JPH1176391A - 創傷治癒を促進させるためのモレキユラーシーブの使用 - Google Patents

創傷治癒を促進させるためのモレキユラーシーブの使用

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JPH1176391A
JPH1176391A JP10193646A JP19364698A JPH1176391A JP H1176391 A JPH1176391 A JP H1176391A JP 10193646 A JP10193646 A JP 10193646A JP 19364698 A JP19364698 A JP 19364698A JP H1176391 A JPH1176391 A JP H1176391A
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mmp
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ポール・ウイリアム・ワツト
Lotte Josephsen
ロツテ・ジヨセフセン
Michael William Grady
マイケル・ウイリアム・グラデイ
James Mcgregor
ジエイムズ・マグレガー
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Johnson and Johnson Medical Ltd
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    • A61L15/00—Chemical aspects of, or use of materials for, bandages, dressings or absorbent pads
    • A61L15/16—Bandages, dressings or absorbent pads for physiological fluids such as urine or blood, e.g. sanitary towels, tampons
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Abstract

(57)【要約】 【課題】 創傷治癒を促進させるためのモレキュラーシ
ーブの使用に関する。 【解決手段】 創傷に適用するための、微孔性の架橋−
結合したポリスチレンビーズまたはゼオライトのような
モレキュラーシーブ材料の使用を提供する。

Description

【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術】本発明は、創傷治癒を促進させる
ための、特に静脈性潰瘍、糖尿病性潰瘍および褥瘡（と
こずれ）のような慢性創傷の創傷治癒を促進するための
モレキュラーシーブの使用に関する。
【０００２】
【従来の技術】慢性創傷、特に静脈性潰瘍、糖尿病性潰
瘍およびとこずれのような一般的な慢性創傷の処置に、
現在好適な手法には吸着体創傷用包帯および単に薬物を
加えた創傷用包帯が含まれる。これらの包帯はこれまで
慢性の創傷治癒のために至適化されたことかなかった。
【０００３】英国特許第2259858号明細書は、悪臭のあ
る創傷から臭気を減じるためにゼオライト（無機の珪酸
アルミニウムモレキュラーシーブの１族）の使用を記載
する。ゼオライトはガス−透過性の小袋(sachet)に密閉
され、そしてゼオライトを含有する小袋は、創傷から発
生する悪臭物質を吸着するために、悪臭のある創傷に適
用された創傷用包帯の上方に置かれる。ゼオライトが創
傷体液と接触するように、創傷に直接適用することを教
示してはいない。
【０００４】1996年5月15-19日に米国、マサチューセッ
ツ州、ボストンで開催された第２回の創傷治癒学会およ
び欧州組織修復学会の合同学会で発表されたポスター１
４８で、C.Christoforouらは、生分解性の陽性に荷電し
たDEAE Sephadexイオン交換体アガロースビーズが、急
性の創傷にインビボで適用した時に、創傷治癒能につい
て良い効果を及ぼすことを報告した。
【０００５】
【発明の構成】本発明は、創傷治癒を促進するために創
傷に適用する組成物を調製するためのモレキュラーシー
ブ材料の使用を提供する。
【０００６】いずれかの理論により拘束されることを望
まないが、モレキュラーシーブ材料は創傷体液からマト
リックス メタロプロティナーゼ(MMP)を吸着することよ
り創傷治癒を促進すると考えられている。このMMPは、
基底膜のような細胞外マトリックス(ECM)成分のタンパ
ク質分解性崩壊の原因である、構造的および機能的に関
連した酵素の一族を示す。MMP生産および活性化のジス
レギュレーション(dysregulation)は、改変されたECMタ
ンパク質分解を引き起こし、ゆっくりと創傷を治癒する
可能性がある。
【０００７】好ましくは、本発明に使用するモレキュラ
ーシーブ材料は、非−生物吸収性である。すなわち、モ
レキュラーシーブは好ましくはインビボで分解しない。
対照的に、MMPに結合することが知られているコラーゲ
ンのようなある種のバイオポリマーは、創傷用包帯とし
て使用した時に、分解のために効率が低下する事が示さ
れ、そしてインビボで結合しているMMPを放出するかも
しれない。
【０００８】好ましくは、本発明に使用するモレキュラ
ーシーブ材料は、水中または血清中で非−膨潤性であ
る。対照的に、イオン交換樹脂に基づくある種のバイオ
ポリマーは水和して低分子の移動を阻害するゲル−様マ
トリックスを形成し、これによりMMPが吸着される効率
を抑制する。
【０００９】好ましくは、ＢＥＴ単一点（乾燥サンプ
ル）窒素吸着法で測定した時のモレキュラーシーブ材料
の比表面積は、250m2/gより大きく、そして好ましくは5
00m2/gより大きく、最も好ましくは750m2/gより大き
い。
【００１０】好ましくは、モレキュラーシーブは本質的
にポリマー粒子から成る。好ましくはポリマー粒子は、
少なくとも750m2/g、より好ましくは少なくとも1000m2/
gの表面積を有する。特定の好適態様では、このモレキ
ュラーシーブはサイズが10−150μmの粒子状である。
【００１１】好ましくはポリマー粒子は、水銀ポロジメ
トリーで測定した時に、1.0μm未満、好ましくは0.25μ
m未満、そして最も好ましくは0.1μm未満の孔直径中央
値を有する。
【００１２】好ましくはポリマー粒子は、0.1−5.0mm、
好ましくは1.0−5.0mmの範囲の直径を有するビーズを含
んで成る。そのようなビーズはモレキュラーシーブとし
て、またはHPLC用の固定相として使用するために市販さ
れている。
【００１３】好ましくは、ポリマー粒子はポリスチレン
を含んで成り、そしてより好ましくはポリマー粒子は架
橋結合したポリスチレンから本質的に成る。適当には、
高度に多孔性の架橋−結合ポリスチレン粒子が、英国、
ミッド−グラモーガン、ポンティクラム、カウブリッジ
ロードのプロライト インターナショナル社(Purolite
International Limited)から登録商標PUROSEPおよびMAC
RONETSで市販されている。これら材料の合成は、例えば
ソ連国特許第434757号および同第804647号明細書に記載
されている。これらの材料は、化学工学の分野におい
て、液体から不純物を除去するためにモレキュラーシー
ブとして使用されて来たが、創傷用包帯に使用するため
に提案されたことはこれまでになかった。
【００１４】多孔性の架橋−結合ポリスチレン粒子は、
ポリスチレンまたは0.3−２％のジビニルベンゼンとそ
のコポリマーを、有機溶媒中でフリーデル−クラフト触
媒の存在下にて二官能性架橋−結合剤を用いて処理する
ことにより形成される。生成した架橋−結合ゲルを、洗
浄そして乾燥させて吸着体粒子を提供する。好適な二官
能性架橋−結合剤は、p-キシレンジクロライド、モノク
ロロジメチルエーテルおよびジメチルホルマルを含む。
好適なフリーデル−クラフト触媒は、三塩化鉄、三塩化
アルミニウム、四塩化錫および二塩化亜鉛を含む。好適
な有機溶媒は、ジクロロエタン、テトラクロロエタンお
よびニトロベンゼンを含む。
【００１５】好ましくは、モレキュラーシーブ材料は、
全体的に、または一部が織られた、不織の、または編ま
れた布で形成されている容器に包含されている。より好
ましくは、モレキュラーシーブは全体が該布から形成さ
れた包み、スリーブまたは靴下に包含されている。好適
な布は、すでに好ましくはヒートシールにより結合して
いる種類のスパン−ボンデットの、不織の、非付着性の
ナイロン布である。モレキュラーシーブ材料を含む生成
した「ティーバック」は創傷表面に直接適用するのに適
しており、これにより創傷体液がモレキュラーシーブ材
料と接触する。別の好適な態様では、モレキュラーシー
ブ材料を、吸着性創傷包帯材料の連続的な固体相に分散
させる。適当な材料は、米国特許第3157524号明細書ま
たは欧州特許出願公開第85/04413号明細書に記載されて
いる架橋−結合した凍結乾燥コラーゲンスポンジのよう
なスポンジ材料を含む。他の好適な態様では、モレキュ
ラーシーブ材料を、ジョンソン アンド ジョンソンメデ
ィカルス社（Jhonson &Jhonson Medical Inc.)から登録
商標TIELLEで販売されているポリウレタンスポンジのよ
うな、非−生分解性の吸着性マトリックス中に分散させ
る。
【００１６】好ましくはモレキュラーシーブ材料を含ん
で成る層を、多層創傷包帯の他の層と組み合わせる。よ
り好ましくは、多層創傷包帯は滅菌され、そしてプラス
チックラミネートホイル小袋のような細菌−不透過性の
容器に包装される。
【００１７】本発明に従い、モレキュラーシーブ材料を
創傷に、好ましくは静脈性潰瘍、糖尿病性潰瘍または褥
瘡のような慢性創傷に、創傷体液がモレキュラーシーブ
材料と接触するように適用する。
【００１８】本発明の具体的な態様をこれから実施例に
より、図面を参照として記載する。
【００１９】
【実施例】
方法１ 大変高い内面積および均一な孔サイズを有する架橋−結
合ポリスチレンモレキュラーシーブを、以下のように調
製した：100ml中のテトラクロロエタン中の2.6g(0.01モ
ル)のSnCl4溶液を、104g（１モル)のポリスチレンおよ
び0.76g(0.01モル)のジメチルホルマル溶液(700mlの同
溶媒中）に加えた。混合物を完全に撹拌し、そして室温
に５時間維持した。生成したゲルをくずし、アセトン、
次にアセトンと0.5N HClの混合物、次に0.5N HCl、次に
水で洗浄し、そしてゲルを乾燥させた。
【００２０】実施例１ 本発明の使用のための創傷用包帯を、以下のように調製
した。
【００２１】プロライト カンパニー（Purolite Compan
y)から得たPUROSEP(商標)ダーク架橋-結合微孔性ポリス
チレンビーズのサンプルを、ヒートシールによりナイロ
ン布中に密閉した。150、298および558mgのビーズを含
む多数のそのような「ティーバック」を調製した。
【００２２】実施例２ ヒトの急性創傷体液に由来するプロ MMP2およびプロ MM
P9の、実施例１で調製した創傷用包帯への結合の程度を
以下のように評価した。
【００２３】実施例１のバックは、2.5mlのサンプルを
1:10に希釈した乳房切除の急性創傷体液に浸漬した。サ
ンプルは周囲温度で３時間、創傷体液と接触状態で震盪
し、続いてティーバックを取り出し、SDS-緩衝液ですす
いだ。
【００２４】創傷体液中に残る特別なMMPプロ酵素の活
性は、Heussen C.およびDowdle E.B.によりAnal.Bioche
m.102:196-202,(1980)(この文献の全内容は、引用によ
り本明細書に編入する)に記載されているように、ゼラ
チン SDS ポリアクリルアミドゲル電気泳動(ザイモグラ
フィー)により評価した。
【００２５】プロティナーゼ活性によるゲル上の個々の
クリアランスゾーンの面積を、OPTILAB(商標)スシテム
により測定した。これは各実験を繰り返し（ｎ＝３）、
そして結果をステューデント試験により統計的に分析す
ることにより行い、ここでＰは0.05以下である。結果は
次の通りである。
【００２６】 包帯 対照のプロ９％ 対照のプロ２％ ナイロン 100 100 ナイロン＋158mgビーズ 71 60 ナイロン＋298mgビーズ 57 34 ナイロン＋558mgビーズ 18.3 8.9 モレキュラーシーブへのMMPの結合の強さは、以下のよ
うに定性的に評価した。ゆるく結合したタンパク質をテ
ィーバックから洗うために、バックを取り出し、そして
５mlのMMP緩衝液に加え、そして１時間震盪した。洗浄
物中にはSDS-PAGEゲルにより検出されるプロテアーゼ活
性はなかった。
【００２７】次にこの「ティーバック」を、以下のよう
に作成した2.5mlのサンプル緩衝液を用いて処理した：
6.3mlの0.5m Tris/HCl、pH6.0緩衝液、２−５mlグリセ
ロール、0.5gドデシル硫酸ナトリウム(SDS)、16.2mlの
水。この強力な界面活性剤-基本緩衝液でも、強力に結
合したMMPをモレキュラーシーブから剥がすことはでき
なかった。
【００２８】実施例３ 一連のモレキュラーシーブおよびイオン交換体樹脂ビー
ズ材料によるMMP結合の比較試験を、以下のように行っ
た：実験には以下の材料を使用した：Purposep(商標)ダ
ーク；Purosep(商標)ライト、HISIV(商標)1000 ゼオラ
イト、AG.50Wゼオライト；HISIV(商標)3000 ゼオライ
ト；ゼラチンアガロースビーズ；QEA-Sephadex(商標)、
ファルマシア社（Pharmacia Ltd)から供給されている固
体アガロースビーズ；DEAE-Sephadex(商標)、ファルマ
シア社から供給されている固体アガロースビーズ；DEAE
Agaroseビーズ；およびDextran S04ビーズ。
【００２９】100mgの各材料のサンプルをミクロ遠心分
離管に入れ、そして１mlの1:15に希釈した急性創傷体液
(MMP緩衝液で希釈した乳房切除体液)を加えた。試験管
を室温で３時間、オービタルミキサーの速度６で震盪し
ながらインキューベーションした。この時間の後、試験
管を卓上遠心機で1300rpmにて遠心し、そして上清を集
め、そして−20℃で保存した。上清の20μlアリコート
中に残るプロMMP2およびプロMMP9活性を、ゼラチンSDS
ポリアクリルアミドゲル電気泳動で実施例2に記載の
ようにアッセイし、そしてその結果を図１に示す。
【００３０】図１に示す結果は、モレキュラーシーブ材
料と一緒にインキューベーションした創傷体液サンプル
中のMMP活性が、明らかに減少していることを示してい
る。この減少は、高表面積（800m2/gより大きい)の架橋
−結合ポリスチレン PUROSEPビーズで最も記録された。
【００３１】各試験管中に残る残渣に、0.5mlのMMP緩衝
液をオービタルミキサーで簡単に混合しながら加えた。
再度、これらの試験管を前記のように遠心し、そして上
清を集めた。この洗浄工程は、弱く結合していたいかな
るプロテアーゼをも種々のサンプル残渣から遊離したは
ずである。
【００３２】最後に、各試験管中に残る各残渣に、0.5m
lのサンプル緩衝液(上記に定義した)を、オービタルミ
キサーで簡単に混合しながら加えた。
【００３３】これらの試験管を４℃で一晩、ゆるやかに
震盪機上で混合した。
【００３４】上清（抽出物）中のプロMMP2およびプロMM
P9活性は、次にMMPが種々の材料に結合する強さを評価
することにより測定した。
【００３５】20μlの抽出物をSDS-PAGEゼラチンザイモ
グラムで流し、そしてプロテアーゼにより生じたクリア
ランスを画像分析システム、デンシトメトリーによるNI
H画像により評価した。値はSDS-PAGEゲル上のゼラチン
クリアランスのピクセルとして与えられる。
【００３６】図２から、処理したゼオライトモレキュラ
ーシーブから幾らかのMMPを抽出することができたが、
そのMMPはこの方法で抽出するにはPurposepに強すぎる
ほど強力に結合していたことが分かる。
【００３７】上記に記載したモレキュラーシーブを含む
創傷用包帯は、創傷治癒を向上させるために慢性創傷の
表面に直接適用できる。したがって別の観点では、本発
明は創傷、特に静脈性潰瘍、とこずれまたは糖尿病性潰
瘍のような慢性創傷に、モレキュラーシーブ材料を含ん
で成る創傷用包帯を適用することにより、それらを処置
する方法を提供する。
【００３８】前記の請求項の範囲内にある多くの他の態
様が、当業者には明らかであろう。
【００３９】本発明の主な特徴および態様は、次の通り
である。
【００４０】１．創傷の治癒を促進するために、創傷に
適用するための組成物を調製するためのモレキュラーシ
ーブ材料の使用。
【００４１】２．モレキュラーシーブ材料が、微孔性の
ポリマービーズおよびゼオライトから選択される、上記
１に記載の使用。
【００４２】３．モレキュラーシーブ材料が、水に非−
膨潤性の非−生分解性ポリマーを含んで成る、上記１ま
たは２に記載の使用。
【００４３】４．モレキュラーシーブ材料が架橋−結合
したポリスチレンビーズを含んで成る、上記３に記載の
使用。
【００４４】５．モレキュラーシーブ比表面積が、BET
一点(乾燥サンプル)窒素吸着測定法により測定した時に
250cm2/gより大きい、上記いずれかに記載の使用。
【００４５】６．上記の比表面積が400cm2/gより大き
い、上記５に記載の使用。
【００４６】７．モレキュラーシーブ材料が、吸着性創
傷用包帯材料中に分散されている、上記いずれかに記載
の使用。
【００４７】８．上記組成物が、静脈性潰瘍、糖尿病性
潰瘍および褥瘡から選択される慢性潰瘍に適用するため
のものである、上記いずれかに記載の使用。
【図面の簡単な説明】
【図１】選択したモレキュラーシーブ材料およびイオン
交換樹脂とインキューベーションした、およびしなかっ
た（対照）後の急性創傷体液中に検出されたMMP活性の
量を示す。
【図２】図１で使用したモレキュラーシーブおよびイオ
ン交換樹脂からMMPのプロテアーゼ抽出後に、SDS-サン
プル緩衝液中に検出されたMMP活性の量を示す。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 ロツテ・ジヨセフセン イギリス・スターリング エフケイ８ １ キユーエス・リバーサイド・アビーミル48 (72)発明者 マイケル・ウイリアム・グラデイ イギリス・バーリー−イン−ウオーフデイ ル エルエス29 ７エルピー・ホールドラ イブ74 (72)発明者 ジエイムズ・マグレガー イギリス・グラスゴー ジー64 １エイワ イ・ビシヨツプブリツグス・フエターケア ンガーデンズ22

Claims (3)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項１】 創傷の治癒を促進するために、創傷に適
    用するための組成物を調製するためのモレキュラーシー
    ブ材料の使用方法。
  2. 【請求項２】 モレキュラーシーブ材料が、微孔性のポ
    リマービーズおよびゼオライトから選択される、請求項
    １に記載の使用方法。
  3. 【請求項３】 モレキュラーシーブ材料が、水に非−膨
    潤性の非−生分解性ポリマーを含んで成る、請求項１ま
    たは２に記載の使用方法。
JP10193646A 1997-06-30 1998-06-25 創傷治癒を促進させるためのモレキユラーシーブの使用 Pending JPH1176391A (ja)

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