JPS60137280A - 細胞生産物濃縮装置 - Google Patents
細胞生産物濃縮装置Info
- Publication number
- JPS60137280A JPS60137280A JP24706683A JP24706683A JPS60137280A JP S60137280 A JPS60137280 A JP S60137280A JP 24706683 A JP24706683 A JP 24706683A JP 24706683 A JP24706683 A JP 24706683A JP S60137280 A JPS60137280 A JP S60137280A
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- JP
- Japan
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- tank
- filter
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- Pending
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- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
〔ノケ業」：の利用分野〕
本発明は細胞培養液より直接的に目的とする細胞生産物
を渡縮するための細胞生産物ｍ線装置に関するものであ
る。
を渡縮するための細胞生産物ｍ線装置に関するものであ
る。
大量の細胞培養液から目的生産物を回収する工４７は、
その生産物を得るための全工程及び総経費において極め
て大きな割合を占める。
その生産物を得るための全工程及び総経費において極め
て大きな割合を占める。
例えば、動物細胞培養終了後の培養液は、次の様な特徴
を有する。
を有する。
（１）多ｈＹの水分を含有する。
（２）固型分として、細胞、蛋白質（細胞生産物）を含
む。
む。
（３） ＪＲ地酸成分用いられた無機塩類、血清を含む
。
。
（４） 目的物以外の微量の副産物や着色性不純物か含
まれている。
まれている。
（５）液体の性状は、目的とする細胞生産物を分解する
様な雑菌の汚染を受け易い。
様な雑菌の汚染を受け易い。
（６）培養ｆｌ！（培養した細胞の秤類）によっては、
濃縮時に激しく発泡したり、粘性物質を産出する場合が
ある。
濃縮時に激しく発泡したり、粘性物質を産出する場合が
ある。
以上の（工な培養液は、通常、目的物の抽出精製工程に
於いて、主要な工程の他に、これを補足するべき工程と
して、ａ）細胞分離（セル セパレーション： Ｃｅｌ
ｌ ５ｅｐａｒａｔｉｏｎ） 、 ｂ）ｆｆ縮（コン
セントレージョン゛Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ）、
ｃ）脱色（デカロリセーション： Ｄｃｃｏｌｏｒｉｚ
ａｔｉｏｎ）、ｄ）晶才斤（クリスタリゼーション・Ｃ
ｒｙｓｔａｌｌｉ−ｚａｔｉｏｎ）等が組み込まれる。
於いて、主要な工程の他に、これを補足するべき工程と
して、ａ）細胞分離（セル セパレーション： Ｃｅｌ
ｌ ５ｅｐａｒａｔｉｏｎ） 、 ｂ）ｆｆ縮（コン
セントレージョン゛Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ）、
ｃ）脱色（デカロリセーション： Ｄｃｃｏｌｏｒｉｚ
ａｔｉｏｎ）、ｄ）晶才斤（クリスタリゼーション・Ｃ
ｒｙｓｔａｌｌｉ−ｚａｔｉｏｎ）等が組み込まれる。
工業的な大容量培養の場合、細胞の分離〔回転式連続濾
過器、葉状加圧濾過器等が用いられる）及びその後のＩ
Ｍ縮（吸着法、沈殿法、塩析法）の２項目が、大きな問
題となる。即ち、大川の培養液から細胞を除去するには
、細胞の目詰まり４ｍ償できる大型の除去装置が必要と
なり、又、濃縮には大型の反応槽が必要である。
過器、葉状加圧濾過器等が用いられる）及びその後のＩ
Ｍ縮（吸着法、沈殿法、塩析法）の２項目が、大きな問
題となる。即ち、大川の培養液から細胞を除去するには
、細胞の目詰まり４ｍ償できる大型の除去装置が必要と
なり、又、濃縮には大型の反応槽が必要である。
本発明は細＃培養液から細胞及び細胞破片を除去し、該
炉液力）ら直ちに目的とする細胞生産物を濃縮し得る細
胞生産物濃縮装置を提供することを目的とする。
炉液力）ら直ちに目的とする細胞生産物を濃縮し得る細
胞生産物濃縮装置を提供することを目的とする。
この為、本発明者は細胞生産物の濃縮・抽出の補助工程
としての培養中及び培養後の培養液の部分濃縮を、細胞
の除去と細胞生産物の濃縮という点について鋭意研究し
、本発明に達した。
としての培養中及び培養後の培養液の部分濃縮を、細胞
の除去と細胞生産物の濃縮という点について鋭意研究し
、本発明に達した。
１１１１ち本発明は、細胞残渣を除去するためのフィル
ターを備えた細胞残渣除去槽と、目的とする細胞生産物
を通過させず低分子等の他の培養液成分を通過させるフ
ィルターを備えた細胞生産物の濃縮槽とを連結し、加圧
、減圧、ｖａＪｌｊｉを行なわせる事により、効率の良
い予備濃縮を行なう細胞生産物濃縮装置にかかるもので
ある。
ターを備えた細胞残渣除去槽と、目的とする細胞生産物
を通過させず低分子等の他の培養液成分を通過させるフ
ィルターを備えた細胞生産物の濃縮槽とを連結し、加圧
、減圧、ｖａＪｌｊｉを行なわせる事により、効率の良
い予備濃縮を行なう細胞生産物濃縮装置にかかるもので
ある。
ここで、ｍ飽残渣を除去するためのフィルターとしては
、培養する細胞の大きさ或は死滅細胞の大きさに適した
フィルターを選択する。例えば、メンブランフィルタ−
（０，４５μｍ等）、ガラスフィルター（Ｇ４、Ｇ５、
細菌用）、フィルターチューブ（分子量依存透析チュー
ブ（スペクトラムシリーズ、スペクトラム社製））等が
使用できる。
、培養する細胞の大きさ或は死滅細胞の大きさに適した
フィルターを選択する。例えば、メンブランフィルタ−
（０，４５μｍ等）、ガラスフィルター（Ｇ４、Ｇ５、
細菌用）、フィルターチューブ（分子量依存透析チュー
ブ（スペクトラムシリーズ、スペクトラム社製））等が
使用できる。
目的とする！１ｌｌＩ胞生産物を通過させず他の培養液
成分を通過させるフィルターとしては、目的とする細胞
生産物の分子量の物質を通さないフィルター例えばメン
ブランフィルタ−、フィルターチューブを使用し、目的
とする細胞生産物がウィルスの場合は０．２２μＭ、又
抗体等ではその分子量に沿ったフィルター又は透析膜を
使用する。
成分を通過させるフィルターとしては、目的とする細胞
生産物の分子量の物質を通さないフィルター例えばメン
ブランフィルタ−、フィルターチューブを使用し、目的
とする細胞生産物がウィルスの場合は０．２２μＭ、又
抗体等ではその分子量に沿ったフィルター又は透析膜を
使用する。
細胞残渣除去槽と濃縮槽とは、重層して連結してもよく
、細胞残渣除去槽のフィルター下側と濃縮槽の上部とを
チューブ等により連結してもよい。
、細胞残渣除去槽のフィルター下側と濃縮槽の上部とを
チューブ等により連結してもよい。
ｆ線種はフィルターの下ｆｌｉｔに炉液トラップ槽を設
け、フィルターを通過した低分子物質含有の炉液を貯留
し得るようにする。
け、フィルターを通過した低分子物質含有の炉液を貯留
し得るようにする。
更に、却１胞残渣除去槽と濃縮槽の濃縮部は加圧し得る
ようにして濾過速度を速めてもよく、この場合細胞残渣
除去槽の圧力は濃ｆＭ部の圧力よりも高めに設定する。
ようにして濾過速度を速めてもよく、この場合細胞残渣
除去槽の圧力は濃ｆＭ部の圧力よりも高めに設定する。
又、濃縮槽のｉｆｌ縮部とＦ？＆ｌ）ラップ槽は減圧し
得不ようにして？ｐ過速度を速めてもよく、この場合濃
縮部の減圧度よりも？Ｐ液・トラップ槽の減圧度を高め
に設定する。
得不ようにして？ｐ過速度を速めてもよく、この場合濃
縮部の減圧度よりも？Ｐ液・トラップ槽の減圧度を高め
に設定する。
更に、加圧と減圧を適宜組み合わせることにより、細胞
培養液及び目的とする細胞生産物の性状、量に応じて濾
過速度を調整する。
培養液及び目的とする細胞生産物の性状、量に応じて濾
過速度を調整する。
更に、細胞残渣除去槽と濃縮槽とをか液が循環し得やよ
う接続する。例えば、濃縮槽の濃縮部から細胞残渣ｉ大
検へ濃縮液を戻すためのチューブを接続して濃縮液を循
環させ、濃縮液中に残存する細胞残渣を完全に除去する
ようにし、又、濃縮槽の炉液トラップ槽からｉ！ｌＩ縮
部へか掖を戻すためのチューブを接続してか液を循環さ
せ、炉液中に残存する目的の細胞生産物を完全に回収す
るようにする。
う接続する。例えば、濃縮槽の濃縮部から細胞残渣ｉ大
検へ濃縮液を戻すためのチューブを接続して濃縮液を循
環させ、濃縮液中に残存する細胞残渣を完全に除去する
ようにし、又、濃縮槽の炉液トラップ槽からｉ！ｌＩ縮
部へか掖を戻すためのチューブを接続してか液を循環さ
せ、炉液中に残存する目的の細胞生産物を完全に回収す
るようにする。
以下、本発明の実施例を図面を参照しつつ説明する。
第１図は本発明の一実施例であり、底部にグラスフィル
ター１又はメンブランフィルタ−を設けた細１１ω残渣
除去槽２を濃縮槽３に重層して連結しである。該濃縮槽
３はその底部にメンブランフィルタ−４をメンプラン保
持用の多孔板等により支持せしめて配置してあり、該メ
ンブランフィルタ−４の下方にネジロ父はクリンプ等に
より炉液トラップＭ４５を着脱可能に取り付けである。
ター１又はメンブランフィルタ−を設けた細１１ω残渣
除去槽２を濃縮槽３に重層して連結しである。該濃縮槽
３はその底部にメンブランフィルタ−４をメンプラン保
持用の多孔板等により支持せしめて配置してあり、該メ
ンブランフィルタ−４の下方にネジロ父はクリンプ等に
より炉液トラップＭ４５を着脱可能に取り付けである。
図中６はキャップ、７．８は液循環用チューブ又は加圧
、減圧ラインを接続するための接続１］、９は啜引口を
示す。
、減圧ラインを接続するための接続１］、９は啜引口を
示す。
以」二のように構成したので、キャップ６を取り外して
、棺養液を細胞残渣除去４＠２内に注入すると、細ＩＩ
ω及び細胞残渣がグラスフィルター１により枦夫され、
液体部分が濃縮槽３の濃縮ｉ＋＋１ｏに移行し、更にメ
ンブランフィルタ−４により目的とする細胞生産物の分
子量よりも小さな分子量の物質が濾過され、ろ液トラッ
プ槽５に貯！７１される。こうして、濾過を続けるとａ
線種３の濃縮部１０内に目的とする細胞生産物が高温度
に濃縮され、大量の細胞培養液からの目的とする細胞生
産物の予備的濃縮を効率よく行なうことが可能となる。
、棺養液を細胞残渣除去４＠２内に注入すると、細ＩＩ
ω及び細胞残渣がグラスフィルター１により枦夫され、
液体部分が濃縮槽３の濃縮ｉ＋＋１ｏに移行し、更にメ
ンブランフィルタ−４により目的とする細胞生産物の分
子量よりも小さな分子量の物質が濾過され、ろ液トラッ
プ槽５に貯！７１される。こうして、濾過を続けるとａ
線種３の濃縮部１０内に目的とする細胞生産物が高温度
に濃縮され、大量の細胞培養液からの目的とする細胞生
産物の予備的濃縮を効率よく行なうことが可能となる。
第２図は本発明の第２実施例であり、ｍｌ記第１実施例
と略同様の構成において、グラスフィルター１又はメン
ブランフィルタ−の代わりに目的とするａ胎生産物を通
す分子濾過膜チューブ１１を装着した例である。
と略同様の構成において、グラスフィルター１又はメン
ブランフィルタ−の代わりに目的とするａ胎生産物を通
す分子濾過膜チューブ１１を装着した例である。
本実施例の場合にも、ｎ１■記実施例と同様に効率よく
目的とする細胞生産物を濃縮することができ、特に除去
すべき細胞残渣が多量の場合にａ１適である。
目的とする細胞生産物を濃縮することができ、特に除去
すべき細胞残渣が多量の場合にａ１適である。
第３図は本発明の第３実施例であり、前記第１実施例と
略同様の構成において、Ｓ線種３のメンブランフィルタ
−４の代オ）りに目的とするｍ胎生産物を通さない分子
濾過膜チューブ１２を８Ａ着した例である。
略同様の構成において、Ｓ線種３のメンブランフィルタ
−４の代オ）りに目的とするｍ胎生産物を通さない分子
濾過膜チューブ１２を８Ａ着した例である。
本実施例の場合にも、前記実施例と同様に効率よ＜目的
とする細胞生産物をｉｌ縮することができ、特にか過面
積が大きくなるので濾過速度を高めることができ、更に
効率の良いか過淵縮が５丁能となる。
とする細胞生産物をｉｌ縮することができ、特にか過面
積が大きくなるので濾過速度を高めることができ、更に
効率の良いか過淵縮が５丁能となる。
第４図は本発明の第４実施例であり、＋ｎ＋記第１実施
例と略同様の構成において、接続ロアに培養液槽１３を
チューブ１４により接続し、他の接続口８に加圧ライン
１５又は爆気（バブリング）ラインを接続し、吸引孔９
に吸気ライン１６を接続した例である。
例と略同様の構成において、接続ロアに培養液槽１３を
チューブ１４により接続し、他の接続口８に加圧ライン
１５又は爆気（バブリング）ラインを接続し、吸引孔９
に吸気ライン１６を接続した例である。
本実施例の場合には、細胞残渣除去槽２に培養後の培養
液を培養液槽１３からチューブ１４を経由して加圧下で
流入させ、且つ細胞の目詰まりを低減する為に濃縮槽３
の濃縮部１０に定期的な加７ＩＥ又は爆気を行ないつつ
、炉液トラップ槽５を減圧吸引する事により、連続的に
精製の為の予備濃縮を行なうことができる。特に細胞培
養後の多量に細胞を含む培養液からの目的物の予備濃縮
に好適である。
液を培養液槽１３からチューブ１４を経由して加圧下で
流入させ、且つ細胞の目詰まりを低減する為に濃縮槽３
の濃縮部１０に定期的な加７ＩＥ又は爆気を行ないつつ
、炉液トラップ槽５を減圧吸引する事により、連続的に
精製の為の予備濃縮を行なうことができる。特に細胞培
養後の多量に細胞を含む培養液からの目的物の予備濃縮
に好適である。
第５図は本発明の第５実施例であり、前記第１実施例と
略同様の構成において、゛接続ロアに培養槽１７をチュ
ーブ１４により接続し、他の接続１１８に新鮮培地補給
槽１８を備えた循環ライン１９の一部＜Ｋ＋を接続し、
該循環ライン１９の他端をｊ８養槽１７に接続し、吸引
孔９に吸気ラインを接続した例である。
略同様の構成において、゛接続ロアに培養槽１７をチュ
ーブ１４により接続し、他の接続１１８に新鮮培地補給
槽１８を備えた循環ライン１９の一部＜Ｋ＋を接続し、
該循環ライン１９の他端をｊ８養槽１７に接続し、吸引
孔９に吸気ラインを接続した例である。
本実施例の場合には、細胞の培養中の平均密度が、循茄
式連続ＪＦｊ養で行なう場合はそれ程高くないので、以
１この様に用いる。口１１ち、細胞残７ＩＩ＋除去４曹
２に珀ａ１〜を培養槽１７から加圧下で涼ノ＼させ、詰
縮泗１０で濃縮した培地液を循環ライン１９を経由して
新鮮培地の添加を行ないつつ培養槽１７にＪアす。これ
により、効率の良い連続培養装置の一部として利用でき
る。
式連続ＪＦｊ養で行なう場合はそれ程高くないので、以
１この様に用いる。口１１ち、細胞残７ＩＩ＋除去４曹
２に珀ａ１〜を培養槽１７から加圧下で涼ノ＼させ、詰
縮泗１０で濃縮した培地液を循環ライン１９を経由して
新鮮培地の添加を行ないつつ培養槽１７にＪアす。これ
により、効率の良い連続培養装置の一部として利用でき
る。
以−にの実施例において、第１図乃至第５図に図示した
符号のうち同一のものは同一のものを示す。
符号のうち同一のものは同一のものを示す。
以」二述べた様に本発明の細胞生産物濃縮装置によれば
、細胞残渣除去槽、細胞生産物の濃縮槽及び細胞生産物
の除去された培養液をトラップするか１ルトラツプ槽を
連結又は重層し、加圧、温圧の操作により、Ｕｌ＋胞の
目詰まりを抑制しつつ濃縮するようにしたので、培養移
液からの目的細胞生産物の一１Ｍ縮はもちろん、１′￥
養途中に組み込み循環式培養装置の一部として利用する
事により効率の良いウィルス、細胞生産物の生産を行な
わせる小が出来る等、種々の優れた効果を発揮する。
、細胞残渣除去槽、細胞生産物の濃縮槽及び細胞生産物
の除去された培養液をトラップするか１ルトラツプ槽を
連結又は重層し、加圧、温圧の操作により、Ｕｌ＋胞の
目詰まりを抑制しつつ濃縮するようにしたので、培養移
液からの目的細胞生産物の一１Ｍ縮はもちろん、１′￥
養途中に組み込み循環式培養装置の一部として利用する
事により効率の良いウィルス、細胞生産物の生産を行な
わせる小が出来る等、種々の優れた効果を発揮する。
第１図は本発明の第１実施例の説明図、第２図は本発明
の第２実施例の説明図、第３図は本発明の第３実施例の
説明図、第４図は本発明の第４実施例の説明図、第５図
は本発明の第５実施例の説明図である。 １はグラスフィルター、２は細胞残渣除去槽、３は濃縮
槽、４はメンブランフィルタ−１５は炉ｌ侵トラップ槽
、１０は濃縮部、１１．１２は分子濾過膜チューブ、１
３は培養液槽、１７は培養槽、１９は循環ラインを示す
。 特許出ｉ頭人 日本全桑工業株式会社
の第２実施例の説明図、第３図は本発明の第３実施例の
説明図、第４図は本発明の第４実施例の説明図、第５図
は本発明の第５実施例の説明図である。 １はグラスフィルター、２は細胞残渣除去槽、３は濃縮
槽、４はメンブランフィルタ−１５は炉ｌ侵トラップ槽
、１０は濃縮部、１１．１２は分子濾過膜チューブ、１
３は培養液槽、１７は培養槽、１９は循環ラインを示す
。 特許出ｉ頭人 日本全桑工業株式会社
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １）細胞残渣を除去するためのフィルターを備えた細胞
残渣除去槽と、目的とする＃ｌｌｌｌ産生産物過させず
他の培養液成分を通過させるフィルターを備えた濃縮槽
とを連結してなることを特（かとする細胞生産物濃縮装
置。 ２）濃縮槽が、フィルターの下側に濾過した培養液成分
を貯留する炉液トラップ槽を備えた濃縮槽である特許請
求の範囲第１項記載の細胞生産物濃縮装置。 ３） １ｎ胞残渣除去槽又は濃縮槽及び該両槽が加Ｉｒ
：、又は減圧を行なうことができる特許請求の範囲第１
項又は第２項記載の細胞生産物膿縮−？：装置。 ４）濃縮槽が、その炉液を細胞残渣除去槽に戻すように
した濃縮槽である特許請求の範囲第１項又は第３項記載
の細胞生産物濃縮装置。 ５）濃縮槽が炉液トラップ槽のが液を濠縮都に戻すよう
にした濃縮槽である特許請求の範囲第２項又は第３項記
載のｍ脳生産物濃縮装置。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP24706683A JPS60137280A (ja) | 1983-12-26 | 1983-12-26 | 細胞生産物濃縮装置 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP24706683A JPS60137280A (ja) | 1983-12-26 | 1983-12-26 | 細胞生産物濃縮装置 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS60137280A true JPS60137280A (ja) | 1985-07-20 |
Family
ID=17157913
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP24706683A Pending JPS60137280A (ja) | 1983-12-26 | 1983-12-26 | 細胞生産物濃縮装置 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS60137280A (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH0253479A (ja) * | 1988-08-12 | 1990-02-22 | Kawasumi Lab Inc | 培養装置 |
| US5000843A (en) * | 1988-10-17 | 1991-03-19 | Snow Brand Milk Products Co., Ltd. | Culture fluid concentrator |
-
1983
- 1983-12-26 JP JP24706683A patent/JPS60137280A/ja active Pending
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH0253479A (ja) * | 1988-08-12 | 1990-02-22 | Kawasumi Lab Inc | 培養装置 |
| US5000843A (en) * | 1988-10-17 | 1991-03-19 | Snow Brand Milk Products Co., Ltd. | Culture fluid concentrator |
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