JPS5852258A - ジペプチドエステルとアミノ酸エステルとの付加化合物の回収法 - Google Patents
ジペプチドエステルとアミノ酸エステルとの付加化合物の回収法Info
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- JPS5852258A JPS5852258A JP14797481A JP14797481A JPS5852258A JP S5852258 A JPS5852258 A JP S5852258A JP 14797481 A JP14797481 A JP 14797481A JP 14797481 A JP14797481 A JP 14797481A JP S5852258 A JPS5852258 A JP S5852258A
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- adduct
- amino acid
- phase
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
テルとの付加化合物の回収法に関するものであ如、更に
詳しくは、この化合物を含む水性懸濁液からこの付加化
合物を有機溶媒のスラリーとして分離回収する方法に関
するものである。
詳しくは、この化合物を含む水性懸濁液からこの付加化
合物を有機溶媒のスラリーとして分離回収する方法に関
するものである。
ジペプチドエステル、例えばＮ−ペンジルオキシカルボ
ニル−α−Ｌ−アルパルチルーＬーフェニル゛アラニ２
低級アルキルエステルとアミノ酸エステル、ＰＩｔハフ
ェニルアラニン低級アルキルエステル、やバリン低級ア
ルキルエス，チルなどとの付加化付物は、甘味剤である
α−Ｌ−アスノくルチルーＬー７ェニルアラニン低級ア
ルキルエステル物である。
ニル−α−Ｌ−アルパルチルーＬーフェニル゛アラニ２
低級アルキルエステルとアミノ酸エステル、ＰＩｔハフ
ェニルアラニン低級アルキルエステル、やバリン低級ア
ルキルエス，チルなどとの付加化付物は、甘味剤である
α−Ｌ−アスノくルチルーＬー７ェニルアラニン低級ア
ルキルエステル物である。
この様な付加化合物は、Ｎ一保蔭アミノジカルボン醸と
アミノ酸エステルを水性媒体中、蛋白分解１［Ｅの存在
下で反応させることにより（特開昭５５−９２７２９，
特開呻５ ４ − ９ ２ ２． ６ ）、あるいはジ
ペプチドエステルとアミノ酸エステルとを水などの溶媒
中で反応させること（特開昭５５−１９２！５４，特開
昭５５−７５６４４）などにより得られる。これらの反
応では付加化合物は溶媒中へ同相の形で析出する。従っ
てこの様な溶媒、特に水性媒体からこの付加化合物をい
かに効率よ回 く爵収するかは極めて重要な課題である、。
アミノ酸エステルを水性媒体中、蛋白分解１［Ｅの存在
下で反応させることにより（特開昭５５−９２７２９，
特開呻５ ４ − ９ ２ ２． ６ ）、あるいはジ
ペプチドエステルとアミノ酸エステルとを水などの溶媒
中で反応させること（特開昭５５−１９２！５４，特開
昭５５−７５６４４）などにより得られる。これらの反
応では付加化合物は溶媒中へ同相の形で析出する。従っ
てこの様な溶媒、特に水性媒体からこの付加化合物をい
かに効率よ回 く爵収するかは極めて重要な課題である、。
上述した公知の方法では、この回収をＶ過で行なってい
る。また、水と二相を形成することのできる有機溶媒を
反応終了液に加えて付加化合物を溶解抽出し、有機溶媒
中の均一液として分離することも知られている（特開＃
Ｂ５４−１１２９５）しかしながら、抽出を効率よく行
なうためには水と二相形成ができると同時に、付加化合
物に対する溶解力の大きい有機溶媒を使用する必要があ
るが、この様な有機溶媒は、酢酸エチル郷のエステル類
やクロロホルム，二塩化エタン等のハロゲン化アルキル
類等比較的限られている。ところが、エステル類につい
ては、加水分解の′問題があり、ｔｉハロゲン化アルキ
ル類については、近年発ガン性が問題になっている折か
ら、食品等の原料となる付加化合物の処理工程において
は、極力その使用を避けることが望ましい。
る。また、水と二相を形成することのできる有機溶媒を
反応終了液に加えて付加化合物を溶解抽出し、有機溶媒
中の均一液として分離することも知られている（特開＃
Ｂ５４−１１２９５）しかしながら、抽出を効率よく行
なうためには水と二相形成ができると同時に、付加化合
物に対する溶解力の大きい有機溶媒を使用する必要があ
るが、この様な有機溶媒は、酢酸エチル郷のエステル類
やクロロホルム，二塩化エタン等のハロゲン化アルキル
類等比較的限られている。ところが、エステル類につい
ては、加水分解の′問題があり、ｔｉハロゲン化アルキ
ル類については、近年発ガン性が問題になっている折か
ら、食品等の原料となる付加化合物の処理工程において
は、極力その使用を避けることが望ましい。
一方、付加化合物に対する溶解力が小さい有機溶媒の場
合には、大量に使用することが必要で経済上も問題があ
る。
合には、大量に使用することが必要で経済上も問題があ
る。
本発明者らは、この様な問題点を解決するため付加化合
物の分離法について工業的に更に有利な方法を鋭意検討
した結果、意外にも水相と有機溶媒相の二相系において
付加化合物の結晶が固相状態で有機溶媒相中に取シ込ま
れ、未反応原料、酵素尋を含む水相から効果的に分離で
きることを見い出し本発明を完成した。
物の分離法について工業的に更に有利な方法を鋭意検討
した結果、意外にも水相と有機溶媒相の二相系において
付加化合物の結晶が固相状態で有機溶媒相中に取シ込ま
れ、未反応原料、酵素尋を含む水相から効果的に分離で
きることを見い出し本発明を完成した。
即ち本発明は、一般式
％式％
で表わされるジペプチド左ステルとアミノ酸エステルと
の付加化合物を固相で含む水性混合液に水と二相を形成
することのできる有機溶媒を加えて混合し、この付加化
合物の実質的部分を固相で含む有機溶媒相と水相との二
液相を形成させ、有機溶媒相を水相から分離し、この付
加化合物を有機溶媒のスラリーとして回収することを特
徴とする付加化合物の回収法を提供するものである。
の付加化合物を固相で含む水性混合液に水と二相を形成
することのできる有機溶媒を加えて混合し、この付加化
合物の実質的部分を固相で含む有機溶媒相と水相との二
液相を形成させ、有機溶媒相を水相から分離し、この付
加化合物を有機溶媒のスラリーとして回収することを特
徴とする付加化合物の回収法を提供するものである。
一般式（１）中Ｒ１及びＲ６はメチル基、エチル基の様
な低級アルキル基、Ｒｔ及びＲ３はイソプロピル基。
な低級アルキル基、Ｒｔ及びＲ３はイソプロピル基。
ボニル基の様な置換基を有することのあるベンジルオキ
シカルボニル基、ｎは１又は２である。
シカルボニル基、ｎは１又は２である。
一般式（１）で表わされる付加化合物を同相で含む水性
混合液は一般式 ％式％（１） で表わされるアミノ酸エステルと一般式で表わされるに
一保陣アミノジカルボン鍛を水性媒体中、蛋白分解酵素
の存在下で反応させて、水性媒体中に一般式（夏）で表
わされる付加化合物を析出させることにより１ｉｌｓす
ることができる。
混合液は一般式 ％式％（１） で表わされるアミノ酸エステルと一般式で表わされるに
一保陣アミノジカルボン鍛を水性媒体中、蛋白分解酵素
の存在下で反応させて、水性媒体中に一般式（夏）で表
わされる付加化合物を析出させることにより１ｉｌｓす
ることができる。
一般式（ＩＩ）及び（１）中、Ｒ１，）＋２ ＊ Ｒ，
＠ ＊ Ｒ４ｅ ！及びｎけ一般式（，１）中における
と同じ意味を表わす。
＠ ＊ Ｒ４ｅ ！及びｎけ一般式（，１）中における
と同じ意味を表わす。
エステル及びｆｆｆｌ（１）で表わされるＮ−保睡アミ
ノジカルボン酸は、それぞれ付加化合物、アミノ酸エス
テル及びＮ−保鏝アミノジカルボン酸と云う。
ノジカルボン酸は、それぞれ付加化合物、アミノ酸エス
テル及びＮ−保鏝アミノジカルボン酸と云う。
上述の方法による付加化合物の調製は、特開昭５３−９
２７２９号公報等に記載されている公知の条件に従って
よい。これらの条件を飼示すると以下の様である。
２７２９号公報等に記載されている公知の条件に従って
よい。これらの条件を飼示すると以下の様である。
オールプロテアーゼ。
好ましくは、プロリン
ン、サーモライシン。
タシナーゼＮ、Ｐ８−
プロテアーゼ等の虻属
プロテアーゼ、？モア
ーゼなどの粗製酵素も
使用可。
酵 素 濃 度 通常、基質１モルに対して約２
ないし約４００ （約５ ｘ １０＝ないし 約１×１−ミリモル） （約Ｉ Ｘ １ （１’ないし ３ Ｘ １０−’ ミリモル） 反応の際の液性 使用する酵素がＷｌ累活性を示
す範囲内、通常 ｐＨ約４ないし約９、 好ましくは４ないし８゜ 反 応 温 度 使用する酵素がＩｗ累竺性を維
持し得る温度範 囲、好ましくは約２０ ないし約５０℃。
ないし約４００ （約５ ｘ １０＝ないし 約１×１−ミリモル） （約Ｉ Ｘ １ （１’ないし ３ Ｘ １０−’ ミリモル） 反応の際の液性 使用する酵素がＷｌ累活性を示
す範囲内、通常 ｐＨ約４ないし約９、 好ましくは４ないし８゜ 反 応 温 度 使用する酵素がＩｗ累竺性を維
持し得る温度範 囲、好ましくは約２０ ないし約５０℃。
この方法ではアミノ酸エステルとＮ−保護アミノジカル
ボン酸は、それぞれ１体又はし体とＤ 一体との混合物
を用いる。
ボン酸は、それぞれ１体又はし体とＤ 一体との混合物
を用いる。
アミノ酸エステルとしてＬ一体を用いるとＬＬ−型ジペ
プチドエステルとＬ−型アミノ酸エステルとの付加化合
物が、またＬ一体とＤ一体との混合物を用いるとＬＬ−
型ジペプチドエステルとＤ 一体又Ｈｎ一体とＬ一体の
混合のアミノ酸エステルとの付加化合物が生成する。
プチドエステルとＬ−型アミノ酸エステルとの付加化合
物が、またＬ一体とＤ一体との混合物を用いるとＬＬ−
型ジペプチドエステルとＤ 一体又Ｈｎ一体とＬ一体の
混合のアミノ酸エステルとの付加化合物が生成する。
本発明の水性混合液は、またアミノ酸エステルと一般式
で表わされるジペプチドエステルを水性媒体中で反応さ
せることによりて調製できる。
せることによりて調製できる。
この様にして得られる付加化合物は、特開昭５５−１９
２５４号公報及び特開昭５５−７５４４４号公報に開示
されている様にＤＬ−アミノ酸エステルの光学分割のた
めに利用できる。
２５４号公報及び特開昭５５−７５４４４号公報に開示
されている様にＤＬ−アミノ酸エステルの光学分割のた
めに利用できる。
こうして得られた水性混合−に水と二相を形成すること
のできる有機溶媒を加えると、付加化合物の結晶は固相
のまま有機溶媒相に移行しスラリー状となる。
のできる有機溶媒を加えると、付加化合物の結晶は固相
のまま有機溶媒相に移行しスラリー状となる。
水と二相を形成することのできる有機溶媒としては、ベ
ンゼン、トルエン等の芳香族炭化水素。
ンゼン、トルエン等の芳香族炭化水素。
メチルイソブチルケトン、ジイソブチルケトン等のケト
ン類、ジインプロピルエーテル等のエーテル類又はこれ
らの混合液を好適なものとして例示することができる。
ン類、ジインプロピルエーテル等のエーテル類又はこれ
らの混合液を好適なものとして例示することができる。
本発明は、付加化合物を有機溶媒のスラリーとして分離
するものであるから、付加化合物を完全に溶解する程多
鎗の有機溶媒を使用するものでない。その１は通常、付
加化合物１重量部に対して約１ないし約２０重１部、好
ましくは約３ないし約１５重１部である。
するものであるから、付加化合物を完全に溶解する程多
鎗の有機溶媒を使用するものでない。その１は通常、付
加化合物１重量部に対して約１ないし約２０重１部、好
ましくは約３ないし約１５重１部である。
本発明で用いる有機溶媒は、水相と二相を形成して付加
化合物を懸濁させたとき、その溶解度の範囲で付加化合
物を溶解させて含むが、その実質混曾液゛と有機溶媒を
”接触させるときの温度は、通常約０ないし約８０℃で
ある。しかしながら、形成し九二相を分離し、水相から
残存酵素を回収する目的の場合には、約５ないし約５０
℃で混合を行なうことが望ましい。
化合物を懸濁させたとき、その溶解度の範囲で付加化合
物を溶解させて含むが、その実質混曾液゛と有機溶媒を
”接触させるときの温度は、通常約０ないし約８０℃で
ある。しかしながら、形成し九二相を分離し、水相から
残存酵素を回収する目的の場合には、約５ないし約５０
℃で混合を行なうことが望ましい。
混合時間及び二相の分離時間は、特に限定的でないが、
通常５分ないし３時間の範囲内で行なわれる。
通常５分ないし３時間の範囲内で行なわれる。
付加化合物の実質的部分をスラリーとして含む有機溶媒
相と水相は液々抽出の時に用いられるような慣用の手段
により分離することができる。
相と水相は液々抽出の時に用いられるような慣用の手段
により分離することができる。
前述した様な付加化合物の生成反応で未反応で残ったア
ミノ酸エステル、Ｎ−保障アミノジカルボン醪、酵素轡
の大部分は水相に残るので、これによって付加化合物を
υ１ｊＪ−ら分陰することができる０分離された有機相
からは慣用の手段、例えば有機溶媒を蒸発により除去す
るとか、ろ過等の方法により付加化合物を単離すること
ができる。
ミノ酸エステル、Ｎ−保障アミノジカルボン醪、酵素轡
の大部分は水相に残るので、これによって付加化合物を
υ１ｊＪ−ら分陰することができる０分離された有機相
からは慣用の手段、例えば有機溶媒を蒸発により除去す
るとか、ろ過等の方法により付加化合物を単離すること
ができる。
あるいは、分離された有機相を酸性水溶液と接触させる
ことにより、付加化合物の一方の成分であるアミノ酸エ
ステルを水相側に移動させ、これよりアミノ酸エステル
を、有機相からは他方の成分である一般式幌で表わされ
るジペプチドエステルを分離することができる。
ことにより、付加化合物の一方の成分であるアミノ酸エ
ステルを水相側に移動させ、これよりアミノ酸エステル
を、有機相からは他方の成分である一般式幌で表わされ
るジペプチドエステルを分離することができる。
また付加化合物を含む有機溶媒相を直ちに付加化合物の
アミノ基の保護基（一般式〇）中のＸ）の脱離の工程に
供すること本できる。
アミノ基の保護基（一般式〇）中のＸ）の脱離の工程に
供すること本できる。
以上の説明から明らかな様に、本発明によれば、水性混
合液中の付加化合物を他の成分から有機溶媒中への高濃
度のスラリーの形で効率的に分離できる。また付加化合
物を全景溶解することなしに１実質的部分と固形物とし
て有機溶媒相に抽出できるので、溶媒の使用緻が少なく
てすみ工業的に有利である。しかも、溶解による抽出の
場合に比べてより安定で、かつ生理学的により問題の少
ない有機溶媒を用いることができる。
合液中の付加化合物を他の成分から有機溶媒中への高濃
度のスラリーの形で効率的に分離できる。また付加化合
物を全景溶解することなしに１実質的部分と固形物とし
て有機溶媒相に抽出できるので、溶媒の使用緻が少なく
てすみ工業的に有利である。しかも、溶解による抽出の
場合に比べてより安定で、かつ生理学的により問題の少
ない有機溶媒を用いることができる。
以下、本発明を実施例により巣に拝しく説明する。
実施例１
Ｎ−ヘンシルオキシカルボニル矢−アスパラギン酸５ｓ
４ｓｙとＤＬ−フェニルアラニンメチ、ルエステ４１１
塩１０７．８４ｔを２ｔのフラスコにとり、蒸留水４９
Ｏｄ、５Ｎ−水酸化ナトリウム水溶ｇｔｏｏ−及び粗製
サーモライシン（サーモアーゼＰＳ−１６０．商標患、
大和化成＠製）ｔａ ｔ、酢酸カルシウム−水塩α９２
を加え、４０℃で攪拌しながら反応させた。１５時間後
、懸濁状の反応混合液を得た。この液にトルエン６０ロ
ーを加え、４０℃で２０分間攪拌混合した。攪拌を止め
ると固形物を懸濁状に含むトルエン相と均一透明な水相
とに分離した。１０分後に固形物を含むトルエン相を水
相から分離し、トルエン相は２００ｄの（１５％酢酸カ
ルシウム水溶液で２回洗浄を行なったのち、固形物をガ
ラスフィルターを用いてろ過によシ分離した。乾慄後、
酢酸エチル−〇−へキサ／混合浴媒から再結晶を行ない
、Ｎ献− 一ベンジルオキシカルボニルーＬ−７スパルチルーＬ−
７エニルアラニンメチルエステル（以下、Ｚ−ＡＰＭと
云う）と主ＫＤ一体のフェニルアラニンメチルエステル
（以下％Ｄ−ＰＭと云う）との１＝１の付加化合物１０
１１ ？（収率８＆２チ）を得た。この結晶が、Ｚ−Ａ
ＰＭと王にＤ−ＰＭの１＝１の付加化付物であることは
、ＮＭＲ。
４ｓｙとＤＬ−フェニルアラニンメチ、ルエステ４１１
塩１０７．８４ｔを２ｔのフラスコにとり、蒸留水４９
Ｏｄ、５Ｎ−水酸化ナトリウム水溶ｇｔｏｏ−及び粗製
サーモライシン（サーモアーゼＰＳ−１６０．商標患、
大和化成＠製）ｔａ ｔ、酢酸カルシウム−水塩α９２
を加え、４０℃で攪拌しながら反応させた。１５時間後
、懸濁状の反応混合液を得た。この液にトルエン６０ロ
ーを加え、４０℃で２０分間攪拌混合した。攪拌を止め
ると固形物を懸濁状に含むトルエン相と均一透明な水相
とに分離した。１０分後に固形物を含むトルエン相を水
相から分離し、トルエン相は２００ｄの（１５％酢酸カ
ルシウム水溶液で２回洗浄を行なったのち、固形物をガ
ラスフィルターを用いてろ過によシ分離した。乾慄後、
酢酸エチル−〇−へキサ／混合浴媒から再結晶を行ない
、Ｎ献− 一ベンジルオキシカルボニルーＬ−７スパルチルーＬ−
７エニルアラニンメチルエステル（以下、Ｚ−ＡＰＭと
云う）と主ＫＤ一体のフェニルアラニンメチルエステル
（以下％Ｄ−ＰＭと云う）との１＝１の付加化合物１０
１１ ？（収率８＆２チ）を得た。この結晶が、Ｚ−Ａ
ＰＭと王にＤ−ＰＭの１＝１の付加化付物であることは
、ＮＭＲ。
工Ｒ１元素分析、 ＆ｊｔ、［が特開昭５５−９２７２
９号公報に開示されているデータと同一であることによ
り確認した。
９号公報に開示されているデータと同一であることによ
り確認した。
実施例２
実施例１において粗製サーモライシンを７．２ｆ。
酢酸カルシウム−水塩を１５９．反応時間を８時間にし
た以外は実施例１と同様にしてペプチド生成及び付加化
合物の形成反応を行なった。
た以外は実施例１と同様にしてペプチド生成及び付加化
合物の形成反応を行なった。
反応終了後、トルエンの代りにメチルイソブチルケトン
を１を使用した以外は実施例１と同様に処理を行なった
。固形物を懸濁状で含有したメチルイソブチルケトン相
は分離後、四−タリーエバポレーターで溶媒を留去した
のち、残渣を酢酸エチル−ｎ−ヘキサン混曾浴媒から再
結晶し、Ｚ−ＡＰＭとＤ−ＰＭの１＝１付加化合物の１
０２．２ｐ（収率８４．１％）を得た。
を１を使用した以外は実施例１と同様に処理を行なった
。固形物を懸濁状で含有したメチルイソブチルケトン相
は分離後、四−タリーエバポレーターで溶媒を留去した
のち、残渣を酢酸エチル−ｎ−ヘキサン混曾浴媒から再
結晶し、Ｚ−ＡＰＭとＤ−ＰＭの１＝１付加化合物の１
０２．２ｐ（収率８４．１％）を得た。
実施ｙｓ４ｓ
実施例２とト１様にしてペプチド生成及び付加化合物の
形成反応を行なった０反応終了後、メチルイソブチルケ
トンの代シにジイソグロビルエーテル５００−を使用し
九以外は実施例２と同様に処理を行なった。固形物を懸
濁状に含有したジイノプロビルエーテル相は分離後、ロ
ータリーエバポレーターで溶媒を留去し九のち、残渣を
酢酸エチル−ｎ−ヘキサンから再結晶し、Ｚ−ＡＰＭと
主にＤ−ＰＭの１＝１付加化合物９４５Ｆ（収率７９．
５チ）を得たつ 実施１１ｉ１４ 実施Ｎ２において、ＤＬ−フェニルアラニンメチルエス
テル塩酸塩の代り［Ｌ−フェニルアラニンメチルエステ
ル塩酸塩を用いた以外は実施例２と（ロ）様にしてペプ
チド生成及び付加化合物形成反応を行なった。反応終了
後、メチルインブチルケトンの代りにメチルインブチル
ケトン９００−とトルエン１００−の混合溶媒を用い、
実施例２と同様に後処理を行なった。固形物を懸濁状で
含有する有機相は、水相から分離したのち、ロータリー
エバポレーターで溶媒を留去し、残渣を酢酸エチル−ｎ
−ヘキサンより再結晶し、２−ムＰＭとＬ−フェニルア
ラニンメチルエステル（以）、Ｌ−ＰＭと云う）の１：
１付加化曾物９＆４Ｂ？（収率８ｔ２Ｌｓ）を得た。
形成反応を行なった０反応終了後、メチルイソブチルケ
トンの代シにジイソグロビルエーテル５００−を使用し
九以外は実施例２と同様に処理を行なった。固形物を懸
濁状に含有したジイノプロビルエーテル相は分離後、ロ
ータリーエバポレーターで溶媒を留去し九のち、残渣を
酢酸エチル−ｎ−ヘキサンから再結晶し、Ｚ−ＡＰＭと
主にＤ−ＰＭの１＝１付加化合物９４５Ｆ（収率７９．
５チ）を得たつ 実施１１ｉ１４ 実施Ｎ２において、ＤＬ−フェニルアラニンメチルエス
テル塩酸塩の代り［Ｌ−フェニルアラニンメチルエステ
ル塩酸塩を用いた以外は実施例２と（ロ）様にしてペプ
チド生成及び付加化合物形成反応を行なった。反応終了
後、メチルインブチルケトンの代りにメチルインブチル
ケトン９００−とトルエン１００−の混合溶媒を用い、
実施例２と同様に後処理を行なった。固形物を懸濁状で
含有する有機相は、水相から分離したのち、ロータリー
エバポレーターで溶媒を留去し、残渣を酢酸エチル−ｎ
−ヘキサンより再結晶し、２−ムＰＭとＬ−フェニルア
ラニンメチルエステル（以）、Ｌ−ＰＭと云う）の１：
１付加化曾物９＆４Ｂ？（収率８ｔ２Ｌｓ）を得た。
Ｚ−ＡＰＭとＬ−ＰＭのＩ：１付加化曾物である夜
ことは、ＮＭＲ，工Ｒ１元素分析、施光駁が特′開昭５
３−９２７２９号に開示されているデータと同一である
ことにより確認した。
３−９２７２９号に開示されているデータと同一である
ことにより確認した。
実施例５
Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−Ｌ−アスパラギンｔｌ
！５．５４５ ｆとＤＬ−フェニルアラニンメチルエス
テルｊ４酸Ｉ４１ （Ｌ ７８４ Ｆを２００ｓｄの７
ラスコにとり、蒸留水４０ｍ、５Ｎ−力性ソーダ水浴液
１〇−及びサーモライシン２００ｗｆ、酢酸カルシウム
−水塩１３０ｗＩＩを加え、４０℃で攪拌しながら反応
させた。７時間後、反応混合液にメチルイソブチルケト
ン１００−を加え、４０℃で２０分間攪拌混会合た。攪
拌停止１０分後、固形物を含む有機相と均一な水相とを
分離し、有機相は２０Ｗｌｔのα５囁酢鍍カルシウム水
浴液で２回洗浄を行なりた後、ロータリーエバポレータ
ーで溶媒を留去し、残渣を酢酸エチル−ｎ−ヘキサンよ
り再結晶し、Ｚ−ＡＰＭと主にＤ−ＰＭ＋７）１ ：
１の付加化合物の結晶０１α３４Ｆ（収率８ｉ２囁）を
得喪。
！５．５４５ ｆとＤＬ−フェニルアラニンメチルエス
テルｊ４酸Ｉ４１ （Ｌ ７８４ Ｆを２００ｓｄの７
ラスコにとり、蒸留水４０ｍ、５Ｎ−力性ソーダ水浴液
１〇−及びサーモライシン２００ｗｆ、酢酸カルシウム
−水塩１３０ｗＩＩを加え、４０℃で攪拌しながら反応
させた。７時間後、反応混合液にメチルイソブチルケト
ン１００−を加え、４０℃で２０分間攪拌混会合た。攪
拌停止１０分後、固形物を含む有機相と均一な水相とを
分離し、有機相は２０Ｗｌｔのα５囁酢鍍カルシウム水
浴液で２回洗浄を行なりた後、ロータリーエバポレータ
ーで溶媒を留去し、残渣を酢酸エチル−ｎ−ヘキサンよ
り再結晶し、Ｚ−ＡＰＭと主にＤ−ＰＭ＋７）１ ：
１の付加化合物の結晶０１α３４Ｆ（収率８ｉ２囁）を
得喪。
実にガロ
サーモライシンの代りにＰ８−プロテアーゼ１ｆを用い
友以外は実施Ｐ１５と同様の操作でペプチド生成、付加
化合物の形成及び反応後の処理を行なっ九、再結晶後、
得られたＺ−ＡＰＭと主にＤ−ＰＭの１＝１付加化会物
の収＠＃′ｉ９．８７ｔ（収率８ｔ２−’）であった。
友以外は実施Ｐ１５と同様の操作でペプチド生成、付加
化合物の形成及び反応後の処理を行なっ九、再結晶後、
得られたＺ−ＡＰＭと主にＤ−ＰＭの１＝１付加化会物
の収＠＃′ｉ９．８７ｔ（収率８ｔ２−’）であった。
チルーＬ−フェニルアラニンメチルエステルのナトリウ
ムｔ４ｓｏｔを２０−の水に浴解し、この液をＤＩ、−
バリンメチルエステルの塙ｌ！＆！塩！ＬＯｔを含む２
０Ｗｌｔの水浴液中に攪拌しながら滴下した。
ムｔ４ｓｏｔを２０−の水に浴解し、この液をＤＩ、−
バリンメチルエステルの塙ｌ！＆！塩！ＬＯｔを含む２
０Ｗｌｔの水浴液中に攪拌しながら滴下した。
室温に２時間静置したのち、５０−のメチルイノブチル
ケトンを加えて攪拌した。有機溶゛媒相を水相から分離
したのちｐ過乾燥し、Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−
Ｌ−アスパルチル−Ｌ −７ｘニルアラニンメチルエス
テルとバリンメチルエステルとの付加化合物ａ９ｆを得
た−０ この付加化合物を１規定の塩酸水溶液で処理し光学純度
７２チのＤ−バリンメチルエステルを得九。
ケトンを加えて攪拌した。有機溶゛媒相を水相から分離
したのちｐ過乾燥し、Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−
Ｌ−アスパルチル−Ｌ −７ｘニルアラニンメチルエス
テルとバリンメチルエステルとの付加化合物ａ９ｆを得
た−０ この付加化合物を１規定の塩酸水溶液で処理し光学純度
７２チのＤ−バリンメチルエステルを得九。
特許出願人 東洋曹達工業株式会社
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 （１）一般式 ％式％ で表わされるジペプチドエステルとアミノ酸エステルと
の加付化合物（式中Ｒ，及びＲ，は低級アルキルｉＲ１
及びＲ，ｉｔアミノ鈑の側鎖基、 Ｘｉｄ置換基を有す
ることのあるベンジルオキシカルボニル基であ）、ｎは
１又は２である）を固相で含む水性混合液に水と二相を
形成することのできる有機溶媒を加えて混合し、この付
加化合物の実質的部分を固相で含む有機溶媒相と水相と
の二液相を形成させ、有機溶媒相を水相から分離し、こ
の付加化合物を有機溶媒のスラリーとして１収すること
を特徴とするジペプチドエステルとアミノ酸エステルと
の付加化合物の回収法。 （２）水と二相を形成することのできる有機溶媒が水と
二相を形成することのできるケトン類。 脂肪族系もしくは芳香族系の炭化水素類又はエーテル類
である特許請求の範囲第１項記載の回収法。 （２）水と二相を形成することのできる有機溶媒を付加
化合物を完全に溶解できる置未満の■で用いる特許請求
の範囲第１ＪＪｉｌ又は第２項記載の回収法。 幡 水と二相を形成することのできる有機溶媒を付加化
合物１重量部に対して約１ないし約２０重置部の置加え
る特許請求の範囲第１項＼ ないし第３項のいずれかの項記載の回収法。 （６） 付加化合物のジペプチド部分がＬＬ−型である
特許請求の範囲第１項ないし第５項記載の回収法。 偏） 水性混合液が一般式 ０ で表わされるアミノ酸エステル（式中Ｒ８は低級アルキ
ル基、Ｒｔはアミノ酸の側鎖基である）と一般式 ％式％ で表わされるＮ−保護アミノジカルボンＭ（式中Ｘはｔ
ｍ基を有することのあるベンジルオキシカルボニル基で
あシ、ｎは１又は２である）を水性媒体中、蛋白分解酵
素の存在下で反応させて一般式 で表わされるジペプチドエステルとアミノ酸エステルと
の付加化合物（式中Ｒ，、Ｒ，、Ｘ及びｎ＃′ｉ前記同
様であシ、Ｒｓ及びＲ４はそれぞれト、及びＲ１と同一
の基である）を生成させた反応生成液である特許請求の
範囲第１項ないし第５項のいずれかの項記載の回収法。 （至）付加化合物、アミノ酸エステル及びｙ−保護アミ
ノジカルボン酸の一般式中の山及びＲ４がメチル基、Ｒ
３及びＲ１がベンジル基。 ｎが１である特許請求の範囲第６項記載の回収法。 （８）用いるアミノ酸エステル及びＮ−保護アミノジカ
ルボン酸がそれぞれ独立にＬ−型又はＬ−型とＤ型の混
合物である特許請求の範囲第６項又は第７項記載の回収
法。 （９） 用いる蛋白分解ＷＩ素が金属グロテアーゼで
ある特許請求の範囲第６項ないし第８項のいずれかの項
記載の回収法。
Priority Applications (10)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP14797481A JPS5852258A (ja) | 1981-09-21 | 1981-09-21 | ジペプチドエステルとアミノ酸エステルとの付加化合物の回収法 |
| EP82108116A EP0075160B1 (en) | 1981-09-21 | 1982-09-02 | Process for recovering a dipeptide derivative |
| DE8282108116T DE3274985D1 (en) | 1981-09-21 | 1982-09-02 | Process for recovering a dipeptide derivative |
| AU88018/82A AU554836B2 (en) | 1981-09-21 | 1982-09-03 | Process for recovering a dipeptide derivative |
| US06/415,912 US4487717A (en) | 1981-09-21 | 1982-09-08 | Process for recovering a dipeptide derivative |
| CA000411792A CA1186648A (en) | 1981-09-21 | 1982-09-20 | Process for recovering a dipeptide derivative |
| BR8205516A BR8205516A (pt) | 1981-09-21 | 1982-09-20 | Processo para recuperacao de um derivado de dipeptidio |
| DD27258282A DD232067A5 (de) | 1981-09-21 | 1982-09-21 | Verfahren zur gewinnung eines dipeptidderivats |
| DD24340782A DD216451A5 (de) | 1981-09-21 | 1982-09-21 | Verfahren zur gewinnung eines dipeptidderivats |
| DD82272585A DD232499A5 (de) | 1981-09-21 | 1982-09-21 | Verfahren zur gewinnung eines dipeptidderivats |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP14797481A JPS5852258A (ja) | 1981-09-21 | 1981-09-21 | ジペプチドエステルとアミノ酸エステルとの付加化合物の回収法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS5852258A true JPS5852258A (ja) | 1983-03-28 |
| JPH0212238B2 JPH0212238B2 (ja) | 1990-03-19 |
Family
ID=15442304
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP14797481A Granted JPS5852258A (ja) | 1981-09-21 | 1981-09-21 | ジペプチドエステルとアミノ酸エステルとの付加化合物の回収法 |
Country Status (2)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS5852258A (ja) |
| DD (1) | DD232067A5 (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR2708938A1 (fr) * | 1993-08-09 | 1995-02-17 | Bioeurope | Procédé enzymatique perfectionné de préparation d'oligomères de L-lysine. |
-
1981
- 1981-09-21 JP JP14797481A patent/JPS5852258A/ja active Granted
-
1982
- 1982-09-21 DD DD27258282A patent/DD232067A5/xx not_active IP Right Cessation
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR2708938A1 (fr) * | 1993-08-09 | 1995-02-17 | Bioeurope | Procédé enzymatique perfectionné de préparation d'oligomères de L-lysine. |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| DD232067A5 (de) | 1986-01-15 |
| JPH0212238B2 (ja) | 1990-03-19 |
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