JPS59208460A - 癌罹病に由来する細胞からの高ラジカルの発生を検知する方法 - Google Patents
癌罹病に由来する細胞からの高ラジカルの発生を検知する方法Info
- Publication number
- JPS59208460A JPS59208460A JP8365183A JP8365183A JPS59208460A JP S59208460 A JPS59208460 A JP S59208460A JP 8365183 A JP8365183 A JP 8365183A JP 8365183 A JP8365183 A JP 8365183A JP S59208460 A JPS59208460 A JP S59208460A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- cell
- hematoporphyrin
- cancer
- cells
- shows
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/574—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Immunology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Hospice & Palliative Care (AREA)
- Oncology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明はガンの診断の際に用いて好適な測定方法に関し
、特に生体外（ｉｎ ＶｉｔｒＯ）において細胞とヘマ
トポルフィリンとの結合度合を測定する方法に関するも
のである。
、特に生体外（ｉｎ ＶｉｔｒＯ）において細胞とヘマ
トポルフィリンとの結合度合を測定する方法に関するも
のである。
急増しつつあるガンの診断法として最近脚光を浴びてき
たものの１つに光感受性物質とレーザー光線を用いた方
法がある。これは、腫瘍に親和性を有した光感受性物質
を静脈内投与し、長ｖｆ間かけて腫瘍に蓄積させた後、
レーザ光線を患部に照射し、例えばレーザ光照射によっ
てヘマトポルフィリンが発生する蛍光を観察することに
より、腫瘍を判別するものである。
たものの１つに光感受性物質とレーザー光線を用いた方
法がある。これは、腫瘍に親和性を有した光感受性物質
を静脈内投与し、長ｖｆ間かけて腫瘍に蓄積させた後、
レーザ光線を患部に照射し、例えばレーザ光照射によっ
てヘマトポルフィリンが発生する蛍光を観察することに
より、腫瘍を判別するものである。
ところが、この方法は生体内（ｉｎ ｖｉｖｏ ）での
測定であり、蓄積までに３日間程度必要であり患者の苦
痛はもちろんのこと、多くの手間がかかつていた。
測定であり、蓄積までに３日間程度必要であり患者の苦
痛はもちろんのこと、多くの手間がかかつていた。
本発明は上述した点に鑑みてなされたものであり、ヘマ
トポルフィリンのガン細胞及びリンパ球による摂取率が
高いことに着目し、ヘマトポルフィリンと細胞との結合
の度合を正確に測定することのできる方法を提供するこ
とにより、ガンの診断容易ならしめることを目的として
いる。
トポルフィリンのガン細胞及びリンパ球による摂取率が
高いことに着目し、ヘマトポルフィリンと細胞との結合
の度合を正確に測定することのできる方法を提供するこ
とにより、ガンの診断容易ならしめることを目的として
いる。
本発明にかかる方法は、取出された細胞又は組織にヘマ
トポルフィリンを混入し、標識化されているヘマトポル
フィリンの量を測定するようにしたことを特徴としてい
る。以下、本発明を詳述する。
トポルフィリンを混入し、標識化されているヘマトポル
フィリンの量を測定するようにしたことを特徴としてい
る。以下、本発明を詳述する。
第１図はヘマトポルフィリンの構造式を示す。
ヘマトポルフィリンは光照射を受けるとπ−カチオン
ラジカルを生成し、このラジカルを電子スピン共鳴装置
（ＥＳＲ装置）で測定することができる。第２図は上記
ラジカルのＥＳＲスペクトルの測定例を示し、ｑ値は２
．００１５である。第３図は、ヘマトポルフィリンのリ
ン酸バッファ溶液約１００μ込に光（紫外線）を照射し
て測定したＥＳＲスペクトル強度と希釈濃度との関係を
示しており、高濃度領域に飽和現象がみられるものの、
全体としてヘマトポルフィリン濃度とＥＳＲ信号強度と
の間に良好な直線関係が存在することが分る。尚、測定
は、室温では感度が低下するため、−１００℃の低温で
行われている。
ラジカルを生成し、このラジカルを電子スピン共鳴装置
（ＥＳＲ装置）で測定することができる。第２図は上記
ラジカルのＥＳＲスペクトルの測定例を示し、ｑ値は２
．００１５である。第３図は、ヘマトポルフィリンのリ
ン酸バッファ溶液約１００μ込に光（紫外線）を照射し
て測定したＥＳＲスペクトル強度と希釈濃度との関係を
示しており、高濃度領域に飽和現象がみられるものの、
全体としてヘマトポルフィリン濃度とＥＳＲ信号強度と
の間に良好な直線関係が存在することが分る。尚、測定
は、室温では感度が低下するため、−１００℃の低温で
行われている。
第４図は、ＥＳＲ装置を用いて本発明にかかる３一
方法を実７Ｉ！！ｉする際の手順を示す流れ図である。
（１）被検細胞（例えばリンパ球）を用意し、（２）こ
れを例えば０．００５モルのへマドポルフィリン５０μ
込と混合し、（３）３７℃で約１０分インキコベートし
、（４）５分間１５００ｒｒ１ｍ、で遠心分離してリン
パ球のみ取り出して生理食塩水にて洗浄し、（５）洗浄
後、リンパ球を３００μ込の生理食塩水に浮遊させた状
態でＥｌ装置に導入し、光（紫外線）照射しつつ定量測
定する。
れを例えば０．００５モルのへマドポルフィリン５０μ
込と混合し、（３）３７℃で約１０分インキコベートし
、（４）５分間１５００ｒｒ１ｍ、で遠心分離してリン
パ球のみ取り出して生理食塩水にて洗浄し、（５）洗浄
後、リンパ球を３００μ込の生理食塩水に浮遊させた状
態でＥｌ装置に導入し、光（紫外線）照射しつつ定量測
定する。
第５図は赤面球系腫瘍細胞に５６２について−Ｆ記手順
で測定した時の、細胞数とＥＳＲ信号の相対強度との関
係を示す。細胞数と相対強度との間には良好な直線関係
があることが分る。
で測定した時の、細胞数とＥＳＲ信号の相対強度との関
係を示す。細胞数と相対強度との間には良好な直線関係
があることが分る。
第６図は正常健康者のマクロファージによる貧食作用の
影響を調べたものである。図中黒丸はリンパ球中にマク
ロファージが混在している場合について第４図の手順で
測定した結果を示し、白丸はマクロファージを完全に除
去した場合である。
影響を調べたものである。図中黒丸はリンパ球中にマク
ロファージが混在している場合について第４図の手順で
測定した結果を示し、白丸はマクロファージを完全に除
去した場合である。
マクロファージの存在がヘマトポルフィリンのり＝４−
ンバ球中への摂取量を高めることが明らかである。
これは、マクロファージによるヘマトポルフィリンの貧
食作用によるものと考えられる。そこで正確を期するた
めには、測定に際しては、マクロファージを例えばシリ
カゲル等で除去したリンパ球又は細胞を用いることが望
ましい。
食作用によるものと考えられる。そこで正確を期するた
めには、測定に際しては、マクロファージを例えばシリ
カゲル等で除去したリンパ球又は細胞を用いることが望
ましい。
第７図は、第４図の手順に従って測定した正常健康者（
下）とガン患者（上）のリンパ球についてのＥＳＲスペ
クトルを示す。ガン患者は、正常者に対し約２倍の強度
となっている。
下）とガン患者（上）のリンパ球についてのＥＳＲスペ
クトルを示す。ガン患者は、正常者に対し約２倍の強度
となっている。
第８図は、正常健康者７名、ガン患者（卵巣ガン、子宮
ガン及び消化器系ガン）１９名、ＨＢＢ炎患者６名の各
々のリンパ球と、前記に５６２及び膵ガンセルラインで
あるＨＧＣ−２５について第４図の手順で測定した測定
結果を示す。
ガン及び消化器系ガン）１９名、ＨＢＢ炎患者６名の各
々のリンパ球と、前記に５６２及び膵ガンセルラインで
あるＨＧＣ−２５について第４図の手順で測定した測定
結果を示す。
ガン患者の平均値は２．０４．ｌ５Ｄ０．８６であり、
正常健康者の平均値０．７４．ｌ５Ｄ０゜２８に比し極
めて大きく、はっきりと区別することが可能である。
正常健康者の平均値０．７４．ｌ５Ｄ０゜２８に比し極
めて大きく、はっきりと区別することが可能である。
ガンの培養細胞であるに５６２及びｌ−Ｉ Ｇ Ｇ −
２５も伴に正常健康者に比し極めて高い値を示した。
２５も伴に正常健康者に比し極めて高い値を示した。
従って、上記第４図の手順によって細胞とヘマトポルフ
ィリンとの結合の度合を定量的に測定すれば、その測定
結果に基づいて患者がガンであるか否かを正確に判別す
ることが可能である。
ィリンとの結合の度合を定量的に測定すれば、その測定
結果に基づいて患者がガンであるか否かを正確に判別す
ることが可能である。
又、非ガン性疾患であるＨＢ感感想患者平均値０．７４
．ｌ５Ｄ０．２２と正常健康者との間には差はほとんど
認められなかった。
．ｌ５Ｄ０．２２と正常健康者との間には差はほとんど
認められなかった。
以上詳述した如く本発明によれば、細胞とへマドポルフ
ィリンとの結合度合を測定する方法が提供されるため、
その測定結果に基づきガンの診断を精度良く行うことが
可能となる。
ィリンとの結合度合を測定する方法が提供されるため、
その測定結果に基づきガンの診断を精度良く行うことが
可能となる。
尚、上述した実施例ではＥＳＲ装置を用いてヘマトポル
フィリンの試料を測定したが、ヘマトポルフィリンを標
識化して検出できる装置であれば他の手段を用いること
も可能であり、例えば予め放射性同位元素によって標識
化したヘマトポルフィリンを用い、第４図における（５
）のステップにおいて放射線検出器を用いてヘマトポル
フィリンの量を測定するようにしても良いことは言うま
でもない。
フィリンの試料を測定したが、ヘマトポルフィリンを標
識化して検出できる装置であれば他の手段を用いること
も可能であり、例えば予め放射性同位元素によって標識
化したヘマトポルフィリンを用い、第４図における（５
）のステップにおいて放射線検出器を用いてヘマトポル
フィリンの量を測定するようにしても良いことは言うま
でもない。
第１図はへマドポルフィリンの構造を示す図、第２図は
へマドポルフィリンのＥＳＲスペクトルの一例を示す図
、第３図はへマドポルフィリン濃度と電子スピン共鳴信
号相対強度どの関係を示す図、第４図は本発明にかかる
方法を実施するための手順を示ず流れ図、第５図は赤面
球系腫瘍細胞に５６２について上記手順で測定した時の
、細胞数とＥＳＲ信号の相対強度との関係を示す図、第
６図は正常健康者のマクロファージによる貧食作用の影
響を調べた結果を示す図、第７図は第４図の手順に従っ
て測定した正常健康者（下）とガン患者（上）のリンパ
球についてのＥＳＲスペクトルを示す図、第８図は正常
健康者、ガン患者、１」Ｂ肝炎患者の各々のリンパ球と
、Ｋ５６２及びＨＧＣ−２５について第４図の手順で測
定した測定結果を示す図である。 ７− 手続補正書 く自利 １．事件の表示 昭和５８年特許願第８３６５１号 ２、発明の名称 ｍ胞とヘマトポルフィリンの結合度合を測定する方法 ３、補正をする者 事件との関係 特許出願人 住所 東京都昭島市中神町１４１８番地（Ｔ Ｅ Ｌ
０４２５ （４３） １１６５）４、補正の対象 明細書全文 ５、補正の内容 （１）明細書全文を別紙の通り補正する。 以 上 訂 正 明 細 書 １、発明の名称 細胞に関Ｊ−る６監別テスト ２、特許請求の範囲 ３、発明の詳細な説明 ［産業上の利用分野］ 本発明は細胞に関する鑑別テストに関し、特に癌の診断
の際に用いて好適な鑑別テストに関づるものである。 ［従来の技術］ 急増しつつある癌の診断法として最近脚光を浴びてきた
ものの１つに光感受性物質とレーザー光線を用いた方法
がある。これは、腫瘍に親和性を右した光感受性物質を
静脈内投与し、長時間かけて腫瘍に蓄積させた後、レー
ザ光線を患部に照射し、例えばレーザ光照射によってヘ
マトポルフィリンが発生する蛍光を観察することににす
、腫瘍を判別覆るものである。 ［発明が解決しようどする問題点］ ところが、この方法は生体内（ｉｎ ｖｉｖｏ ）での
測定であり、蓄積までに３日間程度必要で患者の苦痛は
勿論のこと多くの手間がかかっていた。 ［問題点を解決するための手段］ 本発明者は、被験者から取出した細胞にヘマトポルフィ
リンを添加し、インキコベ−１・後細胞のみを分離し、
分離した細胞に含まれるラジカルの量を電子スピン共鳴
装閥を用いて測定することにより、癌に関する鑑別を行
うことができることを見出した。 従って本発明は、生体外（ｉｎ ｖｉｔｒｏ）において
実施することができ、癌の診断に利用できる鑑別−］− テストを提供するものである。以下、本発明を詳述する
。 ［実施例］ 第１図はへマドポルフィリンの構造式を示づ。 ヘマトポルフィリンは光照射を受けるとπ−カチオン
ラジカルを生成し、このラジカルを電子スピン共鳴装置
（ＥＳＲ装置）で測定することができる。第２図は上記
ラジカルのＥＳＲスペクトルの測定例を示し、ｑ値は２
．００１５である。第３図は、ヘマトポルフィリンのリ
ン酸バッファ溶液約１００μ込に光（紫外＃りを照射し
て測定したＥＳＲスペクトル強度と希釈濃度との関係を
示しており、高濃度領域に飽和現象がみられるものの、
全体としてヘマ［−ポルフィリン濃度とＦＳＲ信丹強度
との間に良好な直線関係が存在することが分る。尚、測
定は、室温では感度が低下するため、−１００℃の低温
で行われている。 第４図は、ＥＳＲ装置を用いて本発明にかかる方法を実
施する際の手順を示す流れ図である。 （１）被検者からＩＩＩ胞（例えばリンパ球）を取出−
３−鼎 ２− し、（２〉これを例えば０．００５モルのヘマトポルフ
ィリン５０μｇ、と混合し、（３）３７℃で約１０分イ
ンキュベートし、（／Ｉ）５分間１５００ ｐｐｍ、で
遠心分離して細胞のみ取り出して生理食塩水にて洗浄し
、（５）洗浄後細胞を３００１ｔ ９゜の生理食塩水に
浮遊させた状態でＥＳＲ装買に導入し、光（紫外線）照
射しつつ定量測定する。 第５図は赤血球系肝癌細胞Ｋ ５６２について上記手順
で測定した時の、細胞数と１ＳＲ信号の相対強度との関
係を示づ゛。ｍＩＩＩ数と相対強度との間には良好な直
線関係があることが分る。 第６図は正常健康者のマクロファージにＪ：る貧食作用
の影響を調べたものである。図中黒丸はリンパ球中にマ
クロファージが混在している場合について第４図の手順
で測定した結果を示し、白丸はマクロファージを完全に
除去した場合である。 マクロファージの存在がヘマトポルフィリンのリンパ球
中への摂取量を高めることが明らかである。 これは、マクロファージによるヘマトポルフィリンの貧
食作用によるものと考えられる。そこで正、
−４− 確を期するためには、測定に際しては、マクロファージ
を例えばシリカゲル等で除去したリンパ球又は細胞を用
いることが望ましい。 第７図は、第４図の手順に従って測定した正常健康者（
下）と癌患者（上）のリンパ球についてのＥＳＲスペク
トルを示す。癌患者のリンパ球が示す強度は、正常者の
リンパ球が示す強度の約２倍となっている。 第８図は、正常健康者７名、癌患者（卵巣癌。 子宮癌及び消化器系癌）１９名、ＨＢ肝炎患者６名の各
々のリンパ球と、前記に５６２及び膵癌セルラインであ
るＨＧＣ−２５について第４図の手順で測定した測定結
果を示す。 癌患者の強度平均値は２．０４．１ＳＤＯ，，８６であ
り、正常健康者の平均値０．７４．ｌ５ＤＯ０２８に比
し極めて大きく、はっきりと区別することが可能である
。 癌の培養細胞であるに５６２及びＨＧＣ−２５も、共に
正常健康者に比し極めて高い値を示した。 一方、非癌性疾患であるＨＢ肝炎患者は、平均値０．７
／ｌ、１３ｒ）０．２２と正常健康者との間には差はほ
と／υど認められなかった。 従って、上記第４図の手順によってリンパ球又は細胞に
含まれるラジカルｍを測定寸れば、その測定結果に基づ
いて被検者が癌であるか否かを正確に判別することが可
能である。 以上詳述した如く本発明によれば、生体外（ｉｎｖｉｔ
ｒｏ）において実施することができるヘマトポルフィリ
ンを用いた細胞に関する鑑別テストが提供されるため、
その測定結果に基づき癌の診断を正確に行うことが可能
となる。 ４、図面の簡単な説明 第１図はへマドポルフィリンの構造を示す図、第２図は
へマドポルフィリンのＦＳＲスペクトルの一例を示す図
、第３図はへマドポルフィリン濃度ど電子スピン共鳴信
号相対強面との関係を示す図、第４図は本発明にかかる
方法を実施するための手順を示す流れ図、第５図は赤血
球系腫瘍細胞に５６２について上記手順で測定した時の
、細胞数とＥＳＲ信号の相対強度との関係を示す図、第
５− ６図は正常健康者のマクロファージによる貧食作用の影
響を調べた結果を示す図、第７図は、第４図の手順に従
って測定した正常健康者（下）と癌患者（上）のリンパ
球についてのＥＳＲスペクトルを示す図、第８図は、正
常健康者、癌患者、１１Ｂ肝炎患者の各々のリンパ球と
、Ｋ２Ｏ２及び１」ＧＣ−２５について第４図の手順で
測定した測定結果を示す図である。 特許出願人 日本電子株式会社 代表者 伊脛 −夫 株式会社 スベシアル レファレンス ラボラトリ−代表者 藤１
）稽治 ６−
へマドポルフィリンのＥＳＲスペクトルの一例を示す図
、第３図はへマドポルフィリン濃度と電子スピン共鳴信
号相対強度どの関係を示す図、第４図は本発明にかかる
方法を実施するための手順を示ず流れ図、第５図は赤面
球系腫瘍細胞に５６２について上記手順で測定した時の
、細胞数とＥＳＲ信号の相対強度との関係を示す図、第
６図は正常健康者のマクロファージによる貧食作用の影
響を調べた結果を示す図、第７図は第４図の手順に従っ
て測定した正常健康者（下）とガン患者（上）のリンパ
球についてのＥＳＲスペクトルを示す図、第８図は正常
健康者、ガン患者、１」Ｂ肝炎患者の各々のリンパ球と
、Ｋ５６２及びＨＧＣ−２５について第４図の手順で測
定した測定結果を示す図である。 ７− 手続補正書 く自利 １．事件の表示 昭和５８年特許願第８３６５１号 ２、発明の名称 ｍ胞とヘマトポルフィリンの結合度合を測定する方法 ３、補正をする者 事件との関係 特許出願人 住所 東京都昭島市中神町１４１８番地（Ｔ Ｅ Ｌ
０４２５ （４３） １１６５）４、補正の対象 明細書全文 ５、補正の内容 （１）明細書全文を別紙の通り補正する。 以 上 訂 正 明 細 書 １、発明の名称 細胞に関Ｊ−る６監別テスト ２、特許請求の範囲 ３、発明の詳細な説明 ［産業上の利用分野］ 本発明は細胞に関する鑑別テストに関し、特に癌の診断
の際に用いて好適な鑑別テストに関づるものである。 ［従来の技術］ 急増しつつある癌の診断法として最近脚光を浴びてきた
ものの１つに光感受性物質とレーザー光線を用いた方法
がある。これは、腫瘍に親和性を右した光感受性物質を
静脈内投与し、長時間かけて腫瘍に蓄積させた後、レー
ザ光線を患部に照射し、例えばレーザ光照射によってヘ
マトポルフィリンが発生する蛍光を観察することににす
、腫瘍を判別覆るものである。 ［発明が解決しようどする問題点］ ところが、この方法は生体内（ｉｎ ｖｉｖｏ ）での
測定であり、蓄積までに３日間程度必要で患者の苦痛は
勿論のこと多くの手間がかかっていた。 ［問題点を解決するための手段］ 本発明者は、被験者から取出した細胞にヘマトポルフィ
リンを添加し、インキコベ−１・後細胞のみを分離し、
分離した細胞に含まれるラジカルの量を電子スピン共鳴
装閥を用いて測定することにより、癌に関する鑑別を行
うことができることを見出した。 従って本発明は、生体外（ｉｎ ｖｉｔｒｏ）において
実施することができ、癌の診断に利用できる鑑別−］− テストを提供するものである。以下、本発明を詳述する
。 ［実施例］ 第１図はへマドポルフィリンの構造式を示づ。 ヘマトポルフィリンは光照射を受けるとπ−カチオン
ラジカルを生成し、このラジカルを電子スピン共鳴装置
（ＥＳＲ装置）で測定することができる。第２図は上記
ラジカルのＥＳＲスペクトルの測定例を示し、ｑ値は２
．００１５である。第３図は、ヘマトポルフィリンのリ
ン酸バッファ溶液約１００μ込に光（紫外＃りを照射し
て測定したＥＳＲスペクトル強度と希釈濃度との関係を
示しており、高濃度領域に飽和現象がみられるものの、
全体としてヘマ［−ポルフィリン濃度とＦＳＲ信丹強度
との間に良好な直線関係が存在することが分る。尚、測
定は、室温では感度が低下するため、−１００℃の低温
で行われている。 第４図は、ＥＳＲ装置を用いて本発明にかかる方法を実
施する際の手順を示す流れ図である。 （１）被検者からＩＩＩ胞（例えばリンパ球）を取出−
３−鼎 ２− し、（２〉これを例えば０．００５モルのヘマトポルフ
ィリン５０μｇ、と混合し、（３）３７℃で約１０分イ
ンキュベートし、（／Ｉ）５分間１５００ ｐｐｍ、で
遠心分離して細胞のみ取り出して生理食塩水にて洗浄し
、（５）洗浄後細胞を３００１ｔ ９゜の生理食塩水に
浮遊させた状態でＥＳＲ装買に導入し、光（紫外線）照
射しつつ定量測定する。 第５図は赤血球系肝癌細胞Ｋ ５６２について上記手順
で測定した時の、細胞数と１ＳＲ信号の相対強度との関
係を示づ゛。ｍＩＩＩ数と相対強度との間には良好な直
線関係があることが分る。 第６図は正常健康者のマクロファージにＪ：る貧食作用
の影響を調べたものである。図中黒丸はリンパ球中にマ
クロファージが混在している場合について第４図の手順
で測定した結果を示し、白丸はマクロファージを完全に
除去した場合である。 マクロファージの存在がヘマトポルフィリンのリンパ球
中への摂取量を高めることが明らかである。 これは、マクロファージによるヘマトポルフィリンの貧
食作用によるものと考えられる。そこで正、
−４− 確を期するためには、測定に際しては、マクロファージ
を例えばシリカゲル等で除去したリンパ球又は細胞を用
いることが望ましい。 第７図は、第４図の手順に従って測定した正常健康者（
下）と癌患者（上）のリンパ球についてのＥＳＲスペク
トルを示す。癌患者のリンパ球が示す強度は、正常者の
リンパ球が示す強度の約２倍となっている。 第８図は、正常健康者７名、癌患者（卵巣癌。 子宮癌及び消化器系癌）１９名、ＨＢ肝炎患者６名の各
々のリンパ球と、前記に５６２及び膵癌セルラインであ
るＨＧＣ−２５について第４図の手順で測定した測定結
果を示す。 癌患者の強度平均値は２．０４．１ＳＤＯ，，８６であ
り、正常健康者の平均値０．７４．ｌ５ＤＯ０２８に比
し極めて大きく、はっきりと区別することが可能である
。 癌の培養細胞であるに５６２及びＨＧＣ−２５も、共に
正常健康者に比し極めて高い値を示した。 一方、非癌性疾患であるＨＢ肝炎患者は、平均値０．７
／ｌ、１３ｒ）０．２２と正常健康者との間には差はほ
と／υど認められなかった。 従って、上記第４図の手順によってリンパ球又は細胞に
含まれるラジカルｍを測定寸れば、その測定結果に基づ
いて被検者が癌であるか否かを正確に判別することが可
能である。 以上詳述した如く本発明によれば、生体外（ｉｎｖｉｔ
ｒｏ）において実施することができるヘマトポルフィリ
ンを用いた細胞に関する鑑別テストが提供されるため、
その測定結果に基づき癌の診断を正確に行うことが可能
となる。 ４、図面の簡単な説明 第１図はへマドポルフィリンの構造を示す図、第２図は
へマドポルフィリンのＦＳＲスペクトルの一例を示す図
、第３図はへマドポルフィリン濃度ど電子スピン共鳴信
号相対強面との関係を示す図、第４図は本発明にかかる
方法を実施するための手順を示す流れ図、第５図は赤血
球系腫瘍細胞に５６２について上記手順で測定した時の
、細胞数とＥＳＲ信号の相対強度との関係を示す図、第
５− ６図は正常健康者のマクロファージによる貧食作用の影
響を調べた結果を示す図、第７図は、第４図の手順に従
って測定した正常健康者（下）と癌患者（上）のリンパ
球についてのＥＳＲスペクトルを示す図、第８図は、正
常健康者、癌患者、１１Ｂ肝炎患者の各々のリンパ球と
、Ｋ２Ｏ２及び１」ＧＣ−２５について第４図の手順で
測定した測定結果を示す図である。 特許出願人 日本電子株式会社 代表者 伊脛 −夫 株式会社 スベシアル レファレンス ラボラトリ−代表者 藤１
）稽治 ６−
Claims (3)
- （１）取出された細胞又は組織にヘマトポルフィリンを
混入し、標識化されているヘマトポルフィリンの量を測
定するようにした細胞とへマドポルフィリンの結合度合
を測定する方法。 - （２）混入後へ７１ヘボルフイリンに光を照射し、光照
射により生成されたラジカルを標識として電子スピン共
鳴により宝船測定するようにした特許請求の範囲第１項
記載の測定方法。 - （３）ヘマトポルフィリンは予め放射性同位体によって
標識化されており、細胞又は組織との混入後放射線検出
手段により定量測定するようにした特許請求の範囲第１
項記載の測定方法。
Priority Applications (5)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP8365183A JPS59208460A (ja) | 1983-05-13 | 1983-05-13 | 癌罹病に由来する細胞からの高ラジカルの発生を検知する方法 |
| US06/608,996 US4696905A (en) | 1983-05-13 | 1984-05-10 | Method for diagnosing cancer using ESR |
| EP84105337A EP0125651B1 (en) | 1983-05-13 | 1984-05-11 | A method for detecting cancerous cells |
| DE198484105337T DE125651T1 (de) | 1983-05-13 | 1984-05-11 | Verfahren zum nachweis von krebszellen. |
| DE8484105337T DE3483493D1 (de) | 1983-05-13 | 1984-05-11 | Verfahren zum nachweis von krebszellen. |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP8365183A JPS59208460A (ja) | 1983-05-13 | 1983-05-13 | 癌罹病に由来する細胞からの高ラジカルの発生を検知する方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS59208460A true JPS59208460A (ja) | 1984-11-26 |
| JPH0213270B2 JPH0213270B2 (ja) | 1990-04-03 |
Family
ID=13808350
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP8365183A Granted JPS59208460A (ja) | 1983-05-13 | 1983-05-13 | 癌罹病に由来する細胞からの高ラジカルの発生を検知する方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS59208460A (ja) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS6025452A (ja) * | 1983-07-23 | 1985-02-08 | Supeshiaru Refuarensu Lab:Kk | 罹癌患者由来のリンパ球の測定方法 |
| JPS60135765A (ja) * | 1983-12-23 | 1985-07-19 | Jeol Ltd | 癌罹病由来のリンパ球の測定方法 |
| JPS62182663A (ja) * | 1985-10-23 | 1987-08-11 | Nippon Mejifuijitsukusu Kk | 放射性金属標識癌診断剤 |
-
1983
- 1983-05-13 JP JP8365183A patent/JPS59208460A/ja active Granted
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| BIO CHEM BIOPHYS RES COMMUN=1977 * |
| PHOTOBIO CHEM PHOTOBIO PHRS=1982 * |
| PHOTOBIO CHEM PHOTOBIO PHRS=1983 * |
Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS6025452A (ja) * | 1983-07-23 | 1985-02-08 | Supeshiaru Refuarensu Lab:Kk | 罹癌患者由来のリンパ球の測定方法 |
| JPH0249663B2 (ja) * | 1983-07-23 | 1990-10-30 | Esu Aaru Eru Kk | |
| JPS60135765A (ja) * | 1983-12-23 | 1985-07-19 | Jeol Ltd | 癌罹病由来のリンパ球の測定方法 |
| JPH035551B2 (ja) * | 1983-12-23 | 1991-01-25 | Nippon Denshi Kk | |
| JPS62182663A (ja) * | 1985-10-23 | 1987-08-11 | Nippon Mejifuijitsukusu Kk | 放射性金属標識癌診断剤 |
| JPH0424661B2 (ja) * | 1985-10-23 | 1992-04-27 | Nippon Mejifuijitsukusu Kk |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0213270B2 (ja) | 1990-04-03 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Grochowski et al. | Analysis of trace elements in human brain: its aim, methods, and concentration levels | |
| RU2132635C1 (ru) | Способ диагностики онкологических заболеваний и устройство для его осуществления | |
| US9442125B2 (en) | Method and a device for characterizing the coagulation or sedimentation dynamics of a fluid such as blood or blood plasma | |
| JPS62103571A (ja) | 新生細胞の発生判定方法とその装置 | |
| JPH0241708B2 (ja) | ||
| IE50002B1 (en) | Composition suitable for use in testing biological tissues and/or liquids which contain biological matter,and the method of use | |
| US20100099195A1 (en) | Zinc-Based Screening Test and Kit for Early Diagnosis of Prostate Cancer | |
| JP2012529630A (ja) | 診断方法 | |
| US5252488A (en) | Circular dichroism and spectrophotometric absorption detection methods and apparatus | |
| BR102016018150A2 (pt) | Dispositivo para detecção do biomarcador adam10 para o diagnóstico da doença de alzheimer, método de aplicação do referido dispositivo, uso do dito dispositivo para diagnóstico da doença de alzheimer, método de aplicação de elisa para diagnóstico da doença de alzheimer | |
| JPS59208460A (ja) | 癌罹病に由来する細胞からの高ラジカルの発生を検知する方法 | |
| EP0272291B1 (en) | Method for measuring polarized fluorescence emissions | |
| EP0125651B1 (en) | A method for detecting cancerous cells | |
| Kramer et al. | Accuracy of cord blood screening for sickle hemoglobinopathies: three-to five-year follow-up | |
| Kremer et al. | Simultaneous fluorescence measurement of calcium and membrane potential responses to endothelin | |
| AU590412B2 (en) | Separation and method of use of density specific blood cells | |
| Hashimoto et al. | Measurement of cytoplasmic viscosity by fluorescence polarization in phytohemagglutinin-stimulated and unstimulated human peripheral lymphocytes. | |
| JPS60135765A (ja) | 癌罹病由来のリンパ球の測定方法 | |
| US4575486A (en) | Process for differentiating the origin of particles in urine | |
| JPH0245151B2 (ja) | Ganribyonisurusaibokaranokorajikarunohatsuseiokenchisuruhoho | |
| RU2137420C1 (ru) | Способ выявления "группы опухолевого риска" и скрининга ранних стадий опухолевых заболеваний | |
| RU2226983C1 (ru) | Способ диагностики синдромов детского церебрального паралича | |
| de Oliveira et al. | Characterization of the redox status of cancer patients through the d-ROMs and BAP test and correlation of these parameters with blood variables | |
| Zhou et al. | Optical spectroscopic analysis of cerebrospinal fluid of human brain tumor using visible resonance Raman spectroscopy | |
| RU2085946C1 (ru) | Способ диагностики онкологического заболевания |