JPS6016930A - 生物学的蛋白質含有組成物の汚染除去法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 （発明の分野） 血液又は血液成分の受領者は、採取の際に血液中に存在
した又は取扱中に血液製品に移行した外来性生物から感
染を獲得する危険性を有する。収集されたヒト−血液又
は臨床試料と接触する医療従事者もまた、潜在的に危険
性を有する血液−担持生物又は試料−担持生物に暴篇さ
れる相当な機会を有する。今日、血液成分は供血者から
得られ、そしてしばしば−緒にされたロットを含み、こ
の場合、１人又は複数の供血者がウィルス性感染、細菌
性感染又は他の感染を有する場合がある。血液又は血液
成分は、哺乳動物宿主１通常はヒト宿主、中で生理的機
能を供することを要求されるから、これらの機能は生物
学的組成物の汚染除去処理によって損傷されてはならな
い。さらに、血液又は血液成分は、これを不都合な免疫
反応を生じさせる免疫原物質に変化せしめるように変性
せしめてはならない。最後に、処理によシ宿主の健康に
有害な残留物又は生成物がそのままにされるべきではな
く、あるいはこれらの残留物又は生成物は容易に除去さ
れるべきである。

（従来技術の記載） 米国特許第４．３２７，０８６号は、ヒト血液凝固因子
Ｘｉを含有する水溶液の熱処理方法を記載している。米
国特許明細書第４，３２１，９１９号は８−メトキシプ
ソラレン（８−ＭＯＰ）によるヒト−血液の身体性処理
を取扱っている。Ｈｙｄｅ及びＨｅａｒｓｔ　、Ｂｉｏ
ｃｈｅｍｙｓｔｒｙ　（］　９７８　）］　７　：１２
５１−１２５７は、２種類のブソラレン（ｐｓｏｒａｌ
ｅｎ　）誘導体のＤＮＡ及びクロマチンへの結合につい
て記載している。Ｈｕｓａｊｏ等、　Ｅｘｐｒｉ−ｅｎ
ｔｉａ（１９６５）ＸＸＩ　、２２−２４は１光増感フ
ロクマリン　（ｆｕｒｏｃｏｕｍａｒｉｎ　）によるＤ
ＮＡ含有ウィルスの元年活性化について記載している。

米国特許第４，３５０，５９４号、第４，３４８，２３
８号及び第４．３５０，１５６号は、分子址に基く血液
成分の選択的除去方法を記載している。米国特許第４，
３２９，９８６号は、後で透析により除去される化学療
法剤による血液の身体性処理を記載している。Ｇｅｎｅ
ｔｉｃ　Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ　Ｎｅｗｓの１９８２
年７月／り月号は、「臨床的又は商業的試薬又は装置」
の殺菌のためのプソラレンの使用を提案している。

フロクマリンを用いるある種の酵素蛋白質の生物学的機
能の実質的な損傷を示す幾つかのデータが科学文献に公
表されている〔例えば、Ｖｅｒｏｎｅｓｅ　。

Ｆ、Ｍ等、　ｐｉｈｏｔｏｃｈｅｍ、　ｐｈｏｔｏｂｉ
ｏｌ　、　３４　：　３５　］（１９８１）　：　Ｖｅ
ｒｎｅｓ＋ｅ　、　Ｆ、Ｍ、等、ｐｈｏｔｏｃｈｅｍ　
。

ｐｈｏｔｏｂｉｏｌ、　３６　：　２５　（１９８２）
を参照のこと〕。

（発明の要約） 生物学的組成物の汚染除去のための、哺乳動物宿主中で
病原効果を有することができるポリヌクレオチドを永久
的に不活性化する方法及び組成物が提供される。特に、
哺乳動物宿主中で感染性複製を行うことができるポリヌ
クレオチＰ１例えばウィルスゲノムを不活性化するため
に、フロクマリン組成物を使用する。哺乳動物宿主にお
いて使用するだめの組成物を、フロクマリン及び長波長
紫外線（ＵＶＡ）で処理することによシ汚染除去するこ
とができる。

（具体的な態様の記載） この発明に従えば、哺乳動物宿主に使用するための５宿
主中で有害な生理的作用を発揮することができるポリヌ
クレオチド担持組成物をフロクマリン組成物と一緒にし
、そして非核酸性成分の生理的活性が保持されるように
あらかじめ定められた条件下で、ＵＶＡにより処理する
。〔この明細書においては、「ポリヌクレオチド」なる
語は、（１）核酸（ＤＮＡ又はＲＮＡ）を含有する微生
物、（２）微生物、原核生物（下等生物形）又は真核生
物（高等生物形）に由来する核酸ｒツムもしくは亜ダノ
ム断片、又は任意の他の核酸断片、を意味する。〕 生物学的組成物の汚染除去においては、生物学的標品を
含有する水性媒体を、適当な量のフロクマリン組成物と
混合し、そしてすべてのヌクレオチドが不活性化され、
核酸以外の成分はその正常な生理的活性を保持する条件
下で紫外線を照射する。

種々の生物学的組成物、特に１．血液又は血液成分を含
む蛋白質組成物を用いることができる。全血、ツヤツク
された赤血球、血小板、及び血漿（新鮮血漿又は新鮮凍
結血漿）が有利である。他の有利な血液成分には、血漿
蛋白質部分、抗血友病因子（ＡＨＦ、ファクターｖｎｔ
　）　；ファクターＩＸ及びファクターＩＸ〜合体（ア
アクター■、Ｖ■、ＩＸ及びＸ）；フィブリノ−ダン、
ファクター店、プロスワンビン及びスロンビン（ファク
ター■及びＩ［ａ）　：免疫グロブリン（例えば、Ｉｇ
Ａ、ＩｇＤ。

ＩｇＥ、及びＩｇＭ並びにこれらの断片、例えばＦａｌ
）　’＋Ｆ（ａｂ’　入Ｉ　Ｆｃ）　；破傷風及び肝炎
Ｂに対して使用されるような超免疫グロブリン；寒冷沈
澱物（クリオプレシピテート）；アルブミン；インター
フェロン；リンホカイン：伝達因子等が含まれる。他の
生物学的組成物にはワクチン、組換ＤＮＡによシ産生さ
れた蛋白質、オリゴペプチドリガンド等が含まれる。水
性媒体中の蛋白質濃度は一般に約１μｇ／耐〜５００　
ｉ’ｖ／　！ｌ、さらに通常は約Ｉ　Ｍｌ／ｄ〜１００
■／ｄの範囲である。−は通常は生理的ｐＨ（約７．４
）附近であり、一般には約６〜９の範囲であシ、さらに
通常は約７である。媒体中には、他の成分、例えば塩、
添加物、緩衝剤、安定剤、又はこれらに類するものが存
在していてもよい。これらの成分は、特定の機能のため
に添加される常用の成分である。フロクマリンにはプソ
ラレン及びその誘導体が含まれ、ここで置換基はアルキ
ル、特に炭素原子数１〜３個のアルキル、例えばメチル
；アルコキシ、特に炭素原子数１〜３個のアルコキシ、
例えばメトキシ；及び炭素原子数１〜６個の置換された
アルキル。

さらに通常は１〜２個のへゾロ原子を有し炭素原子数１
〜３個の置換されたアルキル（置換基がオキシ、特にヒ
ドロキシ又は炭素原子数１〜３個のアルコキシであって
、例えばヒドロキシメチル及びメトキシメチル、あるい
は置換基がアミノ、例えば合計炭素原子数１〜６個のモ
ノ−及びジ−アルキルアミノであって、例えばアミノメ
チルである）である。１〜５個、通常は２〜４個の置換
基が存在し、これらは通常４，５，８．４′及び５′位
、特に４′位に存在する。代表的な化合物には５−メト
キシゾンラレン、８−メトキシゾソラレン（８−ＭｏＰ
）、４．５’、８−　）リメチルグソラレン（ＴＭＰ）
、４′−ヒドロキシメチル−４，５’、８−トリメチル
プソラレン（Ｉ（ＭＴ）、４’　−アミノメチル−４，
５’、８−　）リメチルゾソラレン（ＡＭＴ）、４−メ
チルグンラレン、４，４′−ジメチルプソラレン、４．
キージメチルグソラレン、４’、８−ジメチルゾソラレ
ン、及び４′−メトキシメチル−４，５’、８−トリメ
チルグソラレンが含まれる。

この発明のフロクマリンは、広範囲の種類のウィルス及
びポリヌクレオチド、すなわち単鎖又は二重鎖のＤＮ、
Ａ又はＲＮＡに対して活性である。

代表的なウィルスには、アデノウィルス、アレナウイル
ス、バクテリアファージ、プニアウイルス、ヘルペスウ
ィルス、オルソミクソウィルス、ハホパウイルス、ノ９
ラミキソウイルス、ピコルナウィルス、４ツクスウイル
ス、レオウィルス、レトロウィルス、ラブドウィルス、
及びトガウィルスが含まれる。これら以外の病原性微生
物には、細菌、クラミゾイア、マイコグラズマ、ゾロト
ゾア、リケッチャ、及び他の単細胞微生物が含まれる。

フロクマリンはさらに、肝炎Ｂウィルス、及び肝炎非Ａ
非Ｂウィルスを不活性化する場合にも効果的である。こ
の不活性化方法はまた、核酸を含有するであろう特徴付
けられていない感染性因子（例えば後天性免疫不全症候
群を生じさせる因子）に対しても使用することができる
。

フロクマリンのほかに、シングレット酸素又は他の高反
応性酸素含有物を除去する添加剤を含金せしめることが
できる。これらの添加剤には、アスコルビン酸塩、グル
タチオン、ナトリウムチオニド等が含まれる。ある場合
には、これらの添加物は不都合な作用を有するので、そ
れぞれの場合にこれらの使用は実験的に決定する。これ
らの添加物を存在せしめる場合、その存在蓋は約２０μ
ｇ／ｍｌ〜２０■／　ｍｅとする。

フロクマリンは単独で又は組合わせて使用することがで
き、組合わせて使用するのが好ましい。

フロクマリンの各々は０．０１μｇ／ｘｉ〜１〜／　ｍ
ｅ好ましくは０．５μｇ／ｄ〜１００μｇ／Ｋｌの範囲
とし、約１μｇ／ｄ未満及び約１ｆ１ｇ／ｄよシ多くは
使用しない。ＲＮＡについては好ましいフロクマリンは
ＡＭＴ及びＨＭＴである。ＤＮＡについては好ましいフ
ロクマリンはＴＭＰである。ＤＮＡ含有ポリヌクレオチ
ド及びＲＮＡ含有ポリヌクレオチドの混合物のため、又
は未知のもしくは未確認の核酸性の感染性因子又は感染
する可能性がある因子の不活性化のだめ、あるいは未知
の病原の感染に対する保腰のためには、ＴＭＰ及びＡＭ
Ｔを組合わせて使用するのが好ましい。

この発明の実施においては、組成物へのフロクマリンの
均一な分散を実質上保証する任意の常法によシ、フロク
マリンを生物学的組成物に加える。

次にこの組成物を、組成物全体が十分な照射に暴露され
フロクマリンが存在するすべてのポリペプチドと反応し
ポリペプチドが不活性化されることを保証する榮件下で
照射する。媒体の性質、特に、血液の場合のようにその
不透明さに依存して、溶液の深さは広範囲に異る。通常
、深さは約０．０２５既以上であシ、１ｃｔｎ以上であ
る。全血の場合、深さは一般に約０．２５１ＪＬ〜２．
５　ＷＬＩＬである。使用する光は一般に約３００ｎｍ
〜４００ｎｍの範囲の波長を有する。強度は一般に０．
１　ｍＷ／ｃｒ／Ｉ〜約５Ｗ／ｄの範囲である。変性を
防止するために、温度は６０℃未満、好咬しくけ約４０
°Ｃ未満、通常は約−１０℃〜３０°０に保持すべきで
ある。照射される媒体を静置し、攪拌し、又は循環しな
がら照射を行い、そして連続的に照射し、又は照射期間
と非照射期間を反復する。循環は閉ループ系で行い、又
はすべての試料が照射に暴露されることを保証する単一
通過系で行う。照射の合計時間は、試料の種類、使用す
るフロクマリン誘導体、光源のスペクトル出力の強度、
及び存在するであろう？リヌクレオチドの種類に依存し
て異る。通常、この時間は１分間以上であシそして６時
間以下でｓｂ、さらに通常は約１５分〜約２時間である
。溶液を循環する場合、その流速は一般に０．１ｔ＃／
分〜５０ｅ／分の範囲である。消費されないゾソラレン
及び／又はその光分解生成物を照射混合物から除去する
のが好ましい。これは、照射が完了した後に適当なサイ
ズの膜を通して透析することによシ、又は適当なサイズ
の有孔繊維によシ容易に達成することができる。ある用
途においては、溶液状の又は支持体に固定された抗体、
例えばモノクロナル抗体を用いて、結合した又は非結合
のフロクマリンを除去するのが好ましい。

次に例によシ説明する。但しこれによシこめ発明の範囲
を限定するものではない。

（実験） この実験は、全血及び血液製品に含まれる微生物汚染物
を破壊するためのプソラレン光反応の能力を証明するた
めに実施した。

（１）ヘルペスウィルスの一員であるネコーリノトラ力
イティス（ｒｈｉｎｏｔｒａｃｈｅｉｔｉｓ　）ウィル
スをラビットのヘパリン処理した全血に、最終濃度が約
２　Ｘ　１０’　ＰＦＵ／ｌ／となる量において加えた
。

ラビットの血液の一部分に４′　−ヒドロキシメチル−
４，５ｒｓ　−）リメチルプソラレン（ＨＭＴ）を加え
、そしてアリコートを種々の時間対照した。

残留する生存ウィルスについて試験するため、メチルセ
ルロース重層を用いて、培養したネコの細胞（Ｆｃ３Ｔ
ｇ　）　（ＡＴＣＣＣＣＬ　１７６　）を使用して二重
グラークアッセイを行った。ウィルス力価を。

試験試料に暴露した後７２時間の二重アッセイ培養にお
いて観察されたウイルスゾラークの算術平均としてめた
。結果を次に示す。

ＨＭＴのみを受理し、照射を受けなかった血液アリコー
トは５．３Ｘ　１０’　ＰＦＵ／−の力価を与えた。

ＨＭＴ及び５分間の照射を受けたアリコートは４．５Ｘ
１０’　ＰＦＵ／＊／の力価を示した。″プンラレン及
び１時間の照射を受けたアリコートにおいては検出し得
る生存ウィルスは残留していなかった。この測定の感度
は、≧１．ＯＸ１０’　ＰＦＵ／１の力価において残留
ウィルスの検出が可能であった。ＨＭＴ及び１時間の照
射を受けた血液試料は、異相差顕微鏡による観察及び可
視的な溶血の不存在による判定において赤血球の明白な
損傷を示さなかった。従ってこれらのデータは、全血中
に存在した高つイルスカ価は、グソラレン士血液の赤血
球成分を損傷しない光処理により不活性化することがで
きることを証明している。

（２）第２の実験において、レオウィルスの一員で、ｂ
る前古病ウィルス（セロタイプ１１）、＄コ・−リノト
ラ力イティスウイルス、及びシミアンウィルス４０を、
プロフィレート（Ｐｒｏｆｉｌａｔｅ）（アルファ・セ
ラビラティクスにょシ製造されたヒトー凝固因子■璽の
商業標品）の溶液に加えた。

プロフィレート（１８０ユニツト）の凍結乾燥標品を１
０ｓｌの無菌水に溶解した。この溶液をさらに、バルビ
タール緩衝液（２ｇの脱イオン水に１１．７５ｒのナト
リウムパルビタール及ヒ１４６７１のＮａ（Ｊ！を溶解
して０．２２ミクロンのフィルターを通して濾過したも
の）にょシ、５ユニツト／ｄの最終濃度に稀釈した。一
部（２ｄ）を、暗中室温に置いた。これをサンプル＃１
とする。第２の２一部分を、下記の装置を通して１時間
照射しながらポンプ輸送した。これをザンノルナ２とす
る。適当量の試薬を添加することにょＱ第３の２ｄ部分
にｉ　０７４ｇ　／ｍｌのＡＭＴ及び１ｏ　μｇ　／ｄ
のＨＭＴを含有せしめ、そして１時間照射した。

これをサンプル＃３とする。第４の２ｄ部分を１゜ｆｉ
ｇ　／ＭｌノＡＭＴ、１０　ｔｔｇ　／ｗｅのＨＭＴ、
及び１０ｒｎＭのアスコルビン酸ナトリウムに調整し、
そして１時間照射した。これをサンプル４Ｉ−４とする
。すべてのサンプルを操作中２ｏ０ｃに保持した。

凍結乾燥した標品の溶解から凝固因子Ｖｌ測定の完了ま
での全経過時間は６．５時間であった。

凝固因子ｖＩ　の測定は、各サンプルにつき種々の稀釈
（１：５〜１　：　１００）において行い、そして正常
なヒト血清及びプールされた正常なヒト血清における活
性と比較した。結果を第１表に要約する。

以下余白 プソラレン不活性化操作を受けたサンプル（サンノルナ
３）は、対照サンプル（サングルナ１）中に存在するフ
ァクター■活性の８４チを保持した。これは照射のみを
受けたサンプルによυ保持された活性（％）よシ大であ
シ（サンプルｆ２によシロ８％が保持された）、そして
このことはグソラレン光化学反応がファクター■の活性
にｔｌとんど、又は全く影響を与えないことを示してい
る。

驚くべきことに、照射中のアスコルビン酸ナトリウム（
ｆソラレン及び光の存在下での不活性化から酸素を保護
することがすでに示されているシングレット酸素除去剤
でおる）により、ファクター■の活性が対照サンプルに
おけるレベルの１１チに低下した。

上記のサンプル１１２、及び３と同じサンプルに２　Ｘ
　１０’　ＰＦ　Ｕ／ｗｅのネコーリノトラ力イティス
ウイルス（ＦｅＲＴ）、Ｉ　Ｘ　１０’　ＰＦＵ／ＩＩ
／の前古病ウィルス（ＢＴＶ）、及び４Ｘ１０＠Ｐ　Ｆ
　Ｕ／ｗ１１の１シミアンウイルス４０（ＳＵ−４０）
を接種した。第２表に、これらのサンプルについてのグ
ラークアッセイの結果を示す。

第　２　表 ファクター■標品中つ１イルス感染Ｌ＋）に対する光化
学不活性化方法及びその成分（イ）の影響サンプル１　
サンプル２　サンダル３ Ｆ−−ＵＶＡ−Ｆ−、ＵＶＡ”　Ｆ”、ＵＶＡ”ＦｅＲ
Ｔ力価　８．６×１０’　３．５×１０’　０．０ＢＴ
Ｖ力価　３．８Ｘ１０’　１．４Ｘ１０’　１．ｌＸ１
０”５Ｕ−４０℃両　２．５８１０”　１．６Ｘ　１０
＠１．２×１０”注（ホ）Ｆ：フロクマリン ＵＶＡ　：長波長紫外線 （＋）組織培養におけるグラークアッセイにより測定し
た感染性。

ＦｅＲＴの場合、検出し得るウィルス粒１子−の数は５
オーダー以上低下しゾラークアッセイにおける検出限界
以下となった。ＢＴＶ感染は、約５オーダー低下してｌ
ｌ０ＰＦＵ／ｄとなった。５ｖ４０感染は１．２×１０
ｇの力価まで低下した。すなわち、上記の簡単で便利で
短い方法を用いて、ファクター■の存在下で、ファクタ
ーｖｉ活性の少なくとも８４チを保持しながら、多数の
広範囲のタイプのウィルスが少なくとも５オ一ダー同時
に不活性化され得ることが示された。上記の観察に基き
、処理を延長し、反復し、又は改良することによって、
感染性ウィルス粒子の残留する可能性を非常に低い値に
下げることが可能であると予想される。このようにして
、引用される用途のいずれについても適当な安全限界が
達成される。

（装置及び系） 全血は長波長ＩＵ、Ｖ元線について非常に高い光学濃度
を示す（吸収は４００ｎｍ〜５０．０＋ｎｍの範囲の可
視光線のために高い）ので、血液は適切に短い光学的通
過距離を通して照射した。この実験においては、血液を
、゛内径０．８７５ｕｔの？リエチレン毛細管を通して
ポンプ輸送した。この毛細管を直径１．２７ｃｍの管に
巻き付け、そして１８℃・に保持された水に浸漬した。

血液を、ペリスタルポンプを通して連続的に毛細管に循
環せしめた。血液は毛細管を通って一循するのに約２．
５分間を必要とし、前記の照射時間の細２０優にわたっ
て光ビーム中にあった。光源は、低圧水銀ラングとし、
コバルトガラスフィルターを通した。このフィルターは
約３２０ｎｍ〜３８０ｎｍの光を通過せしめ、透光ビー
クは３６０ｎｍである。サンプルにおける入射強度は約
４０　ｍＷ／ｃＩＩであった。

以上の結果からそしてこの発明の目的に従って、生物学
的組成物中のポリヌクレオチドを不活性化することによ
り哺乳動物宿主に適用するための安全な組成物が得られ
ることが明らかである。組成物中に存在する蛋白質はそ
の生理的活性を保持し、哺乳動物中でのその生理的機能
を満たすことができる。この方法は簡単で迅速であり、
そして多くの試料を処理するための拡張することができ
る。

必要とされる少量の試薬は一般に宿主に対して有害では
ない。

以上、この発明をやや詳細に記載したが、これによｐこ
の発明の範囲を限定するものではない。

以下余白 手続補正書（方バ） 昭和５９年８月２日 特許庁長官　志　賀　学　殿 １、事件の表示 昭和５９年　特許願　第０８６２７５号２、発明の名称 生物学的蛋白質含有組成物の汚染除去法３、補正をする
者 事件との関係　特許出願人 名　称　アドバンスト　ジェネティノクス　リサーチイ
ンスティテユート ４、代理人 ６、補正の対象 （１）願書の「出願人の代表者、の欄 （２）委任状 （３）明細↑ ７、補正の内容 （１，）（２）別紙の通り （勿萌軸婁の婦１（内容にチ更なり ８、添附書類の目録 （１）訂正願書　１３ｍ （２）委任状及び訳文　各１通 （３）跨）Ｊ１８徊１　１五 手続補正書（自発） 昭和５９年８月２日 特許庁長官　志　賀　学　殿 １、事件の表示 昭和５９年　特許願　第０８６２７３号２、発明の名称 生物学的蛋白質含有組成物の汚染除去法３、補正をする
者 事件との関係　特許出願人 名　称　アドバンスト　ジヱネティツクス　リサーチイ
ンスティテユート ４、代理人 住　所　東京都港区虎ノ門−丁目８番１０号静光虎ノ門
ビル〒１０５電話（５０４）０７２１　−一５、　補正
の対象 明細書の「発明の詳細な説明」の欄 ６、補正の内容 （１）　明細書第１４頁第９〜１１行目（タイプ浄書明
細書第１１頁第６〜８行目） 「ある場合には、・・・・・・実験的に決定する。」を
削除する。

（２）同第２１頁第９〜１２行目（タイプ浄書明細書第
１６頁第１６〜２０行目） 「第４の２一部分・・・・・・サンプル＃４とする。」
を削除する。

（３）同第２２頁第１表（タイプ浄書明細書第１８頁第
１表）を次の通９補正する。

−一一一、−一−−−，，，−，，−−、−−ｊ　、　
−−−−−、、、−、−ｉ　−一−−−−−，−」 （４）　同第２６頁第６〜１１行目（タイプ浄書明細書
第１９頁第９〜１４行目・） 「驚くべきことに、・・・・・・縮に低下した。」を削
除する。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １　哺乳動物宿主中において複製可能なポリヌクレオチ
   ドを不活性化するだめの、生物学的蛋白質含有組成物の
   汚染除去法であって、媒体中に存ａする前記ポリヌクレ
   オチドを不活性化するのに十分な量において少なくとも
   １種のフロクマリンを添加しておいた生物学的蛋白質含
   有水性組成物を、前記生物学的組成物の生理的活性を実
   質上保持しながら前記媒体中に存在する前記ポリヌクレ
   オチドを不活性化すのに十分な時間にわたシ、そして波
   長において照射することを含んで成る方法。 ２　少なくとも２種類の７０クマリンを存在、せ、しめ
   る特許請求の範囲第１項記載の方法。 ３　前記水性媒体が血液又は血液成分含有水性媒体であ
   る特許請求の範囲第１項記載の方法。 ４　前記血液成分が凝固因子である特許請求の範囲第３
   項記載の方法。 ５　未反応フロクマリン又はその光分解生成物を限外濾
   過又は透析によシ選択的に除去する特許請求の範囲第１
   項又は第２項記載の方法。 ６　フロクマリン又はフロクマリンと反応した生物学的
   成分を、これらの変性された成分に対する抗体によシ選
   択的に除去する特許請求の範囲第１項又は第２項記載の
   方法。 ７　哺乳動物宿主中で複製可能なポリヌクレオチドを不
   活性化することによる血液又は血液成分含有水性媒体の
   汚染除去法であって、１μｒ　７ｗ１以上約３００μｆ
   ７／ｘ６以下の全フロクマリン濃度において少なくとも
   １種の７０クマリンを含有する前記媒体を、約３００ｎ
   ｍ〜４００ｎｍの範囲の波長の光ビーム巾約０．１ｍＷ
   ／ｃＩ！１〜５Ｗ／ｄ及び少なくとも約０．０２５ａｕ
   の深さにおいて約５分間〜１２時間の全照射時間にわた
   って循環せしめることを含んで成る方法。 ８２種類のフロクマリンを前記媒体中に存在せしめ、こ
   の２種類のフロクマリンが４′−ヒドロキシメチル−４
   ，５’、　８−　トリメチルグソラレン及び４′−アミ
   ノメチル−４，５’、　８−１−リメチルプソラレンで
   ある特許請求の範囲第７項記載の方法。 ９　前記汚染除去が血液成分についてである特許請求の
   範囲第８項記載の方法。 １０　前記血液成分が凝固因子である特許請求の範囲第
   ９項記載の方法。 １１　肝炎Ａウィルス、肝炎Ｂウィルス、及非Ａ非Ｂ肝
   炎ウィルスを生物学的組成物中で不活性化する特許請求
   の範囲第１項又は第２項記載の方法。 １２　後天性免疫不全症候群（ＡＩＤＳ）を生じさせる
   因子を生物学的組成物中で不活性化する特許請求の範囲
   第１項又は第２項記載の方法。