JPS60239448A - 両性電解質混合物 - Google Patents
両性電解質混合物Info
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- JPS60239448A JPS60239448A JP59095268A JP9526884A JPS60239448A JP S60239448 A JPS60239448 A JP S60239448A JP 59095268 A JP59095268 A JP 59095268A JP 9526884 A JP9526884 A JP 9526884A JP S60239448 A JPS60239448 A JP S60239448A
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
（産業上の利用分野）
本発明は、多塩基性アミノカルボン酸の混合物を含有す
る両性電解質混合物およびその製造法に関するものであ
る。特に、タンパク質等の高分子両性電解質を分別、分
析するのに適した等電点分画用水溶性両性電解質担体お
よびその製造法に関するものである。
る両性電解質混合物およびその製造法に関するものであ
る。特に、タンパク質等の高分子両性電解質を分別、分
析するのに適した等電点分画用水溶性両性電解質担体お
よびその製造法に関するものである。
（従来の技術）
等電点分画法とは、通電によって自由溶液あるいは適当
゛なゲル中にｐＨ勾配形成剤によってあらかじめ安定な
ｐｔｉ勾配を形成させ、そのｐＨ勾配に対してタンノセ
ク質等の両性電解質をそのｐＩ（等電点）と同一のｐｔ
ｉ層まで泳動させ、そのｐＨ層内にそれらを濃縮分離さ
せる方法である。すなわち、タンパク質等の両性電解質
のｐＩの差に基づいて個々の成分を互いに分離する方法
である。
゛なゲル中にｐＨ勾配形成剤によってあらかじめ安定な
ｐｔｉ勾配を形成させ、そのｐＨ勾配に対してタンノセ
ク質等の両性電解質をそのｐＩ（等電点）と同一のｐｔ
ｉ層まで泳動させ、そのｐＨ層内にそれらを濃縮分離さ
せる方法である。すなわち、タンパク質等の両性電解質
のｐＩの差に基づいて個々の成分を互いに分離する方法
である。
この等電分画法に用いるｐＨ勾配形成剤が両性電解質担
体である。
体である。
５ｖｅｎｓｓｏｎの理論的および実験的考察（Ｈ。
５ｖｅｎｓｓｏｎ、Ａｃｔａ Ｏｈｅｍ、５ｃａｎｄ、
ｅ ／ ｔ 。
ｅ ／ ｔ 。
１７１＆（／９４２））および従来からの知見によれば
、この両性電解質担体に要求される特性としては、以下
の各項目が挙げられる。
、この両性電解質担体に要求される特性としては、以下
の各項目が挙げられる。
まず、分画するタン・ξり質等の基質の分離能を大とす
るために、 （１）種々のｐＨ（はとんどのタンパク質のｐＩが属す
るｐＨの範囲で、具体的にはｐＨＪ〜ｉ。
るために、 （１）種々のｐＨ（はとんどのタンパク質のｐＩが属す
るｐＨの範囲で、具体的にはｐＨＪ〜ｉ。
の範囲］に、密に異なる等電点を有する水溶性両性電解
質混合物であること。
質混合物であること。
（２） ＤＩ−１）Ｋｌの値ができる限り小さいこと。
である。
次に、カラム泳動分画法における基質の光学的検出を妨
害しないために、 （３）検出波長として頻用される２ｒＯｎｍ域に分光吸
収を有しないこと。
害しないために、 （３）検出波長として頻用される２ｒＯｎｍ域に分光吸
収を有しないこと。
（４）着色タンノｅり質の検出妨害とならないように、
着色はできる限り少な（、基質染色液に対する脱色性が
良好で残色のないこと。
着色はできる限り少な（、基質染色液に対する脱色性が
良好で残色のないこと。
そして、分画後、担体から基質を単離分取する際、両性
電解質全透析除去するために、 （５）透析性が良好で、基質と分離しやすいこと。
電解質全透析除去するために、 （５）透析性が良好で、基質と分離しやすいこと。
である。
（発明が解決しようとする問題点）
これまでに、上記の特性を満足させるべく種々の両性電
解質担体が提案されてきた。例えば、西独特許（公開）
２．／３７，１，１７号、同コ、λｒ Ｊ Ｏ，７≠３
、特開昭ｔｏ−≠７！２６号等に記載のアミノスルホン
酸系化合物、西独特許（公開）コ、ｔＯり、２７７号に
記載のジアミンと不飽和カルボン酸との反応生成物、あ
るいは特開昭ｊ３−／≠ｔり７６号に記載のアミノ酸等
と二官能性アルキル化剤との反応生成物や特公昭ｊＯ−
２ｊりを号に記載のポリアミンと不飽和カルボン酸との
反応生成物等である。
解質担体が提案されてきた。例えば、西独特許（公開）
２．／３７，１，１７号、同コ、λｒ Ｊ Ｏ，７≠３
、特開昭ｔｏ−≠７！２６号等に記載のアミノスルホン
酸系化合物、西独特許（公開）コ、ｔＯり、２７７号に
記載のジアミンと不飽和カルボン酸との反応生成物、あ
るいは特開昭ｊ３−／≠ｔり７６号に記載のアミノ酸等
と二官能性アルキル化剤との反応生成物や特公昭ｊＯ−
２ｊりを号に記載のポリアミンと不飽和カルボン酸との
反応生成物等である。
しかしながら、前述の両性電解質担体に要求される特性
をすべて満足するものは、いまだ得られていない。特に
、基質の分離能や染料の脱色性と、両性電解質担体独自
の着色度とを同時に満足させることは困難であった。と
りわけ、着色度については、原料のポリアミンに起因す
るものと考えられているが、原料および目的物の精製も
効果がなかった。
をすべて満足するものは、いまだ得られていない。特に
、基質の分離能や染料の脱色性と、両性電解質担体独自
の着色度とを同時に満足させることは困難であった。と
りわけ、着色度については、原料のポリアミンに起因す
るものと考えられているが、原料および目的物の精製も
効果がなかった。
（問題点を解決するための手段）
本発明者は、鋭意研究の結果、
少な（ともλつのアミノ基またはイミノ基を有する有機
化合物と、炭素−炭素二重結合を有するカルボン酸エス
テルとを、非水系溶媒中で反応させた後、エステル部分
を加水分解することにより合成することを特徴とする多
塩基性アミノカルボン酸の混合物を含有する両性電解質
混合物により、前述の問題点を解決できることを見出し
た。
化合物と、炭素−炭素二重結合を有するカルボン酸エス
テルとを、非水系溶媒中で反応させた後、エステル部分
を加水分解することにより合成することを特徴とする多
塩基性アミノカルボン酸の混合物を含有する両性電解質
混合物により、前述の問題点を解決できることを見出し
た。
本発明に用いられる少な（とも２つのアミノ基またはイ
ミノ基を有する有機化合物は、次の一般式（Ｉ）で表わ
される。
ミノ基を有する有機化合物は、次の一般式（Ｉ）で表わ
される。
一般式（Ｉ）
５
を含んでいてもよい二価の基を表わし、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ
３％ Ｒ４、およびＲ５は、独立に水素原子、アルキル
基または置換アルキル基を表わす。ただし、Ｒｔ 、Ｒ
２、Ｒ３、Ｒ４およびＲ５のうち少なくとも１つは水素
原子である。
３％ Ｒ４、およびＲ５は、独立に水素原子、アルキル
基または置換アルキル基を表わす。ただし、Ｒｔ 、Ｒ
２、Ｒ３、Ｒ４およびＲ５のうち少なくとも１つは水素
原子である。
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４およびＲ５は、好ましくは水素
原子、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基％ ｉ−プ
ロピル基、ｎ−ブチル基、ｉ−ブチＡ４、ｔ−ブチル基
、ヒドロキシメチル基またはヒドロキシメチル基から選
ばれる。ＲＵ好ましく一巴寥飴！１１１τ小／ＩＩＪ牛
１ノソＩループキ？Ｍ −個以上の−Ｎ−で表わされる
基を鎖中に含むポ■ ５ リメチレングループを表わし、その中の１以上のメチレ
ン基は、上記Ｒ１からＲ５で表わされる基で置換されて
いてもよい。
原子、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基％ ｉ−プ
ロピル基、ｎ−ブチル基、ｉ−ブチＡ４、ｔ−ブチル基
、ヒドロキシメチル基またはヒドロキシメチル基から選
ばれる。ＲＵ好ましく一巴寥飴！１１１τ小／ＩＩＪ牛
１ノソＩループキ？Ｍ −個以上の−Ｎ−で表わされる
基を鎖中に含むポ■ ５ リメチレングループを表わし、その中の１以上のメチレ
ン基は、上記Ｒ１からＲ５で表わされる基で置換されて
いてもよい。
一般式（Ｉ）で表わされる化合物としては、例えば、ジ
エチレントリアミン、トリエチレンテトラミン、テトラ
エチレンペンタミン、ペンタエチレンへ午サミンおよび
それぞれに対応するプロピレンアミン等が挙げられる。
エチレントリアミン、トリエチレンテトラミン、テトラ
エチレンペンタミン、ペンタエチレンへ午サミンおよび
それぞれに対応するプロピレンアミン等が挙げられる。
一般式（ＩＪで表わされる化合物は、単独で使用しても
二種類以上を使用してもよく、１以上のモノアミンを併
用することもできる。
二種類以上を使用してもよく、１以上のモノアミンを併
用することもできる。
本発明に用いられる炭素−炭素二重結合を有するカルボ
ン酸エステルは、次の一般式（Ｉｆ）で表わされる。
ン酸エステルは、次の一般式（Ｉｆ）で表わされる。
一般式（ＩＩ）
式中、Ｒ６およびＲｙ ｆ１独立に水素原子、または低
級アルキル基を表わす。Ｒ８は水素原子、シアノ基、ま
たは低級アルキル基を表わす。Ｘは単結合または二価の
低級アルキレン基金表わす。
級アルキル基を表わす。Ｒ８は水素原子、シアノ基、ま
たは低級アルキル基を表わす。Ｘは単結合または二価の
低級アルキレン基金表わす。
Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８またはＸの中に１個の−ＣＯ２Ｒ１０
基を有していてもよい。Ｒ９およびＲＩＯは独立に置換
されていてもよい低級アルキル基を表わす。
基を有していてもよい。Ｒ９およびＲＩＯは独立に置換
されていてもよい低級アルキル基を表わす。
Ｒ９または１０で表わされる基としては、好ましくは、
メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、ｉ−プロピル基
、ヒドロキシエチル基、またはメトキシエチル基から選
ばれる。
メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、ｉ−プロピル基
、ヒドロキシエチル基、またはメトキシエチル基から選
ばれる。
一般式（ＩＩＪで表わされる化合物としては、α。
β−不飽和カルボン酸エステルが好ましく、例えば、ア
クリル酸メチル、アクリル酸エチル、アクリル酸ｎ−プ
ロピル、アクリル酸メトキシエチル、およびそれらに対
応するメタクリル酸エステル、マレイン酸またはイタコ
ン酸等が挙げられる。
クリル酸メチル、アクリル酸エチル、アクリル酸ｎ−プ
ロピル、アクリル酸メトキシエチル、およびそれらに対
応するメタクリル酸エステル、マレイン酸またはイタコ
ン酸等が挙げられる。
一般式（ＩＩ）で表わされる化合物は、単独で使用して
も二種類以上を使用してもよい。
も二種類以上を使用してもよい。
本発明の両性電解質混合物は、一般式ＣＩＪおよび一般
式（ＩＩ）で表わされる化合物を非水系溶媒中で反応さ
せ、その後、エステル部を加水分解することにより合成
される。ここで、非水系溶媒を用いるのは、一般式（Ｉ
Ｉ）で表わされる化合物のエステル部分が加水分解され
ると、反応生成物の着色度が大となり、また不純物混入
の原因となるためである。
式（ＩＩ）で表わされる化合物を非水系溶媒中で反応さ
せ、その後、エステル部を加水分解することにより合成
される。ここで、非水系溶媒を用いるのは、一般式（Ｉ
Ｉ）で表わされる化合物のエステル部分が加水分解され
ると、反応生成物の着色度が大となり、また不純物混入
の原因となるためである。
ここで用いられる非水系溶媒として框、例えば、メタノ
ール、エタノール等のアルコール系、ジエチルエーテル
、テトラヒドロフラン、ジオキサンのようなエーテル系
、あるいにアセトニトリル、Ｎ、Ｎ−ジメチルホルムア
ミドのような非プロトン性極性溶媒や−・ロゲン化炭化
水素等が挙げられるが、好ましくはアルコール系溶媒で
ある。
ール、エタノール等のアルコール系、ジエチルエーテル
、テトラヒドロフラン、ジオキサンのようなエーテル系
、あるいにアセトニトリル、Ｎ、Ｎ−ジメチルホルムア
ミドのような非プロトン性極性溶媒や−・ロゲン化炭化
水素等が挙げられるが、好ましくはアルコール系溶媒で
ある。
反応温度および時間は、出発原料および反応溶媒により
適宜選択することができるが、可能な限り低い方が目的
物の着色に対して有利である。また、必要に応じて触媒
（有機ま７８：ｉｌｔ無機の酸や塩基）や重合防止剤を
用いてもよい。
適宜選択することができるが、可能な限り低い方が目的
物の着色に対して有利である。また、必要に応じて触媒
（有機ま７８：ｉｌｔ無機の酸や塩基）や重合防止剤を
用いてもよい。
ここで得られるポリアミノポリカルボン酸エステルの種
類は、一般式（Ｉ）の化合物中の無置換アミノ基の水素
原子数の総和と、一般式（Ｉｆ）の化合物の数に応じて
決まる。
類は、一般式（Ｉ）の化合物中の無置換アミノ基の水素
原子数の総和と、一般式（Ｉｆ）の化合物の数に応じて
決まる。
加水分解工程は、通常水を溶媒として行ない、必要に応
じて無機または有機の塩基等の触媒を用いることもでき
る。生成物の着色を防止するために、常圧または加圧下
で不活性気体（窒素ガス、アルゴンガス等）中で反応す
ることが好ましく、水素ガスとパラジウム−炭素のよう
な還元条件下で行なうことも有効である。
じて無機または有機の塩基等の触媒を用いることもでき
る。生成物の着色を防止するために、常圧または加圧下
で不活性気体（窒素ガス、アルゴンガス等）中で反応す
ることが好ましく、水素ガスとパラジウム−炭素のよう
な還元条件下で行なうことも有効である。
（作用）
前述の方法で得られる両性電解質混合物の種類は、一般
式〔工〕および一般式ＣＩ［Ｊで表わされる化合物の仕
込みモル比を適当に選ぶことによって調節することもで
きるが、加水分解条件の選び方による加水分解率の変更
によっても調節することができる。したがって本発明は
、λ工程の反応のいずれにおいてもｐＩの異なる両性電
解質の種類を幅広くコントロールすることができるとい
う漬１占め一九へ− 不飽和カルボン酸にポリアミンを付加させるという従来
の方法（特公昭よ０−２ｊりを号に記載）は、酸（不飽
和カルボン酸）と塩基（ポリアミン）の中和反応を伴い
、その著しい反応熱に起因すると考えられる２ｒＯｎｍ
領域に分光吸収を有する不純物や着色物質を副生じやす
い。本発明による方法では、出発物質として不飽和カル
ボン酸エステルを用いるので、酸塩基中和反応による発
熱の問題はな（、付加反応による反応熱もほとんど無視
しうるので、熱による不純物や着色の懸念はない。また
、エステル部を加水分解する工程では、不活性気体中で
行なえばさらに着色を抑えることができる。
式〔工〕および一般式ＣＩ［Ｊで表わされる化合物の仕
込みモル比を適当に選ぶことによって調節することもで
きるが、加水分解条件の選び方による加水分解率の変更
によっても調節することができる。したがって本発明は
、λ工程の反応のいずれにおいてもｐＩの異なる両性電
解質の種類を幅広くコントロールすることができるとい
う漬１占め一九へ− 不飽和カルボン酸にポリアミンを付加させるという従来
の方法（特公昭よ０−２ｊりを号に記載）は、酸（不飽
和カルボン酸）と塩基（ポリアミン）の中和反応を伴い
、その著しい反応熱に起因すると考えられる２ｒＯｎｍ
領域に分光吸収を有する不純物や着色物質を副生じやす
い。本発明による方法では、出発物質として不飽和カル
ボン酸エステルを用いるので、酸塩基中和反応による発
熱の問題はな（、付加反応による反応熱もほとんど無視
しうるので、熱による不純物や着色の懸念はない。また
、エステル部を加水分解する工程では、不活性気体中で
行なえばさらに着色を抑えることができる。
従来法では、アミン中の窒素原子数の増加とともに、紫
外吸収物質ならびに着色物質が増加するのに対し、本発
明の方法はそのような相関はみられず、窒素原子数が増
加しても副生物は少ない。
外吸収物質ならびに着色物質が増加するのに対し、本発
明の方法はそのような相関はみられず、窒素原子数が増
加しても副生物は少ない。
本発明の方法によって得られる両性電解質は、統計的計
算から２００〜ｊ００の成分種の混合物と推定される。
算から２００〜ｊ００の成分種の混合物と推定される。
したがって、反応方法およびその条件により、生成され
る成分種およびその数が著しく変化することは十分予想
される。
る成分種およびその数が著しく変化することは十分予想
される。
特に、一般式（Ｉ）で表わされる化合物の窒素原子数が
太き（なるはと反応が複雑となり、その変化は太き（な
ると考えられる。すなわち、合成法あるいは合成条件の
違いにより、生成する両性電解質混合物の組成ならびに
性質が大側に異なると考えられる。
太き（なるはと反応が複雑となり、その変化は太き（な
ると考えられる。すなわち、合成法あるいは合成条件の
違いにより、生成する両性電解質混合物の組成ならびに
性質が大側に異なると考えられる。
両性電解質混合物は、分子量分布が広いほど分離能が向
上することは既に知られているが、例えば一般式（ＩＩ
）の化合物としてペンタエチレンへ中サミンを用い、一
般式（ＩＩＪの化合物として、アクリル酸メチルを用い
る本発明の方法による両性電解質混合物の分子量分布は
、前述の従来法（アミンは同一で、不飽和カルボン酸と
してアクリル酸を使用）で得られる両性電解質混合物の
分イ 子嚢分布と比較し１約′・５倍大き０とがわかっ
ている。
上することは既に知られているが、例えば一般式（ＩＩ
）の化合物としてペンタエチレンへ中サミンを用い、一
般式（ＩＩＪの化合物として、アクリル酸メチルを用い
る本発明の方法による両性電解質混合物の分子量分布は
、前述の従来法（アミンは同一で、不飽和カルボン酸と
してアクリル酸を使用）で得られる両性電解質混合物の
分イ 子嚢分布と比較し１約′・５倍大き０とがわかっ
ている。
（実施例）
以下に、実施例をもって本発明の詳細な説明するが、本
発明は、これらの実施例に限定されることなく、これま
で述べてきた種々の態様においても実施することができ
る。
発明は、これらの実施例に限定されることなく、これま
で述べてきた種々の態様においても実施することができ
る。
実施例−１
か（はん棒（シール付き〕、温度計、ソーダライムＶｔ
付した２１１の弘ツロ丸底フラスコに（ンタエチレンヘ
キサミン（市販品を分子、蒸留、精製り、りもの）／／
４．ｌｉ＋（１１）、−ｔｍｏｌｅ）と、ｚ０ｃ以下に
冷却したメタノール／ｌを入れ溶解する。
付した２１１の弘ツロ丸底フラスコに（ンタエチレンヘ
キサミン（市販品を分子、蒸留、精製り、りもの）／／
４．ｌｉ＋（１１）、−ｔｍｏｌｅ）と、ｚ０ｃ以下に
冷却したメタノール／ｌを入れ溶解する。
容器を冷却し、メチルアクリレート／７Ｊｇ（λｍｏｌ
ｅ）ｉｊ ’Ｃ以下で滴下する。滴下後同温で約１時間
、室温（，２ｊ〜３００Ｃ）で３時間ゆっくり攪拌する
。反応液をλノのナス型フラスコに移し減圧下、ｇｏ°
Ｃ以下でメタノールを留去する。
ｅ）ｉｊ ’Ｃ以下で滴下する。滴下後同温で約１時間
、室温（，２ｊ〜３００Ｃ）で３時間ゆっくり攪拌する
。反応液をλノのナス型フラスコに移し減圧下、ｇｏ°
Ｃ以下でメタノールを留去する。
残留’ＪｆｌｌＪＦ１ペンタエチレンへ中サミンのメチ
ルアクリレート付加物である。
ルアクリレート付加物である。
次にペンタエチレンへ中すξンーメチルアクリレート付
加物１０ｇに蒸留水ｌｌ００ｙｄｆ加え溶解する。この
溶液をオートクレーブに入れアルゴン（又は窒素、水素
）ガスｉ７〜１０Ｋｌｐ／ａｎ の圧力で充填し、ｔｏ
’ｃ、λφｈｒかくはんし加水分解する。
加物１０ｇに蒸留水ｌｌ００ｙｄｆ加え溶解する。この
溶液をオートクレーブに入れアルゴン（又は窒素、水素
）ガスｉ７〜１０Ｋｌｐ／ａｎ の圧力で充填し、ｔｏ
’ｃ、λφｈｒかくはんし加水分解する。
次にこの溶液をナス型フラスコに移し減圧下、ｕｏ”ｃ
以下で内容積が約ｌ／−２量になるまで濃縮する（副生
ずるメタノール等を除去するため）。
以下で内容積が約ｌ／−２量になるまで濃縮する（副生
ずるメタノール等を除去するため）。
濃縮液に再び蒸留水を加え内容物ポリアミノポリカルボ
ン酸の濃度が２０％になるように調製する。
ン酸の濃度が２０％になるように調製する。
性能の結果を表−工に示す。
ペンタエチレンへ中サミンの代りにトリエチレンテトラ
ミン、テトラエチレンペンタミンを使用しても同様に合
成できる。
ミン、テトラエチレンペンタミンを使用しても同様に合
成できる。
又、アクリル酸エステルの代りにメタクリル酸エステル
を使用しても同様に合成できる。
を使用しても同様に合成できる。
実施例−２
実ｍ例−１に於いて原料ペンタエチレンへ中サミンの代
りにテトラエチレン４ンタミンを用い同様に合成した。
りにテトラエチレン４ンタミンを用い同様に合成した。
性能の結果を表−ＩＫ示す。
実施例−３
撹拌棒（シール付き）、温度計、塩化カルシウム管を付
したλｌの参ツロ丸底フラスコにペンタエチレンヘキサ
ミノ（市販品を分子、蒸留、精製したもの）／／４．！
１ｌ（Ｏ，ｊｍｏｌｅ）と、ｚ ’Ｃ以下に冷却したメ
タノール／ ’ｌ ｔ−入れ溶解する。
したλｌの参ツロ丸底フラスコにペンタエチレンヘキサ
ミノ（市販品を分子、蒸留、精製したもの）／／４．！
１ｌ（Ｏ，ｊｍｏｌｅ）と、ｚ ’Ｃ以下に冷却したメ
タノール／ ’ｌ ｔ−入れ溶解する。
容器を冷却しメチルアクリレート１７２ｇ（ｊｍｏｌｅ
）とロープロピルアクリＬ／−ト！７９（０゜ｊｍｏｌ
ｅ）との混合物ｔ−ｊ ｏＣ以下で滴下する。
）とロープロピルアクリＬ／−ト！７９（０゜ｊｍｏｌ
ｅ）との混合物ｔ−ｊ ｏＣ以下で滴下する。
滴下後同温で約１時間、室温（コ！〜３００Ｃ）で３時
間ゆっくりか（はんする。反応液ｉＪＪのナス型フラス
コに移し減圧下≠００Ｃ以下でメタノールを留去する。
間ゆっくりか（はんする。反応液ｉＪＪのナス型フラス
コに移し減圧下≠００Ｃ以下でメタノールを留去する。
残留物はペンタエチレンへ中サミンのメチルアクリレー
トおよびプロピルアクリレートの付加物である。次にこ
のペンタエチレンへ午すきンのメチルおよびプロピルア
クリレート付加物ｔｏｐに、蒸留水弘００−を加え溶解
する。この溶液をオートクレーブに入れアルゴン（又は
窒素、水素）ガスＹｒ！−１ＯＫｆ／ａｎ２の圧力で充
填しｚｏ ０ｃ、コ４Ｌｈｒ攪拌し加水分解する。濾過
抜法に、この溶液をナス型フラスコに移し減圧下ａｏ”
ｃ以下で内容積が約／／−２量になるまで濃縮する（副
生するメタノール、プロノミノール等を除去するため）
。
トおよびプロピルアクリレートの付加物である。次にこ
のペンタエチレンへ午すきンのメチルおよびプロピルア
クリレート付加物ｔｏｐに、蒸留水弘００−を加え溶解
する。この溶液をオートクレーブに入れアルゴン（又は
窒素、水素）ガスＹｒ！−１ＯＫｆ／ａｎ２の圧力で充
填しｚｏ ０ｃ、コ４Ｌｈｒ攪拌し加水分解する。濾過
抜法に、この溶液をナス型フラスコに移し減圧下ａｏ”
ｃ以下で内容積が約／／−２量になるまで濃縮する（副
生するメタノール、プロノミノール等を除去するため）
。
濃縮液に再び蒸留水を加え内容物ポリアミノポリカルボ
ン酸の濃度が２０％になるように調製する。
ン酸の濃度が２０％になるように調製する。
性能の結果を表−■に示す。
以上実施例で示した本発明の方法で合成した両性担体ポ
リアミノポリカルボン厳の性能と比較例として公知の方
法（特公昭１０−２！９４）で合成したものの性能をま
とめて表−■に示す。
リアミノポリカルボン厳の性能と比較例として公知の方
法（特公昭１０−２！９４）で合成したものの性能をま
とめて表−■に示す。
分離能および脱色性の評価は以下のように行なった。
（１）分離能
七ノξラックスＥＦｇ（富士写真フィルム■製等電点電
気泳動用セルロースアセテート膜）またはポリアクリル
アミドゲルディスク（３０ｑｂアクリルアミド、１．ｔ
％ＢＩｓ）を担体として、血清、ヘモグロビン等のタン
ノＲり質およびｐＩママ−−（Ｎａｔｕｒａｌ Ｃｏ１
ｏｒｅｄ ｐ Ｉ Ｍａｒｋｅｒ：Ａｃｅｔ。
気泳動用セルロースアセテート膜）またはポリアクリル
アミドゲルディスク（３０ｑｂアクリルアミド、１．ｔ
％ＢＩｓ）を担体として、血清、ヘモグロビン等のタン
ノＲり質およびｐＩママ−−（Ｎａｔｕｒａｌ Ｃｏ１
ｏｒｅｄ ｐ Ｉ Ｍａｒｋｅｒ：Ａｃｅｔ。
Ｃｙｆｏｃｈｒｏｍｅ ｃ ＃Ｒｒｕｂ Ｃｙｆｏｃｈ
ｒｏｍｅ ｃ’ ＋Ｃ２、Ｈｏｒｓｅ Ｍｙｏｇｌｏｂ
ｉｎ＊Ｗｈａｌｅ ＭｙｏｇｌｏｂｌｎＰａＪｕｓｔ
ｃ２）’ｆｒ試料として、合成した両性電解質担体の等
電点分画能を常法（例えば、富士写真フィルム■のパン
フレット「セパラックスＥＦ、等電点電気泳動法の手引
き」参照） 評価段階二〇・・・優秀、○・・・良好、△・・・可（
２）脱色性 七ノ（シックスＥＦ膜、ポリアクリルアミドゲルによる
等電点分画法によって蛋白質を分画した後染色液（クー
マシーブリリアントブルーノで処理すると膜全体が染色
される。
ｒｏｍｅ ｃ’ ＋Ｃ２、Ｈｏｒｓｅ Ｍｙｏｇｌｏｂ
ｉｎ＊Ｗｈａｌｅ ＭｙｏｇｌｏｂｌｎＰａＪｕｓｔ
ｃ２）’ｆｒ試料として、合成した両性電解質担体の等
電点分画能を常法（例えば、富士写真フィルム■のパン
フレット「セパラックスＥＦ、等電点電気泳動法の手引
き」参照） 評価段階二〇・・・優秀、○・・・良好、△・・・可（
２）脱色性 七ノ（シックスＥＦ膜、ポリアクリルアミドゲルによる
等電点分画法によって蛋白質を分画した後染色液（クー
マシーブリリアントブルーノで処理すると膜全体が染色
される。
次に染色された膜を脱色液（＃酸：エタノール：蒸留水
＝１００ｒｄ：コｊＯｔｄ：Ａ！０ｍ１）に浸漬するこ
とによって染色された蛋白質は脱色されず膜に残り、パ
ックグランド（染色された両性電解質担体）のみ脱色さ
れることが必要である。このパックグランドの脱色性は
早（かつ完全に脱色されることが好ましい。残色すると
蛋白質の検出、定量等の障害となる。
＝１００ｒｄ：コｊＯｔｄ：Ａ！０ｍ１）に浸漬するこ
とによって染色された蛋白質は脱色されず膜に残り、パ
ックグランド（染色された両性電解質担体）のみ脱色さ
れることが必要である。このパックグランドの脱色性は
早（かつ完全に脱色されることが好ましい。残色すると
蛋白質の検出、定量等の障害となる。
（注−１ン従来法：特公昭ＩＱ−２！２６号に記載の方
法 （注−２）原料の略称： ｐＨ（ペンタエチレンへキサミン） ＴＰ、（テトラエチレンベンタハ／） ＭＡ（メチルアクリレート） ＰＡ（ｎ−プロピルアクリレート） ＡＡ（アクリル酸） （注−３）外観および分光吸収はいずれも水溶液（発明
の効果） 上記表−■に示すように本発明の方法で合成した両性電
解質担体は公知の方法で合成したものに比較しＪｆｆ（
７ｎｍ、 ３７（７ｎｍの吸収がそれぞれ１７ｉｏｏ、
／／１０００以下に低減され、又経時（冷蔵保存（４”
Ｃ））にて、はとんど吸収の増加が見られなかった。
法 （注−２）原料の略称： ｐＨ（ペンタエチレンへキサミン） ＴＰ、（テトラエチレンベンタハ／） ＭＡ（メチルアクリレート） ＰＡ（ｎ−プロピルアクリレート） ＡＡ（アクリル酸） （注−３）外観および分光吸収はいずれも水溶液（発明
の効果） 上記表−■に示すように本発明の方法で合成した両性電
解質担体は公知の方法で合成したものに比較しＪｆｆ（
７ｎｍ、 ３７（７ｎｍの吸収がそれぞれ１７ｉｏｏ、
／／１０００以下に低減され、又経時（冷蔵保存（４”
Ｃ））にて、はとんど吸収の増加が見られなかった。
更に本発明の方法で合成した両性電解質担体は分離能、
脱色性、透析性の点でも公知の方法で合成したものより
すぐれていることがわかる。
脱色性、透析性の点でも公知の方法で合成したものより
すぐれていることがわかる。
特許出願人 富士写真フィルム株式会社特許庁長官殿
１．事件の表示 昭和ｊり年 特願第り、ｔ２６を号２
、発明ノ名称 両性電解質混合物 ３、補正をする者 事件との関係 特許出願人 ）・−−と１”−／ン・ す１り Ｌ、７ザフ連絡先
Ｔ′ｒｒＪ６東京都港区西麻布２丁目２６番３０号富士
写真フィルム株式会社東京本社 電話（４０６）２５３７ − ４、補正の対象 明細書の「発明の詳細な説明」の欄 ５、補正の内容 （１）第ｉｓ頁ｌり行目の ［ｃｙｆｏｃｈ、ｒｏｍｅ Ｃｌおよび「ｃｙｆｏｃｈ
ｒｏｍｅ Ｃ’ｊ ｆ それぞれＩＣｙｔｏｃｈｒｏｍｅ Ｃ４および［ｃｙｔ
ｏｃｈｒｏｍｅ Ｃ’ｊと補正する。
、発明ノ名称 両性電解質混合物 ３、補正をする者 事件との関係 特許出願人 ）・−−と１”−／ン・ す１り Ｌ、７ザフ連絡先
Ｔ′ｒｒＪ６東京都港区西麻布２丁目２６番３０号富士
写真フィルム株式会社東京本社 電話（４０６）２５３７ − ４、補正の対象 明細書の「発明の詳細な説明」の欄 ５、補正の内容 （１）第ｉｓ頁ｌり行目の ［ｃｙｆｏｃｈ、ｒｏｍｅ Ｃｌおよび「ｃｙｆｏｃｈ
ｒｏｍｅ Ｃ’ｊ ｆ それぞれＩＣｙｔｏｃｈｒｏｍｅ Ｃ４および［ｃｙｔ
ｏｃｈｒｏｍｅ Ｃ’ｊと補正する。
（２）第１６頁μ行目の
「参照）」を
「にエリ評価した。」
と補正する。
Claims (1)
- 少な（とも一つのアミノ基またはイミノ基を有する有機
化合物と、炭素−炭素二重結合を有するカルメン酸エス
テルとを、非水系溶媒中で反応させた後、エステル部分
を加水分解することにより合成することを特徴とする多
塩基性アミノカルボン酸の混合物を含有する両性電解質
混合物っ
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP59095268A JPS60239448A (ja) | 1984-05-11 | 1984-05-11 | 両性電解質混合物 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP59095268A JPS60239448A (ja) | 1984-05-11 | 1984-05-11 | 両性電解質混合物 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS60239448A true JPS60239448A (ja) | 1985-11-28 |
Family
ID=14133016
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP59095268A Pending JPS60239448A (ja) | 1984-05-11 | 1984-05-11 | 両性電解質混合物 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS60239448A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0708335A3 (en) * | 1994-10-19 | 1996-08-28 | Fuji Photo Film Co Ltd | Dry, analytical element with an ampholyte |
-
1984
- 1984-05-11 JP JP59095268A patent/JPS60239448A/ja active Pending
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0708335A3 (en) * | 1994-10-19 | 1996-08-28 | Fuji Photo Film Co Ltd | Dry, analytical element with an ampholyte |
| US5709837A (en) * | 1994-10-19 | 1998-01-20 | Fuji Photo Film Co., Ltd. | Dry analytical element containing ampholyte |
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