JPS61104799A - 逆転写酵素を含有するビールスのスクリーニング試験法 - Google Patents
逆転写酵素を含有するビールスのスクリーニング試験法Info
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- JPS61104799A JPS61104799A JP60237804A JP23780485A JPS61104799A JP S61104799 A JPS61104799 A JP S61104799A JP 60237804 A JP60237804 A JP 60237804A JP 23780485 A JP23780485 A JP 23780485A JP S61104799 A JPS61104799 A JP S61104799A
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- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/48—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving transferase
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- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/569—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for microorganisms, e.g. protozoa, bacteria, viruses
- G01N33/56983—Viruses
- G01N33/56988—HIV or HTLV
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- G01N33/5767—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for hepatitis non-A, non-B hepatitis
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
〔産業上の利用分野〕
本発明は、血液もしくは血液製剤１ｆｃは逆転写酵素（
リバーストランスクリグターゼ）ｔ−含有するビールス
を含むあらゆる源中の逆転写酵素を含有するビールスの
存在を検出するためのスクリーニング試験法に関するも
のである。頁に詳細には１本発明は１体液、好ましくは
血液銀行で得られた血液中の逆転写酵素活性の存在を決
定することによって、給血者の非Ａ非Ｂ肝炎の検出およ
び診断に関するものである。本発明の利点は、本明細書
に開示された試験法を使用することによって、レトロビ
ールスのキャリアーとなシうる血液、血清、血漿または
それから肪導された生成物を同定することによシ給血者
（輸血）または血漿に関連する製剤を通じてレトロビー
ルスに関係する感染が伝染することを防止することにあ
る。
リバーストランスクリグターゼ）ｔ−含有するビールス
を含むあらゆる源中の逆転写酵素を含有するビールスの
存在を検出するためのスクリーニング試験法に関するも
のである。頁に詳細には１本発明は１体液、好ましくは
血液銀行で得られた血液中の逆転写酵素活性の存在を決
定することによって、給血者の非Ａ非Ｂ肝炎の検出およ
び診断に関するものである。本発明の利点は、本明細書
に開示された試験法を使用することによって、レトロビ
ールスのキャリアーとなシうる血液、血清、血漿または
それから肪導された生成物を同定することによシ給血者
（輸血）または血漿に関連する製剤を通じてレトロビー
ルスに関係する感染が伝染することを防止することにあ
る。
非Ａ非Ｂ肝炎は、血清学上、肝炎Ａビールスおよび肝炎
Ｂビールスとは区別される作用物によって引き起こされ
ると推定されている。この疾患の診断は、肝炎Ａ、肝炎
Ｂ、サイトメガロウィルスおよびニゲシュタイン−パー
ル（Ｅｐｓｔｅｉｎ −Ｂａｒｒ ）ビールスを血清学
上除去することに基づいている。
Ｂビールスとは区別される作用物によって引き起こされ
ると推定されている。この疾患の診断は、肝炎Ａ、肝炎
Ｂ、サイトメガロウィルスおよびニゲシュタイン−パー
ル（Ｅｐｓｔｅｉｎ −Ｂａｒｒ ）ビールスを血清学
上除去することに基づいている。
非Ａ非Ｂ肝炎の感染は世界中で報告されていて、成人の
間の肝炎の散発症例の２０チを占めている。アメリカ国
内において、この型の肝炎は輸血後の肝炎の９０チを占
めている。驚いたことには、これらの症例の５０ｔｌｂ
は慢性肝炎を発生させ、そしてかかる個人が潜在感染源
となシ続ける。
間の肝炎の散発症例の２０チを占めている。アメリカ国
内において、この型の肝炎は輸血後の肝炎の９０チを占
めている。驚いたことには、これらの症例の５０ｔｌｂ
は慢性肝炎を発生させ、そしてかかる個人が潜在感染源
となシ続ける。
この疾患には伝染し得る作用物が存在していることが示
されたが、現在非Ａ非Ｂ作用物七四定する試験方法がな
い。本発明は、非Ａ非Ｂ肝炎がレトロビールスもしくは
レトロビールス様作用物が原因であることを初めて示す
ものであって、そして臨床、特に血液銀行にて得られた
血液中におけるレトロビールスもしくはレトロビールス
様作用物七スクリーニングする方法を提供するものであ
る。
されたが、現在非Ａ非Ｂ作用物七四定する試験方法がな
い。本発明は、非Ａ非Ｂ肝炎がレトロビールスもしくは
レトロビールス様作用物が原因であることを初めて示す
ものであって、そして臨床、特に血液銀行にて得られた
血液中におけるレトロビールスもしくはレトロビールス
様作用物七スクリーニングする方法を提供するものであ
る。
従って、本発明の一つの目的は、病原性となりうるレト
ロビールス関連感染を伝染しうる血液若しくは給血者ｔ
スクリーニングする方法を提供することである。
ロビールス関連感染を伝染しうる血液若しくは給血者ｔ
スクリーニングする方法を提供することである。
更に、本発明の別の目的は、血液、血清、血漿又は血漿
製剤中における逆転写酵素活性を有するビールスの存在
を検出する方法を提供するものである。
製剤中における逆転写酵素活性を有するビールスの存在
を検出する方法を提供するものである。
本発明の他の目的は、非Ａ非Ｂ肝炎の原因となる作用物
の存在全検出する方法を提供することである。
の存在全検出する方法を提供することである。
本発明の更に別の目的は、非Ａ非Ｂ肝炎の原因となる作
用物を含む病原性もしくは接触感染性のレトロビールス
の検出のためのキットｔ−ａ供することである。
用物を含む病原性もしくは接触感染性のレトロビールス
の検出のためのキットｔ−ａ供することである。
その他の目的および利点は、本発明の詳細な説明が進む
につれて明らかとなろう。
につれて明らかとなろう。
本発明のこれら並びにその他の目的並びに利点は、血清
又は血液、特に給血者からの血液中における逆転写酵素
を含有するビールスの存在を検出する次めのスクリーニ
ング試験によって達成される。
又は血液、特に給血者からの血液中における逆転写酵素
を含有するビールスの存在を検出する次めのスクリーニ
ング試験によって達成される。
本明細書に使用する「血液」という用語は、血液自体は
かシでなく、血清、血漿もしくは血液もしくは血液成分
から得られたもしくは製剤され次アらゆる他の生成物も
しくは分画上も含むものである。
かシでなく、血清、血漿もしくは血液もしくは血液成分
から得られたもしくは製剤され次アらゆる他の生成物も
しくは分画上も含むものである。
本明細書に記載されたスクリーニング試験はいかなる起
源の逆転写酵素の存在金も検出することができるが、本
明細書で説明するところのレトロビールス中における逆
転写酵素（ＲＴ ）は粒子に関連するものであること、
すなわち、そのＲＴはビールスの中に被覆されているこ
とに注目すべきである。
源の逆転写酵素の存在金も検出することができるが、本
明細書で説明するところのレトロビールス中における逆
転写酵素（ＲＴ ）は粒子に関連するものであること、
すなわち、そのＲＴはビールスの中に被覆されているこ
とに注目すべきである。
従って、ＲＴｔ−検出するための最初の主要な工程は血
液の可溶性分画からビールス粒子を単離することである
。次Ｋ、単離されたビールス粒子はその中からＲＴを放
出させるために破砕されるかまたは溶解され、そして続
いて特異的な酵素活性が検定される。
液の可溶性分画からビールス粒子を単離することである
。次Ｋ、単離されたビールス粒子はその中からＲＴを放
出させるために破砕されるかまたは溶解され、そして続
いて特異的な酵素活性が検定される。
従って、本明細書で使用されるＲＴは、特定のビールス
を起源とするものであって、体、組織もしくは体液の通
常部分に関連した可溶性蛋白質ではないことは明らかに
すべきである。
を起源とするものであって、体、組織もしくは体液の通
常部分に関連した可溶性蛋白質ではないことは明らかに
すべきである。
知られている限シでは、ＲＴは試験し７ｈＬ／）ロピー
ルスの全てに関連して見出されている。
ルスの全てに関連して見出されている。
従って、この意味において、ＲＴはかかるビールスのマ
ーカーと云うことができる。しかしながら、特に、この
グループに属しかつ臨床的にはよシ重要であるビールス
は、ヒトＴ細胞リンパ球向性！、■、ｍＷ（ＨＴＶＢＩ
、■、ＩＩ）＄ｊび非Ａ非Ｂ肝炎ビールスである。本発
明は、非Ａ非Ｂ肝炎がレトロビールスを原因とするもの
であシ、従ってＲＴ検定によシ検出できることを示す最
初のものであることは注目することができる。
ーカーと云うことができる。しかしながら、特に、この
グループに属しかつ臨床的にはよシ重要であるビールス
は、ヒトＴ細胞リンパ球向性！、■、ｍＷ（ＨＴＶＢＩ
、■、ＩＩ）＄ｊび非Ａ非Ｂ肝炎ビールスである。本発
明は、非Ａ非Ｂ肝炎がレトロビールスを原因とするもの
であシ、従ってＲＴ検定によシ検出できることを示す最
初のものであることは注目することができる。
本明細書にて使用しているような「レトロビールス」と
いう用語は、レトロビールス様作用物もしくは存在物で
あって、上述したレトロビールス中に見出されるものと
同じ密度を有しかつそのようなＲＴ’活性を示すものを
含んでいる。
いう用語は、レトロビールス様作用物もしくは存在物で
あって、上述したレトロビールス中に見出されるものと
同じ密度を有しかつそのようなＲＴ’活性を示すものを
含んでいる。
本発明を実施するためにはＲＴ活性を検出する適当な方
法であればいずれも使用することができるが、好ましい
方法としては、放射性同位元素で標識した酵素法、組織
法、標識免疫法、螢光法、抗原抗体法、ＥＬＩ８Ａ （
酵素結合免疫吸着検定法）等が挙げられる。精製されｆ
ｃＲＴま几はＲＴの分解生成物に対するモノクローナル
もしくはポリクローナル抗体は特に好ましい。
法であればいずれも使用することができるが、好ましい
方法としては、放射性同位元素で標識した酵素法、組織
法、標識免疫法、螢光法、抗原抗体法、ＥＬＩ８Ａ （
酵素結合免疫吸着検定法）等が挙げられる。精製されｆ
ｃＲＴま几はＲＴの分解生成物に対するモノクローナル
もしくはポリクローナル抗体は特に好ましい。
かかる検定技術はよく知られていて、この分野における
通常の技術を有する者には自明でおるはずである。好ま
、しい方法ならびに物質を以下に説明する。
通常の技術を有する者には自明でおるはずである。好ま
、しい方法ならびに物質を以下に説明する。
本明細書中に使用される略語は次の通シである。ＮＡＮ
ＢＨＦｉ非Ａ非Ｂ肝炎を、ＲＴ＃′ｉリバーストランス
クリックーゼ（逆転写酵素）ｔ−１ＡＬＴはアラニン・
アミノトランスフェラーゼを、ＡＳＴ ＆１７スパルテ
ート・アミントランスフェラーゼを、ＰＥＧはポリエチ
レングリコール６１）００ｔ−、ＨＡｖは肝炎Ａビール
スを、ＨＢＶは肝炎Ｂビールスｉ、Ｒ８Ｖはラウス家鶏
肉腫（Ｒｏｕｓａ畠ｒｃｏｍａ ） ビールス’ｉ、Ｃ
ＭＶはサイトメガロビールスｆ、ＥＢＶはニブシュタイ
ン−パール（Ｅｐｓｔｅｉｎ−Ｂａｒｒ ）ビールスｔ
−、ＨＴＬＶ ｌはヒトＴ細胞リンパ球向性ビールスＩ
Ｉ！１ＡＩＤＳは後天性免疫不全症候群を意味する。
ＢＨＦｉ非Ａ非Ｂ肝炎を、ＲＴ＃′ｉリバーストランス
クリックーゼ（逆転写酵素）ｔ−１ＡＬＴはアラニン・
アミノトランスフェラーゼを、ＡＳＴ ＆１７スパルテ
ート・アミントランスフェラーゼを、ＰＥＧはポリエチ
レングリコール６１）００ｔ−、ＨＡｖは肝炎Ａビール
スを、ＨＢＶは肝炎Ｂビールスｉ、Ｒ８Ｖはラウス家鶏
肉腫（Ｒｏｕｓａ畠ｒｃｏｍａ ） ビールス’ｉ、Ｃ
ＭＶはサイトメガロビールスｆ、ＥＢＶはニブシュタイ
ン−パール（Ｅｐｓｔｅｉｎ−Ｂａｒｒ ）ビールスｔ
−、ＨＴＬＶ ｌはヒトＴ細胞リンパ球向性ビールスＩ
Ｉ！１ＡＩＤＳは後天性免疫不全症候群を意味する。
物質と方法
感染性血清および血漿製剤生成物
４個の血清接種物および２個の血漿誘導生成物音研究し
た。これらの各々はＮＡＮＢＨｉ人間および／またはチ
ンパンジーに伝染しそしてＨＡＹ、ＨＢＶ、ＣＭＶ並び
Ｋ ＥＢＶが存在しない仁とが前板りて示された。
た。これらの各々はＮＡＮＢＨｉ人間および／またはチ
ンパンジーに伝染しそしてＨＡＹ、ＨＢＶ、ＣＭＶ並び
Ｋ ＥＢＶが存在しない仁とが前板りて示された。
４個の接種物はＮＡＮＢＨに感染し次患者からの血清で
あり次。接種物Ｉは、輸血によシ慢性ＮＡＮＢＨに感染
した患者から得られた充分に定義されている血清であっ
た。この接種物は接種によシ偶然に他の人間およびチン
パンソーにＮＡＮＢＨｔ−伝染されたことが知られた。
あり次。接種物Ｉは、輸血によシ慢性ＮＡＮＢＨに感染
した患者から得られた充分に定義されている血清であっ
た。この接種物は接種によシ偶然に他の人間およびチン
パンソーにＮＡＮＢＨｔ−伝染されたことが知られた。
接種物ＳＫおよびＲＰは、慢性ＮＡＮＢＨｔ−発症した
２人の患者からＮＡＮＢＨの急性７エーズ中に採取され
次血清であり次。２接種物ＳＥは輸血関連ＮＡＮＢＨを
有する患者からのものでｌ）、そして接種物ＲＰは男性
の同性愛者からのものである。これらの血清の各々は、
試験の目的のために有効な人間の代用であるチンパンジ
ーにＮＡＮＢＨｉ伝染させた。第４番目の接種物（接種
物Ｈ）は、チンパンジーにＮＡＮＢＨ’に伝染されるこ
とが示されている慢性ＮＡＮＢＨｉ有する患者から得ら
れた充分に定義されている血清であった。
２人の患者からＮＡＮＢＨの急性７エーズ中に採取され
次血清であり次。２接種物ＳＥは輸血関連ＮＡＮＢＨを
有する患者からのものでｌ）、そして接種物ＲＰは男性
の同性愛者からのものである。これらの血清の各々は、
試験の目的のために有効な人間の代用であるチンパンジ
ーにＮＡＮＢＨｉ伝染させた。第４番目の接種物（接種
物Ｈ）は、チンパンジーにＮＡＮＢＨ’に伝染されるこ
とが示されている慢性ＮＡＮＢＨｉ有する患者から得ら
れた充分に定義されている血清であった。
２個の接種物はアメリカ合衆国で製造され友血漿製剤生
成物であって、それぞれは抗血有病因子とフィブリノ−
ダンであった。それらのそれぞれはＮＡＮＢＨの人への
伝染に関係があって、両方共チンパンジーにＮＡＮＢＨ
ｉ伝染させることが示され次。
成物であって、それぞれは抗血有病因子とフィブリノ−
ダンであった。それらのそれぞれはＮＡＮＢＨの人への
伝染に関係があって、両方共チンパンジーにＮＡＮＢＨ
ｉ伝染させることが示され次。
ＮＡＮＢＨ患者および健康管理
それぞれ臨床的、組織学的ならびに（除外による）血清
学的に確認されたＮＡＮＢＨ’ｉ有する１２人の患者か
らの血清標本について調べられた。これらの患者には、
輸血を受は次者（患者３名で、全て慢性ＮＡＮＢＨＱ発
症した）、静注用薬剤使用者（患者４名で、そのうちの
３名が慢性ＮＡＮＢＨｔ−発症した）および肝炎作用物
には何ら曝されていない散発性症例（患者５名で、その
うちの２名′が慢性ＮＡＮＢＨを発症し次）が含まれて
いる。ＮＡＮＢＨの診断は、血清ＡＬＴ活性（通常値の
上限の少くとも５倍、４０ ＩＶ／ｓｄ ）、ビールス
性肝炎と一致する肝組織学ならびにＨＡＹの次めの血清
学上のマーカー（ＩｇＭＷの抗ＨＡＹ抗体）、ＨＢＳ
（Ｄための血清学上のｉ−カー（血清中のＨＢｓＡｇ
ｔたけ血清中の抗ＨＢｃ単体）、ＣＭＶもしくはＥＢＶ
のための血清学上のマーカーが存在しないことに基づい
てこれらの患者のそれぞれについて行なわれた。
学的に確認されたＮＡＮＢＨ’ｉ有する１２人の患者か
らの血清標本について調べられた。これらの患者には、
輸血を受は次者（患者３名で、全て慢性ＮＡＮＢＨＱ発
症した）、静注用薬剤使用者（患者４名で、そのうちの
３名が慢性ＮＡＮＢＨｔ−発症した）および肝炎作用物
には何ら曝されていない散発性症例（患者５名で、その
うちの２名′が慢性ＮＡＮＢＨを発症し次）が含まれて
いる。ＮＡＮＢＨの診断は、血清ＡＬＴ活性（通常値の
上限の少くとも５倍、４０ ＩＶ／ｓｄ ）、ビールス
性肝炎と一致する肝組織学ならびにＨＡＹの次めの血清
学上のマーカー（ＩｇＭＷの抗ＨＡＹ抗体）、ＨＢＳ
（Ｄための血清学上のｉ−カー（血清中のＨＢｓＡｇ
ｔたけ血清中の抗ＨＢｃ単体）、ＣＭＶもしくはＥＢＶ
のための血清学上のマーカーが存在しないことに基づい
てこれらの患者のそれぞれについて行なわれた。
コントロール用血清は４９名の健常人よシ得られ７ｔが
、そのうちの１３名は血漿製剤の研究所に働く人でおり
、′！た３６名は有料でのグラがいくらか高いことで知
られている。
、そのうちの１３名は血漿製剤の研究所に働く人でおり
、′！た３６名は有料でのグラがいくらか高いことで知
られている。
チンパンジー
２匹のチンパンジー（た１士コ山牲江竺）１２７８号と
１２８４号は、テイノぐ−等（Ｔａｂｏｒａｔ ａｌ
）、２ノセツト（Ｌａｎｃｅｔ）１９７８年１号４６３
頁およびティパー等（Ｔａｂｏｒ ｅｔ ａｌ ）、Ｎ
、Ｅｎｇｌ 、 Ｊ 、Ｍｓｄ 、、１９８０年３０３
号１４０頁に記載されているような飼育コロニーから入
手された。
１２８４号は、テイノぐ−等（Ｔａｂｏｒａｔ ａｌ
）、２ノセツト（Ｌａｎｃｅｔ）１９７８年１号４６３
頁およびティパー等（Ｔａｂｏｒ ｅｔ ａｌ ）、Ｎ
、Ｅｎｇｌ 、 Ｊ 、Ｍｓｄ 、、１９８０年３０３
号１４０頁に記載されているような飼育コロニーから入
手された。
逆転写酵素（ＲＴ）活性
ＲＴ検定 血清試料（１００μり、陰性コントロール物
質（クシ胎児血清）ならびに陽性コントロール物質（ラ
ウス家鶏肉朧ビールス、粒子数Ｉ Ｘ １０”個）を全
て、初めに、０．５ Ｍ ）’）スＨｃＬノ３５ ％／
” リ＊Ｉ：ｌ−ル溶液（ｐＨ７，０）中で、７７．０
ＯＯＧ、４℃で１時間遠心分離して、サルンガドハラン
等（８ａｒｎｇａｄｈａｒａｎ ｅｔ ａ ）、Ｍｅｔ
ｈｏｄｓ Ｃａｎｃｅｒ Ｒ＠ｓ 、 １９７６年１２
号３頁に記載されているような血清蛋白からのビールス
粒子−レッドにした。このペレットは０．７５ ％オク
チルフェノールエチＶンオキシド濃縮物（Ｎｏｎ１ｄｅ
ｔ Ｐ ４０ ）で処理されてビールス粒子が破壊され
た。処理された試料の各々金欠いで６０−トリスＨＣｔ
（ｐＨ８，３） 、８ ｍＭ Ｍｇｅｔ、８０ｍＭＫＣ
６，２０ｍＲｄソチオスレイトール、０．１μｌアクチ
ノマイシンＤ、それぞれ無標識のアオキシリゴヌクレオ
チドトリフォスフェート（８０μＭ）、２０μＭ （３
Ｈ） ＴＴＰ （チミソントリフォスフェート、比活性
１．２ Ｃ１／ ｍｍｏｌ ）および１ｔｔｌｄｅす（
ｒＡ）ｐ（ｄＴ）１ｏ（テンブレートゲライマーとして
）からなる溶液４０μｔに添加した。この反応は、３７
℃で１時間培養しそして１〜／−酵母ｔＲＮＡ ４０μ
ノおよび０．２ｍＭピロリン酸ナトリウムを含有する１
（ｌＴｃＡ５ｄｋ添加して終了した。３０分後、沈殿可
能放射性活性はグラスファイバーフィルター上に集めら
れ、転線されそして液体シンチレーションによりて決め
られた。この試料は、もしその試料のｅｐｍが陰性コン
トロールのａｐｍ（平均０．３５Ｘ１０’）の２倍であ
れば陽性であると考えられた。Ｒ８Ｖ粒子の滴定に基づ
くこの陽性カットオフ （０，７Ｘ１０３ｃｐｍ）はＲ
８Ｖ粒子ｌＸｌ０’個に関連するＲＴ活性を表わす。従
って、ある接種物中のビールス力価の大まかな概算は、
Ｒ８Ｖ粒子の種々の数に関連するａｐｍ値で表わしたＲ
Ｔ活性に関連すげそしてその値を接種物について得られ
に値と比較することによって得ることができる。検定さ
れた生成物は放射性同位元素にて標識され次ＤＮＡであ
る。
質（クシ胎児血清）ならびに陽性コントロール物質（ラ
ウス家鶏肉朧ビールス、粒子数Ｉ Ｘ １０”個）を全
て、初めに、０．５ Ｍ ）’）スＨｃＬノ３５ ％／
” リ＊Ｉ：ｌ−ル溶液（ｐＨ７，０）中で、７７．０
ＯＯＧ、４℃で１時間遠心分離して、サルンガドハラン
等（８ａｒｎｇａｄｈａｒａｎ ｅｔ ａ ）、Ｍｅｔ
ｈｏｄｓ Ｃａｎｃｅｒ Ｒ＠ｓ 、 １９７６年１２
号３頁に記載されているような血清蛋白からのビールス
粒子−レッドにした。このペレットは０．７５ ％オク
チルフェノールエチＶンオキシド濃縮物（Ｎｏｎ１ｄｅ
ｔ Ｐ ４０ ）で処理されてビールス粒子が破壊され
た。処理された試料の各々金欠いで６０−トリスＨＣｔ
（ｐＨ８，３） 、８ ｍＭ Ｍｇｅｔ、８０ｍＭＫＣ
６，２０ｍＲｄソチオスレイトール、０．１μｌアクチ
ノマイシンＤ、それぞれ無標識のアオキシリゴヌクレオ
チドトリフォスフェート（８０μＭ）、２０μＭ （３
Ｈ） ＴＴＰ （チミソントリフォスフェート、比活性
１．２ Ｃ１／ ｍｍｏｌ ）および１ｔｔｌｄｅす（
ｒＡ）ｐ（ｄＴ）１ｏ（テンブレートゲライマーとして
）からなる溶液４０μｔに添加した。この反応は、３７
℃で１時間培養しそして１〜／−酵母ｔＲＮＡ ４０μ
ノおよび０．２ｍＭピロリン酸ナトリウムを含有する１
（ｌＴｃＡ５ｄｋ添加して終了した。３０分後、沈殿可
能放射性活性はグラスファイバーフィルター上に集めら
れ、転線されそして液体シンチレーションによりて決め
られた。この試料は、もしその試料のｅｐｍが陰性コン
トロールのａｐｍ（平均０．３５Ｘ１０’）の２倍であ
れば陽性であると考えられた。Ｒ８Ｖ粒子の滴定に基づ
くこの陽性カットオフ （０，７Ｘ１０３ｃｐｍ）はＲ
８Ｖ粒子ｌＸｌ０’個に関連するＲＴ活性を表わす。従
って、ある接種物中のビールス力価の大まかな概算は、
Ｒ８Ｖ粒子の種々の数に関連するａｐｍ値で表わしたＲ
Ｔ活性に関連すげそしてその値を接種物について得られ
に値と比較することによって得ることができる。検定さ
れた生成物は放射性同位元素にて標識され次ＤＮＡであ
る。
接種物■および接種物ＳＥの各々１−全別別に１０ ｒ
ｒＭ ）リスＨＣ２（ｐＨ７，５’）、ｌＱＱｍＭＮａ
Ｃｔおよびｌ ｍＮＩ ＥＤＴＡで調製した１０重量％
ないし６０重量％シ、糖勾配（１１ｍ）上に層状にして
ＳＷ４１０−ターで遠心分離しそしてペックマンＬＢ−
７０型超遠心分離器で３０，０００ｒｐｍ、４℃で１９
時間遠心分離した。分画（各０．７ｄ）ｉ勾配の底から
集め、２６０ｍｍでの吸光度ｔ” ＬＫＢ ｕｖ ：ｒ
−ドで決定し次。遠心分離で７１糖を除去した後、分画
のＲＴ活性を上記し良ようにして検定した。
ｒＭ ）リスＨＣ２（ｐＨ７，５’）、ｌＱＱｍＭＮａ
Ｃｔおよびｌ ｍＮＩ ＥＤＴＡで調製した１０重量％
ないし６０重量％シ、糖勾配（１１ｍ）上に層状にして
ＳＷ４１０−ターで遠心分離しそしてペックマンＬＢ−
７０型超遠心分離器で３０，０００ｒｐｍ、４℃で１９
時間遠心分離した。分画（各０．７ｄ）ｉ勾配の底から
集め、２６０ｍｍでの吸光度ｔ” ＬＫＢ ｕｖ ：ｒ
−ドで決定し次。遠心分離で７１糖を除去した後、分画
のＲＴ活性を上記し良ようにして検定した。
ＲＴ陽性超遠心分離分画のチンパンジーへの接！
ＲＴ活性を含む各勾配からの分画を集め（分画１２−１
５．２．８ ｍ ）、フィルター滅菌（０，２２μＭフ
ィルター）し、テンプぐフジ−１２フ３号（接種＄１）
と１２８０号（接種物ｓｇ）に静脈注射した。２匹のチ
ンパンソーは、毎週採血され、血清酵素活性（ＡＬＴと
ＡＳＴ ）ならびに肝炎の血清学上のマーカーを測定し
次。更に、２週間毎に肝臓生検を得て、光学顕微鏡によ
る肝炎の証拠ｒらびに電子顕微鏡に°よるＮＡＮＢＨ中
の特定の超微細構造変化を調べた。
５．２．８ ｍ ）、フィルター滅菌（０，２２μＭフ
ィルター）し、テンプぐフジ−１２フ３号（接種＄１）
と１２８０号（接種物ｓｇ）に静脈注射した。２匹のチ
ンパンソーは、毎週採血され、血清酵素活性（ＡＬＴと
ＡＳＴ ）ならびに肝炎の血清学上のマーカーを測定し
次。更に、２週間毎に肝臓生検を得て、光学顕微鏡によ
る肝炎の証拠ｒらびに電子顕微鏡に°よるＮＡＮＢＨ中
の特定の超微細構造変化を調べた。
ＲＴの生物物理学的および生物化学的特長３個の血清試
料（接種物！、ＳＥ、ＲＰ）中、のＲＴ活性を、ウェル
シュ等（Ｗｅｌｓｈ ｅｔ ａｌ”）、Ｎｕｃｌ＊ｉｃ
Ａｃ１ｄｓ Ｒｅｓ、、１９８０年８号２３４９頁に
従りて６．５％ｙｆ！リエチＶングリコール６０００（
ＰＥＧ ）による処理ならびに、グツドマン等（Ｇｏｏ
ｄｍａｎ ａｔ ａｌ ） 、 Ｐｒｏｃ
、Ｎａｔｌ、Ａｃａｄ、Ｓｅｌ。
料（接種物！、ＳＥ、ＲＰ）中、のＲＴ活性を、ウェル
シュ等（Ｗｅｌｓｈ ｅｔ ａｌ”）、Ｎｕｃｌ＊ｉｃ
Ａｃ１ｄｓ Ｒｅｓ、、１９８０年８号２３４９頁に
従りて６．５％ｙｆ！リエチＶングリコール６０００（
ＰＥＧ ）による処理ならびに、グツドマン等（Ｇｏｏ
ｄｍａｎ ａｔ ａｌ ） 、 Ｐｒｏｃ
、Ｎａｔｌ、Ａｃａｄ、Ｓｅｌ。
Ｕ、８．Ａ、、１９７１年６８号２２０３頁、ミルスタ
イン等（Ｍｉ１ｓｔ＠１ｎ ａｔ ａｌ ）、Ｊ、ＣＩ
ｉｎ、Ｍｉｅｒｏｂｉｏ−１ｏｇｙ、 １９７５年１
月３５３頁に記載されているように５μＩ ＲＮＡ ｓ
ａ Ａと２種の異なる外因性テンプＶ−）！ライマー
の存在下での別の分析によって検定した。
イン等（Ｍｉ１ｓｔ＠１ｎ ａｔ ａｌ ）、Ｊ、ＣＩ
ｉｎ、Ｍｉｅｒｏｂｉｏ−１ｏｇｙ、 １９７５年１
月３５３頁に記載されているように５μＩ ＲＮＡ ｓ
ａ Ａと２種の異なる外因性テンプＶ−）！ライマー
の存在下での別の分析によって検定した。
結果
粒子関連ＲＴ活性は、６個の感染性ＮＡＮＢＨ物質の全
部ならびに急性もしくは慢性ＮＡＮＢ）Ｉ ’に有する
患者からの１２個の血清の全部に検出され友。そのＲＴ
活性は０．８５ Ｘ １０’ ｃｐｍから１６．６Ｘ１
０’ｃｐｒｎ’ｊ−での範囲であった。これと対照に、
コントロールとしての健常人からの４９個・の血清のう
ち４７個（９６％）には、酵素活性が欠如していた（
ＣＰＭの範囲は０．２Ｘ１０’から０．５６×１０３ま
で）。２名の健常人のコントロールからの血清は、それ
ぞれ１．２Ｘ１０ｃｐｍと１．０×１０’ａｐｍであっ
て、低い陽性と見なされた（力、トオ７０．７Ｘ１０３
ｃｐｍ）。第１Ｎはこれらの試験からのデータを示す。
部ならびに急性もしくは慢性ＮＡＮＢ）Ｉ ’に有する
患者からの１２個の血清の全部に検出され友。そのＲＴ
活性は０．８５ Ｘ １０’ ｃｐｍから１６．６Ｘ１
０’ｃｐｒｎ’ｊ−での範囲であった。これと対照に、
コントロールとしての健常人からの４９個・の血清のう
ち４７個（９６％）には、酵素活性が欠如していた（
ＣＰＭの範囲は０．２Ｘ１０’から０．５６×１０３ま
で）。２名の健常人のコントロールからの血清は、それ
ぞれ１．２Ｘ１０ｃｐｍと１．０×１０’ａｐｍであっ
て、低い陽性と見なされた（力、トオ７０．７Ｘ１０３
ｃｐｍ）。第１Ｎはこれらの試験からのデータを示す。
Ｉ−Ｉｗｔ 仔
隠Ｑ第１図に示すように接種物ＩのＲＴ活性のピーク
はシ、１１勾配中において１．１４Ｊ’／−にバンドと
して現れた。同様のパンｒ状のパターンが２個の他の血
清接種物に訃いても得られた。
隠Ｑ第１図に示すように接種物ＩのＲＴ活性のピーク
はシ、１１勾配中において１．１４Ｊ’／−にバンドと
して現れた。同様のパンｒ状のパターンが２個の他の血
清接種物に訃いても得られた。
接種物ＳＫおよびＲＴのビークＲＴ活性もまた１、１４
．Ｆ／−にバンドとして現れた。
．Ｆ／−にバンドとして現れた。
ｆ ：／ ｉ４ツノ−１１Ｃ１ａｍ物１ （チン／４７
ジ一１２７８号）または接種物ＢＥ（チンパンジ−１２
８４″号）のいずれからのＲＴ陽性シ、１１勾配分画を
接覆し次後、２匹の動物はＮＡＮＢＨｔ−発症し次こと
が、血清ＡＬＴ活性の上昇（基準線の少くとも３倍）、
光学顕微鏡による肝炎の組織学上の証拠ならびに電子顕
微鏡による特異的な超微細構造的細胞質変質（Ｃ−ｍｆ
ＪＩｌ細管）によって確認された。
ジ一１２７８号）または接種物ＢＥ（チンパンジ−１２
８４″号）のいずれからのＲＴ陽性シ、１１勾配分画を
接覆し次後、２匹の動物はＮＡＮＢＨｔ−発症し次こと
が、血清ＡＬＴ活性の上昇（基準線の少くとも３倍）、
光学顕微鏡による肝炎の組織学上の証拠ならびに電子顕
微鏡による特異的な超微細構造的細胞質変質（Ｃ−ｍｆ
ＪＩｌ細管）によって確認された。
本明細書中に記載した検定によって検出されたＲＴ活性
の生物物理的ならびに生物化学的特長を第■貴に示す。
の生物物理的ならびに生物化学的特長を第■貴に示す。
第■表：逆転写酵素（ＲＴ）活性の特質ｂ）
添加又は処理 ＲＴ活性完全システム”
４．０９アクチノマイシンＤ、１
００μｍ１４．０１６．５４ＰＥＧイｖ、 ）ｅ）４．
１１ポリ（ｒＡ）ｅ ｐ（ｄＴ）、ａ、１ｉｔｌ
７．２９ポリ（ａ人） ・ｐ（ｄＴ）１゜、ｌμ
９ ３．６４注ａ）完全システムとは、外因性
テンプレートを除いて、上記物質と方法の項に記載した
標準ＲＴ反応を表わしている。活性は内因性テンプレー
トだけを用いた合成を表わしている。
４．０９アクチノマイシンＤ、１
００μｍ１４．０１６．５４ＰＥＧイｖ、 ）ｅ）４．
１１ポリ（ｒＡ）ｅ ｐ（ｄＴ）、ａ、１ｉｔｌ
７．２９ポリ（ａ人） ・ｐ（ｄＴ）１゜、ｌμ
９ ３．６４注ａ）完全システムとは、外因性
テンプレートを除いて、上記物質と方法の項に記載した
標準ＲＴ反応を表わしている。活性は内因性テンプレー
トだけを用いた合成を表わしている。
ｂ）上述した完全反応への添加
Ｃ） 完全システムへの添加前のビールス粒子のＰ田
による沈殿 分離密度でのバンドの他に、ＲＴ活性は、６．５％ＰＥ
Ｇ沈殿物中に完全に回収されるので、ビールス粒子に関
連している。ＲＴ活性は、テングレートプライマーとし
てのポリ（ｄＡ）ｐ（ｄＴ）１゜ヨシも４す（ｒＡ）ｐ
（ｄＴ）１゜が優先していること、つまシ、ビールスの
酵素を細胞ＤＮＡポリメラーゼから区別する特質を示し
ている。更に、［： ３ Ｈ］ ＴＴＰの結合は、ＤＮ
Ａ依存依存ＤＮＡ全成金阻止アクチンマイシンＤに非感
受性であった。
による沈殿 分離密度でのバンドの他に、ＲＴ活性は、６．５％ＰＥ
Ｇ沈殿物中に完全に回収されるので、ビールス粒子に関
連している。ＲＴ活性は、テングレートプライマーとし
てのポリ（ｄＡ）ｐ（ｄＴ）１゜ヨシも４す（ｒＡ）ｐ
（ｄＴ）１゜が優先していること、つまシ、ビールスの
酵素を細胞ＤＮＡポリメラーゼから区別する特質を示し
ている。更に、［： ３ Ｈ］ ＴＴＰの結合は、ＤＮ
Ａ依存依存ＤＮＡ全成金阻止アクチンマイシンＤに非感
受性であった。
内因性テンプＶ−）プライマーによるビールス性ＲＴ活
性はＲＮＡ ｍ＠Ａ消化に感受性を有していたのに対し
て、外因性テンプレートプライマー〔ポリ（ｒＡ）ｐ（
ｄＴ）１゜〕との区応は影響を受けなかった。
性はＲＮＡ ｍ＠Ａ消化に感受性を有していたのに対し
て、外因性テンプレートプライマー〔ポリ（ｒＡ）ｐ（
ｄＴ）１゜〕との区応は影響を受けなかった。
ＮＡＮＢＨの急性もしくは慣性相からの１２個の血清試
料ばかシでなく、４個の感染性血清および２個の感染性
血漿製剤生成物における粒子関連ＲＴ活性の知見による
と、この疾患がこの酵素を保有するビールスもしくはビ
ールス様作用物に起因することが示されている。ショ糖
勾配分画中のこのＲＴ活性の分布（ピーク活性１．１４
Ｉ／−）と、ＲＴ陽性シ、糖勾配分画を接種することに
よる典型的なＮＡＮＢＨのチンパンジーへの伝染は、試
験された患者の血清ばかシでなく。
料ばかシでなく、４個の感染性血清および２個の感染性
血漿製剤生成物における粒子関連ＲＴ活性の知見による
と、この疾患がこの酵素を保有するビールスもしくはビ
ールス様作用物に起因することが示されている。ショ糖
勾配分画中のこのＲＴ活性の分布（ピーク活性１．１４
Ｉ／−）と、ＲＴ陽性シ、糖勾配分画を接種することに
よる典型的なＮＡＮＢＨのチンパンジーへの伝染は、試
験された患者の血清ばかシでなく。
血清ならびに血漿製剤生成物中のＮＡＮＢＨ作用物が７
トロビールスもしくはレトロビールス様作用物であるこ
との証拠を示してｈる。４９名のコントロール中の２名
の血清中のＲＴ活性がレトロビールスのそれと一致する
密度にバンドが出九という知見から、これらの人がレト
ロビールスもしくはレトロビールス様作用物に感染され
ているが示された。実際コントロール群の４９名全員は
通常の人達よりもＮＡＮＢＨに対して高い危険性ｔ−帯
びていた。
トロビールスもしくはレトロビールス様作用物であるこ
との証拠を示してｈる。４９名のコントロール中の２名
の血清中のＲＴ活性がレトロビールスのそれと一致する
密度にバンドが出九という知見から、これらの人がレト
ロビールスもしくはレトロビールス様作用物に感染され
ているが示された。実際コントロール群の４９名全員は
通常の人達よりもＮＡＮＢＨに対して高い危険性ｔ−帯
びていた。
疫学止具なる型のＮＡＮＢＨｔ−有する患者からの′１
２個の血清全てにおけるＲＴ＃ｉ性についての知見から
、一種もしくはそれ以上のレトロビールスもしくはレト
ロビールス様作用物がＮＡＮＢＨの１２症例全ての原因
であることが示された。
２個の血清全てにおけるＲＴ＃ｉ性についての知見から
、一種もしくはそれ以上のレトロビールスもしくはレト
ロビールス様作用物がＮＡＮＢＨの１２症例全ての原因
であることが示された。
一般の人達よ！Ｊ ＮＡＮＢＨに感染する危険性が高い
健常な研究従事者ならびに有料プラズマフェレーシス給
血者からの４９個の血清のうちの４７個の血清中のＲＴ
活性が無かったことは、この試験で使用され７’ｊＲＴ
検定の特異性を支持している。この特異性を示す追加の
証拠は、テンブレートゲライマーとしてのポリ（ｒＡ）
ｐ（ｄＴ）１゜によって示され次優位性、 ＰＥＧ−に
よるＲＴの沈殿、ＲＮＡ ｓ ｅ Ａによる不活性化に
対する内因性テンプレートの感受性、反応生成物のアル
カリ加水分屏に対する抵抗性ならびに上述し几すルンガ
ドハラン等によって引用されたようなレトロビールスに
ついて報告されたものと一致する密度におけるショ糖勾
配中でのＲＴ活性ならびに伝染性の分布である。
健常な研究従事者ならびに有料プラズマフェレーシス給
血者からの４９個の血清のうちの４７個の血清中のＲＴ
活性が無かったことは、この試験で使用され７’ｊＲＴ
検定の特異性を支持している。この特異性を示す追加の
証拠は、テンブレートゲライマーとしてのポリ（ｒＡ）
ｐ（ｄＴ）１゜によって示され次優位性、 ＰＥＧ−に
よるＲＴの沈殿、ＲＮＡ ｓ ｅ Ａによる不活性化に
対する内因性テンプレートの感受性、反応生成物のアル
カリ加水分屏に対する抵抗性ならびに上述し几すルンガ
ドハラン等によって引用されたようなレトロビールスに
ついて報告されたものと一致する密度におけるショ糖勾
配中でのＲＴ活性ならびに伝染性の分布である。
ＮＡＮＢＨならびにこの疾患の原因となる作用物の公知
の特長は、レトロビールスもしくはレトロビールス様作
用物の病因と一致しているようである。ＮＡＮＢＨ作用
物はホルマリン、熱又はクロロホルムによって不活性化
されるが、これはまたレトロビールス類と一致している
。慢性感′染は、ＮＡＮＢＨ作用物での感染、特に輸血
によって伝染する感染に引き続いて起るのが普通である
。レトロビールス類は慢性感染の原因となるのが特長的
である。 ＮＡＮＢＨに関連して記載されている抗原抗
体システムは、全て血清中に感染性ビールスと共存して
いると思われるレトロビールスの外的ならびに内的な抗
原双方に対する抗体の発現に一致している。逆電気泳動
によって検出されそして接種物Ｉから精製された少くと
も一種の抗原は、シューグパッハ等（Ｓｅｈｕｐ−ｂａ
ｃｈ ａｔ ｍｌ ）、サイエンス１９８４年２２４号
５０３頁に記載されセしてＨＴＬＶ Ｉ［Ｉビールスの
表面に存在するものと類似するグリコプロティンである
と思われる。
の特長は、レトロビールスもしくはレトロビールス様作
用物の病因と一致しているようである。ＮＡＮＢＨ作用
物はホルマリン、熱又はクロロホルムによって不活性化
されるが、これはまたレトロビールス類と一致している
。慢性感′染は、ＮＡＮＢＨ作用物での感染、特に輸血
によって伝染する感染に引き続いて起るのが普通である
。レトロビールス類は慢性感染の原因となるのが特長的
である。 ＮＡＮＢＨに関連して記載されている抗原抗
体システムは、全て血清中に感染性ビールスと共存して
いると思われるレトロビールスの外的ならびに内的な抗
原双方に対する抗体の発現に一致している。逆電気泳動
によって検出されそして接種物Ｉから精製された少くと
も一種の抗原は、シューグパッハ等（Ｓｅｈｕｐ−ｂａ
ｃｈ ａｔ ｍｌ ）、サイエンス１９８４年２２４号
５０３頁に記載されセしてＨＴＬＶ Ｉ［Ｉビールスの
表面に存在するものと類似するグリコプロティンである
と思われる。
特異的な細胞質の超微細構造的変質はチンパンジーのＮ
ＡＮＢＨの間に一致して観察された。同様な変質は、シ
ャ、７等（５ｃｈａｆｆ ａｔ ａｌ ）、ランセｙ
ト（Ｌａｎｃ＠ｔ）１９８３年１号１３３６頁に記載れ
ているようにレトロビールスＨＴＬＶ Ｉ［［による慢
性感染に関連した症候群である後天性免疫不全症候群（
ＡＩＤＳ ）に感染した患者のリンパ球中において報告
されている。
ＡＮＢＨの間に一致して観察された。同様な変質は、シ
ャ、７等（５ｃｈａｆｆ ａｔ ａｌ ）、ランセｙ
ト（Ｌａｎｃ＠ｔ）１９８３年１号１３３６頁に記載れ
ているようにレトロビールスＨＴＬＶ Ｉ［［による慢
性感染に関連した症候群である後天性免疫不全症候群（
ＡＩＤＳ ）に感染した患者のリンパ球中において報告
されている。
加えて、公知の量のヒトＴ細胞リンツヤ球向性ビールス
ｍＷ１ （ＨＴＬＶ ＩＨ） ’にヒト血漿に添加した
場合、逆転写酵素活性によりて検出される。
ｍＷ１ （ＨＴＬＶ ＩＨ） ’にヒト血漿に添加した
場合、逆転写酵素活性によりて検出される。
ＨＴＬＶ ＩＩＩ ｔ−含む血漿よプ誘導した３種の生
成物、抗血友病因子濃縮物、フィブリノ−ダンおよび血
漿蛋白分画はｔ７’？、逆転写酵素活性を有しているこ
とが判明した。逆転写酵素活性は直接ビールス力価に関
係していて、血漿中のＨＴＬＢ −ＩＩビールスカ価を
推定するために逆転写酵素活性を使用するのが有用であ
ることを示し次。
成物、抗血友病因子濃縮物、フィブリノ−ダンおよび血
漿蛋白分画はｔ７’？、逆転写酵素活性を有しているこ
とが判明した。逆転写酵素活性は直接ビールス力価に関
係していて、血漿中のＨＴＬＢ −ＩＩビールスカ価を
推定するために逆転写酵素活性を使用するのが有用であ
ることを示し次。
上述し次ことから１本発明は、血液銀行や血液関連製剤
の生産者が全ての給血者ならびに血液製剤ｔスクリーニ
ングしてそしてＮＡＮＢＨやＡＩＤＳ ｔ−含むレトロ
ビールス関連病原性条件を伝染し得るものを特定するこ
とを可能にすることが明らかである。本発明を利用する
単一スクリーニング試験によって、レトロビールス関連
接触伝染性もしくは感染性条件の検出、診断ならびに除
去が可能である。
の生産者が全ての給血者ならびに血液製剤ｔスクリーニ
ングしてそしてＮＡＮＢＨやＡＩＤＳ ｔ−含むレトロ
ビールス関連病原性条件を伝染し得るものを特定するこ
とを可能にすることが明らかである。本発明を利用する
単一スクリーニング試験によって、レトロビールス関連
接触伝染性もしくは感染性条件の検出、診断ならびに除
去が可能である。
酵素検定、モノクローナル抗体もしくはポリクローナル
抗体を含む抗原抗体力価検定等から選ばれた適当なＲＴ
検定システムを含むコンテナーからなるキットは、本発
明による開示に従って臨床的にならびに研究室で使用さ
れると最も価値がある。マイクロ力価プレート、放射性
同位元素標識、物質、ピペット、緩衝液、補酵素等のよ
うな補助品その他のこの技術分野で日常的に使用され良
く知られているものは本発明によるキットに含めること
ができる。
抗体を含む抗原抗体力価検定等から選ばれた適当なＲＴ
検定システムを含むコンテナーからなるキットは、本発
明による開示に従って臨床的にならびに研究室で使用さ
れると最も価値がある。マイクロ力価プレート、放射性
同位元素標識、物質、ピペット、緩衝液、補酵素等のよ
うな補助品その他のこの技術分野で日常的に使用され良
く知られているものは本発明によるキットに含めること
ができる。
第１図は、接種物工のショ糖密度勾配のバンドおよび逆
転写酵素活性の分布を示す図である。
転写酵素活性の分布を示す図である。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １、粒子関連逆転写酵素活性の存在を検出するために血
液を検定することからなる逆転写酵素含有作用物を検出
するための血液スクリーニングの単一工程法。 ２、前記血液が血清、血漿またはそれから製剤された分
画もしくは生成物であることからなる特許請求の範囲第
１項に記載の方法。 ３、前記血液が血液銀行において給血者から得られるこ
とからなる特許請求の範囲第２項に記載の方法。 ４、前記作用物がビールス粒子であることからなる特許
請求の範囲第３項に記載の方法。 ５、前記粒子がレトロビールスであることからなる特許
請求の範囲第４項に記載の方法。 ６、前記作用物が非Ａ非Ｂ肝炎の原因となる因子である
ことからなる特許請求の範囲第３項に記載の方法。 ７、前記ビールスがヒトＴ細胞リンパ球向性ビールスI
II型であることからなる特許請求の範囲第５項に記載の
方法。 ８、逆転写酵素活性の源を同定しそしてその源を分離す
ることからなるレトロビールスを原因とする感染が伝染
することを防止する方法。 ９、被験者から得られた体試料における逆転写酵素活性
を検定することからなる被験者における非Ａ非Ｂ肝炎を
検出する方法。 １０、血液または血液製剤における逆転写酵素活性を検
定するための手段からなる血液または血液製剤の試料中
における逆転写酵素を含有する作用物の存在を検出する
ための試験キット。 １１、前記手段が放射性同位元素標識酵素検定システム
であることからなる特許請求の範囲第１０項に記載され
ている試験キット。 １２、前記手段が抗原抗体力価システムであることから
なる特許請求の範囲第１０項に記載されている試験キッ
ト。 １３、前記手段が逆転写酵素に対する特異性を有するモ
ノクローナル抗体システムであることからなる特許請求
の範囲第１０項に記載されている試験キット。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US665400 | 1984-10-26 | ||
| US06/665,400 US4707439A (en) | 1984-10-26 | 1984-10-26 | Screening test for reverse-transcriptase containing virus such as non-A, non-B hepatitis, NANBH |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS61104799A true JPS61104799A (ja) | 1986-05-23 |
Family
ID=24669956
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP60237804A Pending JPS61104799A (ja) | 1984-10-26 | 1985-10-25 | 逆転写酵素を含有するビールスのスクリーニング試験法 |
Country Status (8)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4707439A (ja) |
| EP (1) | EP0186526B1 (ja) |
| JP (1) | JPS61104799A (ja) |
| AT (1) | ATE51029T1 (ja) |
| AU (1) | AU591072B2 (ja) |
| CA (1) | CA1263304A (ja) |
| DE (1) | DE3576529D1 (ja) |
| DK (1) | DK162060C (ja) |
Families Citing this family (22)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US9309574B1 (en) | 1984-08-22 | 2016-04-12 | The United States Of America As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Molecular cloning of HIV-1 from immortalized cell lines |
| US5853978A (en) * | 1985-12-04 | 1998-12-29 | Genentech, Inc. | Molecularly cloned acquired immunodeficiency syndrome polypeptides and methods of use |
| US6534285B1 (en) | 1984-12-24 | 2003-03-18 | Genentech, Inc. | Molecularly cloned acquired immunodeficiency syndrome polypeptides and their methods of use |
| US5218099A (en) * | 1986-04-01 | 1993-06-08 | The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services | Post-transfusion, non-A, non-B hepatitis virus polynucleotides |
| US4942122A (en) * | 1987-02-24 | 1990-07-17 | Research Education Institute, Inc. | Aids prognosis test detecting the presence of antibodies inhibiting HIV reverse transcriptase |
| US5350671A (en) * | 1987-11-18 | 1994-09-27 | Chiron Corporation | HCV immunoassays employing C domain antigens |
| US5698390A (en) * | 1987-11-18 | 1997-12-16 | Chiron Corporation | Hepatitis C immunoassays |
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