JPH07505634A

JPH07505634A - 新規オピエート誘導体，タンパクおよびポリペプチドオピエート誘導共役体および標識

Info

Publication number: JPH07505634A
Application number: JP5517657A
Authority: JP
Inventors: ビューチラー、ケネス・フランシス
Original assignee: バイオサイト・ダイアグノスティックス・インコーポレイテッド
Priority date: 1992-04-06
Filing date: 1993-03-31
Publication date: 1995-06-22
Also published as: EP0635019A1; AU3941893A; CA2132342A1; DE69325096T2; WO1993020079A1; ATE180484T1; DE69325096D1; EP0635019B1; US5610283A; EP0635019A4

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】新規オピエート誘導体、タンパクおよびポリペプチドオピエート誘導共役体およ本発明は、体液試料中のオピエートの代謝産物を選択的に検出するための、イムノアッセイを含む、リガンドレセプターアッセイの分野に関する。更に詳しくは本発明は、オピエートおよびオピエート代謝産物に対する抗体の調製およびイムノアッセイ処理において用いるための新規オピエート誘導体、およびオピエート誘導体共役タンパクおよびポリペプチド、および標識の調製法に関する。

発明の背景オピエートはケシ科植物によって産生されるアルカロイドの１クラスである。

ケシ科植物により産生される最も一般的なオピエートはモルヒネおよびコディンである。これらのオピエート類は何世紀にもわたって痛みを抑制するのに使用されているが、連続的な使用により中毒症となる。モルヒネの合成類縁体もまた、天然オピエートの麻酔性および中毒性を示し、これにはヘロイン（ジアセチルモルヒネ）、ヒドロモルホン（ｈｙｄｒｏｍｏｒｐｈｏｎｅ）、ヒドロコドン（ｈｙｄｒｏｃｏｄｏｎｅ）、レポルファノール（ｌｅｖｏｒｐｈａｎｏｌ）、オキシコドン（ｏｘｙｃｏｄｏｎｅ）およびオキシモルホン（ｏｘｙｍｏｒｐｈｏｎｅ）が含まれる。オピエート、特にヘロインおよびモルヒネの不法使用の結果、オピエートの中毒症を監視し、治療するためにオピエートの代謝産物を迅速に検出するための抗体および診断薬が、医療上必要となる。

このクラスのオピエートおよびオピエート代謝産物の抗体の調製には、オピエート誘導体を合成し、該誘導体を抗原性のポリペプチドまたはタンパクに共有結合で結合させる必要がある。更に、オピエート誘導体は、種々のポリペプチド類、タンパク類、または標識類に共有結合で結合し、抗体のスクリーニングおよびイムノアセイ処理において利用される。オピエート誘導体は、測定するオピエート代謝産物のミミック構造であるべきである。従って、タンパク類、ポリペプチド類または標識類に共有結合で結合するタイプのオピエート誘導体の選択および合成が焦点となっている。加えて、オピエート誘導体は、安定かつ水溶性である必要がある。オピエート化合物および、免疫化およびイムノアッセイのための共役体については米国特許第３．７０９，８６８号、３．８５２，１５７号、３．８６本発明は、オピエートおよびオピエート代謝産物の抗体の調製のため、抗原（タンパク類またはポリペプチド類）と共有結合するように合成された、新規なオピエート誘導体に関する。得られる新規な抗原は、標準的な方法により抗体の製造に用いてもよい。抗体が得られれば、当該抗体およびタンパク類、ポリペプチド類または標識類と共有結合させた新規誘導体をイムノアッセイ処理に用いてもよい。

！＾本発明において、および本明細書中に用いられている以下の語は、他に特に述べる場合を除き、以下の意味で定義される。

「薬」は、生体組織に投与したときに、自然発生的化学反応、または酵素による触媒反応、または代謝反応の結果、固有の活性を生ずる、化合物またはりガントを意味する。薬は、生体組織によって、薬誘導体に代謝されてもよい。薬およびその代謝産物の一般的な例としては、モルヒネ、バルビッール剤、テトラヒドロカンナビノール、フェンシフリジン、アンフェタミン類、メタアンフェタミン類、オピエート類、ベンゾジアゼピン類、コカイン、エストロン−３−グルクロニド、プレグナンジオール−グルクロニド、コティナイン、リセルグ酸ジエチルアミド、プロポキンフェン、メタトン、アナポリックステロイド類およびトリサイクリック−抗を薬類が挙げられる。

「′ｘ誘導体」は、連結基に共役した、リガンド誘導体、薬、薬代謝産物、または薬顛似物を意味する。

「薬代謝産物」は、生化学的または代謝的経路における、薬由来の上流または下流の化合物、または中間体を意味する。

「標識」は、信号発生成分、または信号を発生させる手段を意味するとみてよく、例えば色素や酵素が挙げられる。標識への薬誘導体の結び付きは、共有結合、吸着作用、キレート等における疎水性および／または静電結合、またはそれらの組み合わせおよび相互作用によるものであってよい。

「オピエートｊは、５員環を有するケシ科植物により産生される天然由来のアルカロイド類またはこれらのアルカロイド類の合成アナログを意味し、例としてはこれに限定されないが、モルヒネ、コディン、ヘロイン、ハイドロモルホン、ハイドロコドン、オキシモルホンおよび類似物が挙げられる。

「結合領域」は、リガンドに結合するレセプターの部分に関する分子構造を示す。更に詳しくは、結合領域は、そのアミノ酸配列が、タンパクの特定の部位を表す、天然または合成のポリペプチド、またはそのポリペプチドをコード化した核酸を示すものであり、該領域は、単独または他の領域との組み合わせで、所望のりガント／レセプター結合ペアと同様または類似した結合の特性を示す。結合活性さえ示されていれば、領域の特異的な配列や、特異的な境界は、さして重要ではない。同様に、本明細書中においては、結合活性が示されているときには、結合特性は、必然的にある範囲の親和性、親和力および特異性、およびそれら組み合わせを含む。

「連結基」は、タンパク、ポリペプチドまたは標識と、薬、または薬誘導体との間の化合物を意味する。当業者が認めるように、必須の化学的構造を完成するためには、それぞれの反応体は、必要な反応性基を有していけらばならない。そのような基の代表的な組み合わせは、アミノ基とカルボキシル基とのアミド結合形成、カルボキシル基と水酸基とのエステル結合形成、アミン基とハロゲン化アルキルとのアルキルアミノ結合形成、チオール類とチオール類のジスルフィド類形成、またはチオール類とマレイミドまたはハロゲン化アルキルのチオエーテル類形成がある。明らかに、水酸基、カルボキシル基、アミノ基およびここに示していないその他の官能性基を既知の方法により採り入れてもよい。同様に、当業者が認めるような、様々な連結基を使用してもよい。連結の構造は、薬または浸誘導体がタンパク、ポリペプチドまたは標識に結び付いて形成された安定な共有結合であったほうがよい。いくつかの場合においては、所望のリガンドとレセプターの結合特性を強化するために、連結基は、親水性であっても、疎水性であってもよい。共有結合は、リガンドと連結基が存在する溶液の状態では、安定であっ項原子（ＮＨ，０、Ｓ）からなる、分枝鎖または直鎖状化合物である。前述のように限定することなくとも、化学的に融和性のある原子の組み合わせだけが、連結基を構成することは、当業者には自明のことであろう。化学的融和性のある連結基として条件に合うものは、例えば、炭素−炭素結合との組み合わせで、アミド、エステル、チオエーテル、チオエステル、ケト、ヒドロキシル、カルボキシル、エーテル基が挙げられる。連結基を構成するようなその他の化学的融和性のある化合物を、この定義の章で示し、ここにおける内容の一部とする。

「ヒドロカルビル」は、水素およびその他の元素が結び付いた、炭素鎖からな、る有機ラジカルを示す。この語は、アルキル、アルケニル、アルキニルおよびアリール基、飽和および不飽和結合の混合物を有する基、炭素環式環を含み、またそのような基の組み合わせを含む。直鎖、分枝鎖環式構造物またはそれらの組み合わせであってもよい。

「アリール」は、共役π電子系を有する、少なくとも一つの環を有する芳香族基を示し、炭素環式アリール、複素環式アリールおよびジアリール基を含み、これらのすべては所望により置換されていてもよい。

「炭素環式アリール基」は、芳香族環上の環状原子が炭素である基を示す。炭素環式アリール基は、単環式の炭素環式アリール基、および所望により置換されたナフチル基を含む。

「単環式の炭素環式アリール」は所望により置換されたフェニルを示す。好ましくは、フェニル、または１から３の置換基で置換されたフェニルであって、置換基は、低級アルキル、ヒドロキシ、低級アルコキシ、低級アルカノイロキシ、ハロゲン、ンアノ、トリハロメチル、低級アンルアミノ、低級アミノ、または低級アルコキンカルボニルであることが好ましい。

「所望により置換されたナフチル」は、１−または２−ナフチル、または好ましくは低級アルキル、低級アルコキシまたはハロゲンで置換した１−または２−ナフチルを示す。

「複素環式アリール基」は、芳香族環上の環状原子が、１がら３の異種原子を有し、環原子の残りが炭素原子である基を示す。好適な異種原子は、酸素、硫黄、および窒素を含み、フラニル、チェニル、ピリジル、ピロリル、Ｎ−低級アルキルピロール、ピリミジル、ピラジニル、イミダゾリル等を含み、すべて所望により置換されていてもよい。

「所望により置換されたフラニル」は、２−または３−フラニル、もしくは好ましくは低級アルキルまたはハロゲンで置換された、２−または３−フラニルを示す。

「所望により置換されたピリジル」は、２−１３−もしくは４−ピリジル、または好ましくは低級アルキルもしくはハロゲンで置換された２−１３−または４− ピリジルを示す。

「所望により置換されたチェニル」は、２−もしくは３−チェニル、または好ましくは低級アルキルもしくはハロゲンで置換された２−または３−チェニルを示す。

「ジアリール」は、ここに定義した炭素環式子り−ルまたは複素環式アリールで置換されたフェニルを示し、フェニル環の結合位置はオルト、メタ、またはバラで、好ましくはパラである。ジアリールは、−Ｃ，Ｈ４−Ａｒ置換基とも表せる、ここでＡｒはアリールを示す。

「アラルキル」は、アリール基で置換されたアルキル基を示す。好適なアラルキル基は、ベンジル、ピコリル等を含み、それらは所望により置換されていてもよい。

「低級」は、ここでは有機ラジカル類または化合物類に関して、それぞれ７以下、好ましくは４以下、より好ましくは１または２の炭素原子と定義される。このような基は、直鎮であっても、分枝鎖であってもよい。

（ａ）「アルキルアミノ」、（ｂ）「アリールアミノ」および（Ｃ）「アラルキルアミノ」の語は、それぞれ−ＮＲＲ’で表される基を示し、（ａ）では、Ｒはアルキル、およびＲｏは水素またはアルキルであり；　（ｂ）では、Ｒはアリール、およびＲｏは水素またはアリールであり：　（Ｃ）では、Ｒはアラルキル、およびＲｏは水素またはアラルキルである。

「アシル」は、ヒドロカルビル−〇〇−またはＨＣＯ−を示す。

「アシルアミノ」は、ＲＣＯＮＣＲ）−および（ＲＣＯ，Ｎ−をそれぞれ示し、Ｒは、それぞれ独立して、水素またはヒドロカルビルである。

「ヒドロカルピロキンカルボニロキシ」は、ＲＯＣ（０）Ｏ−の基を示し、Ｒは、ヒドロカルビルである。

「低級カルボアルコキンメチル」または「低級ヒドロ力ルビロキンカルポニメチル」は、ヒドロカルビル−〇Ｃ（０）ＣＨ２−を示し、ヒドロカルビル基は、１０以下の炭素原子を含む。

「カルボニル」は、−Ｃ（０）−を示す。

「カルボキシアミド（ｃａｒｂｏｘａｍｉｄｅ）Ｊまたは「カルボキシアミド（ｃａｒｂｏｘａＬＩｉｄｏ）Ｊは、−ＣＯＮＨ２を示し、それぞれのＲは、それぞれ独立して水素またはヒドロカルビルである。

「低級ヒドロカルビル」は、炭素原子が１０以下のヒドロカルビル基を示す。

「アルキル」は、直鎖、分枝鎖および環式基を含む、飽和脂肪族基を示す。

「アルケニル」は、少なくとも一つの炭素−炭素の二重結合を含む、不飽和ヒドロカルビル基を示し、直鎖、分枝鎖および環式基を含む。

「アルキニル」は、少なくとも一つの炭素−炭素の三重結合を含む、不飽和ヒドロカルビル基を示し、直鎖、分枝鎖および環式基を含む。

「ヒドロカルビロキシカルボニルアミノ」は、ウレタン、ヒドロカルビル−〇− ＣＯＮＲ−を示し、Ｒは、水素またはヒドロカルビルであり、ヒドロカルビルは、それぞれ独立して選択される。

「ジ（ヒドロカルビロキシカルボニル）アミン」は、（ヒドロカルビル−〇−Ｃ ○）２Ｎ−を示し、それぞれのヒドロカルビルは、独立して選択される。

「ヒドロカルビルアミノ」は、−ＮＲＲ’を示し、Ｒは、ヒドロカルビルであり、Ｒｏは、ヒドロカルビルまたは水素から独立して選択される。

「メルカプト」は、ＳＨまたはその互変体である。

「メチレン」は、−ＣＨ２−を示す。

「アルキレン」は、２価の直鎖または分枝鎖飽和脂肪族ラジカルを示す。

「オキシ」は、−〇−（酸素）を示す。

「チオ」は、−８−（硫黄）を示す。

「ジスルフィド」は、−５−Ｓ−を示す。

「チオエステル」は、−５−Ｃ−を示す。

「チオエーテル」は、Ｃ−５−Ｃを示す。

「アナライト（Ａｎａｌｙｔｅ）Ｊは、検出および／または測定して調べようとする、天然または合成由来の物質を意味し、かかる物質は、該アナライトと特異的な相互作用をする、特定の結合パートナ−を有する。

「リガンド」は、リガンドレセプターの結合パートナ−を意味する。検出をした場合に、試料中にアナライトの存在が推定されるであろう物質は、限定なしに、ハブテン類、ホルモン類、抗原類、抗体類、デオキシリボ核酸（ＤＮＡ）　、リポ核酸（ＲＮＡ）　、前記の材料の代謝産物、および天然物または合成物のその他の物質を含み、診断上の興味があるものであってもよ（、特定の結合パートナ −１すなわちリガンド−レセプターアッセイのりガントレセプター等を有している。

「レセプター」は、一般的には抗体、またはその断片を意味するが、アッセイの目的次第ではその他のりガントであってもよいリガンドと結合し得るレセプターを意味する。

「リガンド−レセプターアッセイ」は、リガンドと、そのリガンドと特異的に相互作用をするりガントレセプターとの複合体の形成によって検出されるアナライトのアッセイを意味する。リガンド−レセプターアッセイは、拮抗的であっても、非拮抗的であってもよく、また、均−系であっても、非均−系であってもよい。

「免疫原」は、化学的または生化学的構造、決定素（ｄｅｔｅｒｍｉｎａｎｔ）　、抗原またはその一部で、免疫反応を惹起するものであり、例えばポリリジン、牛血清アルブミン、および鍵穴透明ヘモンアニン（ＫＬＨ）等を含むものを意味する。

「抗原性」は、化学的または生化学的構造、決定素、抗原またはその一部で、抗体の構造を含めることのできるものを意味する。

図面の説明図１は、実施例１．２および３の化合物の構造式である。

図２は実施例４〜７の化合物の構造式である。

図３は実施例９〜１２の化合物の構造式である。

図４は実施例１３〜１６の化合物の構造式である。

好ましい態様の詳細な説明本発明は、抗体の生成および一般にはイムノアッセイ処理に用いる、新規化合物に関する。本化合物は、モルヒネおよびモルヒネ代謝産物の誘導体である。オピエートおよびオピエートアナログを、タンパク、ポリペプチドまたは標識と共有結合させるため、ツルーモルヒネまたはツルーモルヒネ誘導体上の３°−ヒドロキシまたは窒素が修飾される。タンパク、ポリペプチドまたは標識と、オピエート誘導体の間の連結基は浸誘導体およびレセプターの結合を誘導するためにデザインされる。例えば、誘導体はタンパク質、ポリペプチドまたは標識の表面から、誘導体自体がレセプターの結合領域に存在できるように置き換えられてもよい。

一般に、本発明の化合物は、式［式中、Ｒｏは、以下の群より選ばれる連結基である。

Ｒは、（式中、Ａは、１〜２０の炭素、および０〜１０の異項原子（ＮＨ，０ＳＳ）の連結基であり、分枝鎖でも直鎖でもよい）］で示される構造を有する化合物である。

更に、免疫原性タンパクもしくはポリペプチド分子、またはタンパクもしくはポリペプチド分子または標識を、該分子または標識へのアミド、ジスルフィド、チオエーテルまたはエステル結合を介して誘導した化合物の一般的構造は以下の式：［式中、Ｐは、抗原性タンパクもしくはポリペプチド、またはタンパク、ポリペプチドもしくは標識であり：Ｘは、少なくとも１で、１００より大きくはなく：Ｒ゛は、 −Ｈ，−ＣＨ，、−ＣＣＨ，、−ＣＨ，ＣＨ。

であり、Ｒは、以下群より選ばれる連結基である（式中、Ａは、１〜２０の炭素、およびＯ〜１０の異項原子（ＮＨ，○、Ｓ）の連結基であり、分枝鎖でも直鎮でもよい：Ｂは、最終的にタンパク、ポリペプチドまたは標識に連結する、以下の基からなる群より選ばれる連結基である・式中、Ｚは、１〜２０の炭素、および０〜１０の異項原子（ＮＨ，０１Ｓ）の連結基であり、分枝鎖でも直鎖でもよい））コにより示される。

さらに、本発明の化合物は一般に、式。

［式中、Ｒｏは −Ｈ，−ＣＨ，、ＣＨ，Ｃ−１ＣＨ２ＣＨ２−であり、Ｒは、Ｒ”は以下の群より選ばれる連結基である：（式中、Ａは、１〜２０の炭素、および０〜１０の異項原子（ＮＨ，Ｏ，Ｓ）の連結基であり、分枝鎖でも直鎖でもよい。）］で示される構造を有してよい。

更に、免疫原性タンパクもしくはポリペプチド分子、またはタンパクもしくはポリペプチド分子または標識を、該分子または標識へのアミド、ジスルフィド、チオエーテルまたはエステル結合を介して誘導した化合物の一般的構造は以下の式［式中、Ｐは、抗原性タンパクもしくはポリペプチド、またはタンパク、ポリペプチドもしくは標識であり。

Ｘは、少なくとも１で、１００より大きくはなく。

Ｒｏは ○ −Ｈ，−ＣＨ３、−ＣＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ。

であり、Ｒは、Ｒ”は以下の群より選ばれる連結基である：（式中、Ａは、１〜２０の炭素、および０〜１０の異項原子（ＮＨＳＯ，Ｓ）の連結基であり、分枝鎖でも直鎖でもよい：Ｂは、最終的にタンパク、ポリペプチドまたは標識に連結した、以下の基からなる群より選ばれる連結基である。

式中、Ｚは、１〜２０の炭素、および０〜１０の異項原子（Ｎ８％０ＳＳ）の連結基であり、分枝鎖でもＩＬ鎖でもよい。））］により示される。

本発明において、特に好ましい化合物（最良の形態）は、以下の式：［式中、Ｒｏは −Ｈ，ＣＨ，Ｃ−１ＣＨ３ＣＨ２− Ｒは以下の群から選ばれる連結基である：］で示される。

特に好ましい（最良の形態の）、免疫原性タンパクもしくはポリペプチド分子、またはタンパクもしくはポリペプチド分子または標識を、該分子または標識へのアミド、ジスルフィド、チオエーテルまたはエステル結合を介して誘導した化合物の構造は以下の式。

［式中、Ｐは、抗原性タンパクもしくはポリペプチド、またはタンノくり、ポリペプチドもしくは標識であり：Ｘは、少なくとも１で、１００より大きくはなく：Ｒ°は、Ｚは、１〜２０の炭素、および０〜１０の異項原子（ＮＨ，０１Ｓ）の連結基であり、分枝鎖でも直鎖でもよい。〕により示される。

本発明の特に好ましい（最良の形態の）化合物としては以下の式：［式中、Ｒｏは、 −Ｈ，ＣＨ，Ｃ−１ＣＨ３ＣＨ！− Ｒは以下の群より選ばれる連結基である。

］により示される化合物を含んでもよい。

さらに加えて、特に好ましい（最良の形態の）免疫原性タンパクもしくはポリペプチド分子、またはタンパクもしくはポリペプチド分子または標識を、該分子または標識へのアミド、ジスルフィド、チオエーテルまたはエステル結合を介して誘導した化合物の構造は以下の式。

［式中、Ｐは抗原性タンパクもしくはポリペプチド、またはタンパク、ポリペプチドもしくは標識であり。

Ｘは少な（とも１で１００より大きくな（、Ｒ′は、 −Ｈ，、ＣＨ３Ｃ−５ＣＨ３ＣＨ２− であり、Ｚは、１〜２０の炭素、および０〜１０の異項原子（ＮＨ，０１Ｓ）の連結基であり、分枝鎖でも直鎖でもよい。］により示される。

特に興味深いのは、３°−および６′−位の両方のアセチルエステル基をそれぞれエトキン誘導体で置換することにより合成されたオピエート誘導体である。これらのエーテルオピエート誘導体は、エーテル部分が水溶液中でエステルと比べて加水分解されにくいため、類似のエステル基より好ましい。さらに、計測しようとする代謝産物の構造のミミソクである化合物を合成する目的には、ヘロインの３゛−および６′−位のアセチルエステル基の大きさとエチルエーテル基はほぼ同じである。ヘロインの代謝においてｚ３°−アセチルは最初に加水分解されて３−°ヒドロキシ基となり、６′−アセチルモルヒネが生成する（ジェイ・アナル゛トキソクス（Ｊ、　Ａｎａｌ、　Ｔｏｘ、　）　１旦、１〜７（１９９１）参照）。６゛−アセチルモルヒネはさらに代謝されてモルヒネとなる。従って、ヘロインの濫用をモニターす°るには６′−アセチルモルヒネに対する抗体の調製が必要である。しかしながら、６゛−アセチル基は水溶液中では加水分解されやすい。さらに、６゛−アセチルモルヒネに対する特異性の高い抗体が要求される場合には、抗原性６°−アセチルモルヒネ複合体による免疫化によっては特異性の高い６゛−アセチルモルヒネ抗体が得られない、というのは免疫源上のオピエート誘導体の６°−アセチルエステルは、免疫操作の間、動物の体内でさらに代謝されるか、もしくは非酵素的過程において単に加水分解されてそれぞれモルヒネ誘導体となるがらである。６゛−エトキシモルヒネ誘導体はこの限界を越えるために合成されたものである、というのは抗体が、安定な６゛−エトキシモルヒネ誘導体、すなわち６゛−アセチルモルヒネのミミックに対して生成されるからである。

本発明の化合物は、化合物とタンパク、ポリペプチドまたは標識の共有結合が穏やかな条件下、例えばｐＨ７のタンパク溶液、において容易に生じるよう、チオール類またはチオールエステル類として合成される。薬物誘導体とチオールまたはチオールエステルとの間の連結基は様々な長さを有していてよい。例えば、モルヒネの３−ヒドロキシ基またはツルーモルヒネの２級窒素が直接、様々な鎖長のアルキルハライドカルボン酸、例えば４−ブロモブチル酸と反応し、そして続いてホモンステインチオラクトンのごときアミノチオールエステルと反応する。

また、上述の官能基は様々な鎖長のカルボン酸チオールエステル、例えばアセチルチオプロピオン酸と反応する。得られた誘導体のチオールエステルは、例えば０、ＯＩＭ〜０．１Ｍ水酸化カリウム等、希薄塩基溶液内で加水分解されて、マレイミド、アルキルハライドまたはチオールのごときチオール反応性基と反応するチオール基を生じる。チオール反応性基は一般にタンパク、ポリペプチドまたは標識上にあるが、チオール薬物がチオール反応性化合物と反応した後に、タンパク、ポリペプチドまたは欅識上へ組み入れてもよい。

タンパク、ポリペプチドまたは標識を、分子中にマレイミドまたはハロゲン化アルキルを組み入れている試薬と反応させる。これらの試薬およびその使用方法は、イリノイ州ロックフォード（Ｒｏｃｋｆｏｒｄ）のピアス（Ｐｉｅｒｃｅ）より入手できる。例えば、マレイミド基をタンパク、ポリペプチド、または標識に組み入れるためには、スクシンイミジル−４−（Ｎ−マレイミドメチル）シクロヘキサン−１−カルボキンレート（ＳＭＣＣ）　、スクシンイミジル−４−（ｐ −マレイミドフェニル）ブチレート（ＳＭＰＢ）、またはｍ−マレイミド−ベンゾイル−Ｎ−ヒドロキメスクシンイミドエステル（ＭＢＳ）が使用できる。ハロゲン化アルキルを、タンパク、ポリペプチドまたは標識に組み入れるためには、同じくピアスの、Ｎ−スクシンイミジル（４−ヨードアセチル）アミノベンゾアート（ＳＩＡＢ）が、使用できる。薬チオールが、タンパク、ポリペプチドまたは標識と反応する前に、チオール反応性化合物と反応できるならば、薬チーオルと反応させる前に、マレイミド、ハロゲン化アルキルまたはチオール等のチオール反応基を、タンパク、ポリペプチドまたは標識中に組み入れてもよい。また、オピエートチオール誘導体の共有結合のために、種々の長さのビス−マレイミド化合物類を、タンパク類、ポリペプチド頚または標識を含むチオールと反応させてもよい。逆に、ビス−マレイミド化合物を、チオール誘導体と反応させて、続いてタンパク、ポリペプチドまたは標識を含むチオールと反応させてもよい。普通、ビス−マレイミド類は、ピアスの、ビス−マレイミドヘキサン、ミズリー州、セントルイスのシグマ化学社（Ｓｉｇｍａ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｃｏ、　）の、Ｎ、　Ｎ’−ビス（３−マレイミドプロピオニル）−２＝ヒドロキシ−１，３ −プロパンンアミン、ウィスコンシン州、ミルウォーキーのアルドリッチ化学社（＾１ｄｒｉｃｈ　Ｃｈｅｗ、　Ｃｏ、　）の、１．１−（メチレンジー４，１ −フェニレン）−ビスマレイミドである。チオールオピエート誘導体はまた、誘導体を分子中に組み込む手段として、ポリペプチド、タンパクまたは標識を含むチオールと、ジスルフィドを形成し得る。

抗体の生成のために、浸誘導体、免疫原、およびタンパクおよびポリペプチド共役体を用いること、並びにそのイムノアッセイ処理への使用は、例えば、米国特許第５．０２８．５３５号、および第５．０８９．３９１号に記載されている。

！施撚硫酸モルヒネ（２，０ｇ、６Ｘ１０−”モル）および炭酸カリウム（３ｇ、２．２ｘ１０−２モル）を１００ｍ１のエチルアルコールへ添加した。ブロモ酢酸（１，０ｇ、７．２Ｘ１０−３モル）を添加し、溶液をかきまぜながら２時間、還流した。

溶液が室温へ冷却されるまで置き、３．０ｍｌの塩酸（３７％）を添加した。溶液を１０分間還流した。溶液を室温まで冷却させ、溶媒を真空下で除いた。残渣ヘアセトン（８０ｍｌ）を添加し、懸濁液を１０分間撹拌した。沈殿を濾別し、２０ｍ１のアセトンで洗浄した。濾液を真空下で蒸発させた。塩酸（６Ｎ、５０ｍ１）を残渣へ添加し、溶液を室温で２時間撹拌した。溶媒を真空下で除き、水（４０ｍｌ）を添加して残渣を溶解させ、溶媒を真空下で除いた。水の添加および真空下のエバポレーションを２回以上繰り返した。アセトン（５０ｍｌ）を残渣へ添加し、懸濁液を油状物質が固化するまでかきまぜた。アセトンをデカンテーションで除いた。アセトン（９０ｍ　ｌ　）を添加し、デカンテーションで除きモしてアセトン（９０ｍｌ）を再び残渣へ添加した。アセトンスラリー内の沈殿をガラス製の棒で砕き、懸濁液を濾過した。沈殿を１０ｍ１のアセトンで洗浄し、真空下で乾燥させた。回収された生成物３’−０−カルボキシメチルモルヒネ塩酸塩は１．８９ｇであった３゛−〇−カルボキシメチルモルヒネ塩酸塩（１，８９ｇ、５ｘｌＯ−３モル）、ｄｌ−ホモシスティンチオラクトン塩酸塩（０，７５ｇ、４．９ｘｌＯ−３モル）およびピリジン（１，２ｍｌ、１．５Ｘ１０−”モル）を３０ｍ１の無水ジメチルホルムアミドへ溶解させた。１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３− エチルカルボジイミド塩酸塩（１，１ｇ、５．７ｘｌＯ”モル）を添加し、得られた溶液をアルゴン雰囲気下、室温にて１時間かきまぜた。溶媒を真空下で除き、水（８０ｍｌ）を残渣へ添加した。水溶液を２回、合計で１００ｍ１のメチレンクロライドにて抽出した。炭酸ナトリウム飽和溶液（１ｍｇ）を水相へ添加してｐＨが７となるようにした。水溶液はクロロホルム（３００ｍｌ）にて３回抽出し、混合クロロホルム相を水（８０ｍｇ）で抽出した。クロロホルムを６ｇの硫酸マグネシウムにて乾燥させ、濾過した。クロロホルムを真空下で除き、残渣を３回、水（３００ｍｌ）と共に粉砕した。エチルアルコール（１００ｍｌ）を、残渣を溶解するために添加し、真空下で除いた；この手順を２回繰り返した。

メチレンクロライド（３００ｍｌ）を残渣へ添加し、懸濁液を４時間撹拌し、その後濾過した。

メチレンクロライドを真空下で除去し、エチルアセテート（６０ｍｇ）をフラスコへ添加して残渣を溶解させた。塩酸（ＩＭ）のジエチルエーテル溶液（３ｍｇ）をこの溶液へ添加すると白色沈殿が生成した。沈殿を濾別し、エチルアセテートで洗浄した。沈殿を真空下で乾燥し、標題の化合物０．９７　ｇを回収した。

実施例３３−０−［２−（ンステイン）−アセトアミド］−モルヒネの合成３−０−［２ −（２−アミノ−４−チオブタン酸チオラクトン）−アセトアミド］−モルヒネ（０，０１ｇ、２．１ｘｌＯ”モル）を０．８３５ｍ　ｌのジメチルホルムアミド／水（７０／３０、Ｖ　／　Ｖ　）へ溶解した。水酸化カリウム（０，２０９ｍ１、ＩＮ）を添加し、溶液を５分間室温にＷいた。リン酸カリウム緩衝液（０，３ｍｇ、０．５Ｍ、　ｐＨ７）を直接添加し、溶液をｐＨ７−７，５となるよう塩酸（ＩＮ）にて調節した。溶液中の標題の化合物は、溶液中に遊離しているかまたはタンパク質、ポリペプチドまたは標識に結合しているマレイミド、アルキルハライドまたはチオール等のチオール反応性基と反応させるのにそのまま用いた。

実施例４３−０−　［２−（２−アミノ−４−チオールブタン酸チオラクトン）アセトアミョニ±二毀１ヱたと炊竺乙呻ｌ舌［ｌ丸ム目止旦忙ｆ旦−ユ至倉惑モルヒネ−ＨＣＴＬ　（２４ｍｇ、５ｘｌＯ−’モル）を氷酢酸（１ｍｇ）へ溶解し、硫酸（９８％、１μｌ）を添加したｉ反応物は５０℃にて４日間加熱した。溶媒は真空下で除き、白色固体を水に溶解し、ｌＸ２５ｃｍのヴイダブク（Ｖｙｄａｃ）０１８カラムにて、２０ｍＭリン酸カリウム（ｐＨ７〜７．５）から１００％メタノールへの５０分間の線状グラジェントを用い、流速２ｍｌ／分にて精製した。

生成物は２５〜３２分で溶出する。このフラクションを真空下で蒸発させ、残渣をエチルアルコール（５ｍｇ）と共に粉砕し、濾過し、濾液を真空下で蒸発させて１５．５ｍｇの標題の化合物を得た。

６−アセチルモルヒネ−ＨＣＴＬ　（０，３ｍｇ、４．８ｘ１０−７モル）を０．０２５ｍ１のジメチルホルムアミド／水（７０／３０、Ｖ／Ｖ）内へ溶解した。水酸化カリウム（０，００６ｍ１．ＩＮ）を添加し、溶液を室温で２分間放置した。

リン酸カリウム緩衝液（０，１ｍｇ　０．５Ｍ、ｐＨ７）を直接添加した。溶液中の標題の化合物は、溶液中に遊離しているかもしくはタンパク、ポリペプチドまたは標識と結合している、マレイミド、アルキルハライドまたはチオールのごときチオール反応性基と反応させるのに直接用いた。

モルヒネ水和物（１，４２ｇ、４．６８ｘｌＯ−”モル）の無水テトラヒドロフラン（５０ｍｇ）溶液を２０分間かけて、窒素雰囲気下、氷／水槽内へ保持した水酸化カリウム（１，７５ｇ、４．３６Ｘ１０−”モル）を無水テトラヒドロフランへ懸濁した懸濁液を撹拌している上へ滴下した。懸濁液をアルゴン雰囲気下、氷／水檀内で６時間撹拌し、その後室温まで暖めた。ヨウ化エチル（０，７２ｍＬ９Ｘ１０−”モル）を添加し、懸濁液をアルゴンの存在下、室温で１時間撹拌した。

懸濁液を氷／水上で冷却し、水（１０ｍｇ）を懸濁液へ滴下し、続いて塩酸（ＩＮ、５０ｍ１）を滴下した。溶媒を真空下で除き、水（５０ｍｇ）を残渣へ添加して懸濁液を濾過した。水性濾液を２回、クロロホルム（４０ｍｇ）にて抽出した。水相へ塩酸（６Ｎ、５ｍ１）を処理してｐＨを７とした。水相はその後１０回クロロホルム（４００ｍ　ｌ　）にて抽出した。混合クロロホルム相を硫酸マグネシウムにて乾燥させ、濾過し、溶媒を真空下で除いた。標題の化合物（４３０ｍｇ）をうすい茶色のガラス状固体として回収した。

実施例７６−０−エトキシ−ツルーモルヒネの合成６−ｏ−二トキ１モルヒネ（０，１３ｇ１４×１Ｏ−４）、クロロホルム（１０ｍｇ）に溶解し、重炭酸カリウム（０，６１ｇ１６ｘｌＯ−３モル）およびフェニルクロロホルメート（０，３５ｍ１．２．８Ｘ１０−３モル）を添加した。溶液を撹拌しながら２時間還流し、その後さらに重炭酸カリウム（０，４３１ｇ、６ｘｌＯ−’モル）およびフェニルクロロホルメート（０，３５ｍ１．２．８Ｘ１０−”モル）を添加した。溶液をさらに２時間還流した。反応混合物を室温まで冷却し、溶液を濾過し、濾液を真空下でエバポレーションした。残渣オイルへアルゴンガスを吹き込み、氷／水槽上で冷却し、アリールアルコール（０，４４ｍ１６．４Ｘ１０−”モル）を滴下して処理し、その後ヒドラジン処理（１，５１ｍ１，４．８Ｘ１０−”モル）を行った。溶液はその後アルゴンの下で７時間還流した。溶液を室温まで冷却し、水（１ｍｇ）を添加し、溶媒を真空下で除いた。残漬を塩酸（２Ｎ）にてｐＨが３になるまで処理した。水溶液はジエチルエーテル（２０ｍ　ｌ　）にて２回抽出した。水酸化アンモニウム（３０％）を水相へｐＨが９になるよう添加し、溶液を３回クロロホルム（６０ｍｇ）にて抽出した。結合したクロロホルム抽出物を硫酸マグネシウムにて乾燥させ、濾過し、真空下でエバポレーションを行い１０１ｍｇの標題の化合物を得た。

実施例８２−（２−アミノ−４−チオールブタン酸チオラクトン）ブロモアセトアミド（ブロモアセチル＝ＨＣＴＬ）ブロモ酢酸（１，０ｇ、７．２ｘｌ（Ｉ３モル）、ｄｌ−ホモンステインチオラクトン塩酸塩（１１ｇ、７．２Ｘ１０−”モル）およびピリジン（１，２ｍｇ、１．５Ｘ　１０”モル）を無水ジメチルホルムアミド（３６ｍｇ）に溶解し、その後１−（３−ジメチル−アミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（１，５２ｇ、７．９ｘｌＯ−”モル）を添加した。反応混合物は室温で１８時間撹拌した。

溶媒を真空下で除き、エタノール（１０ｍｇ）を添加して残渣を溶解させ、その後エタノールを真空下で除いた。エタノール（１０ｍｇ）を再度残渣を溶解するために添加し、真空下で除いた。水（２０ｍｇ）をこのオイルへ添加し、水溶液を　。

３回メチレンクロライド（４５ｍｇ）にて抽出した。混合有機抽出物を無水硫酸マグネシウムにて乾燥させた。溶液を濾過し、溶媒を真空下で除き、透明なオイルを得た。ジエチルエーテル（５ｍｇ）を添加し、得られた沈殿を集め、ガラス製のじょうご上で洗浄した。沈殿を真空下で乾燥させ、１．０ｇの標題の化合物を回収した。

６−エトキシ−ツルーモルヒネ（０，１ｇ、３．３Ｘ１０”モル）およびブロモアセチル−ＨＣＴＬ　（０，０８３ｇ、３．５ｘｌＯ”モル）を無水ジメチルホルムアミド（３ｍｇ）へ溶解した。炭酸カリウム（０，０５５ｇ、４ｘｌＯ−’ モル）を添加し、溶液を室温で２３時間撹拌した。溶媒を真空下で除き、残渣をエチルアセテート内で粉砕し、ｉ！！過した。濾液をジエチルエーテルに溶解した塩酸（ＩＮ）にてｐＨ２にまで酸性化した。白色沈殿をガラス製じょうご上で回収し、真空下で乾燥させた。回収した標題の化合物は１００ｍｇであった。

６−ニトキ／−Ｎ−ＨＣＴＬ−モルヒネ（１０ｍｇ、２Ｘ１０−’モル）を０゜９８ｍ１のジメチルホルムアミド／水（７０／３０、Ｖ／Ｖ）へ溶解した。水酸化カリウム（０，０２ｍ１．１ＯＮ）を添加し、溶液を室温で５分間放置した。

リン酸カリウム緩衝液（０，２ｍｇ、０．５Ｍ、　ｐＨ７）を直接添加し、溶液をｐＨ７〜７．５に塩酸（ＩＮ）にて調整した。溶液中の標題の化合物を、溶液中に遊離しているかまたはタンパク、ポリペプチドまたは標識に結合しているマレイミド、アルキルハライドまたはチオールのごときチオール反応性基と反応させるためにそのまま用いた。

実施例１１３−○−［２−（２−アミノ−４−チオールブタン酸チオラクトン）−アセトアミドゴー６−０−エトキソーＬ）の合成６−０−エトキシモルヒネ（０．１３ｇ，４ｘｌＯ″４モル）、ブロモアセチル −ＨＣＴＬ　（０．１９ｇ，８ｘｌＯ”モル）および粉末炭酸カリウム（０．　１１　ｇ。

８Ｘ１０”モル）を無水ジメチルホルムアミド（４ｍｌ）へ添加し、溶液をアルゴン雰囲気下、室温にて２１時間撹拌した。溶媒を真空下で除き、残渣を２回エチルアセテート（３０ｍｌ）内で粉砕した。エチルアセテート溶液は水（３０ｍｌ）にて４回抽出し、無水硫酸マグネシウムにて乾燥させ、濾過した。エチルアセテートを真空下で除き、再びエチルアセテート（１５ｍｌ）へ溶解し、塩酸（ＩＮ）のエチルエーテル溶液にてｐＨ２まで酸性化させた。ベージュの固体が沈殿し、これを濾別しそしてエチルアセテートにて洗浄した。粗生成物を水（０．８ｍ１）Ｉ，−溶解し、ヴイダック（Ｖｙｄａｃ）ＩＸ２５ｃｍ，逆相Ｃ１８カラム上で２０ｍＭのリン酸カリウム（ｐＨ７）から１００％メタノールの８０分間の線状グラジェントを用いて精製した。精製物は５２〜５５分の間に溶出され、このフラクションをまとめ、真空下で溶媒を除去した。残渣をエタノール（１００％、２０ｍ１）内で粉砕し、濾過した。エタノールを真空下で除き、残渣をエチルアセテート（１０ｍｌ）と共に粉砕し、化合している有機溶液を塩酸（ＩＭ）のエチルエーテル溶液にてｐＨ２まで酸性化した。溶媒を真空下で除き、生成物を真空下で乾燥させた。標題の化合物（１２ｍｇ）をオフホワイトの固体として回収した。

実施例１２３−０−［２−（／スティン）−アセトアミド］　−６−０−エトキシ−モルヒネ６−エトキシジメチルホルムアミド／水（８０／２０，ｖ／ｖ）−＼溶解させた。水酸化カリウム（０．０２ｍｌ、１ＯＮ）を添加し、溶液を室温で３０秒間装いた。リン酸カリウム緩衝液（０．３ｍｌ，０．５Ｍ，ｐＨ７）を直接添加し、塩Ｍ　（ＩＮ）Ｉ：ｒ溶液番ｐＨ７〜７．５に調節した。溶液中の標題の化合物を、溶液中に遊離しているかまたはタンパク、ポリペプチドまたは標識と結合している、マレイミド、アルキルハライドまたはチオールのごときチオール反応性基と反応させるのにそのまま用いた。

ツルーモルヒネ（０．３ｇ，１ｘｌＯ”モル）およびブロモアセチル−ＨＣＴＬ（０．２４８ｇ、１．０４Ｘ１０−’モノりをジメチルホルムアミド（１０ｍｌ）へ添加し、次に無水炭酸カリウム（０．１５ｇ，１．１ｘｌＯ−３モル）を添加した。

反応物を５０℃で２４時間撹拌した。溶液を濾過し、溶媒を真空下で除いた。黄色オイルをメチレンクロリド（２０ｍｌ）と共に粉砕し、沈殿物を濾別し、メチレンクロリドにて洗浄した。化合物は真空下で乾燥し、０．２５ｇの標題の化合物を回収した。

Ｎ−ＨＣＴＬ−モルヒ＊　（９．３ｍｌ、２×１０−５モル）を０．９８ｍｌのジメチルホルムアミド／水（７　０／３　０、Ｖ　／　Ｖ　）内へ溶解した。水酸化カリウム（０．０２ｍｌ、ＩＯＮ）を添加し、溶液を室温で２分間室いた。

リン酸カリウム緩衝液（０．２ｍｌ、０．５Ｍ，ｐＨ７）を直接添加し、溶液を塩酸にてｐＨ７〜７．５に調整した。溶液中に遊離しているかまたはタンパク、ポリペプチドまたは標識と結合している、マレイミド、アルキルハライドまたはチオールのごときチオール反応性基と反応させるのに、溶液中の標題の化合物をそのまま用いＩこ。

６−０−アセチル−Ｎ−　［２−　（２−アミノ−４−チオールブタン酸チオラクトン）−アセトアミド］ーモルヒネ塩酸塩（６−アセチル−Ｎ−ＨＣＴＬ−モルヒネ）の合成Ｎ−ＨＣＴＬ−モルヒネ（０．１２ｇ，２．６ｘｌＯ−’モル）を氷酢酸（３．６ｍｌ）内へ溶解し、その後硫酸（０．０１３ｍｌ、９５％）を添加した。溶液を撹拌し、６日間７０℃に加熱した。溶媒を真空下で除き、２５ｍｇの残渣を０。

１Ｍリン酸カリウム（ｐＨ３）／メタノール（０．２５ｍｌ，５０１５０、Ｖ／Ｖ）へ溶解し、２０ｍＭリン酸カリウム、ｐＨ４．５にて２ｍ１７分の速度で平衡としたヴイダック（Ｖｙｄａｃ）逆相Ｃ１８カラム（ＩＸ２５ｃｍ）上にて精製した。生成物は６０％メタノールを上限とするグラジェントによって５４分に溶出された。標題の化合物は５２から５８分の間に溶出した。これらのフラクションをプールし、溶媒を真空下で除き、残渣をエタノール（１０ｍｌ）と共に粉砕した。エタノール溶液を濾過し、溶媒を真空下で除き、９．１ｍｇの標題の化合物を得た。

実施例１６６−０−アセチル−Ｎ−［（２−システィン）−ア七ドアミド］ーモルヒネの合成６−アセチルＮ−ＨＣＴＬモルヒネ（０．７ｍｇ、１．４Ｘ１０−’モル）を０。

０７ｍｌのジメチルホルムアミド／水（７　０／３　０、Ｖ　／　Ｖ　）に溶解した。水酸化カリウム（０．０１７ｍｌ、ＩＮ）を添加し、溶液を室温で２分間室いた。リン酸カリウム緩衝液（０．２５ｍｌ，０．５Ｍ，ｐＨ７）を直接添加した。溶液中に遊離しているかまたはタンパク、ポリペプチドまたは標識に結合している、マレイミド、アルキルハライドまたはチオールのごときチオール反応性基と反応させるのに、溶液中の標題の化合物をそのまま用いた。

他の態様も以下の請求の範囲に含まれる。

実施例１実施例２ＦＩＧ　ｉ。

実施例４実施例５実施例６実施例９実施例１０実施例１１実施例１２　ＦＩＧ３゜実施例１３実施例１４実施例１５フロントページの続き（５１）　Ｉｎｔ、　Ｃ１，’　識別記号　庁内整理番号ＧＯＩＮ　３３１５３　Ｇ　７０５５−２Ｊ／／　Ａ　６１　Ｋ　３９／３８５　９２８４−４ＣＩ

Claims

【特許請求の範囲】１．式： ▲数式、化学式、表等があります▼ ［式中、Ｒは、以下の群より選ばれる連結基である：▲数式、化学式、表等があります▼．▲数式、化学式、表等があります▼．▲数式、化学式、表等があります▼▲数式、化学式、表等があります▼．▲数式、化学式、表等があります▼． ▲数式、化学式、表等があります▼．▲数式、化学式、表等があります▼．▲数式、化学式、表等があります▼▲数式、化学式、表等があります▼．▲数式、化学式、表等があります▼Ｒ′は以下の群うちの一つである： −Ｈ、−ＣＨ３、▲数式、化学式、表等があります▼および−ＣＨ２ＣＨ３（式中、Ａは、１〜２０の炭素、および０〜１０の異項原子（ＮＨ、Ｏ、Ｓ）からなる、分枝鎖でも直鎖でもよい連結基である。）］で示される化合物。２．式： ▲数式、化学式、表等があります▼ 〔式中、Ｐは、抗原性タンパクもしくはポリペプチド、またはタンパク、ポリペプチドもしくは標識であり；Ｘは、少なくとも１で、１００より大きくはなく；Ｒ′は −Ｈ、−ＣＨ３、▲数式、化学式、表等があります▼−ＣＨ２ＣＨ■であり、Ｒは、以下の群より選ばれる連結基である：▲数式、化学式、表等があります▼ ．▲数式、化学式、表等があります▼．▲数式、化学式、表等があります▼．▲ 数式、化学式、表等があります▼（式中、Ａは、１〜２０の炭素、および０〜１０の異項原子（ＮＨ、Ｏ、Ｓ）からなる、分枝鎖でも直鎖でもよい連結基であり；Ｂは、最終的にタンパク、ポリペプチドまたは標識に連結する、以下の基からなる群より選ばれる連結基である： ▲数式、化学式、表等があります▼．▲数式、化学式、表等があります▼．▲数式、化学式、表等があります▼▲数式、化学式、表等があります▼．▲数式、化学式、表等があります▼（式中、Ｚは、１〜２０の炭素、および０〜１０の異項原子（ＮＨ、Ｏ、Ｓ）からなる連結基であり、分枝鎖でも直鎖でもよい。））］で示される化合物へ誘導された、免疫原性タンパクもしくはポリペプチド分子、またはタンパクもしくはポリペプチド分子または標識。３．請求項２記載の化合物を含有する抗原に応答するよう調製されたレセプタ４．式： ▲数式、化学式、表等があります▼ ［式中、Ｒ′は −Ｈ、−ＣＨ３、▲数式、化学式、表等があります▼、−ＣＨ２ＣＨ３であり、Ｒは ▲数式、化学式、表等があります▼．▲数式、化学式、表等があります▼．▲数式、化学式、表等があります▼．▲数式、化学式、表等があります▼であり、Ｒ′′は、以下の群より選ばれる連結基である：▲数式、化学式、表等があります▼．▲数式、化学式、表等があります▼．▲数式、化学式、表等があります▼ ▲数式、化学式、表等があります▼．▲数式、化学式、表等があります▼．▲数式、化学式、表等があります▼（式中、Ａは、１〜２０の炭素、および０〜１０の異項原子（ＮＨ、Ｏ、Ｓ）からなる、分枝鎖でも直鎖でもよい連結基である。）］で示される化合物。５．式： ▲数式、化学式、表等があります▼ ［式中、Ｐは、抗原性タンパクもしくはポリペプチド、またはタンパク、ポリペプチドもしくは標識であり：Ｘは、少なくとも１で、１００より大きくはなく；Ｒ′は −Ｈ、−ＣＨ３、▲数式、化学式、表等があります▼、−ＣＨ２ＣＨ３であり、Ｒは、 ▲数式、化学式、表等があります▼．▲数式、化学式、表等があります▼．▲数式、化学式、表等があります▼であり、Ｒ′′は以下の群より選ばれる連結基である：▲数式、化学式、表等があります ▼．▲数式、化学式、表等があります▼▲数式、化学式、表等があります▼．▲ 数式、化学式、表等があります▼（式中、Ａは、１〜２０の炭素、および０〜１０の異項原子（ＮＨ、Ｏ、Ｓ）からなる、分枝鎖でも直鎖でもよい連結基であり；Ｂは、最終的にタンパク、ポリペプチドまたけ標識に連結する、以下の基からなる群より選ばれる連結基である： ▲数式、化学式、表等があります▼．▲数式、化学式、表等があります▼．▲数式、化学式、表等があります▼▲数式、化学式、表等があります▼．▲数式、化学式、表等があります▼（式中、Ｚは、１〜２０の炭素、および０〜１０の異項原子（ＮＨ、Ｏ、Ｓ）からなる連結基であり、分枝鎖でも直鎖でもよい。））］で示される化合物へ誘導された、免疫原性タンパクもしくはポリペプチド分子、またはタンパクもしくはポリペプチド分子または標識。６．請求項５記載の化合物を含有する抗原に応答するよう調製されたレセプタ７．式： ▲数式、化学式、表等があります▼ ［式中、Ｒ′は −Ｈ、▲数式、化学式、表等があります▼、ＣＨ３ＣＨ２−であり、Ｒは、以下の群より選ばれる連結基である：▲数式、化学式、表等があります▼ ．▲数式、化学式、表等があります▼で示される化合物。８．式： ▲数式、化学式、表等があります▼ 〔式中、Ｐは、抗原性タンパクもしくはポリペプチド、またはタンパク、ポリペプチドもしくは標識であり；Ｘは、少なくとも１で、１００より大きくはなく；Ｒ′は −Ｈ、▲数式、化学式、表等があります▼、ＣＨ３ＣＨ２−であり、Ｚは、１〜２０の炭素、および０〜１０の異項原子（ＮＨ、Ｏ、Ｓ）からなる連結基であり、分枝鎖でも直鎖でもよい。〕で示される化合物へ誘導された、免疫原性タンパクもしくはポリペプチド分子、またはタンパクもしくはポリペプチド分子または標識。９．請求項８記載の化合物を含有する抗原に応答するよう調製されたレセプタ１０．式： ▲数式、化学式、表等があります▼ ［式中、Ｒ′は −Ｈ、▲数式、化学式、表等があります▼、ＣＨ３ＣＨ２−であり、Ｒは、以下の群より選ばれる連結基である：▲数式、化学式、表等があります▼ ．▲数式、化学式、表等があります▼で示される化合物。１１．式： ▲数式、化学式、表等があります▼ 〔式中、Ｐは、抗原性タンパクもしくはポリペプチド、またはタンパク、ポリペプチドもしくは標識であり；Ｘは、少なくとも１で、１００より大きくはなく；Ｒ′は、 −Ｈ、▲数式、化学式、表等があります▼、ＣＨ３ＣＨ２−であり、Ｚは、１〜２０の炭素、および０〜１０の異項原子（ＮＨ、Ｏ、Ｓ）からなる連結基であり、分枝鎖でも直鎮でもよい。］で示される化合物へ誘導された、免疫原性タンパクもしくはポリペプチド分子、またはタンパクもしくはポリペプチド分子または標識。１２．請求項１１記載の化合物を含有する抗原に応答するよう調製されたレセプター。