JPS60169766A - 可溶性画分アスパラギン酸アミノトランスフエラ−ゼ及びミトコンドリア画分アスパラギン酸アミノトランスフエラ−ゼの分別測定用試薬 - Google Patents
可溶性画分アスパラギン酸アミノトランスフエラ−ゼ及びミトコンドリア画分アスパラギン酸アミノトランスフエラ−ゼの分別測定用試薬Info
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- JPS60169766A JPS60169766A JP2443184A JP2443184A JPS60169766A JP S60169766 A JPS60169766 A JP S60169766A JP 2443184 A JP2443184 A JP 2443184A JP 2443184 A JP2443184 A JP 2443184A JP S60169766 A JPS60169766 A JP S60169766A
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- aspartate aminotransferase
- acid aminotransferase
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- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/573—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for enzymes or isoenzymes
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は抗アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ抗
体結合不溶性担体からなるアスパラギン酸アミノトラン
スフェラーゼ測定用試薬に関する。
体結合不溶性担体からなるアスパラギン酸アミノトラン
スフェラーゼ測定用試薬に関する。
血清中のアスパラギン酸アミノトランスフェラーゼは、
可溶性画分に存在するもの（ｃ−ＡＳＴ）とミトコンド
リア画分に存在するもの（ｍ−ＡＳＴ）の２つに大別さ
れる。臨床的に血清アスパラギン酸アミノトランスフェ
ラーゼは、肝疾患の状態をよく反映し、肝疾患の診断に
利用されている。しかしながら、現在主に行われている
血清アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼの活性測
定法は、全アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼの
測定法であるが、可溶性画分アスパラギン酸アミノトラ
ンスフェラーゼ及びミトコンドリア画分アスパラギン酸
アミノトランスフェラーゼを分別して測定することは肝
疾患の進行の程度を適格に表すことができるため望まし
い。そこで、電気泳動法。
可溶性画分に存在するもの（ｃ−ＡＳＴ）とミトコンド
リア画分に存在するもの（ｍ−ＡＳＴ）の２つに大別さ
れる。臨床的に血清アスパラギン酸アミノトランスフェ
ラーゼは、肝疾患の状態をよく反映し、肝疾患の診断に
利用されている。しかしながら、現在主に行われている
血清アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼの活性測
定法は、全アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼの
測定法であるが、可溶性画分アスパラギン酸アミノトラ
ンスフェラーゼ及びミトコンドリア画分アスパラギン酸
アミノトランスフェラーゼを分別して測定することは肝
疾患の進行の程度を適格に表すことができるため望まし
い。そこで、電気泳動法。
カラム法、吸収法との方法により、可溶性画分アスパラ
ギン酸アミノトランスフェラーゼと、ミトコンドリア画
分アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼを分別する
手段が報告されているが、これらの方法は日常の検査法
として利用されるにまでは至っていない。
ギン酸アミノトランスフェラーゼと、ミトコンドリア画
分アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼを分別する
手段が報告されているが、これらの方法は日常の検査法
として利用されるにまでは至っていない。
そこで、上記情況に鑑み研究を進めた結果、抗原−抗体
反応により可溶性画分アスパラキン酸アミノトランスフ
ェラーゼとミトコンドリア画分アスパラギン酸アミノト
ランスフェラーゼを分離し、その活性を測定することに
より分別を可能にしたものである。
反応により可溶性画分アスパラキン酸アミノトランスフ
ェラーゼとミトコンドリア画分アスパラギン酸アミノト
ランスフェラーゼを分離し、その活性を測定することに
より分別を可能にしたものである。
すなわち、本発明は抗ヒトアスパラギン酸アミノトラン
スフェラーゼ抗体結合不溶性担体からなる、アスパラギ
ン酸アミノトランスフェラーゼ測定用試薬に関する。
スフェラーゼ抗体結合不溶性担体からなる、アスパラギ
ン酸アミノトランスフェラーゼ測定用試薬に関する。
さらに詳細には、抗ヒトアスパラギン酸アミノトランス
フェラーゼ抗体を利用した抗体結合不溶性担体からなる
、血清中の可溶性画分及びミトコンドリア画分のアスパ
ラギン酸アミノトランスフェラーゼ測定用試薬に関する
。
フェラーゼ抗体を利用した抗体結合不溶性担体からなる
、血清中の可溶性画分及びミトコンドリア画分のアスパ
ラギン酸アミノトランスフェラーゼ測定用試薬に関する
。
本発明において、抗体結合体としては、ペーパーディス
ク、ガラスピーズ等の不溶性の担体であれば使用するこ
とができ、抗体の結合は化学的方法によって行うことが
できる。実際には、血清と抗体結合担体を反応させ、抗
原−抗体反応を行ったのち、緩衝液にて充分担体を洗浄
し、非特異的な物質を完全に除去する。その後、常法の
アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ活性測定法に
従い活性を測定する。
ク、ガラスピーズ等の不溶性の担体であれば使用するこ
とができ、抗体の結合は化学的方法によって行うことが
できる。実際には、血清と抗体結合担体を反応させ、抗
原−抗体反応を行ったのち、緩衝液にて充分担体を洗浄
し、非特異的な物質を完全に除去する。その後、常法の
アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ活性測定法に
従い活性を測定する。
劇症肝炎患者血清１０ｍ！！より可溶性画分アスパラギ
ン酸アミノトランスフェラーゼを精製した。
ン酸アミノトランスフェラーゼを精製した。
ヒト血清１０ｍ（！に１０ｍＭのコハク酸カリウムを含
む５０ｍＭリン酸カリウム緩衝液（ｐ）Ｉ ６．０）
３０ｍ（！を添加した後１．雷法に従い硫安分画を行い
４０〜８０％硫安画分を集めた。その１０ｍＭコハク酸
カリウムを含む５０＋Ｍリン酸カリウム緩衝液（ｐＨ６
，０）に対して充分透析を行った後、同緩衝液で平衡歯
したＣＭ−Ｃｅｌｌｕｌｏｓｅに添加した。素通り画分
を可溶性画分アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ
及び塩化カリウム０ないし０．５ Ｍまでのグラジェン
トにて溶出する画分を、ミトコンドリア画分アスパラギ
ン酸アミノトランスフェラーゼとした。その両アスパラ
ギン酸アミノトランスフェラーゼを、メンブランフィル
タ−にて濃縮後、両者の抗原としてウサギに対して免疫
した。免疫は常法に従い行った。すなわち、フロイント
のコンプリート・アジュバント１ｍＱを、上記にて精製
した両アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ抗原１
ｍＱと混和し、別々に２匹のウサギに注射した。
む５０ｍＭリン酸カリウム緩衝液（ｐ）Ｉ ６．０）
３０ｍ（！を添加した後１．雷法に従い硫安分画を行い
４０〜８０％硫安画分を集めた。その１０ｍＭコハク酸
カリウムを含む５０＋Ｍリン酸カリウム緩衝液（ｐＨ６
，０）に対して充分透析を行った後、同緩衝液で平衡歯
したＣＭ−Ｃｅｌｌｕｌｏｓｅに添加した。素通り画分
を可溶性画分アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ
及び塩化カリウム０ないし０．５ Ｍまでのグラジェン
トにて溶出する画分を、ミトコンドリア画分アスパラギ
ン酸アミノトランスフェラーゼとした。その両アスパラ
ギン酸アミノトランスフェラーゼを、メンブランフィル
タ−にて濃縮後、両者の抗原としてウサギに対して免疫
した。免疫は常法に従い行った。すなわち、フロイント
のコンプリート・アジュバント１ｍＱを、上記にて精製
した両アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ抗原１
ｍＱと混和し、別々に２匹のウサギに注射した。
その後ブースターを２週間間隔で３回行い、抗血清を得
た。抗血清は常法に従い３３％の硫安分画、ＤＥＡＥ−
Ｃｅｌｌｕｌｏｓｅの素通りを行い各々の抗体を得た。
た。抗血清は常法に従い３３％の硫安分画、ＤＥＡＥ−
Ｃｅｌｌｕｌｏｓｅの素通りを行い各々の抗体を得た。
実施例１
ペーパー−゛イスクを とした″″′二径６鶴にパンチ
した濾紙（東洋濾紙、 Ｎｏ、５ＬＡ ）２ｇを充分に
水洗し、水８０ Ｊ及びブロムシアン２ｇを添加したの
ちｌＮＮａＯＨでｐ）Ｉを１０．５に調整しながら３０
分間反応させる。その後、５ｍＭ炭酸水素ナトリウム溶
液で洗浄後、さらに水洗する。
した濾紙（東洋濾紙、 Ｎｏ、５ＬＡ ）２ｇを充分に
水洗し、水８０ Ｊ及びブロムシアン２ｇを添加したの
ちｌＮＮａＯＨでｐ）Ｉを１０．５に調整しながら３０
分間反応させる。その後、５ｍＭ炭酸水素ナトリウム溶
液で洗浄後、さらに水洗する。
この活性化ペーパーディスクに０．１Ｍ炭酸水素ナトリ
ウム溶液４０ｍ１！及び抗可溶性画分アスパラギン酸ア
ミノトランスエラーセ抗体１４■を添加し、４℃にて３
時間振盪する。その後、０．１Ｍ炭酸水素ナトリウムで
洗浄し、次いで０．１Ｍ炭酸水素ナトリウム溶液に溶解
した５０ｍＭエタノールアミン４０ｍＱを添加し、室温
にて３時間振盪する。その後、０．１Ｍ炭酸水素ナトリ
ウム溶液、次いで、０．５Ｍ炭酸水素ナトリウム溶液に
て充分洗浄後、０．１Ｍ酢酸緩衝液（ｐ）Ｉ ４．０）
４０ ＋ｎ（ｊを添加し、室温にて３０分間振盪する
。
ウム溶液４０ｍ１！及び抗可溶性画分アスパラギン酸ア
ミノトランスエラーセ抗体１４■を添加し、４℃にて３
時間振盪する。その後、０．１Ｍ炭酸水素ナトリウムで
洗浄し、次いで０．１Ｍ炭酸水素ナトリウム溶液に溶解
した５０ｍＭエタノールアミン４０ｍＱを添加し、室温
にて３時間振盪する。その後、０．１Ｍ炭酸水素ナトリ
ウム溶液、次いで、０．５Ｍ炭酸水素ナトリウム溶液に
て充分洗浄後、０．１Ｍ酢酸緩衝液（ｐ）Ｉ ４．０）
４０ ＋ｎ（ｊを添加し、室温にて３０分間振盪する
。
以上のように調整したペーパーディスクは、０．９％塩
化ナトリウム、 ０．０５％アジ化ナトリウム。
化ナトリウム、 ０．０５％アジ化ナトリウム。
０．３％牛血清アルブミン及び０．６％トリトンＸ−４
０５を含むトリス−塩酸緩衝液（ｐＨ８，０）中４℃に
て保存する。
０５を含むトリス−塩酸緩衝液（ｐＨ８，０）中４℃に
て保存する。
インキュベーション緩衝液、すなわち０．９％塩化ナト
リウム、＋ ０．０５％アジ化ナトリウム、０，３％牛
血清アルブミン及び０．６％トリトンＸ−４０５を含む
５０ｍＭ）リス−塩酸緩衝液（ｐＨ８，０） １００
Ｊ＋抗可溶性画分アスパラギン酸アミノトランスフェラ
ーゼ抗体を結合したペーパーディスク１枚及び血清５０
ＰＱを添加し、４℃にて８時間放置する。
リウム、＋ ０．０５％アジ化ナトリウム、０，３％牛
血清アルブミン及び０．６％トリトンＸ−４０５を含む
５０ｍＭ）リス−塩酸緩衝液（ｐＨ８，０） １００
Ｊ＋抗可溶性画分アスパラギン酸アミノトランスフェラ
ーゼ抗体を結合したペーパーディスク１枚及び血清５０
ＰＱを添加し、４℃にて８時間放置する。
その後このペーパーディスクを０．９％塩化ナトリウム
を含む５０ｍＭ１−リスー塩酸緩ｉ＃ｉ液（ｐＨ８，０
）２ ｍＱにて３回洗浄する。次にアスパラギン酸アミ
ノトランスフェラーゼ活性をＰＯ２法にて測定する。
を含む５０ｍＭ１−リスー塩酸緩ｉ＃ｉ液（ｐＨ８，０
）２ ｍＱにて３回洗浄する。次にアスパラギン酸アミ
ノトランスフェラーゼ活性をＰＯ２法にて測定する。
本測定法は、３００単位（Ｗａｔａｎａｂｅ、）Ｉ、
ｅｔ ａｌ、＋Ｉｇａｋｕ ｎｏ ａｙｕｍｉ、 １２
０ （１２） 、 １１２７ （１９８２） ）まで直
線性を示し、同時再現性（ｎ＝２４）の変動係数は３．
００％である。
ｅｔ ａｌ、＋Ｉｇａｋｕ ｎｏ ａｙｕｍｉ、 １２
０ （１２） 、 １１２７ （１９８２） ）まで直
線性を示し、同時再現性（ｎ＝２４）の変動係数は３．
００％である。
実施例２
ペーパー−゛イスク 〜 とした ・去径６ｆｌにパン
チした濾紙（東洋濾紙、 Ｎｏ、５１Ａ ）２ｇを充分
に水洗し、水８０１１ＩＱ及びブロムシアン２ｇを添加
した後、Ｉ Ｎ Ｎａ０１１でｐｌ＋を１０．５に調整
しながら３０分間反応させる。その後、５ｍＭ炭酸水素
ナトリウム溶液で洗浄後、さらに水洗する。
チした濾紙（東洋濾紙、 Ｎｏ、５１Ａ ）２ｇを充分
に水洗し、水８０１１ＩＱ及びブロムシアン２ｇを添加
した後、Ｉ Ｎ Ｎａ０１１でｐｌ＋を１０．５に調整
しながら３０分間反応させる。その後、５ｍＭ炭酸水素
ナトリウム溶液で洗浄後、さらに水洗する。
この活性化ペーパーディスクに、０．１Ｍ炭酸水素ナト
リウムｉ ′／ｆｉ、４０ ｎ＋（！及び抗ミトコンド
リア画分アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ抗体
１４曙を添加し、４°Ｃにて３時間振盪する。−その後
、０．１Ｍ炭酸水素ナトリウムで洗浄し、次いで０．１
Ｍ炭酸水素ナトリウムに溶解した５０ｍＭエタノールア
ミン４０ ＋ｎＱを添加し、室温にて３時間振盪する。
リウムｉ ′／ｆｉ、４０ ｎ＋（！及び抗ミトコンド
リア画分アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ抗体
１４曙を添加し、４°Ｃにて３時間振盪する。−その後
、０．１Ｍ炭酸水素ナトリウムで洗浄し、次いで０．１
Ｍ炭酸水素ナトリウムに溶解した５０ｍＭエタノールア
ミン４０ ＋ｎＱを添加し、室温にて３時間振盪する。
その後０．１Ｍ炭酸水素ナトリウム溶液、次いで０．５
Ｍ炭酸水素ナトリウム溶液にて充分洗浄後、０．１Ｍ酢
酸緩衝液（ｐｌ＋ ４．０） ４０ ｍＱを添加し、室
温にて３０分間振盪する。以上のように調整したペーパ
ーディスクは、０．９％塩化ナトリウム。
Ｍ炭酸水素ナトリウム溶液にて充分洗浄後、０．１Ｍ酢
酸緩衝液（ｐｌ＋ ４．０） ４０ ｍＱを添加し、室
温にて３０分間振盪する。以上のように調整したペーパ
ーディスクは、０．９％塩化ナトリウム。
０．０５％アジ化ナトリウム、０．３％牛血清アルブミ
ン及び０．６％トリトンＸ−４０５を含む５０＋ｎＭ）
リス−塩酸緩衝液（ｐＨ８，０＞中、４℃にて保存する
。
ン及び０．６％トリトンＸ−４０５を含む５０＋ｎＭ）
リス−塩酸緩衝液（ｐＨ８，０＞中、４℃にて保存する
。
インキュベーション緩衝液、すなわち０．９％塩化ナト
リウム、 ０．０５％アジ化ナトリウム、０．３％牛血
清アルブミン及び０．６％トリトンＸ−４０５を含む５
０ＩＩＩＭトリスー塩酸緩衝液（ｐＨ８，０） １００
、−１！。
リウム、 ０．０５％アジ化ナトリウム、０．３％牛血
清アルブミン及び０．６％トリトンＸ−４０５を含む５
０ＩＩＩＭトリスー塩酸緩衝液（ｐＨ８，０） １００
、−１！。
抗ミトコンドリア画分アスパラギン酸アミノトランスフ
ェラーゼ抗体を結合したペーパーディスク１枚及び血清
５０２Ｑを添加し、４°Ｃにて８時間放置する。その、
後、このペーパーディスクを０．９％塩化ナトリウムを
含む５０ｍＭ）リス−塩酸緩衝液（ｐＨ８，０）・２
ｍＱにて３回洗浄する。次にアスパラギン酸アミノトラ
ンスフェラーゼ活性をＰＯＰ法にて測定する。本測定法
は３００単位まで直線性を示し、同時再現性（ｎ＝２４
）の変動係数は３．００％である。
ェラーゼ抗体を結合したペーパーディスク１枚及び血清
５０２Ｑを添加し、４°Ｃにて８時間放置する。その、
後、このペーパーディスクを０．９％塩化ナトリウムを
含む５０ｍＭ）リス−塩酸緩衝液（ｐＨ８，０）・２
ｍＱにて３回洗浄する。次にアスパラギン酸アミノトラ
ンスフェラーゼ活性をＰＯＰ法にて測定する。本測定法
は３００単位まで直線性を示し、同時再現性（ｎ＝２４
）の変動係数は３．００％である。
実施例３
ガースビーズを とした −
径６龍のガラスピーズ４０ｇを充分に水洗した後、１５
０°Ｃにて２４時間乾燥する。その後２％γ−アミノプ
ロピルトリエトキシシラン−アセトン溶液４０１１ＩＱ
を加え、４５℃にて２４時間還流する。次いでビーズを
水洗後、１％グルタルアルデヒド４０ ｕ＋Ｑを加え、
４℃にて２４時間振盪する。
０°Ｃにて２４時間乾燥する。その後２％γ−アミノプ
ロピルトリエトキシシラン−アセトン溶液４０１１ＩＱ
を加え、４５℃にて２４時間還流する。次いでビーズを
水洗後、１％グルタルアルデヒド４０ ｕ＋Ｑを加え、
４℃にて２４時間振盪する。
その後５０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７，０）にて水洗後
、同緩衝液４０ ｎ＋Ｑ及び抗可溶性画分アスパラギン
酸アミノトランスフェラーゼ抗体１４■を添加し、４℃
にて２４時間振盪する。次に０．１Ｍ炭酸水素ナトリウ
ムに熔解した５０ｍＭエタノールアミン４゜ｎＩＱを添
加し、４℃で２４時間振盪する。その後５０ｍＭ酢酸緩
衝液（ｐＨ５，０） ”’？：：洗浄後、０．９％塩化
ブートリウム、 ０．０５％アジ化ナトリウム、０．３
％牛血清アルブミン及び０．６％トリトンＸ−４０５を
含む５０ｍＭ）リス−塩酸緩衝液（ｐｌ＋ ８．０ ＞
中に４℃に”’Ｃ（Ｍ存する。０．９％塩化ナトリウム
、０．０５％アジ化ナトリウム、０．３％牛血清アルブ
ミン及び０．６％トリトンＸ−４０５を含む５０ ｍＭ
Ｆ ’） スＦＡ酸緩（ｈ液（ｐＨ８，０） １００
ｐＤ 、抗可ｉ性画分７スパラギン酸アミノトランス
フェラーゼ抗体結合ガラスピーズｌコ及び血清５０．Ｑ
を３７℃にて３時間放置する。その後実施例１と同様に
洗浄し、ライトマン−フランケル法にて活性を測定する
（Ｓ、 Ｒｅｉｔｍａｎ ａｎｄ Ｓ、 Ｐｒａｎｋｅ
ｌ、 Ａｍｅｒ、 Ｊ、 Ｃ１１ｎ。
、同緩衝液４０ ｎ＋Ｑ及び抗可溶性画分アスパラギン
酸アミノトランスフェラーゼ抗体１４■を添加し、４℃
にて２４時間振盪する。次に０．１Ｍ炭酸水素ナトリウ
ムに熔解した５０ｍＭエタノールアミン４゜ｎＩＱを添
加し、４℃で２４時間振盪する。その後５０ｍＭ酢酸緩
衝液（ｐＨ５，０） ”’？：：洗浄後、０．９％塩化
ブートリウム、 ０．０５％アジ化ナトリウム、０．３
％牛血清アルブミン及び０．６％トリトンＸ−４０５を
含む５０ｍＭ）リス−塩酸緩衝液（ｐｌ＋ ８．０ ＞
中に４℃に”’Ｃ（Ｍ存する。０．９％塩化ナトリウム
、０．０５％アジ化ナトリウム、０．３％牛血清アルブ
ミン及び０．６％トリトンＸ−４０５を含む５０ ｍＭ
Ｆ ’） スＦＡ酸緩（ｈ液（ｐＨ８，０） １００
ｐＤ 、抗可ｉ性画分７スパラギン酸アミノトランス
フェラーゼ抗体結合ガラスピーズｌコ及び血清５０．Ｑ
を３７℃にて３時間放置する。その後実施例１と同様に
洗浄し、ライトマン−フランケル法にて活性を測定する
（Ｓ、 Ｒｅｉｔｍａｎ ａｎｄ Ｓ、 Ｐｒａｎｋｅ
ｌ、 Ａｍｅｒ、 Ｊ、 Ｃ１１ｎ。
Ｐａｔｈｏｌ、、 ２８．５６−６３ （１９５７）
） 、検量線は３００単位まで直線であった。
） 、検量線は３００単位まで直線であった。
実施例４
ガースビーズ とした 去
径６龍のガラスピーズ４０ｇを充分に水洗した後、１５
０℃にて２４時間乾燥する。その後、２％γ−アミノプ
ロピルトリエトキシシラン−アセトン溶液４０ｍＱを加
え、４５℃にて２４時間還流する。次いでビーズを水洗
後、１％グルタルアルデヒド４０ｍ（！を加え４°Ｃに
て２４時間振盪する。
０℃にて２４時間乾燥する。その後、２％γ−アミノプ
ロピルトリエトキシシラン−アセトン溶液４０ｍＱを加
え、４５℃にて２４時間還流する。次いでビーズを水洗
後、１％グルタルアルデヒド４０ｍ（！を加え４°Ｃに
て２４時間振盪する。
その後５０ｍＭＩＪン酸緩衝液（ｐＨ７，０）にて洗浄
後、同緩（１１液４０ｍ（！及び抗ミトコンドリア画分
アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ抗体１４■を
添加し、４℃にて２４時間振盪する。次に０．１Ｍ炭酸
水素ナトリウムに熔解した５０ｍＭエタノールアミン４
０ｍＱを添加し、４℃で２４時間振盪する。
後、同緩（１１液４０ｍ（！及び抗ミトコンドリア画分
アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ抗体１４■を
添加し、４℃にて２４時間振盪する。次に０．１Ｍ炭酸
水素ナトリウムに熔解した５０ｍＭエタノールアミン４
０ｍＱを添加し、４℃で２４時間振盪する。
その後５０ｍＭ酢酸緩衝液（ｐＨ５，０）で洗浄後、０
．９％塩化ナトリウム、 ０．０５％アジ化ナトリウム
。
．９％塩化ナトリウム、 ０．０５％アジ化ナトリウム
。
０．３％牛血清アルブミン及び０．６％トリトンＸ−４
０５を含む５０１ＩＩＭトリスー塩酸緩衝液（ｐＨ８，
０）中に４℃にて保存する。０．９％塩化ナトリウム。
０５を含む５０１ＩＩＭトリスー塩酸緩衝液（ｐＨ８，
０）中に４℃にて保存する。０．９％塩化ナトリウム。
０．０５％アジ化ナトリウム、０．３％生血清アルブミ
ン及び０．６％トリトンＸ−４０５を含む５０ｍＭ）リ
ス−塩酸緩衝液（ｐＨ８，０） １００ Ｎ、１！ 、
抗ミトコンドリア画分アスパラギン酸アミノトランスフ
ェラーゼ抗体結合ガラスピーズ１コ及び血清５０，７．
１１を３７℃にて３時間放置する。その後実施例１と同
様に洗浄し、ライトマン−フランケル法にて活性を測定
する。検量線は３００単位まで直線であった。
ン及び０．６％トリトンＸ−４０５を含む５０ｍＭ）リ
ス−塩酸緩衝液（ｐＨ８，０） １００ Ｎ、１！ 、
抗ミトコンドリア画分アスパラギン酸アミノトランスフ
ェラーゼ抗体結合ガラスピーズ１コ及び血清５０，７．
１１を３７℃にて３時間放置する。その後実施例１と同
様に洗浄し、ライトマン−フランケル法にて活性を測定
する。検量線は３００単位まで直線であった。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 ■、 抗ヒトアスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ
抗体結合不溶性担体からなる、アスパラギン酸アミノト
ランスフェラーゼ測定用試薬。 ２、 抗ヒトアスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ
抗体を利用した抗体結合不溶性担体からなる、血清中の
可溶性画分及びミトコンドリア画分のアスパラギン酸ア
ミノトランスフェラーゼ測定用の特許請求の範囲第１項
記載のアスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ測定用
試薬。 ３、 不溶性担体がペーパーディスク、ガラスピーズで
ある特許請求の範囲第１項または第２項記載の可溶性画
分アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ及びミトコ
ンドリア画分アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ
測定用試薬。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2443184A JPS60169766A (ja) | 1984-02-14 | 1984-02-14 | 可溶性画分アスパラギン酸アミノトランスフエラ−ゼ及びミトコンドリア画分アスパラギン酸アミノトランスフエラ−ゼの分別測定用試薬 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2443184A JPS60169766A (ja) | 1984-02-14 | 1984-02-14 | 可溶性画分アスパラギン酸アミノトランスフエラ−ゼ及びミトコンドリア画分アスパラギン酸アミノトランスフエラ−ゼの分別測定用試薬 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS60169766A true JPS60169766A (ja) | 1985-09-03 |
Family
ID=12137957
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2443184A Pending JPS60169766A (ja) | 1984-02-14 | 1984-02-14 | 可溶性画分アスパラギン酸アミノトランスフエラ−ゼ及びミトコンドリア画分アスパラギン酸アミノトランスフエラ−ゼの分別測定用試薬 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS60169766A (ja) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4981787A (en) * | 1989-02-14 | 1991-01-01 | Xytronyx, Inc. | Method for diagnosis of periodontal disease by detection of L-alanine aminotransferase |
| US5047328A (en) * | 1988-10-26 | 1991-09-10 | The Board Of Trustees Of The University Of Illinois | Method for determination of the type and severity of periodontal disease states |
| CN104459158A (zh) * | 2014-12-22 | 2015-03-25 | 宁波美康生物科技股份有限公司 | 天冬氨酸氨基转移酶线粒体同工酶检测试剂盒 |
| CN106537147A (zh) * | 2013-09-13 | 2017-03-22 | 韩国帕克特生物科技有限公司 | 通过测定ast的含量诊断、预后或监测肝脏疾病的试剂盒和方法 |
-
1984
- 1984-02-14 JP JP2443184A patent/JPS60169766A/ja active Pending
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5047328A (en) * | 1988-10-26 | 1991-09-10 | The Board Of Trustees Of The University Of Illinois | Method for determination of the type and severity of periodontal disease states |
| US4981787A (en) * | 1989-02-14 | 1991-01-01 | Xytronyx, Inc. | Method for diagnosis of periodontal disease by detection of L-alanine aminotransferase |
| CN106537147A (zh) * | 2013-09-13 | 2017-03-22 | 韩国帕克特生物科技有限公司 | 通过测定ast的含量诊断、预后或监测肝脏疾病的试剂盒和方法 |
| CN104459158A (zh) * | 2014-12-22 | 2015-03-25 | 宁波美康生物科技股份有限公司 | 天冬氨酸氨基转移酶线粒体同工酶检测试剂盒 |
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