JPS5921391A - 固定化ガラス及びその製造法 - Google Patents
固定化ガラス及びその製造法Info
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- JPS5921391A JPS5921391A JP57133055A JP13305582A JPS5921391A JP S5921391 A JPS5921391 A JP S5921391A JP 57133055 A JP57133055 A JP 57133055A JP 13305582 A JP13305582 A JP 13305582A JP S5921391 A JPS5921391 A JP S5921391A
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- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
- G01N33/551—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals the carrier being inorganic
- G01N33/552—Glass or silica
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C03—GLASS; MINERAL OR SLAG WOOL
- C03C—CHEMICAL COMPOSITION OF GLASSES, GLAZES OR VITREOUS ENAMELS; SURFACE TREATMENT OF GLASS; SURFACE TREATMENT OF FIBRES OR FILAMENTS MADE FROM GLASS, MINERALS OR SLAGS; JOINING GLASS TO GLASS OR OTHER MATERIALS
- C03C11/00—Multi-cellular glass ; Porous or hollow glass or glass particles
- C03C11/002—Hollow glass particles
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N11/00—Carrier-bound or immobilised enzymes; Carrier-bound or immobilised microbial cells; Preparation thereof
- C12N11/02—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
１ こσ１発明！、【、固定化ガラス及びその
！ｌシ造２月（開山 する。さらに、！’ｆ、
Ｌ ＜ ｉｌ、酊ふ、抗１輻（、抗ｆト祐のペプチド含
：「＋化合物を固定化してなる固定化ガラス及びその贋
造法をζ関’ｒ Ｊ＋ ０ 最近、酢、＋；鵜のペプチド含（Ｆ化合１１］をガラス
担（４−に固定化した固定化ガラスか診ＩＩ）を川やｉ
′目１（川のパイオリアクタ−として用いられるようＩ
Ｃｆ（ってきた。こハらの１．’、１定化ガラスの製造
法とＬ″ｃ′目、溶融法よって−Ｆ Ｗ） ？！Ｊられ
たＳｉｎ、系ガラスの表曲台・アルカリ処理して水酸基
を生成させ、こＪ目こ例えばアミノアルキル基を）９人
しこれに酵素をイ・」加して固定でせる方法が知られて
おり実用化でねている。
！ｌシ造２月（開山 する。さらに、！’ｆ、
Ｌ ＜ ｉｌ、酊ふ、抗１輻（、抗ｆト祐のペプチド含
：「＋化合物を固定化してなる固定化ガラス及びその贋
造法をζ関’ｒ Ｊ＋ ０ 最近、酢、＋；鵜のペプチド含（Ｆ化合１１］をガラス
担（４−に固定化した固定化ガラスか診ＩＩ）を川やｉ
′目１（川のパイオリアクタ−として用いられるようＩ
Ｃｆ（ってきた。こハらの１．’、１定化ガラスの製造
法とＬ″ｃ′目、溶融法よって−Ｆ Ｗ） ？！Ｊられ
たＳｉｎ、系ガラスの表曲台・アルカリ処理して水酸基
を生成させ、こＪ目こ例えばアミノアルキル基を）９人
しこれに酵素をイ・」加して固定でせる方法が知られて
おり実用化でねている。
しかじ上ｊ・ｉ従乎の方法において４′、ｉガラス′Ｊ
’＜１１＋！ Ｉｃ水水酸基化化１さゼる工程が必要で
ｔノリ、ぞれによってａＥ ｉ／、ｉ Ｌうる水酸ノ、
（の）１１位面ｔｔ’ｌ当りノＩＩＩ Ｎ、 ｒｉｂ！
ＩＱがあって酵素２Ｓの固シｉ！鼠を増大し活性の高
い固＞ｉ！化ガラスをイＩＩることか１１４σ・（１で
あった。
’＜１１＋！ Ｉｃ水水酸基化化１さゼる工程が必要で
ｔノリ、ぞれによってａＥ ｉ／、ｉ Ｌうる水酸ノ、
（の）１１位面ｔｔ’ｌ当りノＩＩＩ Ｎ、 ｒｉｂ！
ＩＱがあって酵素２Ｓの固シｉ！鼠を増大し活性の高
い固＞ｉ！化ガラスをイＩＩることか１１４σ・（１で
あった。
この発明１１１〕記問題点をｈ’（消°ノーベ〈なされ
たものである。このり６明の発明者らを」金ｋＩＳアル
コキシ１′を原Ｓ：とし、これを緩和な条ｆｌ下で加水
分２１“ｒして生成−！るゲル状物を酊素刈固定用１１
１体ＬＬで用いることに」：す、水ｒ１ぐ）、（を導入
する工程を行なうことな（従来に比して担体肖９のｔＩ
Ｐ素等の固定；１（が増大されｌｃ固定化ガラスが得ら
れる小火を見出し、この発明に１＋＋達した。
たものである。このり６明の発明者らを」金ｋＩＳアル
コキシ１′を原Ｓ：とし、これを緩和な条ｆｌ下で加水
分２１“ｒして生成−！るゲル状物を酊素刈固定用１１
１体ＬＬで用いることに」：す、水ｒ１ぐ）、（を導入
する工程を行なうことな（従来に比して担体肖９のｔＩ
Ｐ素等の固定；１（が増大されｌｃ固定化ガラスが得ら
れる小火を見出し、この発明に１＋＋達した。
かくしてこの発明によれば、（！１体として、金属アル
コキシＩ°の加水分解で生成する水酸止金わＳ化合物及
び／又はその縮合物からｌＩるガラス様ゲル体を用いて
なるペプチド含有化合物の固定化ガラスが提供きれる。
コキシＩ°の加水分解で生成する水酸止金わＳ化合物及
び／又はその縮合物からｌＩるガラス様ゲル体を用いて
なるペプチド含有化合物の固定化ガラスが提供きれる。
この発明Ｋ ＪＪける金ｂｉアルコキシ１′としては、
ガラス製造分野や七うミックス製造分野で知られた金属
のアルコキシドがわ１（々適用でき、具体的には ５ｉ
（ＯＣｌｌ、）、 、 Ｓ ｉ （ＱＣ，１１ｓ ）
４ 、 ”ｌ”ｉ （ＱＣ，ＩＩ、 ）、 、Ｖ（
ＱＣ，１１５）３、Ａ ｅ （ＱＣ，ＩＩ、 ） ｓ、
Ｎ ｎ ０ＣＩＩ、 等ノ低級アルフキシ金れ１が挙げ
られ、これらのうち低級゛γルフキシシシンを用いるの
が通常好適である。
ガラス製造分野や七うミックス製造分野で知られた金属
のアルコキシドがわ１（々適用でき、具体的には ５ｉ
（ＯＣｌｌ、）、 、 Ｓ ｉ （ＱＣ，１１ｓ ）
４ 、 ”ｌ”ｉ （ＱＣ，ＩＩ、 ）、 、Ｖ（
ＱＣ，１１５）３、Ａ ｅ （ＱＣ，ＩＩ、 ） ｓ、
Ｎ ｎ ０ＣＩＩ、 等ノ低級アルフキシ金れ１が挙げ
られ、これらのうち低級゛γルフキシシシンを用いるの
が通常好適である。
なＪＪ、これら二種以−Ｌの混合物を用いてもきしつか
えはない。
えはない。
この発明の固定化ガラスを作製するに当って、まずＪ−
記金用γルコキシｌ゛は加水分ＦＪＹによってゲル状物
とされる。
記金用γルコキシｌ゛は加水分ＦＪＹによってゲル状物
とされる。
例えば低級アルコキシシランを用いた場合、この加水分
解は水性溶媒中、酸１′ｌ、下にて緩和な条１゛１下て
行なうのが通常適当である。この際、家出下で溶媒を蒸
散させつつ加水分解を進め、加）♂１１を避けできるだ
け加水分Ｐｆｆ物の水酸止金ｆｉｌ化合１（りの高縮合
化が防止されたゲル状物を生成させることが好ｔしい。
解は水性溶媒中、酸１′ｌ、下にて緩和な条１゛１下て
行なうのが通常適当である。この際、家出下で溶媒を蒸
散させつつ加水分解を進め、加）♂１１を避けできるだ
け加水分Ｐｆｆ物の水酸止金ｆｉｌ化合１（りの高縮合
化が防止されたゲル状物を生成させることが好ｔしい。
この際の水性浴りｆＩ、としてｔ」水を含む１；１１発
性の親水性溶剤を用いるのが適当であり、例えば含水メ
タ／−ルや含水エタノールが好適に用いらオｌる。場合
によっては水分は空気中から供給されるため水を含オせ
なくてもよい。水のみで加水う〕ｍ“を行なうことも可
ｎ［、であるが、この場αｔ」加水分解が急激に進み渦
ぎて不均一になる惧れがありさらに１ゲル状物の乾燥１
−不利であり好捷しくない。−ｉだ溶媒のｐ ＩＩは通
常酸性（ｐＨ１〜３程度）とするのが適当であり、通常
、塩酸等の無機酸を少Ｊｌ＋添加することによってｌ１
１１を整される。かような水性溶媒中に金属アルコキシ
ドを加え室温で充分にＪＴ２ Ｊｉ’ ｉｌ１合した後
、空気中ｆＣ放置して水及び親木￥Ｉ：溶剤を自然乾燥
きせることにより、この発明のゲット状物が単離きれる
。
性の親水性溶剤を用いるのが適当であり、例えば含水メ
タ／−ルや含水エタノールが好適に用いらオｌる。場合
によっては水分は空気中から供給されるため水を含オせ
なくてもよい。水のみで加水う〕ｍ“を行なうことも可
ｎ［、であるが、この場αｔ」加水分解が急激に進み渦
ぎて不均一になる惧れがありさらに１ゲル状物の乾燥１
−不利であり好捷しくない。−ｉだ溶媒のｐ ＩＩは通
常酸性（ｐＨ１〜３程度）とするのが適当であり、通常
、塩酸等の無機酸を少Ｊｌ＋添加することによってｌ１
１１を整される。かような水性溶媒中に金属アルコキシ
ドを加え室温で充分にＪＴ２ Ｊｉ’ ｉｌ１合した後
、空気中ｆＣ放置して水及び親木￥Ｉ：溶剤を自然乾燥
きせることにより、この発明のゲット状物が単離きれる
。
ただし、加水分Ｗｆ条件は金ｈ４アルフキシトによって
もｈ′４なり、有機溶媒も使用可能で；ｔ’ｙ 、！Ｊ
−１だ、アルカリ性下でも可能であり、−！二記例に限
定きれることなく；＋！１宜選ｖくずれＣＩ’よい。
もｈ′４なり、有機溶媒も使用可能で；ｔ’ｙ 、！Ｊ
−１だ、アルカリ性下でも可能であり、−！二記例に限
定きれることなく；＋！１宜選ｖくずれＣＩ’よい。
例えば、金トＳアルコキシドとして５１（ＱＣ，ｌ１ｂ
）＜を用いた場合にｔ：ｔガラス様のゲル体が得られる
がそのｆｉｌ成暑ｆＳｒ （ＯＣｚｌｌｓ）／−）加水
分がｆ物である５ｉ（０１１）。
）＜を用いた場合にｔ：ｔガラス様のゲル体が得られる
がそのｆｉｌ成暑ｆＳｒ （ＯＣｚｌｌｓ）／−）加水
分がｆ物である５ｉ（０１１）。
又はその低縮合物からなるため、従来のＳｉｎ、系ガラ
ス）（アルカリ処理により生成きれたホ酸＾Ｌｉ−こ比
して非り：（に多数の水「ＩＩ基をそれ自身有している
。
ス）（アルカリ処理により生成きれたホ酸＾Ｌｉ−こ比
して非り：（に多数の水「ＩＩ基をそれ自身有している
。
従って１；ｔ、来の固定化ガラスに比して多鼠の酵素等
を固定化できるものと考えられる。他の金ｋＪｓアルコ
キシドについても同様に、旬られたガラス様ゲル体）」
水酸止金れｉ化合物やその低Ｊｌｌｉ合物からなるため
、多１１（の酵素等を固定化できるものと考えられる。
を固定化できるものと考えられる。他の金ｋＪｓアルコ
キシドについても同様に、旬られたガラス様ゲル体）」
水酸止金れｉ化合物やその低Ｊｌｌｉ合物からなるため
、多１１（の酵素等を固定化できるものと考えられる。
かようなゲル状物ｔま単離後ｆ［：、けに緩和１ｔ ＋
ＡＡ Ｌ艷（通常５０〜２００℃程度）で乾燥して用い
てもよく、その−土ま用いてもよい。そして、その形状
も？Ｕられた形状そのままで用いてもよく、板状にカッ
トして用いてもよく、粉砕り、−（微粒子−又は１：）
状として用いてもよい。ＭｒＥ常、固定＋、Ｖをより増
加させるためには、微粒子又番」粉状として用いても」
。
ＡＡ Ｌ艷（通常５０〜２００℃程度）で乾燥して用い
てもよく、その−土ま用いてもよい。そして、その形状
も？Ｕられた形状そのままで用いてもよく、板状にカッ
トして用いてもよく、粉砕り、−（微粒子−又は１：）
状として用いてもよい。ＭｒＥ常、固定＋、Ｖをより増
加させるためには、微粒子又番」粉状として用いても」
。
〈板状体としでも表面を第１１面化することがｊｌ・１
当でｔＩる。
当でｔＩる。
こめゲル状物（ガラス様ゲル体）をＪｊ４体ＬＬ１これ
にシランカップリング剤をＪｉ応ΔＶ、その反応物にペ
プチド含有化合物を固定化することｔζよりこの発明の
固定化ガラスカニ？υられる。
にシランカップリング剤をＪｉ応ΔＶ、その反応物にペ
プチド含有化合物を固定化することｔζよりこの発明の
固定化ガラスカニ？υられる。
１−記ゲル状物に反応させるシランカップリング剤とし
ては、アミ７基、チオール基、エボ；１−シ基などの官
能性基を有する当該分野で公知のシランまｅ５１１体が
１１イ用でき、具体的に奢まｒ−アミノプロピルトリエ
トキシシラン、ｒ−りロロブロピルｉリメトキシシラン
、ビニルトリエトキシシラン、ｒ−グリシドキシプルピ
ルトリメ１キシシラン、Ｎ−７７−（γミノエチル）
−ｒ −７ミノプロビルトリメトキシシラン等が使用さ
れる。かようなシランカップリング剤との反応基よ、当
該分野で公知の条件下で行なわれる。例えばｒ −°ｒ
ミノプロピルを３〜５に調整した後、この溶８ｋに充
分に乾燥さイ れた前記ゲル状物又はその粉砕物
を加え加ｉＬｌ下混合してＵｔ １１＋Ｊ間処理した後
水洗し°〔未反応のカップへ ｉ リング剤を除去することにより得られる。
ては、アミ７基、チオール基、エボ；１−シ基などの官
能性基を有する当該分野で公知のシランまｅ５１１体が
１１イ用でき、具体的に奢まｒ−アミノプロピルトリエ
トキシシラン、ｒ−りロロブロピルｉリメトキシシラン
、ビニルトリエトキシシラン、ｒ−グリシドキシプルピ
ルトリメ１キシシラン、Ｎ−７７−（γミノエチル）
−ｒ −７ミノプロビルトリメトキシシラン等が使用さ
れる。かようなシランカップリング剤との反応基よ、当
該分野で公知の条件下で行なわれる。例えばｒ −°ｒ
ミノプロピルを３〜５に調整した後、この溶８ｋに充
分に乾燥さイ れた前記ゲル状物又はその粉砕物
を加え加ｉＬｌ下混合してＵｔ １１＋Ｊ間処理した後
水洗し°〔未反応のカップへ ｉ リング剤を除去することにより得られる。
１ このようにして処〃１（されたゲル状物に公
知の方法で酵素、抗原、抗体等のペプチド含有化合物が
固定化芒Ｊする。例えし！“、カップリング剤としてｒ
−アミノプロピルトリエトキシシランを用いてアミノア
ルキル基を水酸基にエステル結合で多数導入Ｌ ｋゲル
状１りを用いる場合、」二記アミノアルキルノ、（にグ
ルタフトアルデヒドを用いてアルデヒド基全有するシッ
フペースを導入し、これ１１酵累等を接触させてアルデ
ヒド基と酵素衿のアミノ基間で？５１ＱｌＩＪＩｔ Ｊ
υ−２１，１ｊ１１（，３ンざらにシッフベースを形成
菌せて１．Ｌｉ’ｎ−ｒること１ζより固定化を行なう
ことができ、これ以夕ｔにもアミノアルキル基をジアゾ
化して芳香族アミ７基を導入しこれ１Ｃ酵素等を固定化
し°〔もよく、１にカルボジイミドを用いてアミノアル
キル基と酊メ・；等との間Ｋ ｉ（を接ペプチド結合を
行ない固定化を行なってもよぐ酊ｇ、！等の種７Ｊ１に
応じ−（Ｊｌ、１宜選１）ソすればよい。他のカップリ
ング剤使用時にも同様にｉＩ′Ｉ接又は適宜変侠したカ
ップリングツ、（にょって酵素２８を固定化することが
できる。
知の方法で酵素、抗原、抗体等のペプチド含有化合物が
固定化芒Ｊする。例えし！“、カップリング剤としてｒ
−アミノプロピルトリエトキシシランを用いてアミノア
ルキル基を水酸基にエステル結合で多数導入Ｌ ｋゲル
状１りを用いる場合、」二記アミノアルキルノ、（にグ
ルタフトアルデヒドを用いてアルデヒド基全有するシッ
フペースを導入し、これ１１酵累等を接触させてアルデ
ヒド基と酵素衿のアミノ基間で？５１ＱｌＩＪＩｔ Ｊ
υ−２１，１ｊ１１（，３ンざらにシッフベースを形成
菌せて１．Ｌｉ’ｎ−ｒること１ζより固定化を行なう
ことができ、これ以夕ｔにもアミノアルキル基をジアゾ
化して芳香族アミ７基を導入しこれ１Ｃ酵素等を固定化
し°〔もよく、１にカルボジイミドを用いてアミノアル
キル基と酊メ・；等との間Ｋ ｉ（を接ペプチド結合を
行ない固定化を行なってもよぐ酊ｇ、！等の種７Ｊ１に
応じ−（Ｊｌ、１宜選１）ソすればよい。他のカップリ
ング剤使用時にも同様にｉＩ′Ｉ接又は適宜変侠したカ
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できる。
固＞ｉ２化用の酵：（（とじてｔま長体的にｔＪグル：
］−ススキキシダーゼウリカーゼ、ウレアーゼ、クレア
チ；；ナービ、ＣｏＡ−シンテターゼ、ＣｏＡ−オキシ
ダーゼ、コレステロールＡギシダーゼ、コレステロール
ヒドロラーゼ等力稍ｔげられるが限定されることはなく
、抗原や抗体を固定化することもできる。
］−ススキキシダーゼウリカーゼ、ウレアーゼ、クレア
チ；；ナービ、ＣｏＡ−シンテターゼ、ＣｏＡ−オキシ
ダーゼ、コレステロールＡギシダーゼ、コレステロール
ヒドロラーゼ等力稍ｔげられるが限定されることはなく
、抗原や抗体を固定化することもできる。
このように１．て得られた固定化ゲル体（固定化ガラス
）＃″ｉｉ従来定化ガラスと同イ☆）に、種々の３１ｅ
）ｊ！ｊでお所用や合成用のバイオリアクターとして
１ かつ固定化１ｊ二当って水酸基を等大する工
程を必要ラ 一 きしないため、従来ｔｉｃ比して大幅にコス
ト全低減１ でき、また水系媒体中で処＃Ｊ！’（
’き−（１機ｒｒ； Ｍを用いミ ー ないため有利であり、さらに固定化ガラスも
従来１ のものに比して活１’＋４の高いものが
ｉＵらね、工業上極めて、ｒＪ−川である。この発明に
よるガラスはガラスピーズの他に板状、’ｊ’ｌ・状の
形状でもよく、ガラスや金属？１°の表面を被覆したア
ルコ４シｌ°ガラスｉ に酵素などを固定化しｆ
ｃ形珂１であってもよい。
）＃″ｉｉ従来定化ガラスと同イ☆）に、種々の３１ｅ
）ｊ！ｊでお所用や合成用のバイオリアクターとして
１ かつ固定化１ｊ二当って水酸基を等大する工
程を必要ラ 一 きしないため、従来ｔｉｃ比して大幅にコス
ト全低減１ でき、また水系媒体中で処＃Ｊ！’（
’き−（１機ｒｒ； Ｍを用いミ ー ないため有利であり、さらに固定化ガラスも
従来１ のものに比して活１’＋４の高いものが
ｉＵらね、工業上極めて、ｒＪ−川である。この発明に
よるガラスはガラスピーズの他に板状、’ｊ’ｌ・状の
形状でもよく、ガラスや金属？１°の表面を被覆したア
ルコ４シｌ°ガラスｉ に酵素などを固定化しｆ
ｃ形珂１であってもよい。
以−ト、この発明を実施例ＧＣよってより＋Ｉ’ Ｌ
＜ ｉ？Ｃ♂明°〕゛る。
＜ ｉ？Ｃ♂明°〕゛る。
実施例１．（ゲル状物の作製−工Ｒ１Ｊ ）テ１ラエト
キシシラン５ｉ（ＱＣ，ＩＩ、）４１０９、ｊ
エ タ ノ −ル ３０．ノー！％ 水
３．８ ｍｌノ乏 び月Ｉへ）（ｌｕ １．４ｔ
／７）；ＩＩ ６６ｈ ／ −１ｆｆ １ １
’！ 宕ｒ１．Ｊ −ｒｌ １６１ Ｋなる
ｉでＩ勺！詩間攪拌混合した。この混合Ｙノを空気中に
約４日間放置して加水分１１（と水及びエタノ−への蒸
発を進め、約１２０℃で乾燥させ°（Ｓｉ（０１１）４
糸のゲ４・状物を９；）な。
キシシラン５ｉ（ＱＣ，ＩＩ、）４１０９、ｊ
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’！ 宕ｒ１．Ｊ −ｒｌ １６１ Ｋなる
ｉでＩ勺！詩間攪拌混合した。この混合Ｙノを空気中に
約４日間放置して加水分１１（と水及びエタノ−への蒸
発を進め、約１２０℃で乾燥させ°（Ｓｉ（０１１）４
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（γミノアルキル化−工稈２）
工程１”［’得られたゲル状物を乳シ１．でｔａ砕し、
ふるい全通して平Ｊ／Ｊ粒？に（ｉ（しＢｏ、 ８０／
１２０ 、＋２０／’、２００のビーズを４！Ｊ ｆｃ
〇 ５ｗｔ％のｒ−アミツブｐビルトリエｔ：Ｘンシラン水
溶液を５Ｎ）＆λ酸で＋、１１３．５ ！で、悶整し、
このｎ’ｉ ｈ”ｉ、 ４５ ｗｌ ｆｃ対し上記ビー
ズ状ゲへ状豹を各々５ｙ没入し、さらに、ＩＩ ３．５
になイ、よう）ｒ ｊ”Ｉ整１．た。
ふるい全通して平Ｊ／Ｊ粒？に（ｉ（しＢｏ、 ８０／
１２０ 、＋２０／’、２００のビーズを４！Ｊ ｆｃ
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溶液を５Ｎ）＆λ酸で＋、１１３．５ ！で、悶整し、
このｎ’ｉ ｈ”ｉ、 ４５ ｗｌ ｆｃ対し上記ビー
ズ状ゲへ状豹を各々５ｙ没入し、さらに、ＩＩ ３．５
になイ、よう）ｒ ｊ”Ｉ整１．た。
この混合’ｌｆ、ｆｆ 全、（１１拌ｅ、Ｊ 、 ｉｉ
、、ｔ ！！Ｊ： Ｗｌ、ジノ、ｕ −）をイ・１設し
た四ツ１−■７ラスフに入れウメ−ターパスでｎ＋！良
は・７５℃にＣｉｉち、６・）としくノ１１拌させなか
ら３１１＆ １１１１１に応を行４った。反此、４ど了
伎、ビーズを１１υ月メンブランフィルターに移し、！
６の７？：ｑ＋、１＋を水で木反１心のｒ−アミノプロ
ピルトリエトキシシランを除去した後、デシケータ−で
乾燥さ４して１１゛ｌ径の）′４にる三拙のアミノアル
キル化ゲル状’ｉ！ｊをイりた。このアミノアルキル化
ゲル状物はデシケータ−内で保存する。
、、ｔ ！！Ｊ： Ｗｌ、ジノ、ｕ −）をイ・１設し
た四ツ１−■７ラスフに入れウメ−ターパスでｎ＋！良
は・７５℃にＣｉｉち、６・）としくノ１１拌させなか
ら３１１＆ １１１１１に応を行４った。反此、４ど了
伎、ビーズを１１υ月メンブランフィルターに移し、！
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ピルトリエトキシシランを除去した後、デシケータ−で
乾燥さ４して１１゛ｌ径の）′４にる三拙のアミノアル
キル化ゲル状’ｉ！ｊをイりた。このアミノアルキル化
ゲル状物はデシケータ−内で保存する。
（酵素の固定化−］二稈３）
」−記７ ミノアルキル化ゲル状物（ビーズ状）を各々
三官能１′１．の、グルタルアルデヒド（２，５ｗｔ％
）のリン酸地綴右ｑＭ液（ｌ、ＩＩ ７．０ ）に＆？
ｅ／Ｌ、アスピレータ−で減１１；させつつ約３０分攪
拌下１に応いせた。続いてさらに釣３０分１：ｉ川で攪
拌上反応きせｔ（。反応渇１ρ１１２５℃であった。こ
れを、１１７．０のリン酸塩Ｊ、Ｑ ？Ｉυ液で充分に
ｂし浄し、乾Ｍ・きせた。
三官能１′１．の、グルタルアルデヒド（２，５ｗｔ％
）のリン酸地綴右ｑＭ液（ｌ、ＩＩ ７．０ ）に＆？
ｅ／Ｌ、アスピレータ−で減１１；させつつ約３０分攪
拌下１に応いせた。続いてさらに釣３０分１：ｉ川で攪
拌上反応きせｔ（。反応渇１ρ１１２５℃であった。こ
れを、１１７．０のリン酸塩Ｊ、Ｑ ？Ｉυ液で充分に
ｂし浄し、乾Ｍ・きせた。
この処理によりゲル状物のアル、デヒドＪ１（をｒ７す
るシッフベースが３！１人いれる。
るシッフベースが３！１人いれる。
得られたゲル状物を１町／＃Ｊ（グルコースオキシダー
ゼ／１．１１７．０ リン６φ塩釆’（ｊす１む液）
中に浸ｒｔ／ Ｌ、２５℃下Ｊｉノ″３０分減圧下でＬ
υ〜・かＫ Ｉｉ’Ｌ押して反応を行ない、ｋｇいて６
０分゛ｊ：（圧下で緩かに１ｔγ拌して固定化反シ１）
：を行な−３ｋ Ｏこの処理によりグルコースオキシダ
ーゼのアミツノ、ｔが反１．１；に関−ｑし、担体（ゲ
ル状物）のアルデヒド基とσらにシッフペースを杉成し
固定化される。このｊ：うｔてしてこの発明のグル；１
−スオキシダーゼ固定化ゲル状物（ガラス）が各々得ら
れた。
ゼ／１．１１７．０ リン６φ塩釆’（ｊす１む液）
中に浸ｒｔ／ Ｌ、２５℃下Ｊｉノ″３０分減圧下でＬ
υ〜・かＫ Ｉｉ’Ｌ押して反応を行ない、ｋｇいて６
０分゛ｊ：（圧下で緩かに１ｔγ拌して固定化反シ１）
：を行な−３ｋ Ｏこの処理によりグルコースオキシダ
ーゼのアミツノ、ｔが反１．１；に関−ｑし、担体（ゲ
ル状物）のアルデヒド基とσらにシッフペースを杉成し
固定化される。このｊ：うｔてしてこの発明のグル；１
−スオキシダーゼ固定化ゲル状物（ガラス）が各々得ら
れた。
（ず古性ム（艮巾 ）
上記固＞ｉ４化ガラスピーズのうち２００メツシユのも
のの固定化度合を従来と比較するためポルタンメトり一
法により活性試験を行なった。まず、１ｗｔ％のβ−Ｄ
グルコースｒａｔｔｙ ＜ １，１１７．０リンｒｉ４
ｊＬｆ ＬＧ ？４０ｋＶ ） １０ ｍｌを、上記
この発明の固ンｉ：化ガラスピーズ１ｙを入れたビーカ
ーに注入し１５分間株かに１１２拌してｊく応でせ、反
応１浅から’）、、、ｔを採取して５％ヨウ化カリウム
ｉＭ ／ｌｋ １ ｎｅｔ ｆＬ／、５ｉ ＪＪＩＩ
した。
のの固定化度合を従来と比較するためポルタンメトり一
法により活性試験を行なった。まず、１ｗｔ％のβ−Ｄ
グルコースｒａｔｔｙ ＜ １，１１７．０リンｒｉ４
ｊＬｆ ＬＧ ？４０ｋＶ ） １０ ｍｌを、上記
この発明の固ンｉ：化ガラスピーズ１ｙを入れたビーカ
ーに注入し１５分間株かに１１２拌してｊく応でせ、反
応１浅から’）、、、ｔを採取して５％ヨウ化カリウム
ｉＭ ／ｌｋ １ ｎｅｔ ｆＬ／、５ｉ ＪＪＩＩ
した。
この操作により、＾Ｙメ・；反応によりう６生したメ（
Ｍｒｌ？化水計；でｌ−が１．（ａｑ）に酸化される。
Ｍｒｌ？化水計；でｌ−が１．（ａｑ）に酸化される。
このｌ、をポルタンメトリー法に」、す）９１元し、マ
イ元電を１ｌｌｌ定することにＪ、１月！ Ｊｉ’ｔが
定；Ｉ（でき、ひいＣは固′、？化ガラスピーズに」ｊ
ける酵素の固定化の程度すなわち活）１の［，１度がわ
かる。
イ元電を１ｌｌｌ定することにＪ、１月！ Ｊｉ’ｔが
定；Ｉ（でき、ひいＣは固′、？化ガラスピーズに」ｊ
ける酵素の固定化の程度すなわち活）１の［，１度がわ
かる。
従来のガラスをＪｊｊ体として＋＞ｉＪ記り同４；）ｉ
ｌでして？１ｔた固定化ガラスピーズとこの弁明の固
定化ガラスピーズとのポルタンメトリー法による結果を
表１に示す。
ｌでして？１ｔた固定化ガラスピーズとこの弁明の固
定化ガラスピーズとのポルタンメトリー法による結果を
表１に示す。
表 １
※ ０．５３ｖｓＮｏＥ−ｃｌ＜元型ｂ；こはブランク
イト゛丸をノ＝Ｌ引いたものであり、童位走有ｄすＱ２
Ｏｒ−＋Ｖ／秒である。
イト゛丸をノ＝Ｌ引いたものであり、童位走有ｄすＱ２
Ｏｒ−＋Ｖ／秒である。
このようにこの発明のｌ、ｊ、ｉ定化力゛ラスは、従〕
にのガラスを担体と−ｒるもの１ζ比して明らｔ・１て
Ａ′、−’ ｇ’：活性が高いことが判る。
にのガラスを担体と−ｒるもの１ζ比して明らｔ・１て
Ａ′、−’ ｇ’：活性が高いことが判る。
１ ・
第１頁の続き
７２発 明 者 田原修
京都市中京区西ノ京桑原町１番
地株式会社島津製作所三条工場
内
７２発 明 者 水口博義
京都市中京区西ノ京桑原町１番
地株式会社島津製作所三条工場
内
７２発明 者 柄谷′〆
京都市中京区西ノ京桑原町１番
地株式会社島津製作所三条工場
内
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 ｉ ＋ｘ＋ １ｆｔ（ｌして、金属アルコキ
シ１°の加水分Ｙイで口 補 生成する水ｒａｔ化金属化合ｅｙ及び／又
はぞ９６（１合γグからなるガラス４子ゲル体ｋｌ目い
てなる′ぐプ子１ ドロ有化合１りの固定化ガ
ラス。 （２） 金属アル：Ｊ千シトの−ｆｉ１１又はニセ１
（以上どＪＪ：１本１ ｌｌ） ｔｆｆ し
て生１＋’９するゲル状１勺ヲ単を目−こノ’ＬｉＣ−
ｒ１ ゛ ′ 入（・ −／
−７１−／Ｌ＝ ）・（・ ” ″”パ４“ ′Ａ５な
Ｅ ０） ′Ｌ：イＬヒＰ１１ 基を有する
シランカップリング剤ｔＭ応芒Ｕ、４ その反
シト５．１’ｉｔ ｃ’ｃペプーｆ−１゛八５「１化合
物を固定ＩＬ： ′する美 １ こと６−１．“ｆｒ＆と・Ｊ−１，固定化
ガラスの装造Ｌ１、。
Priority Applications (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP57133055A JPS5921391A (ja) | 1982-07-29 | 1982-07-29 | 固定化ガラス及びその製造法 |
| EP83304391A EP0100660B1 (en) | 1982-07-29 | 1983-07-29 | A bioreactor and a process for the production thereof |
| DE8383304391T DE3376223D1 (en) | 1982-07-29 | 1983-07-29 | A bioreactor and a process for the production thereof |
| US07/243,156 US4897468A (en) | 1981-12-29 | 1988-09-09 | Immobilization of peptide-containing compounds on metal hydroxide gels |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP57133055A JPS5921391A (ja) | 1982-07-29 | 1982-07-29 | 固定化ガラス及びその製造法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS5921391A true JPS5921391A (ja) | 1984-02-03 |
| JPH0372273B2 JPH0372273B2 (ja) | 1991-11-18 |
Family
ID=15095762
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP57133055A Granted JPS5921391A (ja) | 1981-12-29 | 1982-07-29 | 固定化ガラス及びその製造法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS5921391A (ja) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS63171363A (ja) * | 1987-01-09 | 1988-07-15 | Terumo Corp | 免疫凝集反応用粒子 |
| JPS6488367A (en) * | 1987-09-30 | 1989-04-03 | Japan Chem Res | Immobilized antibody |
| EP0895082A2 (en) * | 1997-08-01 | 1999-02-03 | Canon Kabushiki Kaisha | Method of spotting probe on solid support, probe array and method of manufacturing thereof, and method of detecting target substance and method of identifying structure of target substance using probe array |
| KR100450191B1 (ko) * | 2001-12-28 | 2004-10-02 | 삼성에스디아이 주식회사 | 생체물질 고정용 기판 및 이의 제조방법 |
-
1982
- 1982-07-29 JP JP57133055A patent/JPS5921391A/ja active Granted
Cited By (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS63171363A (ja) * | 1987-01-09 | 1988-07-15 | Terumo Corp | 免疫凝集反応用粒子 |
| JPS6488367A (en) * | 1987-09-30 | 1989-04-03 | Japan Chem Res | Immobilized antibody |
| EP0895082A2 (en) * | 1997-08-01 | 1999-02-03 | Canon Kabushiki Kaisha | Method of spotting probe on solid support, probe array and method of manufacturing thereof, and method of detecting target substance and method of identifying structure of target substance using probe array |
| EP0895082A3 (en) * | 1997-08-01 | 1999-08-11 | Canon Kabushiki Kaisha | Method of spotting probe on solid support, probe array and method of manufacturing thereof, and method of detecting target substance and method of identifying structure of target substance using probe array |
| EP1352976A2 (en) * | 1997-08-01 | 2003-10-15 | Canon Kabushiki Kaisha | Method of spotting probe on solid support, probe array and method of manufacturing thereof, and method of detecting target substance and method of identifying structure of target substance using probe array |
| EP1352976A3 (en) * | 1997-08-01 | 2003-10-29 | Canon Kabushiki Kaisha | Method of spotting probe on solid support, probe array and method of manufacturing thereof, and method of detecting target substance and method of identifying structure of target substance using probe array |
| US7994297B2 (en) | 1997-08-01 | 2011-08-09 | Canon Kabushiki Kaisha | Method of spotting probes on a solid support |
| KR100450191B1 (ko) * | 2001-12-28 | 2004-10-02 | 삼성에스디아이 주식회사 | 생체물질 고정용 기판 및 이의 제조방법 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0372273B2 (ja) | 1991-11-18 |
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