセチルオキシプロピｌ
ｖ　２−（Ｎ−メチルモμホリニオ）エチル　ホスフェ
ート。

３−ヘキサジ３／Ａ／オキＶ−２−アセチルオキシプロ
ピｔｖ２−（ｉ−メチルピペリジニオ）エチル　ホスフ
ェート。

３−ヘキサデＶｌｖオキＶ　２−アセチルオキシプロピ
ｐｖ２−Ｃｗ−メチルピロリジニオ）メチμ　ホスフェ
ート。

１−ｏ−ｔりｐデｖｓｔ−２−ｏ−メトキシカルボニμ
グリセロー３−ホスホコリン。

３−ヘキサデンルオキシ−２−（メトキシカルボニμオ
キシ）プロピＡ’２−ピリジニオエチμホスフェート。

３−オクタデシμオキＶ−２−アセチμオキシプロピＡ
／２−ピリジニオメチμ　ホスフェート。

３−ヘキサデＶ／Ｌ／オキシー２−アセチμオキシプロ
ヒ／Ｌ／２−チアゾリオエチル　ホスフェート。

３−ヘキサデＶ／Ｉ／オキシー２−メトキシプロピ／Ｉ
／２−ピリジニオメチμ　ホスフェート。

３−オクタデシ〜オキＶ−２−メトキシプロピＡ／２−
（Ｎ−メチルモルホリニオ）エチル　ホスフェート、　
３−オクタデシルオキシ−２−メトキシプロピ／ｌ／　
　２−（Ｎ−メチルピロリジニオ）エチル　ホスフェー
ト。

１−０−ヘキサデシ／Ｌ’−２−０−（Ｎ　、　Ｎ−ジ
メチμカμパモイＡ／）グリセロ−３−ホスホコリン。

１−０−ヘプタデシ１ｖ−２−０−（Ｍ　、　ｌｌｌ−
ジメチルカμバモイＡ／）グリセロ−３−ホスホコリン
。

１−〇−オクタデシ／Ｉ／−２−０−（に、Ｈ−ジメチ
ルカμパモイル）グリセロ−３−ホスホコリン。

１−０−オクタデシル−２−０−（Ｈ，Ｎ−ジエチル力
μパモイμ）グリセロ−３−ホスホコリン。

１−〇−オクタデシＡ／−２−０−（Ｎ、Ｎ−ジデロピ
ρ力！パモイｌＬ／）グリセロ−３−ホスホコリン。

３−オクタデシルオキ５／−２−（Ｎ、Ｎ−ジメチμ力
μパモイμオキシ）グロ？”Ａ／　　２−（Ｎ。

Ｎ　、　Ｎ−）　リエチルアンモニオ）エチ〃　ホスフ
ェート。

モμホリニオ）エチμ　ホスフェート。

３−へプタデＶルオキシー２−（Ｎ、Ｎ−ジメチμカμ
バモイμオキＶ）プロピｔｖ２−（Ｎ−メチルピロリジ
ニオ）エチル　ホスフェート。

３−オクタデｙ／Ｌ／オキシ−２−（Ｎ、）ｌ−ジメチ
ル力〃バモイμオキシ）プロピ／ｌ／２−（Ｎ−メチル
ピロリジニオ）エチル　ホスフェート。

３−オクタデシルオキＰ−２−（Ｎ、Ｎ−ジメチルカル
バモイルオキシ）プーピ／Ｌ’　　２−（ピリジニオ）
エチル　ホスフェ−）。

３−オクタデシルオキシ−２−（Ｎ、）ｌ−ジメチルカ
ルバモイルオキシ）プロピｐｖ２−（チアゾリオ）エチ
ル　ホスフェート。

３−ヘキサデシルオキＶ−２−（Ｎ、Ｎ−ジメチルカル
バモイルオキシ）プロピＮ　２−（オキサゾリオ）エチ
ル　ホスフェート。

１−〇−オクタデシｙｖ−２−０−（Ｎ−メチμカルパ
モイ／Ｌ’）グリ七ロホスホコリン。

３−ヘキサデシルオキシ−２−（Ｎ−メチルカルバモイ
ルオキシ）プロピｔｖ２−（ピリジニオ。

）エチル　ホスフェート。

１−０−オクタデシｆｉ／−２−０−（Ｎ、Ｎ−ジメチ
ル力ルパモイＶ）グリ七ロー３−ホヌホ（Ｎ、Ｎ−ジメ
チ／Ｉ／）エタノールアミン。

■−〇−オクタデＶルー２−（０−メトキＶカルボニＡ
／）グリセロ−３−ホスホコリン。

１−０−オクタデシＡ／−２−（０−メトキシカμボニ
／Ｌ／）グリ七ロー３−ホスホ（Ｎ、Ｎ−ジメチ眉エタ
ノールアミン、　３−０−オクタデシルオキシ−２−（
０−メトキシカルボニルオキシ）プロピｔｖ２−（チア
ゾリオ）エチル　ホスフェート。

３−オクタデシルオキシ−２−アセチルアミノプロヒ／
Ｉ／２−トリメチμアンモニオエチル　ホスフェート。

３−ヘキサデシルオキシ−２−プロピオニルアミノプロ
ピ／Ｌ／２−ジメチルアミノエチル　ホスフェート。

３−ヘキサデシルオキシ−２−プチリルアミノプロヒｐ
２．−）リメチルアンモニオエチル　ホスフェート。

３−オクタデシルオキシ−２−パレリルアミノプロヒ／
Ｌ／２−トリメチ〃アンモニオエチル　ホスフェート。

３−テトラデシルオキシ−２−アセチルアミノプロピ／
Ｌ’２−）リメチμアンモニオエチＩ　ホスフェート。

３−オクタデＶ／Ｉ／オキＶ−２−メトキシカルボニ〃
アミノプロピＡ／２−トリメチルプンモニオエチｐ　ホ
スフェート。

３−ヘキサデシルオキシ−２−メ（キシカルボ二μアミ
ノプロピ／Ｌ／２−）ジメチルアンモニオエチル　ホス
フェート。

３−ノｔデシμオキシー２−メトキシカ！ボニ〃アミノ
プロピ／Ｌ／２−トリメチμアンモニオエチμ　ホスフ
ェート。

３−テトヲデシρオキＶ＋２−エトキシカμボニμアミ
ノプロピ／Ｌ’２−）リメチ〜アンモニオエチμ　ホス
フェート。

３−オクタデシルオキシ−２−プロホキＶ力μボニルア
ミノプロピμ゛２−トリメチμアンモニオエチル　ホス
フェート。

３−オクタデシルオキシ−２−プトキシカルポニμアミ
ノプロピＡ’２−）ジメチルアンモニオエチル　ホスフ
ェート。

３−オクタデシルオキシ−２−アセチルアミノプロピ／
’　　２−（１−ピリジニオ）エチル　ホスフェート。

３−ヘキサデシルオキシ−２−フセチルアミノプロピ）
ｖ　　２−（３−チアゾリオ）エチ〃　ホスフェート。

３−ヘキサデシルオキシ−２−プロピオニルアミノプロ
ピル　２−モルホリノエチル　ホスフェート。

３−オクタデシルオキシ−２−アセチμアミノプロピ／
Ｉ／　　２−ＣＭ−メチルモ〃ホリニオ）エチμ　ホス
フェート。

３−オクタデシルオキシ−２−アセチルアミツブａｘヒ
μ　２−（Ｎ−メチルピロリジニオ）エチル　ホスフェ
ート。

３−オクタデシルオキＳ／２−アセチルアミノｆｕビｔ
ｖ２−ＣＭ−メチルピペリジニオ）エチμ　ホスフェー
ト。

３−オクタデシルオキシ−２−メトキシカμボニルアミ
ノプロピ／ｌ／　　２−（３−チアゾリオ）エチμ　ホ
スフェート。

３−オクタデシルオキＶ−２−メトキシカルボニルアミ
ノプロピｔｖ２−（１−ピリジニオ）エチル　ホスフェ
ート。

３−オクタデシルオキシ−２−メトキシカμボニルアミ
ノプロピＡ／２−（Ｎ−メチルピロリジニオ）エチル　
ホスフェート。

３−オクタデシルオキシ−２−メトキシカμボニμアミ
ノプロピｖ２−（Ｎ−メチルピペリジニオ）エチ〃　ホ
スフェート。

３−オクタデＶ／Ｌ／オキｖ−２−メトキシカμボニμ
アミノプロピ１ｖ２−（Ｎ−メチμモμホリニオ）エチ
μ　ホスフェート。

３−ヘキサデシルオキシ−２−メトキシカμボ二μアミ
ノプロピ／Ｉ／２−ジメチ〃アミノエチルホスフェート などの化合物があげられる。

化合物（Ｉ）はＲおよび８体が存在するが、その各々ま
たはそれらの混合物を使用してもよい。

化合物（Ｉ）の塩としては薬理学的に許容されうる塩が
あげられ、たとえば塩酸塩、臭化水素酸塩、硫酸塩、硝
酸塩、燐酸塩などの無機酸塩、たと、ｔｔｆマレイン酸
塩、ツマ−μ酸塩＊ｐ−）”ンスμホン酸塩などの有機
酸塩などの酸付加塩があげられる。

リン脂質としてはたとえば卵黄Ｖンチン、大豆しＶチン
、スフィンゴミエリン、ホスファチジルセリン、ホスフ
ァチジルグリセロール、ホスファチジルイノシト−μ、
ジホスファチジ！グリセロー〃、ホスファチジルエタノ
ールアミンなどの天然リン脂質、ジステアロイμホスフ
ァチジμコリン、シバμミトイμホスファチジμエタノ
ールアミンなどの合成リン脂質があげられる。上記リン
脂質の中でもレシチン、シバμミドイルホスファチジル
プリンなどの１．２−シアＶ／Ｌ／グリセロー３−ホス
ホコリンが望ましい。

本発明の抗腫瘍剤は各構成成分を単に混合したものでも
、脂質小胞体（例、エマμジョン、リポソーム）の状態
で分散していてもよいが、脂質小胞体として分散してい
る場合がよシ好ましく、リボソームの場合が最も好まし
い。各構成成分を単に混合したものは、自体公知の混合
方法を使用して調製することができ、脂質小胞体も通常
の方法、たとえば−）　ポルチクスイング法〔んｐ、３
ｔｇｎｄｉｓｈら、　Ｊ、　ＭｏＬ　ＢｉｏＬ　１３　
、２３８（１９６５）　）　、　（ｂ）超音波（５ｏｎ
ｉｃａｔｉｏｎ゛）法（Ｈ，Ｏ，Ｈａｕａｅｒ、　Ｂｉ
ｏｃｈｅｍ。

Ｂｉｏｐｈｙａ　Ｒｅｓ、ＣｏｍｍｕｒＬ４５．１０４
９（１９７１））　ｅ（０）　　プレーベジクρ法（Ｈ
，Ｔｒｉａｕｂｌｅら、　１（ｅｕｒｏｓｏｉ。

Ｒｅａ、ＰｒｏｇＢｕｌＬ　９．３７３（１９７１）　
）　、（ｄ）　　エタノール注入法（Ｊ、　Ｍ、　Ｈ，
Ｋｒｅｍｅｒら、　Ｂｉｏｃｈｅｍｉ　−８ｔｒｙ穂、
３９３２（１９７７））、（ｅ）　　コール酸除去法（
Ｅ、　Ｇ、　Ｅｎｏｃｋら、　Ｐｒｏｃ、　ＮａｔＬ　
Ａｃａｄ、　Ｓｃｉ、　７６　。

１４５（１９７９））　、（ｆ）　　アニーリング法〔
λＬｔＬｗ＆ａｚｅａｋら、　Ｂｉｏｃｈｉｍ、　Ｂｉ
ｏｐｈｙａ　Ａｃｔａ　４４３　＊３１３（１９７６）
）　、（ｇ）　　凍結融解融合（Ｆｒｅｅｚｅ−Ｔｈａ
ｗ　）法（Ｍ、　Ｋａａａｈａｒａら、　Ｊ、　Ｂｉｏ
Ｌ　Ｃｈｅｗ。

２５２．７３８４（１９７７））、（ｈ）Ｗ１０／Ｗエ
マルジョン法（８，Ｍａｔｓｕｍｏｔｏら、　Ｊ、Ｃｏ
１１ｏｉｄ工ｎｔｅｒｆａｃｅ　８ｏ１．６２，１４９
（１９７７）　）　ｅ（１）逆相蒸発法（Ｆ、　５ｚｏ
ｋａら、　Ｂｉｏｃｈｉａ　Ｂｉｏｐｈｙｇ、　Ａｏｔ
ａ６０１　、５５９（１９８０））などの方法を用いて
調製することができる。また、リン脂質を水性媒体中に
分散させることによって得られた液に化合物（Ｉ）を溶
解させた後、凍結乾燥し、得られた凍結乾燥品を水性媒
体中に再分散させることＫよって調製することもできる
。凍結乾燥品の水性媒体中への再分散は凍結乾燥品に水
性媒体を加え、単に振盪することＫよシ達成できる。さ
らに、化合物（Ｉ）、リン脂質および水性媒体の混合物
をホモゲナイザーや乳化機など通常乳化に使用される装
置を用いて分散液を調製することもできる。よりＷＩ細
な分散液を１ｌｌｌ製するため、超音波乳化機を用いて
もよい。

上記水性媒体としてはたとえば水、生理食塩水、緩衝液
（例、リン酸緩衝液、クエン酸緩衝液。

トリスアミノメタン緩衝液）、糖類（例、ブドウ糖、ソ
μビ）−Ａ／）の水溶液ま支社それらの混合溶液が好適
に用いられる。

リン脂質と化合物（Ｉ）との混合割合はモル比で１：１
〜１００：１程度が好ましく、さらには２：１〜３０：
１が好ましい。必要に応じコレステロールを加えること
ができる。コレステロールの使用は脂質小胞体の膜の安
定化に役立ち、リン脂質とコレステロ−〃の混合割合は
２：１〜２：３が好ましい。分散液として使用する際に
は水性媒体をリン脂質および化合物ＣＩ）に対して等置
板上用いる場合が好ましい。

本発明の抗腫瘍剤の粒径は１０ｐｓｇ以下の場合が好ま
しい。

式（Ｉ）中、Ｒ２が一０Ｒ６（Ｒ６は低級ア〃カノイ／
Ｉ／）で表わされる基である化合物線文献〔例、Ｌ　Ｐ
’ｕｊｉｔａら、　Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ　Ｌｅｔｔ
ｅｒｓ　２３゜３５０７（１９８２）＋　Ｆ’、Ｈｅｙ
ｍａｎｓら、　Ｂｉｏａｈｉｍ。

Ｂｉｏｐｈｙａ、　Ａａｔａ　６６６、２３０（１９８
１）　；　ｖｏｎ　Ｇ、Ｂｉｒｔｈら、　Ｈｅ１ｖ、　
ＣｈｉＩＬＡｃｔａ　６５　、１０５９（１９８２）　
ｉ　Ｔ−Ｍｕｒ＆ｍａｔｓｕら、　Ｃｈｅｗ　Ｐｈｙａ
、　Ｌｉｐｉｄｓ　２９　、１２１（１９８１）　ｓ　
Ｊ、　、ｒ、　Ｇｏｄｆｒｏｉｄら、　ＦＩＣＢ３　Ｌ
ｅｔｔｅｒｓ旦６．１６１（１９８０））が多大（１）
中、Ｒ２が一０Ｒ６（Ｒ６は低級アルキ／Ｉ／）で表わ
される基である化合物は文献（Ｄ、　Ｊ、　Ｈａｎａｈ
ａｎら、　ＢｉｏｃｈｅｚＢｉｏｐｈｙａＲｅａＣｏｍ
ｍｕｎ　９９，１８３（１９８１）；）１．　Ｕ。

Ｗｅｌｔｇｉｅｎら、　Ｌｉｅｂｉｇｓ　Ａｎｎ　Ｃｈ
ｅｗ、　７０９　、２０４（１９６７）　Ｈ８，Ｔｓｕ
、ｓｈｉｍａら、　Ｃｈｓｍ、　Ｐｈａｒｚ　ＢｕｌＬ
、ジ！１．３２６０（１９８２））　ｉまた式（１）中
、Ｒ２が−０Ｒ６（Ｒ６は置換力μパモイ／Ｌ／）で表
わされる基である化合−は文献〔特開昭５８−３９６９
０号公報；特願昭５７−７６２２４号公報〕；また式（
Ｉ）中、Ｒ２が一０Ｒ６（Ｒ６杜アμコキクカ〃ポニＡ
／）で表わされる化合物は文献〔特開昭５８−１３５９
２号公報〕に記載された方法あるいはそれらに準する方
法によって合成できる。

式（１）中、Ｒ２カーｕＨｃｏＲ７テ表りサレル基であ
る化合物は、たとえば下記の方法で合成される。

Ａ法 式 ％式％ 〔式中、Ｒ１、Ｒ２は前記と同意義〕の化合物に式：；
Ｌｏａｎ２ａＨ２ｙ　　　　（■）〔式中、Ｙおよび２
はハロゲン（例、塩素、臭素、誉つ素）を示す〕の化合
物を反応させ、次いで加水分解し、式 ％式％ 〔式中、各記号は前記と同意義〕で示される化合物を得
る。

化合物（ＩＶ）はまた式 〔式中、Ｙは前記と同意義〕で表わされる化合物を活性
誘導体とし、これと化合物（ＩＩ）とを自体公知の方法
に従って反応させることによっても製造することができ
る。

〔式中、各記号は前記と同意義〕のアミン化合物を反応
させることによシ、化合物（Ｉ）を得る。

なお、本法において使用される化合物（ＩＩ）はたとえ
ば、下記の方法で容易に合成される。

ｃｍ　２ｏｌＩ 〔式中、ｉｔ”　＊　Ｒ”　ａ前記と同意義。Ｒ８はテ
トしドロピッニル基、）リチμ基などの水酸基の保護基
を示し、Ｒ９８０２はメジμ基、）Ｓ／Ｊｖ基を示す〕
また化合物（Ｉｔ）は文献（Ｊ、　Ｏｒｇ　Ｃｈｅｗ、
　４８　＋１１９７〜１２０１（１９８３））に記載の
下記の方法によっても合成される。

（ＩＦ） 〔式中、Ｒ１，Ｒ２は前記と同意襞〕 Ｂ法 式（ＩＩ）で示される化合物にたとえばオキシ塩化リン
、ビーホスホリルクリリドなどのリン酸化剤を反応させ
た後、加水分解し、式 ０式％ 〔式中、各記号は前記と同意義〕で表わされる化金物を
得た後、化合物（ＶＩ）をリン酸基の活性化剤で反応性
誘導体とし、式 〔式中、Ｒ３，Ｈ４，Ｈ５は前記と同意義。Ａ−は、塩
素、ブロム、ボウ素、トシμイオンなどのアニオンを示
す〕で示される化合物と反応させることＫよシ、化合物
（Ｉ）を得る。

Ｃ法 式 ％式％ 〔式中、各記号は前記と同意義〕の化合物にｕ２ｃｏｏ
ｕ　　　　　　　　　（ＩＸ　）〔式中、Ｒ２は前記と
同意義〕の反応性誘導体を　　・反応させて化合物（１
）を得る。

本法で用いられる（■）はたとえば次の方法で合成され
る。

〔式中、各記号は前記と同意義〕

Ａ法における（Ｍ）、方法における（ＶＩ）のリン酸誘
導体を活性誘導体とする方法は、それ自体公知の方法に
従っておこなうことができる。たとえば五塩化リンと反
応させ、リン酸りｐライドとする方法、また自体公知の
縮合試薬（例、２，４．６−ドリメチμベンゼンス〃ホ
ニμクロツイド、８−キノリンスルホニルクロッイド、
２．４゜６−イツプロピμベンゼンスμホニルイミダゾ
フイド、２，４．６−）リメチルベンゼンスμホ二μテ
トフゾフィド、ジシクロヘキシμカμポジイミドなど）
で活性化する方法があげられる。

以上化合物（Ｉ）の代表的な製造法を記したが、本発明
で使用される化合物（Ｉ）の製造はこれらの方法にのみ
限定されるものではない。

本発明においては化合物（Ｉ）およびリン脂質の＃１か
に、たとえば前述のコＶステロー／Ｉ／用、ジセチμホ
スフェート、ホスファチジン酸、ヌテアリルアミン、ビ
タミンＥあるいは油脂（例、大豆油、ゴマ油、落花生油
）などを適宜添加することもできる。

作用 本発明の抗腫瘍剤においては化合物（Ｉ）の副作用（血
小板活性化、血圧低下、血管透過性亢進、組織障害性）
の顕著な減少と化合物（Ｉ）の主作用（例、マクロファ
ージ活性化作用、１ｉｊＡ壊死作用′）の増強がみられ
、担がん温血動物に対し、安全な抗腫瘍剤として投与す
ることができる。投与方法、投与ルート、投与量は投与
対象・症状に応じて適宜選択できるが、通常化合物（、
Ｉ）として担がん温血動物に対する投与量は０．１〜１
００１１ｆ／に９ｃ体重）程度、１日１〜３回程度、経
口または非経口的に投与される。非経口的投与において
は注射剤などがあげられ、経口投与においては液剤など
があげられる。

実施例 実施例１ ジパルミトイルホスファチジルコリン２９．４１Ｆ（４
０ｐｍｏｌ　）、コレクタａ−ｐｙｘ　５．５１％Ｆ（
４０μｍｏ：Ｌ　）および３−オクタデシ！オキンー２
−メトキシグロピル　２−ＣＭ−メチμモルホリニオ）
エチル　ホスフェート１．１ｑ（２ｐｍｏｌ　）をクロ
ロホルムに加え、正確に５０露１とする。この溶液をチ
ューブ（ナス型コルベン）にとシ、減圧回転下で留去後
、さらに高真空で乾燥する。チューブ内面上には所定量
の薬物を含有する脂質フィルムが付着する。次ぎに、５
０〜６０℃のリン酸緩衝液（ｐＨ７，３）８ｓｒｔを加
え、すばや（ｖｏｌｔｅｘｍｉｘｅｒ　　で攪拌してリ
ポソーム（懸濁）液を得る。

このとき、ジパルミトイルホスファチジルコリンで５ｍ
Ｍ、薬物で２５０　ｐ、Ｍの濃度である。

実施例２ １−０−オクタデシｆｉ／−２−０−（１１、Ｎ−ジメ
チル力ルパモイｙ）グリセロ−３−ホスホコリン１．２
Ｗ（２μｍｏｌ　）および１−０−オクタデシ／ｌ／−
２−０−（Ｎ、Ｎ−ジメチ）ｖカルバモイルｖ）グリセ
ロ−３−ホヌホーＮ、Ｎ−ジメチルエタノールアミン１
．１１９　（２７ｚｍｏｌ　）を用い、実施例１と同様
にして各々対応するリポソーム液を得ａ。

実施例３ ジパルミトイルホスファチジルコリン３０．２Ｗｇ、コ
レステロ−／Ｌ／１５．５１１１および３−オクタデシ
ルオキシ−２−（Ｎ、Ｍ−ジメチルカルバモイルオキＶ
）プロピｔｖ２−（ピリジニオ）エチルホスフェート３
ダにクロロホルムを加え正確に３０＊ｌとする。

この溶液の一定量を正確′にナス型コルベンにとり、減
圧下クロロホルムを留去し、さらに高真空で乾燥する。

各コルベン内面上には所定量の薬物を含有する脂質フィ
ルムが付着する。

各々について０．４５μメンプフンフイルターで沖過し
たリン酸緩衝生理食塩水（ＰＨ７，３，５５℃）１０耐
を加え、５５℃にてｖｏｌｔｅｘ　ｍ１ｘｅｒで攪拌し
、さらに超音波ホモジナイザーで処理することによシ、
粒径０．１〜１０μｍのリポソーム液を得る。

実施例４ 卵黄レレチン２５０１ｙに３−オクタデシＡ／−２−ア
セチルオキシプロピ／Ｉ／２−ピリジニオエチル　ホス
フェート２０ｑを加え、０．４５μメンズヲンフイルタ
ーでｆＩ過した１／１５Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ７）およ
び０．９％食塩水の１＝１混液２５ｄを加えた後、６０
℃の温度で超音波乳化機で処理し、分散液を調製する。

これをそのまま使用してもよいし、一旦、凍結乾燥機に
かけ、バイアμ凍乾した後、用時蒸留水２５−を加え捩
盪して分散後、注射剤として使用してもよい。

実施例５ ジパルミトイルホスファチジルコリン２９．４Ｗ、コレ
ステロ−／ｌ／１５．５１Ｆ、３−オクタデシルオキシ
−２−アセチルアミノプロピ／Ｌ／２−トリメチμアン
モニオエチル　ホスフェ−）１．６１１ｉ！１＝クロロ
ホルムを加え正確に５０ｗ１とする。この溶液１５ｗ１
をナス型コルベンにとシ、減圧回転下で溶媒を留去し、
さらに高真空で乾燥する。次に５０−６０℃のリン酸緩
衝用液（ＰＨ７，３）８１／を加え、すばや（ｖｏｌｔ
ｅｘ　ｍ１ｘｅｒで攪拌してリポソーム液を得る（薬物
濃度　６０μＶｍｌ　）。

実施例６ ジパルミトイルホスファチジルコリン３０．２１１ｇ、
コレステ０−Ａ／１５．５１１Ｆ、　３−；ｔりｌｌデ
シμオキシ−２−アセトキシプロピｖ２−（ピリジニオ
）エチμ　ホスフェ−１３０哩をクロロホルム５０ｓ／
に溶解する。これをナス型コルベンにとシ、減圧回転下
に溶媒留去し、ついで高真空で乾燥する。コルペン内壁
には薬物含有脂質フィルムが付着する。これを５０−６
０’のリン酸緩衝液（ｐＨ７，３）８１１１１４を加え
、すばや（ｖｏｌｔａｘ　ｍ１ｘｅｒで攪拌してリポソ
ーム液を得る（薬物濃度−１■／ｄ）。

実施例７ ジパルミトイルホスファチジルコリン１８Ｉｖ。

コレステロ−／Ｉ／９ｑ、３−オクタデシルオキシ−同
様の方法でリポソーム液を調製する（薬物濃度０．６岬
／胛ｌ）。

実施例８ ジパルミトイルホスファチジルコリン２９．４１％Ｆ、
コレステロ−１ｖ１５．５Ｗ、３−オクタデシルオキシ
−２−アセチルアミノプロピμ　２−（Ｈ−メチルピロ
リジニオ）エチμ　ホスフェート１ダＣｚクロロホルム
を加え５０１ｄとし、溶解させる。

これをナス型コルベンにとシ減圧回転下で留去後、さら
に高真空で乾燥する。次いで５０−６０℃のリン酸緩衝
液（ｐＨ７，３）２５１１ｄを加え、すばや（ｖｏｌｔ
ｅｘ　ｍ１ｘｅｒ’で攪拌してリポソーム液を得る。

傑物濃度　４０μｆ／ｄ） 実施例９ 卵黄レシチン２５０１１ｇに３−オクタデシルオキシ−
２−アセチルアミノプロピＡ／２（１−ピリジニオ）エ
チル　ホスフェート２０ｇＦを加、ｔ、０．４５μメン
ズレンフイμターで′濾過した１／１５Ｍ９ン酸緩衝液
（ＰＨ７，３）および０．９％食塩水の１＝１混液２５
＊／を加える。これを温度６０℃に保ぢ゛ながら超音波
乳化機で処理し、分散液を調製する。これをその″！１
−使用してもよいし、一旦、凍結乾燥機にかけ、バイア
／Ｌ’凍乾品とした後、用時、蒸留水２５ｙｉｔを加え
、振盪して分散後、注射剤として使用する。

発明の効果 試験例１　ザルコーマ１８０担がんマウスに対する作用 ３−オクタデシルオキシ−２−メトキシプロピル　２−
（Ｎ−メチルピロリジニオ）エチル−ホスフェート（３
μｇ／マウス）を生理食塩水溶解液またはリポソーム液
として、工ＣＲマウス（雄。

７〜９週令、１群５匹）に腹腔内投与した。４日後、各
マウスに８１８０細胞ｅ　１　ｘ　１０５個／マウスを
腹腔内移植し、各群マウスの生存日数を測定した。対照
群（薬物無投与）の平均生存日数は１３、７　Ｆｌ　、
薬物・生食水溶液・投与群で２１．６日、薬物・リポソ
ーム液投与群で〉４５日を示した。

また、薬物３０μ９７”ｒウスの条件下におけるマウス
の平均生存日数は薬物・生食水溶液・投与群で１３．０
日、薬物・リポソーム液・投与群で２４．５日であった
。

試験例２　ザルコーマ１８０担がんマウスに対する作用 ＩＣＲマウス（雄、８週令、１群５匹）を３群にわけ、
各群マウスに８１８０１１１１胞、ｌＸ１０６ｃｅｌｌ
／マウスを皮下移植し、７日日よシ第１群マウスに３−
オクタデシルオキシ−２−アセチルアミノプロピ／Ｌ’
　　２−）リメチ〃アンモニオエチルホスフェートの生
理食塩水溶液（薬物投与量−３μり／マウス／ｄａｙ、
液量αｏ５譚／）を、第２群マウスに同リポソーム液（
実施例腎晶載された液。

薬物投与量−３μｇ／マウス／ｄａｙ、液量０．０５　
ｗｌ　）を、各々１日１回、１０日間９尾静脈よ多連続
投与した。第３群には対照として生理食塩水（０，０５
＊ｔ）を同条件下に投与した。２４日目各群マウスの平
均腫瘍重量を測定した結果を表１に示す。

表　　　１ 対　　照　　　１．７９　　　　　　−第１群　０．７
１　　６０．３ 第２群　０．３８　　７８．８ 試験例３　ザルコーマ１８０担がんマウスに対する作用 試験例２と同条件でｒ＆下移植した８１８０担がんマウ
スを３群（１群５１！！；）にわけ、移植７日日から４
日ＩＣ１度、計４回薬物生理食塩水溶液（薬物投与量−
５０μｆ／マウス７１回）を第１群マウスの、薬物リポ
ソーム液（実施例記載の方法で調製、薬物投与量−５０
μｆ／マウヌ７１回）を第２群マウスの、生理食塩水を
第３群マウスの腫瘍組織内に投与した後、２４日目に各
群マウスの平均重量を測定し、腫瘍増殖阻止率を算出し
た。薬物としては３−オクタデシルオキシ−２−アセチ
ρアミノデロヒＡ／２−トリメチルアン毫ニオエｆｌＶ
ホスフェートを使用した。結果を表２に示す。

表　　２ 対　　照　　１．７９　　　　　　− 第１群　０．８１　　５４．８ 第２群０．４１　７７．１ 試験例４　ザルコーマ１８０担がんマウスに対する作用 ３−オクタデシルオキＶ　２−アセチルアミノプロピ／
ｌ’　　２−（１−ピリジニオ）エチル　ホスフェート
（３０ｆｇ　）を含む生理食塩水溶液またはリポソーム
液（実施例７に記載）をＩＣＲマウス（雄、８週令、１
群５匹）に腹腔内投与した（３０ｆｇ／マウス、０．０
５ｍ？）。４日後、各マウスに８１８０細胞＊　Ｉ　Ｘ
　１０５ｏｅｌｌ／ｖｔ７スを腹腔内移植し、各群マウ
スの平均生存日数を測定した。

対照群の平均生存日数は１３．３Ｅ１．薬物水溶液投与
群で１９．８日、薬物リポソーム液投与群で２＆５日を
示した。

試験例５　ザルコーマ１８０担がんマウスに対する作用 工ＣＲマウス（雄、７〜９週令、１群５匹）を３群にわ
け、各群ともザルコーマ１８０細胞、ＩＸ　１０６ｃｅ
ｌＶマクスに皮下移植し、７日日よシ第１群マｆ１７．
に１−ｏ−オ？ｌ’ｆ’Ｖｆｉｙ−２−０−（Ｎ、Ｎ−
ジメチルカルバモイ１ｖ）グリセロ−３−ホスホコリン
の生理食塩水溶解液（０，０５ｇＪ。

薬物投与量０．５μｇ／マウス＊）を、第２群マウスに
同リポソーム液（０，０５＊ｔ、薬物投与量１．５μｇ
／マウス）をそれぞれ尾静脈注射によって、１日１回、
１０日間連続投与した。第３群（対照群）には生理食塩
水（’０．０５＊ｔ）を同条件下で投与した。各群のマ
ウスの腫瘍増殖を測定した。対照群の癌平均重量は２．
２８ｆであシ、これに対する第１群マウスの平均重量は
１１３ｆ、第２群マウスのそれは０．３５９であフた。

幻なお、薬物投与ｔｏ５μｇ／マウスは本条件下におけ
ゐ最大耐量に近い投与量である。

試験例６　ザルコーマ１８０担がんマウスに対する作用 ３−オクタデシルオキシ−２−アセチルアミノゾロ？’
／ｌ／　　２−（ｍ−メチルピロリジニオ）エチル　ホ
スフェートの薬物２μすを含むリン酸緩衝用液またはリ
ポソーム液（実施例８）茶工ＣＲマウス（雄、８週令、
１群５匹）に腹腔内投与した（２μＩＦ１０．０５阿ｔ
／マウス）。４日後、各マウスにｓｔ８０ｍ胞＋　Ｉ　
Ｘ　１０５ｃｅｌｌ／−ｙウス　を腹腔内移植し、各群
マウスの平均生存日数を測定した。

対照群の平均生存日数は１３．８日、ｌ物水溶液投与群
で２１．２日、薬物リポソーム液投与群で３０．１日を
示した。

試験例７　　ＭＭ４６担がんマウスに対する作用Ｃ３Ｈ
／Ｈｅマウス（雄、８週令、１群５匹）を３群にわけ、
１−０７オクタデシ／Ｌ／−２−０−（１’Ｔ、Ｍ−ジ
メチルカルバモイ／Ｌ／）グリセロ−３−ホヌホーＨ，
Ｎ−ジメチルエタノールアミンの水溶液（０，０５１１
１１、薬物投与量ｌＯμｇ／マウス）を第１群マウスに
、同リポソーム液（０，０５ｍｌ　。

１０μｆ／マウス）を第２群マウスに、生理食塩水（０
，０５ｍ）をＷ！！、３群マウスに１日１回、連続４日
、腹腔内投与した。２日後、ｙｙ４６１１１胞、ｌＸ１
０５ｏｓｌｌ　　を腹腔内移植し、さらに２日後から１
日１回連続４日間、上記と同じ条件で薬物の腹腔内投与
を行なった。対照群（第３群）の平均生存日数は１８．
８日であシ、これに対し、第１群マウスおよび第２群マ
ウスの平均生存日数は２５．７日および３９．５日であ
った。

試験例８　マクロファージ活性化作用 モルモット（Ｈａｒｔｌｅｙ、雌）に１０ｇ／の流動パ
フフィンを腹腔内投与し、４日後、腹腔滲出細胞を採取
した。その細胞５　Ｘ　１０５ケずつを９６穴プレート
に加え、２時間静置後、生理食塩水による洗滌で非付着
細胞を除去した。予め定められた量の薬物（生理食塩液
またはりボゾーム液）を含むＥａｇｌｅ　Ｍｉｎｉｍｕ
ｍ　Ｅｓ５ｅｎｔｉａｌ培地〔１５％非慟化モルモット
血清（５６℃、３０分間処理で得られる）含有〕をプレ
ート上の各付着細胞に加え、ラムについて液成分を取シ
、残存グルコース量を定量し、マクロファージの活性化
率を次式に従って算出した。

３−オクタデシルオキシ−２−（Ｎ、Ｎ−ジメチ〃カル
パモイロキシ）プロピｌ　　２−（Ｎ−メチルピロリジ
ニオ）エチル　ホスフェートおよび３−オクタデシルオ
キシ−２−アセチμアミノプロピ／Ｌ’　　２−（１−
ピリジニオ）エチル　ホスフェートのマクロファージ活
性化の大略のＥＤ５Ｑ値は薬物水溶液の投与で、それぞ
れ６Ｘ１０　　Ｍおよび４Ｘ１０’Ｍ　　を示し、薬物
リポソーム液の投与で９　Ｘ　１０−１０Ｍおよび４　
Ｘ　１０−９Ｍの値を示し、リポソームにすることによ
って約１０倍の活性化増強効果を示した。

試験例９　マクロファージ活性化作用 ３−オクタデＶ／Ｌ／オキＶ−２−メトキシプロピ／ｌ
／　　２−Ｃｙ−メチルピロリジニオ、）エチル　ホス
フェートについて試験例８と同様の方法でマクロファー
ジ活性化作用を測定した。結果を表５に示す。

表５　薬物リポソーム液のマクロファージ活性化増強作
用１０−９　　　　０．１４　　　　０．８８１０”−
８０，１００，８４ １０−７０，１００，９０ １０−６０，３５０，９８ 試験例１０　血小板活性化作用 モルモットから採血し、調製したＰＲＰ　（Ｐｌａｔｅ
ｌｅｔ　ｒｉｃｈ　ｐｌａｓｍａ　）　１　ｗｌに（１
４ｃ）−セロトニン（比放射活性、　５５　Ｃ１／鴛ｍ
ｏｌ　、　　使用量０．５　ｐｃｉ）’Ｉｔ加ｔ２２２
０分イ：ｙ＊ユペ−）した。これを３５００ｒｐｍで１
０分、遠心し、析出物を集め、Ｔｒｉ８−Ｔｙｒｏｄｅ
液（Ｂｏｖｉｎｅ　ｓｅｒｕｍａｌｂｕｍｉｎ　　Ｚ　
５１８１／ｄ　；　ＣａＣｌ２．２　ｍＭ　；　Ｍｇｌ
：！１２゜１ｍＭ含有）に懸濁し、細胞濃度を５　Ｘ　
１０８ｃｅｌｌ／ｓ／に調製した。この細胞懸濁液（１
００μＪ）にあらかじめ定められた濃度に調製した薬物
水溶液またはリポソーム液（１０μｊ　）を加え室温で
２分インキュベートした。次に、１．５Ｍホ！ムアルデ
ヒド１０μＩを加え、細胞を固定化した後、１２０００
９で１分、超遠心し、得られた上清液についてシンチレ
ーション・カウンターで放射活性を開襟キロトニン放出
量を測定した。なお、セロトニン１００％放出の標準と
して上記薬物の代シに１０％Ｔｒｉｔｏｎ　Ｘ　１００
液（１０μＪ　）を用いた。３−オクタデシルオキシ−
２−（ＩＪ、Ｎ−ジメチ〃カルパモイロキシ）プロピμ
　ｚ−ｉ−メチルピロリジニオ）エチル　ホスフェート
および３−オクタデシルオキＦ　＋　２−アセチルアミ
ノプロピμ　２−（１−ピリジニオ）エチル　ホスフェ
ートの血小板活性化能の大略のＥＤ５Ｑ値は水溶液の投
与で、それぞれ６×ｌＯＭ、４ｘ１０−８Ｍの値を示し
、リポソーム液の投与で約１０”−６Ｍ、約５Ｘ１０’
Ｍの値を示した。リポソームにすることによシ血小板活
性化能（本発明においては副作用に対応する）は１１５
０〜１／１００に低下したことを示し、リポソーム液の
マウスに対する驚異的な毒性低下の一端を説明するもの
である。

試験例１１　　血圧降下実験 ベントパルビターμ麻酔下の雄性ＳＤフラット３００〜
４５０９）の左股動脈内に血圧測定の丸めのチューブを
、一方右股静脈内に薬物注入のためのチューブを挿入し
たう血圧は圧トランスジューサーを介してポリグラフに
記録した。試験例５で使用した１−０−オフタデＶｌｖ
−２−０−（Ｎ、Ｎ−−シメチル力ルパモイＡ／）グリ
セロ−３−ホスホコリンの水溶液ならびにリポソーム液
（実施例２の方法で調製）投与による血圧変化を測定し
た。薬物１μｔ／ｋｌ投与では前者で５７　ｍｍ１１ｇ
　、後者で２４祁−の血圧下降、薬物３μＩＩ／ｋｇ投
与では前者で６５ｍｍＨｇｔ後者で４０　＋ｎｍＨｇの
血圧下降を示し、リポソームにすることによシ、血圧低
下作用試験例１２　マウスに対する毒性 ３−オクタデシルオキシ−２−アセチルアミノプロヒ／
Ｌ／２−トリメチμア゛ンモニオエチル　ホ製）をマウ
ス腹腔内に注射し、２４時間後の観察結果を次に示す。

３０　　　生存 １００　　　生存　　　生存 ３００　　　死亡　　　生存 １０００　　　　　　　　生存 ネリン酸緩衝液に溶解した液 試験例１３　マウスに対する毒性 １−〇−オクタデシＡ／−２−０−（Ｎ、Ｎ−ジメチル
力μパモイ／Ｌ／）グリセロ−３−ホスホコリン（リポ
ソーム液は実施例２の方法で調製）を用い、試験例７と
同様な方法によシ、マウスに対する毒性を調べた。

結果を表４に示す。

表４

Claims (2)

【特許請求の範囲】
1. （１）式 ▲数式、化学式、表等があります▼ 〔式中、Ｒ＾１はアルキル基を、Ｒ＾２は式−ＯＲ＾６ （式中、Ｒ＾６は低級アルキル基、低級アルカノイル基
   、低級アルコキシカルボニル基または低級アルキルで置
   換されていてもよいカルバモイル基を示す）で表わされ
   る基または式 −ＮＨＣＯＲ＾７ （式中、Ｒ＾７は水素、低級アルキル基または低級アル
   コキシ基を示す）で表わされる基を示し、Ｒ＾３、Ｒ＾
   ４およびＲ＾５はそれぞれ水素または低級アルキル基を
   示すか、▲数式、化学式、表等があります▼として含窒
   素５員または６員複素環基を示し、Ｒ＾６が低級アルキ
   ル基または低級アルカノイル基である場合、Ｒ＾３、Ｆ
   ＾４およびＲ＾５は▲数式、化学式、表等があります▼
   として含窒素５員または６員複素環基を示す〕で表わさ
   れる化合物またはその塩と
2. （２）リン脂質 を含有してなる抗腫瘍剤。