JPS60152481A - カップリング方法 - Google Patents

カップリング方法

Info

Publication number
JPS60152481A
JPS60152481A JP59253953A JP25395384A JPS60152481A JP S60152481 A JPS60152481 A JP S60152481A JP 59253953 A JP59253953 A JP 59253953A JP 25395384 A JP25395384 A JP 25395384A JP S60152481 A JPS60152481 A JP S60152481A
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
compound according
compound
group
formula
structural formula
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
JP59253953A
Other languages
English (en)
Inventor
スチーブン・デイー・アレン
マイケル・トンプソン
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Becton Dickinson and Co
Original Assignee
Becton Dickinson and Co
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Becton Dickinson and Co filed Critical Becton Dickinson and Co
Publication of JPS60152481A publication Critical patent/JPS60152481A/ja
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D307/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom
    • C07D307/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings
    • C07D307/26—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member
    • C07D307/30—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D307/32—Oxygen atoms
    • C07D307/33—Oxygen atoms in position 2, the oxygen atom being in its keto or unsubstituted enol form
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D333/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom
    • C07D333/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings
    • C07D333/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings not substituted on the ring sulphur atom
    • C07D333/26—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings not substituted on the ring sulphur atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D333/30—Hetero atoms other than halogen
    • C07D333/36—Nitrogen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07J—STEROIDS
    • C07J19/00—Normal steroids containing carbon, hydrogen, halogen or oxygen, substituted in position 17 by a lactone ring
    • C07J19/005—Glycosides
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07J—STEROIDS
    • C07J33/00—Normal steroids having a sulfur-containing hetero ring spiro-condensed or not condensed with the cyclopenta(a)hydrophenanthrene skeleton
    • C07J33/002—Normal steroids having a sulfur-containing hetero ring spiro-condensed or not condensed with the cyclopenta(a)hydrophenanthrene skeleton not condensed
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
    • G01N33/54353—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals with ligand attached to the carrier via a chemical coupling agent
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/961—Chemistry: molecular biology and microbiology including a step of forming, releasing, or exposing the antigen or forming the hapten-immunogenic carrier complex or the antigen per se
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/964—Chemistry: molecular biology and microbiology including enzyme-ligand conjugate production, e.g. reducing rate of nonproductive linkage
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
    • Y10S436/80—Fluorescent dyes, e.g. rhodamine
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
    • Y10S436/804—Radioisotope, e.g. radioimmunoassay

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Oxygen Or Sulfur (AREA)
  • Steroid Compounds (AREA)
  • Heterocyclic Compounds Containing Sulfur Atoms (AREA)
  • Pyrane Compounds (AREA)

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は有機物質を他にカップリングさせるために有用
な化合物、カップリング生成物の製造に有用な中間体、
およびそれらの用途に関する。
ある有機−質を他にカップリングさせる必要のある場合
は多く、多くの場合との梱のカップリングは二官能性化
合物（しばしばカップリング剤またはスば一す−化合物
と呼ばれる）を用いて行われる。たとえばイムノアッセ
イなどのアッセイにおいては、アッセイの成分の一方は
りガントゝからなるトレーサー；たとえば適切なマーカ
ー（例えば螢光色素のような色原体）にカップリングし
た抗原である。この種のトレーサーヲ製造する際には、
多くの場合抗原を二官能性のカップリング剤またはスＲ
−サー化合物の使用によシ螢元色素にカップリングさせ
る。
同様に固体支持体を用いるイムノアッセイにおいては、
アッセイに用いられる物質（たとえば抗体）を固体支持
体（たとえばポリマー）にカップリング略せる必要があ
り、ある場合にはこれはカップリング剤の使用により達
成される。
当技術分野においてｅよ、ある物質をカップリング剤せ
たはス投−サー化合物を介して他に力久プリングさせる
ための改良された手段がめられている。
本発明の一観点によれば、カップリング剤としてイ１用
な二官能性の化合物が提供される。、１本発明の一観点
によれば、ある物質を他にカンプリングさせるための中
間体が提供される。
本発明の他の観点によれは、カップリングした化合物ま
たは物質が提供される。
本・兄り１の他の観点によれは、上ｔＷｒのカップリン
グ剤、中間体およびカップリングした化合物」の製法が
提供される。
本発明のさらに能のイ睨点によｔｌは、カップリング剤
、中間体およびカップリング生成物の使用法が提供され
る。
よｐ詳細には、不発明の−ω１点によれは下記の構造式
： （式中Ａは−Ｎ＝ｃ＝ｓまたは−Ｎ＝Ｃ＝Ｏである）を
有するカンプリング剤が提供される。
これらのカップリング剤は２官能性であシ、イソシアネ
ートおよび／またはイソチオシアネート官能基は有機化
合物の活性水素置換基と反ＬＵシてカンプリング中間体
全製造しうる。特にイソシアネート基はメルカプト（チ
オール）、ヒト９０キシ、カルボニルまたは第１もしく
は第２アミンなどの官能基捷たはそｉｔらのｊ１４宜な
３話と反応しうる。イノチオシアネート基は４１’ｊた
け第２アミン残基と反応しうる。
カンプリング剤ｌまたは１１と適宜な有機化合物との反
応によシ、下ｇｔのカップリングした中間体が製造され
る。
めり；Ｒは有億残基であシ；Ｙが−に４−Ｃ−であるＣ
） あシ　Ｒ／は水素原子または炭化水素残基、好ましくけ
アルキル基でおる。） 明らかなように、Ｄは化合物１−１：たは■にカップリ
ングしている４＋　４汞化合物上の活性水素直ｐフ１蟇
から誘導される。
平ｆ＋ｆｆ造式ｉｌ＋およびＩＶＯ中１１１体のラクト
ン官能基は紀１アミン（芳香族または脂肪族の第１アミ
ン、好ましくは脂肪族第ｌアミン）である官能基少なく
とも１個を含む肩壁化合物と反応しうる。構造式１およ
びｌで辰わされるカップリング化合物のインシアネート
またはインチオシノイ・−ト官能基を筐ず反応させ：次
いでラクトン官能基を反応させる。従って、本発明によ
シ製造されるカンプリングした化合物は下記の構造式を
もっっ０ １ ９日・ 曹 （式中Ｘは有俊残基であり；Ｙ、ＤおよびＲは先きに定
義されたものであり、Ｚは一８Ｈ４たは−ＯＨである。
） 本発明のカップリング剤はり、Ｌ−ホモンステインチオ
ラクトンまたはα−アミノ−ｒ−ブチロラクトンとジホ
スゲンもしくはホスゲン（インシアネート官能基を与え
る）またはチオホスゲン（インチオシアイ・−ト官能基
を与える）全適切な無水溶剤（たとえば無水ジオキサン
）中で、高められた温度（たとえば還流条件）で、反応
が終了するのに十分な期ｆｉｊＪ反応させることにょシ
製造ズきるっ次いで溶剤をカップリング剤から除去する
。生成物は、この生成物を溶剤（たとえば塩化メチレン
）に溶解したのち溶解していない出発物質を濾過するこ
とによって、未反応の出発物質から分離、できる。
本発明のカンプリング剤のイソシアネートまたインチオ
ファネート官能基を、活性水素基（％に前記の官能基少
なくとも１種）を有する有機化合物にカップリングさせ
る。この独のカップリングはインシアネート基またはイ
ンチオシアネート基を活性水素基と反応させるために当
技術分野で一般に知られた方法により行われる。当技術
分野で知られるように、大部分の場合この独のカップリ
ングは室２晶またはわずかに１坊められた温り支で１昆
合し、次いでカップリングした化合ｅｌｋ出発物質から
分離することによシ行うことができる。
活性水素基がアミノ基であり、カップリング剤がラクト
ン誘導体である場合、カップリング反応はラクトン環の
開裂による架橋を最少脈に抑え、または阻止すべく調歪
された蛍のカップリング剤およびｉｆ＆化合物を用いて
行うべきである。
たとえは本発明によれば構造式１および■により衣わさ
れるカンプリング剤を、まず活性水素基をもつ有機化合
物（インシアネートまたはインチオシアネート管能基と
反応しうるもの）と反応させる。従ってインチオファネ
ートまたはインシアネート官能基と反応する有機化合物
は、蛋白質が一般に無水の条件下で反応を受けないとい
う点で一般には蛋白質以外のものである。
構造式■およびＩＶによシ表わはれるカップリングした
中間体ｔま、４％ｆｆ造式Ｖにより人わされるようなカ
ップリングした生成物の製造に使用できる。
不−？、明のカッ−７Ｐ　＋）ンｒｔｂ−ｂ“（１１τ
喪で耐ｔＳ轍に１よ、化合物ＩＩＩまたはＩＶのラクト
ン′またはチオラクトン′ぼ能基を、少なくとも１個の
第１アミンを官能基として言ひ有機化合物と反応させる
。
構造式■またはｔＶの中間体全溶液状で、第１アミン官
能基をもつ有機化合物と反応させ、構造式Ｖのカップリ
ングした化合物を製造することができる。一般にこの反
応は塩基性条件下で室温から１００℃までの温度におい
て行われる。これよシ高い温度もその温度がカップリン
グした化合物に不利な影響を与えない限り採用できる。
カップリングした中間体は一般に水のみには溶解しない
ため、この反応には一般に有機溶剤が単独で、または水
と混和して用いられる。蛋白質をカップリングした中間
体と反応させる場合、有機溶剤は蛋白質に不利な影響を
与えないもの（蛋白質を変性させないもの；たとえばジ
メチルホルムアミドまたはジメチルホルホキシビ）でな
ければならない。
本発明のカップリング剤は多植多様な有熾物質全互いに
カップリングさせるために使用できる。
たとえば本発明のカップリング化合物は、トレーサーが
たとえばりガント（ここで用いられる６リガ／ビという
語はハプテン、抗原または抗体を意味する）にカップリ
ングした過すなマーカー（たとえば放射性マーカー、色
原体、酵素など）からなるアッセイに使用されるトレー
サーの製造に使用できる。
木様に本発明のカップリング剤は、リガンドをアッセイ
に使用するために固体支持体（たとえばポリマー）にカ
ンプリングさせるのに１更用できる。
また本発明のカップリング剤は、治療薬を例えば抗原部
位に輸送するために、たとえば治療薬を抗体にカップリ
ングさせることにより治療剤を製造するためにも使用で
きる。
従って構造式Ｖにおいて、Ｒは有機化合物から誘導され
る有機残基であってよく、これは前記の棟部の適宜な活
性水素基金含む。これらの１機化合物は好捷しくは色原
体（色素、好ましくは螢光色素）、非蛋白質性抗１ｂ（
、非蛋白・質性ハプテン、酵素、放射性置換基を含む有
機化合物、固体支持体、捷たけ治療薬（特に医県）であ
る。
同（−２）に４’＋’Ｊ造式Ｖにおいて又は少なくとも
１１固の第Ｊアミン置ｓｙ％基金もつ刹１ｄ化合物から
誘導される１俊９ｉ基であシうる。これらのイｊ俵化合
物は蛋白質、抗体、ハプテン、抗原、色ＪＪ♂、体（色
素、好１しくに螢光色素）、酵素、放射性置換基をもつ
有機化合物、ポリマーなどであってよい。
たとえば構造式Ｖのアッセイ用トレーサーを、製。
造する麩には、ＲおよびＸの一方がリガンドであり、Ｉ
りおよびＸの１ｍ刀がマーカー、たとえば色原体、放射
性置換基を含む有機化合物、または酵素である。前記の
ようにトレーサーを蛋白質リガンドから製造する場合、
構造式ＶにおいてＸは好ましくは蛋白質から誘導され、
Ｒはマーカーとして作用しうる有機化合物から誘導源れ
る。
たとえば螢光トレーサーを製造する場合、ＲおよびＸの
一方はカップリング剤の官能基の１つとカップリングし
うる適宜な置換基ｋｍする螢光色素から誘導され、Ｒお
よびＸの他方はリガンドである。
前記のように本発明のカップリング剤を用いてカップリ
ングさせるマーカー化合物は、酵素、色原体、または放
射性置換基（たとえは放射性ヨウ素）を含む有機化合物
でありうる。
適切な色原体の代表例として、以下のものが挙げられる
。アクリジン色素、アズレ（ａ′ｙ、ｕｒｅ）色素、キ
ノン色素、ナイルブルー、クレジルバイオレット、フル
オレセイン類、ローダミン団、クマリン類、アミノナフ
タリン誘導体（ダンシル化合物）など。
放射性トレーサーを製造するための適切な放射性マーカ
ーの代表例としては、以下のものが挙げられる：ヒドロ
キシフェニル置換されたアミンまたはアミノ酸、これら
においてフェニル基には放射性置換基１個または２個以
上が含まれていてもよい、たとえば放射性ヨウ素化され
たチロシンまたはチラミン；イミダゾール基が放射性置
換基１個または２個以上により置換されたイミダゾール
置換されたアミノ酸またはアミン等。
適−ノな酵素マーカーの代表１７１１としては以下のも
のが挙げられる：パーオキシダーゼ、β−ガラクトンダ
ーゼ、アセチルコリンエステラーゼ、グルコアミラーゼ
、マレインはテヒドロゲナーゼ、グルコース−６−リン
赦テヒト５０ゲナーゼ、グルタルオキシダーゼ、アシド
９ホスフアターゼナト。
当技術分野で知られるように、固体支持体はポリマーで
あってもよい、ただしポリマーはカンプリング化合物（
１捷たは■）の反応性置換基の１つと反応しうる置換基
を含むもので、たとえばポリアクリルアミド、ポリ（ア
ミノスチレン）、セルロース、架橋アガロースなどであ
る。
本発明により製造されるトレーサーおよび支持体上のリ
ガンドは、当技術分野で一般に知られている型の多種多
様な被分析体（″′仮分析体（ｑｎ・１−ｙｔｅ）”と
いう語はハプテン、抗原または抗体を表わす）のアッセ
イに使用できる。たとえば本発明は治療薬およびいわゆ
る１′麻薬（ｄｒｕｇｓ　ｏｆ　ａｂｕｓｅ）”を含む
薬剤；ステロイド９、ビタミン、糖、アミノ酸、ポリは
プチド、蛋白′ぼ、各棟ホルモン、抗生物質、ウィルス
などのアッセイに使用できる。
本発明によシ製造されるトレーサーおよび支持体上のり
ガントはイムノアッセイ（″イムノアッセイ７という語
は総称的に用いられ、抗原または抗体の代わりに天然の
結合剤ヲ使用し、時に胱合蛋白負結合アッセイと呼ばれ
るアッセイヲ含ム）に使用でき、当技術分野で知らｒし
るようにアッセイの成分の一つは結合剤である。被分析
体がハプテンまたは抗原である場合、結合剤は抗体、ま
たは被分析体に特異的な結合部位１個または２個以上を
もつ天然物質であシ、被分析体が抗体である場合、結合
剤は抗体に対する抗原、または被分析体に呼応して誘発
された抗体であろう。適切な結合剤の選択は当業者がな
しうる範囲内にあると考えられ、本発明を十分に理解す
るためにこの点に関してこれ以上詳述する必女はないと
思われる。
アッセイに１県して、アッセイに用いられるトレーサー
のりガント″部分は採用さｊするアッセイの型により定
められる。たとえばアッセイが抗原またはハプテンであ
る被分析体に関するものである場合、トレーサーのリガ
ント９部分はアッセイすべき抗ｊ皇もしくはハプテンま
たはそ！ｔらの適宜な同族体である（″適宜な同族体”
という語はアッセイに用いられる結合剤に結合した被分
析体の同族体を意味する）。あるいはトレーサーのりガ
ント９部分がアッセイすべきハプテンまたは抗原に対す
る結合剤であってもよく、この場合アッセイはトレーサ
ーがそのトレーサーに特異的な結合部位に結合するのを
被分析体が阻止するように工夫される。
成分４汀体が抗体である場合、トレーサーのりガント部
分は抗体またｅまその適宜な同族体であり、この場合抗
体およびトレーサーの双方が被分析抗体およびトレーサ
ーの双方に対して特異的な、限られた数の結合部位に関
して競合するであろう。あるいはトレーサーのりガント
部分は、被分析抗体に対する抗原または被分析抗体に呼
応して誘発された抗体であってもよい。この場合、被分
析抗体はトレーサーがそのトレーサーに対し特異的な結
合部位に結合するのを阻止する。
被分析体をいわゆる６サンドインチ型”のアッセイによ
り決定する場合には、トレーサーのりガンビ部分が被分
析体に特異的な結合部位をもち、被分析体は複畝の決定
部位をもつ。
トレーサーのりガント″部分として用いられる適切な゛
リガンドの選択は本明細書の教ボから当業者がなしうる
範囲のものと考えられ、従って本発明を十分に理解する
ためにこの点に関してこれ以上詳述する必要はないと思
われる。
本発明のカップリング剤は治療薬を抗体（特にモノクロ
ーン抗体）にカップリングさせるためにも使用できる。
この場合、構造式ＶにおいてＲは治療薬から誘導され、
ｘＦｉ抗体から誘２Ｎすれる。
従って上記の記述から明らかなように、カップリングし
た化合物Ｖは多種多様な有機化合物から製造でき、化合
物ＶにおいてＲにより表わされる有機残基はある有機化
合物から誘導され、カップリングした化合物Ｖにおいて
Ｘによシ表わされる有機残基は他の有機化合物から誘導
される。ただし各有機化合物は適宜な活性水素置換基金
含む。
基と反応しうる活性水素置換基金含む有機化合物から誘
導される有う幾残基であってもよく、その有機化合物は
マーカー（放射性置換された有機化合物、巳原体、好ま
しくは螢光色素、酵素）、またはりガント、特に非蛋白
性抗原もしくは非蛋白性ハプテン、固体支持体、または
治療薬（特に医薬）であってもよい。同僚にＸはｍｌア
ミノ残基を含む有機化合物から誘導される有機残基であ
２工もよい。たとえばＸは蛋白質、抗体、ノ・ブテン、
抗原、色原体（色素、好ましくは螢光色素）、酵素、放
射性置換基を有する有機化合物、ポリマーなどの有機化
合物から誘導される有機残基であってもよい。
本発明を以下の実１ｆ＝５１Ｊに関連してさらに記述す
るが、これにより本発明の範囲が限定されるべきではな
い。
実施例１ 乾燥（未蒸留）ジオキサ７２５〜３０　ＷＬｅ中のり、
Ｌ−ホモシスティンチオラクトン１〜５モルを入れた乾
燥した二口または三日丸底フラスコ（ストッパーおよび
還流装置により閉じたもの）に防御フート８内で寺モル
量のホスゲンを注射器により添カｌした。３０分間撹拌
することによシ混合し、熱をかけることによシ（加熱マ
ントルにより）還流条件を開始した。必要に応じ少量の
溶剤を添加しながら２４〜３０時間還流した。５ゴをＩ
Ｒにより調べた。
上ｄピの方法を用い、ホスゲンの代ｖシにチオホスゲン
を１更用して、Ａが−Ｎ＝Ｃ＝８である化合物１を製造
した。
実施例２ Ｄ、Ｌ−ホモシスティンチオラクトンの代わシにｒ−ア
ミノ−γ−ブチロラクトンを用いて実施例１の方法を繰
シ返し、Ａが−Ｎ＝Ｃ＝Ｏである化合物■全製造した。
ホスゲンの代わシにチオンｊメゲンを用いて実施例２を
繰シ返し、Ａが−Ｎ＝Ｃ＝８である化合物■を製造した
。
実ｈイ鉢ｔ２す３ 実〃ｉ！ｉレリ１または２の方法により製造されたイソ
シアネート誘導体を等モル割合でジゴキシンと、ビリジ
／中窒素・ξ−ジした容器内で室内のＩ！ｉＡＩ＆およ
び常圧において４８〜７２時間反応させ、Ｙが１ −Ｎ−Ｃ−であり、Ｄが一〇−であシ、Ｒがジゴキシン
残基である化合物■または１ｖを製造した。
実施例４ 実施例１もしくは２で製造したインチオシアネート誘導
体およびチロキシン（Ｔ４）を用いて上記の操作を繰シ
返し、 １ Ｙが一１ｉ　−Ｃ−であり、Ｄが−ＮＨ−であり、Ｒが
チロキシン残基である化合物■Ｉ　ｆ　ｆこは■を製造
した。
実施例５ 実施例３または４でシに造した化合物を竹ソＩす合でフ
ルオレセインアミンと、水中でｐＨ９，５（ホウｒ段端
緩衝液）において室内の幅度および圧力で反Ｌ６ツぜ、
Ｘがフルオレセイン残基でメリ、Ｒ，Ｙおよ０・Ｄが実
施例３および４に定６）畑れたものである化合物ｖ（ｆ
−製造した。
実力ｆμ例３または・Ｉの方法によシ製造τＳれた化合
物ｆ：蛋白質に関して過剰モルで（たとえば２５〜３０
：１）使用することにより、実施シリ３コ？よび４で製
造した化合物を蛋白質とカップリングきせるために、上
６１と同じ方ｌ去をｌｌｌいることができた。
上記の方法は他のリガンドを１（口の肩壁化合物、たと
えば酵素、ポリマーなどとカップリングさせるためにも
利用しうることは理解すべきである。
本発明は、有嵌化合物盆迅速にかつ１ハ１単に他にカッ
プリングさせ７うるという点で特に有利である。
さらに、異なる官能基ヲもつカップリングＷＩＪ　ｔ　
Ｗ用することにより異なる反応によって（異なる反応順
序）２種の有機化合物をカップリングさせ、これにより
別個のカップリング反応それぞれにおいて架橋する傾向
を除くことができる。
これらおよび他の利点は本明細書の教示から当業者に明
らかであろう。
以上の教示を考慮して本発明を種々に修正および変更す
ることができ、従って特許請求の範囲の記述の範囲内に
おいて本発明を以上に記述した以外の様式で実施するこ
とができる。
特許出顛人　ベクトン・デイッキンソン・アンド・カン
パニー （外５名−２

Claims (1)

  1. 【特許請求の範囲】 ｆｉｌ　構造式１またはｌｌ： ○ または （式中Ａは−Ｎ＝Ｃ＝８および−Ｎ＝Ｃ＝Ｏよシなる群
    から選ばれる） を肩する化合物。 ＋２１　構造式１を有する　ｌｌゼ粁請求の結■、廉躯
    槍記載の化合物。 （３）　構造式りを壱する、特許請求の範囲第１項記載
    の化合物。 （４）Ａが一１１１＝ｃ＝ｏである、特許請求の範囲第
    １項ないし３項のいずれか罠記載の化合物。 （５）Ａが−Ｎ＝Ｃ＝Ｓである、ｑ！ｊ許請求の範囲第
    １項ないし３項のいずれかに記載の化合物。 （６）特許請求の範囲に記載された構造式１−１だは■
    を有する化合物を次式： ％式％ （式中Ｙ“は−ＯＨ，−８八−ＣＯＯＨおよび−Ｒ′↓
    ’ＪＨＪニジなる群よシ選ばれ、ＲおよびＲ′は下ロピ
    式用およびＩＶで与えられる意味を有する） ヲ有する化合物と反応させて侍られる、構造式■または
    ！■＝ 選ばれ： Ｒは有機残基であり；そして ０ Ｙが−Ｎ−凸−である場合、Ｄは一〇−、−８−１そし
    て Ｒ／は水素原子および炭化水素残基よりなる群から選ば
    れる） を有する複合化合物。 （７）Ｒがハプテンおよび抗原よりなる群から選ばれる
    リガントゞから誘導された残基である、特許請求の範囲
    第８項記載の化合物。 １ （８）Ｄが−Ｎ−であ！、、Ｒ／が水素原子である、特
    許請求の範囲第６項又は７項記載の化合物。 （９）構造式■を令する、特許請求の範囲第６・ないし
    ８項のいずれかに記載の化合物。 （１０）　構造式ＩＶを有する、特許請求の範囲第６な
    いし８項のいずれかに記載の化合物。 （１１）　Ｒがシイキシンから誘導された残基である、
    特許請求の範囲第６項記載の化合物。 ○ （＋２１　Ｄが一〇−であシ、Ｙが−Ｎ−Ｃ−である、
    ％計請求の範囲第１１項記載の化合物っ（１３１Ｒがチ
    ロキシンから誘導された残基である、特許請求の範囲第
    ６項記載の化合物。 Ｏ不　Ｄが−ＮＨ−であり、Ｙが−Ｎ−Ｃ−である、１
    時計請求の範囲第１３ｆｊ４記載の化合物。 α９　待７’　請求の範囲Ａ６項ないし１４項のいず〕
    しかに記載した式ＬＬＩｔたはＩＶの化合物を法式：Ｘ
    　−ＮＨ２ （式中Ｘは下記式Ｖで与えられる怠ｆＥｔ４４する。）
    を有する化合物と反応させて得られる構造式Ｖ：ＦＩ２ （式中ｘＦｉ有機残基であシ： Ｚは一８Ｈおよび−ＯＨよシなる群から選ばれ：れ； Ｒは有機残基であシ； Ｙが−Ｎ−凸一である場合、Ｄは一〇−１−Ｓ−１して そして Ｒ′は水素原子および炭化水素残基よりなる群から選ば
    れる） を翁する複合化合物。 （ＬＩ　Ｒがハプテンおよび抗原よシなる群から遺ばれ
    るリガンドから誘導される残基である、特許請求の範囲
    第１５項記載の化合物。 （１７）　Ｘが検出可能なマーカーである、特許請求の
    範囲第１６項記載の化合物。 ０８）マーカーが螢光色素である、特許請求の範囲第１
    ７項記載の化合物。 （１９＋　螢光色素がフルオレ上４フ色素でちる、特許
    請求の範囲第１８項記載の化合物。 ｃ２（１）　ＲおよびＸの一方が検出用油なマーカーで
    あり、ＲおよびＸの他方は抗原、ハプテンおよび抗体よ
    りなる群から選ばれるリガンドから誘導される残基であ
    る特許請求の範１！ｌ：ｌ第１５項記載の化合物。 ＣＤ　トレーサーを使用する被分析体のアッセイにおい
    て、トレーブーとして行ｎ１−Ｍ肖求の範囲第１７項な
    いし２０項のいずれかに記載の化合物を使用することを
    特徴とするアッセイ方法。
JP59253953A 1984-01-06 1984-11-30 カップリング方法 Pending JPS60152481A (ja)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US06/568,698 US4595656A (en) 1984-01-06 1984-01-06 Coupling agents and products produced therefrom
US568698 1984-01-06

Publications (1)

Publication Number Publication Date
JPS60152481A true JPS60152481A (ja) 1985-08-10

Family

ID=24272357

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP59253953A Pending JPS60152481A (ja) 1984-01-06 1984-11-30 カップリング方法

Country Status (9)

Country Link
US (1) US4595656A (ja)
EP (1) EP0149904B1 (ja)
JP (1) JPS60152481A (ja)
AU (1) AU570733B2 (ja)
DE (1) DE3468210D1 (ja)
DK (1) DK560084A (ja)
MY (1) MY102067A (ja)
NZ (1) NZ209820A (ja)
ZA (1) ZA847895B (ja)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2007528835A (ja) * 2003-02-28 2007-10-18 ジーイー・ヘルスケア・バイオサイエンス・アクチボラグ 金属キレートアフィニティリガンドの合成方法

Families Citing this family (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5622871A (en) 1987-04-27 1997-04-22 Unilever Patent Holdings B.V. Capillary immunoassay and device therefor comprising mobilizable particulate labelled reagents
US4959306A (en) * 1986-11-28 1990-09-25 Sclavo, Inc. Labeling design for a binding assay reagent
US4975532A (en) * 1986-11-28 1990-12-04 Sclavo, Inc. Method to derivatize dextran
ATE225509T1 (de) 1987-04-27 2002-10-15 Inverness Medical Switzerland Testgerät zur durchführung von spezifischen bindungsprüfungen
US6352862B1 (en) * 1989-02-17 2002-03-05 Unilever Patent Holdings B.V. Analytical test device for imuno assays and methods of using same
US5252496A (en) 1989-12-18 1993-10-12 Princeton Biomeditech Corporation Carbon black immunochemical label
US6991911B2 (en) * 2003-12-15 2006-01-31 Dade Behring Inc. Assay for entactogens
US7022492B2 (en) * 2003-12-15 2006-04-04 Dade Behring Inc. Ecstasy haptens and immunogens
US20050130243A1 (en) * 2003-12-15 2005-06-16 Zheng Yi F. Assay for entactogens
US7115383B2 (en) * 2004-03-22 2006-10-03 Dade Behring Inc. Assays for amphetamine and methamphetamine
US7037669B2 (en) * 2004-03-22 2006-05-02 Dade Behring Inc. Assays for amphetamine and methamphetamine using stereospecific reagents
US8956859B1 (en) 2010-08-13 2015-02-17 Aviex Technologies Llc Compositions and methods for determining successful immunization by one or more vaccines

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3968233A (en) * 1973-12-05 1976-07-06 Istituto Chemioterapico Italiano α-Amino-γ-butyrolactones as sedatives

Family Cites Families (19)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB1316990A (en) * 1970-09-17 1973-05-16 Roche Products Ltd Imidazolyl derivatives
DE2347386A1 (de) * 1973-09-17 1975-04-03 Schering Ag Benzimidazol-1-carbonsaeureamide
US3925355A (en) * 1974-03-01 1975-12-09 Corning Glass Works Labelled digoxin derivatives for radioimmunoassay
FR2265355B1 (ja) * 1974-03-28 1977-11-04 Blum Jean
GB1471755A (en) * 1974-06-20 1977-04-27 Radiochemical Centre Ltd Derivatives of digoxin and digotoxin
DE2603319C3 (de) * 1976-01-29 1979-08-23 Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim Verfahren zur Fixierung von biologisch aktiven Proteinen an Trägern
US4115539A (en) * 1976-05-17 1978-09-19 Union Carbide Corporation Analytical or clinical derivatives, tagged derivatives and methods of analysis using such derivatives
JPS53119873A (en) * 1977-03-28 1978-10-19 Rohm & Haas Digoxigenin derivative
US4152411A (en) * 1977-07-27 1979-05-01 Akzona Incorporated High specific activity labeled substances
CA1119163A (en) * 1977-09-01 1982-03-02 Ravi K. Varma Digoxigenin derivatives
US4279992A (en) * 1978-03-13 1981-07-21 Miles Laboratories, Inc. Specific binding assay employing an enzyme-cleavable substrate as label
US4426453A (en) * 1980-09-18 1984-01-17 Amersham International Limited Derivatives of iodothyronine compounds and their use in an assay for the free iodothyronine compounds
US4378428A (en) * 1981-03-30 1983-03-29 Baker Instruments Corporation Method for carrying out non-isotopic immunoassays, labeled analytes and kits for use in such assays
US4442204A (en) * 1981-04-10 1984-04-10 Miles Laboratories, Inc. Homogeneous specific binding assay device and preformed complex method
US4399121A (en) * 1981-11-04 1983-08-16 Miles Laboratories, Inc. Iodothyronine immunogens and antibodies
US4469797A (en) * 1982-09-23 1984-09-04 Miles Laboratories, Inc. Digoxigenin immunogens, antibodies, labeled conjugates, and related derivatives
US4476229A (en) * 1982-11-08 1984-10-09 Abbott Laboratories Substituted carboxyfluoresceins
US4476228A (en) * 1982-11-08 1984-10-09 Abbott Laboratories Determination of unsaturated thyroxine binding protein sites using fluorescence polarization techniques
US4489165A (en) * 1983-01-24 1984-12-18 Becton Dickinson And Company Chromogenic tracers for use in an assay

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3968233A (en) * 1973-12-05 1976-07-06 Istituto Chemioterapico Italiano α-Amino-γ-butyrolactones as sedatives

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2007528835A (ja) * 2003-02-28 2007-10-18 ジーイー・ヘルスケア・バイオサイエンス・アクチボラグ 金属キレートアフィニティリガンドの合成方法

Also Published As

Publication number Publication date
MY102067A (en) 1992-03-31
NZ209820A (en) 1988-04-29
DK560084A (da) 1985-07-07
EP0149904A1 (en) 1985-07-31
DK560084D0 (da) 1984-11-26
AU570733B2 (en) 1988-03-24
US4595656A (en) 1986-06-17
EP0149904B1 (en) 1987-12-23
AU3403684A (en) 1985-09-12
DE3468210D1 (en) 1988-02-04
ZA847895B (en) 1985-06-26

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US4714763A (en) Novel oxazine-ureas and thiazine urea chromophors as fluorescent labels
JPS60152481A (ja) カップリング方法
EP1928822B1 (en) Violet laser excitable dyes and their method of use
US5496925A (en) 5(6)-methyl substituted fluorescein derivatives
EP0108399B1 (en) Substituted carboxyfluoresceins
US5672478A (en) Methods of use for and kits containing chemiluminescent compounds
US5304645A (en) Resorufin derivatives
CA2096495C (en) Dual analyte immunoassay
JP5777169B2 (ja) 新規な蛍光色素およびその使用
JPS59151060A (ja) アッセイ用の色原体トレ−サ−
US20100009342A1 (en) Control of chemical modification
EP0593956B1 (en) Agglutination assays using multivalent ligands
CN109824599B (zh) 一种阿苯达唑半抗原及其制备方法和应用
US4670406A (en) Tracers for use in assays
US5756771A (en) 5(6)-methyl substituted fluorescein derivatives
BRPI0711388B1 (pt) método para detectar um analito em uma amostra em um procedimento de ensaio
US20100029017A1 (en) Mono-chlorinated hydroxycoumarin conjugates
JP2960628B2 (ja) 標識サイロニンハプテン類似体を用いたイムノアッセイ
US4873318A (en) Oxazine-ureas and thiazine urea chromophors
US4780535A (en) Maleic and phthalic diamides
CN111363027A (zh) 一种安眠酮抗原及其制备方法
JPH04231873A (ja) バルビツレート検定法、トレーサー、免疫抗原、抗体およびキット
JPH06316599A (ja) ジフェンヒドラミンおよびその代謝産物の免疫学的測定のための組成物および方法
JPS62267289A (ja) フレカイナイド螢光偏光イムノアツセイにおいて使用するためのトレ−サ−
JPH0735400B2 (ja) ジカチオンエーテル類を使用するポリマー粒子への化合物の付着方法およびそれを含有するキット