JPS58203913A - 高分子多糖類物質ｍｐｓ−８２及びその利用 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、新規な高分子多糖類ＭＰＳー８２ルとしてＲ
ｈ　ａｍｎ　ｏ　ｓ　ｅを用いた。

とその利用に関するものである。

史に詳細には、本発明は、ビヒドパクテリウムｌｌｌ６
ＶＣＩ１４する高分子多糖類物質ＭＰ８−８２生産薗関
するものである。更には、本発明は、高分子多糖類物質
ＭＰ８−８２を有効成分とする免疫賦活剤に関するもの
である。

本発明の＾分子釜ｍ類物質ＭＰ８−８２はビヒドバクテ
リウム属に属する鳥分子多ｍ類物質ＭＰＳ−８２生産菌
を培養することによって製造することができる。高分子
多糖類物質ＭＰ８−８２生産菌の具体例としては、微工
研に寄託された鉋として、ビヒドパクテリウム・ロンガ
ムＡＡ２１−Ｒ１３ＲＢＰ−１２６が示され、有効に使
用される１、次に、ビヒドバクテリウム・ロンガムＡ　
２１−Ｒの菌学的性質を示す。

形１１　　ＢＬ寒天培地で、嫌気性下でよく生育【２゜
桿状あるいはＹ字状を呈する。

生育環境　嫌気性 生育温度　　１５℃で生育せず　　４５℃以上で生育せ
ずダラム染色　　十 糖の資化性（ＩＩの生成） （ガスの生成はいずれもなし） ブフビノース　　　　士 キシロース　　　　　士 リボース　　　　　　＋ グルコース　　　　　＋ マンノース　　　　　＋ ７ラクトース　　　　士 ガラクトース　　　　＋ ７ユークロース　　　＋ マルトース　　　　　＋ セロビオース　　　　− ラクトース　　　　　＋ トレノ１０−ス　　　　　− メリビオース　　　　士 ラノイノース　　　　＋ メレチトース　　　　＋ デキストリン　　　　± スターチ　　　　　　士 グリコーゲン　　　　− −ｆヌリン　　　　　− マンニット　　　　　− ソルビット　　　　　− イノシット　　　　　− エスクリン　　　　　− サリシン　　　　　　− アミグダリ／　　　　− 一分子多糖か物質ＭＰ８−８２は、尚分子多糖Ｍ’４１
）質ＭＰ８−８２生産薗を培養［７た匝、培１１ｖＩＩ
Ｊの液体区分および菌体区分から分離採取することによ
って得ることができる。

培養培地と１７てけ、いかなる組成の培地でもよいが、
脱脂乳、ホエー等を含有する乳＃１劇培養培地が好まし
い。

培養条件としては、例えば、２０℃〜４５℃の嫌気性下
の静置培養で十分であり、また、簡分子多ｓ＃Ｉ物質Ｍ
ＰＳ　　８２生産菌の生育が可能で＾分子多糖類物質Ｍ
Ｐ８−８２を１産する条件であればいかなる条件でもよ
い。

高分子多糖類物質ＭＰ８−８２生童−の培養物から遠心
分離によね液体区分および菌体区分を得、次いで、これ
らから抗Ｍ瘍作用を有する南分子多糖訓吻賀ＭＰ８−８
２を採取する。液体区分からｆｌＩＪ分子多糖類物質Ｍ
ＰＳ−８２を採取するには常法ｖＣよればよく、例とし
て、ゲルＶ過、イオン交侠）ロマトダラフイー、塩析、
溶媒分画、透析なとの操作を単独あるいは適宜併用すれ
ばよい。菌体区分から南分子多楯類４Ｅ賀ＭＰＳ−８２
を採取するには、一体区分から例えば水抽出を行ない、
その臘は液体区分からの採取法に準ずればよい。

本冗明す法において、一般的には、ホエー培地で１−分
子憂棚争ｉ質ＭＰ８−８２生産菌を嫌気性Ｆで静置培養
し、培養終了後、遠心分離にて培養Ｌ＆液會侍る。

次いで、この培養１澄液に有機溶媒を添加し、沈ｓ１吻
５ｒ侍る。

−ｈ、遠心分離にて得られた菌体区分につき水抽出を竹
ない、次いで、遠心分離を行ない抽出上重液を得る Ｃｃ／）ＬｆＩｌ液に有機溶媒を添加し、沈澱物を得る
。

このようにして得られた崗沈澱智を水に溶解した欲、同
様に有機溶媒を添加し、再沈澱させる。

この沈澱物質を水に溶解後、クロロホルム　イソアミル
アルコール混溶（クロロホルム：イソＴミルアルコール
＝５　：　１　）を加え振とうし味蛋白を行なう。次い
で、有機溶媒添加によ峠再沈澱させる。この沈＃物質を
適当な緩衝液に溶解した鎌、同極の緩衝液で十分緩衝化
り、＊イオン交挾捧に負荷する。次いで、同種の緩鈎液
を流［、陽イオ／交換体に吸着されない高分子多糖類ｖ
ｌＪ質を含む通過液を回収【７、隘イオン交換体に吸着
させ、０．５Ｍ　ＮａＣｌを流し溶出画分を得る１、こ
れをイオン交換水に対して透析する。透析内液を凍結ｋ
ｆｉｌし、ｆＩＩＩｌＩｉ１１６分子多楯類物質ＭＰ８
−８．２を得る。

ことに得られた高分子多糖類物質ＭＰ８１＄２は優れた
免疫賦活作用を有し、抗腫瘍剤として市川であり、か′
）また、高粘性であるため（Ｃ１増粘剤として有用であ
る。

本発明の一分子多抛類物質ＭＰ８−８υ〕理化学的性質
を次に示す。

（１）　　元素分析 Ｃ：５８．０５％ １１：　　　６．５２％ Ｏ：　５５．２１ｇ６ Ｎ　：　　α２４− （２３分装置 戚１）除外ｔｐｙａ法による場合。

８ｅｐｈａｒｃｓｓｅ　２ＢＫよる限外濾過を行なった
。

カラムサイズ２．５　Ｘ　４０．５　ｔｓ　；フラクシ
ョン５ｇ；試料２１ｖ（１５３１１７）を負性；展開剤
０．０２　’ｌｋ　ＮａＮＢ水溶液：の条件によ秒、本
物質ははぼＶｏｉｄ　Ｖｏｌｕｍｅ付近に分−される。

（鶴）超遠心法による場合、 ０．０２Ｍりん酸緩衝液ｉ７．５）に０．１慢濃度で溶
解した試料について超遠心法（設定回転数５１２００Ｒ
ＰＭ）により沈降電数を求めたところ２．０８（８： ５ｙｅｄｂｅｒｇ単位）で、かつ単一性を示した。

＋３１　−　点く分解点） 本物質は２２５℃付近から変色が始まり、２７０℃付近
でほとんど黒褐色に分所する。

（４）比論光ｋ 〔α）、＝＋１１２±５°（Ｃ＝０．２５％）（５）紫
外線吸収スペクトル 第１図に示す通りである。

（６）赤外部吸収スペクトル 第２図に示す通りである。

（力　溶剤に対する溶解性 水に可溶、メタノール、エタノール、゛ｒ十トン、エー
テルに不溶 （８）呈色反応 （１）モーリッシュ反応　　十 （１１）アンスロン反応　　　十 Ｇｏ）　　システィン−硫酸反応　　−４ｖ）　　アニ
リン−塩酸反応　　− （Ｖ）　　カルバゾール−硫酸反応　士（わずかに反応
）（■１）　　エルソンーモルガン反応　　−（Ｖｌｌ
ｌ　　ビユレット反応　　　−（ｖｌｌｌ）ニンヒドリ
ン反応　　− （９）塩基性、酸性、中性の別 本物質の０．５−水＃液の−１は４．７５付近である。

（溶鱗前の純水の…＝５．６５）０１　　物實の色 本物質の凍結乾燥物は白色繊維状である。

ＯＯ構成糖の種類 ／リカゲルプレート（Ｍｅｒｃｋ　ａｒｔ、　Ａ３５５
ジ、２０Ｘ２０ｍ）を使用し、薄層クロマトグラ：ノイ
ーによる構成糖の種類を調べた。

条件： 試料を２　Ｎ　−Ｈ，８０，で沸とう水中４時間Ｄ口水
分解し、炭酸バリウムで中和後ｒ過した。Ｐｌ＆を濃縮
後リン酸処理をほどこしたシリカゲ゛ルプレート（Ｍｅ
ｒｃｋ　ａｒｔ、Ａ　５５５５２０　Ｘ　２０　ｃｍ　
）にスポットし、約７時間、人の展開溶媒を用いて展開
し、Ｂの発色剤で発色した結果、 （ｉ　Ｉ　ｕ　ｃ　ｏ　ｓ　ｅ Ｇａｌａｃｔｏｓｅ （ｌａｌａｃｔｕｒｏｎｉｃ　　　Ａｃ１ｄ禾錐紹糖 の存在が耐められた。

同様の方法でＣの展開溶媒を用いて展開し、Ｂの発色剤
で発色した結果、本物質の構成糖として鉋められた未確
認糖はＲｈ　ａｍｎ　ｏ　ｓ　ｅよりもやや高いＲｆ値
を与えた。

Ａ（ソプロビルアルコール、アセトン。

０．１Ｍ乳酸をそれぞれ４二４：２の割合で混合したも
の。

Ｂ　アニリン４ｙｄ、）フェニルアミン４ｇ。

ａｃｅｔｏｎｅ　２００Ｍ、　Ｈ１ＰＯ４８０＊　５０
ｄ、を混合したもの。

Ｃメチルエチルケトン：ｎ−ブタノールニホウ酸緩価液
＋ｐｉ（８，９４１ ＝４０ｄ：４０ｉｕ：５厘２に混合したもの。

ａカ　構成糖の組成比 試料を２８−Ｈ，８０４で沸とう水中４時間加水分解し
、炭酸バリウムで中和後Ｖ過［７、そのｐ液に含まれる
糖を、中性糖については、アルディドールアセテートの
形に変えた後、条ｖ＋１で１　ｆｋ　ＥＣＮ８８ｗＭ　
（５ｍ　）カラムを用いた（ＩＬＣＫよって（第６図は
そのＧＬＣチャートを示す）、またＧａ１ａｃｔｕｒｏ
ｎｉｃ　ａｃｉｄ＆Ｃついては、アルディドールＴＭ８
誘導体の形に変オた後、条件２で５１８ｉｌｉｃｏｎｅ
８Ｂ−５２（５ｍ）カラムを用いたＧＬＣＫよって（第
４図はそのＧＬＣ）ヤードを示す）定量１、た。その結
果、 ｒ）Ｉｕｃｏｓｅ　：Ｇａ１ａｃｔｏｓｅ　：未確紹抛
：（ｊｄｌａｃｔｕｒｏｎｉｃ　　ａｃｉｄ＝ｌ：０８
〜１．２：０．２〜１．０：Ｕ、０２〜ａ６の比率で５
つだ。

第６図で１はＧｌｕｃｏｓｅ、　２はＧａ１ａｃｔｏｓ
’？ｊ、６＃ゴ未確認糖である。

第４図で４はｒｉｌｕｃｏｓｅとＧａ１ａｃｔｏｓｅの
混ｆｔ４ｍ、５はＧａ１ａｃｔｕｒｏｎｉｃ　ａｃｉｄ
、　６は未確認糖である。

条件１：カラム温［１９５℃恒温 検出器及びインジェクションｉｉ［２５０℃キャリアー
ガス　Ｎ２　４０　ｍｌ／Ｍ　ｉ　ｎ＋ＩＪｕ’ンブル
は、米国ファンスディール社より購入したものを便用Ｌ
７ｆｃ。

条件２：カラム温度　１５０℃〜２′５０℃（２℃／ｍ
　１　ｎ昇温） 検出器及びインジェクションＴｈＡＭｊＬ２５０℃キャ
リアーガス　Ｎｌ　　４０ｍｌ／′ｍ　ｉ　ｎ標準サン
プルは、米国ファンステイール社より購入したものを使
用した。

なお、未確認軸の定量のための標準サンプルとしてＲｈ
　ａｍｎ　ｏ　ｙ４　ｅを用いた。

次に本発明の実施例及び試験例を示す。

実施例１ ホエー培地（１０ｆｂ　ｗ／ｖホエー粉＋０４５５ｗ／
　Ｖ　　ビール酵母エキス）１０１にＢ目ｉｄ、ｂａｃ
ｔｅｒｉｕｍ　ｌｏｎｇｕｍ　４２１−Ｒ％　ＦＥＲＭ
　ＢＰ−１２６を接種し、５７℃で２４時間嫌気性下で
静置培養し、培養終了後、遠心弁１１１ｉ！　（１０，
００Ｏｒｐｍ。

１５ｍ１ｎ）にて培養上澄液９２！を得る。この上置液
に塩化ナトリウムｆ　０．５　％になるようにとかし、
９９５−エチルアルコールを最終ａｙｊＬとし、て５０
チ（ｖ／ｖ）となるように添加する。本操作に工り沈＃
物賀が銘められるようになり、この沈澱物質を遠心弁Ｉ
ＩＩ（１０，００Ｏｒｐｍ、　　５ｍ１ｎｌ　Ｌ、、沈
澱物’ｊ！１１．２９を得る。

この沈＃物１＆にイオン交換水を加え溶解後、不溶性Ｐ
４１！Ｊ實を遠心弁＠　（１０，００Ｏｒｐｍ、　　１
５　ｍｉｎ　ｌｋ（て除去する。本操作を計３回繰り返
すことにより８００〜の粗精製−が得られる。

ここに慢られた１ｌＬＩｉＩ製物をイオン交換水に溶解
【ｓ　ＳｃＶａｇ法−′Ｉなわちインアミルアルコール
とクロロホルムの混液を１／′５容加えで５０分間振と
うｒることに↓ゆ除タンパクを行なう。

次にこの粗精製物を０．０５　Ｍ　ＩＪン酸緩餉液（−
６０）に１１７、同緩備液で十分に緩術化し九ジエｌル
アミノエチルセルロース（Ｉ）Ｉ３ＡＦＳセルロース）
を光＊１．九カラムに負荷する。同緩衝液を流り、、ｏ
ｇＡＥ−セルロースに非吸看性物賀を含む通過液をすて
る。

次に０．０５ＭＩＪｙ＠ｉ緩伽液（ｐｔｉ６．０）に０
．５Ｍａ度ＶＣなる様にＮａＣｊ！を溶解した液を流し
、溶出１、てくる通過液を採取する。これを凍結乾燥し
た嶽、イオン交換水に溶解し、イオン交換水に対して１
０℃で４日間、透析チューブｒＣて透析をｆＴなう。透
析終了後、透析内液を凍結乾燥【７、白色繊維状の鳥分
子多糖類物質ＭＰ８−８２の凍結乾燥標品３５０〜を得
る。

試験例１ ８ａｒｃｏｍａ　１８０腹水腫ｒｉｈＫ対する効米ｄｄ
Ｙ系５週令の雌性マウスを用い、試験＃ｆ−は１群７匹
対照群け１群１５匹とし、予め１週間ｄｄＹ系マウスに
継代増殖させた８ａｒｃｏｍａ１８０［水−錫細胞を２
　Ｘ　１０’　個腹腔内に移植し、移４１１４１日より
連続９日間、対照群には生理食塩水を、試験群には生理
食塩水圧溶解した、実施例１で得た＾分子多糖＠智質Ｍ
Ｐ８−８２を腹腔内投与した。全投与ｉｔけ１１．５　
−１４５〜／峠、および１８０ｘｖ／に９の５段階とし
た。

結果を第１表に示した。

第１表

【図面の簡単な説明】

第１図はＩＩｌ＃ｉ分子多糖類物質ＭＰ８−８２の紫外
巌吸収スー々クトルをｆｉ２図は１ＩＩＩｔしく赤外部
吸収スＣ，７）ルを、第３図は同じく条件１によるＧＬ
Ｃすｉ’−）を、第４図は同じく条件２によるＧＬＣす
亀′・−トを示す。 代理人弁理士　戸　１）親　男 ・第３図 ０　　　　　２５　　　　　　印　　　　　７５１ρ１
１ｆ分） 第　　　４　　　図 （分）

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 ｔ　次の理化学的性質を有する続分子多糖類物質ＭＰ８
   −８２゜ ＋１３　　元素分析 Ｃ：５８．０５チ Ｈ：　　６．５２チ ０：５５．２１チ Ｎ：　　Ｑ、２４％ （２）　　分子量 ＋１１　　限外濾過法による場合。 ５ｅｐｈａｒｏｓｅ２ＢＫよる限外ｔＦｉ過を行なった
   。 カラムサイズ２．５　Ｘ　４０．５国；フラクション５
   ｇ：試料２〜（１，５１）を負荀：展開剤ＣＬ　０２　
   ＋４　ＮａＮＢ水溶液水溶液性により、本物３ｉｔＦｉ
   ｔｉｔｆＶｏｉｄ　Ｖｏｌｕｍｅ付近に分−される。 （１：）　　超遠心法による場合。 ０、０２　Ｍりん１２緩伽液（…７．５　）に０．１チ
   濃度で溶解【７た試料について超遠心法（設定回転数５
   １２０ＯＲＰＭ）により沈降矩数を求めたところ２．０
   ８（８：Ｓｖｅｄｂｅｒｇ単位］で、かつ単一性を示し
   た。 （３］　　融　点（分解点） 本十勿貿は２２５℃付近から変色が始ま妙、２７０℃付
   近ではとんと黒褐色に分解する。 （４）比に尤度 〔α〕ゎ＝＋１１２±５°（Ｃ＝０．２５％）（５）紫
   外Ｓ吸収スペクトル 第１図に示す通りである。 ：６）赤外部吸収スはクトル 第２図に示す通りである。 ＋７）＃削ＶＣ対する溶解性 水ＶＣＯＪ’　溶、メタノール、エタノール、アセトン
   、エーテルに不溶 （８）呈色反応 中　モーリッシュ反応　　士 （１１）アンスロン反応　　　十 自１０　　システィン−硫酸反応　　−４Ｖ）　　アニ
   リン−塩酸反応　　　−（Ｖ）　　カルバゾール−硫酸
   反応　　±（わずかに反応）榊　エルソンーモルガン反
   応− Ｖ＋＋＋　　ビユレット反応　　　− （１１＋＋＋）　　ニンヒドリン反応　　−（９）塩基
   性、ｍ性、中性の別 本物質の０．５−水溶液の−は４．７５付近である。（
   溶解前の純水の−＝５．６５１Ｑｌ　　物質の色 本物質の凍結乾燥物は白色繊維状である。 Ｑｌ）　　構成糖の種類 シリカゲルプレート（Ｍｅｒｃｋ　ａｒｔ−４５５５′
   ５．２０　Ｘ　２０３）を使用し、薄層り。７．グラ、
   イー１よ暮構成糖。樵３．調べた。 条件： 試料を２　Ｎ　−Ｈ，８０，で沸とう水中４時間加水分
   解し、炭酸バリウムで中和［Ｆｉ過」７た。ｐ液を濃縮
   後リン酸処理をほどこしたシリカゲルプレート（Ｍｅｒ
   ｃｋ　ａｒｔ、ム５５５５　２０Ｘ２０ｃｔｎｌにスポ
   ットし、約７時間、Ａの展開溶媒を用いて展開し、Ｂの
   発色剤で発色した結果、 Ｇｌｕｃｏｓｅ Ｇａｌａｃｌｏｓｅ ＧａｌａｃｔｕｒｏｎｉｃＡｃｉｄ 未確認糖 の存在が認められた３゜ 同様の方法でＣの展開溶媒を用いて展開し、Ｂの発色剤
   で発色し７た結果、本物質の構成糖として認められた未
   確認糖は ａｈ　ａｍｎ　ｏ　ｓ　ｅよりもやや高いＲｆ値を与え
   た。 Ａ　イノプロピルアルコール、アセトン。 ０．１Ｍ乳酸をそれぞれ４：４：２の割合で混合１７た
   もの。 Ｂ　アニリン４’ｌｌ、’）フェニルアミン４ｇ、　ａ
   ｃｅｔｏｎｅ　２００１１．　Ｈ＠ＰＯ４８０Ｓ５０ｄ
   １を混合したもの。 Ｃメチルエテルクトン：ｎ−ブタノー ルニホウ酸緩衝液（ｐ！４８．９４） ＝　４０ｓｃｊ　：　４０ｉｅｇ　：　５ｓｃｌ；に混
   合したもの。 α２　構成糖の組成比 試料を２　Ｎ　−）１，８０．で沸とう水中４時間加水
   分解シフ、炭酸バリウムで中和１濾過し、その炉液に含
   まれる軸を、中性軸については、アルディドールアセテ
   ートの形に変えた後、条件１で１　嘩ＥＣＮＳ８−Ｍ（
   ５ｍ　ｌカラムを用いたＧＬＣによって（ＪｊＬ５１Ｗ
   は七のＧＬＣチャートを示す）、また Ｇａ１ａｃｔｕｒｏｎｉｃ　ａｃｉｄ　　Ｋついては、
   アルディドールＴＭＳ＠導体の形に変えた説、条件２で
   ５　％　５ｉｌｉｃｏｎｅ　８１Ｂ−５２（５ｍ　ｌカ
   ラムを用いたＧＬＣによって（第４図１まそのＧＬＣチ
   ャートを示す）定量ｌ−た。その結果、 Ｕｌｕｃｏｓｅ　：　Ｇａ１ａｃｔｏｓｅ　：未確認糖
   ：０ａｌａｃｔｕｒｏｎｉｃａｃｉｄ 二に〇、８〜１．２：０．２〜１．０：０．０２〜０．
   ６の比率であった。 第５図で１けＧｌｕｃｏｓｅ、　２けＧａ１ａｃｔｏｓ
   ｅ。 ６は未確認抛である。 第４図で４ｉｊＧＩｕｃｏｓｅとＧａ１ａｃｔｏｓｅの
   混合物、５　ｉｊ　ｎａｌａｃｔｕｒｏｎｉｃ　ａｃｉ
   ｄ％６け未ＭＩｉ認糖である。 条件１：カラム温度　１９５℃恒温 検出器及びインジェクション温度２５０℃キャリアーガ
   ス　Ｎ、　４０ｄ／Ｍｉ　ｎ条件２：カラム塩［１５０
   ℃〜２５０℃（２℃／ｍ　！　ｎ昇温） 検出器及びインジェクション温［２５０℃キャリアーガ
   ス　Ｎ、　　４０ＷＬｌ／ｍｉｎ標準サンプルは、米国
   ファンステイール社より購入したものを使用した。 なお禾確認鞄の定量のための標準サンプルとしてルｈａ
   ｍｎｏｓｅを用いた。 ２、次の理化学的性實を有する高分子多糖類物質ＭＰ８
   −８２を有効成分とする免疫賦活剤。 （１）　　元素分析 Ｃ：５８０５チ Ｈ：　　６．５２チ ０：５５．２１チ Ｎ：　α２４チ （２）　　分子量 （１）　　限外濾過法による場合。 ８ｅｐｈａｒｏｓｅ　２　Ｂによる限外濾過を行なった
   。 カラムサイズ２．５　ｘ　４０．５画；フラクショ７５
   ｇ；試料２ＩＩｓ？（ｔ５ｍｊ）を負荷；展開剤０．０
   ２　ｑｂＮａＮ、水溶液、の条件により、本物質はほぼ
   Ｖｏｉｄ　Ｖｏ１ｕｍｅ付近に分画される。 （１１）超遠心法による場合。 ０、０２　Ｍりん酸緩衝液（−１７５）に０．１チ濃度
   で溶解した試料について超遠心法（設定回転数５１２０
   ０ＲＰＭ１により沈降定数を求めたところ２．０８（８
   ：Ｓｔｅｄｂｅｒｇ率位＞　テ、　カつ単一性ｔ’示し
   た。 （３１融　点（分解点） 本物質は２２５℃付近から変色が始まり、２７０℃付近
   ではとんと黒褐色に分解する。 （４１比旋光度 ［（１）　　＝＋１１２±５°（Ｃ＝Ｑ、２５１（５）
   　　紫外部吸収スペクトル 第１図に示す通りである。 （６）赤外部吸収スペクトル 第２図ＶＣ示す通りである。 （７）　　浴剤ｖｃ対する溶解性 水１／Ｃｔ＝Ｉ溶、メタノール、エタノール、アセトン
   、エーテルに不溶 （８）呈色反応 中　モーリッシュ反応　　十 （１１）アンスロン反応　　　十 （ｕｉ）　　システィン−硫酸反応　　−（ＩＶ）　　
   アニリン−塩酸反応　　−（Ｖ）　　カルバゾール−硫
   酸反応　　士（れ検収反応）（ｖｌ）　　エルソンーモ
   ルガン反応　　−〜ＩＤ　　ビユレット反応　　−− （Ｖｌｌ＋１　　ニンヒドリン反応　　−（９）塩基性
   、＃！性、中性の別 本物質の０．５慢水溶液のｐｉ（Ｉ／′ｉ４．７５付近
   である。（溶解前の純水の−＝５．６５１四　物質の色 本物質の凍結乾燥物は白色繊維状である。 ａＯ構成糖の種類 シリカゲルプレート（Ｍｅｒｃｋ　ａｒｔ、Ａ３５５５
   ．２０　％　２０　ｃｐｎ　）を使用し、薄鳩クロマト
   グラフィーによる構成糖の種類を調べた。 条件： 試料を２　Ｎ　−１（、Ｓｏ、で佛とり水中４時間加水
   分解し、炭酸バリウムで中和後沖過した。Ｆ液を濃縮後
   リン敏処理をほどこしたシリカゲルプレート（Ｍｅｒｃ
   ｋ　ａｒｔ、Ａ３５５５　２０Ｘ２０ｃＩｍ）にスポッ
   ト【２、約７時間、人の展開溶媒を用いて展開し、Ｂの
   発色剤で発色した結果、 Ｇ　ｌ　ｕ　ｃ　ｏ　ｓ　ｅ Ｇａｌａｃｌｏｓｅ Ｇａｌａｃｔｕｒｏｎ　ｉｃ　　　Ａｃ１ｄ禾確認糖 の存在が認められた。 同様の方法でＣの展開溶媒を用いて展開し、Ｂの発色剤
   で発色した結果、本物質の構成糖と［７て認められた未
   確認糖は Ｒｂａｍｎｏｓｅよりもやや高いｉＬｆ値を与えた。 Ａ　イソプロピルアルコール、アセトン。 ０．１Ｍ乳酸をそれぞれ４：４：２の割合で混合し７た
   もの。 Ｂ　　−ｆ二＋）：ｙ４ｍ、ジフェニルアミン４ｆｌ　
   、　ａｃｅｔｏｎｅ　２００ｍｌ　、　８３Ｐ０４８０
   　％５０１、を混合し之もの。 Ｃメチルエチルケトン：ｎ−ブタノー ルニホウ酸緩衝液（ｐＨ８，９４） ＝４０ｄ：　４０ｍ：　５！ｌ！Ａ’に混合したもの。 （１２＋　　構成糖の組成比 試料を２　Ｎ　−Ｈ，８０，で沸とう水中４時間加水分
   解し、炭酸バリウムで中和ｔｌｋｒ過し。 そのｐ液に含まれる勧を、中性軸については、アルディ
   ドールアセテートの形に変えた後、条件１で１ＳＥＣＮ
   Ｓ８−　Ｍ　（５１１）カラムを用いたＧＬＣによって
   （第６図はそのＧＬＣチャートを示す）、また Ｇａ１ａｃｔｕｒｏｎｉｃ　ａｃｉｄ　　については、
   アルディドールＴＭ８ｇ導体の形に変えた後、条件２で
   ５　’ｌｋ　８ｉ１ｉｃｏｎｅ　８ｇ−５２（５ｍ　ｌ
   カラムを用いたＧＬＣによって（第４−はそのＧＬＣチ
   ャートを示す）定量した。その結果、 Ｇｌｕｃｏｓｅ　：　Ｇａ１ａｃｔｏｓｅ　：未確認軸
   ：ＧａＪａｃｔｕｒｏｎｉｃ　ａｃ、１ｄ＝ｉ：ｏ、ｓ
   〜ｔ２：α２〜１．０：０．０２〜０．６の比率であっ
   た。 第６図で１はＧｌｕｃｏｓｅｓ　２はＧａ１ａｃｔｏｓ
   ｅｓ３Ｉ／ｉ未蓚關抛である。 第４図で４はＧｌｕｃｏｓｅとＧａ１ａｃｔｏｓｅの混
   合物、５はＧａ１ａｃｔｕｒｏｎｉｃ　ａｃｉｄｓ　６
   は未確認軸である、 条件１：カラム温度　１９５℃恒温 検出器及びインジェクション温［２５０℃キャリアーガ
   ス　Ｎ！　　４０ｄ／′Ｍｉ　ｎ条件２：カラム温度１
   ５０℃〜２３０℃（２℃／ｍ　ｉ　ｎ昇温） 検出器及びインジェクション温度２５０℃キャリアーガ
   ス　Ｎ、　４０−／ｍｉｎ標準サンプルは、米国ファン
   ステイール社より購入したものを使用した。 なお未確認軸の定量のための標準サンプ