JPS58144749A - 第２抗体で被覆したイムノアツセイ用プラスチツク支持材およびその製造方法 - Google Patents
第２抗体で被覆したイムノアツセイ用プラスチツク支持材およびその製造方法Info
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- JPS58144749A JPS58144749A JP57177717A JP17771782A JPS58144749A JP S58144749 A JPS58144749 A JP S58144749A JP 57177717 A JP57177717 A JP 57177717A JP 17771782 A JP17771782 A JP 17771782A JP S58144749 A JPS58144749 A JP S58144749A
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は吸着又は共有結合によって、大男の場合プラス
チック材料で出来九チューブの形状をした支持材上Ｋｌ
ｌ定され九砿覆層が、親和クロマトグラフィーによって
高度Ｋｑ製され丸亀２の抗体（即ち第１の抗体に対する
抗体）である、抗原又はハシテンＯイムノアッセイを目
的とし九新飢な支持材に閤し、又同時にその様な支持体
、Ｉｌ＃にチューブ状支持体の製法に関する、後者の場
合番号を付して直ぐに使用可能な様にホルダーに職付は
良形とする仁とができるが、包装状態において３７℃で
は少くとも１５日、＋４℃では６ケ月間は安定である。
チック材料で出来九チューブの形状をした支持材上Ｋｌ
ｌ定され九砿覆層が、親和クロマトグラフィーによって
高度Ｋｑ製され丸亀２の抗体（即ち第１の抗体に対する
抗体）である、抗原又はハシテンＯイムノアッセイを目
的とし九新飢な支持材に閤し、又同時にその様な支持体
、Ｉｌ＃にチューブ状支持体の製法に関する、後者の場
合番号を付して直ぐに使用可能な様にホルダーに職付は
良形とする仁とができるが、包装状態において３７℃で
は少くとも１５日、＋４℃では６ケ月間は安定である。
上記新規な支持材は抗原及びハシテンのイムノアッセイ
を簡便にするものである。
を簡便にするものである。
多くのイムノアッセイ法、特にラジオイムノアッセイ法
の多くにおいて、第１の抗体に対する第２の抗体を用い
、第１の抗体と第２の抗体を反応させて、第１の抗体に
結合し九状履のものから遊離の抗原を分離することが行
われている。
の多くにおいて、第１の抗体に対する第２の抗体を用い
、第１の抗体と第２の抗体を反応させて、第１の抗体に
結合し九状履のものから遊離の抗原を分離することが行
われている。
免疫沈澱法においては、第２の抗体は遊離状態で使用さ
れる（ Ｍｏｒｇａｎ 、 Ｌａｚａｒｏｗ １９６２
、Ｕｔｌｇｅｒ ｅｔ Ｃｏ１．１９６２ ）。
れる（ Ｍｏｒｇａｎ 、 Ｌａｚａｒｏｗ １９６２
、Ｕｔｌｇｅｒ ｅｔ Ｃｏ１．１９６２ ）。
促進免疫沈澱法においては、沈澱促進剤（／リエチレン
グリコール、エタノール、硫酸アンモニウム等）を第２
抗体に加えて、免疫沈澱反応の時間を１５分乃至３０分
に減らすＩＩＫしている（ Ｍａｒｔｉｎ 、 Ｌａｎ
ｄｏｎ １９７４ ）。
グリコール、エタノール、硫酸アンモニウム等）を第２
抗体に加えて、免疫沈澱反応の時間を１５分乃至３０分
に減らすＩＩＫしている（ Ｍａｒｔｉｎ 、 Ｌａｎ
ｄｏｎ １９７４ ）。
微粒状のイムノ吸着剤を用いる方法においては、第２抗
体はニ ー第１抗体と一緒に予備インキュベートする、−微結晶
セルｏ −１乃至ＷＩＤＥ ｏ ５ｅｐｈａｒｏｓｅ
４ Ｂ（ＤＡｓＰ）、アクリルアミＰゲル、又はラテッ
クス粒子等に結合させる、或は 一駿化鉄と会合し九イリマーに結合させる（ Ｎｙｅａ
ｔＣｏｌ、１９７６）、 の何れかの形で用いられる。
体はニ ー第１抗体と一緒に予備インキュベートする、−微結晶
セルｏ −１乃至ＷＩＤＥ ｏ ５ｅｐｈａｒｏｓｅ
４ Ｂ（ＤＡｓＰ）、アクリルアミＰゲル、又はラテッ
クス粒子等に結合させる、或は 一駿化鉄と会合し九イリマーに結合させる（ Ｎｙｅａ
ｔＣｏｌ、１９７６）、 の何れかの形で用いられる。
この方式においては、第２抗体に比肩する役目を釆えす
黄金色スタフィロコッカス曹（Ｓ、駄Ｌｒ６ｕ８ ）Ｏ
蛋白ムを用いる技法（Ｊｏｎａｓｏｎ、 Ｋｒｏｎｖｕ
１１９７３）を堆入れねばならない。
黄金色スタフィロコッカス曹（Ｓ、駄Ｌｒ６ｕ８ ）Ｏ
蛋白ムを用いる技法（Ｊｏｎａｓｏｎ、 Ｋｒｏｎｖｕ
１１９７３）を堆入れねばならない。
これ畳の方法は全て主たる二欠点を有する。
即ち嬉−にピペットで懸濁状部の試薬を採取すると、屡
々検定値が一定にならない原因を構成するが、簡便な免
疫沈澱法のみがとの菖−の欠点を生じないものである。
々検定値が一定にならない原因を構成するが、簡便な免
疫沈澱法のみがとの菖−の欠点を生じないものである。
第二に結会し九抗原から遊離抗原分画を分離するには遠
心法又は微粒子濾過法が必要で、酸化鉄粒子を用いる方
法のみが、磁場内において分離を行うことによりこの欠
点を逃れるものであるが、反面これＫは設備の追加を必
要とする。
心法又は微粒子濾過法が必要で、酸化鉄粒子を用いる方
法のみが、磁場内において分離を行うことによりこの欠
点を逃れるものであるが、反面これＫは設備の追加を必
要とする。
Ｃａｔｔ及ヒＴｒｅｇｅａｒ （１９６７） Ｋよる固
相において＄１２抗体を結合する方法におき換えること
で、この第二の欠点は解消される。
相において＄１２抗体を結合する方法におき換えること
で、この第二の欠点は解消される。
ＲＩＡ法では第２抗体（ムｂ１）を同相に固定し、後者
ｔ−第１抗体（Ａｂ ）の溶液及び検定すべき抗原（Ａ
ｇ）ｔ−含んだ溶液とインキエベートシ、この溶液には
標識し友抗原（ムｇ）が加えられる。仙−紹及びＡｂ
−Ａｇ複合体が形成され、これ等が同相上のＡｂ” Ｋ
固定され、結合しない抗原（１１１１及び非標識共Ｋ）
は液相に残る。
ｔ−第１抗体（Ａｂ ）の溶液及び検定すべき抗原（Ａ
ｇ）ｔ−含んだ溶液とインキエベートシ、この溶液には
標識し友抗原（ムｇ）が加えられる。仙−紹及びＡｂ
−Ａｇ複合体が形成され、これ等が同相上のＡｂ” Ｋ
固定され、結合しない抗原（１１１１及び非標識共Ｋ）
は液相に残る。
第２抗体は通常動物又はヒトの血秦或は血清を種の異つ
九動物に反復注射することＫよって得られる。後者の血
清中には最初の動物又はヒトのガンマ・グロブリンに対
する抗体（ずンマ・グロブリン）が含まれる。免疫処置
を受は九動物の血清中ガンマ・グロブリン（Ａｂ”）は
同相ＫｗＡ定する前に分離、精製しなければならない。
九動物に反復注射することＫよって得られる。後者の血
清中には最初の動物又はヒトのガンマ・グロブリンに対
する抗体（ずンマ・グロブリン）が含まれる。免疫処置
を受は九動物の血清中ガンマ・グロブリン（Ａｂ”）は
同相ＫｗＡ定する前に分離、精製しなければならない。
Ｚｉｏｌａ Ｂ、 Ｒ，ａｔ Ｇｏｌ、 （１９７７）
の方法では、第２抗体のガンマ・グロブリン（羊血清、
兎抗ガンマ・グロブリン）は、Ｉリスチレンのビーズに
吸着させる前に硫酸ナトリ９ムで沈澱し、次いで８ｅｐ
ｈａｄｅｘ Ｇ −２００ゲルで分子Ｐ遇することによ
ってのみ、精製が行われる。併しビーズの取扱はチュー
ブに較べると容易でな諭。更に傘針な試薬の取扱も必要
とされる。
の方法では、第２抗体のガンマ・グロブリン（羊血清、
兎抗ガンマ・グロブリン）は、Ｉリスチレンのビーズに
吸着させる前に硫酸ナトリ９ムで沈澱し、次いで８ｅｐ
ｈａｄｅｘ Ｇ −２００ゲルで分子Ｐ遇することによ
ってのみ、精製が行われる。併しビーズの取扱はチュー
ブに較べると容易でな諭。更に傘針な試薬の取扱も必要
とされる。
■ωｌａＦ等（１９７３）の方法では、第２抗体のガン
！・グロブリン（山羊血清、兎抗ガンマ・グロブリン）
はぼりスチレン・チューブに吸着させる曽に硫酸アンモ
ニ９ムで沈澱させ、次いでＤｉＣＡｉＣ竜ルロースを用
いてクロマトグラフィーを行うことによってのみ精製が
行われる。こうしたチューブは３７℃でのインキュベー
ションと試薬の順次添加（抗８０Ｈ血清に次いで被検検
体のビペツ）Ｋよる揮散、次いで３７℃で４時間のイン
中ユペーシ冒ンに絖くヨード１２５で標ｓｔ、九ＳＯＢ
添加、更に引続き３７℃で１４時間Ｏインキエペーシ冒
ン）を特徴とする手法に基づいた、絨毛性成長ホルモン
（ＳＣＨ）の検定□にのみ用いられて来え。こうしえチ
ューブは＋４℃で２ケ月以上安定に保つことは不可能で
、更に商品としての試薬を一発するには向かなかつ丸。
！・グロブリン（山羊血清、兎抗ガンマ・グロブリン）
はぼりスチレン・チューブに吸着させる曽に硫酸アンモ
ニ９ムで沈澱させ、次いでＤｉＣＡｉＣ竜ルロースを用
いてクロマトグラフィーを行うことによってのみ精製が
行われる。こうしたチューブは３７℃でのインキュベー
ションと試薬の順次添加（抗８０Ｈ血清に次いで被検検
体のビペツ）Ｋよる揮散、次いで３７℃で４時間のイン
中ユペーシ冒ンに絖くヨード１２５で標ｓｔ、九ＳＯＢ
添加、更に引続き３７℃で１４時間Ｏインキエペーシ冒
ン）を特徴とする手法に基づいた、絨毛性成長ホルモン
（ＳＣＨ）の検定□にのみ用いられて来え。こうしえチ
ューブは＋４℃で２ケ月以上安定に保つことは不可能で
、更に商品としての試薬を一発するには向かなかつ丸。
本発明の方法においては、第２抗体のガンマ・グロブリ
ンは支持体、特にぼりエチレン製であることが好ましい
チューブ材に固定される前に、親和クロマトグラフィー
によって精製される。その結果性能の向上し九イムノ吸
着が得られ、それ等は検定の関にニ ー中閏のインキュベーション無しに、第１抗体を開始剤
試薬として最後に加えながら、一段階のみで行う全試薬
の順次添加、及び 一試験室内の温度又は他の温度において数時間（動的方
法）乃至２４時間（平衡法）のインキュベーションにか
けられる。
ンは支持体、特にぼりエチレン製であることが好ましい
チューブ材に固定される前に、親和クロマトグラフィー
によって精製される。その結果性能の向上し九イムノ吸
着が得られ、それ等は検定の関にニ ー中閏のインキュベーション無しに、第１抗体を開始剤
試薬として最後に加えながら、一段階のみで行う全試薬
の順次添加、及び 一試験室内の温度又は他の温度において数時間（動的方
法）乃至２４時間（平衡法）のインキュベーションにか
けられる。
従って本発明に基づく第２抗体で皺覆したチューブ材の
製法は次の２段階からなる： １）精製すべき第２抗体に対する杭体ガン！・グロブリ
ンが固定されているゲルで構成され九カラムを用い九親
和クロマトグラフィーによって高度に精製され＊ＩＩ２
抗体ガンマ・グロツサ／を得ること、 ２）／リマー（Ｉリエチレン、４リスチレンＩＩＩり製
のチューブ材上にこのガンマ・グロブリンを固定するこ
と。
製法は次の２段階からなる： １）精製すべき第２抗体に対する杭体ガン！・グロブリ
ンが固定されているゲルで構成され九カラムを用い九親
和クロマトグラフィーによって高度に精製され＊ＩＩ２
抗体ガンマ・グロツサ／を得ること、 ２）／リマー（Ｉリエチレン、４リスチレンＩＩＩり製
のチューブ材上にこのガンマ・グロブリンを固定するこ
と。
ａＳりａ−ｆ）グラフィーには、兎ｆｙｗ−／ａプリン
が固定され九ダル（好ましく ＦｉＳａｐ―旬閏４Ｂ又
はＵｌｔｒａｇｅｌ ＡＣム２２のゲル）を用いる。
が固定され九ダル（好ましく ＦｉＳａｐ―旬閏４Ｂ又
はＵｌｔｒａｇｅｌ ＡＣム２２のゲル）を用いる。
！ｌＩ際の親和クロマトグラフィーは次０ＩＮＫ Ｌ、
テ行う： 羊皇清（例えば１００ｓＪ）、兎抗１７ ｗ
−グロブリンをカラムに導入しｐＨ７，４の憐駿ナト
リ９ム緩＊＊でクロマトグラムのベースラインのリター
ンにｊ［ゐまで溶離を行う。羊ガンマ・グロブリン、兎
杭ガンマ・グロツサ／を次いでカラムのｐＨ及び電導度
を急に変える緩衝液（例えばｐＨ２，８０グリシン−水
酸化ナトリウム緩衝液）て溶離する。
テ行う： 羊皇清（例えば１００ｓＪ）、兎抗１７ ｗ
−グロブリンをカラムに導入しｐＨ７，４の憐駿ナト
リ９ム緩＊＊でクロマトグラムのベースラインのリター
ンにｊ［ゐまで溶離を行う。羊ガンマ・グロブリン、兎
杭ガンマ・グロツサ／を次いでカラムのｐＨ及び電導度
を急に変える緩衝液（例えばｐＨ２，８０グリシン−水
酸化ナトリウム緩衝液）て溶離する。
溶離液をｐＨ７，４に平衡させてから、チューブ材Ｋｌ
ｉ定させる。
ｉ定させる。
吸着によるＩリエチレン・チューブ材上固定の例上記で
得られた溶離液（６０乃至１００声ｔ／ｖｄ ）をチュ
ーブ材の各々の中に入れてインキュベートする。次いで
優者を塩化す） Ｉ）ラムの９Ｓ溶液及び蛋白質の溶液
で順次洗い、この様に処置し九チューブ材を凍結乾燥な
どの手法によって乾燥してから、乾燥剤と一緒にサシエ
ラ）Ｋ詰める。
得られた溶離液（６０乃至１００声ｔ／ｖｄ ）をチュ
ーブ材の各々の中に入れてインキュベートする。次いで
優者を塩化す） Ｉ）ラムの９Ｓ溶液及び蛋白質の溶液
で順次洗い、この様に処置し九チューブ材を凍結乾燥な
どの手法によって乾燥してから、乾燥剤と一緒にサシエ
ラ）Ｋ詰める。
こうしたチューブ材の特異性はニ
ー６７℃で少くとも１５日、＋４℃では６ケ月間、包装
状態において安定で、 一検定における再現性が良いことにある。
状態において安定で、 一検定における再現性が良いことにある。
本発明に従って第２抗体で被覆し友支持体はヒト卵胞刺
激ホルモン（ｈＦｓＨ）やヒト黄体形成ホルモン（ｈＬ
Ｈ）の様なホルモンのイムノアッセイ、特にラジオイム
ノアッセイに用いられる。
激ホルモン（ｈＦｓＨ）やヒト黄体形成ホルモン（ｈＬ
Ｈ）の様なホルモンのイムノアッセイ、特にラジオイム
ノアッセイに用いられる。
この試薬系は以下を含んだものである：試薬Ｒ１：１“
Ｉ−ｈＦｓＨ（く０．７５μＧｉ）、２びん。
Ｉ−ｈＦｓＨ（く０．７５μＧｉ）、２びん。
試薬Ｒ２：０から４０μｇ／−の間の濃度の４１ＦＳＨ
標準試薬、７びん。
標準試薬、７びん。
試１１Ｒ３：抗ｈＦｓＨ兎血清、２びん。
本発明の試薬Ｒ４：（羊ガンマ・グロブリン、兎抗ガン
マ・グロブリン）、チューブ ４８本のホルダー２組。、 試＊Ｒ５： ｉ［剤（ｈＦ’ｓＨ無シ）、１びん。
マ・グロブリン）、チューブ ４８本のホルダー２組。、 試＊Ｒ５： ｉ［剤（ｈＦ’ｓＨ無シ）、１びん。
試＠Ｒ１，： ＰＢＳ−ＢＳＡのｐＨ７，４緩衝液５゜
−を２びん。
−を２びん。
試薬Ｒ７及び８：ヒト対照血清、各１びん。
この試薬系は以下を含んだものである：試薬Ｒ１： Ｉ
ＩＩＩ−ｈＬＨ（＜０．７５５Ｃ１） 、２ヒ／ｖ。
ＩＩＩ−ｈＬＨ（＜０．７５５Ｃ１） 、２ヒ／ｖ。
試１１Ｒ２：１ｍ）度０から４０ ｎｇ／＊ｏ間ノ１ｌ
ｌｋｈＬＨ液、７びん。
ｌｋｈＬＨ液、７びん。
試薬Ｒ３：１ｊ−ｈＬＨ兎血清、２びん。
本発明の試薬４：（羊ガンマ・グロブリン、兎抗ガンｉ
・グロブリン）、チューブ４８ 本のホルダー２組。
・グロブリン）、チューブ４８ 本のホルダー２組。
試薬Ｒ５：＠釈剤（ｈＬＨ無し）、１びん。
試薬Ｒ＜５ ： ＰＢＳ−ＢＳＡのｐ）Ｉ ７．４緩衝
液５０ｍ１を２びん。
液５０ｍ１を２びん。
試薬Ｒ７及び８：ヒト対照血清、各１びん。
これ轡２系列の試薬系の特異性はニ
ー中間のインキュページｌｙ無しで、第１抗体（抗ｈＬ
Ｈ又は抗ｈＦｓＨ抗体）を最後に加えて、全ての試薬を
唯の１段階のみにおいて順次添加し、且つ試験室内の温
ｆにおいて数時間から２４時間までのインキュベージ曹
ンを行い、遠心分−を行わない、と云う簡単な操作法と
、 一検定の考え方において、Ｇｏｃｏｌａの手法とは逆に
第１抗体を最後に加えると云う事実が、この試ＪＩＩを
して開始試薬の役割を果丸さしめ、それによって検定に
おける免疫反応が全てのチューブ材において同時に開始
するから、検定は動的状態でも平衡状態においても実施
でき、チューブ材底部に第２抗体ではなくて第１抗体を
固定し九被覆チューブ材を用い九方法においても同様に
この様な利点が得られること、及び検定条件下でのＲＩ
Ａ被覆チューブ材内［”Ｉ−ｈＬＨ又は腸Ｉ−ｈＦｓＨ
が存在しないこと並びにインキュベーションの終期に反
応媒体を吸引し次いで洗滌することＫよって、１−よ参
低い「非特定物質値」を得ることが可能Ｋする、と云う
点である。
Ｈ又は抗ｈＦｓＨ抗体）を最後に加えて、全ての試薬を
唯の１段階のみにおいて順次添加し、且つ試験室内の温
ｆにおいて数時間から２４時間までのインキュベージ曹
ンを行い、遠心分−を行わない、と云う簡単な操作法と
、 一検定の考え方において、Ｇｏｃｏｌａの手法とは逆に
第１抗体を最後に加えると云う事実が、この試ＪＩＩを
して開始試薬の役割を果丸さしめ、それによって検定に
おける免疫反応が全てのチューブ材において同時に開始
するから、検定は動的状態でも平衡状態においても実施
でき、チューブ材底部に第２抗体ではなくて第１抗体を
固定し九被覆チューブ材を用い九方法においても同様に
この様な利点が得られること、及び検定条件下でのＲＩ
Ａ被覆チューブ材内［”Ｉ−ｈＬＨ又は腸Ｉ−ｈＦｓＨ
が存在しないこと並びにインキュベーションの終期に反
応媒体を吸引し次いで洗滌することＫよって、１−よ参
低い「非特定物質値」を得ることが可能Ｋする、と云う
点である。
本発明の支持材の使用は更にニ
ーハプテン鎖、即ちステロイド、ピタンン、薬物勢・
一巨大分子、即ちホルモン類（黄体形成ホルモン、甲状
腺刺激ホルモン等）の様な蛋白質、血清蛋白（結合蛋白
、抗体等）、血清、血漿、尿、植物ノ々イラス等の様な
生物物質中の有機組織蛋白、と云った物質のラジオイム
ノアッセイ及び酵素イムノアッセイにも拡張できる。
腺刺激ホルモン等）の様な蛋白質、血清蛋白（結合蛋白
、抗体等）、血清、血漿、尿、植物ノ々イラス等の様な
生物物質中の有機組織蛋白、と云った物質のラジオイム
ノアッセイ及び酵素イムノアッセイにも拡張できる。
本発ＩＮＯチューブ材の使用を容易にする九めに、プラ
スチック製のホルダー、好ましくは熱成形し丸材料で、
試薬系又は（イムノアッセイ用）キットの形でまとめて
もよい。
スチック製のホルダー、好ましくは熱成形し丸材料で、
試薬系又は（イムノアッセイ用）キットの形でまとめて
もよい。
ホルダーはチューブ材の収容を容易にする丸めの下向き
０Ｊｌｌｌいチャンネルを有する隣接し九複数個の円形
キャビティーを持つ九４−ス１と、同様にプラスチック
材料、好ましくは熟成型材で構成され、クリップ３によ
ってベースと嵌合する蓋体３から構成される。
０Ｊｌｌｌいチャンネルを有する隣接し九複数個の円形
キャビティーを持つ九４−ス１と、同様にプラスチック
材料、好ましくは熟成型材で構成され、クリップ３によ
ってベースと嵌合する蓋体３から構成される。
この様にして構成されたコン・ぐクトな集成物は以下の
利点を有する： ａ）チューブ材同志が隣接していて、ホルダー内で完全
な配列をしている結果、ピペットによる採取及び洗滌の
操作が容１である。
利点を有する： ａ）チューブ材同志が隣接していて、ホルダー内で完全
な配列をしている結果、ピペットによる採取及び洗滌の
操作が容１である。
ｂ）これ郷チューブ材が安定に支持されるので、その操
作、特に内容物を空は九り水切りしたりする操作が容易
にできる。
作、特に内容物を空は九り水切りしたりする操作が容易
にできる。
Ｃ）使い捨ての蓋体を上に上げ九位置に保ち凍結乾燥そ
の他の方法で乾燥を行うことができ、支持プレート同志
を合せればそれだけで装置によってクリップ固定ができ
る。更に製品の最終密封までの間保護する丸めに包装内
部に中性ガスを導入してもよい。
の他の方法で乾燥を行うことができ、支持プレート同志
を合せればそれだけで装置によってクリップ固定ができ
る。更に製品の最終密封までの間保護する丸めに包装内
部に中性ガスを導入してもよい。
ｄ）蓋体のシェル状の形により、熱シール總断フィルム
による密封が可能である。この様にして密封ブリスター
包装が行える。
による密封が可能である。この様にして密封ブリスター
包装が行える。
ｅ）数が４８個のチューブ材は番号を付してあり、直ち
に使用可能である。これ等は４リエチレ／、メリスチレ
ン或は他の任意のプラスチック材料で出＊九磐血チュー
ブ材である。
に使用可能である。これ等は４リエチレ／、メリスチレ
ン或は他の任意のプラスチック材料で出＊九磐血チュー
ブ材である。
ｆ）ホルダーの形状構成は、継続して行う分配及び洗滌
を目的とした如何なる形のチューブ材並びに包侠材にも
応用可能である。
を目的とした如何なる形のチューブ材並びに包侠材にも
応用可能である。
以上便するに本発明によれば、この様にイムノアッセイ
の実施に′ｓ？？てかな妙の改嵐をもたらす、ホル／−
に配置し先番号付きで乾燥し友、即ち直ちに使用可能な
チューブ材が得られるものである。
の実施に′ｓ？？てかな妙の改嵐をもたらす、ホル／−
に配置し先番号付きで乾燥し友、即ち直ちに使用可能な
チューブ材が得られるものである。
１１１．２及び６図に本発明のチューブ材ホルダー〇−
夷１１Ｉ／１態橡を示す。謔２図は平面図、嬉３図は横
断ＩＩｉ図、第１図はＩ−Ｉ軸に治った長手万両断面図
である。
夷１１Ｉ／１態橡を示す。謔２図は平面図、嬉３図は横
断ＩＩｉ図、第１図はＩ−Ｉ軸に治った長手万両断面図
である。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 （１） ポリマー、好ましくはぼりエチレン上に固定
された、親和クロマトグラフィーによって高度に精製し
た第２技体で被覆を形成し九ことｔ４Ｉ像とする、第２
抗体で被覆し友イムノアッセイ用プラスチック支持材。 （２）第２抗体が第１の動物種の血清ガンマ・グロブリ
ンであ抄且つ第２の動物種又はヒトのがンマ・グロブリ
／を用い友クロマトグラフィーによって精製し友、第２
の動物種又はヒトの血清の抗ガンマ・グロブリンである
ことを特徴とする特許請求の範ｉ！ｌ菖１項記載の支持
材。 （３）第２抗体が羊ガンマ・グロブリン、兎抗ガンマ・
グロブリンであることを特徴とする特許請求の範囲第１
及び第２項記載の支持材。 （４）チューブ材の形に形成されていることｔｌ＃微と
する特許請求の範囲第１乃至第３に記載の支持材。 ６）第２抗体を含んだ免疫血清を、精製すべき抗体の抗
原であるガンマ・グロブリンを用いた親和クロマトグラ
フィーにより処理し、得られえ精製第２抗体Ｖｒぼりエ
チレン又は？リスチレン等のプラスチック材料製の支持
材Ｋａ着によって一定することからなる仁とｔ特徴とす
る、特許請求の範囲第１乃至嬉４項に記載の支持材の製
造方法。 （６）親和クロマトグラフィーにおいて、ゲルを充し九
カラムを用い精製すべき抗体に対する抗原であるガンマ
・グロブリンをその上に固定して、こ０カラ五に精製す
べき抗体を含む免疫血清を通し、次いでクロマトグラム
のベースラインのリターンに至るまでｐＨ７，４の隣酸
塩緩衝液で解離を行い、次いで［２技体のガンマ・グロ
ブリンをカラムのｐＨと電導度が急激に変る様な緩衝液
を用いて溶離すること１特黴とする特許請求の範囲第５
項に記載の方法。 （イ）第２技体のガンマ・グロブリンを含む溶離筐をｐ
）１７．４で平衡させ、稀釈して支持材素面％にチュー
ブ材内面においてインキュベートして、チューブ材壁を
構成するＩシマー上に吸着によって支持材表面に固定す
ることを特徴とする特許請求の範囲第５及びＪＩＩ６項
の何れかに記載の方法。 （８）％許請求の範囲第４項記載のチューブ材を用いて
、他の試薬を唯一段階で順次添加して且つ第１抗体を最
後に加えて開始剤として作用させることを特徴とする、
同相状部の第２抗体を用いたイムノアッセイの方法。 （９） ヒト卵胞刺激ホルモン及び黄体形成ホルモン
の検定を目的とし友、特許請求の範囲第８項記載の方法
。 （１０）検定を平衡条件及び動的条件で行うことを特徴
とする特許請求の範Ｓ謔９項記載の方法。 （１１）熟成型プラスチック材料で形成され、チューブ
材を導入するための下向きの細いチャンネルを有する１
ｌＨＩｔ、た複数の円形中ヤピティー並びに１チユーブ
材を乾燥する目的又は保護目的のガスの導入の丸めに蓋
材を上に上げ九位置に、威祉チューゾ材を逆さにし得る
様に下側位置に保つことを可能にする２個のクリップ部
分によってペースにクリップ国定される蓋体を有するペ
ースを含むことを特徴とする特許請求の範８菖５項記載
のチューブ材を提供乃至は支持固定する機構。 （１２）直ちに使用し得る４８本の番号を付したチュー
ブ材を含む仁とｔ特徴とする、特許請求の範囲第４項記
載の機構。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| FR8120347A FR2515827B1 (fr) | 1981-10-29 | 1981-10-29 | Nouveaux tubes revetus d'un deuxieme anticorps hautement purifie, prets a l'emploi, pour les dosages immunologiques, et leur procede de preparation |
| FR8120347 | 1981-10-29 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS58144749A true JPS58144749A (ja) | 1983-08-29 |
Family
ID=9263538
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP57177717A Pending JPS58144749A (ja) | 1981-10-29 | 1982-10-12 | 第２抗体で被覆したイムノアツセイ用プラスチツク支持材およびその製造方法 |
Country Status (6)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0078734B1 (ja) |
| JP (1) | JPS58144749A (ja) |
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| DE (1) | DE3273844D1 (ja) |
| ES (1) | ES8401261A1 (ja) |
| FR (1) | FR2515827B1 (ja) |
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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| JPS61228351A (ja) * | 1985-04-02 | 1986-10-11 | Kyoto Ikagaku Kenkyusho:Kk | 糞便中のヘモグロビンの検出方法 |
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-
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- 1982-10-25 AT AT82401955T patent/ATE22997T1/de active
- 1982-10-25 EP EP82401955A patent/EP0078734B1/fr not_active Expired
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