JPH11509759A - 肺疾患の検出方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 被験者の少なくとも片側の肺に、肺の粘液分泌物を水和する、および／またはその中の繊毛ビート頻度を刺激する、ウリジン-5'-三リン酸、その活性化合物類似体、またはそのいずれかの薬剤学的に許容可能な塩を投与し、任意で前記少なくとも片側の肺にその中の肺の粘液分泌物を水和する有効量の生理学的に許容可能な塩を同時に投与することを含む、被験者の少なくとも片側の肺から粘液検体の入手を促進するための方法。次いで、喀痰または粘液検体を前記少なくとも片側の肺から収集し、次いで検体を肺疾患に関して分析することができる。本方法の実施に有用な医薬組成物は、ＵＴＰまたはその塩を単独で含むか、あるいは生理学的に許容可能な塩、または薬剤学的に許容可能なその塩との組み合わせを含む。組成物は、液体／液体懸濁液組成物、あるいは乾燥粉末組成物が可能である。

Description

【発明の詳細な説明】 肺疾患の検出方法 本発明は、国立衛生研究所（ＮＩＨ）の補助金番号HL-SP01-34322による政府 援助により達成された。政府は、本発明に特定の権利を有する。 技術分野 本出願は、一般に肺の診断検査、特にその収集を促進するために肺の粘液分泌 物が水和される、肺の診断検査に関する。 背景技術 喀痰検体の分析は、肺癌および肺結核（ＴＢ）等の多くの肺疾患の治療と診断 に特に重要である。 特に、肺の微生物感染は、後天性免疫不全症候群（エイズ）患者において重大 な問題である。二つの特に問題となる感染症は、ニューモシスティスカリニ(Pne umocystis carinii)肺炎感染症とマイコバクテリア(mycobacteria)感染症である 。 ニューモシスティスカリニ肺炎感染症は、典型的には「ＰＣＰ」感染症と呼ば れる。現在、エイズ患者の約７０％がこの疾患にかかるものと推定されている。 ＰＣＰは、ペンタミジンイセチオネートで治療できるが、残念なことに、この治 療法の副作用としてその毒性がある。従って、この疾患にかかっているエイズ患 者の迅速かつ便利なスクリーニングと早期の迅速で正確なその診断が今なお必要 とされている。 マイコバクテリアは、好気性で胞子形成をしない非運動性バチルスの、多様な 、広範に分布する細菌の大きな一科で、細胞壁脂質含有率が高く、成長速度が遅 い。マイコバクテリアには、無害なものも重要な病原体となるものもある。病原 性マイコバクテリウムには、ヒト結核症の病原菌であるヒト型結核菌(M．tuberc ulos is)や、鳥型結核菌(Mycobacterium Avium)複合感染症の病原菌である鳥型結核菌 (M．Avium)のような非ヒト結核症マイコバクテリアが挙げられる。 発明の概要 本発明の第一の態様は、被験者の少なくとも片側の肺からの粘液検体の入手を 促進する方法である。方法は、被験者の少なくとも片側の肺に、その中の肺の粘 液分泌物を水和する有効量の生理学的に許容可能な塩を投与し、同時に被験者の 少なくとも前記片側の肺に肺の粘液分泌物を水和する、および／またはその中の 粘液分泌を刺激する、および／またはその中の繊毛のビート頻度を刺激する有効 量の下記式（Ｉ）の化合物 （式中、X₁、X₂、X₃は、それぞれ独立してOHまたはSHであり、R₁は、O、イミド 、メチレン、ジハロメチレンからなる一群から選ばれ、R₂は、HまたはBrである 。）または薬剤学的に許容可能なその塩を投与することを含む。 方法は、前記被験者の少なくとも前記片側の肺からの粘液検体の収集段階（例 えば、前記被験者が喀痰することによる）が付随するか、あるいは後続する。 被験者の少なくとも片側の肺からの粘液検体の入手を促進する方法も開示され ており、該方法は、該被験者の少なくとも前記片側の肺に肺の粘液分泌物を水和 する、および／またはその中の粘液分泌を刺激する、および／またはその中の繊 毛のビート頻度を刺激する有効量の上記式（Ｉ）の化合物または薬剤学的に許容 可能なその塩を投与し、次いで粘膜検体を前記被験者の少なくとも前記片側の肺 から収集することを含む。収集された粘液検体は、次いで前記被験者における肺 疾患（例えば、微生物感染症、癌、その他）の有無に関して分析することができ る。 本発明の第二の態様は、被験者の少なくとも片側の肺からの粘液検体の収集を 促進するのに有用な医薬組成物で、この組成物は、肺の粘液分泌物を水和する有 効量の生理学的に許容可能な塩、および肺の粘液分泌物を水和する有効量の上記 式（Ｉ）の化合物または薬剤学的に許容可能なその塩のいずれか一方を、単独ま たは組み合わせて含む。組成物は液体組成物でも、乾燥粉末組成物でもよい。 発明の詳細な説明 上記式（Ｉ）の化合物の実例となる化合物（ここでは「活性化合物」とも呼ば れる。）には：（ａ）ウリジン5'-三リン酸(UTP)；（ｂ）ウリジン5'-O-(3-チオ 三リン酸)(UTPγS)；および（ｃ）5-ブロモ-ウリジン5'-三リン酸(5-BrUTP)が含 まれる。好ましい上記式（Ｉ）の化合物は、ＵＴＰ類似体のウリジン5'-O-(3-チ オ三リン酸)（またはUTPγS）である。これらの化合物は公知であり、あるいは 公知の方法または本技術に精通する者にとって明らかな変法に従って合成できる 。一般にはBoucher; N．Cusack and S.Hourani，Annals N．Y．Acad．Sci．603 ，172-181(G．Dubyak and J．Fedan編、1990)の米国特許第5,292,498号を参照。 例えば、UTPは、Kenner et al.，J．Chem．Soc．1954，2288または、Hall and K horana，J．Chem．Soc．76，5056（1954）に記載されている方法で合成できる。 Merck Index，Monograph No．9795（第11版，1989）参照。UTPγSは、R.S．Good y and F．Eckstein，J．Am．Chem．Soc．93，6252(1971)に記載されている方法 で合成できる。 簡単にするために、ここでは式Iはウリジン三リン酸活性化合物を自然界に存 在するＤ型で示しているが、 特に明示されていない限り、本発明はＬ型の化合 物、およびＤ型およびＬ型の化合物の混合物も包含する。好ましくは、自然界に 存在するＤ型である。 式（Ｉ）の活性化合物は、そのものを、あるいは、それらの薬剤学的に許容可 能な塩類の形態で、例えば、ナトリウムあるいはカリウム等のアルカリ金属塩、 アルカリ土類金属塩、またはアンモニウムおよびテトラアルキルアンモニウム塩 、NX₄ ⁺（式中、Xは、炭素数1〜4のアルキル基）を投与できる。薬剤学的に許容 可能な塩は、親化合物の所望の生物活性を保持し、望ましくない毒性作用を発揮 しない塩である。 アミロライド(amiloride)［3,5-ジアミノ-6-クロロ-N-(ジアミノメチレン)ピ ラジンカルボキサミドとしても知られている。］、ベンザミル(benzamil)［3,5- ジアミノ-6-クロロ-N-(ベンジルアミノアミノメチレン)ピラジンカルボキサミド としても知られている。］、フェナミル(phenamil)［3,5-ジアミノ-6-クロロ-N- (フェニルアミノアミノメチレン)ピラジンカルボキサミドとしても知られている 。］は、公知の化合物であり、E．Cragoeの米国特許第3,313,813号に開示されて いる。ここに使用される「アミロライド」、「ベンザミル」、「フェナミル」（ ここでは「活性化合物」とも呼ばれる。）の言葉は、薬剤学的に許容可能なそれ らの塩類を含み、例えば、塩酸アミロライド、塩酸ベンザミルまたは塩酸フェナ ミル等（しかし、これらに限定されない。）が挙げられる。あるいは、本発明の 組成物を調製するために使用されるアミロライド、ベンザミル、またはフェナミ ルは、アミロライド、ベンザミル、またはフェナミルの薬剤学的に許容可能な遊 離塩基の形態でも良い。化合物の遊離塩基は塩よりも溶けにくいため、肺にベン ザミルまたはフェナミルをより持続的に放出する場合に使用される。 本発明の方法を実施するために使用される生理学的に許容可能な塩類（ここで は、しばしば「活性化合物」と呼ばれる。）は、肺の内皮細胞から粘液への水の 輸送を促進することにより肺の粘液分泌物を水和するものである。生理学的に許 容可能な塩類は、肺の粘液分泌物を水和するための望ましい生物活性を保持し、 望ましくない毒性作用は発揮しない塩類である。生理学的に許容可能な塩類は、 典型的には、塩化ナトリウム、塩化カリウム、塩化コリン、N-メチル-D-グルカ ミンクロライドなどの塩化物の塩である。現在、塩化ナトリウムが好ましい。こ れらの塩は、吸入可能な乾燥粉末（下記に検討されている）または水溶液の形態 で提供される。 本発明は、主にヒト被験者の治療に関する。被験者は、嚢胞性線維症患者であ るかどうかは問わない。本発明は、イヌやネコ等のその他の哺乳動物の被験対象 の治療にも獣医学的目的に使用できる。 ここに開示されている活性化合物は、適切な手段により被験者の肺に投与でき る。ここに使用されている「同時に」という言葉は、併用効果を発揮することが できる十分近い時間を意味する（即ち、同時とは同じ時間か、あるいは各投与の 前または後の短時間に２つ以上の事象が発生してもよい）。「少なくとも片側の 肺」とは、被験者の片側の肺または両側の肺に活性化合物を投与できるが、投与 が片側の肺に限られる場合には、種々の活性化合物は同じ肺に投与すべきである ことを意味する。 活性化合物は、好ましくは、被験者が吸入する単数または複数の活性化合物を 含む吸入可能な粒子のエーロゾル懸濁の投与により投与される。活性化合物は、 乾燥粉末吸入薬、計量された投与量の吸入薬、または液体／液体懸濁液などの種 々の形態でエーロゾル化できるが、これらに限定されない。吸入可能な粒子は液 体または固体であってもよい。米国特許第4,501,729号に記載されているように （出願者は、この特許と本明細書で引用されたその他の全ての特許の内容を取り 込んで本明細書の一部をなすこととする。）、粒子は、アミロライド、ベンザミ ルまたはフェナミルなどのその他の治療成分を、気道粘液分泌物からの水の再吸 収を阻害する有効量の選択された化合物と共に任意で含む。 粒状の医薬組成物は、分散または輸送を補助する担体と任意で組み合わせるこ とができる。糖（即ち、乳糖、スクロース、トレハロース、マンニトール）のよ うな適切な担体は、適当な比率（例えば、重量比で１対１）で、単数または複数 の活性化合物と混合できる。 本発明を実施するための活性化合物を含む粒子は、吸入可能なサイズの粒子： 即ち、吸入時に口腔または鼻腔と喉頭を通過し、肺の気管支と肺胞の中に入るの に十分小さいサイズの粒子を含むべきである。一般に、サイズが約１から１０ミ クロン（より好ましくは、サイズが約５ミクロン未満）の粒子が吸入可能である 。エーロゾルに含まれる吸入不可能なサイズの粒子は咽喉部に沈着し、のみこま れる傾向があり、エーロゾル中の吸入不可能な粒子の量は最小限にするのが好ま しい。鼻腔投与に関しては、10〜500μmの範囲の粒子径が鼻腔内に確実に保持す るために好ましい。 エーロゾルを生産するための活性化合物の液体医薬組成物は、活性化合物を発 熱物質を含まない滅菌水のような適切な賦形剤と組み合わせることにより調製で きる。本発明を実施するために使用される高張食塩水は、好ましくは、発熱物質 を含まない滅菌溶液で、１から１５（重量）％の生理学的に許容可能な塩を含み 、より好ましくは、３から７重量％の生理学的に許容可能な塩を含む。式（Ｉ） の化合物または薬剤学的に許容可能なその塩類が高張食塩水和物に含まれる場合 には、それらは典型的には、約10^-4Mから約10^-1Mの濃度で、より好ましくは、約 10^-2Mから約10^-1Mの濃度で含まれる。アミロライド、ベンザミルまたはフェナミ ルなどのその他の治療用化合物を任意で含めることができる(このような化合物 を含める場合、食塩水は、好ましくは、0.3重量％以下の生理学的に許容可能な 塩であり、より好ましくは、0.12重量％の生理学的に許容可能な塩である。) 微細化された活性化合物の吸引可能な乾燥粒子を含む固体粒子組成物は、乳鉢 と乳棒で乾燥活性化合物をすりつぶし、次いで微細化された組成物を400メッシ ュの篩にかけ、大きな凝塊を破砕または分離することにより調製できる。活性化 合物は単独（すなわち、固体粒子組成物は活性化合物を実質的に含むことができ る。）、あるいは適切な比率で活性化合物と混合して（例えば、１対１の重量比 ）、肺または気道に送るために糖(即ち、乳糖、スクロース、トレハロース、マ ンニトール)またはその他の許容可能な賦形剤、分散剤、希釈剤または担体と組 み合わせて処方することもできる。乾燥粉末固体粒子組成物は、吹き付け乾燥、 製粉、凍結乾燥、その他の本技術において公知の方法により入手できる。同様に 、アミロライド、ベンザミルまたはフェナミル等のその他の治療用化合物も含め る事ができる。 活性化合物を含む液体粒子のエーロゾルは、圧力で駆動するジェットネブライ ザーまたは超音波ネブライザー等の適切な手段により作製できる。米国特許第4, 501,729号参照。ネブライザーは、活性化合物成分を含む溶液または懸濁液を、 典型的には空気または酸素等の圧縮ガスを狭いベンチュリ管オリフィスを通して 加速するか、または超音波により攪拌させることにより、治療用エーロゾルミス トに変換する市販されている装置である。ネブライザーで使用するために適切な 処方は、液体担体中の活性化合物成分からなり、活性成分は処方の最大限40w/w ％まで含むが、20w/w％未満が好ましい。担体は、典型的には水（最も好ましく は、発熱物質を含まない水）、または希釈水性アルコール溶液、好ましくは、等 張に調製された希釈水性アルコール溶液である。しかし、担体は、例えば、塩化 ナトリウムを添加することにより体液と比較して高張でもよい。任意の添加剤に は、処方が滅菌されずに調製された場合には、例えば水酸化安息香酸メチルのよ うな防腐剤、抗酸化剤、香料、揮発油、緩衝剤、界面活性剤が含まれる。 活性化合物を含む固体粒子のエーロゾルも同様に、固体粒子薬物エーロゾル発 生装置により生産できる。固体粒子薬物を被験者に投与するためのエーロゾル発 生装置は、上記の様に吸入可能な粒子を作製し、計量された所定の投与量の薬物 を含む一定容量のエーロゾルを、ヒトへの投与に適した速度で発生する。固体粒 子エーロゾル発生装置の一例は、吸入器である。吸入器による投与に適した処方 には、微細に粉砕された粉末が含まれ、これは吸入器により送られるか、あるい は鼻から吸い込む方法で鼻腔内に摂取される。吸入器内で、粉末（例えば、ここ に記載されている治療を実施するために有効なその測定された投与量）は、典型 的には、ゼラチンまたはプラスチックで作られたカプセルまたはカートリッジに 入っており、これはその場で穴を空けられるか、開封されて、吸入により、ある いは手動ポンプにより装置に空気が通過することによって粉末が送られる。吸入 器に使用される粉末は、活性成分のみか、あるいは活性成分、乳糖のような適切 な粉末希釈剤、任意で界面活性剤を含む粉末ブレンドを含む。活性成分は、典型 的には、処方の0.1から100w/wである。第二のタイプのエーロゾル発生装置の例 は、投与量を調節できる吸入器を含む。計量された投与量吸入器は、典型的には 液化高圧ガスである推進剤(propellant)中に活性成分の懸濁液または溶液処方を 含む、加圧エーロゾルディスペンサーである。使用中、これらの装置は、典型的 には、10から200μリットルの調節された容量を送るように調整されたバルブを通し て処方を発射し、活性成分を含む微細な粒子スプレイを発生する。適切な推進剤 には、特定のクロロフルオロカーボン化合物、例えば、ジクロロジフロロメタン 、トリクロロフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタンおよびそれらの混 合物が含まれる。処方は、さらに一種類以上の例えばエタノールのような補助溶 媒(cosolvent)、オレイン酸または三オレイン酸ソルビタン等の界面活性剤、抗 酸化剤、適切な香料をさらに含めることができる。 クロロフルオロカーボンを含む推進剤とクロロフルオロカーボン以外を含む推 進剤の両者を含め、どのような推進剤でも本発明の実施に使用できる。従って、 本発明の実施に使用できるフルオロカーボンエーロゾル推進剤には、全ての水素 がフッ素で置換されたフルオロカーボン推進剤、全ての水素が塩素と少なくとも 一個のフッ素で置換されたクロロフルオロカーボン推進剤、水素を含むフルオロ カーボン推進剤、および水素を含むクロロフルオロカーボン推進剤が含まれる。 このような推進剤の具体例として以下が挙げられるが、これらに限定されない： CF₃-CHF-CF₂H; CF₃-CH₂-CF₂H; CF₃-CHF-CF₃; CF₃-CH₂-CF₃; CF₃-CHCl-CF₂Cl; CF₃ -CHCl-CF₃; cy-C(CF₂)₃-CHCl; CF₃-CHCl-CH₂Cl; CF₃-CHF-CF₂Cl; CF₃-CHCl-CFH Cl; CF₃-CFCl-CFHCl; CF₃-CF₂-CF₂H; CF₃-CF₂-CH₃; CF₂H-CF₂-CFH₂; CF₃-CF₂-CF H₂; CF₃-CF₂-CH₂Cl; CF₂H-CF₂-CH₃; CF₂H-CF₂-CH₂Cl; CF₃-CF₂-CF₂-CH₃; CF₃-CF₂ -CF₂-CF₂H; CF₃-CHF-CHF-CF₃; CF₃-O-CF₃; CF₃-O-CF₂H; CF₂H-H-O-CF₂H; CF₂H- O-CFH₂; CF₃-O-CH₃; CF₃-O-CF₂-CF₂H; CF₃-O-CF₂-O-CF₃; cy-CF₂-CF₂-O-CF₂-; c y-CHF-CF₂-O-CF₂-; cy-CH₂-CF₂-O-CF_2-; cy-CF₂-O-CF₂-O-CF₂-; CF₃-O-CF₂-Br; CF₂H-O-CF₂-Br; およびそれらの混合物。式中、「cy」は、環式化合物を意味す る。この場合、表示されている構造式の両端の末端共有結合は同一であり、両端 の末端基が互いに共有結合する。特に好ましくは、1,1,1,2-テトラフルオロエタ ン（推進剤134a）およびヘプタフルオロプロパン（推進剤227）等のヒドロフル オロアルカンである。フルオロポリマーのような安定剤は、Johnsonの米国特許 第5,376,359号に記載されているように、フルオロカーボン推進剤の処方に任意 で含めることができる。 エーロゾルは、固体または液体粒子から形成される場合でも、約10から150リットル /分の速度で、好ましくは約30から150リットル/分、最も好ましくは約60リットル/分の 速度でエーロゾル発生装置により発生できる。薬物量の多いエーロゾルほど、よ り急速に投与できる。典型的には、各エーロゾルは患者に約30秒間から約20分間 、患者に投与でき、好ましくは、約5分から10分間の投与時間である。 式（Ｉ）の化合物、または薬剤学的に許容可能なその塩の投与量は、治療され る状況と被験者の状態によって変わるが、一般に被験者の気道表面で活性化合物 の溶解濃度が約10^-9から約10^-2モル/リットルまでまたは10^-1モル/リットルまででさえで もよく、より好ましくは、約10^-5から約10^-1モル/リットル、最も好ましくは、約10^{- 4} から約10^-3まで、約10^-1モル/リットルまでに達するのに十分な量であろう。投与さ れる活性化合物の溶解度に応じて、一日量を一回または数回に分けて投与するこ とができる。 喀痰検体を、その中の感染性微生物種を検出するために細胞、細菌またはＤＮ Ａ分析に供する場合、まず喀痰検体をN-アセチル-L-システイン（NALC）および 水酸化ナトリウム等の融解剤で分解する。 上記のように、本発明はニューモシスティスカリニ肺炎とマイコバクテリア感 染症の検出に使用される粘液検体の収集に特に有用である。ここで使用される「 マイコバクテリア」という言葉は、本技術における従来の意味を持ち、抗酸性、 非運動性、桿状細菌を示す。一般的にはB．Davis et al.，Microbiology，724-7 42（第#版、1980）を参照。一般に全てがマイコバクテリウム科に属する。具体 例として、マイコバクテリアは、マイコバクテリウムアフリカナム(Mycobacteri um africanum)、トリ型結核菌(M．avium)、ウシ型結核菌(M．bovis)、ウシ型結 核菌−ＢＣＧ(M．bovis-BCG)、マイコバクテリウムキロナエ(M．chelonae)、マ イコバクテリウムフォルツイタム(M．fortuitum)、マイコバクテリウムゴルドナ エ(M．gordonae)、マイコバクテリウムイントラセルラエ(M．intracellulae)、 マイコバクテリウムカンサシ(M．kansasii)、らい菌(M．leprae)、マイコバクテ リウムミクロチ(M．microti)、パラ結核菌(M．paratuberculosis)、マイコバク テリウムスクロフラセウム(M．scrofulaceum)、およびヒト結核菌(M．tuberculo sis)が挙げられるが、これらに限定されない。本発明は、結核性(tuberculosis) およびと非結核性(non-tuberculosis)マイコバクテリウムの両者の診断に有用で 、トリ型結核菌複合感染症の診断に有用である。 本発明は以下の実施例に詳細に説明されているが、これらに限定されるもので はない。 実施例１ ＵＴＰとそれに続く高張食塩水の投与 被験者にPari LC PlusネブライザーによりＵＴＰ溶液（発熱物質を含まない0. 9％（重量）の滅菌食塩水中の10^-2M UTP）のエーロゾルを10分間吸入させる。そ の直後、被験者にネブライザーにより高張食塩水（発熱物質を含まない3%の滅菌 食塩水）のエーロゾルを10分間吸入させる。エーロゾル吸入中とエーロゾル吸入 後、被験者に咳をさせ、エーロゾル吸入中とエーロゾル吸入停止後20分間にわた り全ての喀痰を収集する。喀痰はプラスチック喀痰容器に採取する。このように して得られた喀痰を臨床上必要な間、内容に関して分析する。これには、銀染色 および免疫蛍光法による肺の新生物に関する細胞検査、ニューモシスティスカリ ニの様な感染性物質の分析が含まれる。この方法は、培養、免疫細胞化学、およ び分子（ＰＣＲ）その場での(in situ)ハイブリッド形成）技術を用いて、細菌 、ウイルス、マイコプラズマ等の肺下部のその他の微生物の診断に応用できる。 実施例２ アミロライドを含むＵＴＰの投与 本実施例は、ＵＴＰが発熱物質を含まない0.12％の滅菌食塩水に溶解され、そ の溶液に10^-2Mアミロライドも含まれている以外は、上記実施例１と実質的に同 じ方法で実施される。 実施例３ 高張食塩水とそれに続くＵＴＰの投与 本実施例は、高張食塩水を最初に投与し、その直後にＵＴＰ溶液を投与する以 外は、上記実施例１と本質的に同じ方法で実施される。投与の継続時間および濃 度は同様である。 実施例４ 高張食塩水中のＵＴＰの同時投与 本実施例は、上記実施例１の変法により実施される。10^-1ＵＴＰを高張食塩水 に希釈して、ネブライザーにより発生させたエーロゾルを15分間吸入させること により一種類の溶液を患者に投与する。 実施例５ ＵＴＰ投与とそれに続く検体収集 本方法は、高張食塩水を別に投与しない以外は、上記実施例1と実質的に同じ 方法で実施される。 被験者にPari LC PlusネブライザーによりＵＴＰ溶液（発熱物質を含まない0. 9％（重量）の滅菌食塩水中の10^-2M ＵＴＰ）のエーロゾルを10分間吸入させる 。エーロゾル吸入中とエーロゾル吸入後、被験者に咳をさせ、エーロゾル吸入中 とエーロゾル吸入停止後20分間にわたり全ての喀痰を収集する。喀痰はプラスチ ック喀痰容器に採取する。このようにして得られた喀痰を実施例１に記載されて いる様に分析する。この方法は、培養、免疫細胞化学、および分子（ＰＣＲ、そ の場での(in situ)ハイブリッド形成）技術を用いて、細菌、ウイルス、マイコ プラズマ等の肺下部のその他の微生物の診断に応用できる。 実施例６ 固体粒子ＵＴＰの投与 本実施例は、固体粒子ＵＴＰまたは薬剤学的に許容可能な塩、例えば、上述の 方法、あるいはBoucherの米国特許第5,292,498号に記載されている方法により調 整されたＵＴＰ酸ナトリウムを実質的に含む吸入可能な乾燥粉末を被験者に投与 する以外は、上記実施例５と本質的に同じ方法で実施される。喀痰検体を、上記 実施例１および５に記載されている方法により収集し、上記実施例１および５に 記載されている方法により分析する。 前記実施例は本発明を説明するためのもので、本発明を制限する事を目的とす るものではない。特に、容量、時間、数量は上記に具体的に示されたものとは異 なる可能性がある。したがって、本発明は以下の請求項により定義され、請求項 と同等物もその中に含まれる。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ， ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，Ｌ Ｕ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ， ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，Ｓ Ｚ，ＵＧ)，ＵＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＴ，ＡＵ ，ＡＺ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ， ＣＺ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＥ，ＤＫ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＥ，Ｅ Ｓ，ＦＩ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＨＵ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ， ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，Ｍ Ｘ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ， ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １．被験者の少なくとも片側の肺に、該肺中の肺粘液分泌物を水和し、および ／または該肺中の繊毛のビート頻度を刺激する有効量の生理学的に許容可能な塩 を投与し、 同時に、上記被験者の少なくとも上記片側の肺に、上記肺の肺粘液分泌物を 水和する有効量の下記式（Ｉ）の化合物 （式中、X₁、X₂、X₃は、それぞれ独立にOHまたはSHであり、R₁は、O、イミド、 メチレン、およびジハロメチレンからなる一群から選ばれ、R₂は、HまたはBrで ある。）または上記式（Ｉ）の化合物の薬剤学的に許容可能な塩を投与すること を含む、被験者の少なくとも片側の肺からの粘液検体の入手を促進する方法。 ２．上記記生理学的に許容可能な塩を、該塩と、上記式（Ｉ）の化合物または 上記式（Ｉ）の化合物の薬剤学的に許容可能な塩のいずれか一方とを含む水溶液 の投与により投与する請求項１に記載の方法。 ３．上記式（Ｉ）の化合物または上記式（Ｉ）の化合物の薬剤学的に許容可能 な塩を、上記被験者の気道表面で約10^-9から約10^-1モル/リットルの濃度を達成でき る 十分な量で投与する請求項１に記載の方法。 ４．肺粘液分泌物から水の再吸収を阻害する有効量で、アミロライド、ベンザ ミル、フェナミルおよび薬剤学的に許容可能なこれらの塩類からなる一群から選 ばれる化合物を、上記被験者へ同時に投与することをさらに含む請求項１に記載 の方法。 ５．上記X₂および上記X₃が、OHである請求項１に記載の方法。 ６．上記R₁が、酸素である請求項１に記載の方法。 ７．上記R₂が、Hである請求項１に記載の方法。 ８．上記化合物が、ウリジン-5'-三リン酸、ウリジン-5'-O-(3-チオ三リン酸) および薬剤学的に許容可能なそれらの塩類からなる一群から選ばれる請求項１に 記載の方法。 ９．上記生理学的に許容可能な塩が、塩化ナトリウム、塩化カリウム、塩化コ リン、およびN-メチル-D-グルカミンクロライドからなる一群から選ばれる請求 項１に記載の方法。 １０．上記生理学的に許容可能な塩が、塩化ナトリウムである請求項１に記載 の方法。 １１．上記被験者の上記少なくとも片側の肺から粘液検体を収集する段階をさ らに含む請求項１に記載の方法。 １２．上記生理学的に許容可能な塩と、上記式（Ｉ）の化合物または上記式（ Ｉ）の化合物の薬剤学的に許容可能な塩のいずれか一方とを、それらを含む吸入 可能な粒子のエーロゾル懸濁を、上記被験者の上記少なくとも片側の肺に投与す ることにより投与する請求項１に記載の方法。 １３．被験者の少なくとも片側の肺に、該肺中の肺粘液分泌物を水和し、およ び／または該肺中の繊毛のビート頻度を刺激する有効量の下記式（Ｉ）の化合物 （式中、X₁、X₂、X₃は、それぞれ独立してOHまたはSHであり、R₁は、O、イミド 、メチレン、ジハロメチレンからなる一群から選ばれ、R₂は、HまたはBrである 。）または上記式（Ｉ）の化合物の薬剤学的に許容可能な塩を投与することを含 み、そしてその後上記被験者の上記少なくとも片側の肺から粘液検体を収集する ことを含む、被験者の少なくとも片側の肺からの粘液検体の入手を促進する方法 。 １４．上記被験者の肺疾患の有無を検出するために上記粘液検体を分析する段 階をさらに含む請求項１３に記載の方法。 １５．上記生理学的に許容可能な塩を、該塩と、上記式（Ｉ）の化合物または 上記式（Ｉ）の化合物の薬剤学的に許容可能な塩のいずれか一方とを含む水溶液 を投与することにより投与する請求項１３に記載の方法。 １６．上記式（Ｉ）の化合物または上記式（Ｉ）の化合物の薬剤学的に許容可 能な塩を、上記被験者の気道表面で約10^-9から約10^-3モル/リットルの濃度を達成す るのに十分な量で投与する請求項１３に記載の方法。 １７．肺粘液分泌物からの水の再吸収を阻害する有効量で、アミロライド、ベ ンザミル、フェナミルおよび薬剤学的に許容可能なそれらの塩類からなる一群か ら選ばれる化合物を、上記被験者に同時に投与することをさらに含む請求項１３ に記載の方法。 １８．上記X₂および上記X₃が、OHである請求項１３に記載の方法。 １９．上記R₁が、酸素である請求項１３に記載の方法。 ２０．上記R₂が、Hである請求項１３に記載の方法。 ２１．上記化合物が、ウリジン-5'-三リン酸、ウリジン-5'-O-(3-チオ三リン 酸)および薬剤学的に許容可能なこれらの塩からなる一群から選ばれる請求項１ ３に記載の方法。 ２２．上記式（Ｉ）の化合物または上記式（Ｉ）の化合物の薬剤学的に許容可 能な塩を、それらを含む吸入可能な粒子のエーロゾル懸濁を上記被験者の上記少 なくとも片側の肺に投与することにより投与する請求項１３に記載の方法。 ２３．肺粘液分泌物を水和する有効量の生理学的に許容可能な塩と、肺粘液分 泌物を水和し、および／または繊毛のビート頻度を刺激する有効量の下記式（Ｉ ）の化合物： （式中、X₁、X₂、X₃は、それぞれ独立してOHまたはSHであり、R₁は、O、イミド 、メチレン、ジハロメチレンからなる一群から選ばれ、R₂は、HまたはBrである 。）または上記式（Ｉ）の化合物の薬剤学的に許容可能な塩のいずれか一方とを 組み合わせて含む、被験者の少なくとも片側の肺から粘液検体の入手を促進する ため に有用な医薬組成物。 ２４．上記組成物が、吸入可能な粒子を含む乾燥粉末である請求項２３に記載 の組成物。 ２５．上記組成物が、食塩水である請求項２３に記載の組成物。 ２６．上記食塩水が、高張食塩水である請求項２５に記載の組成物。 ２７．上記溶液が、肺粘液分泌物からの水の再吸収を阻害する有効量で、アミ ロライド、ベンザミル、フェナミルおよびそれらの薬剤学的に許容可能な塩類か らなる一群から選ばれる化合物をさらに含む請求項２３に記載の組成物。 ２８．上記生理学的に許容可能な塩が、塩化ナトリウム、塩化カリウム、塩化 コリン、N-メチル-D-グルカミンクロライドからなる一群から選ばれる請求項２ ３に記載の組成物。 ２９．上記生理学的に許容可能な塩が、塩化ナトリウムである請求項２３に記 載の方法。