JPS61225190A - リン脂質複合体とその製造方法 - Google Patents
リン脂質複合体とその製造方法Info
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- JPS61225190A JPS61225190A JP29337585A JP29337585A JPS61225190A JP S61225190 A JPS61225190 A JP S61225190A JP 29337585 A JP29337585 A JP 29337585A JP 29337585 A JP29337585 A JP 29337585A JP S61225190 A JPS61225190 A JP S61225190A
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- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は均−系リポソーム免疫検定に有用な新規免疫反
応性リン脂質複合体に関する。さらに詳しくは、本発明
はリポソーム免疫検定に有用なジブキシンおよびジーｉ
＃午シン類縁リン脂質複合体の迅速かつ効率的な製造方
法を提供するものである。
応性リン脂質複合体に関する。さらに詳しくは、本発明
はリポソーム免疫検定に有用なジブキシンおよびジーｉ
＃午シン類縁リン脂質複合体の迅速かつ効率的な製造方
法を提供するものである。
倉規な螺嵌の一つにおいては、末端の瑚原子団、例えば
ジゴキシンのジギトキソースをカルボキシメチルオキシ
ム官能団を介してリン脂質に結合する合成手法が提供さ
れる。かかる手法は公刊の方法に比し、より梢６ｇ易な
生成物をはるかに良好な収率で与えるものである。さら
りここの手法は、循環を介する納金が極めて好ましい類
嫌すン脂質狽合体、すなわちジｆ）キシン、ぞトキシン
、ウワバイン、ジゼトニン、およびその池の類襟強心性
配！ｌｉ体に適用することができる。これらの強心性配
瑚体に加えて他の配珈体例えばサポニン鮮からのもの（
しかしこれに限定されなＶｈ）もまた本発明の範囲内に
ある。
ジゴキシンのジギトキソースをカルボキシメチルオキシ
ム官能団を介してリン脂質に結合する合成手法が提供さ
れる。かかる手法は公刊の方法に比し、より梢６ｇ易な
生成物をはるかに良好な収率で与えるものである。さら
りここの手法は、循環を介する納金が極めて好ましい類
嫌すン脂質狽合体、すなわちジｆ）キシン、ぞトキシン
、ウワバイン、ジゼトニン、およびその池の類襟強心性
配！ｌｉ体に適用することができる。これらの強心性配
瑚体に加えて他の配珈体例えばサポニン鮮からのもの（
しかしこれに限定されなＶｈ）もまた本発明の範囲内に
ある。
さらに本発明の方法は、変性によって特異的抗体による
免疫認識に重曹な鍵ぎｒｔヒ団から趨く峨れてオキツム
誘導体全形成することのできるステロイＦｘ＋ＭＪえば
エストｏｐンおよびテストステロンからａ専されるリン
脂質複合体に適用することかできる。ここに開示する新
規リン脂質複合体は、高感度リポソーム免疫検定、例え
ばジゴキシンに対するものに有用である。
免疫認識に重曹な鍵ぎｒｔヒ団から趨く峨れてオキツム
誘導体全形成することのできるステロイＦｘ＋ＭＪえば
エストｏｐンおよびテストステロンからａ専されるリン
脂質複合体に適用することかできる。ここに開示する新
規リン脂質複合体は、高感度リポソーム免疫検定、例え
ばジゴキシンに対するものに有用である。
ジゴキシンは効力の大傘い強心性ｍ体である。
中毒筺のジゴキシンは好ましくな＾、遺死の恐のある直
ス生喝学的効果金与える［ Ｈｏｆｆｍａｎら、ｊ Ｔ
ｈｅ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ Ｂａ５ｉｓ
ｏｆ ＴｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓＪＧｉｌｍａｎ 、第
６版、第７２９８％ ニューヨーク（１９８０））。従
って、強心性配＋１１本を投与される患者に対する適正
な投与スケジュール決定の助とするため、強心性配一体
に対する（１々の免疫検定法が現在臨床的にひろく使用
されて＾る。ジブキシンは低分子叶で、それ自体でｆ７
１．原性を待つには小さ゛過ぎるので、免疫検定に使用
するためのメ験勧吻内にジゴキシン特異性抗体を生じさ
せるｆｃめには、ジントキシンをハプテンとして共有結
合的に抗ＪｆＡＢ１体、例えばヒト血清アルブミン（Ｈ
８Ａ）、ウシ血清アルブミン（ＢＡＡ ） ｆ：たはキ
ーホールリンペット（ｋｅｙｈｏｌｅ ｌｉｍｐｅｔ；
）のヘモシアニン＜ ＫＬＨ）と複合させることが必
蟹であった。分析に使用する先便反応性ジゴキシン誘導
体の代置的製造法は）３ｕｔｌｅｒらの方法（Ｐｒｏｃ
、 Ｎａ、ｔｌ、 Ａｃａｄ。
ス生喝学的効果金与える［ Ｈｏｆｆｍａｎら、ｊ Ｔ
ｈｅ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ Ｂａ５ｉｓ
ｏｆ ＴｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓＪＧｉｌｍａｎ 、第
６版、第７２９８％ ニューヨーク（１９８０））。従
って、強心性配＋１１本を投与される患者に対する適正
な投与スケジュール決定の助とするため、強心性配一体
に対する（１々の免疫検定法が現在臨床的にひろく使用
されて＾る。ジブキシンは低分子叶で、それ自体でｆ７
１．原性を待つには小さ゛過ぎるので、免疫検定に使用
するためのメ験勧吻内にジゴキシン特異性抗体を生じさ
せるｆｃめには、ジントキシンをハプテンとして共有結
合的に抗ＪｆＡＢ１体、例えばヒト血清アルブミン（Ｈ
８Ａ）、ウシ血清アルブミン（ＢＡＡ ） ｆ：たはキ
ーホールリンペット（ｋｅｙｈｏｌｅ ｌｉｍｐｅｔ；
）のヘモシアニン＜ ＫＬＨ）と複合させることが必
蟹であった。分析に使用する先便反応性ジゴキシン誘導
体の代置的製造法は）３ｕｔｌｅｒらの方法（Ｐｒｏｃ
、 Ｎａ、ｔｌ、 Ａｃａｄ。
８ｃ１．、 Ｕ、８．Ａ、、１９６７．５７、第７１−
７８貞、およびｊ Ｍｅｔｈｏｄ ｉｎ Ｅｎｚｙｍｏ
ｌｏｇｙ Ｊ、ＡｃａｄｅｍｉｃＰｒｅｓｓ、 ８４第
５５８−５７７貞（１９８２））であり、これはｇｒｌ
ａｎｇｓｒおよびＢｅ１ｎ６ｒの研究［Ｐｒｏｃ。
７８貞、およびｊ Ｍｅｔｈｏｄ ｉｎ Ｅｎｚｙｍｏ
ｌｏｇｙ Ｊ、ＡｃａｄｅｍｉｃＰｒｅｓｓ、 ８４第
５５８−５７７貞（１９８２））であり、これはｇｒｌ
ａｎｇｓｒおよびＢｅ１ｎ６ｒの研究［Ｐｒｏｃ。
Ｎａｔｌ、 Ａｃａｄ、 Ｓｃｉ、、５２．６８Ｃ１９
６４）］に居づｈて＾る。
６４）］に居づｈて＾る。
この反応ぼ末端瑚ＥＪＪ （ゾヂトキソースまたはうＡ
／−ス）の過ヨウ素酸塩開裂、次にタンパク質担体、酵
累または類峰生物学的分子との反応、そして最後に水素
化ナトリウムによる還元的アミノ化という一連の反応を
富むものである。上記反応系列ｋＷ用して、ジー？ヤシ
ンーＨ８Ａ （Ｂｕｔｌｅｒら、上山）、ジゴキシン−
ＢＳＡ Ｉ： ５ｒｎｉｔｈら、ＢｉＯｃｈｓｎｉｓｔ
ｒｙ９ 、４ ６６１ 〜３３７１（１９７［、］）
］ 、 ）’ ＩＪ ＋ンーウワパイン［：
Ｆ’ｒｅｙｔａｇら、Ｊ−ｏｆ １１１ｍ１ｌｎＯ］Ｏ
ｇｌＣａ１Ｍｅｔｈｏｄｓ、 ７ ｆＪ 、 ｒ１’、
１６６〜１４０ 鑓（１９Ｂ ４月およびゾイキシン
ーゾベンゾー１８−クラウン−６（Ｋｅａｔｉｎｃ＝ら
、Ａｎａｌ、 Ｃｈｅｍ、 ５６、第８ ｆｌ １〜と
３０６貞（１９Ｒ４））伏合不が製１にされた。
／−ス）の過ヨウ素酸塩開裂、次にタンパク質担体、酵
累または類峰生物学的分子との反応、そして最後に水素
化ナトリウムによる還元的アミノ化という一連の反応を
富むものである。上記反応系列ｋＷ用して、ジー？ヤシ
ンーＨ８Ａ （Ｂｕｔｌｅｒら、上山）、ジゴキシン−
ＢＳＡ Ｉ： ５ｒｎｉｔｈら、ＢｉＯｃｈｓｎｉｓｔ
ｒｙ９ 、４ ６６１ 〜３３７１（１９７［、］）
］ 、 ）’ ＩＪ ＋ンーウワパイン［：
Ｆ’ｒｅｙｔａｇら、Ｊ−ｏｆ １１１ｍ１ｌｎＯ］Ｏ
ｇｌＣａ１Ｍｅｔｈｏｄｓ、 ７ ｆＪ 、 ｒ１’、
１６６〜１４０ 鑓（１９Ｂ ４月およびゾイキシン
ーゾベンゾー１８−クラウン−６（Ｋｅａｔｉｎｃ＝ら
、Ａｎａｌ、 Ｃｈｅｍ、 ５６、第８ ｆｌ １〜と
３０６貞（１９Ｒ４））伏合不が製１にされた。
べ国待杆第４．１１５．５３９最明、１州ｉには十ロジ
ンメチルエステル金ペースとするインシアネートを１史
用す６ソゴキシンのｄｊ盲方法か開示されている。木！
３ｐ４峙、ｆＦ第４．２９７，２７３最明１咄査および
４．５６６．７５９最明、浦畜には化学ルミネセンス注
フタルアルデヒド保識ジｆキシＣニンの製法が開小され
ている。米国特許第４，３４２．８２６最明、四曹には
非符性ソゴキシンーホスファチソルエタノールアミン収
合体ｋＡｍするたり〕の上田Ｂｏｔｔｌｅｒらの方法が
述べられてのるが、このＡ個物は非線に謀雑な（毘合９
勿としてイ梯られる。
ンメチルエステル金ペースとするインシアネートを１史
用す６ソゴキシンのｄｊ盲方法か開示されている。木！
３ｐ４峙、ｆＦ第４．２９７，２７３最明１咄査および
４．５６６．７５９最明、浦畜には化学ルミネセンス注
フタルアルデヒド保識ジｆキシＣニンの製法が開小され
ている。米国特許第４，３４２．８２６最明、四曹には
非符性ソゴキシンーホスファチソルエタノールアミン収
合体ｋＡｍするたり〕の上田Ｂｏｔｔｌｅｒらの方法が
述べられてのるが、このＡ個物は非線に謀雑な（毘合９
勿としてイ梯られる。
従って本発明は高感度リホソーム叱疫瑛定に有用ナゾゴ
キシンおよびシフ″午シン類鍬リン脂質複合体および曲
の瞑付体に対する強いり望を満たすものである。
キシンおよびシフ″午シン類鍬リン脂質複合体および曲
の瞑付体に対する強いり望を満たすものである。
ここに開示する。Ｉｒ現な合成法はゾアルゼヒド中Ｊｉ
１体・り１］えはジイギシンゾアルデヒｒ會カル１でキ
シメチルオ牛シム官り目団を介して結合するものであり
１，１１＃夷が各易な生成物が１ぢ収ギで得られる。
１体・り１］えはジイギシンゾアルデヒｒ會カル１でキ
シメチルオ牛シム官り目団を介して結合するものであり
１，１１＃夷が各易な生成物が１ぢ収ギで得られる。
本発明Ｖこよれは、式
（式中、Ｒは鷹化的開裂金受ける１、２−ジヒｒａキシ
基′ｔ−含廟する竹機化合吻から誘導された部分であり
、ＸおよびＸ′は１，２−ジヒドロキシ基の順化的開裂
によって生ずる。大木原子と８部分とｔ−４精する測鎖
部分であり、そしてＰおよびＰ′はＩＪ７１１Ｗ賞エタ
ノールアミン部分である）で表わされるリン脂質榎合体
化合物か開示され、請求される。
基′ｔ−含廟する竹機化合吻から誘導された部分であり
、ＸおよびＸ′は１，２−ジヒドロキシ基の順化的開裂
によって生ずる。大木原子と８部分とｔ−４精する測鎖
部分であり、そしてＰおよびＰ′はＩＪ７１１Ｗ賞エタ
ノールアミン部分である）で表わされるリン脂質榎合体
化合物か開示され、請求される。
本発明の噛祿の一つＶＣおいては、Ｒｉ’を強心性配鏑
体例えばジゴキシン、クギトキシン、ゼトキシン、ウワ
バイン、ゾ・ビトニン→から誘導される。
体例えばジゴキシン、クギトキシン、ゼトキシン、ウワ
バイン、ゾ・ビトニン→から誘導される。
式（１）で表わされる化合物に対しては Ｒ７ぼ好まし
くＨであり、そしてＰはリン１１１質部分、好ましくは
ジパルミトイルホスファチジルエタノールアミンから誘
導されるリンＢＶＩ質部分である。式（１１）で表わさ
れる化合物に対しては、ＰおよびＰ′はリン脂Ｉｉ！部
分、好ｔしくぼゾパルミトイルホスホチジルエタノール
アミンから誘導されるものである。
くＨであり、そしてＰはリン１１１質部分、好ましくは
ジパルミトイルホスファチジルエタノールアミンから誘
導されるリンＢＶＩ質部分である。式（１１）で表わさ
れる化合物に対しては、ＰおよびＰ′はリン脂Ｉｉ！部
分、好ｔしくぼゾパルミトイルホスホチジルエタノール
アミンから誘導されるものである。
他の適当なリン脂Ｘ部分もまたリポソームに変性した性
質を導入するためにはでましいつこれらは例えば天然の
ホスファチジルエタノ−ルアずン、シミリスチルホスフ
ァチジルエタノールアミン、ホスファチゾルセリン号で
ある。
質を導入するためにはでましいつこれらは例えば天然の
ホスファチジルエタノ−ルアずン、シミリスチルホスフ
ァチジルエタノールアミン、ホスファチゾルセリン号で
ある。
本発明の別の總様においては１式
（式中、Ｗはカルボニル法令くとも、１つ倉もつステロ
イドから誘導され、ここで前記カルボニル基は前記オキ
シイミノ部分＝Ｎ−０−を形成するものとし、そしてＰ
Ｉ−ｊリン脂質エタノールアミン部分である） で表わされる化合物を包含する。
イドから誘導され、ここで前記カルボニル基は前記オキ
シイミノ部分＝Ｎ−０−を形成するものとし、そしてＰ
Ｉ−ｊリン脂質エタノールアミン部分である） で表わされる化合物を包含する。
好ましくはＰはジパルミトイルホスファチジルエタノー
ルアミン（ＤＰＰＥ ）から−導され、ステロイドはテ
ストステロンおよび６−ケドーエストラジオールを包含
する。
ルアミン（ＤＰＰＥ ）から−導され、ステロイドはテ
ストステロンおよび６−ケドーエストラジオールを包含
する。
別の標識においては、ステロイドは１つまたはそれ以上
のカルボニル基’ｅｌｌｆＬ、このうちの少くとも１つ
はオキシイミノ部分を形成して前記リン脂質部分と結合
する。
のカルボニル基’ｅｌｌｆＬ、このうちの少くとも１つ
はオキシイミノ部分を形成して前記リン脂質部分と結合
する。
別の標識においては、ステロイドは酸化的開裂ｒ受ける
１、２−ジヒドロキシ基をキ有し、そしてオキシイミノ
部分は酸化的開裂から生ずるｒＲ索原子とおよびリン脂
質エタノールアミン部分ト結合する。
１、２−ジヒドロキシ基をキ有し、そしてオキシイミノ
部分は酸化的開裂から生ずるｒＲ索原子とおよびリン脂
質エタノールアミン部分ト結合する。
一般に、本発明のＩｆｒ規リン脂質複合体は、オ牟シム
誘導体に変性および（または）変儀できる宮電基をもつ
化合物からＰＪｇ導されるう前記式〒もつ化合ＷのＩｆ
ｒ瓜′疫１青方ｔともまた本発明の１蛇四内にｈるっ ここに開示される化合′吻ｅ Ｉ’Ｊ！用する米１′持
許第４．３４２，８２６縁間１１イｉｌ＃および第４．
２３５．７９２号明細書中に記載のリホソーマル免疫検
定もまた不°老明の（ｉ回内にあるっ 本発明のｉＩｒ硯リンす實脂質体を・共溶するための反
応系夕！Ｉ ？ｅ％ ジゴギシンを圀として次の図Ａに
示す。
誘導体に変性および（または）変儀できる宮電基をもつ
化合物からＰＪｇ導されるう前記式〒もつ化合ＷのＩｆ
ｒ瓜′疫１青方ｔともまた本発明の１蛇四内にｈるっ ここに開示される化合′吻ｅ Ｉ’Ｊ！用する米１′持
許第４．３４２，８２６縁間１１イｉｌ＃および第４．
２３５．７９２号明細書中に記載のリホソーマル免疫検
定もまた不°老明の（ｉ回内にあるっ 本発明のｉＩｒ硯リンす實脂質体を・共溶するための反
応系夕！Ｉ ？ｅ％ ジゴギシンを圀として次の図Ａに
示す。
ａ、過ヨウ素酸ナトリウム
ｂ、 （１４Ｈ２０ＣＩ（２（、’０ＯＨ）２・ＨＣ
４／Ｎａ０Ａｃ＋ＥｔＯＨｃ、 ＮＨ８＋Ｄ、Ｃ，Ｃ
，→メ古性エステルｄ、ジパルミトイルホスファチゾル
エタノールアミ ン （ＤＰＰＥ） 、／ ＣＨＣ
ｌ３ ／ Ｅｔ３Ｎジゴキシンの末端ゾギトキソース
を、同えば、窒素ふんい気下過ヨウ素酸ナトリウムを１
重用して開裂すると定量的にジアルデヒＰｔ−生ずる。
４／Ｎａ０Ａｃ＋ＥｔＯＨｃ、 ＮＨ８＋Ｄ、Ｃ，Ｃ
，→メ古性エステルｄ、ジパルミトイルホスファチゾル
エタノールアミ ン （ＤＰＰＥ） 、／ ＣＨＣ
ｌ３ ／ Ｅｔ３Ｎジゴキシンの末端ゾギトキソース
を、同えば、窒素ふんい気下過ヨウ素酸ナトリウムを１
重用して開裂すると定量的にジアルデヒＰｔ−生ずる。
クロロホルム／メタノール躊媒糸（容敏比１０／１ ）
による薄；−クロマトグラフィ（Ｔ’Ｔ、Ｃ） （シリ
カビル、メルク社）はＲ１゛＝＝＝０．１６に１個の均
質なスポットを示す〔メタノール／磯硫酸（各緻比９／
１）を・・Ｋ凄しｆｃｆｉｍｌ辱間湛めると暗褐色に発
色することで検出〕。ジゴキシンジアルデヒドとカルボ
キシメトキシアミンヘミヒドロりａリドとの縮合反応ハ
窒素ふんい気丁酢メ俊ナトリウム／エタノール中で迅速
に運行する。ジー（０−カルｆキシＩチル） オキ’／
ム（ＴＬＣ： Ｒｆ＝０．０４〜０．１２、浴媒系：り
Ｏｏホルム／メタノール、ｇ ＷＥ 比６ ／１）が定
量的に得られた。このジイキシンジオヤシム誘導体は１
１ちに次の反応工種に使用した。次にジオキシムのカル
ざキシ官能苓をジシクａへ牛ジルカルざジイミげの存在
でＮ−ヒげロキシスクシンイミドと反応させて活性エス
テルを得た。次にジオキシム活性エステルをジパルミト
イルホスファチゾルエタノールアミン（ＤＰＰＩｌｊり
ドア ２時間橿かに加熱して縮合させた。反応ばでＬ
Ｃによりｍ 屑Ｋ 監視した。クロロホルム／メタノー
ル／水浴媒系いＩ比７５ ／２５／３ ）に、Ｅ６ｆｆ
ｄｌＣ’マドグラフィは、Ｒｆ＝０．３０におけるＮ−
ヒドロキシスクシンイミドと共に、ａｆ＝０．２０とＲ
ｆ々０．１３とに２１日の主殻成分金示した◎破合本の
りン８ぼ管部分はモリブデンブルー噴霧法によって演出
した。Ｉ尚剥のＮ−ヒドロキシスクシンイミドは、Ｊ１
４製粗放体クロマト（Ｔ、Ｃ）Ｃ午−ゼルデル（Ｋｉｅ
Ｓｅｌｇｅｌ ）、２００ＩＩ、ガラスカラム（２，５
ｘ ５ Ｑ ｃｒＢ ）、４媒系：りａａホルム／メタ
ノール／水（６量比２／８／１ ））により反応混合物
から除去した。純粋なジゴキシン−シーＤＰＰＥ ｆＪ
ｉ 合体（”３．１６４８ ｇ、２０４ ％ Ｒｆ”’
［１，３（１）およびジデキシンーモノーＤＰＰＥ層
合体（０，１４２４９，２６−ｂ ％ 、Ｒｆ；１１看
５）ぼりａｏホルム／メタノール／水（谷ｉ比２／８／
１ ）系調製用′Ｉｌｆ・Ｃ０ｆこより徂反応混合物か
ら単離した。他に二つの副生成物が、１４Ｌ＠された。
による薄；−クロマトグラフィ（Ｔ’Ｔ、Ｃ） （シリ
カビル、メルク社）はＲ１゛＝＝＝０．１６に１個の均
質なスポットを示す〔メタノール／磯硫酸（各緻比９／
１）を・・Ｋ凄しｆｃｆｉｍｌ辱間湛めると暗褐色に発
色することで検出〕。ジゴキシンジアルデヒドとカルボ
キシメトキシアミンヘミヒドロりａリドとの縮合反応ハ
窒素ふんい気丁酢メ俊ナトリウム／エタノール中で迅速
に運行する。ジー（０−カルｆキシＩチル） オキ’／
ム（ＴＬＣ： Ｒｆ＝０．０４〜０．１２、浴媒系：り
Ｏｏホルム／メタノール、ｇ ＷＥ 比６ ／１）が定
量的に得られた。このジイキシンジオヤシム誘導体は１
１ちに次の反応工種に使用した。次にジオキシムのカル
ざキシ官能苓をジシクａへ牛ジルカルざジイミげの存在
でＮ−ヒげロキシスクシンイミドと反応させて活性エス
テルを得た。次にジオキシム活性エステルをジパルミト
イルホスファチゾルエタノールアミン（ＤＰＰＩｌｊり
ドア ２時間橿かに加熱して縮合させた。反応ばでＬ
Ｃによりｍ 屑Ｋ 監視した。クロロホルム／メタノー
ル／水浴媒系いＩ比７５ ／２５／３ ）に、Ｅ６ｆｆ
ｄｌＣ’マドグラフィは、Ｒｆ＝０．３０におけるＮ−
ヒドロキシスクシンイミドと共に、ａｆ＝０．２０とＲ
ｆ々０．１３とに２１日の主殻成分金示した◎破合本の
りン８ぼ管部分はモリブデンブルー噴霧法によって演出
した。Ｉ尚剥のＮ−ヒドロキシスクシンイミドは、Ｊ１
４製粗放体クロマト（Ｔ、Ｃ）Ｃ午−ゼルデル（Ｋｉｅ
Ｓｅｌｇｅｌ ）、２００ＩＩ、ガラスカラム（２，５
ｘ ５ Ｑ ｃｒＢ ）、４媒系：りａａホルム／メタ
ノール／水（６量比２／８／１ ））により反応混合物
から除去した。純粋なジゴキシン−シーＤＰＰＥ ｆＪ
ｉ 合体（”３．１６４８ ｇ、２０４ ％ Ｒｆ”’
［１，３（１）およびジデキシンーモノーＤＰＰＥ層
合体（０，１４２４９，２６−ｂ ％ 、Ｒｆ；１１看
５）ぼりａｏホルム／メタノール／水（谷ｉ比２／８／
１ ）系調製用′Ｉｌｆ・Ｃ０ｆこより徂反応混合物か
ら単離した。他に二つの副生成物が、１４Ｌ＠された。
、１１０生成物の１竜の同定は行わなかった。
二つの生い複合体の４漬はＩＲ，ＵＶ扁分離１１巨プロ
トンＮＭＲスペクトルおよび尚凛原子責寧（ＦＡＢ）マ
ススペクトルから得られる。
トンＮＭＲスペクトルおよび尚凛原子責寧（ＦＡＢ）マ
ススペクトルから得られる。
上記の合成方法の利点は比較的安定で、貯−町１】［で
なで粘性化できるオキシム中１用体金効率醍く両供する
ことが答易にできる点にある。この中間座は前記のＢｕ
ｔｌｅｒらの方法における本質的な欠点ｆｔ見服するも
のである。これらｅ工、□持により少ない活性全もつア
ミンｄ導体例えばリン脂質の存在下、ジアルデヒド中１
ｈ’１体が有害な副反応を破る１頃同忙夙言する口その
曲のＡ＝ＩＪ点は、Ｒｕｔｌｅｒらの方ｆＰ、が４まし
い生成物の特性付けを妨害する弗常ｔＣ複・４な混合物
ｒ生じるのに対し、本発明方法はｄ易に単離し、特性付
けしそして構製できる生成 ゛物會与える点にある
。
なで粘性化できるオキシム中１用体金効率醍く両供する
ことが答易にできる点にある。この中間座は前記のＢｕ
ｔｌｅｒらの方法における本質的な欠点ｆｔ見服するも
のである。これらｅ工、□持により少ない活性全もつア
ミンｄ導体例えばリン脂質の存在下、ジアルデヒド中１
ｈ’１体が有害な副反応を破る１頃同忙夙言する口その
曲のＡ＝ＩＪ点は、Ｒｕｔｌｅｒらの方ｆＰ、が４まし
い生成物の特性付けを妨害する弗常ｔＣ複・４な混合物
ｒ生じるのに対し、本発明方法はｄ易に単離し、特性付
けしそして構製できる生成 ゛物會与える点にある
。
ここに述べた合成法は、儲Ｉを介する結合金片む類似の
リン脂ＫＮ合体、列えばジぞトキシン、ギ）＋シン、ウ
ワパイン、ジゼトニンおよび類縁強心性配錆体の製令、
および特異性抗体による免疫認識に俄かな達ぎ能団から
離れてオキシム誘導体を形成するよ５変注することので
きるステロイドを含むリン脂質複合体の製造にも４虐用
することができる。
リン脂ＫＮ合体、列えばジぞトキシン、ギ）＋シン、ウ
ワパイン、ジゼトニンおよび類縁強心性配錆体の製令、
および特異性抗体による免疫認識に俄かな達ぎ能団から
離れてオキシム誘導体を形成するよ５変注することので
きるステロイドを含むリン脂質複合体の製造にも４虐用
することができる。
例 １
ゾイギシンＤＰＰＥ腹合体の合成
Ａ）ジゴキシンジアルデヒド
ジゴキシン（０，４９８５ｇ 、０．＜５４ ｍ ｍｏ
ｔ）をクロロホルム／メタノール（３／１．５ ） １
０ｍにｍ ７１１’ Ｌ 、１００ ｍｌの二ロフラス
コに装入する。過ヨウ素設ナトリウム（０，３１０２，
Ｆ、１．４ｍｍｏｚ）全蒸留水ｄ ｍｌ Ｋ ｔ＆解し
、均圧にした添加漏斗に装入する。過ヨウ素戚囁尋液を
フラスコに、窒素下でかきまぜなから倣々に加える。白
色沈設が直ちに生成し、反応ば過ヨウ永酸ＶＭ＊１）Ｏ
ｔ＆ １５分以内に完了する。反応の値付はクロロホル
ム／メタノール（専破比１０／１ ）中でＴｒ、、ｃ
（イー、エム、メルク社、デリコー） ＴＬＣンート、
シリカデル６０Ｆ’２５４ ０．２１１１厚〕１（よ
り一恰イ兄す６［：Ｒｆ：０．１６＝ジアルデヒド、１
１１の均゛ぼスポット、Ｒ４・： ０．０７ ＝ジゴキ
シン。両スポット共ｒｒ、ｃ板をメタノール／庸硫酸（
容縫比９／１）で噴感じて１００Ｃのオープンに入れる
と＃渇色となった〕。
ｔ）をクロロホルム／メタノール（３／１．５ ） １
０ｍにｍ ７１１’ Ｌ 、１００ ｍｌの二ロフラス
コに装入する。過ヨウ素設ナトリウム（０，３１０２，
Ｆ、１．４ｍｍｏｚ）全蒸留水ｄ ｍｌ Ｋ ｔ＆解し
、均圧にした添加漏斗に装入する。過ヨウ素戚囁尋液を
フラスコに、窒素下でかきまぜなから倣々に加える。白
色沈設が直ちに生成し、反応ば過ヨウ永酸ＶＭ＊１）Ｏ
ｔ＆ １５分以内に完了する。反応の値付はクロロホル
ム／メタノール（専破比１０／１ ）中でＴｒ、、ｃ
（イー、エム、メルク社、デリコー） ＴＬＣンート、
シリカデル６０Ｆ’２５４ ０．２１１１厚〕１（よ
り一恰イ兄す６［：Ｒｆ：０．１６＝ジアルデヒド、１
１１の均゛ぼスポット、Ｒ４・： ０．０７ ＝ジゴキ
シン。両スポット共ｒｒ、ｃ板をメタノール／庸硫酸（
容縫比９／１）で噴感じて１００Ｃのオープンに入れる
と＃渇色となった〕。
反応ｌｊ！、合＃Ｉ倉回転魚発装置で蒸発し、クロロホ
ルム３ Ｑ ｔｎｌと水３ ｍｌとの中に加える。鳩っ
た溶液金抜１１！２す、水性１−をクロロホルム１Ｑａ
７で６回洗浄する。４ｆ機２川を合−ｔ、Ｃ６０ｍ１）
硫酸マグネシウム上で乾燥する。＋ｆ機溶媒金蒸発乾固
すると灸鍛喝色旧伏吻が残る。このものを直ちＶｃ欠の
反応に使用する。
ルム３ Ｑ ｔｎｌと水３ ｍｌとの中に加える。鳩っ
た溶液金抜１１！２す、水性１−をクロロホルム１Ｑａ
７で６回洗浄する。４ｆ機２川を合−ｔ、Ｃ６０ｍ１）
硫酸マグネシウム上で乾燥する。＋ｆ機溶媒金蒸発乾固
すると灸鍛喝色旧伏吻が残る。このものを直ちＶｃ欠の
反応に使用する。
Ｂ）ジゴキシン−ソー（０−カルＳキシメチル）オキシ
ム カルボ午シメト中ジルアミンへミヒドロクａリド（０，
６１１９１１，１，４ｍｍｏｔ）す６よび酢ｌ浚ナトリ
ウム（０，２２６０１９，１，６ｍｍ０１）ｆｌ：水３
ｍｌに、ｄ解し、５Ｑｒｓｌの二口フラスコに装入す
る。エタノール１．３ｍ／１ｃ４ｉ４した前記ジゴキシ
ンジアルデヒ「を均圧にしたｒａ斗に入れ、窒素下でか
〜まぜながら徐々にフラスコに加える。反応は１０分以
内ｉｃ 完了する（ ＴＬＣ’ ：クロロホルム／メタ
ノール、容量化６／１、Ｒｆ ： ０．０９−０．１３
）。反応混合物を蒸発乾固し、酢酸エチル２Ｑｔｎｌ
と水３ ｍｌとに静解する。有機＠全停離し、水性層を
酢酸エチル５．３ａ／で６回洗浄する。有機ｆｆ１ｊを
合一し、無水硫酸マグネシウム上で乾燥する。溶液を濾
過し蒸発乾固する。残分を高真空（０，１萌Ｈｇ ）下
に６０分間乾燥して直ちに次の工程に使用する。
ム カルボ午シメト中ジルアミンへミヒドロクａリド（０，
６１１９１１，１，４ｍｍｏｔ）す６よび酢ｌ浚ナトリ
ウム（０，２２６０１９，１，６ｍｍ０１）ｆｌ：水３
ｍｌに、ｄ解し、５Ｑｒｓｌの二口フラスコに装入す
る。エタノール１．３ｍ／１ｃ４ｉ４した前記ジゴキシ
ンジアルデヒ「を均圧にしたｒａ斗に入れ、窒素下でか
〜まぜながら徐々にフラスコに加える。反応は１０分以
内ｉｃ 完了する（ ＴＬＣ’ ：クロロホルム／メタ
ノール、容量化６／１、Ｒｆ ： ０．０９−０．１３
）。反応混合物を蒸発乾固し、酢酸エチル２Ｑｔｎｌ
と水３ ｍｌとに静解する。有機＠全停離し、水性層を
酢酸エチル５．３ａ／で６回洗浄する。有機ｆｆ１ｊを
合一し、無水硫酸マグネシウム上で乾燥する。溶液を濾
過し蒸発乾固する。残分を高真空（０，１萌Ｈｇ ）下
に６０分間乾燥して直ちに次の工程に使用する。
Ｃ）ジゴキシン−ジー（０−カルＳキシメチル）オキシ
ムのＮ−とドロキシスクシンイミドエステルの製造 ジゴキシン−ジー（０−カル汁ζキシメチル）オギシム
のＮ−ヒトａキシスクシンイミーエステル（活性エステ
ル） ジシクロへキシルカルボジイミド（ＤＣＣ％ｌ］、２Ｉ
Ｊｆｆ５Ｉｓ １．３ｍｍｏｚ）２乾＠ ＤＩＪＰ
６ ｍｌ ｉｃ ｍ ｉ’４し、５０ゴの二ロフラスコ
ンこ装入する。ｄ液を氷水浴（４゛Ｏ）中で冷却する。
ムのＮ−とドロキシスクシンイミドエステルの製造 ジゴキシン−ジー（０−カル汁ζキシメチル）オギシム
のＮ−ヒトａキシスクシンイミーエステル（活性エステ
ル） ジシクロへキシルカルボジイミド（ＤＣＣ％ｌ］、２Ｉ
Ｊｆｆ５Ｉｓ １．３ｍｍｏｚ）２乾＠ ＤＩＪＰ
６ ｍｌ ｉｃ ｍ ｉ’４し、５０ゴの二ロフラスコ
ンこ装入する。ｄ液を氷水浴（４゛Ｏ）中で冷却する。
ノゴギシンージー（〇−カルボキンメチル）オキシムｔ
−ＤＭ１ｉ’ ８ ！１ ｍｌに暦解し、窒素下でかき
ませなから途々にフラスコに加える。
−ＤＭ１ｉ’ ８ ！１ ｍｌに暦解し、窒素下でかき
ませなから途々にフラスコに加える。
そのＩＬｔ＋に、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド溶液（
ＤＭＦ’ ６ ｍｌ中、０．１５００ Ｊｉ、１．３ｍ
ｍｏｔ）を間挿にし【０口える。反１６の進行は’１
’ＬＣにより監視する〔クロロホルム／メタノール／水
、ｇｔ比７５／２５／６、Ｒ＋ ： １．０ （ＤＣＣ
）、０．７５ （ジオキシムＮＨ８活性エステル）％
０．３４ （ＮＨ８）、０．１（ジオキシム）〕。反
応は窒素下４υで１８１寺１…ｊ迷続して行う。
ＤＭＦ’ ６ ｍｌ中、０．１５００ Ｊｉ、１．３ｍ
ｍｏｔ）を間挿にし【０口える。反１６の進行は’１
’ＬＣにより監視する〔クロロホルム／メタノール／水
、ｇｔ比７５／２５／６、Ｒ＋ ： １．０ （ＤＣＣ
）、０．７５ （ジオキシムＮＨ８活性エステル）％
０．３４ （ＮＨ８）、０．１（ジオキシム）〕。反
応は窒素下４υで１８１寺１…ｊ迷続して行う。
目的生成を吻はＴｆ・Ｃで矢の特性を有している＝（１
）均質なＵＶ４寅出町症スポツト（短波長） 、＋２＋
この物質スポットＶよＴＬＣ仮をメタノール／喚硫酸（
各敗北９／１）で−Ｋ ｒｉ Ｌ短詩＋ｕ５）００”Ｃ
のオープン内で湛めると褐色？蛍びる。
）均質なＵＶ４寅出町症スポツト（短波長） 、＋２＋
この物質スポットＶよＴＬＣ仮をメタノール／喚硫酸（
各敗北９／１）で−Ｋ ｒｉ Ｌ短詩＋ｕ５）００”Ｃ
のオープン内で湛めると褐色？蛍びる。
反応混合吻をＡ４してジシクロヘキシル尿素を徐云１−
１徂反応混付物を次の工程に使用する。
１徂反応混付物を次の工程に使用する。
Ｄ）クコ９ギシンー〇ＰＰＥ獲合体の製造ェ ／
は・
−、・７／
ん
、）！
■ ・ ・′
０− ＼、
′、＼
□−、〆
７／′
徂ジオキシム活性エステル（反応混合物１７ｍ１）ｅｌ
［１０ａｌの二ロフラスコに装入する。ＤＰＰＥの懸濁
Ｑ（０，４４３１ｇ、 ０．６４ ｍｍｏｌ、乾燥ク
ロロホルム６０醒ｌとトリエチルアミン０．７ｍｌトに
９故）を蘇加禰斗に入れ、窒素下で元を４所してかきま
ぜながら徐々にフラスコＶＣ加える。混合物をｓかＶＣ
（４［）−５０＝Ｏ）７２時間加熱し続ける。
［１０ａｌの二ロフラスコに装入する。ＤＰＰＥの懸濁
Ｑ（０，４４３１ｇ、 ０．６４ ｍｍｏｌ、乾燥ク
ロロホルム６０醒ｌとトリエチルアミン０．７ｍｌトに
９故）を蘇加禰斗に入れ、窒素下で元を４所してかきま
ぜながら徐々にフラスコＶＣ加える。混合物をｓかＶＣ
（４［）−５０＝Ｏ）７２時間加熱し続ける。
Ｌｉ２はＩ’ＬＣによって監視する〔溶媒系：クロロホ
ルム／メタノール、／水、８叶比７５／２５／ｌ、Ｒｆ
： ０．７５ （ｌｌｉ性：ｒ−スｆｋ ）、０．５２
（未知成分１）、０．４５ （未％ｎＦＩＺ分２ ）
、０．３０ （ＮＨ８）、０．２ ｉ ＤＰＰｇ、 ０
．２０ （ジ置換ｉ１ｋ ） ％ ０．１３（モノ置
換複合体）〕。反応混合分は複雑で、上記は同定した主
安な生ｆ′Ｂ、物である。慎合体の９７８ｗ質部分はモ
リブデンブルー噴ｄ法によっテ横出した。反応混合物を
蒸発しクロロホルム／メタノール／水（２／８／１ ）
Ａｉｌ ０ｔｎｌ中Ｖｃｍえ；ｂ。
ルム／メタノール、／水、８叶比７５／２５／ｌ、Ｒｆ
： ０．７５ （ｌｌｉ性：ｒ−スｆｋ ）、０．５２
（未知成分１）、０．４５ （未％ｎＦＩＺ分２ ）
、０．３０ （ＮＨ８）、０．２ ｉ ＤＰＰｇ、 ０
．２０ （ジ置換ｉ１ｋ ） ％ ０．１３（モノ置
換複合体）〕。反応混合分は複雑で、上記は同定した主
安な生ｆ′Ｂ、物である。慎合体の９７８ｗ質部分はモ
リブデンブルー噴ｄ法によっテ横出した。反応混合物を
蒸発しクロロホルム／メタノール／水（２／８／１ ）
Ａｉｌ ０ｔｎｌ中Ｖｃｍえ；ｂ。
Ｎ−ヒトａキシスクシンイミｌ？はＬＰＬＣ（キーゼル
ｒル２００１１ 、ガラス７７うＡ （２，５ｃｍｘ
５０ｍ）、ｄＩＸ糸：りｃ１ｃ２ホルム／メタノール／
水（各量比２／８／１ ）］により混合物から除去し友
。純粋なモノおよびジ置換複合体はクロロホルム／メタ
ノール／水（４曖比２／８／１）中のＩＪ４候用ＴＬＣ
によって得られた〔Ｒ（： ０．３ ［１（ゾ置挾体）
、０．１５ （モノ置換体）〕。純枠なジゴキシン−シ
ー ＤＰＰＥ謀合体（０，１３４９１１２０％）および
ジゴキシン−モノ−ＤＰＰＴＬすＭ合体（０，１４２４
，９２６，５％）ケ侍た。Ｉｔ！１１’こ二つの副生成
物も単離したがｌｌｉの同定は行わなかった。
ｒル２００１１ 、ガラス７７うＡ （２，５ｃｍｘ
５０ｍ）、ｄＩＸ糸：りｃ１ｃ２ホルム／メタノール／
水（各量比２／８／１ ）］により混合物から除去し友
。純粋なモノおよびジ置換複合体はクロロホルム／メタ
ノール／水（４曖比２／８／１）中のＩＪ４候用ＴＬＣ
によって得られた〔Ｒ（： ０．３ ［１（ゾ置挾体）
、０．１５ （モノ置換体）〕。純枠なジゴキシン−シ
ー ＤＰＰＥ謀合体（０，１３４９１１２０％）および
ジゴキシン−モノ−ＤＰＰＴＬすＭ合体（０，１４２４
，９２６，５％）ケ侍た。Ｉｔ！１１’こ二つの副生成
物も単離したがｌｌｉの同定は行わなかった。
Ｅ） ＮＩＪＲ，ＵＶ、 ＩＲおよびＦ’ＡＢデータ
Ｎ＃、ＡＲ１σＶ、ＩＲ−ｉ’６よび萬速原子衝掌（Ｆ
ＡＳ ） ？ススベクトル？−タｔまとめてＦ記の第１
表および第２衣に示す。
Ｎ＃、ＡＲ１σＶ、ＩＲ−ｉ’６よび萬速原子衝掌（Ｆ
ＡＳ ） ？ススベクトル？−タｔまとめてＦ記の第１
表および第２衣に示す。
第 １ 衣
ジゴキシン−モノ−ＤＰＰｇ
ＮＭＲ（６Ｑ Ｑ ＭＨｚ 、 ｃＤａｔ３’ ）δ
０．ｄ（−直載、３ Ｈｓ １８ ＣＨ３） ％ ０
．９６ （−重縁％ ３ Ｈ％ １９ ＣＨ３）、
０．９１１ （三直１＃％６Ｈ％ リン密質中の末、
１メチル４） ２．２３−１，０５ Ｃ（ｔ’合多ｍｔ 線％ ８３
Ｈ１２（ＣＨ２）１２．３ ＣＨ３（ジギトキソース
Ｌ！Ａ） 、６ＣＨ２（シギトヤソース’ ） 、８０
Ｈ２（シイキシゲニンＬｉ１）％２四ａ（ＣＨａ）ｘｇ
）２．３２ （二１面の重畳三重線、４Ｈ１２ＣＨ２
Ｃ０）４．７２−６．ｔ１５ Ｃ（６１合多ｍｓ、２７
Ｈ、ｃＨ２■永、９ ＣＨ（ジゼト午ソース１デａト
ン）、６ＣＨ（シイａｐシｒ＝ンｔｊ１ｆｏトｙ）、／
”リセロＣＨ２−０−Ｐプロトン、エタノ−ルアｉ ７
Ｃｆ（２−０−Ｐ 、 −０ＣＨ２−ＣＯ−オｊび−
ａＨ２−ｕＨ）３４．９５ （多ｊｋ線、５Ｈ５ラクト
ンのＣ１ｆ（２、およびソイトキソース内のＣ１，Ｃ１
′および肖ｔｉｃ ｗける３ １＋Ｉ！Ｉのプロトン）
５．２５ （多重線、Ｉ Ｈ，−ＣＨ−０ＣＯＲ）５．
９５ （−直−１１Ｈ，ラクトン、−Ｃ式Ｈ）石〔ケリ
ー（ｃａｒｙ） ２１９ ｍ、ｃｓｃｔ３）、１粥大２
４Ｌｎｍ （ｔＥｌ ７４４） ｔＲ（ｃＲｒ、パーキンエルマー１４６０比＝Ａ’ ｄ
）＆、１−”）：３４３５（デ０−ドＯＨ）、２９２
６．２８５２．１７４３（エステル）、１６６８、１６
２２゜ 第 ２ 表 ジゴキシン−シーＤＰＰＥ ＮｕＲ（３Ｄ ＯＭＨｚ、 ＣＤＣｌ５）δ ０．８２
（−＠ 巌、３Ｈ５）８Ｃ’Ｈ３）。
０．ｄ（−直載、３ Ｈｓ １８ ＣＨ３） ％ ０
．９６ （−重縁％ ３ Ｈ％ １９ ＣＨ３）、
０．９１１ （三直１＃％６Ｈ％ リン密質中の末、
１メチル４） ２．２３−１，０５ Ｃ（ｔ’合多ｍｔ 線％ ８３
Ｈ１２（ＣＨ２）１２．３ ＣＨ３（ジギトキソース
Ｌ！Ａ） 、６ＣＨ２（シギトヤソース’ ） 、８０
Ｈ２（シイキシゲニンＬｉ１）％２四ａ（ＣＨａ）ｘｇ
）２．３２ （二１面の重畳三重線、４Ｈ１２ＣＨ２
Ｃ０）４．７２−６．ｔ１５ Ｃ（６１合多ｍｓ、２７
Ｈ、ｃＨ２■永、９ ＣＨ（ジゼト午ソース１デａト
ン）、６ＣＨ（シイａｐシｒ＝ンｔｊ１ｆｏトｙ）、／
”リセロＣＨ２−０−Ｐプロトン、エタノ−ルアｉ ７
Ｃｆ（２−０−Ｐ 、 −０ＣＨ２−ＣＯ−オｊび−
ａＨ２−ｕＨ）３４．９５ （多ｊｋ線、５Ｈ５ラクト
ンのＣ１ｆ（２、およびソイトキソース内のＣ１，Ｃ１
′および肖ｔｉｃ ｗける３ １＋Ｉ！Ｉのプロトン）
５．２５ （多重線、Ｉ Ｈ，−ＣＨ−０ＣＯＲ）５．
９５ （−直−１１Ｈ，ラクトン、−Ｃ式Ｈ）石〔ケリ
ー（ｃａｒｙ） ２１９ ｍ、ｃｓｃｔ３）、１粥大２
４Ｌｎｍ （ｔＥｌ ７４４） ｔＲ（ｃＲｒ、パーキンエルマー１４６０比＝Ａ’ ｄ
）＆、１−”）：３４３５（デ０−ドＯＨ）、２９２
６．２８５２．１７４３（エステル）、１６６８、１６
２２゜ 第 ２ 表 ジゴキシン−シーＤＰＰＥ ＮｕＲ（３Ｄ ＯＭＨｚ、 ＣＤＣｌ５）δ ０．８２
（−＠ 巌、３Ｈ５）８Ｃ’Ｈ３）。
０．９４（−１社、庫％ ３’（ｓ １９ ＣＨ３）
、０−９０ （Ｅ ｉｆｆ ｉ線、１２ Ｈ，！Ｊ ｙ
）１ｉ￥＠ノ、Ｊ４ メーｆル基） ２．６２ （多重線、８ Ｈｓ ４０Ｈ２−Ｃｏ ）２
．２−１．０５ （α合多爪線） ４．７５−２．８（γＭ合多屯媚） ４．９（多ＫＭ、５Ｈ，ラクト７（１）ＣＨ４、−Ｍよ
びジヂトキソース内のＣ１％ Ｃ′ｌおよびｃ″ｌνこ
おける３個のプロトン） ５．２５ （４！Ｋｍ、２ Ｈ、２ＣＨ−ＯＣＯＲ）５
．９５ （−虫−１ＩＨ％ ラクトン−〇＝ＣＨ）し
Ｆν′ （ケ リ −２１９１Ｍ ％ ＣＨＣＬ３
） 、 ↑４３大 ２ ４ １ ｎｍ（Ｃ２［］
７１） ＩＲ（ＫＢｒ 、パーキンエルマー１４６０比軍→イ２
１４Ｒす、＝ｍ−１） ： ６４２７ （ブロードＯ
Ｈ） ２９２３、２８５３、１７８１、１７４３、１６
６Ｂ。
、０−９０ （Ｅ ｉｆｆ ｉ線、１２ Ｈ，！Ｊ ｙ
）１ｉ￥＠ノ、Ｊ４ メーｆル基） ２．６２ （多重線、８ Ｈｓ ４０Ｈ２−Ｃｏ ）２
．２−１．０５ （α合多爪線） ４．７５−２．８（γＭ合多屯媚） ４．９（多ＫＭ、５Ｈ，ラクト７（１）ＣＨ４、−Ｍよ
びジヂトキソース内のＣ１％ Ｃ′ｌおよびｃ″ｌνこ
おける３個のプロトン） ５．２５ （４！Ｋｍ、２ Ｈ、２ＣＨ−ＯＣＯＲ）５
．９５ （−虫−１ＩＨ％ ラクトン−〇＝ＣＨ）し
Ｆν′ （ケ リ −２１９１Ｍ ％ ＣＨＣＬ３
） 、 ↑４３大 ２ ４ １ ｎｍ（Ｃ２［］
７１） ＩＲ（ＫＢｒ 、パーキンエルマー１４６０比軍→イ２
１４Ｒす、＝ｍ−１） ： ６４２７ （ブロードＯ
Ｈ） ２９２３、２８５３、１７８１、１７４３、１６
６Ｂ。
’４ Ｖこ、アミにおよびエステルの両ハ能基の存在は
ＩＲ＝ｐ−夕により反映される。ここで、１７４３ｔ’
ｍ−１の吸収ばエステルカルボニルに滞し、１６６８訓
−１の吸収はアミドカルボニルに帰す。さらに、１６６
２８ｍ−”の吸収ぼモノ抜合体にのみあり、これは遊離
のカルがニル部分に帰す。
ＩＲ＝ｐ−夕により反映される。ここで、１７４３ｔ’
ｍ−１の吸収ばエステルカルボニルに滞し、１６６８訓
−１の吸収はアミドカルボニルに帰す。さらに、１６６
２８ｍ−”の吸収ぼモノ抜合体にのみあり、これは遊離
のカルがニル部分に帰す。
Ｉ４迫ｆ：さらに１認するため、チオグリセロールマト
リックス中の、消刈した核合体につき、ＭＳ−５０高分
解ηヒ寅、４′分析器金使用して鋼イオン高速原子衝寧
（ＦＡＢ ）マススペクトル（ｍ 、／ ｚ ） ｆ得
た。最強ピークは分子イオン領域に現れ、（Ｍ＋金４）
＋のｍ／ｚと同位元素的に４化された橋とを表ワす。ジ
ゴキシン−モノ−ＤＰＰＥ Ｋ対する分子イオンｉ１６
２１（Ｍ＋Ｎａ）十で、ジ：＋’ キシｙ−ジーＤＰＰ
Ｅに対する分子イオンは２３１１（Ｍ＋Ｋ）十である。
リックス中の、消刈した核合体につき、ＭＳ−５０高分
解ηヒ寅、４′分析器金使用して鋼イオン高速原子衝寧
（ＦＡＢ ）マススペクトル（ｍ 、／ ｚ ） ｆ得
た。最強ピークは分子イオン領域に現れ、（Ｍ＋金４）
＋のｍ／ｚと同位元素的に４化された橋とを表ワす。ジ
ゴキシン−モノ−ＤＰＰＥ Ｋ対する分子イオンｉ１６
２１（Ｍ＋Ｎａ）十で、ジ：＋’ キシｙ−ジーＤＰＰ
Ｅに対する分子イオンは２３１１（Ｍ＋Ｋ）十である。
Ｆ）リボソーマル叱疫険定
両方のＮ合体は米１１特杆第４，３４２．８２６最明祷
賽（例えば列Ｘ）および木１１特奸第４．２３５，７９
２号明、１４ＩＩＪに記載のリポソーマル叱１β隣定方
法で使用さル、省￥認できる晴来が得られる。
賽（例えば列Ｘ）および木１１特奸第４．２３５，７９
２号明、１４ＩＩＪに記載のリポソーマル叱１β隣定方
法で使用さル、省￥認できる晴来が得られる。
列 ２
ジゴキシンの代りに以下に記載の化合物を化学鑓Ｉ的停
ｆｔ使って列１の方法を繰すベすと、同→の結果が得ら
れる： ゾゼトキシン ントキシン ウワバイン ジｖトニン １均 ６ ジパルミトイルホスファチゾルエタノールアミンの代り
にほぼ化学鎗、・藷的寺喰のノミリスチルホスファチジ
ルエタノールアミン會１史って丙１の方法ｔ・謙り区す
と、相当する生成物が得られる。
ｆｔ使って列１の方法を繰すベすと、同→の結果が得ら
れる： ゾゼトキシン ントキシン ウワバイン ジｖトニン １均 ６ ジパルミトイルホスファチゾルエタノールアミンの代り
にほぼ化学鎗、・藷的寺喰のノミリスチルホスファチジ
ルエタノールアミン會１史って丙１の方法ｔ・謙り区す
と、相当する生成物が得られる。
同 ４
ゾイキシンゾアルデヒｒの代ｏ ｖｃ テストステロン
に／”ｉぼ化学１Ｊ！？７１１！Ｗ的咎量ＩＳ！！用す
ること以外は列１〔工■呈Ｂ）、 Ｃ）およびＩ〕）〕
倉１様り返すと、相当するリン宙質俟合体生成物が得ら
れる。
に／”ｉぼ化学１Ｊ！？７１１！Ｗ的咎量ＩＳ！！用す
ること以外は列１〔工■呈Ｂ）、 Ｃ）およびＩ〕）〕
倉１様り返すと、相当するリン宙質俟合体生成物が得ら
れる。
明細・耳に弓己載された範Ｕ月す６よび゛侍杆ｄ青〉凡
の―α１川から逸呪しな１．Ａ眠り、本藷明において１
道（・（誉の変化変形が”Ｔｌ７Ｅであると埋イざルた
い。
の―α１川から逸呪しな１．Ａ眠り、本藷明において１
道（・（誉の変化変形が”Ｔｌ７Ｅであると埋イざルた
い。
手続補正書（方式）
％式％
１、事件の表示 昭和６０年特許願第２９３３７５号
３、補正をする者 事件との関係 特許出願人テク
ニ］ン、インストルメンツ、コーポレーション（昭和６
１年３月２５日発送）
３、補正をする者 事件との関係 特許出願人テク
ニ］ン、インストルメンツ、コーポレーション（昭和６
１年３月２５日発送）
Claims (34)
- （１）式 ▲数式、化学式、表等があります▼（ I ） または ▲数式、化学式、表等があります▼（ I ） （式中、Ｒは酸化的開裂を受ける１，２−ジヒドロキシ
基を含有する有機化合物から誘導された部分であり、Ｘ
およびＸ′は１，２−ジヒドロキシ基の酸化的開裂によ
つて生ずる炭素原子とＲ部分とを連結する側鎖部分であ
り、そしてＰおよびＰ′はリン脂質エタノールアミン部
分である） で表わされるリン脂質複合体化合物。 - （２）式（ I ）で表わされ、式中Ｒがジゴキシンから
誘導され、Ｘが▲数式、化学式、表等があります▼であ
り、Ｘ′が−ＣＨ＿２−でありそしてＲ′がＨである、
前項（１）に記載の化合物。 - （３）Ｐがジパルミトイルホスファチジルエタノールア
ミン（ＤＰＰＥ）から誘導される、前項（２）に記載の
化合物。 - （４）Ｐがジミリスチルホスファチジルエタノールアミ
ンから誘導される、前項（２）に記載の化合物。 - （５）式（II）で表わされ、式中Ｒがジゴキシンから誘
導され、Ｘが▲数式、化学式、表等があります▼であり
そしてＸ′が−ＣＨ＿２−である、前項（１）に記載の
化合物。 - （６）ＰおよびＰ′がそれぞれジパルミトイルホスファ
チジルエタノールアミン（ＤＰＰＥ）から誘導される、
前項（５）に記載の化合物、すなわちジゴキジン−ジ−
ＤＰＰＥ。 - （７）ＰおよびＰ′がそれぞれジミリスチルホスファチ
ジルエタノールアミンから誘導される、前項（５）に記
載の化合物。 - （８）式（ I ）で表わされ、式中Ｒがジギトキシンか
ら誘導され、Ｘが▲数式、化学式、表等があります▼で
あり、Ｘ′が−ＣＨ＿２−でありそしてＲ′がＨである
、前項（１）に記載の化合物。 - （９）Ｐがジパルミトイルホスファチジルエタノールア
ミン（ＤＰＰＥ）から誘導される、前項（８）に記載の
化合物。 - （１０）式（II）で表わされ、式中Ｒがジギトキシンか
ら誘導され、Ｘが▲数式、化学式、表等があります▼で
ありそしてＸ′が−ＣＨ＿２−である、前項（１）に記
載の化合物。 - （１１）ＰおよびＰ′がそれぞれジパルミトイルホスフ
ァチジルエタノールアミン（ＤＰＰＥ）から誘導される
、前項（１０）に記載の化合物。 - （１２）式（ I ）で表わされ、式中Ｒがギトキシンか
ら誘導され、Ｘが▲数式、化学式、表等があります▼で
あり、Ｘ′が−ＣＨ＿２−でありそしてＲ′がＨである
、前項（１）に記載の化合物。 - （１３）Ｐがジパルミトイルホスファチジルエタノール
アミン（ＤＰＰＥ）から誘導される、前項（１２）に記
載の化合物。 - （１４）式（II）で表わされ、式中Ｒがギトキシンから
誘導され、Ｘが▲数式、化学式、表等があります▼であ
りそしてＸ′が−ＣＨ＿２−である、前項（１）に記載
の化合物。 - （１５）ＰおよびＰ′がジパルミトイルホスファチジル
エタノールアミン（ＤＰＰＥ）から誘導される、前項（
１４）に記載の化合物。 - （１６）式（ I ）で表わされ、式中Ｒがウワバインか
ら誘導され、Ｘが▲数式、化学式、表等があります▼ま
たは▲数式、化学式、表等があります▼あるい はそれらの混合物であり、Ｘ′が▲数式、化学式、表等
があります▼または−Ｏ−あるいはそれらの混合物であ
りそしてＲ′がＨである、前項（１）に記載の化合物。 - （１７）Ｐがジパルミトイルホスファチジルエタノール
アミン（ＤＰＰＥ）から誘導される、前項（１６）に記
載の化合物。 - （１８）式（II）で表わされ、Ｒがウワバインから誘導
され、Ｘが▲数式、化学式、表等があります▼または▲
数式、化学式、表等があります▼あるいは それらの混合物でありそしてＸ′が▲数式、化学式、表
等があります▼または−Ｏ−あるいはそれらの混合物で
ある、前項（１）に記載の化合物。 - （１９）ＰおよびＰ′がジパルミトイルホスファチジル
エタノールアミン（ＤＰＰＥ）から誘導される、前項（
１８）に記載の化合物。 - （２０）式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、Ｒ″はカルボニル基少くとも１つをもつステロ
イドから誘導され、ここで前記カルボニル基は前記オキ
シイミノ部分＝Ｎ−Ｏ−を形成するものとし、そしてＰ
はリン脂質エタノールアミン部分である） で表わされるリン脂質複合体化合物。 - （２１）Ｐがジパルミトイルホスファチジルエタノール
アミン（ＤＰＰＥ）から誘導される、前項（２０）に記
載の化合物。 - （２２）前記ステロイドがテストステロンである、前項
（２１）に記載の化合物。 - （２３）前記ステロイドが６−ケト−エストラジオール
である、前項（２１）に記載の化合物。 - （２４）前記ステロイドが２つまたはそれ以上のカルボ
ニル基を含有し、このうちの少くとも１つはオキシイミ
ノ部分を形成して前記リン脂質エタノールアミン部分と
結合する、前項（２０）に記載の化合物。 - （２５）前記ステロイドが酸化的開裂を受ける１，２−
ジヒドロキシ基を含有し、そして前記オキシイミノ部分
は酸化的開裂から生ずる炭素原子とおよびリン脂質エタ
ノールアミン部分と結合する、前項（２０）に記載の化
合物。 - （２６）１，２−ジヒドロキシ基を酸化的に開裂する工
程、生成したジアルデヒド基をカルボキシメトキシルア
ミンと反応させて相当するジオキシムを生成する工程、
および前記ジオキシム中間体にリン脂質を反応させてリ
ン脂質複合体を製造する工程を含有して成る、式（ I
）または（II）で表わされる前項（１）に記載の化合物
および前項（２０）に記載の化合物の製造方法。 - （２７）式（ I ）で表わされる化合物を主として製造
する、前項（２６）に記載の方法。 - （２８）式（II）で表わされる化合物を主として製造す
る、前項（２６）に記載の方法。 - （２９）式（ I ）および（II）で表わされる化合物を
含む混合物を製造する、前項（２６）に記載の方法。 - （３０）Ｒがジゴキシンから誘導され、Ｒ′がＨであり
そしてＰがジパルミトイルホスファチジルエタノールア
ミン（ＤＰＰＥ）から誘導された前項（１）に記載のリ
ン脂質複合体を製造する、前項（２７）に記載の方法。 - （３１）Ｒがジギトキシン、ギトキシン、ウワバインま
たはジギトニンから誘導され、Ｒ′がＨでありそしてＰ
がジパルミトイルホスファチジルエタノールアミン（Ｄ
ＰＰＥ）から誘導されたリン脂質複合体を製造する、前
項（２７）に記載の方法。 - （３２）Ｒがジゴキシンから誘導され、そしてＰおよび
Ｐ′がそれぞれジパルミトイルホスファチジルエタノー
ルアミンから誘導されたリン脂質複合体を製造する、前
項（２８）に記載の方法。 - （３３）Ｒがジギトキシン、ギトキシン、ウワバインま
たはジギトニンから誘導され、そしてＰおよびＰ′がそ
れぞれジパルミトイルホスファチジルエタノールアミン
から誘導されたリン脂質複合体を製造する、前項（２８
）に記載の方法。 - （３４）前項（１）または（２０）に記載のリン脂質複
合体を使用する、人体投与用強心性配糖体およびステロ
イドの適正投与スケジュール決定のためのリポソーマル
免疫検定方法。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US68713584A | 1984-12-28 | 1984-12-28 | |
| US687135 | 1996-07-24 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS61225190A true JPS61225190A (ja) | 1986-10-06 |
Family
ID=24759212
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP29337585A Pending JPS61225190A (ja) | 1984-12-28 | 1985-12-27 | リン脂質複合体とその製造方法 |
Country Status (5)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0187022B1 (ja) |
| JP (1) | JPS61225190A (ja) |
| AU (1) | AU596088B2 (ja) |
| CA (1) | CA1313864C (ja) |
| DE (1) | DE3583015D1 (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS63195569A (ja) * | 1987-02-03 | 1988-08-12 | アボット・ラボラトリーズ | アンフェタミンおよびメタンフェタミンの蛍光偏光イムノアッセイ法 |
| JPS6459157A (en) * | 1987-08-31 | 1989-03-06 | Nissui Seiyaku Co | Immunological analysis and reagent for immunological analysis using the same |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1996040662A2 (en) * | 1995-06-07 | 1996-12-19 | Cellpro, Incorporated | Aminooxy-containing linker compounds and their application in conjugates |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4342826A (en) * | 1980-02-04 | 1982-08-03 | Collaborative Research, Inc. | Immunoassay products and methods |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3997525A (en) * | 1974-01-16 | 1976-12-14 | Bio-Tec, Inc. | Tetra-125 iodo-di-tyramine of digitalis derivative and process for making the same |
| GB1471755A (en) * | 1974-06-20 | 1977-04-27 | Radiochemical Centre Ltd | Derivatives of digoxin and digotoxin |
| US4235792A (en) * | 1977-04-14 | 1980-11-25 | The Governing Council Of The University Of Toronto | Immunological materials |
| DE2952115C2 (de) * | 1979-12-22 | 1982-05-06 | A. Nattermann & Cie GmbH, 5000 Köln | Rosmarinsäure-Phospholipid-Komplex |
-
1985
- 1985-12-18 EP EP85309235A patent/EP0187022B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1985-12-18 DE DE8585309235T patent/DE3583015D1/de not_active Expired - Fee Related
- 1985-12-24 AU AU51626/85A patent/AU596088B2/en not_active Ceased
- 1985-12-27 JP JP29337585A patent/JPS61225190A/ja active Pending
- 1985-12-30 CA CA000498801A patent/CA1313864C/en not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4342826A (en) * | 1980-02-04 | 1982-08-03 | Collaborative Research, Inc. | Immunoassay products and methods |
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| JPS63195569A (ja) * | 1987-02-03 | 1988-08-12 | アボット・ラボラトリーズ | アンフェタミンおよびメタンフェタミンの蛍光偏光イムノアッセイ法 |
| JPS6459157A (en) * | 1987-08-31 | 1989-03-06 | Nissui Seiyaku Co | Immunological analysis and reagent for immunological analysis using the same |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP0187022A2 (en) | 1986-07-09 |
| EP0187022B1 (en) | 1991-05-29 |
| AU5162685A (en) | 1986-07-03 |
| AU596088B2 (en) | 1990-04-26 |
| DE3583015D1 (de) | 1991-07-04 |
| CA1313864C (en) | 1993-02-23 |
| EP0187022A3 (en) | 1986-10-29 |
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