JPS60128368A - 免疫学的分析方法 - Google Patents
免疫学的分析方法Info
- Publication number
- JPS60128368A JPS60128368A JP23513283A JP23513283A JPS60128368A JP S60128368 A JPS60128368 A JP S60128368A JP 23513283 A JP23513283 A JP 23513283A JP 23513283 A JP23513283 A JP 23513283A JP S60128368 A JPS60128368 A JP S60128368A
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- JP
- Japan
- Prior art keywords
- sample
- antigen
- reagent
- flow line
- antibody
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
- G01N33/54313—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals the carrier being characterised by its particulate form
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
技術分野
本発明は、免疫学的分析方法に関するものである。
従来技術
免疫学的反応を利用する生理活性物質の分析法には種々
の方法があり、その一つに抗原抗体反応による凝集物を
光学的に検出する方法がある。また、この抗原抗体反応
による分析法には、抗原と抗体との複合体を検出するも
のと、抗体（抗原）・、を人工粒子や赤血球等の粒子に
固相化し、分析すべき抗原（抗体）との反応による粒子
凝集物を検出するものとがある。
の方法があり、その一つに抗原抗体反応による凝集物を
光学的に検出する方法がある。また、この抗原抗体反応
による分析法には、抗原と抗体との複合体を検出するも
のと、抗体（抗原）・、を人工粒子や赤血球等の粒子に
固相化し、分析すべき抗原（抗体）との反応による粒子
凝集物を検出するものとがある。
このような抗原抗体反応による生理活性物質の分析は、
一般には抗原抗体反応によって生成される凝集物に由来
する光散乱強度や透過光量に基いて同定、定量される。
一般には抗原抗体反応によって生成される凝集物に由来
する光散乱強度や透過光量に基いて同定、定量される。
しかしながら、サンプル中の所定の抗原（抗体）を分析
するために、一定量のサンプルと、試薬として目的とす
る抗原（抗体）に対する一定盪の抗体（抗原）またはこ
れを固相化した人工粒子や赤血球等の粒子とを反応させ
ると、そのときの抗原抗体反応による凝集物の生成程度
は、目的とする抗原（抗体）量が多ければ多い程その程
度が上昇するのではなく、第１図に示すように、目的と
する抗原（抗体）量が試薬である抗体（抗原）ｉｔに対
して非常に多いと反対に凝集物の生成程度が低すしてし
まう。この現象は、いわゆる抗原過剰と呼ばれているが
、抗原過剰においては見掛上目的とする抗原（抗体）量
が少なくなるため、分析結果は実際とは非常にかけ離れ
、たものとなる。
するために、一定量のサンプルと、試薬として目的とす
る抗原（抗体）に対する一定盪の抗体（抗原）またはこ
れを固相化した人工粒子や赤血球等の粒子とを反応させ
ると、そのときの抗原抗体反応による凝集物の生成程度
は、目的とする抗原（抗体）量が多ければ多い程その程
度が上昇するのではなく、第１図に示すように、目的と
する抗原（抗体）量が試薬である抗体（抗原）ｉｔに対
して非常に多いと反対に凝集物の生成程度が低すしてし
まう。この現象は、いわゆる抗原過剰と呼ばれているが
、抗原過剰においては見掛上目的とする抗原（抗体）量
が少なくなるため、分析結果は実際とは非常にかけ離れ
、たものとなる。
従来は、このような抗原過剰による不具合を解決するた
め、二度に分けて試薬を添加したり、ディスクリートタ
イプの分析法でサンプルの希釈の度合を変えたものを複
数テストしたりする方法がとられているが、これらの方
法は分析に長時間を要すると共に、操作も面倒であり、
また不経済である。
め、二度に分けて試薬を添加したり、ディスクリートタ
イプの分析法でサンプルの希釈の度合を変えたものを複
数テストしたりする方法がとられているが、これらの方
法は分析に長時間を要すると共に、操作も面倒であり、
また不経済である。
発明の目的
本ｉ明の目的は、上述した不具合を解決し〜抗原過剰の
影響を受けることなく、被検物質を簡単゛′かつ迅速に
、しかも高精度で分析できる免疫学的分析方法を提供し
ようとするものである。
影響を受けることなく、被検物質を簡単゛′かつ迅速に
、しかも高精度で分析できる免疫学的分析方法を提供し
ようとするものである。
発明の概要
本発明においては、サンプルを７０−ライン中で緩衝液
中に適度に分散させる。このようにすると、フローライ
ンのあるポイントにおける被測定物の濃度と時間との関
係は第２図に曲線Ｉあるい、はＨで示すようになる。こ
の曲線Ｉあるいは■は分散の様式で異なり、様式が決ま
ればサンプルに関係なくは覧一定となる。本発明では、
このようにサンプルを分散させてサンプルの濃度をフン
トロールした状態で濃度一定の試薬を反応させることに
より、抗原過剰をチェックすると共に、抗原過剰領域に
おいても高精度の分析を行ない得るようにしたものであ
る。なお、フローラインでの緩衝液中へのサンプルの分
散の程度ハ、フローラインの長さ、径を、変化させたり
、ミキシング室を設定したりすること等により容易にフ
ントロールすることができる。
中に適度に分散させる。このようにすると、フローライ
ンのあるポイントにおける被測定物の濃度と時間との関
係は第２図に曲線Ｉあるい、はＨで示すようになる。こ
の曲線Ｉあるいは■は分散の様式で異なり、様式が決ま
ればサンプルに関係なくは覧一定となる。本発明では、
このようにサンプルを分散させてサンプルの濃度をフン
トロールした状態で濃度一定の試薬を反応させることに
より、抗原過剰をチェックすると共に、抗原過剰領域に
おいても高精度の分析を行ない得るようにしたものであ
る。なお、フローラインでの緩衝液中へのサンプルの分
散の程度ハ、フローラインの長さ、径を、変化させたり
、ミキシング室を設定したりすること等により容易にフ
ントロールすることができる。
“ このように、フローライン中でサンプルを分散させ
て濃度コントロールを□行なって一定濃度の試薬と反応
させ、その凝集物の程度を光散乱強度あるい−は透過光
量の変化から検出すると、第８図あるいは第４図に示す
ような信号が得られる。すなわち、サンプル中の目的と
する抗原（抗体ンが抗原過剰領域以下の濃度では、第８
図に示すようにピーク状の曲線が得られ、そのピークは
サンプル、中の目的とする抗原（抗体）の濃度が高くな
るに従って°高≦なり、抗原過剰領域に近づくに従って
伸びなぐなるが、第４図に示すようにピークの立ち主が
９の傾きが大きく変化するから、その傾きから目的とす
る抗原（抗体）が抗原゛過剰領域付近まで存在すること
がわかると共に、その光散乱強度からその量を高精度で
定量することができる。
て濃度コントロールを□行なって一定濃度の試薬と反応
させ、その凝集物の程度を光散乱強度あるい−は透過光
量の変化から検出すると、第８図あるいは第４図に示す
ような信号が得られる。すなわち、サンプル中の目的と
する抗原（抗体ンが抗原過剰領域以下の濃度では、第８
図に示すようにピーク状の曲線が得られ、そのピークは
サンプル、中の目的とする抗原（抗体）の濃度が高くな
るに従って°高≦なり、抗原過剰領域に近づくに従って
伸びなぐなるが、第４図に示すようにピークの立ち主が
９の傾きが大きく変化するから、その傾きから目的とす
る抗原（抗体）が抗原゛過剰領域付近まで存在すること
がわかると共に、その光散乱強度からその量を高精度で
定量することができる。
また、抗原過剰領域においては、反対にピークは低くな
るものの、立ち上がりの傾きが大きくなるから、同様に
その傾きと光散乱強度とから抗原過剰をチェックするこ
とができると共に、その量を高精度で定□量することが
できる。
るものの、立ち上がりの傾きが大きくなるから、同様に
その傾きと光散乱強度とから抗原過剰をチェックするこ
とができると共に、その量を高精度で定□量することが
できる。
なお、分析過程は完全フルースルー形でなくても、空気
等でセグメント化させたり、検出部だけをディスクリー
トタイプとすることもできる。
等でセグメント化させたり、検出部だけをディスクリー
トタイプとすることもできる。
実 施 例
第５図は本発明を実施する免疫学的分析装置の一例の構
成を示す線図である。本例では、緩衝液タンク１に収容
した緩衝液２をポンプ８により７、′ｃ１−ライン４中
に輸送し、その中にサンプルを分散させて、表面に目的
とする抗原（抗体′）に対する抗体（抗原）を固相化し
たラテックス試薬を一定濃度、で反応させて、サンプル
中の目的とする抗原（抗体）を分析するものである。
成を示す線図である。本例では、緩衝液タンク１に収容
した緩衝液２をポンプ８により７、′ｃ１−ライン４中
に輸送し、その中にサンプルを分散させて、表面に目的
とする抗原（抗体′）に対する抗体（抗原）を固相化し
たラテックス試薬を一定濃度、で反応させて、サンプル
中の目的とする抗原（抗体）を分析するものである。
サンプルはサンプルインジェクタ６でフローライン４内
に注入し、分散室６で第２Ｆｉ！Ｊに示したように分散
させる。分散室６はフローライン４内にスペースを設定
するだけでシいし、またフローライン４の一部の内径を
調整することで実施すれば特別必要ない。分散したサン
プルがミキシングポイン）７に達するのに同、期して、
試薬タンク８に収容されたラテックス試薬９をポンプ１
ｏにより注入し、これらを混合器１１にて完全に混合す
る。
に注入し、分散室６で第２Ｆｉ！Ｊに示したように分散
させる。分散室６はフローライン４内にスペースを設定
するだけでシいし、またフローライン４の一部の内径を
調整することで実施すれば特別必要ない。分散したサン
プルがミキシングポイン）７に達するのに同、期して、
試薬タンク８に収容されたラテックス試薬９をポンプ１
ｏにより注入し、これらを混合器１１にて完全に混合す
る。
この分散したサンプルに対するラテックス試薬９・の注
入は、第６図に破線で示すように、実線で示すサンプル
濃度変化に対して一定の濃度となるようにする。なお、
このラテックス試薬９は必ずしもサンプル濃度変化全域
に亘って注入する必要はなく、その一部、例えば濃度ピ
ーク部分を含む前、半分あるいは後半分だけでもよい。
入は、第６図に破線で示すように、実線で示すサンプル
濃度変化に対して一定の濃度となるようにする。なお、
このラテックス試薬９は必ずしもサンプル濃度変化全域
に亘って注入する必要はなく、その一部、例えば濃度ピ
ーク部分を含む前、半分あるいは後半分だけでもよい。
このようにして、フローライン４内を輸送しながら分散
したサンプルと一定濃度のラテックス試薬９とを反応さ
せ、検出器１２においてその反応の程度を光散乱強度も
しくは吸光度より検出してサンプル中の目的とする抗原
（抗体）量をめる。
したサンプルと一定濃度のラテックス試薬９とを反応さ
せ、検出器１２においてその反応の程度を光散乱強度も
しくは吸光度より検出してサンプル中の目的とする抗原
（抗体）量をめる。
なお、検出器１２を通過した反応液は排液タンク１８に
排出する。
排出する。
第７図は本発明を実施する免疫学的分析装置の他の例の
構成を示す線図である。本例では、分散室６とラテック
ス試薬９のミキシングポイント７との間の７０−ライン
４にセグメントポイント１４を設け、このセグメントポ
イント１４においてポンプ１５によりフローライン４に
間欠的に空気を注入して、分散して輸送されるサンプル
を第８図および第９図に示すように各濃度毎にセグメン
ト化し、その各セグメント化工〜Ｓｎにラテックス試薬
９を一定濃度で反応させるようにしたもので、その他の
構成は第５図と同じである。本例においては、ラテック
ス試薬９を添加する際のサン、プルの分散の乱れを考慮
することなく、より安定な分析が可能となる。 ゛ なお、上述した各実施例においては反応液を一箇所で測
光するようにしたが、これを複数箇所で測光してレイト
アッセイを行なうこともできる。
構成を示す線図である。本例では、分散室６とラテック
ス試薬９のミキシングポイント７との間の７０−ライン
４にセグメントポイント１４を設け、このセグメントポ
イント１４においてポンプ１５によりフローライン４に
間欠的に空気を注入して、分散して輸送されるサンプル
を第８図および第９図に示すように各濃度毎にセグメン
ト化し、その各セグメント化工〜Ｓｎにラテックス試薬
９を一定濃度で反応させるようにしたもので、その他の
構成は第５図と同じである。本例においては、ラテック
ス試薬９を添加する際のサン、プルの分散の乱れを考慮
することなく、より安定な分析が可能となる。 ゛ なお、上述した各実施例においては反応液を一箇所で測
光するようにしたが、これを複数箇所で測光してレイト
アッセイを行なうこともできる。
また、本発明はラテックス粒子を用いる試薬のみでなく
、その他の粒子、例えば血球を用いる試薬や、あるいは
粒子と用いない試薬による免疫学的反応に基べ分析にも
有効に適用でき７石ことは勿論である。
、その他の粒子、例えば血球を用いる試薬や、あるいは
粒子と用いない試薬による免疫学的反応に基べ分析にも
有効に適用でき７石ことは勿論である。
発、明の効果
浜上述べたように、本発明によれば、分散したサンプル
に対して一定濃度の試薬を反応させるこうにより、抗原
過剰の影響を受けることなく、被検物質を簡単かつ迅速
に、しかも高精度で分析することができる。
に対して一定濃度の試薬を反応させるこうにより、抗原
過剰の影響を受けることなく、被検物質を簡単かつ迅速
に、しかも高精度で分析することができる。
第１図は尊属過剰現象を説明するための線図、第２図、
第８図および第４図は本発明の免疫学、的分析方法を説
明するための線図、 第５図は本発明を実施する免疫学的分析装置の一例の構
成を示す線図、 第６図はその動作を説明するための線図、第７図は本発
明を実施す颯免疫学的分析装置の他の例の構成を示す線
図、 第８図および第９図はその動作を説明するための線図で
ある。 １・・・緩衝液タンク ２・・・緩衝液８・・−ポンプ
４・・・フローライン５…サンプルインジエクタ ＝ ６・・・分散室 ７・・・ミキシングポイント８・・・
試薬タン゛り ９・・・ラテックス試薬１０・・・ポン
プ １１・・・混合器 −１・・・検出器 １８・・・排液タンク１４・・・セ
グメントポイント １５・・・ポンプ。 第１図 第２図 Ｅｔｔ聞 第３図 第４図 時間 第５図 第６図 晴間
第８図および第４図は本発明の免疫学、的分析方法を説
明するための線図、 第５図は本発明を実施する免疫学的分析装置の一例の構
成を示す線図、 第６図はその動作を説明するための線図、第７図は本発
明を実施す颯免疫学的分析装置の他の例の構成を示す線
図、 第８図および第９図はその動作を説明するための線図で
ある。 １・・・緩衝液タンク ２・・・緩衝液８・・−ポンプ
４・・・フローライン５…サンプルインジエクタ ＝ ６・・・分散室 ７・・・ミキシングポイント８・・・
試薬タン゛り ９・・・ラテックス試薬１０・・・ポン
プ １１・・・混合器 −１・・・検出器 １８・・・排液タンク１４・・・セ
グメントポイント １５・・・ポンプ。 第１図 第２図 Ｅｔｔ聞 第３図 第４図 時間 第５図 第６図 晴間
Claims (1)
- Ｌ サンプル中の被検物質を、これと特異的に反応する
試薬を用いて免疫学的に分析するにあたり、前記サンプ
ルを７０−ライン中で分散させた状態で一定濃度の前記
試薬と反応させることを特徴とする免疫学的分析方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP23513283A JPS60128368A (ja) | 1983-12-15 | 1983-12-15 | 免疫学的分析方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP23513283A JPS60128368A (ja) | 1983-12-15 | 1983-12-15 | 免疫学的分析方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS60128368A true JPS60128368A (ja) | 1985-07-09 |
| JPH0581860B2 JPH0581860B2 (ja) | 1993-11-16 |
Family
ID=16981524
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP23513283A Granted JPS60128368A (ja) | 1983-12-15 | 1983-12-15 | 免疫学的分析方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS60128368A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2019007876A (ja) * | 2017-06-27 | 2019-01-17 | 日本電信電話株式会社 | 生体分子検出方法および装置 |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5324015A (en) * | 1976-08-16 | 1978-03-06 | Teikoku Hormone Mfg Co Ltd | Method and apparatus for detection of antigen-antibody reaction |
-
1983
- 1983-12-15 JP JP23513283A patent/JPS60128368A/ja active Granted
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5324015A (en) * | 1976-08-16 | 1978-03-06 | Teikoku Hormone Mfg Co Ltd | Method and apparatus for detection of antigen-antibody reaction |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2019007876A (ja) * | 2017-06-27 | 2019-01-17 | 日本電信電話株式会社 | 生体分子検出方法および装置 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0581860B2 (ja) | 1993-11-16 |
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