JPS61108384A - 新規凝集性酵母 - Google Patents
新規凝集性酵母Info
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- JPS61108384A JPS61108384A JP59230897A JP23089784A JPS61108384A JP S61108384 A JPS61108384 A JP S61108384A JP 59230897 A JP59230897 A JP 59230897A JP 23089784 A JP23089784 A JP 23089784A JP S61108384 A JPS61108384 A JP S61108384A
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- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/01—Preparation of mutants without inserting foreign genetic material therein; Screening processes therefor
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02E—REDUCTION OF GREENHOUSE GAS [GHG] EMISSIONS, RELATED TO ENERGY GENERATION, TRANSMISSION OR DISTRIBUTION
- Y02E50/00—Technologies for the production of fuel of non-fossil origin
- Y02E50/10—Biofuels, e.g. bio-diesel
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
産業上の利用分野
この発明は、優れた凝集性を有する新規酵母に関するも
のである。
のである。
近年、石油代替エネルギーとして、石油化学によらずに
得られる発酵アルコールが注目されている。これはさと
うきびやこれから採った糖蜜、さつまいも、じゃがいも
、とうもろこしなどのセルロース質またはでん粉質を原
料とし、これらを微生物の働きによって発酵させること
により製造される。
得られる発酵アルコールが注目されている。これはさと
うきびやこれから採った糖蜜、さつまいも、じゃがいも
、とうもろこしなどのセルロース質またはでん粉質を原
料とし、これらを微生物の働きによって発酵させること
により製造される。
一般にアルコール発酵では、アルコールの生産性は発酵
槽内の菌体濃度に比例する。そこで発酵槽内の菌体濃度
を高める手段として、優れた凝集性を有する酵母を用い
ることが考えられる。すなわち、酵母が優れた凝集性を
有していると、酵母の沈降速度が速くなり、そのため固
液分離が迅速かつ容易になし得る。そして例えば回分発
酵においては、発酵液を単に静置するだけで菌体を沈降
堆積させることができ、発酵液と菌体の分離を容易に行
なって菌体を再使用に供するこ°とができる。また連続
発酵においては、小径の流動部とこれの上に連設された
菌体沈降用の大径の沈降部とこれに内装された菌体沈降
部材とを主体とした塔型発酵槽を用いることにより、培
地の供給口が増大しても菌体を沈降させてその流出を防
止することができる。このように凝集性を有する酵母を
用いると、凝集性を有しない酵母を用いた場合に比べて
多くの利点があり、そのため新規凝集性酵母が要望せら
れている。
槽内の菌体濃度に比例する。そこで発酵槽内の菌体濃度
を高める手段として、優れた凝集性を有する酵母を用い
ることが考えられる。すなわち、酵母が優れた凝集性を
有していると、酵母の沈降速度が速くなり、そのため固
液分離が迅速かつ容易になし得る。そして例えば回分発
酵においては、発酵液を単に静置するだけで菌体を沈降
堆積させることができ、発酵液と菌体の分離を容易に行
なって菌体を再使用に供するこ°とができる。また連続
発酵においては、小径の流動部とこれの上に連設された
菌体沈降用の大径の沈降部とこれに内装された菌体沈降
部材とを主体とした塔型発酵槽を用いることにより、培
地の供給口が増大しても菌体を沈降させてその流出を防
止することができる。このように凝集性を有する酵母を
用いると、凝集性を有しない酵母を用いた場合に比べて
多くの利点があり、そのため新規凝集性酵母が要望せら
れている。
従来技術およびその問題点
従来から、上記の要望にこたえるべく、凝集性酵母を取
得する試みがなされて来たが、従来の酵母は自然界から
得られた野生株であって、たとえば土壌を探査し特定の
土壌から分離したものであった。
得する試みがなされて来たが、従来の酵母は自然界から
得られた野生株であって、たとえば土壌を探査し特定の
土壌から分離したものであった。
しかしこのように自然界から所望の菌株を見つけ出して
分離する作業は、はなはだ煩わしく／Ｘものであり、ま
た所望の菌株を採取できる確実性の乏しいものであった
。
分離する作業は、はなはだ煩わしく／Ｘものであり、ま
た所望の菌株を採取できる確実性の乏しいものであった
。
この発明は上記のような実情からなされたちのであって
、優れた凝集性を有しかつ実験室で得ることのできる新
規凝集性酵母を提供することを目的とする。
、優れた凝集性を有しかつ実験室で得ることのできる新
規凝集性酵母を提供することを目的とする。
問題点を解決するための手段
この発明の第１のものは新規酵母すなわち優れた凝集性
を有する酵母サツカロマイセス・セ ・ルビシエ（
ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）
ＲＭ −１７（微工研菌寄第７７７０号）（以下、単
にＲＭ−１７と記す）であり、また第２の発明はＲＭ−
１７を用いることを特徴とするアルコール発酵法である
。
を有する酵母サツカロマイセス・セ ・ルビシエ（
ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）
ＲＭ −１７（微工研菌寄第７７７０号）（以下、単
にＲＭ−１７と記す）であり、また第２の発明はＲＭ−
１７を用いることを特徴とするアルコール発酵法である
。
この明細書において、酵母の凝集性の程度（Ｄｅｇｒｅ
ｅ ｏｆ ｆｌｏｃｃｕｌａｔｉｏｎ）は、以下に示す
ギリランド・テスト（Ｇｉｌｌｉｌａｎｄ ｔｅｓｔ
）（Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ａｐ
ｐｌｉｅｄ ＨｉＣｒＯｆｉｉＯＩｏｇｙ ａｎｄ
８ｉｏｔｅｃｈｎｏ＋ｏｇｙ第７巻、第２２７−２３４
頁、１９７９年）により求められたＯＦ値で表示される
。すなわち供試菌株をＹＰＧ培地（注１）で３０℃で１
６時間振盪培養した後、国体の沈降速度、沈降菌体の容
量および硬さを肉眼観察により対照菌株と比較し、表１
に示すＤ ＦｆｉｉＯから５の６段階で凝集の程度を表
示する。
ｅ ｏｆ ｆｌｏｃｃｕｌａｔｉｏｎ）は、以下に示す
ギリランド・テスト（Ｇｉｌｌｉｌａｎｄ ｔｅｓｔ
）（Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ａｐ
ｐｌｉｅｄ ＨｉＣｒＯｆｉｉＯＩｏｇｙ ａｎｄ
８ｉｏｔｅｃｈｎｏ＋ｏｇｙ第７巻、第２２７−２３４
頁、１９７９年）により求められたＯＦ値で表示される
。すなわち供試菌株をＹＰＧ培地（注１）で３０℃で１
６時間振盪培養した後、国体の沈降速度、沈降菌体の容
量および硬さを肉眼観察により対照菌株と比較し、表１
に示すＤ ＦｆｉｉＯから５の６段階で凝集の程度を表
示する。
（以下余白）
表 １
ＲＭ−１７は下記の菌学的性質を有する。すなわちＲＭ
−１７は、 ・ＤＦ値４なる凝集性を有し、液体培養では著しい沈降
性を示す。
−１７は、 ・ＤＦ値４なる凝集性を有し、液体培養では著しい沈降
性を示す。
・廃糖蜜（たとえば１５％の全糖分を含む廃糖蜜）を発
酵し、７〜９ｖｏ１％のエタノールを生成する。
酵し、７〜９ｖｏ１％のエタノールを生成する。
・寒天平板上で多少硬い集落を形成する。
・生育にアデニンおよびヒスチジンを要求する。
・胞子形成能を有する。
ＲＭ−１７の培地としては、炭素源、窒素源、無機イオ
ン、さらに必要ならば有様微量栄養素を含有する通常の
培地が使用できる。炭素源としてはグルコース、ガラク
トース、フラクトース、シュークロース、スターチ加水
分解物、果汁、セルロース分解物などの炭水化物がよく
用いられる。特に好適な培地は、酵母エキス１ｑ１ポリ
ペプトン２ｑ、グルコース２Ｇ、蒸留水１００層よりな
る培地であり、この培地のｌ）Ｈは無調整で５．５であ
る。
ン、さらに必要ならば有様微量栄養素を含有する通常の
培地が使用できる。炭素源としてはグルコース、ガラク
トース、フラクトース、シュークロース、スターチ加水
分解物、果汁、セルロース分解物などの炭水化物がよく
用いられる。特に好適な培地は、酵母エキス１ｑ１ポリ
ペプトン２ｑ、グルコース２Ｇ、蒸留水１００層よりな
る培地であり、この培地のｌ）Ｈは無調整で５．５であ
る。
ＲＭ−１７の培養は温度２５〜４０℃好ましくは３０〜
３７℃で、ｐＨ３，０〜７．０好ましくはｐＨ３，５〜
６．０で行なわれる。
３７℃で、ｐＨ３，０〜７．０好ましくはｐＨ３，５〜
６．０で行なわれる。
つぎにＲＭ−１７の製造法について説明する。
ＲＭ−１７は、財団法人発酵研究所の保存菌であるＤ
Ｆ（ｉｉ！Ｏの酵母サッカロマイセス・セルビシエ（Ｓ
ａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）
Ｉ Ｆ Ｏ−０２２４（以下、単にＩＦＯ−０２２４と
記す）を胞子形成処理し、得られた胞子を変異処理し、
変異胞子を培養することにより製造される。
Ｆ（ｉｉ！Ｏの酵母サッカロマイセス・セルビシエ（Ｓ
ａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）
Ｉ Ｆ Ｏ−０２２４（以下、単にＩＦＯ−０２２４と
記す）を胞子形成処理し、得られた胞子を変異処理し、
変異胞子を培養することにより製造される。
胞子形成処理は常法に従ってなされる。通常は凝集性を
有しない酵母をＹＰＧ寒天培地（注２）で培養した後、
胞子形成寒天培地（注３）に塗抹する方法がとられる。
有しない酵母をＹＰＧ寒天培地（注２）で培養した後、
胞子形成寒天培地（注３）に塗抹する方法がとられる。
また単独胞子由来の細胞を得るには、酵母細胞壁溶解用
の溶菌酵素を用いて子のうを溶解した後、マイクロマニ
プユレータを用いて胞子を分離する方法、または同じく
溶菌酵素で子のうを溶解した後、超音波処理により胞子
を分散させ、胞子を栄養寒天培地で培養する方法がとら
れる。
の溶菌酵素を用いて子のうを溶解した後、マイクロマニ
プユレータを用いて胞子を分離する方法、または同じく
溶菌酵素で子のうを溶解した後、超音波処理により胞子
を分散させ、胞子を栄養寒天培地で培養する方法がとら
れる。
変異処理は、胞子形成により得られた胞子または子のう
に公知の突然変異処理、たとえば紫外線、Ｘ線、γ線を
照射する物理的方法、エチルメタンスルホネート、Ｎ−
メチル−Ｎ′−二トローＮ−ニトロソグアニジン、４−
ニトロキノリン−Ｎ−オキサイドなどの変異誘起剤を接
触した後に選択培地に生育する化学的方法のいずれによ
っても行なわれるが、エチルメタンスルホネートを用い
る方法が特に好ましい。
に公知の突然変異処理、たとえば紫外線、Ｘ線、γ線を
照射する物理的方法、エチルメタンスルホネート、Ｎ−
メチル−Ｎ′−二トローＮ−ニトロソグアニジン、４−
ニトロキノリン−Ｎ−オキサイドなどの変異誘起剤を接
触した後に選択培地に生育する化学的方法のいずれによ
っても行なわれるが、エチルメタンスルホネートを用い
る方法が特に好ましい。
ＲＭ−１７の製造過程における培地および培養条件は、
前述したＲＭ−１７自体の培地および培養条件と同じで
ある。
前述したＲＭ−１７自体の培地および培養条件と同じで
ある。
親酵母であるＩＦＯ−０２２４はＤＦ値Ｏであって全く
凝集性を示さず、また下記表２に示すごとき諸性質（発
酵性および資化性の有無、生理的性質）を有する。
凝集性を示さず、また下記表２に示すごとき諸性質（発
酵性および資化性の有無、生理的性質）を有する。
（以下余白）
表 ２
表２中、ラフィノースの発酵性は、′結合部が切断され
て生じる構成単糖フラクトース、グルコースおよびガラ
クトースのうちいくつの糖を発酵できるかにより表示さ
れる。すなわち、発酵性１／３とはフラクトースのみを
発酵する場合を、発酵性２／３とはフラクトースおよび
グルコースを発酵する場合を、および発酵性３／３とは
すべての構成単糖を発酵する場合をそれぞれ意味する。
て生じる構成単糖フラクトース、グルコースおよびガラ
クトースのうちいくつの糖を発酵できるかにより表示さ
れる。すなわち、発酵性１／３とはフラクトースのみを
発酵する場合を、発酵性２／３とはフラクトースおよび
グルコースを発酵する場合を、および発酵性３／３とは
すべての構成単糖を発酵する場合をそれぞれ意味する。
なお、サツカロマイセス（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ
）属に属する酵母は下記のような国学的性質を有するこ
とが知られている（ Ｊ、ＬＯｄｄｅｒ著「ＴｈｅＹｅ
ａｓｔｓ、 Ａ Ｔａｘｏｎｏｍｉｃ ５ｔｕｄｙ Ｊ
第２版、Ｎ０ｒｔｈ−’Ｈｏ１ｌａｎｄ Ｐｕｂｌｉｓ
ｈｉｎｇ社発行、１９７０年）。
）属に属する酵母は下記のような国学的性質を有するこ
とが知られている（ Ｊ、ＬＯｄｄｅｒ著「ＴｈｅＹｅ
ａｓｔｓ、 Ａ Ｔａｘｏｎｏｍｉｃ ５ｔｕｄｙ Ｊ
第２版、Ｎ０ｒｔｈ−’Ｈｏ１ｌａｎｄ Ｐｕｂｌｉｓ
ｈｉｎｇ社発行、１９７０年）。
すなわち、この属に属する酵母は、
・多極出芽によって増殖する。
・子のう胞子を形成する。
・硝酸塩を資化しない。
・真菌糸を欠くかまたはわずかじか形成しない。
・成熟子のうは容易に開裂しない。
・胞子の形状は球形ないし卵形である。
・グルコースをよく発酵する。
・麦芽汁培地に皮膜を形成しない。
発明の効果
この発明は以上のとおり構成されているので、優れた凝
集性を有する新規酵母を実験空において創製することが
できる。したがって従来のように自然界から所望の菌株
を見つけ出して土壌から分離するといった煩わしい作業
が必要でない上に、所望の凝集性酵母を確実に製造する
ことができる。そしてこうして得られた凝集性酵母を用
いてアルコール発酵を行なうことにより、冒頭で説明し
たように回分発酵においても連続発酵においてもアルコ
ール発酵槽内の菌体濃度を高く維持して、エタノールの
生産性を大幅に向上することができる。
集性を有する新規酵母を実験空において創製することが
できる。したがって従来のように自然界から所望の菌株
を見つけ出して土壌から分離するといった煩わしい作業
が必要でない上に、所望の凝集性酵母を確実に製造する
ことができる。そしてこうして得られた凝集性酵母を用
いてアルコール発酵を行なうことにより、冒頭で説明し
たように回分発酵においても連続発酵においてもアルコ
ール発酵槽内の菌体濃度を高く維持して、エタノールの
生産性を大幅に向上することができる。
実 施 例
つぎにこの発明の実施例を示し、上記効果を実証する。
ａ、製造例
凝集性を有しない酵母サッカロマイセス・セルビシエ（
Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）
Ｉ Ｆ ０−０２２４をＹＰＧ寒天培地（注２）で
３０℃で２４時間培養し、ついで胞子形成寒天培地（注
３）に塗抹し、３０℃で３〜５日間培養を行なった。こ
うして胞子を形成させた。
Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）
Ｉ Ｆ ０−０２２４をＹＰＧ寒天培地（注２）で
３０℃で２４時間培養し、ついで胞子形成寒天培地（注
３）に塗抹し、３０℃で３〜５日間培養を行なった。こ
うして胞子を形成させた。
ついで胞子数が１０７個／だになるように、子のうを無
菌水１７ｎｌに懸濁させ、集菌後リン酸緩衝液（注４）
で洗浄した。ついで子のうを溶菌酵素溶液（注５）２ｗ
中で３０℃で１時間振盪して、子のうを溶解させた。つ
いで集菌後、遊離した胞子を無菌水１ｗで洗浄してリン
酸緩衝液３ｆｆｉ／に懸濁させた。
菌水１７ｎｌに懸濁させ、集菌後リン酸緩衝液（注４）
で洗浄した。ついで子のうを溶菌酵素溶液（注５）２ｗ
中で３０℃で１時間振盪して、子のうを溶解させた。つ
いで集菌後、遊離した胞子を無菌水１ｗで洗浄してリン
酸緩衝液３ｆｆｉ／に懸濁させた。
この懸濁液に変異誘起剤としてエチルメタンスルホネー
トを０．１１１／添加し、懸濁液を３０℃で２時間振盪
した。こうして胞子を変異処理した。ついで集菌後、変
異胞子をリン酸緩衝液０．２１１１！に懸濁させ、懸濁
液に５％チオ硫酸ナトリウム水溶液３１１１１を添加し
て、懸濁液を３０℃で１０分間振盪した。こうして変異
誘起剤を中和した。
トを０．１１１／添加し、懸濁液を３０℃で２時間振盪
した。こうして胞子を変異処理した。ついで集菌後、変
異胞子をリン酸緩衝液０．２１１１！に懸濁させ、懸濁
液に５％チオ硫酸ナトリウム水溶液３１１１１を添加し
て、懸濁液を３０℃で１０分間振盪した。こうして変異
誘起剤を中和した。
集菌後、変異胞子をリン酸緩衝液１２１！／で２回洗浄
して同緩衝液５１１１に懸濁させ、懸濁液を水冷下に３
分間超音波処理することにより変異胞子を懸濁液中に分
散させた。ついで集菌後、懸濁液を無菌水で濃度１／１
０５〜１／１０８に希釈し、希釈懸濁液０．ＩＷｌｌを
ＹＰＧ寒天培°地（注２）に塗抹して３０’Ｃで４８時
間培養し、単独胞子由来の集落を得た。
して同緩衝液５１１１に懸濁させ、懸濁液を水冷下に３
分間超音波処理することにより変異胞子を懸濁液中に分
散させた。ついで集菌後、懸濁液を無菌水で濃度１／１
０５〜１／１０８に希釈し、希釈懸濁液０．ＩＷｌｌを
ＹＰＧ寒天培°地（注２）に塗抹して３０’Ｃで４８時
間培養し、単独胞子由来の集落を得た。
こうして得られた集落のプレートをマスタープレートと
してレプリカ法により変異株の検出を行なった。すなわ
ち、殺菌したベルベット布地を用いて、前記マスタープ
レートの集落を最小培地（注６）にレプリカし、同培地
で３０℃で４日間培養し、最小培地で増殖できない菌株
を栄養要求性変異株としてマスタープレートから釣菌し
た。
してレプリカ法により変異株の検出を行なった。すなわ
ち、殺菌したベルベット布地を用いて、前記マスタープ
レートの集落を最小培地（注６）にレプリカし、同培地
で３０℃で４日間培養し、最小培地で増殖できない菌株
を栄養要求性変異株としてマスタープレートから釣菌し
た。
その結果マスタープレートの菌株２５株のうち凝集性に
優れた株サツカロマイセス・セルビシｘ （Ｓａｃｃｈ
ａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ） ＲＭ −
１７（微工研菌寄第７７７０号）を得た。この株はアデ
ニンおよびとスチジン要求性の菌株であつす、凝集性の
測定 こうして得られたＲＭ−１７について凝集性の程度すな
わちＤＦ値を前述の方法により測定したところ、ＤＦ値
は４であった。
優れた株サツカロマイセス・セルビシｘ （Ｓａｃｃｈ
ａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ） ＲＭ −
１７（微工研菌寄第７７７０号）を得た。この株はアデ
ニンおよびとスチジン要求性の菌株であつす、凝集性の
測定 こうして得られたＲＭ−１７について凝集性の程度すな
わちＤＦ値を前述の方法により測定したところ、ＤＦ値
は４であった。
Ｃ１使用例（アルコール連続発酵）
ＲＭ−１７を用いてつきの操作によりアルコール連続発
酵を行ない、そのアルコール発酵能を調べた。
酵を行ない、そのアルコール発酵能を調べた。
発酵装置として、第１図に示すアルコール発酵装置を用
いた。これは実容積７００ｍのガラス＠流動層型発酵槽
（１）を主体とし、温度制御およびｐＨ！制御できるよ
うに構成されている。
いた。これは実容積７００ｍのガラス＠流動層型発酵槽
（１）を主体とし、温度制御およびｐＨ！制御できるよ
うに構成されている。
そして発酵原料はポンプ（２）によって同種（１）の底
部に供給され、反応液はポンプ（３）で同種の頂部から
底部に戻され、種属の菌体沈降部（４）から流出するよ
うになっている。
部に供給され、反応液はポンプ（３）で同種の頂部から
底部に戻され、種属の菌体沈降部（４）から流出するよ
うになっている。
５００ｍ坂ロフラスコにおいてＹＰＧ培地（注１）１０
０Ｉｄを調整し、これを温度１２１℃で１０分間殺菌し
た後、ＹＰＧ寒天斜面培地（注２）に保存したＲＭ−１
７株を１白菌耳植菌し、３０℃で１夜培養した。こうし
て活性なＲＭ−１７の前培養液を得た。
０Ｉｄを調整し、これを温度１２１℃で１０分間殺菌し
た後、ＹＰＧ寒天斜面培地（注２）に保存したＲＭ−１
７株を１白菌耳植菌し、３０℃で１夜培養した。こうし
て活性なＲＭ−１７の前培養液を得た。
フィリピン産廃糖蜜培地（注７＞７００ｄが入っている
発酵槽（１）に上記前培養液１００ｄを入れ、発ＩＳ温
度３０℃で８時間回分培養を行なった。ついで上記廃糖
蜜培地を発酵槽（１）に流通３５ｄ／時（希釈率＝０．
０５時−１）で連続的に供給し、培地の供給量を徐々に
増加でいって連続発酵を行なった。
発酵槽（１）に上記前培養液１００ｄを入れ、発ＩＳ温
度３０℃で８時間回分培養を行なった。ついで上記廃糖
蜜培地を発酵槽（１）に流通３５ｄ／時（希釈率＝０．
０５時−１）で連続的に供給し、培地の供給量を徐々に
増加でいって連続発酵を行なった。
その結果、培地供給量を１７５ＩＩｉ／時（希釈率−０
，２５時−１）に増加しても、ＲＭ−１７の優れた凝集
性により、槽内に直径１〜４ｍｍのフロックが形成され
て、槽内の菌体濃度（注８）は４７０／／という高い値
に維持された。また産生アルコールは６１ｏ／／という
高い濃度で得られ、アルコール生産性（注９）は第２図
に示すように１４Ｑ／／・時という高い値に達した。
，２５時−１）に増加しても、ＲＭ−１７の優れた凝集
性により、槽内に直径１〜４ｍｍのフロックが形成され
て、槽内の菌体濃度（注８）は４７０／／という高い値
に維持された。また産生アルコールは６１ｏ／／という
高い濃度で得られ、アルコール生産性（注９）は第２図
に示すように１４Ｑ／／・時という高い値に達した。
ｄ、 比較例
酵母としてＲＭ−１７の代わりにＩ ＦＯ−０２２４を
用い、その他の事項を上記使用例と同じにして、上記操
作を繰返した。
用い、その他の事項を上記使用例と同じにして、上記操
作を繰返した。
その結果、培地供給量が７０−７時（希釈率＝０．１時
−１）を超えると、アルコール生産性（注９）は第２図
に示すように４ａｌｌ・時から急激に低下した。
−１）を超えると、アルコール生産性（注９）は第２図
に示すように４ａｌｌ・時から急激に低下した。
ｅ、 培地および試薬
培地および試薬はそれぞれつきのとおりである。
（注１） ＹＰＧ培地
酵母エキス １０Ｑ／／
ポリペプトン ２０Ｑ／／
グルコース ２０Ｑ／ｌ
（注２） ＹＰＧ寒天培地
酵母エキス １０Ｑ／／
ポリペプトン ２０Ｑ／／
グルコース ２０Ｑ／／
寒天 ２０Ｑ／１
（注３） 胞子形成培地
酢酸ナトリウム ５ＣＪ／１
寒天 ２０ｏ／／
（注４） リン酸緩衝液
０．１Ｍリン酸緩衝液
ＤＨ−７，５
（注５） 溶菌酵素溶液
０．１Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ７，５）にザイモリアーゼ
２０Ｔ（生化学工業社製）を０．０５％溶かした溶液２
ｍと、２−メルカプトエタノール１゜４μｌどの混合液 （注６） 最小培地 Ｄｉｒｃｏ−Ｙｅａｓｔ Ｎｉｔｒｏｇｅｎ Ｂａ５ｅ
ＷｌｏＡｍｉｎｏ ａｃｉｄ（Ｄｉｆｃｏ社製）
６．７ｇ／ｌグルコース ２０Ｑ／／ 寒天 ２０Ｇ／／ 。
２０Ｔ（生化学工業社製）を０．０５％溶かした溶液２
ｍと、２−メルカプトエタノール１゜４μｌどの混合液 （注６） 最小培地 Ｄｉｒｃｏ−Ｙｅａｓｔ Ｎｉｔｒｏｇｅｎ Ｂａ５ｅ
ＷｌｏＡｍｉｎｏ ａｃｉｄ（Ｄｉｆｃｏ社製）
６．７ｇ／ｌグルコース ２０Ｑ／／ 寒天 ２０Ｇ／／ 。
（注７） フィリピン産廃糖蜜培地
フィリピン産廃糖蜜 ２８０ｑ／／硫酸アンモニウ
ム ２．８ａ／／ピロ亜硫酸カリウム ０．
５ａ／１消泡剤 ０．２！］／／とよ
りなる混合液を硫酸で１）８４．５に調整したもの （注８） 菌体濃度 発酵槽内の培養液を一定量とり、遠 心分離機で菌体を集め、洗浄後、これ を温度８００℃で燃焼し、焼失した重 量を菌体量として算出したもの （注９） アルコール生産性 培養液１／当り１時間に生産されるア ルコールの重！ （Ｑ）
ム ２．８ａ／／ピロ亜硫酸カリウム ０．
５ａ／１消泡剤 ０．２！］／／とよ
りなる混合液を硫酸で１）８４．５に調整したもの （注８） 菌体濃度 発酵槽内の培養液を一定量とり、遠 心分離機で菌体を集め、洗浄後、これ を温度８００℃で燃焼し、焼失した重 量を菌体量として算出したもの （注９） アルコール生産性 培養液１／当り１時間に生産されるア ルコールの重！ （Ｑ）
第１図は連続発酵のフローシート、第２図は希釈率とア
ルコール生産性の関係を示すグラフである。 第１図 第２図 ４釈−ｐ（ｈ−１）
ルコール生産性の関係を示すグラフである。 第１図 第２図 ４釈−ｐ（ｈ−１）
Claims (3)
- （１）優れた凝集性を有する酵母サッカロマイセス・セ
ルビシエ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉ
ｓｉａｅ）ＲＭ−１７（微工研菌寄第７７７０号）。 - （２）凝集性がＤＦ値で表わして４である特許請求の範
囲第１項記載の酵母。 - （３）優れた凝集性を有する酵母サッカロマイセス・セ
ルビシエ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉ
ｓｉａｅ）ＲＭ−１７（微工研菌寄第７７７０号）を用
いることを特徴とするアルコール発酵法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP59230897A JPS61108384A (ja) | 1984-10-31 | 1984-10-31 | 新規凝集性酵母 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP59230897A JPS61108384A (ja) | 1984-10-31 | 1984-10-31 | 新規凝集性酵母 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS61108384A true JPS61108384A (ja) | 1986-05-27 |
| JPH0121757B2 JPH0121757B2 (ja) | 1989-04-24 |
Family
ID=16915009
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP59230897A Granted JPS61108384A (ja) | 1984-10-31 | 1984-10-31 | 新規凝集性酵母 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS61108384A (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS63156597A (ja) * | 1986-12-19 | 1988-06-29 | Tax Adm Agency | 廃水処理方法 |
| JP2008271953A (ja) * | 2007-03-30 | 2008-11-13 | Mitsui Eng & Shipbuild Co Ltd | アルコール連続生産方法 |
-
1984
- 1984-10-31 JP JP59230897A patent/JPS61108384A/ja active Granted
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS63156597A (ja) * | 1986-12-19 | 1988-06-29 | Tax Adm Agency | 廃水処理方法 |
| JP2008271953A (ja) * | 2007-03-30 | 2008-11-13 | Mitsui Eng & Shipbuild Co Ltd | アルコール連続生産方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0121757B2 (ja) | 1989-04-24 |
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