JPS5852640B2 - ペルオキシダ−ゼ活性の測定方法 - Google Patents
ペルオキシダ−ゼ活性の測定方法Info
- Publication number
- JPS5852640B2 JPS5852640B2 JP6651877A JP6651877A JPS5852640B2 JP S5852640 B2 JPS5852640 B2 JP S5852640B2 JP 6651877 A JP6651877 A JP 6651877A JP 6651877 A JP6651877 A JP 6651877A JP S5852640 B2 JPS5852640 B2 JP S5852640B2
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- JP
- Japan
- Prior art keywords
- enzyme
- acid
- activity
- peroxidase
- hrp
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- Expired
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Description
【発明の詳細な説明】
本発明は蛍光分析法によるペルオキシダーゼ活性の新規
な高感度測定方法に関する。
な高感度測定方法に関する。
本発明に用いられるペルオキシダーゼとしては例えば植
物及び動物組織由来の各種のペルオキシダーゼ、牛乳に
含まれるラクトペルオキシダーゼ（Ｌａｃｔｏｐｅｒ。
物及び動物組織由来の各種のペルオキシダーゼ、牛乳に
含まれるラクトペルオキシダーゼ（Ｌａｃｔｏｐｅｒ。
）（ｉｄａｓｅ ）、酵母菌に含まれるチトクロームＣ
ペルオキシダーゼ（Ｃｙｔｏｃｈｒｏｒｎｅ Ｃｐｅｒ
ｏｘｉｄａｓｅ）、及び白血球や骨髄のエオシン好性細
胞に含まれるウェルドペルオキシダーゼ（Ｖｅｒｄｏｐ
ｅｒｏｘｉｄａｓｅ ）等が対象となるが就中西洋ワサ
ビ（Ｈｏｒｓｅｒａｄｉｓｈ ）由来のペルオキシダー
ゼ（以下ＨＲＰと略す）が最も一般的であり且つ最も代
表的なものである。
ペルオキシダーゼ（Ｃｙｔｏｃｈｒｏｒｎｅ Ｃｐｅｒ
ｏｘｉｄａｓｅ）、及び白血球や骨髄のエオシン好性細
胞に含まれるウェルドペルオキシダーゼ（Ｖｅｒｄｏｐ
ｅｒｏｘｉｄａｓｅ ）等が対象となるが就中西洋ワサ
ビ（Ｈｏｒｓｅｒａｄｉｓｈ ）由来のペルオキシダー
ゼ（以下ＨＲＰと略す）が最も一般的であり且つ最も代
表的なものである。
ペルオキシダーゼは過酸化水素（Ｈ２Ｏ２）共存下で種
々の基質（水素供与体）の酸化反応を触媒する。
々の基質（水素供与体）の酸化反応を触媒する。
ＨＲＰは最も古くからの抽出分離及び精製化が進み、Ｈ
２Ｏ２の直接定量を目的とした生化学的分析法や糖類、
アミノ酸、有機塩基、コレステロール等の測定対象物か
らＨ２Ｏ２の生成する酸化酵素反応とペルオキシダーゼ
によるＨ２Ｏ２の定量との組合せによって測定対象物の
微量定量を目指すなど臨床化学分野において広く使用さ
れている。
２Ｏ２の直接定量を目的とした生化学的分析法や糖類、
アミノ酸、有機塩基、コレステロール等の測定対象物か
らＨ２Ｏ２の生成する酸化酵素反応とペルオキシダーゼ
によるＨ２Ｏ２の定量との組合せによって測定対象物の
微量定量を目指すなど臨床化学分野において広く使用さ
れている。
したがってＨＲＰ活性が高感度に測定出来ることにより
ペルオキシダーゼ自身の高感度検出は勿論のこと、この
反応に関与するＨ２Ｏ２、基質、必要によっては酵素阻
害剤等の微量測定、更にはＨ２Ｏ２の微量測定に基ずく
上記の目的測定対象物の超微量測定も可能になって殊に
臨床診断上の意義は極めて犬である。
ペルオキシダーゼ自身の高感度検出は勿論のこと、この
反応に関与するＨ２Ｏ２、基質、必要によっては酵素阻
害剤等の微量測定、更にはＨ２Ｏ２の微量測定に基ずく
上記の目的測定対象物の超微量測定も可能になって殊に
臨床診断上の意義は極めて犬である。
また一方、生体内微量成分の微量測定法の一つとして近
年急速に発展して来た酵母免疫定量法、或いは免疫組織
化学的手法による抗原検出のための酵素抗体法等におい
ては抗原や抗体の標識酵素としてＨＲＰを活用する事例
が非常に多い。
年急速に発展して来た酵母免疫定量法、或いは免疫組織
化学的手法による抗原検出のための酵素抗体法等におい
ては抗原や抗体の標識酵素としてＨＲＰを活用する事例
が非常に多い。
前者の酵素免疫定量法においては、その測定システム上
からも明らかな如く標識酵素の活性が高感度に測定出来
ることに基いてその標識酵素量の微量測定が可能になり
、その結果として測定対象物となる各種の抗原及び抗体
の超微量の定量化が達成される。
からも明らかな如く標識酵素の活性が高感度に測定出来
ることに基いてその標識酵素量の微量測定が可能になり
、その結果として測定対象物となる各種の抗原及び抗体
の超微量の定量化が達成される。
この論理はＨＲＰを標識酵素とする酵素抗体法について
も通用し、微細組織中の表在抗原や内部抗原の局在性を
より微量の試料についてより詳細に追跡する場合にも役
立つ。
も通用し、微細組織中の表在抗原や内部抗原の局在性を
より微量の試料についてより詳細に追跡する場合にも役
立つ。
このようにペルオキシダーゼ活性の高感度測定方法を確
立することは唯単に微量なペルオキシダーゼ酵素量の測
定が容易になるばかりでなく、被酸化性の基質或いはＨ
２Ｏ２の微量測定更には上記の如く、生体微量成分の生
化学的または酵素免疫化学的測定分野或いは免疫組織化
学分野等への広範囲な応用が可能となる。
立することは唯単に微量なペルオキシダーゼ酵素量の測
定が容易になるばかりでなく、被酸化性の基質或いはＨ
２Ｏ２の微量測定更には上記の如く、生体微量成分の生
化学的または酵素免疫化学的測定分野或いは免疫組織化
学分野等への広範囲な応用が可能となる。
ＨＲＰをはじめとする各種ペルオキシダーゼの活性の測
定方法としては、従来は専ら可視部吸光法が採用されて
来たが、一般的な他の吸光法における如くその測定感度
は相当に低い欠点があった。
定方法としては、従来は専ら可視部吸光法が採用されて
来たが、一般的な他の吸光法における如くその測定感度
は相当に低い欠点があった。
−力先にギルバウト等はホモバニリン酸を基質とする新
規な蛍光分析法を報告した（ Ｇｕｉｌｂａｕｌｔ。
規な蛍光分析法を報告した（ Ｇｕｉｌｂａｕｌｔ。
Ｇ、 、 Ｋｒａｍｅｒ、 Ｄ、Ｎ、、 ａｎｄ Ｈａ
ｃｋｌｅｙ Ｅ、 ；Ａｎａｌ。
ｃｋｌｅｙ Ｅ、 ；Ａｎａｌ。
Ｃｈｅｍ、３９（Ｎｏ、２）２７１（１９６７）、Ｇｕ
−ｉｌｂａｕＨ，Ｇ、、 Ｂｒｉｇｎａｃ、 Ｐ、 ａ
ｎｄ Ｚｉｍｍｅｒ Ｍ ；Ａｎａｌ Ｃｈｅｍ、、４
０（Ｎｏ、１）１９０−１９６（１９６８） 、 Ｇｕ
ｉｌｂａｕｌｔ、 Ｇ、、 Ｂｒｉｇｎａｃ、Ｐ’ａｎ
ｄＪｕｎｅａｕ Ｍ、； Ａｎａｌ、 Ｃｈｅｍ、 、
４０ （、Ｎｏ、 ８． ）１２５６−１２６３（１
９６８）］。
−ｉｌｂａｕＨ，Ｇ、、 Ｂｒｉｇｎａｃ、 Ｐ、 ａ
ｎｄ Ｚｉｍｍｅｒ Ｍ ；Ａｎａｌ Ｃｈｅｍ、、４
０（Ｎｏ、１）１９０−１９６（１９６８） 、 Ｇｕ
ｉｌｂａｕｌｔ、 Ｇ、、 Ｂｒｉｇｎａｃ、Ｐ’ａｎ
ｄＪｕｎｅａｕ Ｍ、； Ａｎａｌ、 Ｃｈｅｍ、 、
４０ （、Ｎｏ、 ８． ）１２５６−１２６３（１
９６８）］。
この蛍光分析法は中性乃至弱アルカリ性の液性下でＨ２
０□の共存によって非蛍光性の安定な基質（ホモバニリ
ン酸）を高度の蛍光性物質（ホモバニリン酸の２量体）
に変換した後その蛍光度を測定することによってペルオ
キシダーゼ活性を求めるもので、上記可視部吸光法採用
時に比較して全般的に測定感度は高まるものの、ペルオ
キシダーゼを使用する多数の事例において未だ充分な現
状にあった。
０□の共存によって非蛍光性の安定な基質（ホモバニリ
ン酸）を高度の蛍光性物質（ホモバニリン酸の２量体）
に変換した後その蛍光度を測定することによってペルオ
キシダーゼ活性を求めるもので、上記可視部吸光法採用
時に比較して全般的に測定感度は高まるものの、ペルオ
キシダーゼを使用する多数の事例において未だ充分な現
状にあった。
こうした状況の中で本発明者等は前記の欠点を改良すべ
く鋭意研究を重ねた結果、基質に対するペルオキシダー
ゼの反応を酸性下、特に酸性下の特定ｐＨ領域で行った
ところ測定感度、測定の精度、再現性の極めて高いペル
オキシダーゼ活性の測定ができることを見出して本発明
を完成するにいたった。
く鋭意研究を重ねた結果、基質に対するペルオキシダー
ゼの反応を酸性下、特に酸性下の特定ｐＨ領域で行った
ところ測定感度、測定の精度、再現性の極めて高いペル
オキシダーゼ活性の測定ができることを見出して本発明
を完成するにいたった。
即ち、酵素作用と生成物の蛍光度測定を同−ｐＨ下で行
わしめるギルバウド等の手法とは逆に、酵素反応をアル
カリ性下ではなく、酸性下殊にｐＨ３，５〜５．５下で
行った後生成した蛍光性物質の蛍光度をアルカリ性下で
測定すること、更にこの際オキシカルボン酸を素材とし
て調製された緩衝液を用いて酵素反応を行うことによっ
て前記ギルバラト等の方法と比較して蛍光強度がはるか
に上昇することを見出したものである。
わしめるギルバウド等の手法とは逆に、酵素反応をアル
カリ性下ではなく、酸性下殊にｐＨ３，５〜５．５下で
行った後生成した蛍光性物質の蛍光度をアルカリ性下で
測定すること、更にこの際オキシカルボン酸を素材とし
て調製された緩衝液を用いて酵素反応を行うことによっ
て前記ギルバラト等の方法と比較して蛍光強度がはるか
に上昇することを見出したものである。
本発明は上記測定方法において酵素反応を酸性下におい
て行うことに特徴を有するが、酸性下のｐＨ領域の中で
も特に高感度に測定できるｐＨ領域がある。
て行うことに特徴を有するが、酸性下のｐＨ領域の中で
も特に高感度に測定できるｐＨ領域がある。
従って、その領域を特に選択して酵素反応を行うのが好
ましい。
ましい。
その特定領域は使用する酸によってｐＨ３，５〜５．５
の間で多少変化するが、この特定領域を見つけるには当
業者にとって特に困難はなく、例えば酵素の活性を測定
する前に使用する緩衝液のｐＨを多少変化せしめて酵素
反応を予備に行いデータを取ってみれば簡単に知ること
ができる。
の間で多少変化するが、この特定領域を見つけるには当
業者にとって特に困難はなく、例えば酵素の活性を測定
する前に使用する緩衝液のｐＨを多少変化せしめて酵素
反応を予備に行いデータを取ってみれば簡単に知ること
ができる。
さらに、本発明者等は上記酸としてオキシカルボン酸を
選択し、これを素材として調製した緩衝液中で上記酵素
反応を行うと、酵素活性の検出感度が著しく向上するこ
とも見出した。
選択し、これを素材として調製した緩衝液中で上記酵素
反応を行うと、酵素活性の検出感度が著しく向上するこ
とも見出した。
以下、本発明の骨子をなす前記２種の要因について実験
例により詳細に説明する。
例により詳細に説明する。
実験例
下記に示した各種緩衝液（ｐＨ３，０〜８．３）５００
μＡ 、 ）ＴＲＰ （Ｔｙｐｅ ＶＩ 、 ＲＺ ：
約２．７５、活性：約２６０ Ｐｕｒｐｕｒｏｇａｌｌ
ｉｎ Ｕｎｉｔｓ ／ ｍｇ。
μＡ 、 ）ＴＲＰ （Ｔｙｐｅ ＶＩ 、 ＲＺ ：
約２．７５、活性：約２６０ Ｐｕｒｐｕｒｏｇａｌｌ
ｉｎ Ｕｎｉｔｓ ／ ｍｇ。
Ｓｉｇｍａ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏ、米国より買入）
の４．５μ９ ／ ｍｌ液１０μ、ｇ、０．２５係ホモ
バニリン酸水溶液５０μ、ｆｆ、０．０５係Ｈ２Ｏ２液
５０μｔを含む反応混合液を３７．５℃でゆっくり振盪
し乍ら３０分間インキュベートした後、１．２５１１Ｋ
ＣＮ液５０μｔを添加して反応を停止させ更に０．ｌＮ
−ＮａＯＨ液２．５ ｍｌを添加してから日立製分光蛍
光光度計２０４型を用いて蛍光強度を測定しく励起波長
３１５ ｎｍ１蛍光波長４２５ｎｍ）で表１の結果を得
た。
の４．５μ９ ／ ｍｌ液１０μ、ｇ、０．２５係ホモ
バニリン酸水溶液５０μ、ｆｆ、０．０５係Ｈ２Ｏ２液
５０μｔを含む反応混合液を３７．５℃でゆっくり振盪
し乍ら３０分間インキュベートした後、１．２５１１Ｋ
ＣＮ液５０μｔを添加して反応を停止させ更に０．ｌＮ
−ＮａＯＨ液２．５ ｍｌを添加してから日立製分光蛍
光光度計２０４型を用いて蛍光強度を測定しく励起波長
３１５ ｎｍ１蛍光波長４２５ｎｍ）で表１の結果を得
た。
表１の結果から明らかな如く、酵素作用ｐＨをオ唄むね
３．５〜５．５の間に設定することによって酵素活性の
検出度は約１０〜５０倍上昇し、またこの酸性ｐＨ領域
設定に当ってクエン酸、酒石酸、乳酸等のオキシカルボ
ン酸を素材として調製された緩衝液を用いることにより
従来公知の無機酸（リン酸）系や他の脂肪族カルボン酸
（コハク酸、酢酸）系、芳香族カルボン酸（重フタル酸
）系使用時に比較して酵素活性の検出感度は更に向上し
た。
３．５〜５．５の間に設定することによって酵素活性の
検出度は約１０〜５０倍上昇し、またこの酸性ｐＨ領域
設定に当ってクエン酸、酒石酸、乳酸等のオキシカルボ
ン酸を素材として調製された緩衝液を用いることにより
従来公知の無機酸（リン酸）系や他の脂肪族カルボン酸
（コハク酸、酢酸）系、芳香族カルボン酸（重フタル酸
）系使用時に比較して酵素活性の検出感度は更に向上し
た。
この際の緩衝液は上記遊離型有機酸と有機酸のアルカリ
塩との適宜組合せによって調製することも出来るが有機
酸のアリカリ塩の代りに無機性のアルカリを用いてもよ
い。
塩との適宜組合せによって調製することも出来るが有機
酸のアリカリ塩の代りに無機性のアルカリを用いてもよ
い。
また異種の有機酸を相互に組合せることも可能である。
酵素作用のための最適ｐＨは緩衝液の調製に用いられた
各種酸類の種類如何によって若干異り、オキシカルボン
酸使用時ではｐＨ４゜０１ その他の脂肪族カルボン
酸ではｐＨ４，０〜４゜５、芳香族カルボン酸及び無機
酸ではｐＨ４，５〜５．０に設定することが望ましい。
各種酸類の種類如何によって若干異り、オキシカルボン
酸使用時ではｐＨ４゜０１ その他の脂肪族カルボン
酸ではｐＨ４，０〜４゜５、芳香族カルボン酸及び無機
酸ではｐＨ４，５〜５．０に設定することが望ましい。
このような本発明を構成する前記２種要因によるペルオ
キシダーゼ活性検出の高感度化の現象は酵素のＲＺ値、
補欠分子族ヘム蛋白云々の如何を問わず各種のペルオキ
シダーゼ及びその各アイソザイム（ｉ ｓｏｊｙｍｅ
）、またｎａｔｉｖｅなペルオキシダーゼそのものの他
、人工的に化学修飾されたもの、更には各種の抗原や抗
体に標識されたペルオキシダーゼについても、他方ホモ
バニリン酸以外のｐ−オキシ芳香族カルボン酸等種々の
基質を用いた場合についてもいずれも同様に認められる
。
キシダーゼ活性検出の高感度化の現象は酵素のＲＺ値、
補欠分子族ヘム蛋白云々の如何を問わず各種のペルオキ
シダーゼ及びその各アイソザイム（ｉ ｓｏｊｙｍｅ
）、またｎａｔｉｖｅなペルオキシダーゼそのものの他
、人工的に化学修飾されたもの、更には各種の抗原や抗
体に標識されたペルオキシダーゼについても、他方ホモ
バニリン酸以外のｐ−オキシ芳香族カルボン酸等種々の
基質を用いた場合についてもいずれも同様に認められる
。
また実際的には蛍光強度の測定時において通常使用され
る１０ｍｍセルの代りにミクロセルを用いる等信の測定
操作上の工夫と組合せれば、更に数分の１量の試料につ
いても測定可能となる。
る１０ｍｍセルの代りにミクロセルを用いる等信の測定
操作上の工夫と組合せれば、更に数分の１量の試料につ
いても測定可能となる。
したがって本発明を実施することにより特別な高性能高
感度を有する蛍光分析計は不要となって通常の臨床検査
室等に設置されている蛍光分析計を用いるだけでペルオ
キシダーゼ活性更には各種生体微量成分等がより簡単な
操作で且つ短時間内に精度及び感度よく測定出来て、本
発明の臨床上における意義は極めて犬である。
感度を有する蛍光分析計は不要となって通常の臨床検査
室等に設置されている蛍光分析計を用いるだけでペルオ
キシダーゼ活性更には各種生体微量成分等がより簡単な
操作で且つ短時間内に精度及び感度よく測定出来て、本
発明の臨床上における意義は極めて犬である。
次に実施例により本発明を更に具体的に説明する。
但し以下に示す測定事例は本発明実施の単なる一例にす
ぎず、先述した如き本発明の適用範囲を何ら限定するも
のではない。
ぎず、先述した如き本発明の適用範囲を何ら限定するも
のではない。
実施例 Ｉ
ＨＲＰ量の測定
０．１Ｍ−クエン酸−Ｎ ａ ２ Ｂ４０７緩衝液（ｐ
Ｈ４，０）または０．０５Ｍ ＮａＨ２ＰＯ４ＮａＯ
Ｈ緩衝液（ｐＨ７，０）５００μ、ｌ 、 ＨＲＰ （
Ｂａ５ｉｃ Ｉｓｏｅｎｚｙｍｅ Ｇｒａｄｅ １−Ｃ
、ＲＺ ： ３．４、活性：３１０Ｐｕｒｐｕｒｏｇａ
ｌｌｉｎ Ｕｎｉｔｓ ７ｍ９東洋紡績■より買入）の
１×１０〜５×１０ ユニット／ａ液１０μｔ。
Ｈ４，０）または０．０５Ｍ ＮａＨ２ＰＯ４ＮａＯ
Ｈ緩衝液（ｐＨ７，０）５００μ、ｌ 、 ＨＲＰ （
Ｂａ５ｉｃ Ｉｓｏｅｎｚｙｍｅ Ｇｒａｄｅ １−Ｃ
、ＲＺ ： ３．４、活性：３１０Ｐｕｒｐｕｒｏｇａ
ｌｌｉｎ Ｕｎｉｔｓ ７ｍ９東洋紡績■より買入）の
１×１０〜５×１０ ユニット／ａ液１０μｔ。
０．２５％ホモバニリン酸水溶液５０μｔ、 ０．０５
％Ｈ２Ｏ２液５０μｔを含む酵素反応混合液を３７．６
℃下３５分間インキュベーションしてから実験例１の如
く所定量のＫＣＮ及びＮａＯＨ液を添加後、１０關セル
を用いて蛍光度を測定し下表２の値を得た。
％Ｈ２Ｏ２液５０μｔを含む酵素反応混合液を３７．６
℃下３５分間インキュベーションしてから実験例１の如
く所定量のＫＣＮ及びＮａＯＨ液を添加後、１０關セル
を用いて蛍光度を測定し下表２の値を得た。
この際、作用ｐＨ４，０下ＨＲＰ量１×１０−３ユニッ
ト区の蛍光度を１００として他の各区の活性を相対値で
示した。
ト区の蛍光度を１００として他の各区の活性を相対値で
示した。
即ち作用ｐＨ７，０下では１×１０ ユニットオーダー
以下のＨＲＰ活性は全く測定不可能なのに対し、本発明
に基く作用ｐＨ４，０下では１０ ユニットオーダーの
極めて微量のＨＲＰ（重量換算では１６０９ｇに相当）
迄も測定出来た。
以下のＨＲＰ活性は全く測定不可能なのに対し、本発明
に基く作用ｐＨ４，０下では１０ ユニットオーダーの
極めて微量のＨＲＰ（重量換算では１６０９ｇに相当）
迄も測定出来た。
実施例 ２
Ｈ２Ｏ２の定量
０．１Ｍ−クエン酸−Ｎ ａ２ Ｂ４０７緩衝液（ｐＨ
４，０）または０．０５ Ｍ −Ｎ ａＨ２ＰＯ４−Ｎ
ａ ＯＨ緩衝液（ｐＨ７，０）の５００μ７ 、 ＨＲ
Ｐ （実験例１と同じ）の１×１０ ユニット／ｙｒｔ
ｌ液１０μｔ、 ０．２５係ホモバニリン酸液５０μを
及び下記量のＨ２Ｏ２を含む検液５０μｔから戒る酵素
反応混合液について実施例１と同様な操作を施し下表３
の値を得た。
４，０）または０．０５ Ｍ −Ｎ ａＨ２ＰＯ４−Ｎ
ａ ＯＨ緩衝液（ｐＨ７，０）の５００μ７ 、 ＨＲ
Ｐ （実験例１と同じ）の１×１０ ユニット／ｙｒｔ
ｌ液１０μｔ、 ０．２５係ホモバニリン酸液５０μを
及び下記量のＨ２Ｏ２を含む検液５０μｔから戒る酵素
反応混合液について実施例１と同様な操作を施し下表３
の値を得た。
表から明らかな如く、従来のＨ２Ｏ２使用量を１０〜２
０分の１量に減少させることによってＨＲＰ活性の検出
感度は約３０％上昇した。
０分の１量に減少させることによってＨＲＰ活性の検出
感度は約３０％上昇した。
更に本発明の実施によって１０ ｇ（ｎｇ）オーダー
のＨ２Ｏ２量の定量が可能となって公知の測定法のいず
れと比較してもはるかに優れた測定感度を示した。
のＨ２Ｏ２量の定量が可能となって公知の測定法のいず
れと比較してもはるかに優れた測定感度を示した。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １ 蛍光分析法によるペルオキシダーゼ活性の測定にお
いて酸性下で酵素反応を行わしめることを特徴とするペ
ルオキシダーゼ活性の測定方法。 ２ 酵素反応をオキシカルボン酸を素材として調製した
緩衝液中で行うことを特徴とする特許請求範囲第１項記
載の方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP6651877A JPS5852640B2 (ja) | 1977-06-06 | 1977-06-06 | ペルオキシダ−ゼ活性の測定方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP6651877A JPS5852640B2 (ja) | 1977-06-06 | 1977-06-06 | ペルオキシダ−ゼ活性の測定方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS541693A JPS541693A (en) | 1979-01-08 |
| JPS5852640B2 true JPS5852640B2 (ja) | 1983-11-24 |
Family
ID=13318151
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP6651877A Expired JPS5852640B2 (ja) | 1977-06-06 | 1977-06-06 | ペルオキシダ−ゼ活性の測定方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS5852640B2 (ja) |
Families Citing this family (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| IT1164389B (it) * | 1983-08-05 | 1987-04-08 | Zambon Spa | Derivati n-sostituiti dell'1-(4'-alchiltiofenil)-2-ammino-1,3-propandiolo |
| US4965193A (en) * | 1984-08-06 | 1990-10-23 | Washington Research Foundation | Detection of microbial beta-lactamase |
| GB201714736D0 (en) | 2017-09-13 | 2017-10-25 | Atrogi Ab | New compounds and uses |
| GB201714734D0 (en) | 2017-09-13 | 2017-10-25 | Atrogi Ab | New compounds and uses |
-
1977
- 1977-06-06 JP JP6651877A patent/JPS5852640B2/ja not_active Expired
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS541693A (en) | 1979-01-08 |
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