JPS58135819A - 鶏の大腸菌症の予防法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は鶏の大腸−ａｔ免疫的に予防し得ゐ方法に関す
る・ ＩＩＯ大膳−症Ｆｉ特定Ｏ皇清−を有すみ文論−の感染
によｐ発鉦する。ζＯ１１気Ｏ梳−としては、大腸■性
散ｊｋ症管はじめ、関節炎、出血性腸炎＃＃が挙けらｎ
る。このも０ＫＪＩ染した鶏は気嚢炎、心論炎、肝包鵬
炎、関節炎および下痢勢の症状を示して重症の場會れ死
Ｋｊｉる・鵞たこの大腸−症は集目的鵞た＃ｉｔ発的に
発生ずゐものであ１％にブ雪イラーでの発生が多く、普
書の大きいものである。

かかる大腸菌症の予防の友めには薬剤の投与が実施され
ているが、薬剤耐性■が多く出現している丸めに効果は
あ萱り期待できない、また、治療の場合も薬剤の選択、
投与方法、労力等に間颯が多く、優れた予防効果ｔ−Ｗ
するものの出現が望１れている。

そこで本尭明者らは前記の問題を解決すべく研究會行な
り７ｔＩｉ！果、大腸曹會鶏の総排泄腔よＪ）１１種す
ることによ砂大腸薗症を予防し得ることを見い出し友。

本発−の大腸菌は動物の臓器１丸は糞便から分離された
ものであり、例としては大腸菌０１．０２および大腸■
（Ｎ、　ｃｏ’１ｉ）〜８−２４４　（黴工研■書１１
５７８７号）が挙げられる。

大腸菌ＭＢ−２４４は牛・ｐ糞便七大腸曹・の選択培地
であるＤＩＩＬ寒天〔栄研化学（抹）製〕上に画線培養
しｍａｔ、たコロニーより得られ友１、形態学的ん見 ｔＯ〜４．０×０４〜ａ７ｓ メラム論性桿− 運動性あｐ 芽胞管形成しない ２、ｊｌｌ地上の所見 肉エキス培地で容轟Ｋｌｉ冑する 肉エキス１％、ペプトン１％および塩化ナトリウム（１
３％會富有する寒天培地での生前良好 コロニー扛低い凸状を示し、無色で１Ｌかｅヤ不透明、
周辺はまるい 五生物学的性状 生育ＰＨ１０〜１　ａｏ　（ｊｉｍ　１１１１７．０　
）生育１１１に２０〜４０℃（ｉ！ｉ遍温屓５７℃）好
気性および過性嫌気性 未炭非抗酸性 カタラーゼ　　　１ｉｌｌＩ！！１ オキシダーゼ　　ｍｓ ｗａｙ　ｊｌ地における発育は緒めらｆ′Ｌ１にい一−
ガラタトシダーゼ　　陽性 ブドウ−からのガス産生あり インドールの生成あり テ１！培地での硫化水−生成せず フレアー（生成せず ぜラチン筐化簡なし フェニルγラエν−デアイナ−（幽脩 すシンΦデカルボキシラーゼ　　　　陽性オルニチン−
デカルボキシラーゼ　　陽性アルギニノ・ジヒドロラー
ゼ　　　　電性ダルタ建ン績デカルポキシラーセ陽性 Ｍｌ［応　　　　　　　　　陽性 ｖ１反応　　　　　　　　　−性 単−ＩＲ木源として＃Ｉｌを利用するがクエンＩＩｋを
利用できない ＆炭水化物からの載量生能 ブドウ棚　　　　　陽性 アラビノース　　　陽性 セロビオース　　　陽性 乳　　　糖　　　　　　　　ｌｌｌ性 麦芽軸　　　　　　陽性 ラフィノース　　　陽性 ラムノース　　　　１１１ｍ 日　　　　Ｓ　　　　　　　　　陽性 トレハクース　　　陽性 キシロース　　　　陽性 アトエツト　　　　陽性 ズルシット　　　　陽性 エスクリン　　　　陽性 マンニット　　　　Ｉｌｌ！１ ソルビット　　　　陽性 〆ｖ−にリン　　　　陽性 ナリシン　　　　　−性 イノシット　　　　陰性 以上の開学的性状から［Ｂ＠ｒｇｓｙ’ｓ　Ｍａｎｕａ
ｌ　ｏｆｌ）＠ｔ・ｒｍｉｎａｔｉマ・１ａｏｔ＠ｒｌ
ｏｌｏｇｙ　ＪＩＩ８１［の分−〇基準にしたがって既
知の一株とＯ＾同を検討した結果１本発ＷＡＫｋｎ”Ｃ
菅ＭＴｈｍｌｌｌ　ＣＭ、−２４４＞轄大腸−（ｌｓｏ
ｈｒｌｏｈｉａ　ｏｏｌｉ）と同定され九〇ｔｏ大輪−
ｗｔｔ−２ａａｔＤｌａＫ対１ｈ病鳳ａｔｌＩＩべた結
果、食〈病ＪｌＥ性がないことｔ１１１誌した・すなわ
ち大輪−夏ト４４４の生−を３遍令０３１１０羽に１羽
織）１．１ｘ１０１１個で静脈内投与した。

７ＨＩ１％ＩＩＯ状ａｔ観察したが死亡餉轄０であ）、
大腸−ｗｏ４Ｉ徴的な病変である心膜炎中肝包ｌｌｌ１
＆の出穂は食〈認められなかった・本発−で用い為大腸
−ｍｓ−２４４Ｆｉ生−〇軟論いた方か扱い・易い０本
発明で用いる大腸−０１゜０２紘不活化して用いる・大
腸−舅ト２４４と大腸−０１％０２は紫外線照射、ガン
！−線照射ｔたはネルマリン処理で不活化するのがよい
が、フェノール、アセトン、アルプール、凍５ｕｉｓ、
ｍ熱、趨音皺あゐいは圧力などで錫層して不活化す為こ
ともできる。さらに、この−ＯＫ＊駿化アルイニウムｌ
ル、７ｍ！インドＯ完金アジ晶バンドのようなアジエバ
ンド（免役賦活剤）を加えることも訪けない、′、さら
にこのものに伽の叡鈎の免疫的抗鳳中非病鳳性Ｏ抗ａｔ
＆會して總装置ａＫｍｓ−ｒｉｅともで自るｅ前記の免
疫的抗鳳とはｓｅａ：ｓタシジウム鳳虫、二具−カッス
ル＠などのワタテン、伝動性コリーずＯ原因−てあ４１
ｔａｓｉａｏｐｈｉｘｕｓ　ｐａｒａｇａｌｌｉｎｓｒ
ｕｍ　％錫マイコブツズマ病のｊｌＩＷ−てｈ　ｈ　Ｍ
ｙ＠ｏｐｘａｓｍａ　ｇａｘｘｔａｇ−ｔｉａｕｍ　、
Ｏｌｏｓｔｏｒｉｌｉｕｍ　　ｐｅｒｆｒｉｎｇ＠ｎｓ
　　％８ｍ１ｍｏｎｓｌｌａｐｕ１１０　Ｔｕｈ　１４
　ｆ　ｌａ　Ｏｌｚａ　ｏ　ｔ　＠　ｒ　ｉ　ｕｌｌ　
ｔＤａ　６　ｔ　Ｏｂａｅｊ　ｉ　ｌＩＬ　ｕ　＠およ
び大１ｋ　’ＩＩ　０１ｓ　Ｏ雪％０７・以外で大−一
症Ｋｌｌ患した錫から分−さｎる他の０抗ＭＡｔ有する
大腸−★たは倫康な帰から分離されゐ非病原性大腸−な
どが挙けられる。

次ｉ″ｅｅｌｌ記大腸■を鶏に接種する・接種に適轟１
に状−として扛抗大腸−症剤を水、生理食塩水、ｐｓａ
　（りン駿バッファー）および組織ｍｓ液などＯ浴１［
Ｋｊｌｉ濁せしめたもの、ｉたは前記の不活化熟思そし
てま危アジエ／（ンドＪ６！ｌを行なったものが例とし
て挙げらｎる。このものを鶏の纏＃瀘腔に襞穏する。接
極の具体的な方法としては−の肛門、ＩＩ絵濾腔ある％
／％はファプリシラＸ自円に抗大Ｉｋ１剤【上記のｍ＊
に懸濁せしめ１羽織、９（ＬＯＧ２ｄ〜１２５ｇ１ｌＩ
下、注入、―付ｔスプレー重艮は肛門Ｓｔ匿すことによ
って投与する方法が挙けらｒＬ為、杭大鵬−症剤０ａＳ
−量は鶏１刹ｍ１）１．０Ｘ１０１個以上を用いる。

本Ｉｉ―に係る抗大ｌ＆１ｌｌＩ症剤を本発明の接一方
法で駅用すｎば副作用を起こすことなく大輪−症ｔはと
んど完全に予防し得る。さらに、従来Ｏａ剤投与法でＦ
ｉ％蘂剤耐性大ｗＩ１１の出ＩＮが多かったが、本発明
の予防方法管用いれば、薬剤に性大輪−〇出現はない。

次に本発明Ｏ効果管示すためＯ１ｉ！麹例を挙ける・ １１織例　１ ０日令の嶋（ブロイラー専用種ハバード）１０羽の肛門
に試料管接種し、また対照（り〜（９）扛試料をそれぞ
れの方法でＩＩ＠シた０次いでこれらＯ帰に２１日令に
お−で大腸−０７ｇを１羽織）１．４Ｘ１０１・個靜脈
円ＪＩ１１１１シて感染させる。対照（唱）は試料をＪ
ｌｌｌｌせずに感染Ｏみ１行なった鳴Ｏで＆　Ｊｅ　＠
感染後７日ＩＫ斃死率について観察した。結ｌ／に轢Ｉ
Ｉ！１に示す、試料の一類および壁一方ｔｉ、について
蝶下記に示す一 本発１１ｉ篭１）：大腸−薦ト２４４の４Ｘ１０１１個
ｔＩ’Ｂ８１０ｍｇＫＩ１ｍｌ濁せしめた一濁液（試料
（１）　）　ｔ−鴎の肛門に１羽ａｍＤ１滴（約１０２
５ｍ）１１下する・ 本島＠（２ｔ！本発＠（１）で用いた試料（１）ｔ−７
１１１で４債に希釈し、−〇肛門に１羽轟り釣１１−塗
付す為。

本島＠（尉＝本島＠（１）で崩い九試料（１）をＰＭ−
で１００倚に希釈し、ｌＩの肛門に１羽轟ｊｌｌ１ｍ（
釣ａ０２ｓｍｇ）滴下する・ 本１ｋｌ（４Ｓ本発＠（１）で用いた試料（１）會ｐＨ
ｌで４００＊に希釈し、＠ｏ肛門に１羽ｍｅ約α１−脆
付する・ 本ｍ＠ｔｓ：大−−Ｉｇ−２４４の４Ｘ１０１１１１１
ＰＢ１１にゐように加えて死■−淘叡とした後、Ｐｉｌ
ｌ會用いてホル！リン會十分に除去し、遠心分ＩＩＩ（
１００００ｒｐｍｌ＝　２０分間）を行ない、死一体を
集めそしてＦＢ８に浮遊させて１０−とする〔試料（２
）　）　、ζＯ試−（２７を錫の肛門に１別画３１１１
（約（ＬＯ２５ｍ）Ｉｌｉ下すゐ・零鉛１！（ω：本本
島４（−で用−た試料（２會アＢ−で４債に希釈し、陶
の肛門に１羽轟ｐ約１１−塗付す為。

本発明（７Ｉ：本島＠（９で用いた試料（ｚをＦＢＩで
１００倚に希釈し、鳥の肛門に１羽！！シ１瞬Ｃ約ｒＬ
Ｏ２Ｓｍ）＠下する。

零＊＠（１：本発＠ｉ５で用−九試料（２１ｔＰＢｌテ
４００普Ｋｆｈ釈し、錫Ｏ肛門に１羽織ｐｉｌｌ−脆付
する一 本発−（？＃：大ａｍ　Ｈａ−２４４０’ｔ、２Ｘ１０
１”　１１ｔ７１１１！！ＩＩＩＫ浮遊させ、シャーレ
（ｊａｉｏｏｎ　＄１１０（Ｈ麿シャーレ）Ｋ入ｎ、紫
外線殺曹灯（車芝駿―ツンプＧＬ　１５　）２１．５１
１１下に置１　ｓＯ分毎に攪拌を４−行な−、さらに静
置状勤で１６６時間射し、不活化ＩＩ燥した一体に２．
５ｄＫ傘為ようＫ　７１１　ｌ加えて死一体浮遊櫃〔試
料（１］會得る。ζＯ試′ｐ＃を鶴の肛門に１羽轟９１
滴（約（Ｌｙ０２１Ｓ−）＃下する・本島−（１０）！
本発明（！；で用い穴試料（潟ｆ　１？Ｂｔｌで４蕾に
希釈し％錫の肛門に１羽轟ｐ約１１−麹付す為。

本＠！１１）！本発明（９歩で用いた試料（■す１−で
Ｉ　Ｑ　０４１に希釈し、ｌＩＯ肛門に１羽轟ｐ１滴（
約α０２３ｄ）１ｍ下する一 本偉啄１２）：本発＠（町で用い次試料（■すＢ−で４
００債に希釈し、＠ｏ肛門に１別画９約α１−麿付する
・ 本発明（１Ｓ）雪大ａｍ璽１１−２４４０１．２Ｘ１０
１１個ｔＰａｌｌでドローになるように浮遊させ、試験
管に入ｔＬ　ｓ　”ｄｏ　ｔ　ＩＩ　ｍとしそして放射
−照桓５メガラッド）を行なった（Ｅ科（４Ｊ、こＯ試
１’）　（４ｊ　を鶏の肛門に１別画）１滴（約α０２
Ｍ）滴下する。

本１！　１ｍ（１４）：本発明（１５）テ用％／％究試
＄４（４１７１１テ４倍に一釈し、鶏の肛門に１別画ｐ
約α１−勤付する・ 本島＠（Ｉｓ）！本灸１ｍ（１３）で用い丸試料（４ｆ
　Ｐｉｌｌ　’ｔ”１００倍に希釈し、・ｍｏｃｒ’ｔ
に１羽轟１ｍ（約ａ０２！！ｄ）＃下する。

本１＆ｖＫ１４）：本発明（１ｓ）で用いた試？）（４
ｔ　１ｍ１１　’ｅ４００倚に希釈し、ｆａｏ肛門に１
羽織ｐ約α１−鎗付する・ 対照（ｌ　　ＩＩ料を接種せず、感染のみを行なう。

対照（２１９本発明（１）で用ｉた試料（１１を婦の胸
筋に同橡量注射すゐ。

対照（＄ｊ　：本発明（１）で用いた試料（１）を燭に
同様量録口殻与する。

対照（４：本島−（５りで用いた試料（２Ｉｔ鶏Ｏ胸筋
ＫＰ＃ｌＩＩ量注射する。

対１１１（１！本発ＩＩＩ　（Ｉ９　テ用イ危試料（２
１１燭に同様量鰻口投与する・ ｍａｔω：本発＠（９）で用いた試料（５Ｊを錫の胸筋
に同様量注射すゐ。

対照（７）：本発１ｊｉ（？）で用いた試料（潟を錫に
同様量鰻口投与する・ １１１１（ＩＩ：本発明（１３）’ｔ”用いた試料（４
）を−の胸筋に同様量注射すゐ。

対１ＩＩＩ（９Ｓ：本発＠（１５）で用いた試料（４を
−に同橡量経口投与す為・ 表　　　　１ １死−−死率一 本島−（１）Ｏ本ＩＩ　＠（１４）　　　１０１＠　Ｏ
＃（Ｉｓ）　■ ｌ　α）　　　２０　　　　　＃　　（１４）　　　　
５０１＠１２０　　　対　照（１）　　　１０Ｇ＃＠　
１０１＠　４Ｑ ｌ　（−１０Ｉ　（２）　　　ａＯ ＃（７）４０＃　　（２）　　　９０ １＠　４０　＃（１９１００ ＃（至）ＯＩ（２）■ ＃（１０）　Ｏ＃（Ｆ）　１０１１ ＃（１１）２０　＃（２）Ｉ０ Ｉ（１２）ｆｆｉｏ　＃錠）　１００ １（謁）０ 実施例　！ Ｏ日令Ｏ鴎（ブ冒イラー専層種ハパード）１０羽Ｏ肛門
に試料をＪＩＩＩＬ％ｔた対照（り〜（１９）及び１ｍ
１１１１　（２１）−（Ｉ８）鉱試料をそれぞれの方法
で接穏した・対１ｍ（１）％Ｃ２０）は試料１ｔＩＩＩ
！種しない０次−でζｎらの１ＩＩＫ２１日令におｉで
１本発１ｉ（１）−（２７）ＯＩＩＩと対１１（１）べ
１９）の錫は大腸−０２を１別画＃＆０Ｘ１０・儂靜脈
内Ｊｌ穐し１本発明（２６）〜（１４Ｘ）ＩＩＩと対照
（２０）−（５Ｂ）　Ｏ鶏は大島−０７ｓｔ１羽轟ｊ１
．４Ｘ１０１・個靜゛脈円Ｉｉ１稙して感染させる・Ｓ
＊畿７日ｉ１に一死皐について鎖察し□た。

結果はｌＩ２に示す・試ｆＩＩ＋Ｏ柚Ｉ＠および４１株
方法については下記に示す・ 本発＠（１）：大腸■菫−２４４の１．２Ｘ１０１３個
および大腸論’＊Ｏ１，ｏｘ１ｇ１を個をＦｉｌ　Ｋ懸
濁せしめ、１６にホルマリンを１５％に＆為ように加え
、死閤―淘象とした俵、Ｐ！ａｌｌ用いてホルマリンを
十分に除去し達心分１１ｉ（１００００ｒｐｍ％２０分
間）を行ない、死一体を集めそしてＦＢＩ　Ｋ浮遊させ
て１０−とする〔試−（１す。

この試料（１１を鶏の肛門に１羽ｍり１滴（約ａ０２Ｍ
）ｍ下すゐ。

本発明（ｆＪ：本ｅｌｌ（１）で用いた試−（１）を錫
の總癖置腔に同様量注入すゐ、一 本島１ｍ（１：本島＆Ｊ１１（１１で用Ｖ％た試料（１
）ＩＦ■で４倍Ｋ１１ｌ釈し％鶏の肛門に１羽ｍ〉約Ｃ
Ｌ１−スプレーする。

本島＠（４＝本発明（１）で用いた試１１ｉ）（１）を
ア１１で１００倍Ｋｆｋ釈し、鴎の肛門に１羽蟲ｊ）１
１ｉ１（約１０１０２Ｓ調下す為一 本発明（ｓ：本発明（１）で用−た試料（１）を１朋で
１００倚に希釈し、鶏のＩＩ＃ＩＰ置腔に同橡量注入す
ゐ・ 本島＠（４Ｊ！本尭Ｑｌｉ　（１）　”ｅ用イタ試料（
１）　ｔ　ＩＦＩｌ−で４００倚に希釈し５ｔｌｈｔ）
肛門に１別画９約１１−スプレーする。

本発明（刀：本発明（１）で用いた試料（１）　ｔ　Ｆ
ＢＩで１００００倍に希釈し、錫の肛門に１別画９１＃
１１（約（ＬＯ２５ａｄ）滴下すル。

本発明（印！本発明（１）で用−た試料（１）をアＢｅ
で１００００倍に希釈し、錫のｍ排泄腔に同様量注入す
為一 本発明（９）：本発明（１）で用いた試料（１）をＰＢ
ＩＩで４００００普に希釈し％燭の肛門に１別画ｐ約１
１−スプレーする。

本島ＩＩ（１０）：大輪−Ｍｌ−２４４０１，２Ｘ１０
１２個および大腸１１０ｆｉの１．０Ｘ１０１２伽（−
ｐｉｇ２１ｍＫ混會して浮遊させ、シャーレ（Ｆａｘｏ
ｎ　ａｌｌ　１００１麿シヤーレ）Ｋ入れ、紫外ｉＩＩ
ＩＭｌｌ灯（東芝殺―ランプＧＬ　Ｉｓ　）２１．５ａ
下Ｋｆｌき％ｓＯ分毎に攪拌を４−行ない、さらに靜置
状鰺で１６時間照射し、不活化を錬した一体に２．６ｍ
ＫｔｋｈようＫ　ＰＩ−を加え死一体浮遊液〔試料（り
〕を得る・この試料管ＩＩＯ肛門に１羽！１夛ｔｉｌｌ
（約ａ０２＝５ｍ）＊下する。

本島１ｊｌｉ（ｔｔ）：　本島１ｊｌｉ（１０）テ用イ
タ試料（ｚを燭の鱒排泄１ｉｌｆｉｌｌｌ量注入する。

本発明（１２）：本島１１（１ので用いた試料（りｆ　
ＰＩ８で４倍に希釈し％鶏の肛門に１羽幽ｐ約α１−ス
プレーする・ 本島＠（１３）：本＊　＠（１ので用い九試料（２）１
　ｐｍａ　Ｔ１００倍に希釈し、ＳＯ肛門に１羽幽〕１
＃４（約ａ０２５ｍ）１１１４下す為。

本発明（１４）　！本Ｉ＋　＠（１ｏ）テ用いた試Ｐ＃
１２ｋＰＢＢで１００倍に希釈し、鋤Ｏ１１癖１１１腔
に同株量注入する。

本島＠（１５戸本発１ｍ（１０）で用いた試料（２１ｔ
　ＰＩ−で４００倍に一釈し、ＩＩＯ肛門に１羽当）約
α１−スプレーする。

本発＠（１４）：本島−（１ので用いた試料（３１ｐｍ
ａで１００００倍に希釈し、鶏の肛門に１別画９１１ｍ
（約（ＬＯ２５ｍ）滴下する。

本発［１７）：本発明（１０）で用いた試料（力をアＳ
ｍで１００００倍に希釈し％鶏の総排泄腔に同様量注入
する・ 本１ｉｌｌ（１８）：本発明（１ので用いた試料（２：
をアＢ８で４００００僑Ｋｌ釈し％鶏の肛門に１１蟲９
約（Ｌｌ−スプレーする。

本発１１（１９）！大腸−Ｍｍ−２４４Ｃ）４０　Ｘ　
１０”領オヨび大腸−０１０ｔＯＸ１０”個ｖｒＦＢＩ
で１０−にな為ようＫａ會浮遊させ、試験管に入れ、　
４０００ｔＳａとし放射線照射（３メガラツド）を行な
った【試料（１］、この試１）（潟を鶏の肛門に１羽当
）ＩＩＩ（約（ＬＯ２５ｍ）滴下すｈｍ本斃ｖＫ２０）
：本島Ｉ＃ｌ（１？）で用いた試料（１會−の籾排畝Ｍ
Ｋ同橡量注入する。

本１１ｉ＠（２１）！本尭＠（１９）′ｅＪｉｌ　イア
を試料（５１７１８テ４倍に希釈し、鶏の肛門に１羽当
り約１１−１−スプレーする・ 本発明＜’ｎ＞　：本発明（１９）で用いた試＊（ｌｔ
ＰＢｌｌで１００倍に希釈し、鋤の肛門に１羽！！少１
１１（鈎ａ０２５ｍ）摘下すゐ・ 本発明（２５戸本発明（１９）で用いた試料（Ａｌｌ？
朋で１００倍に希釈し、鶏の総排泄腔に同様量注入する
・ 本島＆ｊＩ（２４）：本発明（１９）で用いた試料（ｉ
す１で４００倍Ｋ１１ｌ釈し、鋤の肛門に１別画＃ｌ１
９α１−スプレーすゐ。

本発明（２５）：本島Ｉｊ！（１９）で用いたＫＮ（３
１１９Ｂ−で１００００倍に希釈し、鶏の肛門に１羽！
！ｋｌｆａ（約（ＬＯ２Ｓｉｄ）ｌｉ下ｔ！ｂ。

本発Ｉｊｉ（２６）：本島１１１（１？）で用いた試料
（Ｉす１で１００００倍に希釈し、矯Ｏｍｌ排置腔Ｋｆ
ｌｉｆｌ橡量注入する・ 本ＩＩ　［２７）　：本島［１？）で用％Ａ九試料（潟
をアＢ１で４００００ｍＫ希釈し、燭の肛門に１別画り
約１１−スプレーする。

本発−（訪）；本発明（１７と倉〈同ＩＮＫ行なう。

本島啄２９）：本発明（２と食〈−樟に行なう。

本発ＩＡＣｕ）　：　本＊　ＩＩ　（５１と金〈同１１
１に行なう。

本１１［１ｓ１）！本発１１（４と愈（同様に行１５゜
本発ｔＲｃｕ’）１本発羽（５夛２金〈岡橡に行なう。

本−＠（ｕ）！　＊発＠（６）と食（同４１に行なう。

本島＠（３４）！本ｍＩ＃を力と金（同様に行なう・本
発明（Ｍ）：本発明（御と盆〈同様に行なう・本Ｍ弦襲
）：本島＃　（？）と食＜ｆｉｌｊ様に行なう。

本発明（ｓ７）：本島＠（１のと全く同様に行なう。

本侮頻Ｎ）！本発明（１１）と食〈同様に行なう・本−
ｗ４（１？）：本１ｋ　Ｉｊｉ（１２）と食く同様に行
＊５゜、′ 本―痙４０）富本俺ｗ１３）と全く同様に行なう一本一
啄４１）：本島ｗ１４）と食く同１ａＫ行なう一本島＃
４（４３）２本発明（１６）と金〈同様に行なう。

本島Ｉｊｌ！（４４）：本島１７！（１７）と食く同様
に行なう。

本ＩＩＩ明（４５）：本発明（１８）と金〈同１ａＫ行
なう。

本発明（４４）：本発明（１９）と金（同様に行なう、
一本島９１ｉ（４７）：本発明（２０）と愈〈同様に行
なう。

本発明（４８）　：本発明（２１）と金〈同様に行なう
。

本島＠Ｃ４９）：本発明（２２）と金〈Ｐｊ様に行なう
。

本島Ｉｊｌｌ（８０）：本発明（２ｓ）と全く同様に行
なう。

本島＠（５１）：本発明（２４）と倉〈ＩＱ１橡に行な
う・本発明（５２）　：本発明（２５）゛と金＜　１ｉ
ｉｊｌｌＫ行なう。

本発明（５３）！本発明（２６）と金〈同様に行なう。

本発明（５４）　：本島＠（２７）と食〈Ｐｌ捺に行な
う。

対照（１１：試料を襞株せず、感染のみを行なう。

対１１（１を本島＠（１１で用いた試料を錫Ｏ胸筋に間
橡量注射する。

＊ｊｌ（ＩＪ：本発明（１）で用い九試料【錫に崗様量
鰻口投与する。

対１１１（４２本発明（４で用いた試料を鶏の胸筋に同
一量注射す為。

対照（５）　：本発明（４）で用％ｆｈた試料【鶏に同
様量経口投与すゐ。

対ｊｌ（ω：本発明（７Ｂで用いた試ｌｌＩ４を陶の胸
筋に同一量注射すゐ。

対ｍ１（７）！本尭＠（７）で用いた試料を鶏に同様量
経口投与丁為。

対照（−意本勤＠（１０）で用いた試′Ｉ４を鶏Ｏ胸筋
に同一量注射する・ 対ｌｌ情：本本島（１Ｇ）で用いた試料を鶏に同樟量経
口投与する。

対照（１０）：本＊　１１（１＄）で用いた試料を鴎の
胸ｔＩＪＫ向橡量注射する。

対ＩＩ（１１）：本発明（１３）で用いた試料ｔｌｌｌ
Ｋｆｉｌｊ様量経口投与すみ。

対１１ｍ１（１２）！本発明（１６）で用いた試料を−
の胸筋に同樺量注射する。

対照（１５）：本島＠（１６）で用いた試料【鴎に同様
量経口投与する・ ＊ｊｌ（ｔｎ）：本島＠（１９）で用いた試ａＹｒ婚の
胸筋に一様量注射する。

対照（１５）：本発＠（１？）で用いた試料食鶏に同株
量経口投与する・ 対ｊｌｌｌ（１６）：本＊　ｔｓ＜’ｎ＞で用いた試１
１）を錫の胸筋に同様量注射する・ 対照（１７）：本＊　＃４（２２）で用いた試ＩＰ！を
鶏に一機量経口投与す４ｅ 対ｊｌｌ（１８）！本発ｔ１４ｃδ）で用いた試料管陶
Ｏ胸筋に同一量注射する・ ＊１Ｉｌ（１９）：本発１１（２５）で用いた試料を鋤
に一橡量鰻口投与する。

対ｊｌｌ（２Ｇ）：試料を接種せず、感染Ｏみ【行なう
。

対［２１）ｇ装置−（１）で用い次試料を鶏の胸筋に同
様量注射する・ 対照（２２）！重置１！　（１）で用いた試料を鶏に同
様量経口投与する・ 対照（２！Ｓ）！本発明（４で用−た試料音燭の胸筋に
崗機量注射す為。

’Ｎｕｌｌ（２４）！重置＠（４で用いた試料を帰に同
様量経口投与する。

対照（２５）　ｆ重置１１（７）で用％／％た試料を麹
Ｏ胸筋に同様量注射する。

対ＩＩ（２ｍ）：重置ｌ１ｌ（力で用いた試料【−に同
様童経口投与する・ Ｉｆ　ｍｌ（２Ｆ）富本ｌＩ明（１ので用いた試料ｔ”
鶏Ｏ胸筋に同榔量注射すゐ。

対１１１（２１１１）！本−＠（１０）−ｅ用イタ試料
【錫に同様量経口投与す為。

対ｊｌ（２？）　ｓ本１ｍ　１１（１３）で用いた試料
を鶏Ｏ胸筋に同様量注射すゐ。

対ｍ１（５０）！本発明（１５）で用−た試料を鶏に同
様量経口投与する・ 対照（３１）：本発明（１６）で用いた試料を燭の胸筋
に一禄量注射する。

対Ｍｌ（５２）：装置１ｊｉ（１６）で用いた試料を鳥
に同様量経口投与する。

対照（ｓｓ）　１本発明（１９）で用いた試料音燭の胸
筋に同様量注射すゐ・ 対照（馴）：装置＠（１９）で用いた試料を−に一橡量
経口投与する― ＊　Ｍｌ（り：本装置）ｌ（２２）ｆ用−た試料を錫の
絢ｍＫ向嶺量注射すゐ・ ＊ｊｌ（ム）：装置−（２２）で用いた試料を鴎に岡榔
量鰻口投与すゐ。

対ＩＩＩ（＄７）：装置＠Ｃ２Ｓ＞−Ｃ用いた賦ａｔ鋤
の胸筋に一様量注射する・ 対ＩＩＩ（閏）！本発明（２５）で用い次試料をＩＩＫ
同様量経口投与する。

本発明（１）　　　１０　　　　　本発明（１６）　　
　７０＃　　（２１１０＃（１７）　　　７０＃　　（
３１２０＃（１８）　　　８０＃　　（４４０’（１９
）　　　　’ ＃（！Ｊ　　　４０　　　　　　＃（２０）　　　　０
＃（４１５０＃（２１）　　　１０ ＃　　（７）　　　８０　　　　　　＃　　（２２）　
　　５０＃　　（１８０＃（２５）　　　３０ ＃　　（？）　　　８０　　　　　　＃　　（２４）　
　　３Ｇ“　（１０）−０＃（２５）　　　８０＃（１
１）　　　０　　　　　　＃（２６）　　　８０＃　　
（１２）　　１０　　　　　　＃　　（２７）　　　８
０＃　　（１１）　　２０　　　　　　＃　　（２８）
　　　１０＃　　（１４）　　２０　　　　　　＃　　
（２９）　　　２０＃　　（１１５）　　３０　　　　
　　＃　　（３０）　　　１０−死重＃　　　　　　　
　　　−死重情事！１１１１（３１）　　５０　　　　
本１１＠（４１！Ｉ）　　　１０＃　　（ｕ）　　　４
０　　　　　　　＃　　Ｃ４９）　　　５０＃　　（！
＆！ｓ）　　　４０　　　　　　　＃　　（Ｓｏ）　　
　４０１　　（！＄４）　　　１１０　　　　　　１　
　（５１）　　　４０＃　　（り　　　７０　　　　　
　　＃　　（５２）　　　７０＃　　（５４）　　　８
０　　　　　　　＃　　（Ｓ！Ｓ）　　　７０１　　（
Ｕ）　　　　Ｏ＃　　（５４）　　　＄１０＃（Ｍ）Ｏ
対　黒（１）　　１００ ＃（３９）Ｏ＃　　　（至）　　　！０１　　（４０）
　　　ｆｆ１Ｏ＃　　　＠　　　１００ｚ　　（４リ　
　’Ｓｏ　　　　　　　　Ｉ　　　（４１００＃　　（
４２）　　　２０　　　　　　　＃　　　＠　　　１０
０’　　（４ｓ）　　　７０　　　　　　　＃　　　（
４）　　　１００’　　（４４）　　　７０　　　　　
　　　＃　　　の　　１００’　　（４５３７０＃　　
　（至）　　　！０’（４４）　　　１０　　　　　　
　　＃　　　（９）　　　１ｏ。

＃　　（４７）　　　　Ｏｆ　　（１０）　　１００１
１ＲＩＩＩ（１１）　　１００　　　　　　？Ｊ　　Ｉ
Ｉ（２５）　　　１０ｇ＃　　（１２）　　１００　　
　　　　　　＃　　（２６）　　　　１００’　　（１
３）　　１００　　　　　　　　ｘ　　（２７）　　　
　　９０’　　（１４）　　１００　　　　　　　　＃
　　（２８）　　　　１０ｇ’　　（１５）　　１００
　　　　　　　＃　　（２９）　　　ｌＱＱ＃　　（１
４）　　　９０　　　　　　　　＃　　（５０）　　　
　１００＃　　（１７）　　１００　　　　　　　　’
Ｉ　　（３１）　　　　１００＃　　（ｌｓ）　　１０
０　　　　　　　　＃　　（５２）　　　　１００＃　
　（１９）　　１ｇ□　　　　　　　　＃　　（！ＩＳ
）　　　　　９０’　　（２０）　　１００　　　　　
　　　ｓ　　（３４）　　　　１００＃　　（２１）　
　　９０　　　　　　　　＃　　（５５）　　　　ｌＱ
Ｑ＃　　（２２）　　１００　　　　　　　＃　　（３
６）　　　１００＃　　（Ｌｌ）　　１００　　　　　
　　’　　（３７）　　　ＩＯＱ＃　　（２４）　　１
００　　　　　　　　＃　　（３８）　　　　１０Ｇ夷
總例　墨 騨化畿７２時閲以内の＊＜ｙロイラー萼用撫ハバード）
１０羽の肛門に試料ｔ−接槍し、資た対ａｔクベ１０）
及び対照（１２）〜（２０）及び対照（２２）−（！１
０）は試１４をそｎそれの方法で接極した・対照（１）
、（１１）　％　（２１）　ｔ！試料ｖｔａ＊し’ｈい
、次イテこれら０１１１に２１日令において１本発明（
１）　−（？）と対Ｍｌ　（１）〜（１０）の鳥は大１
６１１１（ｈｔ１羽轟別画　１．２Ｘ１Ｇ’儒靜脈ｆＰ
１ｍ株し、本発明（１０）べ１８）と対照（１１）〜（
２０）のｌＩは大＆１１１０＊ｔ１羽轟ｊ）＆０Ｘ１０
―儒静脈円ＪＩＩｋＬ、そして本発明（１９）べ２７）
七対照（２１）−Ｈ！＄０）　０鶏は大１１１１０ｙｓ
ｔ１羽蟲り　１．４Ｘ１０ｔ。

伽静脈円崇槍して感ＩＩさせゐ、ＪＩ染価７日−ｋ１１
死皐についてＩＩＩＩＩした・結果は表５に示すｅＫ科
の穢−１鐘一方法については下記に示す。

本発明（１）：大腸−１１−２４４０１６Ｘ１０”伽、
大腸−０１の＆０Ｘ１０１宜個および大ｍｍｏ鵞のＡＯ
ＸＩＯ”個を７３１１１　Ｋ　ａ會膳濁せしめ、さらに
ホルマνンｔａｓ％に′＆るように加え死曹−濁阪とし
た後、ＰＢＩＩ用いてホル！リン管十分に除去し、達心
分障（１００ＧＯｒｐｍ％２０分間）１行ない％死■体
を集めそしてｐｉｇ　６ｃ浮遊させて１０−とする（試
料（１）　）　、この試料（１）　Ｋ　ＩＩＯ肛門ｔ１
羽轟別画１０７５−とｔｋｈように浸す・ 本鉛−（り：本艷１１！（１）で用いた試料（１）をν
Ｂ８で１００倍に会釈した４のに％鳥の肛門ｔｆｉｉｊ
様量になゐように浸す。

重置＠ｔＳ：重置明（１）で用いた試料（１）　ｔ−’
１’ＢＩＪ　”ｅ１００００僑に希釈したものに、鶏の
肛門を同様量ＫｅＡように浸す・ 本ａ１１（４Ｉ大輪−ｍ１ｅ−２４４０＆０Ｘ１０１２
１１、大腸−０，０＆０Ｘ１０１２個および大腸−０２
の五〇×１υ１２ｓｔｙｍｓ２．５ｓｕｃａ會ｔ、テ浮
遊させ、シャーレ（νａｌｏｎ製１００１１１１シャー
レ）に入れ、館外−駿一灯（東芝験−ランブＧＬ　１５
）’２１．５ａｚ下に置＊、ｓｏ分１１に攪拌ｔ４１ｇ
１行ない、−１ＫｂＫ静置状態で１４時間層射し、かく
して不活化乾錬した曹体ＫＬＳｄｌｌＣなゐようＫ　Ｐ
ＢＩｉを加えて死一体浮遊液〔試料（２Ｉ）會得る・こ
の試料（２）ＫＩＩＩの肛門ｔ１−轟〕α０７５ｍ　Ｋ
なるように浸す。

装置１！（Ｓ　：　本発明（４）”ｔ’用イタ試料（２
１ｔＰＢｌ！で１００倍に希釈した４０に％ＩＩＯ肛門
を同様量Ｋｔ、＆ように浸す。

装置Ｔｉ！ｌ４（６）：本発明（４）で用ｖｈり試料（
Ｚ　ｔ　ＰＢＩＩ　？１００００僑に希釈した。ものに
、ｌＩＩの肛門を同様量に１４ように浸す。

本発明（刀：大ｊ１６　ａｌｌ　Ｍａ−２４４０Ｓ、、
６　Ｘ　１　Ｇ’２１１．　、＊腸１１０１の＆０Ｘ１
０１２個および大腸■０２の五０Ｘ１０”個ｌＦｌ＃１
０ａｄＫ浮遊させ％試験管に入れ、６ｏＯｏｔＩＩＡＩ
１１とし放射ｓｓｉ射（５メガラツド）を行ｔ”）７’
ｔ（Ｋ％（３１）、ζＯ試＊（！ＪＫＩＩＩＩの肛門を
１別画１ａ０７５−になるように浸丁。

装置＠（Ｓ：装置＠（７１テ用Ｉｎ＆Ｅ科（ｌｔｙｉｓ
で１００倍に希釈Ｌｌもの＃ｃ％鶏の肛門ｔｔ！Ｆ１重
量Ｋｔｋ為ように浸す。

型動−１旬！本Ｊ［（７３で用いた試料（潟を２１１５
１で１００００倚に希釈したものに　ｍの肛門を同様量
にな為ように浸す・ 本ｊｉ［１０）：型動＠（１Ｂ七倉〈同様に行なう。

本ｇｌｈ啄１１）！本発明（２と食く同様に行なう。

本発ｌＫ１２）！本＊ｗｔｓト食＜同１１に行ｔ５゜本
Ａ＠（１３）！事発＃（４３と倉〈同様に行なう。

本１１＠（ｔ４）：型動＠　（！ｉ）と食〈同様に行な
う。

本＊ｌＫ１ｇ）：　本鈎１（−ト金＜　ＭＩＩＫ行ｔ　
５　。

本＊＠（１４）！本発明（７）と全く同様に行なう。

型動９１！（１７）を型動＠（Ｉと食〈同様に行なう。

本発＠（１・）：本発明（旬と金＜ｌＷｌ様に行なう。

本員蝋１９）：型動＠（１）と全く同様に行なう。

１ 型動＠（２０）　：本１１１１（２）と全く１ｗＩ様に
行なう。

本発１１（１１）Ｓ重置＃４（４と食く一嫌に行なう。

本発明（２２）　：本発明（４；と食く同様に行なう。

本発明（２３）ｉ本発明（９と金〈同＊に行なう。

本発明（２４）２本鈎−１６）と倉〈同様に行なう。

型動＠Ｃ２５”）ｉ　型動ｖ４（７）と倉〈同１１に行
なう。

型動ｗＡ（２６）：本発明（団と倉〈同１１に行なう・
型動ＩＩ（２７）２本発明（９１と金〈同様に行なう。

対照（１ド試ＰＩ會豪槍せず、感染Ｏみを行なう。

対照（り：型動＠（１りで用％／Ａた試料１鶏の胸筋に
同様量注射する。

対照（Ｓ：型動−（２１で用いた試料を−の腕筋に同様
量注射する。

対照（４；本発明（ジで用いた試料を鋤の胸筋に同様型
注射す為。

対照（ｓ：本発＆ｊ１１（４で用％Ａた試料を錫Ｏ胸筋
に同様量注射する。

対照（−：本発明（−で用いた試料１−の胸筋に同様型
注射すゐ。

対照（７）二本弗明（４１で用いた試料ｔｔａｏ胸筋に
同様量注射する・ 対ｊｌｌ（ＩＩ）！重置１ｊｉ　（７）で用いた試１４
を錫の胸筋に同様量注射する。

対ＩＩ（？）！本発明（ωで用いた試料を鋤の胸筋に同
様量注射すゐ。

対照（１０）：本発明（９１で用いた試料を錫の胸＠に
同様型注射す為。

対ｊｌｌｌ（１１）：試ｆＩ＋を＊＊せず、感染のみを
行なう・対照（１２）：型動１１（１ので用い究試料を
陶の胸筋に同様量注射すり。

対ｍ１（１３）　：本発明（１１）で用いた試料を＠ｏ
胸勧に同様量注射する。

対照（１４）：本Ｉｉ明（１２）で用いた試料１ｍの胸
筋に同様量注射する。

対ｊｌ（１５）：型動＠（１３）で用い九試料を鋤の胸
筋に一橡量注射すゐ。

対Ｍｌ（１４）！本発明（１４）で用％／ｍた試−を鳥
の胸筋に同様量注射すゐ。

！Ｊ１ＪＩＩ（１７）　：型動＠（１５）で用％Ａた試
料を鶏の胸筋に同様量注射する・ 対照（１８）！本発明（１６）で用いた試料を鶏の胸筋
に同様型注射する・ 対照（１９）：型動１１（１７）で用％／％た試料を鶏
Ｏ胸筋に同様型注射すゐ。

対ｍ１（２０）ｉ本発明（１８）で用いた試料を鶏の胸
筋に同様型注射する・ 対ｊｌｌ（２１）：試料１＊鴇せず、感染のみを行なう
・対ｊｌ（２２）：本発明（１９）で用いた試料を鋤Ｏ
胸筋に同様型注射する。

対＊＜ｕ＞：本発＃（２０）で用いた試料を鋤の胸筋に
同様型注射する・ 対ＩＩＩ（２４）　：本発明（２１）で用いた試料を錫
の胸筋に同様量注射する・ 対ｊｌｌ（２５）：本発明（２２）で用い几試料管−の
胸筋に同様量注射する。

対ｌ１ｌ（２４）　：本発明（２５）で用いた試料を鶏
の胸’１ＩｈＫ同橡量注射する・ 対照（２７）８本発明（２４）で用い危賦ａｔ鶏の胸筋
に一機量注射する・ 対照（２８）！重置Ｉｊ！（２５）で用いた試料を鶏の
胸筋に同様量注射する。

対ＩＩＩ（２９）：本発明（２６）で用い九試料を鶏の
胸筋に同様量注射すゐ・ 対照（郭）：本尭ｖＡ（２７）で用い穴試料を階の胸筋
に−」様量注射する。

１５ 型動＠（１）　　　　１０　　　本発明（４０＃（２１
４０＃（５１１０ ＃（１９０＃（Ａｔ　　　　７０ 斃死率（チ）　　　　　　　　　　斃死率（絢本発明（
７）　　　　１０　　　　　本発明（２４）　　　８０
’　　　（８）　　　　３０　　　　　　　＃　　（２
５）　　　１０’　　　（９）　　　　８０　　　　　
　　＃　　（２６）　　　６゜１　　　（１０）　　　
　１０　　　　　　　　Ｉ（２７）　　　　７０＃　　
（１１）　　　５０　　　　対照（１）　　１００１　
　（１２）　　　　９０　　　　　　　＃　　　（２）
　　　１００＃　　＜１５）　　　　　ＯＩ　　　（５
）　　　１００１　　（誦）　　　　２０　　　　　　
　＃　　　（４７１００ｇ　　（１５）　　　　７０　
　　　　　　ｚ　　　（５３８０’　　（１６）　　　
　１０　　　　　　　＃　　　（６）　　　１００＃　
　（１７）　　　　５０　　　　　　　ｇ　　　（７）
　　　１００＃　　（１８）　　　　８０　　　　　　
　＃　　　（８）　　　　９０ｇ　　（１９）　　　　
１０　　　　　　　＃　　　（９）　　　１００＃　　
（２０）　　　　４０　　　　　　　＃　　（１０）　
　　１００１（２１）８０　　、　　　　　＃　　（１
１）　　１００＃　　（Ｚｉり　　　　　０　　　　　
　　＃　　（１２）　　１００１　　（２５）　　　　
４０　　　　　　　＃　　（１５）　　１００斃死率（
４）　　　　　　　　斃死率（−）対照（１４）　　１
００　　　対照（２５）　　１００＃　　（１５）　　
　８０　　　　　　＃　　（２４）　　　１００＃　　
（１６）　　　１００　　　　　　＃　　（２５）　　
　　８０＃　　（１７）　　　１００　　　　　　＃　
　（２６）　　　１００＃　　（１８）　　　９０　　
　　　　＃　　（２７）　　　１００＃　　（１９）　
　　１００＃　　（２Ｂ）　　　、８０’　　（２３）
　　　１００　　　　　　＃　　（２９）　　　１００
＃　　（２１）　　　１００　　　　　　＃　　（３０
）　　　１００＃　　　（２２）　　　　１０Ｇ 夾ｙａ町　　４ 爵化後７２時間以内の鶏（ブロイ２−専用種ハバード）
１０羽の肛門に王妃に示す試料を１羽４１１１＋’１ｉ
Ｉ４（１’１（ＬＯ２５ｄ）の量で滴下した。

Ｋ％（１）：ニューカッスル病生ワクチン液３〇−（１
０００ドーズ）Ｋ実施例１０本発明（１）で用いた試料
（１１，１０ｄｔ懸濁せしめたもの。

試料Ｑ）：アイメリア・テネラのスポロゾイト４０００
０００個とアイメリア・プルネツテイのスポ■シイ）　
４００００００個とｔｌＩ細例１０本発明（１）で用い
た試料（１３１０ａｄｉ（腸濁せしめたもの。

試料（ｌ　：　！ｌ１ｆｉａｏｂａａｔ＠ｒｉｕｍ　、
　Ｌａａｔｏｂａａｉｌｌｕ−および＃ＰＩＩｌ鳳性大
輪−〇％Ｉ　Ｘ　１０１１儒會Ｐｉｌｌ　１０−に混曾
―濁せしめ％さらに実總例ｓＯ本発明（１：で用いた試
料（１目Ｏａｄを加えて―濁ａ會せしめたもＯ・ 試料（４）　：　ｏｘｏｓｔｒｌａｉｔｔｍ　ｐ＠ｒｔ
ｒｉｎｇ＠ｎｓおよびｆｉａ１ｍｏｎ＊１１ａ　ｐｕｌ
ｌｏｒｕｍのそ１１−ｔ’ｎ１Ｘ１０１１個ｔＩＢａ　
Ｋ　１１濁せしめ、さらにホルマリン會ａ５％になるよ
うに加え、死−膳一液としたｗｋ％ホルマリンを十分に
除去し、遠心分−（１００００ｒｐ鳳、２０分間）を行
ない、死醜体を集めて？！ＩＩＫ浮遊させた４０に実Ｉ
ＩＩＡ例５０本発−（１）で用いた試料（１１１０ｓｇ
ｌｌ濁混貧せしめ尺もＯ・ 試料（５ｊ　！　Ｉａ＊ｍｏｐｈｉｌｔ＞ｓ　ｐａｒａ
ｇａｌｌｌｎａｒｕｍシよびＭｙｏｏｐｌｍｓｍｍ　ｇ
ａｌｌｉｓｓｐｔｌａｕｍのそｒＬぞれｌＸ１０１０個
ｔＩＰＢＩＩＬＳＭＩＫ浮遊させ、シャーレ（Ｆａｌａ
ｏｎ調１００１ｔＳ／ｆｆ−１／）Ｋ入ｆ’ｓ　館外−
験■灯（］［！験■うシゾＧＬ１５）２１．５ａ＋下に
置龜、ＳＯ分侮に攪拌１４ｍ行ない、さらに静置状態で
１６時ＩＭＩｊｌｌ射し、その９２．５ｍ１Ｋなるよう
に１１−を加えて死一体浮遊ｓ［ｔ−得、仁のもＯＫ貴
−ｆｌＪｓＯ＊発＃（４テ用ｈ２試料（２１ｔ２．５ｍ
ｇ加えて―ｓａ會せしめたもの。

試料（１）％　（２１％　（１％　（４１および（５１
に用−た工１−カツスル病生ワタチン、アイメリア・テ
ネラ０スボ謬ゾイト、アイメリア・プルネッティのスポ
ロゾイト％　　！ｌ１ｆｉａｏｂａｏｔ＠ｒｉｕｍ　％
　Ｌａｏｔｏｂａ＠１ｌｌｕａｓ−病鳳愉大輪■％　Ｏ
ｌｏｓｔｒｉａｌｕｍ　ｐ＠ｒｆｒｌｎｊｉ＠１）ＩＩ
Ｉ　ｓ１ｍ１ｍｏｎ＠ｌｌａ　　ｐｕｌｌｏｒｕｍ　１
Ｈａ・ｍｏｐｈｉｌｕｓ　　シｕ１−１１１−ｎａｒｕ
ｍ　％Ｍｙｏｏｐｘａｓｍａ　ｇａｘｘｌｓ＊ｐｉｉｏ
ｕｍ　Ｏ１１４ＩＩ法は王妃Ｏとか・ヤである。

試料（１）に用いた工具−カツスル病生ワクチン龍は化
学及び血清療法研究新製の晶ニーカッスル病生ワタテン
ａｓｓｌ＠淑ＳＯ−中に乾燥予防１１１Ｙｒ１０００ド
一ズ分になるようＫ［ｌして鉤刺した− 試料（りに用いたアイメリγ・テネラＯスポロシイ）Ｏ
ａ１１製法は次のとシシである・アイメリア・テネラ０
１に＠オーシストを経口投与した鋤（）ｍｌ　％ｍ　ｌ
ｋ　ｌｌｌ　ｋよびｍｉｓ内容物１県め、３％重り■ム
酸カリウムｌｌ１ｌＫ浮遊せしめそして２８℃において
２日間培養した・得られた成熟オーシストを會む＊筐を
遠心分１１１１（３０００ｒｐｍ、１０分＠）シセして
ｔＬ＃ｌ１１を集める０次−でこの沈殿【水で洗沖し且
つ飽和食塩水ｔＳ加する・こＯ溶淑を達心分＠（３００
Ｏｒｐｍ、１０分間）シ。

上ａｔと勤、この上ｆＩＩＹｒ水で希釈し、希釈液を史
に遠心分−（１０００ｒｐｍ％Ｓ分間）しそしてｍａｔ
県める。仁のａｍはほとんどオーシストＯみよｐ７＆為
、＊記オーシストに水および５％重次ｉｔｓ素鹸ナトリ
ウム淑を加え且つ１５分間款装し九俵、遠心分離（２０
ＧＯｒｐｍｓ　！！分間）を行う、得られた沈殿を水で
洗浄し、次いでホ噌ジナイず−で磨砕する・この麿砕物
嬬はとんどスポーシストよｊＩｔｋる・このスボクシス
トにＳ％−鳳汁および（Ｌ２Ｓ％トリプシンＦＢＩ　＠
浴＊ｔｍ見そして４０℃の温浴中でおよび１５４間消化
せしめる。得られ良消化ｗＬを遠心分離してａｍを集め
、そしてこの沈殿をＦＢＩ　Ｈ浩液で洗浄すゐ・仁めも
のはほとんどスポロゾイトよ＊＊る。これＫＰＢａＨＩ
Ｉｉ［を加えた・試料（３で用いたアイメリア・プルネ
ツテイのスボｗｌイトは上記のアイメリア・テネラ０ス
ボ謬ゾイト胸製法に皐じて行なう、ただしアイメリア・
テネラの代わｐＫ、アイメリア・プルネツテイを使用丁
も。

試料（ＩＫ用い＊　Ｂｉｆｌａｏｂａｔ＊ｒｉｕｍは陶
の腸管か６分１１Ｌ、アメコルビン険ソーダとＬ−シス
テイシ塩欺塩加プレイン・ハートインフイ異−ジｍｙプ
回ス（Ｄｌｆｏｏ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ社ＩＩ）を用
いてｓｙｃで２０時間培養した後、１００００ｒｐｓａ
において２０分間達６分離會行ってＢ１ｆｉｄｏｂａ＊
ｔ・ｒｉｕの灘一体を鞠る・ 試料（場に用ｖｈたＬａｏｔｏｂａａｉｌｌｕｓ　ｉｊ
試料（ｆｓｅＫ用いた１ｉｆｉ４ｏｂａｏｔ＠ｒｉｕｍ
　ＯＩＩｍ　調法と同様に行なった・ 試料（りＫ用Ｖ％た非病原性大腸−轄健康な陶の腸管よ
ｐ分離し、ハート・インフ晶−ジ璽ンプロス（Ｄｉｆｏ
ｏ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ社１１）を用いてｓｙｃで１
Ｓ時間場譬した畿％　１０１００００ｒｐシいて８０分
間遠心分ｌＩＩを行なって非病鳳性大鵬曹の灘■体會得
為。

試料４４）Ｋ用％／％７ｔ　Ｏｌｏｓｔｏｒｉｔｉｕｍ
　ｐ・ｒｔｒｉｎｇ・ｎ−轄試−（ＩＫ用い＊　１１ｆ
ｉｄｏｂａｏｔ＊ｒｉｕｍ　０脚製法と岡１１に１’ｊ
なった。

試料（４＃に用いた＃ａ１ｍｏｎｓｌｌｏ　ｐｕｌｌｏ
ｒｕｍは靜白痢に―患し危局の糞便よシ分醜し、ハート
・イシフイ轟−ジｗンプイ曹ン（ＤｌｆＯＯＬａｂｏｒ
ａｔｏｒｙ社ＩＩ）ｔＮｓ％／％？！７Ｃで１８時間場
培養た後、　　ｔｏｏｏｏｒｐｍ　において２０分間遠
心分１ｌＩＩｔ−行なってｓａｔｗｉｏｎ＊ｘｌａ　　
ｐｕｌｘｏｒｕｍ　４Ｄｔｉｌｌ　１１１１体を得る・
試−（！９に用い７ｔ　Ｈａｓｍｏｐｈｉ１ｕ＠ｐａｒ
ａｇａｌｌｌｎｏｒｗは鰍−悔＝リー簀に罹患した陶の
鼻腔よｐ分醜し、テ冒；レート簿天培地〔日清化学（抹
）製クリメディア〕で一一場養し１．増殖したコロニー
をコンラージ棒會用−てか書取つ危・ 試％（ＩＫ用い＊　Ｍｙｏｏｐｌａｓｍａ　ｇａｌｌｉ
ｓｅ）ｔｉｏｕｍは１鴎呼歇器性マイコプラズｉ病に罹
患した帰Ｏ気嚢よｐ分離゛レタ・分ｓ２ｊ法ｉｊ　［Ｂ
ｔｓｌｌ、１ｌａｔ、Ｉｎ５ｔ。

ムｎｉｍ、Ｈ１ｔｈ、Ｊ　Ａ　５．５　（１？　４４　
’Ｆ　５１月）１１１０１１１に準じて行ｆｋ′：）た
、すなわち、気−の内情を滅曹−棒でぬぐい、それｔａ
ｓ％イーストエタストラタト（Ｉ）ｌｆａｏ社ＩＩ）加
鱗鐵緩衝食壊Ｉ［１−ＫＩＩＡり出し、ζＯ培養材−０
１白金耳を瞭天平ａｍ地Ｋｍ抹するとと％Ｋａｌ＊＜２
−ｔＤｆ１体場地ＫＩＩＩＩした。平１１培地は乾燥を
防ぐ■的で水でしめらしりＩＲ脂＃Ｉ會入ｆしたデＶヶ
ーメー中に収め、筐体場地はそのｔオそｆＬ−ｔ’ｆＬ
！＋７℃で培養した。平′ＩＩｉ場地は６日＠ＫＳＯ倍
の拡大で銀ｓの有無を観察した。液体培地紘１０日間−
察し、そＯ間場地の黄変したもの扛上０＠ｌ！平Ｉ１１
墳地に麿抹ＩＩＩＩＩ養して集１１０有瀬を検査した・
ζζでＩ！期した液体増地扛、Ｊ１１羽分Ｏもも内。

胸肉、心、肝を細挫し％　２１１１１　Ｏ３１雪水を加
えて１夜氷富に静置し、その後１０ＯＣＫｆＳＯ分加熱
し％−過後ＭａＯＬをα！Ｓ％、鶏血液を！ｉ％そして
１０％１Ｉａｏ番［１％加え、１００℃１０分加熱し％
　）Ｉ　７−８　Ｋ修正値Ｐ通および一過滅■【行なっ
た一゛櫃（１）Ｋ％非働性馬血清２０％％１０％ブドウ
纏１％、１％フェノールレッド１２％。

Ｓ％酢ｌＩ／リウム１％およびイニシリン１０００μ／
−を加え穴もＯを使用した。また、ζこで使用した寒天
〒ａ場ｍｉｘ、ｇ体場地作成峙に使用したＰ液（１３を
約４０ＣＫ加熱し％　１％％寒天液の加熱溶解し露もの
輸量を加えて短時間加熱して完愈Ｅｌｌ解させｓｈｏ℃
に冷却し、非−性馬皇＠２ｏ％％Ｓ％酢酸タリウム１％
およびベニシリν１０００　Ｕ／ａｇを加えて寒天場地
七し危１分■し危Ｍｙｏｏｐｌａｍｍｍ　ｇａｌｌｉｓ
ｅｐｔｉｏｕｍはｌ＄　ｄ　ＰＰＬＯ増殖墳地（栄研）
を用いてｓ７℃において墨日鴎鳩−し１次に１００−の
ＰＰＬＯ鳩地−（栄研）に植え次いで５７℃で５日間培
養し１次Ｋ　５０００１１ｇＯＦＰＬＯ増殖場地に植え
、次いでｓ７Ｃｆ６日間ｊｌｌｌＬ、次Ｋ　２９０００
　Ｇ　’ｔ”　Ｓ　Ｏ分１１４１１１心分１１１して集
収した・ 一出願人　日清徊粉株式会社

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １）　大腸−ＭＴＩＩ−２４４Ｋ）！ｉ：ｍ”＊たは死
   一体を活性成分とすゐ抗大ｌ＆−症剤を鶏のＩＩ＃置腔
   ＫＪＩ−すｈこと１ｅ像とする−の大腸１症の予防法・ ２）大腸−Ｍａ　−２４４の生−１１次は死一体と、大
   輪−〇１あ為い鉱０２あるいは０１と０３０死一体ＯＩ
   Ｉみ會わせから′１にゐ抗大ｗｋ−症剤を錫Ｏ■装置１
   ＩＩＩｃＪＩＩＩＩｋすること１−特徴とする端の大腸
   重症の予防法・ Ｓ）大腸■の不活化がガン！−總照射、紫外艙鳳射會九
   はホルマリンでの処塩でなさｎたもＯ４許請求０１１１
   ｉ１１１１１１ｔ＊ｔ！纂２項記載の大腸−ＳＯｆｇ法
   ・ ４）抗大−−直ＭＯＩＩＩｉ−ｉｉが１羽ａｌｋ　＃　
   １．０Ｘ１０’個以上である特許請求の範１８第１項ま
   たは第２項記載゛の大腸−症の予防法。 ５）抗大腸曹症剤、の１１種方法が滴下、注入、スプレ
   ー、浸ｔｌＩまたは塗付によりなされる肴許請求の範囲
   第１項または第２項記蛎の大腸−Ｉ！ｏ予防法。