JPS58157721A - イカリソウ属植物からの多糖体ｐｓ−ａを有効成分とする感染防禦剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、ター１゛不Ｓ１イカリソウ属（トｐｉｍｃｄ
ｉｔ＋ｍｓｐ、　＞植物の全県から得られる多糖体（Ｐ
　Ｓ　−へと命名）を有効成分どりる感染防禦剤（、関
りる１゜ 本発明省らは、′）ｌＬＩＬ狛願１昭Ｆ＋６−６５８９
２シ〕にＣ免疫増強作用をｔｌづる多糖体Ｐ　Ｓ　−１
＼の抽出、単離に成功したが、史に（ＩＪ１究の結果感
染防禦作用もイｊ刀ることを発見１２、本発明を完成［
７に、。

以ド【Ｊ本発明を１ｉ−１細に説明ザる。

；１、ず、本発明の多糖体Ｐ　Ｓ−△の理化学的ｔａ°
Ｃ′（は次のとＪ＞す（ある、。

１　九京分析：　　Ｃ：　：　４０．９２　　Ｈ：　　
６．１７ｆ人　分　：　１救　量 ２　分イＩが：　　７５，０００１．２！ｉ、０００　
（５１７均分子挙）、′３　物’；ｆ　ｆ７）　ｔｌ状
：　　ｌ’、Ｉ　Ｃ，ｅ　−黴かッ（７２不定形粉末１
゜／１　分解点：２０５°０ ５）　ゼ、鯰１斗部吸収スペ・′／トル：２４０・〜・
４０　（ｌ　ｎ　ｍに極大吸収は認められ＞７い。

０　赤外部吸収スペクトル：　第１図のスベシ［−ル’
ｔｒ　；１．１　、、　νＫＢｒ（ｃｙ＋＋　’　）　
　３４００゜２９００．１Ｇ２０．１４００，１２：１
０，１ｏ（ｉｆ）７　　「）Ｎ　：　　７．０　　（Ｐ
　Ｓ　　Ａ　１（１０ｍｇを水（ＩＯ藪に溶解するとさ
） と〕　溶解個、５１溶・・・水、。

不溶・・・メノノノール、１タノール、アセトン、耐酸
１’　Ｊｌル、 シ１プル土−Ｉル、へ１ 橿）ン、り［」［）ホルム１゜ ９　１ｔｌｉＴｈ光１−’Ｑ　：　ｌ　（ＸＪ１９−−
−−−２３．６°　＜　８２（’、）　中、Ｃ＝　０．
５２７％） １０　　甲色艮応： １・り（の諸反応に陽性を小ヴ。

帆））７ンスロンＭＩ酪反）、１≧、　（ｈ）シーリッ
ジ？反応＋（′：＋、λ力１・−ル反応　（（１）ビア
ル綬応次の諸反応（Ｊ陰ｔｅ＋を承り−３゜ 〈ａ〉−ンじドリン及応　山）　２．４−１）　Ｎ　Ｐ
　Ｉ史に＋（Ｃ１（２リヴ戸ノソ［之Ｉ心　（巾ナツト
レゾルシン応　（０）カルバゾールＩ＋ｊｉｌ酸反応１
１　　４ｔ１成糖　： 多糖ｆホ［〕Ｓ−△２０ｍｇに１規定硫醸（）藪を加え
、２助間ｉｏｏ℃ζ゛加熱、ｊＷ流する、、冷後、水酸
化バリウム（中和（〕、沈殿不土切し、１コ１られＩ、
：ｄＭ液をペーパーク１］７トグンフイーにか（）るど
アラ１でノ′−スとカノクＩ・−スの６台か確認さｔｌ
＜、。

１２　均一ｆ１： （ａｌ超連心 平衡密度勾配遠心　（　１２０，０００ｇｘ　７２１１
ｒ’＋間。

ＣａＯア・）で甲　。

山〉電気原動 ＰＩｌ酸［！ル１ー１ースＩＱ（２０−２５Ｖ　／■，
２時間）て゛甲−−。

（（二〉ゲル蘭過 し〕−ｉ１　７ツクスＱ　　ＨｌＯＣ甲　。

次に、本発明の多糖体Ｐ　Ｓ−Δの抽出，中離、精製方
ン人につい（述ぺる、。

第１１稈 一ｒカリソ「“）属植物を水に北和する有機溶媒と水ノ
の１昆含）容ｆｆ．　、１．７ζは水のいずれかぐ抽出
し、５− １０られｌ，抽出液を減１ｆ下濶縮する。この際、水に
混和する有機溶媒どしくはメ々ノール、１−タノール、
イソゾに」パノール等の低級アル］ール類、アセｌ−ン
等のケ１ーン類、ジオキサン等の水【Ｊ混和１ｊる「−
　１ル類等を用いる５，またこれらの混合有機溶媒を用
いてもよい。また抽出溶媒としく、１規定以■この濃度
の耐酸等の低級脂肪酸類、１モル以りの濃度の１ニタノ
ールノノミン舌の水と混和りる低級ノ７ミン類、１現定
以トの濃度の水酸化す１〜リウム等の水に易溶目つアル
カリ例を示づ水酸化物も用いることかでさる。水性抽出
液を得るこの操作は、濃縮操作のことを考えると、水に
混和する有機溶媒と水どの混合溶媒を用い有機溶媒の容
量が５０％以下のブｊが好ましい。また本発明に使用す
るイカリソウは、市販の全草をぞのまま用いてもよいが
、細切を用いるｈが好ましい。

第２１−稈 こうしく得た水性抽出液を脱脂ηる。この操作は省略（
−ることがＣきるが、製剤」の面を考６一 慮づるど行−）ハが好ましい３゜ 脱脂操作（、上、水性抽出液に耐酸ニブル宿−の低級脂
肪酸−ｌスノル類、り１１１ロ小ルムのハ「Ｉゲン化炭
化水素類、ジ土チル１−フルＵ゛の水Ｉ５二？ＩＸ和し
にくいＩ’　−７−ル類、１）−ヘキリン秀の脂肪族炭
化水素類等の有機溶媒の１神父は２秤取１−の混合溶媒
を加λ１、激しく振盪した後、水層のみ分取りイ）。得
られた水層はＩ’ｒ、］様の操作を３３・〜５回行）ｌ
、−後、水浴−１−Ｃ゛加ｆ？＋１ｆ　シ（わずかに残
っているイｊ　ＨＮ　ｉｆｆ媒を除き、濾過づることに
よりｆＩＱ脂した抽出液と２７る３、なお最初に脱脂操
イリをＣｓ　・〕だ後、水に混和−りる有機溶媒と水ど
の混合溶媒または水のいずれかで・抽出してもＪ、い。

第３１稈 （−の脱脂した水ｆ１抽出液に水と任意に混和りる有機
溶媒を加え、沈殿を析出させる。生じた沈殿を瀘取後、
水、！−（ｆ怠に混和づる４１機溶媒にで洗浄覆る３１
次い（、この沈殿を水の中に汀いた後、水と任意に混和
するイ」機溶媒を加え、丙Ｉ良沈殿を析出させる１、生
じ／、：　ｒＡ：殿を濾取し、減７− ｊｌｌ・乾燥さＩＪるど抽出物が１ｑられる９、この際
、水と（Ｔ意に混和判る有機溶媒と１．（は、メタノー
ル、１タノール等の低級ｊ′ルー］−ル頼もしくシ上−
ノ′セ（・シ′、：ｑの９１〜ン類を用いる１、まＩこ
これらの混合Ｗｆ媒を用いてもよい。こうり、　＜　ｑ
：＋られた抽出物は水（再度抽出し精製１．．−Ｃ’　
ｂよい。即ぢ窄）帰ト、水をＩＪｌｌえ、充分撹拌後、
濾過−（する１、この曜液を減１１１・、製綿乾固りる
。二と；こより精製（・さる、。

第４−１稈 第３１稈Ｃ′１ｑられた抽出物を無機塩ホ溶′ａＩｒＪ
溶解さ１！る。烈ｍ塩水溶液どしＣは硫酸すトす、ラム
文（Ｊ塩化］１〜リウム水？８液が好２Ｌシい。次に、
しｉルトリメヂルアンモニウム塩、セヂルビリジーウム
塩等の長鎖をイ］する第１１級ノ′ンしニウム塩４加オ
、′１−じ１．：沈殿を濾過Ｙは、辿心分顛（除去ＩＪ
る。純液を分取し、水ど任意（Ｊ混和づイ２右機溶媒を
加え、１１−シた沈殿を蘭取りる。

第１）［稈 ン啼’５／Ｉｔ稈で得られたン１：Ｉ股に水苓力１１え
、＋’ｌ　ｊ＋−４’、」Ｆ３− Ｔ；　Ｊｌｌｌ　’ｌｒｎ　ｉ□、ｌ　５：ｒｉＪ　ｆ
ｉ７打し２溶解サケる。（二の溶Ｈ）を限外濾過し、濾
過膜を通過りる物質を除去づる１、肱１に捕捉された淵
縮液に水を加オ、１分に撹ノ°１′、希釈しＰｉび限外
濾過りる。数回、この操作を（−ｊい１１う）を通過１
１る物質を完全１こ除去・ｊる。

膜ｌに捕捉されＩこ淵縮液を分取し、水を加え、に釈し
た後、水どイ「愚に混和（する（ｉｔ幾溶媒を加えると
沈殿が１９られる１、 第６エ程 Ｊの沈殿を水に溶解後、ゲル法過等の分１′−４・るい
効果を有づる担体を用いｌ：り１１７１ヘグノ−ノイー
に付し、添ｆ１図面第２図のトｒ−１に該当覆る両分を
分取することにより、本発明多糖体ＰＳ−八が％１られ
る。

６１１記多糖体１’Ｓ−Δの感染防禦効果をＭｉ認づ゛
るため、以トに示り試験を（）・ンた、１（１）感染防
禦効果判定試験 （１）大腸菌 本発明多糖体をｒ　ｃ　Ｆ＜　、、Ｊ　Ｃ１，系５週令
却マウス〈体手約２！ｉ０　＞　１君Ｙ１０ＰＴ！に１
「１１９− 回５ｊ［ｌＩ７！Ｉ沖１：ｌ　Ｎｔ　５同背部皮Ｔ役す
した１、λ・ｊ魚群には生理食塩水（以下Ｐｓど略９）
を投句しｌこ。ｒｓ　ｎ　［＋に大腸菌（ｌ　、　ｃｏ
ｌｉ　　Ｍｉ　４７０７株）を般腔内投与した。菌接秤
後、ン’　）ｊｌ−１に１１ノる１１台匹数を観＊　Ｌ
　ＩＪ１１結宋を第１表に示り。

第１表　大腸菌に苅り−る効果 本発明多糖体投与にＪ、す、大腸菌（に勾りる感染防禦
効果が認めらねた。

（２）緑１１ｔ！菌、黄芭ブドウ球菌、ｌｌ１ｌＩ炎桿
菌、サルしネーノ菌、変形菌。

（１）と同様の５払で緑膿菌（Ｐｓ、ａａｒｕ−１！１
ＴｌｌＳｉｌ　　７０１”　１株）、黄色ノ゛ドウ球菌
（Ｓ。

ａｕｒｃｕｓ　　Ｓｍ１ｌｔ＋　　ｄｉｒｆ＋＋ｓｅ株
）、肺炎桿菌１０− （Ｋ　、　　ｐｎｃｕｍｏｎｉａｅ　　Ｇ　Ｎ　Ｇ４４
５株）、リルーＩ−ネーノ菌（Ｓ　、　ｅｎｔｅｒｉｔ
ｉＣｌｉｓ　Ｎ６−４５株）、変形菌（Ｐ　、　ｖ＋＋
ｌ！に＋ｒｉＳＧＮ　ｈ７３７株）を用い試験した。結
果を第２表に７１−＜　ｔ、ｌ。

−１１− 第２人　緑膿菌、黄色ｆ１−ウ球菌、肺炎桿菌、リルモ
ネーン菌、変形菌に女・１リ−る効果 ｆ注）：１；リルモネラ菌の生存画数は菌接種後１４０
後に１１５２察した。

木Ｒ，明多糖体投りにＪ、す、緑膿菌、黄「１゜Ｉトウ
球菌、肺炎桿菌、サル１ネラ菌、変形菌の８菌に対Ｊる
感染防禦効果か、忍めＩ）れＩこ。

（３）免疫低下時における大腸菌 本発明多糖体をＴＣＰ／ＪＣＬ系５週令姉ンウス（体重
的２５０　）　、１群１０匹に１「１１回４［」間連日
Ｊ１４回チーｖ部皮下投りした。

対照群にはＰ　Ｓを投！ｊした。本発明多′ｖＩ（Ａ投
ち開始日にナイフ１」小スノアミド（２００１１１！１
．′ｋ（！捧弔）を腹腔両投！３した。本発明多糖体＠
終段ＬＪ翌日（５日日）に大腸菌（Ｅ　。

ｃｏｔ　ｉ　　Ｍ　Ｌ　４７０７株）を腹腔内に接種し
た。

菌接秤後７日目にお（プる生存画数を確認した。結束を
第３表に示す。

第：３表　免疫低下時にお（プる大腸菌に対づ−る効梁
−１３３− −１ｋ　　−一 本ざｔＩ］１１多糖体授り（３二より、免疫低Ｆ　ＩＩ
においｌも大腸菌に対”りるｒＡ染防禦効果が認められ
た。

（，１）免鳴・低ト時にお（Ｊる緑膿菌、菌色／ドウ球
菌、変形菌。

（３）と同様のｈ法ｒ緑膿菌（Ｐｓ、ａｃｒｕ−ｇｉｎ
ｏｓａ　　７０ｐ　ｌ’［株）、黄色／ドウａ菌（Ｓ。

ａｕｒｅｕｓ　　Ｓｍ１ｔｈ　　ｄｉｒｆｔ＋ｓ（！株
）、変形菌（Ｐ、　ｖｕｌｇａｒｉｓ　　Ｇ　Ｎ　５７
３７株）を用い試験し１．Ｔ、、結架を第１表に承り。

第４表　免疫（１，（’Ｆ時にお（プる緑膿菌、黄色Ｖ
ド「“］球菌、ゆ彩画に灼り−る効果 、−ｉ　４− 木発明多糖体投！ｊ　ｋＩ　Ｊ、す、卯、疫ｌ＋（’−
１・Ｉｌ：’＋　ＩＪ（１メい（も緑膿菌、黄色７１置
ソ球菌、変形ｂ：ｊの各画に対する感染防禦作用か認め
られＩＱ。

（５）抗／１物貿どのイノ１用 本発明多糖体をＩ　ＣＲ、′、１０１系５週令刊マウス
（体重的２４１０　＞　、　１群１０匹に１回（１、１
ｎｌ　（１、′ｋｇ１木手、、’　Ｅｌ、１　［１１回
５Ｆ１間連［１１ｉｊεシ同背部ＩＱ下ＩＱＬ−Ｊした
。り・１照群にはＩ’Ｓを投Ｌ）し／＝−、６ｔｉ目に
大腸菌Ｎ、ｃｏｌｉＭ　１．４７０７株）を　１．Ｏｘ
　１０７個を腹腔内接秤し人：ｏ７ンピシリン（？１　
Ｑｉｌ用７ンピ′ジリンノ］・リウムー富山化学製）　
１２．５ｍＱ／’ｋＧ！休Φを０；１攻体！？　ｉ内接
及び攻撃４１１．’ｉ間１りの２回、各々のマウスｉ４
背部皮ｒ−没パＪしノ、−ｏ結果を−）ＩＪ人（Ｊ承り
、。

４＼光発明糖体は抗）（物質ど（Ｍ用効果を示した。

（６）免疫低−ト時にａ３Ｌｊる抗生物質との（ＪＩ用
本発明多糖体を？　ＣＲ、・Ｊ　Ｏｒ系［）週令雌１ノ
ウス（体中約２５す＞　、　’Ｉ　ＦＪ　ＩＯＭＬｔ、
二１同０．０！ＪＣＪ、、’　ｋｇイ木Φ７・７日、１
　Ｆｌ　１　ｒｒｌｌ　／１日間）申ｆ−１ｉｆ　’ｌ
　ＩＦ′ｉＩ曹部皮十投与シタ。２４　！ｔｅ１１１１
１ｊ　ｌ、ｉ　ＰＳを投すした。本発明多糖体投！−ｊ
Ｉ７ｉｌ始［」に４Ｊイクロボスノノ７ミド（２０’ｂ を腹腔内投ｔｊシた。本発明多糖体最終投Ｉノ翌ｒ：’
＋　＜　！−＋　Ｅｌ目）に大腸菌（１−、ｃｏｌｉ　
　Ｍ１４７０７株）を１．ＯＸ　１０６個、、、、’　
Ｉ２′Ｌを腹腔内に接種し、１時間後アンピシリン（注
射用７ンピシリンナ１〜リウムー富山化学製）　６．２
５ｍｇ、、／　ｋｇ体重を背部皮１・投ＩノしＩご１．
菌接種後７日目にお（りる生存ｖＬ数を確認した。結果
を第６表に承り。

第６表　免疫低下時における抗９−物質どの（７１用効
采 免疫が低下ゴるど抗４［物質の効果は一１分に発揮さ“
れないが、本発明多糖体を投〜４るど（７１用効宋を示
し、感染防禦作用は増強し　ｌこ　、。

以、Ｉ、　（１）・＝　（６）の結果より本弁明多糖体
は単独、他の抗菌物質との゛併用及び免疫低下時にお１
．−Ｊる単独、他の抗菌物質とのｄｉ用いずれにおいで
も感染防禦作用のあることが判明した。

（ＩＴ）急性青竹試験 リッチフィールド　ウィルコクラン法〔、Ｊ。

ｐｈａｒｌｌｌ、　ｅＸｐ、丁ｈｅｒ、　　９６９９　
　（１９４９）記載〕′Ｃ行ったところＩ　ＣＩ’＜　
、′’　、Ｊ　ＣＬ、糸紐マウスにおＧノるＬ　Ｉ）　
ｂｏ　（ｍＯ，、／　ｋｇ）は、静脈経路ｉ’　４０（
１１７− 以１（′あ−）た。

以−１の試験例から明らかなＪ、うに、本発明多糖体は
低毒性ひ、感染防禦作用を有りるので感染防禦組成物と
して単独あるいは他の４７＋、間物ｒ１ど併用して使用
覆ることができる。本発明多糖体はいずれの抗菌物質と
もｆＪＩ用、配合りることがひき、例えば、アンピシリ
ン、７’　”Ｃ：　：Ｆシンリン、ビベフシリン、カル
ベージリン、シウラシリン、ヘタシリン、プロピシリン
ｊ　フルルＩ’ｉｌ　４→ノシリン、り］ＩＶリシリン
、第４ニー＋ｊシリ〉等のペニシリン系抗ノド物質、セ
フアレ１シン、セファ「１ヂン、レノ１フ１１リジン、
セファゾリン、］！ファ１」グリシン、セフォタキシム
、セフォペラゾン等のレノｔ’　１．１スポリン系抗イ
［物質、ブ１ナンでシン、ノタモ↑」）等のβ　ラクタ
ム系抗・′１物Ｙ’ｉ、シ１１ノンイシン、」−リス１
−１フイシン、ｔ　ｌノアン（・マイシン、キタサマイ
シン・、スビラ＼）・インン秀のンク［ニビノイト系抗
生物質、ミノリイクリン、ｌ’　１シサイクリン、メタ
リーイクリン、ノドフリｒクリン、り１−１ルノ１〜う
→ノイクリン、１８− Ａキシｊトラリ−イクリン、−ノ゛メ１ルク［１ル）１
〜う（ノイクリン、ビ１１リジ、／メＪルラ］・フリー
（ｆ）リン等の１１ヘラリイクリ：ノ系抗牛物質、スト
１ノブトマイシン、リピドマイシン、γンク＼／イシン
、バ１１モンイシン、カナマイシン、フ１フジオマイシ
ン秀のアミノグリコシト物質生物貿、グソミシジン、ハ
シ１ヘー）シン、−１リス−Ｆン、ポリミギシンＢ舌の
ポリベグチド系抗牛物質、パリＡ−’ｆン、アンボ）−
リシン［３，、ｌヘリコマイシン、ペンタマイシン、ビ
マシリン、ツイスタ”１−ン等のポリ■−ン系抗Ｚ１．
物ｖ１．１ｊフアマイシン、リン：１ンイシン、）−リ
ンキスＭ’Ｎがあげられる。

なお、水発明第糖体１〕Ｓ　　△の１１用メカーズ′ム
は不明＜’ｒ　ｆ＋Ｘが多いが、免疫増強作用、感染防
禦作用から考え多糖体Ｐ　Ｓ−八は生体防禦機構を蕗し
く１１ｊすしＣ２いることがｒ１１明した。

このことから、制癌剤、癌転移防ｔｌ−剤等の用途ｂｌ
ｌｌ！持（゛さる。

本発明多糖体４人ｌＡに投ｌ）、）るに当−）（は経ｒ
−，Ｉ　ＩＱ　’、Ｊ、ｔ、１．：　＊Ｊ　（皮１・、
筋肉、静脈）ぞの他のノ”Ｊン去が川（ハられ／、ｌ　
。

経［１（Ωｊ）の際、固形製剤どしで用いる場合（，１
１、錠剤、顆粒剤、散剤、カブｔ・ル剤等にりるごどが
（さ、製剤−１般に使用される糖類、ヒル１１−ス調合
物のＪ、うな賦形剤、Ｃ゛んぶんペースト、メｆル１ご
ル［１−スのＪ、″）な結合剤、増量剤、ｔｉｎ壊剤秀
の添加物を包含し・（もよい。また経し］用液体製剤と
しＣ用いる場合は、内用水剤、懸濁液剤、乳剤、シ［ｌ
ツブ剤などの形・態であつＣも良く、また使用づる前に
再溶解さｌ！る乾燥イ［酸物σ）形態てあつ（もよい、
１ ｉ′１川の揚台（、［、水溶液、懸濁剤、浦ｆ１又は水
溶性マ１．剤の形態Ｃ゛あつＣも良いが、通゛常滅菌水
又はｔｌ−即食塩液イＣど水性液体媒体に溶解又は懸濁
することに１、り調整される。必要に応しＣ一般に使用
ざ４′ｌる溶解剤、安定化剤、保存剤、署張化剤などを
加えＣも良い。

（二のように１〕て４Ｆ７られＩ、−ンＩＱ’ｊＭ剤は
筋肉性ＱＪ、成上？、４：　ｌ：Ｆｆ等適当な／ノ法で
投〜される。この際の用事は、症状、イ１齢、剤型、投
”ｊ　Ｚｊ法等に」：り適宜増減される。１ 本発明多糖イホ（ま通常、（ｌｊＨ１５・・２　、　（
ｌ　Ｈａ　ｑ　、。

ｋＯを１［１１・−・・数回【こ分ＩｔＣ投′ｊりるの
が好ましい１゜ 次に、ホヅＣ明の実施例をｉｊ’：　シＣ更（こｉｉ’
ｆ細に説明１Ｊるが、本発明は、これに限定されるもの
（（、Ｌない、。

製造例 重版のイカリソウ（４バＩイカリソウ、韓国産）細切２
ｋｏに５０％Ｊ、タノール（Ｖ、、、、／Ｖ　）　１！
ｉｆを加え、）玉が１冷１’ＪＩ器を付し、水浴−１５
０℃で０晶間加温抽出しＩζ。抽出後、温時濾過し、残
Ｒ１，１Ｗｉ　／コに５０％［り／−ル（Ｖ　、’Ｖ　
）　１！＋ｉ”Ｊ”Ｌ）　−Ｃ・同様ｔｒ抽出、縮退操
作を３３回行った。全−液を合わ１！、減Ｌｔ−Ｆ４５
℃τ′淵縮し、水１ヰ仙出液１０１を盲ｉ、５、この抽
出液を分液１］−１・に入れ、酢酸１ノ′ル５〕夕を１
」１１λ（酒しく振饅し、水層のみ分取しｉ、：１、こ
の水Ｒｊｉは１１１ｋ（、：、？！′１ｉＩｌｌｉ１ｆ
ル５オずつで同様な抽出を３１！’！Ｉ行）だ１．水層
を減バー１−淵縮し、残存１する耐酸Ｔ　ｆ−ルを留去
した後、蘭過し２１− た、、濾液に一■タノール；３０！を添加、撹１！後、
−夜装置し、析出−ヴる沈殿を濾取した。沈殿を一■−
’ｉ　／　−）し２００ｔＦ　−（’　？ｆ’ｃ　ｒｆ
１シ／、＝ｊ糸、水２ｒにｉ］ぎ、次いでＪタノールＦ
、３１を添加した後沈殿を濾取した１３分取し１．−沈
殿を減ハ■・乾燥し抽出物２０（］を得た。この抽出物
を水１オにて抽出後、濾過し、濾液を減ＦＬ＋Ｇ縮※２
燥し茶褐色粉末状の抽出物１６ｇを得た。

この抽出物１６９に（１，０２モル硫酸ブト“リウム水
溶液１１を加え、７１０°Ｃて゛加温撹拌後、温時濾過
した。３０・〜、４０℃加温−ト、この濾液に１０％−
レチルｌ−リメブルノ′ンモニウムブロマイド水溶液１
００猷を加え、−夜３７℃にて保温、静詔後、遠心力＃
ｌ（３，０００ｒ、１＋、ｍ、、１０分間）し、」−澄
液１！を得た。この１澄液に３１の゛ｌタノールを加え
生じた沈殿（３，Ｏｏ　）を濾取した。この沈殿（３，
Ｏｕ　）に水１！を加え、４０℃で加温、撹拌後、温時
濾過した１、この濾液は更にミリポアフィルタ　ＡＰ２
０（径１４２ｍｍ　、　Ｈ本ミリボアリミツｉツドネ］
製）、ミリポｊ７メンｊランフィルタ２２− １１Δへｌｌ　（径１４２０１１１１　、孔イ￥０．４
５ｔｔ　ｍ　、　ｆ］木ミリポアリミッ゛ノ゛ツドネ１
製）を用い（］ｄづ過（また、。

（二の濾液をミリボノノベリ」ン限外薊過膜ＩＩＳ△０
（公称分子串限外伯ｉ、ｏｏｏ、日本ミリポｊ′リミッ
ノッドネ１製）を用い（限外濾過し、膜通過部を除去し
た。次に、膜不通過部に水！ｉ　００　ｉｌを加え、希
釈後、１１）疫限外濾過した。この操作を３回行った後
、股不通過部を分取した。モしく、ｌＩＱ不通過部を水
に１’　２５（１’Ｅｌに希釈し一１タノール１夕を加
えると沈殿どし”Ｃ抽出物２、Ｏｇを得た。

この抽出物を水２０ν！に溶′解後、ｌｌ）、・デック
スＧ−１５０カラム〈径５０１ｎｍＸｆｉさ６００　ｎ
ｌ　Ｉｌｌ　、ファルンシアノ１１インケミカル着製）
に付し、水１０ν！ずつで溶出し　１；）０の両分を得
た。各々の溶出画分の一部（２＃！稈度）を順次フェノ
ール硫酸法にて発色させ、　４９０１１ｍの吸光度（Ｏ
Ｉ）　’）を測定した。第２図のＦ　ｒ　　−１に該当
づる画分（溶出画分番目３０・〜・５３）を選択、集取
し、減圧濃縮゛）いＣ凍結乾燥り−ることにより本発明
多糖体ＰＳ八６００ｎ１ｇを得た。ぞのｉｌｌ化学的性
質は前述のどおり（・・あった。

実施例１゜ 製３２〜例の万払Ｃ′得た多糖体１０１１Ｉ　！＋を生
理食塩水１００　ｘｌに溶かし５　’ＩＩＩず一つ７′
ンプルに１１人し常法により滅α１しＣ本発明抽出物の
注用液どした。

実施例２゜ 製造例の方払で得た多糖体０．５ｍｇをバイＩルびんに
充填した。これは使用５時、滅菌した水Ｃ・溶解して８
割液と４る３゜ 実施例３゜ 製造例のｈ法（得た多糖体１．Ｏｇ　、結晶］？ル［ｌ
−ス１４０ｑ、ス７アリン酸マグネシウム５す、タルク
４ｇをＶ型混合機τ゛５分間混合する。得られた混合粉
末を直接Ｊ’１錠払で′自径８、Ｏｍｍの隅丸平面の衿
を用い−（，４１錠し、山径８　、　Ｏｎｌ　Ｉｌｌ、
厚さ　３，０ｍ１ｌｌ、申ｉ＄　１５０　ｎｌ　（］の
錠剤１．０００錠を得た。

実施例４．。

製造例の／ｊ法（パ得た多糖体２００＋１１（１、乳糖
９９、８０をＶ望混合機で・′５５分間混合づるｎ２！
］ず゛つ玉ｈシールのアルミアープ包装に入れ散剤を１
ｑだ。

実施例５゜ 製造例の１５法で得た多糖体１．（１（Ｊ　、リン酸水
素カルシウム５００、ケイＩＩ　ｊ’　／レミー「クム
２ｑ、結晶レル［１−ス９５ｇスｊ゛アリン酸マグネジ
’ｙム２ｇをＶ型屁合ｉ１　’（”　５分間ｔｒＡ合し
た後、更にふるいを通してよく混合し、常法に従い、１
力プセル１５０ｍｇのカプセル剤　１，０００カプセル
を１９だ。

【図面の簡単な説明】

第′１図は本発明に用いる多糖体Ｐ　Ｓ−への赤外部吸
収スペクｌ−ル、第２図は第５工程で得られた沈殿を分
子ふるい効果を右りるり１］ントグラフイーにイ〜１し
た際の／／［］マＩ・ダラムを示す。 −２４）−

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １）　下記の理化学的ｔ！！質を有するイカリソウ屈細
   物から得られる多糖体Ｐ　Ｓ−△を有効成分とする感染
   防禦剤 １　元素分析：　　Ｃ：　４０．９２　　Ｈ：　　Ｇ、
   ｉ７沃分：微量 ２　分子給：　　７！ｉ、０００±２５，００［Ｎ平均
   分子＠）３″Ｉ　　物質の竹状：　白色・〜微か・）色
   土定形粉末。 ４　分解点；２０５°０ ！：ｌ　　紫外部吸収スベク［・ル：　　　２４０−＝
   ４（］０ｎｌｌｌに極大吸収は認められない。 （３赤外部吸収スベク１〜ル：　第１図のスペタ１〜ル
   を示す。 ７　　ｐＩｌ：　　７．０　　（１〕Ｓ−Δ１００ｍｇ
   を水！ｉ　０　ｘ、ｅに溶解するどき） Ｅ３　　溶解性：　司溶・・・水。 イ１溶・・・メタノール、ボータノー ル、ジアセトン、耐酸１プル、 ジ］−１ルＪ−アル、ヘキリン、 り１１［］ホルム、。 ］９ ９　比旋光摩：［α１．　　＝、−２３，Ｇｏ　（Ｈ２
   ０中、（、＝　０．４＋２７　　％） １０　　￥色反応： 次の諸反応に陽性を示す。。 （ａｌアンス１−ノン硫酸反応　山〉モーリッシコ反応
   　（Ｃｌｌストール反応　（小ピフル匿応次の諸反応に
   陰性を示づ。 ＋ａ＋　：−ンヒトリン反応　市）　２．４−１−）　
   Ｎ　Ｌ〕反応（Ｃ）＋ごりヴアノフ反応　＋［１）リフ
   トレゾルシン反応　＋ｅｊカルバゾール硫酸反応 １１　　構成糖： ノノ′ノビノースとがラクト−ス、。 １２　　均　　ト 超遠心、電気泳動、ゲル凶過（・均一１、