JPS6083591A - アスペルギルス属菌によるソルビト−ルの製造法 - Google Patents
アスペルギルス属菌によるソルビト−ルの製造法Info
- Publication number
- JPS6083591A JPS6083591A JP19327583A JP19327583A JPS6083591A JP S6083591 A JPS6083591 A JP S6083591A JP 19327583 A JP19327583 A JP 19327583A JP 19327583 A JP19327583 A JP 19327583A JP S6083591 A JPS6083591 A JP S6083591A
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- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
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Description
【発明の詳細な説明】
本発明はブドウ糖から微生物法によりソルビトールを製
造する方法に関し、より詳しくはアスペルギルス属に属
し、ソルビトール生産能を有する微生物を用いて、ソル
ビトールを効率よく製造する方法に関するものである。
造する方法に関し、より詳しくはアスペルギルス属に属
し、ソルビトール生産能を有する微生物を用いて、ソル
ビトールを効率よく製造する方法に関するものである。
ソルビトールは特有の甘味を有すると共に反応性に乏し
く、無害であって湿潤調節作用を有するため、そのまま
食品、歯みがき、化粧品等に添加物として使用される他
、ビタミンＣ、界面活性剤製造の中間原料として広く使
用されている。
く、無害であって湿潤調節作用を有するため、そのまま
食品、歯みがき、化粧品等に添加物として使用される他
、ビタミンＣ、界面活性剤製造の中間原料として広く使
用されている。
ソルビトールは現在、工業的にはブドウ糖をラネーニッ
ケル等のＮｉ触媒を用いて接触還元して製造されている
が、このような方法によれば反応条件が必然的に高温（
１６０℃）、高圧（１７０ｋｇ／ｃｍ２）となりエネル
ギーを多く消費する他、耐圧容器を必要とし、更に水素
を取扱う関係上爆発の危険が内在している。
ケル等のＮｉ触媒を用いて接触還元して製造されている
が、このような方法によれば反応条件が必然的に高温（
１６０℃）、高圧（１７０ｋｇ／ｃｍ２）となりエネル
ギーを多く消費する他、耐圧容器を必要とし、更に水素
を取扱う関係上爆発の危険が内在している。
本発明者らは上記方法とは発想を異にし、グルコースを
微生物学的に還元することにより緩和な条件でソルビト
ールを製造する方法を試みた。
微生物学的に還元することにより緩和な条件でソルビト
ールを製造する方法を試みた。
ブドウ糖をソルビトールに還元する機構は、動物細胞系
では羊の精のう中（Ｈ．Ｇ．Ｈｅｒｓ Ｂｉｏｃｈｅｍ
．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａｃｌａ ３７（１９６０）１２７
１３８）あるいはレンズ中（Ｍ．Ｌｏｕ Ｂｉｏｃｈｅ
ｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａｃｌａ １４１（１９６７）５
４７−５５９）にその存在が知られているが、微生物で
はソルビトールを生産した例がなくわずかに特公昭４５
−２４８３４号及び４６−２３０３８号にキシロースキ
シリトールに好気的に発酵して還元する方法が開示され
ているにすぎない。また、上記発明に開示された菌株を
グルコース培地中で培養してもソルビトールを得ること
はできなかった。
では羊の精のう中（Ｈ．Ｇ．Ｈｅｒｓ Ｂｉｏｃｈｅｍ
．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａｃｌａ ３７（１９６０）１２７
１３８）あるいはレンズ中（Ｍ．Ｌｏｕ Ｂｉｏｃｈｅ
ｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａｃｌａ １４１（１９６７）５
４７−５５９）にその存在が知られているが、微生物で
はソルビトールを生産した例がなくわずかに特公昭４５
−２４８３４号及び４６−２３０３８号にキシロースキ
シリトールに好気的に発酵して還元する方法が開示され
ているにすぎない。また、上記発明に開示された菌株を
グルコース培地中で培養してもソルビトールを得ること
はできなかった。
そこで、本発明者らは土壌などからソルビトールの生産
能を有する微生物を得る目的でスクリーニングを行った
。
能を有する微生物を得る目的でスクリーニングを行った
。
その結果、五炭糖中で培養増殖せしめたアスペルギルス
属の培養体、菌体、あるいは菌体抽出物、凍結乾燥菌体
が基質グルコースをソルビトールに高収率に還元するこ
とを見出して本発明を完成するに至った。
属の培養体、菌体、あるいは菌体抽出物、凍結乾燥菌体
が基質グルコースをソルビトールに高収率に還元するこ
とを見出して本発明を完成するに至った。
本発明に用いられる好ましいアスペルギルス属菌として
は、今回、新しく土壌中より分離したＧ−１８株が代表
菌として例示されるが、本菌株の菌学的性質は表１に示
すとおりである。
は、今回、新しく土壌中より分離したＧ−１８株が代表
菌として例示されるが、本菌株の菌学的性質は表１に示
すとおりである。
表１
アスペルギルス・テレウスＧ−１８の菌学的性質培養条
件 ：ツァペック寒天２５℃、１４日間培養集落性状
：３５ｍｍ クリーム〜黄金色 や
や綿毛状で厚みあり 裏面無色 顕微鏡形態：分生子頭 円柱状 頂のう 半球状
フィアライド ２段 １２〜１５μｍ
分生子柄 長い ５００μｍ以上
分生子 球形 ２．５μｍ滑面 以上の菌学的性質から「マニュアル・オブ・ザ・アスペ
ルギリー、トム・アンド・レイパー［１９４５］（Ｍａ
ｎｕａｌ ｏｆ Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｉ、Ｔｈｏｍ ＆ Ｒ
ａｐｅｒ ［１９４５］）」に従って検索した結果、本
菌株はアスペルギルス・テレウムに属することが認めら
れアスペルギルス・テレウスＧ−１８と命名し、微工研
菌寄第７２６４号として微生物工業技術研究所に寄託さ
れている。
件 ：ツァペック寒天２５℃、１４日間培養集落性状
：３５ｍｍ クリーム〜黄金色 や
や綿毛状で厚みあり 裏面無色 顕微鏡形態：分生子頭 円柱状 頂のう 半球状
フィアライド ２段 １２〜１５μｍ
分生子柄 長い ５００μｍ以上
分生子 球形 ２．５μｍ滑面 以上の菌学的性質から「マニュアル・オブ・ザ・アスペ
ルギリー、トム・アンド・レイパー［１９４５］（Ｍａ
ｎｕａｌ ｏｆ Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｉ、Ｔｈｏｍ ＆ Ｒ
ａｐｅｒ ［１９４５］）」に従って検索した結果、本
菌株はアスペルギルス・テレウムに属することが認めら
れアスペルギルス・テレウスＧ−１８と命名し、微工研
菌寄第７２６４号として微生物工業技術研究所に寄託さ
れている。
本発明に係る菌を増殖させるにあたっては、炭素源とし
て２〜１５％Ｄ−キシロース、Ｄ−アラビノース、Ｄ−
リボース等の五炭糖を含有し、イーストエキス又はコー
ンスティーブリカー等を添加して液体培地を用いる。培
養は２５〜３５℃で２〜１０日間行う。培養法は通気培
養、振盪培養、回転ドラム法等好奇的条件であればいず
れも採用できる。また、培地に上記成分の他、各種ビタ
ミン、無機質や適当な有機物を加えることにより増殖率
を高めることもできる。
て２〜１５％Ｄ−キシロース、Ｄ−アラビノース、Ｄ−
リボース等の五炭糖を含有し、イーストエキス又はコー
ンスティーブリカー等を添加して液体培地を用いる。培
養は２５〜３５℃で２〜１０日間行う。培養法は通気培
養、振盪培養、回転ドラム法等好奇的条件であればいず
れも採用できる。また、培地に上記成分の他、各種ビタ
ミン、無機質や適当な有機物を加えることにより増殖率
を高めることもできる。
次いで、このようにして得られた培養体とグルコースを
接触させることによりソルビトールを得ることができる
が、菌体を洗浄して得た生菌をそのまま使用してもある
程度の効果は認められる。しかし、凍結乾燥菌体、凍結
融解菌体、アセトン、エーテル等の有機溶媒処理した菌
体等の処理菌体を用いた方がはるかに効果的である。ま
た、超音波処理、ビブロゲンセルミル等の破砕機を用い
て調整した菌体破砕物および菌体抽出物を用いることも
できる。
接触させることによりソルビトールを得ることができる
が、菌体を洗浄して得た生菌をそのまま使用してもある
程度の効果は認められる。しかし、凍結乾燥菌体、凍結
融解菌体、アセトン、エーテル等の有機溶媒処理した菌
体等の処理菌体を用いた方がはるかに効果的である。ま
た、超音波処理、ビブロゲンセルミル等の破砕機を用い
て調整した菌体破砕物および菌体抽出物を用いることも
できる。
グルコースの還元にあたっては、上記方法で得られた処
理菌体、菌体破砕物又はこれから分離した菌体抽出物あ
るいはこれらの混合物を１〜６０％濃度のブドウ糖液に
加え、１０〜６０℃、望ましくは２５〜３５℃で反応さ
せる。この際、補酵素として還元型ニコチンアミド ア
デーン ジヌクレオチド ホスフェイト（以下、「ＮＡＤ
ＰＨ」という。）を共存させることによってソルビトー
ルの生産性はより飛躍的に向上させることができる。Ｎ
ＡＤＰＨの添加量は使用する菌体の調整法あるいは菌体
の抽出操作により大幅に異なり、ブドウ糖１モル当り０
．１ミリモル〜２０モル望ましくは０．１モル〜１０モ
ルである。反応に要する時間もまた条件により大きく変
動し、例えば菌体抽出物を用いた場合、３０分ないし１
４日で反応は完了する。
理菌体、菌体破砕物又はこれから分離した菌体抽出物あ
るいはこれらの混合物を１〜６０％濃度のブドウ糖液に
加え、１０〜６０℃、望ましくは２５〜３５℃で反応さ
せる。この際、補酵素として還元型ニコチンアミド ア
デーン ジヌクレオチド ホスフェイト（以下、「ＮＡＤ
ＰＨ」という。）を共存させることによってソルビトー
ルの生産性はより飛躍的に向上させることができる。Ｎ
ＡＤＰＨの添加量は使用する菌体の調整法あるいは菌体
の抽出操作により大幅に異なり、ブドウ糖１モル当り０
．１ミリモル〜２０モル望ましくは０．１モル〜１０モ
ルである。反応に要する時間もまた条件により大きく変
動し、例えば菌体抽出物を用いた場合、３０分ないし１
４日で反応は完了する。
反応終了後、母液からのソルビトールの分離精製にあた
っては遠心分離法、限外濾過法、イオン交換法等公知の
方法を組合せて利用する。
っては遠心分離法、限外濾過法、イオン交換法等公知の
方法を組合せて利用する。
以下、実施例を挙げて本発明を詳細に説明する。なお、
生産物の確認は薄層クロマトグラフィー、高速液体クロ
マトグラフィーおよびガスクロマトグラフィーによって
行った、また定量は高速液体クロマトグラフィーで行っ
た。
生産物の確認は薄層クロマトグラフィー、高速液体クロ
マトグラフィーおよびガスクロマトグラフィーによって
行った、また定量は高速液体クロマトグラフィーで行っ
た。
実施例１
５００ｍｌ容消化フラスコに滅菌した表２に示す組成の
培地５０ｍｌを入れ、アスペルギルス・テレウスＧ−１
８（微工研菌寄第７２６４号）の菌糸を植菌し、３０℃
、３日間培養した。培養菌体をリン酸緩衝液で２回洗浄
し、（Ｅｄｍｕｎｄ Ｂｉｉｌｅｒ社製）で２０分間処
理し、１４，０００ｇ、２０分間遠心分離し、その上清
画分をソルビトールの生産に供した。
培地５０ｍｌを入れ、アスペルギルス・テレウスＧ−１
８（微工研菌寄第７２６４号）の菌糸を植菌し、３０℃
、３日間培養した。培養菌体をリン酸緩衝液で２回洗浄
し、（Ｅｄｍｕｎｄ Ｂｉｉｌｅｒ社製）で２０分間処
理し、１４，０００ｇ、２０分間遠心分離し、その上清
画分をソルビトールの生産に供した。
上記操作で得た上清画分を用いて表３に示す組成の反応
液を調整し、ｐＨ７．５とし、３０℃で６時間反応させ
た。その反応液中に３０μｍｏｉｅｓのソルビトールが
得られた。
液を調整し、ｐＨ７．５とし、３０℃で６時間反応させ
た。その反応液中に３０μｍｏｉｅｓのソルビトールが
得られた。
表２
Ｄ−キシロース ８ｇ
Ｋ２ＨＰＯ４ ０．１ｇ
ＭｇＳＯ４・７Ｈ２Ｏ ０．０５ｇ
ＣａＣｌ２・２Ｈ２Ｏ ０．０１ｇＮａＣｌ
０．０１ｇカザミノ酸 ０
．４ｇ イーストエキス ０．１ｇ ｐＨ５．０ １００mｌ 表３ 遠心上清液 ５ｍｌ グルコース ３．６ｍ ｍｏｌｅｓＮＡＤＰＨ
０．２ｍ ｍｏｌｅｓリン酸緩衝液 ０．７
ｍｍｏｌｅｓ 蒸留水 ５ｍｌ Ｔｏｔａｌ ｖｏｌ １０ｍｌ 実施例２ 実施例１と同様に培養して得られたアスペルギルス・テ
レウスＧ−１８（微工研菌寄第７２６４号）の菌体をリ
ン酸緩衝液で２回洗浄した後、凍結乾燥した。
０．０１ｇカザミノ酸 ０
．４ｇ イーストエキス ０．１ｇ ｐＨ５．０ １００mｌ 表３ 遠心上清液 ５ｍｌ グルコース ３．６ｍ ｍｏｌｅｓＮＡＤＰＨ
０．２ｍ ｍｏｌｅｓリン酸緩衝液 ０．７
ｍｍｏｌｅｓ 蒸留水 ５ｍｌ Ｔｏｔａｌ ｖｏｌ １０ｍｌ 実施例２ 実施例１と同様に培養して得られたアスペルギルス・テ
レウスＧ−１８（微工研菌寄第７２６４号）の菌体をリ
ン酸緩衝液で２回洗浄した後、凍結乾燥した。
得られて凍結乾燥菌体を用いて表４に示した反応組成液
を調整し、３０℃で１６時間反応させた。反応液中に１
２２μｍｏｌｅｓのソルビトールが得られた。
を調整し、３０℃で１６時間反応させた。反応液中に１
２２μｍｏｌｅｓのソルビトールが得られた。
表４
凍結乾燥菌体 ０．５ｇ
グルコース １０ｍ ｍｏｌｅｓ
ＮＡＤＰＨ ２ｍ ｍｏｌｅｓリン酸緩衝液
３．５ｍ ｍｏｌｅｓ蒸留水 ４０ｍｌ 実施例３ アスペルギルス・テレウスＧ−１８（微工研菌寄第７２
６４号）を用いて実施例１の方法で得た反応液２０ｍｌ
をイオン交換樹脂（アミネックスＡ４：商品名）のカラ
ムに通してソルビトールを精整した。得られてソルビト
ールは５４μｍｏｌｅｓであった。
３．５ｍ ｍｏｌｅｓ蒸留水 ４０ｍｌ 実施例３ アスペルギルス・テレウスＧ−１８（微工研菌寄第７２
６４号）を用いて実施例１の方法で得た反応液２０ｍｌ
をイオン交換樹脂（アミネックスＡ４：商品名）のカラ
ムに通してソルビトールを精整した。得られてソルビト
ールは５４μｍｏｌｅｓであった。
Claims (1)
- アスペルギルス属に属し、ソルビトール生産能を有する
菌株を五炭糖類を主炭素源とする培地に培養し、次いで
得られた培養体とブドウ糖を接触せしめソルビトールを
製造することを特徴とするアスペルギルス属菌によるソ
ルビトールの製造法
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP19327583A JPS6083591A (ja) | 1983-10-15 | 1983-10-15 | アスペルギルス属菌によるソルビト−ルの製造法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP19327583A JPS6083591A (ja) | 1983-10-15 | 1983-10-15 | アスペルギルス属菌によるソルビト−ルの製造法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS6083591A true JPS6083591A (ja) | 1985-05-11 |
| JPS639829B2 JPS639829B2 (ja) | 1988-03-02 |
Family
ID=16305225
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP19327583A Granted JPS6083591A (ja) | 1983-10-15 | 1983-10-15 | アスペルギルス属菌によるソルビト−ルの製造法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS6083591A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6790747B2 (en) | 1997-05-12 | 2004-09-14 | Silicon Genesis Corporation | Method and device for controlled cleaving process |
-
1983
- 1983-10-15 JP JP19327583A patent/JPS6083591A/ja active Granted
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6790747B2 (en) | 1997-05-12 | 2004-09-14 | Silicon Genesis Corporation | Method and device for controlled cleaving process |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS639829B2 (ja) | 1988-03-02 |
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