JPS5981536A - 微小粒子分離装置 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発１４１Ｊは微小粒子分離装置に関するもので、特に
連続的に通過する試料！ｖ、濁液中の微小粒子試料の故
、形状、性質等全自動的にｑ１１定して微小粒子試料の
性状に応じて試料粒子を分離採取するための微小粒子分
離装置に１東１する。

この槌の機能を備えた装置ではセル・ソータとして知ら
れるものが一般的であり、分析の結果判明した細胞の性
状に基いて高速で分離採取できるため病状診断や遺伝子
生物学の分野等で↑？θ要が増加しつつちる現状である
。セルノ〜りは毎秒５０００個あるいはそれ以上の速さ
で細胞を採取容器に振シ分け、かつ分析結果全出力する
もので、一般に次のような部分、即ち不活性液体全加圧
して層流として毛管内を通過させその中へ細ｊ泡懸濁液
等の被検液を流し込む部分、被検液がこの毛管ノズルを
流出した直後にレーザ光を照射する部分、レーザ光照射
による試料粒子からの散乱光全検出する散乱光検出部、
螢光を核出する螢光検出ｊη１り、螢光偏光解消度を検
出する螢光偏光解消度検出部等を有する光検出部分、光
検出部からの出力パルスの高さ、パルスの面積、・セル
スの時間幅を検出する回路のアナログ演算部分、アナロ
グ酸ｎ　ｆＧｊ％出力をＡ／Ｄ変換しマイクロコンビー
ータに入力するインターフェイス部分、及びノ４ルスの
高さの度数分布、パルスの面積の度数分布、パルスの時
間幅の２度数分布等を計算表示するマイクロコンビーー
タ部分からなるもので、ノエソトノズルからの流出速度
は毎秒約１０ｍＫ達し、予め螢光染色された被検液中の
細胞が照射レーデ光によって生ずる散乱光を光電増倍管
等で検出することによって細胞の数や大きさを測定する
。ジェットノズル先端からの噴流は計数し易いように交
流電場や音波による振動を加えることによって液滴とし
て流れるように工夫されている。

セル・ソータは細胞の計数と性状の部用な解析を行うの
みでなく、レーザ光を例えばシリンドリカルレンズで整
形して細胞の最大径と細小径や、細胞内の核の位置、あ
るいは細胞径と核径との比を求めたり、レーザ光に対す
る細胞の配位方向の変化に由来する誤判定の防止などの
機能を付加することもできる。またジェットノズル先端
からの僅かに離れた位置で、レーデ照射方向と異る角度
で細胞からの螢光を検出する場合には螢光染色された細
胞内のＤＮＡがレーデによって励起されて基底状態への
移行のＡ程で螢光を放射するため細胞から放射される螢
光を、例えばダイクロミンクミラーで赤と緑の二波長域
に分解してそれぞれの波長での螢光強度全光電増倍管等
で検出しその信号を波高解析器などで分析し出力し、螢
光強度からは細胞内のＤＮＡの量が主として計測される
。螢光現象は複雑で螢光染料が付着した細胞内の場所と
その周辺の状態に関する情報も含んでいるため、螢光の
偏光や螢光ｆｌｉ＋ｊ光解消度を測定することによシ細
胞内分子間のエネルギー伝４全解析する等、詳細な細Ｉ
Ｉ！！の構造、性質の解明が行われる。レーデ光による
分析処手の次に被検液液滴は直流電場全印加された小室
を通過し、ここで細胞分析の結果を用いて細：泡の性状
に従い液滴は流出方向が糸す分けられてそれぞれの採取
容器へ流入するが、個々の液滴にはほぼ１個ずつの細胞
が含まれるように懸濁液ぺ度と液滴の大きさが予め調整
される。

このようにして得られる複数個の測定情報はそれぞれ検
知器で電気信号に変換され増幅された後に、信号処理回
路ケ経て波高解析器やオシロスコープで信号強度を測定
されたシ、デジタル変換してミニコンピユータ等でデー
タ処理される。信号処理回路は散乱光による細胞数の計
測＋ｈうシングル・／ぞラメータ分析、複数の螢光波長
域信号比演算、螢光偏光解消度の演算、にＩｊｌ　ｌ］
’ｔＵの振り分は採取）６制御、同一液滴に関する散乱
光検出と螢光または螢光偏光解消検出との時間的ずれに
対する遅延動作制御、散乱光と各種螢光信号間の相関性
処理、各種光信号の積分等の機能を有している。

一般に波高解析等のセル・ソータによる分析情報はアナ
ログ信号よりもデジタル化してマイクロプロセッサやコ
ンピュータを用いるほうが高度なデータ処理ができるが
、マイクロプロセッサでデータ処理を行うには短かい時
間間隔で発生する複数の信号とマイクロプロセッサに取
り込む時間特性との間にずれがあってＡ／Ｄ変換した信
号を直接扱うことができないためにセル・ソータに使用
されていない。従来からのコンピュータ或ハミニ・コン
ピュータは時間特性の整合は可能であり、またデータ・
レコーダにＡ／Ｄ変換した信号を収録しオフ・ラインで
処理してモヨいが、ミニ・コンピュータであっても操作
が複雑な上に装置が大型となシ高価であるためこの問題
の解決が強く望゛まれてきていることは周知の通りであ
る。アナログ信号をオシロスコーグで観測したり、マル
チチャンネル波高解析器を用いることによりリアルタイ
ムで測定結果の表示はできるが複数棟類の測定に限界が
あることもよく知られているところである。

従って本発明の目的はこれらの問題を解決することであ
り、市販の量産型マイクロコンビュータケ用いて高度の
データ処理ができるセル・ソータを提供することであり
、またそのためのインターフェイス會提供することであ
る。本発明によるインターフェイスは一枚のボードに組
立てることが可能であって市販のセル・ソータへの内装
も可能となるためセル・ソータ筐体からバス・ラインで
マイクロコンピュータと直結することができる。まだ本
発明で使用されるマイクロコンピュータは最も小型化さ
れた所謂ハンド・ベルト型のものでよく、これによって
普及型の小型かつ操作性の優れた微小粒子分離装置の提
供全可能ならしめたものである。

本発明のインターフェイスを用いた微小粒子分画装置は
生物細胞粒子の数や、大きさ、性質等の分析や分離採取
を目的とするセル・ソータとして好適に使用されるが、
それ以外のフローサイトメータや各種の生物細胞以外の
素手粒子の分離装置としても有効に使用し得ることは当
然のことである。

以下セル・ソータ全一例として本発明を図面に治ってさ
らに詳細に説明する。

第１図はインターフェイス會内装してマイクロ・コンピ
ュータと１頁結したセル・ン〜ティング装置のブロック
・ダイアダラムである。すなわち図面で、 １は被検液送出および圧カＡ整部、２はフロー・セル、
３は細胞振シ分は部、４は受器、５はレーザ光源、６は
光源レンズ系　７　、７／　、　７／／はレンズ系、８
はダイクロミンク・ミラー、９は散乱光学系、１０は螢
光光学系ｆ、１１は螢光光学系■、１２は螢光偏光光学
系、１３は散乱光検出器Ｉ、１４は螢光Ｉ検出器２．１
５は螢光■検出器３．１６は螢光偏光検出器４．１７は
前置増幅器Ｉ、１８は前置型幅器２．１９は前置増幅器
３．２０は前１ｕ増幅器４．２１はマルチ・・！ラメタ
信号処理回路、２２はインターフェイス（２３けマイク
ロ・コンピュータ、２４は表示系であって、フローサイ
トメータは細胞振り分は部３と受器４がない。

；′（Ｓ　２図は上記のインターフェイス２２にかかわ
る部分のブロック・ダイアダラムの１例を示すり ２１は５（１１図におけるマルチ・／′Ｐラメタ信号処
理回路でめって、インターフェイスへの入力信号を予め
散乱光系からのシングル・・ぐラメタ、（しるいは散乱
光学系信号と螢光関係信号の内の任意の１個号、まン１
は螢光関係信号の内の任意の２１百号に選別する。これ
らの信号（はいずれもｉ損胞１個に対応した・母ルス出
力であって、２１ｋｌ−ｔの、・クルス冒す、ノ千ルス
幅、ハルス面積’ｉ　を圧に変換するアナログ演算部で
ある。つまシ、４個の検出器からの出力を測定の目的に
従って１抽寸たけ２抽の信号の送別、利得制御、積分、
ピーク・ホールドｔｒどを行う。２１からの７４′ルス
出力Ａ１・ぐルス出力Ｂは、それぞれインターフェイス
内のＡ／Ｄ　変換器、３１および３２でディノタル化さ
れる。３５秒よび３６はシフトレジスタで、そのいずれ
かに信号Ａと信号Ｂが交互に蓄えられそのシフトレジス
タの容量が満たされると、他方のシフトレジスタが１ｔ
Ａ（！−信号Ｂが同様に蓄積を始める。シフトレジスタ
の動作制御はシフトレジスタ制御器３９が行う。

容−堆が満たされたシフトレジスタは割シ込みｆｌｉ［
Ｉ陶器の動作によって入出力バス・インタフェイス４１
を経てマイクロ・コンピュータへデータを転送する。２
系列のシフトレジスタへの信号Ａ、Ｈの流れの開閉はダ
ート回路３３　、３４　。

３７．３８が行う。４１からの出力はマイクロ・コンピ
ュータ内でデータ処理が行われ、プリンタやｆｏフッタ
５どの表示系に出力す゛る。コンピュータへの割り込み
処理のように高速を要するソフトウェアはアセンブリ言
語で、その他の部分はＢＡＳＩＣ言語でグロダラムされ
、マイクロ・コンピータがバス・ライン４２、入出力バ
ス・インターフェイス４１−ｉ経てインターフェイスの
１ｉｌ１作を統括する。

以下第３図にインターフェイスの更に詳細な実砲例を、
第４図に動作のタイム・チャートを示す。

各検出器からの出力のうち、第２図に示すマルチ・・（
ラメタ信号処理回路２１で散乱光信号が７ｐ３図入力Ａ
として、螢光信号■が第３図人力Ｂとして選択され入力
するものとする。信号Ａおよび信号Ｂはそれぞれの変換
器５１および５２でディジタル化される。の変換器が１
２ビツトであれば、ディジタル信号ＡおよびＢはそれぞ
れ１２本のバス・ラインを経てバッファＪＩｌｑ１ｔｈ
？器など次の回路を通シ、処理された後にマイクロ・コ
ンビーータへの出カケープル端７０へ送られる。第３図
ではこれらバス・ラインを模式的に辰した。

ところでＡ／／Ｄ変換器（・まそれぞれの変換が終る度
にその信号ＥＯＣ（Ｅｎｄ　ｏｆ　Ｃｏｎｖｅｒｓｉｏ
ｎ）　ｋ出す。それぞれのＡ／Ｄ変換器ＥＯＣ信号がＮ
ＡＮＤ回路５３で反転され、ワン・ンヨノト回路５６へ
入力する。５６は入力信号の立上りで反転出力Ｑ’を出
す。この信号が次いでＮＯＲ回路５７全経てワン・ショ
ット回路５８へ入力し、５８はＱ信号の立下りでパルス
信号Ｑを発生する。ここテワン・ショット回路５６およ
び５８のパルス幅はそれぞれのワン・ショット回路の時
定数で定めるが、ワン・ショット回路５８のパ／ｌ／　
スｍτ、はワン・ショット回路５６の時定数τ２よシ大
きくする。これらの時間関係は第４図タイム・チャート
に示す通シである。ワン・ショット回路５８の時定数τ
、で定められた時間を経過すると、パルスは立ち下りこ
の信号がカウンタ６３へ入力しカウンタＱＡ全動作させ
て１個計数する。

カウンタのＱＡは反転してワン・ショット回路５８にフ
ィード・バックし５８を元の状態へ戻す。これによって
５８はτ、の時間幅の／Ｊ？ルスを発生する。５８で生
じたパルスはカウンタ６３を動作させて桁上げを行う。

一方、カウンタ６３の出力はインバータを経てバッファ
増幅器５４と５５へ入る。即ち、６３の出力はバッファ
増幅器５４と５５を交互に開閉するダート動作をさせる
。つ壕り、カウンタ６３の出力が正のときバッファ増幅
器５０を反転信号のとき７４ツフア」・１９幅器５２を
開く。この結果シフトレジスタ６０はＡ／Ｄ変換器から
の信号Ａと信号Ｂとを交互に読み込む。

実砲例のカウンタは１６進のものを用いておシ、よって
Ａ、Ｂの組で８ビツトをカウントする。カウンタ６３の
最大桁の出力で、シフトレジスタ５９と６０の動作を切
う換える。

更に、ワンショット回路５８の出力は分岐してワン・シ
ョット回路６４へ入力、６４は予め定められた時定数τ
、で定められた・ぐルスを発生する。τ３の遅延時間を
経て、６４の出力はワン・ショット回路６５を動作させ
、同様に６５は時定数τ４で定められたノ９ルスを発生
するＯワンショット回路６５の出力はＡＮＤとＯＲで組
合された論理回路６６を経てシフトレジスタ５９と６０
へそれぞれ入力し、シフトレジスタに読み込まれたデー
タケジフトさせる。これらシフトレジスタ５９と６０は
、カウンタ６３の最大桁の出力全論理回路６６へ導いて
、そのいずれ全動作させるかを決める。

シフトレジスタに蓄えられたデータは、マイクロ・コン
ピータからの指令が６９から入ってバス・ライン７０を
通）、マイクロ・コンピュータへ出力する。二つのシフ
トレジスタのいずれからマイクロ・コンビーータへ恍み
込むかは、これらシフトレジスタの動作順序とデータシ
フト指令の信号によって判定され、カウンタ６３の最大
桁の状態によって定まる。

フリソノ・フロラｆ６７’および６７“は、シフトレ・
クスク５９と６０が交互に動作してデータの蓄積が終っ
たとき、マイクロ・コンピータヘそれを送シ込むために
、割）込み励作指令全つｄ生する。割）込み指令は、Ｏ
Ｒ回路６８を経て割り込み指令出力端７２からマイクロ
・コンピュータへ送られる。フリソノ・フロソノ６７′
および６７“は論理回路６６とバッファ増幅器６１およ
び６２を介して、シフトレジスタへ接続しティる。不実
施例ではシフトレジスフを用いてデータの一時蓄積？行
ったが、ランダム・アクセス・メモリ（ＲＡＭ）　ｅ用
いることもできる。

第５図はＲＡＭ’ｉ用いた」烏合のブロック・ダイアダ
ラムを示す。シフトレジスフに比べ、データの蓄積−用
が増加でき、かつデータ全交互に配列させる必要がなＡ
ｏ ＡＤ変換器８１と８２でディジタル化された信号はそれ
ぞれバッファ増幅器８３と８４を経てＲＡＭ　８７へ入
るが、カウンタで構成される。ＲＡＭ制御器８５からの
指令で指定された番地にデータ読み込む。ＲＡＭは複数
のデータ記憶部を有し、その一つにデータを読み込み、
他から読み込んだデータをマイクロ・コンピュータへ送
り出す。

ＲＡＭからのデータ読み出しはＲＡＭ制御器８５からの
指令で読み出す番地を指定して行う。マイクロ・コンピ
ー−りへの出力は、割り込み制御器８６の動作によって
出力端４２へ表れる。

本発明のインターフェイスはセル・ソータからの分析デ
ータ全シフトレジスタまたはランダム・アクセス・メモ
リへ読み込んでいる一方で、マイクロ・コンピータへす
でに読み込んだデータ全速り出している。従って、高速
でづ０生するデータをまとめてコンピュータへ送り出す
ことができ、かつ割シ込み動作を行うことによって市販
のマイクロ・コンピータの使用が可能になり、同時にマ
イクロ・コンピュ−タの負担を少く゛することができる
。

次に本発明の装置６：に適した光学系統の構成について
述べる。

第６図は主に本装置の光学系を示した図で、被検出液送
出・圧力調整部１から試料と不活性液体がフローセル２
へ圧送され、フローセル中の毛細ノズルから前述のよう
に層流状態を保ちながら流出される。一方、レーデ光源
５からの照射光は光源レンズ系６を経て層流状態の試料
に照射され、試料からの散乱光、螢光がそれぞれ散乱光
学系９、螢光光学系１０．１１、螢光偏光学系１２へ導
かれ、既述の通シの分離が行われる。

本発明の好ましい実施例では、第７図に解シ易く示した
ように、散乱光学系９にオグティ力ルファイバー１７１
’ｉ用いる。オプティカルファイバーの束の一方端を複
数の細束に分け、その端面を図示のような１〜５の区域
に分画する。

そして、各分画６１９分に対応したファイバー細束をそ
れぞれの、検知か跡面に位置させる。このようにすれば
、散乱光を任意の角度成分に分けて測光でき、図示例で
は５次元のベクトルとして細＠識別処理を行える。又、
分画部分のうち必をな区画だけを取り出すようにしても
よい。

第８図は、螢光光学系における集光部分を示しており、
１８１は照射レーザ光の光軸、１８２は試料から発せら
れる螢光の光軸である。一般に、照射レーデ光が７０−
セル２を通過する際毛管壁で生じる散乱光は、水平にド
゛−ナツツ状に散乱する。従って、この散乱光が測定光
学系に入るのを防ぐため、本発明では照射光の光軸１８
１を含む水平面に対してθの角度をつけて螢光を集光し
ている。θの大きさとしては、螢光の集光角度（半角）
全ψとすると、θ≧ψであるのが望ましい。

第９図（ａ）　＋　（ｂ）は照射レーデ光を試料へ導く
ための光源レンズ系６全示している。第９図（ａ）中１
９１はレーデ光源５からの円形光束、１９２は２枚で一
対のシリンドリカルレンズ、１９３はシリンドリカルレ
ンズ透過後の楕円形光束である。２枚のシリンドリカル
レンズ１９２は、図示のように十字に組合せて配置して
ｂる。このようにすれば、試料への照射光を任意の楕円
形状に収束できるため、測定すべきｌｔＩ　胞の大きさ
に合せて最適なレーザ照射光が得られる。

但し、シリンドリカルレンズ１９３を用いると、第９図
（ｂ）中ａ、ｂ、ｃ、ｄで示したように、シリンドリカ
ルレンズ１９３の人出射面で散乱光が発生する。この散
乱光がｉ１１定光学系へ侵入するのを防ぐため、本発明
のさらに好ましい実施例では、シリンドリカルレンズと
フローセル２０間にピンホールマスク１９４が配置され
る。

又本発明の好ましい実施例では、第６図中１６１で示し
たように、フローセル２内の毛管ノズル先端に温度調節
用の熱交換ブロックが取　　コ付けられ、フローセルに
入る直前にシース液と　　タサンプル液を温調する。両
液は毛管ノズルを通　　れってフローセル２中へ流出さ
れるため、高い流　　学路抵抗によって温度変化を生じ
易いが、本実施４０図例のようにすれば両液の温度は常
に一定に保たれ、測定の安定度が高捷る。　　　　　　
　　　　　第さらに本発明の好ましい実施例では、特に
図　　７示しなかったが、ｉｌ”Ｉ定系中に粒子計数器
が設け　　にられる。この粒子計数器は、目的の粒子が
一定　　イ時間当りいくつΔｌ定にかかっているかをモ
ニタ　　５−するメータである。この粒子数モニターに
よ　　ダって、サンプル流量が処理能力の限界を越えな
　　示いようにＨ：制御できる。第１０図はシフトレジ
ス　　　８りを用いたインタフェイスを使用して得た結
果　　（ａ）の−例で、マウスの赤血球とリンパ球の混
合試　　図料の前方散乱ヒストグラムである。第１１図
は　　第螢光ヒストグラム、第１２図は血液についての
　　第２次元分布図の例である。

以上述べたように本発明によれば、マイクロンビーータ
と接続して高速処理が可能なイン−フェイスを有する微
小粒子分析装置が得らる。又、このような装置での測定
に適した元系を始めとする構成が得られる。

【図面の簡単な説明】

第１図は本装置のブロック・ダイアダラム、２図は本発
明によるインターフェイスのブロク・ダイアダラム、第
３図はンフトレジスタよるインターフェイス回路模式図
、第４図はンターフェイス動作のタイム・チャート、両
図はＲＡＭを用いたインターフェイスブロック・イアグ
ラム、第６図は主に本装置の光学系をした図、第７図は
散乱光学系全示した図、第図は螢光光学系の集光部分を
示す図、第９図、（ｂ）はそれぞれ光源レンズ系を示す
図、第１０は前方散乱強度ヒストグラムの列全示す図、
１１図は螢光強度ヒストグラムの例を示す図、１２図は
２次元分布図出力し０を示す図である。 １・・・被検液選出・圧力調整部、２・・・フローセル
、３・・・細胞振分は部、５・・・レーザ光源、４・・
・受器、６・・・光源レンズ系、９・・・散乱光学系、
１０．１１・・・螢光光学系、１２・・・螢光偏光光学
系、１３〜１６・・・検出器、２１・・・アナログ演算
部（マルチパラメタ信号処理回路）、２２・・・インタ
ーフェイス、２３・・・マイクロコンピュータ、２４・
・・表示系、１６１・・・熱交換ブロック、１７１・・
・オグティ力ルファイバー、１８１・・・照射レーデ光
の光軸、１８２・・・螢光の光軸、１９１・・・円形光
束、１９２・・・シリンドリカルレンズ、１９３・・・
楕円形光束、１９４・・・ヒンホールマスク。 出願人　　日本分光工業株式会社 代理人　丸　山　幸　雄 第　　　７　　　図 １６〕

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. １．６′Ｉ１．小粒子ｊ（１−濁液（試料）と不活性液
   体とをジェットノズルへ送る液送装置及びフロー管を１
   Ｊｉｊえたフロ一部、 フロー管の途中で試料を不活性液体のフローの中心軸に
   注入し試料と不活性液体を層流状態に保持する高速ジェ
   ットノズル、ノズルに音波振動を与え流体を均一な液滴
   に分離するノズル加振装置、 信号ＦＩｉｌＪ御処理ｊカ≦の制御信号に従ってｅ、滴
   を帯電させる液滴帯’ｌｔ装置、 高圧静電場で液滴の荷電量に従って液滴を偏向させる静
   上偏向装置、 １個以上のレーデ光を収束させノズルの直下で高速噴射
   液に照射するレーデ照射光学部、レーデ光照射による試
   料からの散乱光を検出する散乱光検出１ＶＩＳ　％螢光
   を検出する螢光検出６１Ｓ、螢光偏光解消度を検出する
   螢光偏光解消度検出部１個以上の検出部を有する光検出
   部、光検出部からの出カッ（ルスの高さ、パルスの面積
   、パルスの時間幅を検出する回路の１　ｆｌｉ’ｉ１以
   上の回路奮励え、それぞれの出力に対して対数、積、比
   、差、和またはそれらの組合わせを処理するアナログ演
   算部、 アナログ演算部出力をＡ　／　Ｄ変換しマイクロコンピ
   ュータに入力するインターフェイス部、及び パルスの高さの度数分布、７４′ルスの面積の度数分布
   、パルスの時間幅の度数分布を計算表示スるマイクロコ
   ンピュータ部からなる装置において、 該Ａ／Ｄ変換器出力信号を順次読取り記録しそれが満了
   すると隣りへその情報全移動させて、その動作全順次繰
   り返す複数列からなる信号読取り移動列部の一連の情報
   読取り部を複数群備え、信号読取り移動列部が読取り満
   了後、別の信号読取り移動列部が信号読取りを同様に行
   うと共に、既に信号を読取多記憶した信号ｉｉ’ｊ−ｉ
   Ｊ７リイ３　Ｍ＋ｌＩ列から読η゛イり記憶情報をマイ
   クロコンビーータに入力する制御論理回路を有すること
   を特徴とする微小粒子分＃装置。 ２、微小粒子懸濁液（試料）と不活性液体と？ジェット
   ノズルへ送る液送装置及びフロー管をＭｌｊえたフロ一
   部、 フロー管の途中で試料を不活性液体のフローの中心＃１
   ｔ＋に注入し試料と不活性液体を層流状態に保持する高
   速ビエットノズル、ノズルに音波撮動を力え流体を均一
   な液滴に分離するノズル７ｎ振装置、 信号ｉ’１７１ｉ宿１処理部の１伺御信号に従って液滴
   を帯電させる液滴帯′醒装置、 高圧静電場で液滴の荷電り士に従って液滴を偏向させる
   静電偏向装置、 １１ｆｂｊ以Ｊ−（Ｄ　Ｖ−ｆ光ｆ収束させノズル（７
   ）ａＴで畠速噴射液に照射するレーデ照射光学部、レー
   デ光照射による試料からの散乱光を検出する散乱光検出
   部、螢光を検出する螢光検出部、螢光偏光解消度を検出
   する螢光偏光解消度検出部１個以上の検出部を有する光
   検出１１ぢ、光検出６１Ｓからの出力パルスの高す、パ
   ルスノ面積、ノ９ルスの時間幅を検出する回路の１個以
   上の回ＩＦ６を備え、それぞれのｔＢカに対して対数、
   積、比、差、和またはそれらの組合わせを処理するアナ
   ログ演算部、 アナログ演算部出力をＡ／Ｄ変換しマイクロコンピュー
   タニ入方するインターンェイス部、及び ・Ｐルスの高さの度数分布、・ぐルスの面積の度数分布
   、パルスの時間幅の度数分布をｉｉ′１′算表示す不表
   示クロコンピュータ部からなる装置において、 Ａ／Ｄ変換器出力信号を記憶する４１８７作がそれに要
   する時間と記憶位置に無関係に行われ、かつ読取りので
   きる記憶部を備え、信号読取りと既に信号を読取シ記憶
   した情報をマイクロコンビーータに入力する制御論理回
   路部を有すること全特徴とする微小粒子分離装置。 ３、レーザ光照射による試料からの散乱光を検出する散
   乱光検＃、ｉ　ｌ′’ｌ（Ｓがオノティ力ルファイバー
   東の端面の一端をＮ数の細束に分画し、各分画１♀ＩＳ
   分θファイバー細束を複数の検知器の前１１１に設置し
   たことを特徴とする特許請求の範囲第１項及び第２項記
   載の微小粒子分離装置。 ４、レーザ光」１（１吋による試料からの螢光全検出す
   る螢光検出ｔ７１＜が入射光１抽向に対しある選択され
   た角度をもって螢光全集光することを特徴とする特許！
   ！ｉ′ｉ＊の範囲第１項及び第２項記載の’ｎ’？＜小
   粒子分離装置。 ５試料にレーザ光を照射するレーザ照射光学部にレーザ
   光束を任意の楕円形状に収束する二枚のンリンドリ力ル
   レンズを十字に組合わせたこと全特徴とする特許請求の
   範囲第１項及び第２項記載の微小粒子分離装置。 ６、試料前にピンホールマスクを設置したことを特徴と
   する特許Ｒｉυ求の範囲第５項記載の微小粒子分離装置
   。 ７、試料と不活１住液体をノズルから流出させる直前に
   、温度調節手段を設けたこと全特徴とする特許Ｊ１１求
   の範囲第１項及び第２項６弓？１１にの微小粒子分離装
   置。 ８、粒子計数器を備えたことを特徴とする特許請求の範
   囲第１項及び第２項記載の微小粒子分離装置。