JPH11508246A

JPH11508246A - ヘルペスリボヌクレオチド還元酵素インヒビター

Info

Publication number: JPH11508246A
Application number: JP9503484A
Authority: JP
Inventors: ジャンアンドレゴーティエール; ニールモス
Original assignee: ベーリンガーインゲルハイム（カナダ）リミテッド
Priority date: 1995-06-23
Filing date: 1996-03-27
Publication date: 1999-07-21
Also published as: IL118705A0; EP0837845B1; ZA965272B; AU5097796A; DE69617433T2; CA2152541C; AR002541A1; MX9710147A; ATE209628T1; US5672586A; DE69617433D1; EP0837845A1; CA2152541A1; WO1997000855A1

Abstract

(57)【要約】Ｒ¹が水素または(1-4C)アルキルであり、Ｒ²が(1-4C)アルキルである式(I)の化合物またはその治療上許される塩が本明細書に開示される。これらの化合物はヘルペス感染症を治療するのに有益である。

Description

【発明の詳細な説明】ヘルペスリボヌクレオチド還元酵素インヒビター発明の分野本発明は抗ウイルス性を有するペプチド擬態化合物及びウイルス感染症を治療するための化合物の使用方法に関する。更に詳しくは、本発明はヘルペスウイルスに対する活性を示すペプチド擬態化合物、これらの化合物を含む医薬組成物、及びヘルペスウイルスの複製を抑制し、またヘルペス感染症を治療するためのこれらの化合物の使用方法に関する。発明の背景ヘルペスウイルスはヒト及び動物に対し広範囲の疾患を与える。例えば、単純ヘルペスウイルス、型１及び２(HSV-1 及びHSV-2)は夫々唇ヘルペス及び性器病変の原因である。水痘帯状疱疹ウイルス(VZV)は水痘及び帯状疱疹を引き起こし、またエプスタイン−バールウイルス(EBV)は感染性単核細胞症を引き起こす。過去20年にわたって、プリンヌクレオシド類似体及びピリミジンヌクレオシド類似体として知られている化合物のクラスがヘルペスウイルス感染症の治療のための新しい治療薬に関する研究において研究者らにより最も関心を受けていた。その結果、幾つかのヌクレオシド類似体が抗ウイルス剤として開発されていた。現在最も成功しているものは単純性器ヘルペス感染症の治療に特別上等な薬剤であるアシクロビルである。それにもかかわらず、幾つかの重要な進歩にもかかわらず、ヘルペスウイルス感染症を治療するのに有効な安全な治療薬に対する要望が絶えず存在している。この領域における現行の治療薬の総説について、R.E.Boehmeら，Annual Reports in Medicinal Chemistry，29，145（1994）を参照のこと。本件出願は単純ヘルペスウイルスに対する活性を有する化合物の群を開示する。広い安全限界と合わせて、ヘルペスウイルスに対するこれらの化合物の選択的作用は、これらの化合物をヘルペス感染症を治療するのに望ましい薬剤にする。以下の文献が抗ヘルペス活性と関連していたペプチドまたはペプチド擬態化合物を開示している。 E.A.Cohen ら，米国特許第4,795,740 号、1989年１月３日、 R.Freidingerら，米国特許第4,814,432 号、1989年３月21日、 P.Gaudreauら，J.Med.Chem.，33，723（1990）、 J.Adams ら，欧州特許出願第411,334 号、1991年２月６日に公開、 R.L.Tolmanら，欧州特許出願第412,595 号、1991年２月13日に公開、 L.L.Chang ら，Bioorganic＆Medicinal Chemistry Letters，２，1207（1992）、 P.L.Beaulieuら，欧州特許出願第560,267 号、1993年９月15日に公開、 N.Mossら，J.Med.Chem.，36，3005（1993）、及び R.Deziel及びN.Moss，欧州特許出願第618,226 号、1994年10月５日に公開。前記論文の主題ペプチドは特徴的な構造上及び生物学上の相違により本発明のペプチドから区別し得る。以下に使用される略号及び記号がこの出願の“発明の詳細な説明”の部分に定義される。発明の要約本発明の化合物は式１により表され、（式中、Ｒ¹は水素または(1-4C)アルキルであり、かつＲ²は(1-4C)アルキルである）、またはその治療上許される塩である。本発明の化合物の好ましい群は、Ｒ¹が水素またはメチルであり、かつＲ²がメチル、エチル、１−メチルエチルまたはプロピルである式１により表され、またはその治療上許される塩である。これらの化合物の更に好ましい群は、Ｒ¹が水素であり、かつＲ²がメチル、エチルまたは１−メチルエチルである式１により表され、またはその治療上許される塩である。抗ヘルペスウイルス有効量の式１の化合物、またはその治療上許される塩、及び医薬上許される担体を含む医薬組成物が本発明の範囲内に含まれる。また、式１の化合物、またはその治療上許される塩、及び局所適用に適した生理学上許される担体を含む化粧用組成物が本発明の範囲内に含まれる。本発明の重要な局面は抗ヘルペスウイルス有効量の式１の化合物、またはその治療上許される塩を哺乳類に投与することによる哺乳類のヘルペスウイルス感染症の治療方法を伴う。別の重要な局面はヘルペスウイルスをヘルペスウイルスリボヌクレオチド還元酵素抑制量の式１の化合物、またはその治療上許される塩と接触させることによるヘルペスウイルスの複製の抑制方法を伴う。更に別の局面は抗ヘルペスウイルス有効量の式１の化合物、またはその治療上許される塩、及び抗ウイルスヌクレオシド類似体の組み合わせを哺乳類に投与することによる哺乳類のヘルペスウイルス感染症の治療方法を伴う。また、その組み合わせを含む医薬組成物が本発明の範囲内にある。式１の化合物の調製方法が以下に記載される。図面の説明図１はアシクロビル及び式１のペプチド擬態化合物の組み合わせを伴う研究から得られた結果のグラフ図である。これらの研究は実施例12に記載されたイソボール方法の適用を伴って、単純ヘルペスウイルス型１に対するその組み合わせの相乗活性を実証する。発明の詳細な説明全般また、式１はとして示し得る。式中、(N-Me)Val は(S)−２−（メチルアミノ）−３−メチルブタン酸のアミノ酸残基を表し、Tbg は(S)−２−アミノ−３，３−ジメチルブタン酸のアミノ酸残基を表し、Me及びEtは夫々アルキル基メチル及びエチルを表し、またAsp(cy Pn)は(S)−α−アミノ−１−カルボキシシクロペンタン酢酸のアミノ酸残基を表す。アミノ酸またはアミノ酸誘導体に関する“残基”という用語はカルボキシ基のヒドロキシル及びα−アミノ基の一つの水素を脱離することにより相当するα− アミノ酸から誘導された基を意味する。本明細書に使用される“(1-4C)アルキル”という用語は１〜４個の炭素原子を含むアルキル基を意味し、メチル、エチル、プロピル、１−メチルエチル、１，１−ジメチルエチル及びブチルを含む。本明細書に使用される“医薬上許される担体”という用語は活性成分の無毒性の一般に不活性なビヒクルを意味し、これはその成分に悪影響しない。本明細書に使用される“生理学上許される担体”という用語は一種以上の無毒性の賦形剤の許される化粧用ビヒクルを意味し、これらはその中に含まれた活性成分と反応しないし、またその有効性を低下しない。 “有効量”という用語は抗ウイルス剤の所定の抗ウイルス量、即ち、in vivo でヘルペスウイルスに対し有効であるのに充分な薬剤の量を意味する。式１の化合物の調製方法一般に、式１の化合物は反応体に適することが知られている反応条件を使用して既知の方法により調製される。これらの方法の説明が通常の書籍、例えば、 “Annual Reports In Organic Synthesis-1994”,P.M.Weintraubら編集，Acade- mic Press，Inc.，San Diego，CA，USA，1994(及び先の年会論文)、“Vogel's T extbook Of Practical Organic Chemistry”，B.S.Furniss ら編集，Longman Gr oup Limited，Essex，UK，1986、及び“Comprehensive Organic Synthesis”，B .M.Trost 及びI.Fleming 編集，Pergaman Press，Oxford，UK，1991，１〜８巻に見られる。しかしながら、この記載の例外は式１の化合物の調製に重要な中間体の特異な立体特異性合成である。この重要な中間体は式２により表される。 W¹-Tbg-CH₂-(R)-CH(CH₂C(O)CMe₃)C(O)OW² (2) 式中、Ｗ¹はアミノ保護基であり、かつＷ²はカルボキシル保護基である。この場合、Ｗ²は保護基Ｗ¹の存在下で選択的に除去し得る保護基である。Ｗ¹はtert-ブチルオキシカルボニル(Boc)または２，２，２−トリクロロエトキシカルボニルであることが好ましく、またＷ²はベンジル、（４−ニトロフェニル）メチル、メチルまたはエチルであることが好ましい。式２の中間体は下記のスキーム１に示される立体特異性方法により調製し得る。式中、Ｗ¹及びＷ²は本明細書に定義されたとおりであり、かつAlk はメチルまたはエチルである。先のスキーム表示に関して、式W¹-Tbg-O-Alk(3)の出発物質が試薬LiCH₂P(O)(O CH₃)₂(4)（CH₃P(O)(OCH₃)₂とブチルリチウムから調製される）と反応させられて式W¹-Tbg-CH₂P(O)(OCH₃)₂（5）のホスホネートを生じる。好適な三級アミン、好ましくはトリエチルアミンまたはジイソプロピルエチルアミンの存在下のこのホスホネートとグリオキシリルエステルの反応が式w¹-Tbg-(E)-CH=CHC(O)OW²（7）のγ−ケト−α，β−不飽和エステルを生じる。この化合物と式CH₂=CHCH₂OC(O) CH₂C(O)CMe₃（8）のβ−ケトエステルのナトリウムエノラートの反応が式 W¹-Tbg-CH₂-(R)-CH ｛CH(C(O)CMe₃)-(C(O)OCH₂=CHCH₂)｝C(O)OW²（9）のミカエル付加物を生じる。注(1):式８のβ−ケトエステル、即ち、CH₂=CHCH₂OC(O)CH₂C(O)CMe₃はアリルアセテートのリチウムエノラートをトリメチルアセチルクロリドと反応させることにより容易に調製される。注(2):式８のβ−ケトエステルのナトリウムエノラートは触媒有効量の水素化ナトリウムの存在下でβ−ケトエステルからin situ で生成される。その後、R.Deziel，Tetrahedron Letters，28，4371(1987)の方法と同様の好適な二級アミン、好ましくはピロリジンまたはピペリジンの存在下の式９のミカエル付加物とテトラキストリフェニルホスフィンパラジウム(O)の反応が脱アリル化及びその後のアリルエステルの脱カルボキシル化を行って式２の重要な中間体を生じる。式９のミカエル付加物を生じる式(7)のγ−ケト−α，β−不飽和エステルと式８のβ−ケトエステルのナトリウムエノラートのミカエル付加反応で得られる予期しない高い立体選択性は注目に値する。そのミカエル付加反応の立体選択性は、ミカエル付加物から直接誘導された式２の中間体が実質的に単一異性体として得られるという事実により推定される。式２の中間体のジアステレオ異性体の純度が核磁気共鳴研究により実証し得る。式２の中間体の鏡像体の純度がアミノ保護基(Ｗ¹)を除去し、得られる遊離アミノ誘導体にJ.A.Daleら，J.Org.Chem.， 34，2543（1969）の方法を適用することにより分析し得る（更に詳細について、実施例４を参照のこと）。その後再度、式２の重要な中間体のカルボキシル保護基(Ｗ²)が通常の方法、例えば、Ｗ²がベンジルである場合の水添分解により選択的に除去されて、式１の化合物の調製方法に組込むための相当する遊離カルボン酸誘導体（下記のスキーム２中の式14を参照のこと）を生じる。一般に、式１の化合物の調製方法への先の遊離カルボン酸誘導体の組込みは、カルボン酸誘導体（第一単位に相当する）がアミド結合を形成することにより二つのその他の単位に結合される一連の化学イベントと考えられる。式１の化合物を調製するのに好都合かつ実用的な方法の以下の更に詳細な説明において、化学イベントの或る順序が追従される。しかしながら、化学イベントの順序の変化は重要ではなく、それ故、このような変化が本発明の範囲内にあると考えられることが理解されるであろう。同様にまた、保護基Ｗ¹が保護基Ｗ²の存在下で選択的に除去できて、化学イベントの順序の変化を可能にする式２の中間体が本発明の範囲内にあると考えられることが理解されるべきである。それ故、本発明の重要な局面は、Ｗ¹がＮ末端にあるアミンのアミノ保護基であり、かつＷ²が中間体のＣ末端にあるカルボキシル基のカルボキシル保護基である式２の重要な中間体を含む。但し、末端アミンがその後の反応に予定される場合に、アミノ保護基Ｗ¹がカルボキシル保護基Ｗ²の存在下で選択的に除去し得ること、または末端カルボキシルがその後の反応に予定される場合に、カルボキシル保護基Ｗ²がアミノ保護基Ｗ¹の存在下で選択的に除去し得ることを条件とする。アミノ保護基Ｗ¹がカルボキシル保護基Ｗ²の存在下で選択的に除去し得る式２の中間体の例として、Ｗ¹がtert- ブチルオキシカルボニルであり、かつＷ²がベンジル、２，２，２−トリクロロエチル、メチルまたはエチルである中間体が挙げられる。全方法について、更に詳しくは、式１の化合物は下記のスキーム２に示される好都合かつ実用的な方法により調製し得る。スキーム２中、Ｗ¹は本明細書に定義されたとおりであり、Ｗ³はカルボキシル保護基（好ましくは、ベンジル、tert- ブチルまたは２，２，２−トリクロロエチル）であり、Ｒ³は式12についてアジドまた式13についてアミノであり、Ｒ₄は式 15について本明細書に定義されたＷ¹また式16について水素であり、Ｒ⁵は式17及び18の化合物についてアミノ保護基、好ましくはtert- ブチルオキシカルボニルまたは２，２，２−トリクロロエトキシカルボニルであり、また式19について水素であり、かつＲ¹及びＲ²は本明細書に定義されたとおりである。スキーム２を参照して、式１の化合物の調製方法は (a) 式10のカルボン酸誘導体を式11のアミンとカップリングして式12のα−アジドアミドを得、 (b) 式12のα−アジドアミドを還元して式13の相当するα−アミノアミドを得、 (c) 式13のα−アミノアミドを式14のカルボン酸誘導体とカップリングして式15 の二保護中間体を得、 (d) 式15の二保護中間体を選択的に脱保護して式16の遊離Ｎ末端誘導体を得、 (e) 式16の遊離Ｎ末端誘導体を式17のＮ保護バリンとカップリングして式18の二保護中間体を得、 (f) 式18のこの二保護中間体を選択的に脱保護して式19の相当する遊離Ｎ末端化合物を得、 (g) 式19の遊離Ｎ末端化合物を式20の酸塩化物と反応させて式21の相当する保護カルボキシル誘導体を得、そして (h) 式21のこの誘導体を脱保護して式１の相当する化合物を得、そして (i) 所望により、式１の化合物をその治療上許される塩に変換することを特徴とする。カップリング工程(a)、(c)及び(e)並びに脱保護工程(d)、(f)及び(h)はペプチド合成に普通に使用される方法により行い得る。更に明らかに、カップリング工程はカップリングの存在下でその他の反応体の遊離アミノ基による一種の反応体の遊離カルボキシルの脱水カップリングを伴って連鎖アミド結合を形成する。このようなカップリング剤の説明がペプチド化学に関する一般の書籍、例えば、M.Bodanszky,“Peptide Chemistry”,第二改訂版 , Springer-Verlag,ベルリン，ドイツ，1993に見られる。好適なカップリング剤の例はＮ，Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイミド、Ｎ，Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイミドの存在下の１−ヒドロキシベンゾトリアゾールまたはＮ−エチル −Ｎ’−［（３−ジメチルアミノ）プロピル］カルボジイミドである。非常に実用的かつ有益なカップリング剤は単独または１−ヒドロキシベンゾトリアゾールの存在下の市販の（ベンゾトリアゾール−１−イルオキシ）トリ（ジメチルアミノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスフェートである。更に別の非常に実用的かつ有益なカップリング剤は市販の２−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル） −Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレートである。そのカップリング反応は不活性溶媒、例えば、ジクロロメタンまたはアセトニトリル中で行われる。過剰の三級アミン、例えば、ジイソプロピルエチルアミンまたはＮ−メチルモルホリンが反応混合物に添加されて約８のpHに維持する。反応温度は通常０℃〜50℃の範囲であり、反応時間は通常15分〜24時間の範囲である。工程(b)において、式12のα−アジドアミドのアジド基がアジドをアミド基及びエステル基の存在下でアミノ基に選択的に還元することができる還元剤により式13のα−アミノアミドの相当するアミンに変換される。この工程はN.Maiti ら，Tetrahedron Letters，27，1423(1986)の方法により還元剤として塩化第一スズを使用し、反応溶媒としてメタノールを使用して都合良くかつ有効に行い得る。工程(g)において、式19の遊離Ｎ末端化合物が１〜1.5 モル当量の式20の酸塩化物と直接反応させられて式21の保護カルボキシル誘導体を生じる。この工程はアミドの古典的調製方法に基いており、これにより酸塩化物が末端アミノ基と反応させられる。その反応は（1.2 〜2.0 モル当量）過剰の好適な三級アミン、例えば、Ｎ−メチルモルホリンまたはジイソプロピルエチルアミンの存在下で容易に進行する。その反応は不活性溶媒、例えば、ジクロロメタンまたはトルエン中で通常-20 ℃〜20℃の範囲の温度で行われる。更に、所望により、式１の化合物は治療上許される塩の形態で得られる。このような塩は式１の化合物の生物学上の均等物と考えられる。（そのカルボキシル基の）このような塩の例は既知の方法によりナトリウム、カリウムまたはカルシウム陽イオンで生成される塩である。式20の酸クロリドは知られており、または既知の方法により容易に調製し得る。説明のために、式20の或る酸塩化物の調製のための簡単な操作が実施例に含まれる。抗ヘルペス活性式１の化合物の抗ウイルス活性は、単純ヘルペスウイルス型１及び型２(HSV-1 及びHSV-2)、並びにアシクロビル耐性単純ヘルペスウイルスの複製に関するこれらの化合物の抑制効果を示す生化学的操作、微生物学的操作及び生物学的操作により実証し得る。以下の実施例において、ヘルペスリボヌクレオチド還元酵素に関する抑制効果が式１の例示化合物について観察される。ヘルペスリボヌクレオチド還元酵素のこの特異的抑制と関連して、正常な細胞複製に必要とされる細胞リボヌクレオチド還元酵素活性に関するこれらの化合物のこのような効果の比較的小さい効果またはその不在が注目に値する。ウイルス複製に関する式１の化合物の抑制効果の実証方法は細胞培養技術である。例えば、T.Spectorら，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，82，4254（1985）を参照のこと。式１の化合物の治療効果は、例えば、C.R.Brandtら，J.Vitrol.Meth.，36，20 9(1992)により記載された抗ウイルス薬試験について単純ヘルペスウイルス誘発眼疾患のマウスモデルに基くアッセイを使用することにより、実験動物で実証し得る。本発明の化合物、またはその治療上許される酸付加塩の一種が抗ウイルス剤として使用される場合、それは一種以上の医薬上許される担体を含むビヒクル中で、温血動物、例えば、ヒト、ブタまたはウマに局所または全身に投与され、その割合は化合物の溶解性及び化学的性質、選択された投与の経路及び通常の生物学的慣例により決められる。局所投与について、化合物は0.1〜５％、好ましくは0 .5〜５％の活性薬剤を含む医薬上許されるビヒクル中で製剤化し得る。このような製剤は溶液、クリームまたはローションの形態であってもよい。全身投与について、式１の化合物は医薬上許されるビヒクルまたは担体を含む組成物中で静脈内注射、皮下注射または筋肉内注射により投与される。注射による投与について、無菌水性ビヒクル（これはまたその他の溶質、例えば、緩衝剤または防腐剤並びに溶液を等張性にするのに充分な量の医薬上許される塩またはグルコースを含んでいてもよい）中の溶液中の化合物を使用することが好ましい。上記製剤化に適したビヒクルまたは担体は通常の医薬書籍、例えば、“Remin- gton's Pharmaceutical Sciences”,第18編，Mack Publishing Company,イーストン、ペンシルベニア，1990に記載されている。化合物の投薬量は投与の形態及び選択された特別な活性薬剤により変化するであろう。更に、それは治療中の特別な宿主により変化するであろう。一般に、状況下の最適の効果に達するまで、治療が少量のインクレメントで開始される。一般に、化合物は危険または有害な副作用を生じないで抗ウイルス有効な結果を一般に与える濃度レベルで投与されることが最も望ましい。局所適用に関して、式１の化合物は、感染領域を覆うのに充分な量で、生体の感染領域、例えば、皮膚または口腔もしくは生殖腔の一部に好適な局所製剤中で皮膚に投与される。その治療は、病変が治癒するまで、例えば、４〜６時間毎に繰り返されるべきである。全身投与に関して、式１の化合物は毎日体重１キログラム当たり10mg〜150mg の投薬量で投与されるが、前記変化が生じるであろう。しかしながら、毎日体重１キログラム当たり約10mg〜100mg の範囲である投薬量レベルが有効な結果を達成するために使用されることが最も望ましい。本発明の別の局面は、生理学上許される化粧用担体と一緒に、ヘルペスウイルス予防量の式１の化合物、またはその治療上許される塩を含む化粧用組成物を含む。付加的な成分、例えば、皮膚軟化剤がその製剤中に含まれてもよい。本発明の化粧用製剤は予防上使用されて皮膚のヘルペス病変の発生を阻止する。その製剤は皮膚の感染しやすい領域に夜に適用し得る。一般に、化粧用組成物は局所適用について相当する医薬組成物よりも少ない化合物を含む。化粧用組成物中の化合物の量の好ましい範囲は0.5 〜５重量％である。以上に開示された製剤はヘルペスウイルス感染症を治療するための有効かつ比較的安全な薬物であるように指示されるが、有益な結果を得るためのその他の抗ウイルス薬物または薬剤とのこれらの製剤の可能な同時投与が排除されない。このような抗ウイルス薬物または薬剤として、抗ウイルスヌクレオシド、例えば、アシクロビル、及び抗ウイルス表面活性剤または抗ウイルスインターフェロン、例えば、米国特許第4,507,281 号(1985年３月26日)にS.S.Asculai及びF.Rappにより開示されたものが挙げられる。同時投与によるヘルペスウイルス感染症の治療に関して更に詳しくは、抗ウイルスヌクレオシド類似体の抗ヘルペス活性は、それらを式１の化合物と組み合わせることにより、毒性作用を同時に増進しないで、相乗的に増進し得ることがわかった。それ故、医薬上許される担体と、有効量の抗ウイルスヌクレオシド類似体またはその治療上許される塩、及び式１のリボヌクレオチド還元酵素抑制化合物またはその治療上許される塩の組み合わせとを含む哺乳類のヘルペス感染症の治療用医薬組成物が提供される。また、哺乳類のヘルペスウイルス感染症の治療方法が提供される。その方法は抗ヘルペスウイルス有効量の式１の化合物またはその治療上許される塩と、抗ウイルスヌクレオシド類似体またはその治療上許される塩の組み合わせを哺乳類に投与することを含む。その組み合わせに使用される抗ウイルスヌクレオシド類似体は、ヘルペスＤＮＡポリメラーゼのウイルスＤＮＡポリメラーゼインヒビター及び／またはヘルペスＤＮＡポリメラーゼの別の基質に酵素変換(in vivo)し得るものである。抗ウイルスヌクレオシド類似体は既知のヌクレオシド類似体から選択し得る。本発明の好ましいヌクレオシド類似体として、アシクロビル及びその類似体、例えば、式22の化合物、またはその治療上許される塩が挙げられる。式中、Ｒ⁶は水素、ヒドロキシまたはアミノである。（Ｒ⁶がヒドロキシである式 22はアシクロビルを表す）本発明の使用に好ましいその他の抗ウイルスヌクレオシド類似体として、ペンシクロビル、ファムシクロビル及びバラシクロビルが挙げられる。ヌクレオシド類似体の治療上許される塩の例はそのナトリウム塩である。ヌクレオシド類似体と式１の化合物の上記組み合わせの抗ウイルス活性または抗ヘルペス活性に関して使用される場合の“相乗効果”という用語はその組み合わせの二つの個々の成分の予想の累積効果よりも大きい抗ウイルス効果または抗ヘルペス効果を意味する。本発明の組み合わせをヘルペス感染症の治療に使用する場合、その組み合わせは一種以上の医薬上許される担体を含むビヒクル中で温血動物、例えば、ヒト、ブタまたはウマに投与され、その割合はヌクレオシド類似体及び式１の化合物の溶解性及び化学的性質、選択された投与の経路、通常の生物学的慣例により、また相乗的抗ウイルス効果を得るための２種の活性成分の相対量により決められる。その組み合わせは局所投与されてもよい。例えば、２種の活性成分（即ち、抗ウイルスヌクレオシド類似体及び式１の化合物、またはそれらの治療上許される塩）が医薬上許されるビヒクル中の溶液、エマルション、クリーム、またはローションの形態で製剤化し得る。このような製剤は0.01〜1.0 重量％のヌクレオシド類似体、またはその治療上許される塩、及び約0.05〜１重量％の式１の化合物、またはその治療上許される塩を含むことができる。いずれにしても、２種の活性薬剤は相乗的抗ヘルペス効果を与える量で医薬組成物中に存在する。以下の実施例が本発明を更に説明する。温度は摂氏温度で示される。特にことわらない限り、溶液％は重量対容積の関係を表し、また溶液比は容積対容積の関係を表す。核磁気共鳴(NMR)スペクトルをブルカー400MHzスペクトロメーターで記録した。化学シフト（δ）をppm で報告する。実施例に使用される略号として、Boc: tert-ブチルオキシカルボニル；Bzl:ベンジル；DMSO:ジメチルスルホキシド；Et: エチル;EtOH: エタノール；EtOAc:酢酸エチル；Et₂O: ジエチルエーテル；HPLC: 高性能液体クロマトグラフィー；Me: メチル；MeOH: メタノール； Pr: プロピル；TLC:薄層クロマトグラフィー；THF:テトラヒドロフランが挙げられる。実施例１カップリング反応に関する一般操作（また、R.Knorr ら，Tetrahedron Letters，30，1927(1989)を参照のこと）第一反応体、即ち、遊離アミン（またはその塩酸塩）をCH₂Cl₂またはCH₃CN に溶解し、その溶液を４℃に冷却する。窒素雰囲気下で、４当量のＮ−メチルモルホリンをその攪拌溶液に添加する。20分後に、１当量の第二反応体、即ち、遊離カルボン酸、及び1.05当量のカップリング剤を添加する。この目的に実用的かつ有効なカップリング試薬は（ベンゾトリアゾール−１−イルオキシ）トリス（ジメチルアミノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスフェートまたは好ましくは２− （１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレートである。その反応をTLCにより監視する。反応の完結後に、溶媒を減圧で蒸発させる。残渣をEtOAc に溶解する。その溶液を 1Nのクエン酸水溶液、10％のNa₂CO₃水溶液及び食塩水で連続して洗浄する。有機相を乾燥させ（MgSO₄）、濾過し、減圧で濃縮する。残渣をスチルのフラッシュクロマトグラフィー技術(W.C.Stillら，J.Org.Chem.，43，2923(1978))に従ってシリカゲル(SiO₂)で精製する。実施例２１（Ｒ）−エチル−２，２−ジメチルプロピルアミン塩酸塩（NH₂-(R)-CH(Et)CM e₃・HCl)の調製ベンゼン(1L)中の４，４−ジメチル−３−ペンタノン(106g、0.928 モル)及び（Ｒ）−α−メチルベンジルアミン(111g、0.916モル)の冷却溶液（０℃）に、ベンゼン(200mL)中のTiCl₄（50.5 mL、0.461 モル）の溶液をその混合物の温度を10℃未満に保つ速度で添加した。その後、混合物を40℃で３時間機械攪拌し、室温(20 〜22℃)に冷却し、ケイソウ土で濾過した。ケイソウ土をEt₂Oで洗浄した。合わせた濾液及び洗浄液を濃縮した。残渣を乾燥MeOH(2L)に溶解した。その溶液を０℃に冷却し、NaBH₄（20g、0.53モル）を滴下して添加し、その間混合物の温度を５℃未満に保った。メタノールを蒸発させた。残渣をEt₂Oに溶解した。その溶液を食塩水で洗浄し、乾燥させ（MgSO₄）、濃縮して赤みを帯びた油（NMR により示されたようにジアステレオ異性体の18:1混合物）を得た。油をフラッシュクロマトグラフィー（SiO₂、溶離剤：EtOAc/ヘキサン、7:93）により精製してＮ−（１（Ｒ）−フェニルエチル）−１（Ｒ）−エチル-２，２−ジメチルプロピルアミンを液体(110g、収率54％)として得た。この物質をヘキサン（1. 5 L）に溶解した。Et₂O(550mL)中の1NのHCl を15分間の期間にわたってその溶液に添加した。得られる白色の固体をフィルターで回収し、次いでヘキサンで洗浄してＮ−（１（Ｒ）−フェニルエチル）−１（Ｒ）−エチル−２，２−ジメチルプロピルアミン塩酸塩(125g、収率97％)を得た。¹ H NMR(CDCl₃)δ7.79-7.74(m，2H)，7.48-7.30(m，3H)，4.49-4.31(m，1H)，2.4 4-2.36(m，1H)，2.23(d，J=6.5 Hz，3H)，1.95-1.54(m，2H)，1.14(s，9H)，0.5 5(t，J=7.5 Hz，3H). MeOH(120mL)中のこの化合物(41.5g)の溶液を10％Pd/C（w/w）（4.2g）と混合し、その混合物をパール水素化装置中で室温で50psiの水素のもとに48時間振とうした。その混合物をケイソウ土で濾過し、濾液を濃縮して所望のNH₂-(R)-CH(E t)CMe₃をその塩酸付加塩の形態で白色の固体(25g、収率100 ％)として得た。¹ H NMR(CDCl₃)δ8.40-8.10(ブロードｓ，3H)，2.85-2.70(m，1H)，1.90-1.58(m ，2H)，1.22(t，J=7 Hz，3H)，1.10(s，9H). 実施例３中間体H-Asp(cyPn)(Bzl)-NH-(R)-CH(Et)CMe₃（Ｒ⁴がNH₂であり、かつＷ³がBzlである式13の化合物）の調製 (a) （Ｓ）−α−アジド−１−｛（フェニルメトキシ）カルボニル｝シクロペンタン酢酸（Ｗ³がBzl である式10の化合物）：この化合物をエバンス助剤を利用する非対称アジド化方法(D.A.Evansら，J.Amer.Chem.Soc.，112，4011（1990 ）を参照のこと)に従ってM.N.Aboul-Enein ら，Pharm.ActaHelv.，55，50（1980 ）により記載された２−オキソスピロ［４．４］ノナン−１，３−ジオンから調製した。更に詳しくは、ブチルリチウムの1.6Mのヘキサン溶液(469mL、750ミリモル)をアルゴン雰囲気下で-40℃の乾燥THF中のキラル助剤、４（Ｓ）−（１−メチルエチル）−２−オキサゾリジノン(96.8g、750 ミリモル)｛L.N.Pridgen 及びJ.Pro l.，J.Org.Chem,54，3231（1989）により記載される｝の溶液に滴下して添加した。その混合物を-40 ℃で30分間攪拌し、次いで-78 ℃に冷却した。２−オキソスピロ［４．４］ノナン−１，３−ジオンをその冷却混合物に滴下して添加した。その混合物を０℃で１時間攪拌した。その後、クエン酸の20％水溶液(600mL) をその混合物に添加した。有機相を分離し、水相をEtOAc で抽出した。合わせた有機相を食塩水で洗浄し、乾燥させ(MgSO₄)、減圧で濃縮して３−［２−（１− カルボキシシクロペンチル）−１−オキソエチル）｝−４（Ｓ）−（１−メチルエチル）−２−オキサゾリジノンをピンク色の固体(300g)として得た。この固体（約750 ミリモル）をCH₃CN(1L)に溶解した。臭化ベンジル(89.2 mL 、750 ミリモル)及び１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ−７−エン(112mL、750 ミリモル)をその溶液に添加した。その混合物をアルゴン中で16 時間攪拌した。揮発分を減圧で除去した。残渣をH₂O/EtOAc に溶解した。有機相を分離し、クエン酸の10％水溶液及び食塩水で洗浄し、乾燥させ（MgSO₄）、減圧で濃縮して油を得た。その油をヘキサン／EtOAc で結晶化して相当するベンジルエステルを白色の固体(204g、収率73％)として得た。乾燥THF（200mL）中のこの化合物(70g、190ミリモル)の溶液を-78 ℃に冷却した。６％のクメンを含むカリウムビス（トリメチルシリル）アミドの0.66M のTH F 溶液(286mL、190 ミリモル)を15分間の期間にわたってその冷却溶液に添加した。その混合物を-78 ℃で45分間攪拌した。乾燥THF(100mL)中の２，４，６−トリイソプロピルベンゼンスルホニルアジド(67g、220 ミリモル)の溶液をその冷却混合物に一度に添加し、２分後に氷酢酸(50 mL、860 ミリモル)を添加した。その混合物を温め、35〜45℃で１時間攪拌した。揮発分を減圧で除去した。黄色の残渣をヘキサン／EtOH(4:1、1.7 L)ですり砕いた。得られる白色の固体をフィルターで回収した。濾液をSiO₂（230 〜240 メッシュ）と混合した。揮発分を減圧で除去し、残留固体を35℃で減圧で乾燥させてクメンを除去した。次いで残留固体をSiO₂のカラムに入れた。カラムをヘキサン-EtOAc（9:1）で溶離し、溶離液を濃縮して３−｛｛２（Ｓ）−アジド−１−オキソ−２−｛１−｛（フェニルメトキシ）カルボニル｝シクロペンチル｝エチル｝−４（Ｓ）−（１−メチルエチル）−２−オキサゾリジノン(66g、収率86％)を得た。 THF/H₂O(3:1、608 mL)中のこの化合物(13.4g、32.4ミリモル)の溶液を０℃に冷却した。過酸化水素／H₂O（3:7、16.3mL、141 ミリモルのH₂O₂）をその冷却溶液に添加し、続いてLiOH・H₂O（2.86g、68.2ミリモル）を添加した。その混合物を０℃で45分間攪拌し、次いで亜硫酸ナトリウムの10％水溶液(400mL)で反応停止した。NaHCO₃(1.93g)を添加した後、その混合物を減圧で濃縮した。キラル助剤を20時間にわたって連続抽出（NaHCO₃水溶液／クロロホルム）により回収した。その後、水相を０℃に冷却し、濃HCl の添加により酸性にし、次いでEtOAc で抽出した。抽出物を食塩水で洗浄し、乾燥させ(MgSO₄)、減圧で濃縮して（Ｓ） −α−アジド−１−｛（フェニルメトキシ）カルボニル｝シクロペンタン酢酸を白色の固体(8.2g、収率84％)として得た。¹ H NMR(CDCl₃)δ7.40-7.28(m，5H)，5.12(s，2H)，4.55(s，1H)，2.30-2.20(m， 1H)，2.05-1.95(m，2H)，1.8-1.6(m，5H). (b) この実施例の標題化合物：実施例１のカップリング操作に従い、かつ実施例２のNH₂-(R)-CH(Et)CMe₃の塩酸塩を第一反応体として使用し、またこの実施例の(a)節の（Ｓ）−α−アジド−１−｛（フェニルメトキシ）カルボニル｝シクロペンタン酢酸を第二反応体として使用することにより、Ｎ−｛１（Ｒ）−エチル−（２，２−ジメチルプロピル）｝−（Ｓ）−α−アジド−１−｛（フェニルメトキシ）カルボニル｝シクロペンタンアセトアミドを得た。MeOH中でこの化合物をN.Maiti らの方法(Tetrahedron Letters，27，1423(1986))に従って塩化スズ(II)で還元し、続いてクロマトグラフィー(SiO₂、ヘキサン−Et₂O、1:1)により精製してこの実施例の標題化合物を得た。¹ H NMR(CDCl₃)δ7.36-7.27(m，5H)，7.08(d，J=10.5 Hz，1H)，5.17(d，J=12.3 Hz，1H)，5.09(d，J=12.3 Hz，1H)，3.72(s，1H)，3.56(ddd，J=10.5，10.5，2. 5 Hz，1H)，2.23-1.15(m，2H)，1.87-1.80(m，1H)，1.76- 1.57(m，8H)，1.17-1.03(m，1H)，0.88(s，9H)及び0.86(t，J=7.3 Hz，3H)．実施例４中間体Boc-Tbg-CH₂-(R)-CH(CH₂C(O)CMe₃)C(O)OBzl（Ｗ¹がBoc であり、かつＷ² がBzl である式２の化合物）の調製 (a) Boc-Tbg-OMe （Ｗ¹がBoc である式３の化合物）：乾燥CH₃CN(0.5 L)中の Boc-Tbg-OH（68g、0.30モル）の溶液を０℃に冷却した。１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ−７−エン(54 mL、0.36モル）を10分間の期間にわたってその冷却溶液に添加し、続いてCH₃I（37mL、0.60モル）を添加した。その反応混合物を４時間にわたって室温（20〜22℃）で攪拌し、次いで減圧で濃縮した。残渣をEtOAc とH₂O の間に分配した。有機相をH₂O、NaHCO₃の飽和水溶液(2 X) 及び食塩水で洗浄した。その後、有機相を乾燥させ（MgSO₄）、濃縮して透明な粘稠な液体を得た。この物質をバルブ間蒸留（オイルポンプ真空、空気浴温度11 0 ℃）して所望の生成物を無色の油(65g、収率88％)として得た。¹ H NMR(CDCl₃)δ5.10(ブロードd，J＝9.0 Hz，1H)，4.10(d，J＝9.0 Hz，1H)，3 .72(s，3H)，1.44(s，9H)，0.96(s，9H)． (b) Boc-Tbg-CH₂-P(O)(OMe)₂（Ｗ¹がBocである式５の化合物）：窒素雰囲気下で-78 ℃で、メカニカルスターラー、ジャケット付きの添加ロート及び温度計を備えた５L のフラスコにヘキサン中のBuLiの溶液(3.60 モル、10N の溶液361 mL ）を仕込んだ。乾燥THF（１L）中の新しく蒸留したジメチルメチルホスホネート (391mL、3.60モル）の冷却(-78℃)溶液を１時間の期間にわたって添加ロートで滴下して添加した。その混合物を-78 ℃で30分間攪拌した。THF（0.5 L）中のBo c-Tbg-OMe（111g、0.452 モル）の冷却(-78℃)溶液を20分の期間にわたって滴下して添加した。その反応液を-78 ℃で45分間攪拌し、次いで30分の期間にわたって約-30 ℃に温めた。氷酢酸(0.25 L)及びH₂O（0.3 L）の連続添加後に、その混合物をEtOAc(１L)で抽出した。有機層をH₂O、NaHCO₃の10％水溶液及び食塩水で洗浄し、乾燥させ（MgSO₄）、濃縮した。得られる固体をヘキサンですり砕いて所望のホスホネートを融点84〜86℃を有する白色の粉末(144g、収率95％) として得た。¹ H NMR(CDCl₃)δ5.23(ブロードd，J=9.0 Hz，1H)，4.25(d，J＝9.0 Hz，1H)，3. 80(d，J=11.4 Hz，6H)，3.30(dd，J＝22.0，14.6 Hz，1H)，3.12(dd，J＝22.0， 14.6 Hz，1H)，1.44(s，9H)，1.00(s，9H). そのホスホネートをこの実施例の(d)節で使用する。 (c) HC(O)C(O)OBzl（Ｗ²がBzl である式６の化合物）：固体のH₅IO₆（49.3g、 0.216 モル）をEt₂O(900 mL)中のジベンジルＬ−タートレート(70g、0.21モル) の溶液に滴下して添加した。その混合物を室温で2.5 時間攪拌し、次いで濾過した。濾液を乾燥させ（MgSO₄）、濃縮した。残留シロップをヘキサン−Et₂O(2:3) に溶解した。得られるミルク状の溶液をケイソウ土のパッドで濾過した。パッドをヘキサン−Et₂O(2:5)で洗浄した。合わせた濾液及び洗浄液を濃縮してベンジルグリオキシレートを油(69.9g、収率約90％)として得た。¹H-NMR(CDCl₃)はアルデヒドと水和物の混合物を示した。特徴的な化学シフト：δ9.25(s)，7.87-7.21 (m，5H)，5.47-5.03(m)，4.56(ブロードs). (d) γ−ケト−α，β−不飽和エステルBoc-Tbg-(E)-CH=CHC(O)OBzl（Ｗ¹がBoc であり、かつＷ²がBzl である式７の化合物）： CH₃CN（0.7 L）中のこの実施例の(b)節に記載されたBoc-Tbg-CH₂-P(O)(OMe)₂（121g、0.359モル）、及びトリエチルアミン(0.10L、0.72モル)の溶液を窒素雰囲気下で室温で10分間攪拌した。その後、CH₃CN(0.15 L)中のHC(O)C(O)OBzl（121g、約0.36モル）の溶液を30分間にわたって添加した。その混合物を24時間攪拌し、次いで濃縮した。残渣をEt₂ O−ヘキサン(2:1、0.8 L)に溶解した。その溶液をクエン酸の10％水溶液、NaHC O₃の飽和溶液及び食塩水で洗浄し、乾燥させ（MgSO₄）、濃縮した。溶離剤としてEtOAc-ヘキサン(3:20)を使用して、得られるオレンジ色の油をシリカゲルパッド(12 ｘ 10 cm)に通した。溶離液を濃縮して、所望のγ−ケト−α，β−不飽和エステルを黄色の油(112g、収率83％)を得た。¹ H NMR(CDCl₃)δ7.42-7.32(m，5H)，7.23(d，J=15.9 Hz，1H)，6.80(d，J=15.9 Hz，1H)，5.25(s，2H)，5.21(ブロードd，J=8.9 Hz，1H)，4.43(d，J=8.9 Hz，1 H)，1.42(s，9H)，0.96(s，9H). そのγ−ケト−α，β−不飽和エステルをこの実施例の(f)節に使用する。 (e) CH₂=CHCH₂OC(O)CH₂C(O)CMe₃（式８の化合物）： THF(1N、0.8 L)中のリチウムビス（トリメチルシリル）アミドの溶液を-78℃に冷却した。THＦ(40 mL)中の酢酸アリル(39 mL、0.36モル)の溶液をその冷却溶液に滴下して添加した。その混合物を-78 ℃で１時間攪拌した。その後、トリメチルアセチルクロリド(47 mL、0.38モル)の溶液を滴下して添加し、得られる混合物を-78 ℃で25分間攪拌した。ヘキサン(0.3 L)及びHCl の水溶液(3N、0.6 L)をその混合物に添加した。有機相を分離し、重炭酸ナトリウムの飽和水溶液、食塩水及び水で洗浄した。有機相を乾燥させ（MgSO₄）、濃縮してオレンジ色の油を得た。粗生成物を蒸留（バルブ間、空気浴温度60℃、0.25トル）して所望のエステルを無色の油(62g、収率92％)として得た。¹ H NMR(CDCl₃)δ6.02-5.87(m，1H)，5.35(ブロードd，J＝17.2 Hz，1H),5.25(ブロードd，J=9.5 Hz，1H)，4.63(ブロードd，J=5.6 Hz，2H)，3.59(s，2H)，1.19 (s，9H)． (f) ミカエル付加物、即ち、 Boc-Tbg-CH₂-(R)-CH｛CH(C(O)CMe₃)(C(O)OCH₂CH=CH₂)｝C(O)OBzl（Ｗ¹がBoc であり、かつＷ²がBzl である式９の化合物）：固体のNaH（60 ％の油分散液2.7 g、0.07モル）を15分間の期間にわたってTHF（0.8 L）中のCH₂=CHCH₂OC(O)CH₂C( O)CMe₃（83.2g、0.452 モル）の溶液に添加した。全ての固体が溶解するまで(30 分間)、その反応混合物をアルゴンの雰囲気下で室温で攪拌した。その均一溶液を-60 ℃（溶液温度）に冷却し、THF（0.5 L）中のこの実施例の(d)節に記載されたBoc-Tbg-(E)-CH=CHC(O)OBzl（170g、0.45モル）の溶液を45分間の期間にわたって徐々に添加した。その後、その反応混合物を-60 ℃で５時間攪拌した。クエン酸の10％水溶液を添加し、その混合物を室温に温めた。その混合物をEt₂Oで抽出した。有機相を重炭酸ナトリウムの５％水溶液及び食塩水で洗浄し、乾燥させ（MgSO₄）、濃縮してオレンジ色の油(250g)を得、これを更に精製しないで次の反応に使用した。 (g) Boc-Tbg-CH₂-(R)-CH(CH₂C(O)CMe₃)C(O)-OBzl: ピロリジン(56 mL、0.54モル )をアルゴンの雰囲気下で０℃のCH₂Cl₂（250 mL）及びCH₃CN（250mL）中のテトラキストリフェニルホスフィンパラジウム(O)(2.60g、2.25ミリモル、0.5 モル％)の攪拌溶液に添加した。その混合物を室温に温めた。CH₂Cl₂−CH₃CN（200mL: 200mL）中の先の節からのミカエル付加物(250g、0.45モル)の溶液をその混合物に添加した。３時間後に、その混合物を濃縮してオレンジ色の油を得た。その粗油をEt₂O−ヘキサンの混合物(1:1、１L)に溶解した。その溶液をクエン酸の10％水溶液、重炭酸ナトリウムの10％水溶液、及び食塩水で洗浄し、乾燥させ(MgSO₄ )、濃縮して、この実施例の標題化合物をオレンジ色の油(203g、収率>90 ％)として得た。この物質を更に精製しないで実施例５に使用した。少量のサンプルを SiO₂クロマトグラフィーにより精製した。ヘキサン−EtOAc（9:1）で溶離して純粋な標題化合物を無色の油として得た。［α］²⁵ _D+11.5(c=1.3、CHCl₃)、¹H NMR (CDCl₃)δ7.38-7.28(m，5H)，5.10(s，2H)，5.07(ブロードd，J=9.2 Hz，1H)，4 .08(d，J=9.2 Hz，1H)，3.38-3.31(m，1H)，3.09(dd，J=18.8，6.0 Hz，1H)，2. 94(dd，J=18.4 6.1 Hz，1H)，2.82(dd，J=18.4，6.1 Hz，1H)，2.77(dd，J=18. 8，6.0 Hz，1H)，1.42(s，9H)，1.10(s，9H)，0.95(s，9H)．そのジアステレオ異性体純度はNMR により分析して〉35:1 であった(1993年、９月15日に公開されたP.L.Beaulieuらの欧州特許出願第560267号を参照のこと)。標題化合物の鏡像体純度を分析するために、Boc保護基(Ｗ¹)をジオキサン中で4N のHCl で除去し、得られるアミンをモシャーアミド（上記のJ.A.Daleらの文献を参照のこと）に変換した。この実施例の操作により調製された生成物からの結果を標題化合物のラセミ混合物で得られた結果と比較することにより、前記生成物の鏡像体過剰はNMR により測定して>96 ％であり、キラルカラムクロマトグラフィーにより測定して>99 ％であった。この測定を日本、東京にあるダイセル化学工業(米国卸売業者：キラル・テクノロジー社(イーストン、PA、米国))からン(1:19)であり、215 nmにおけるUV検出を使用した。実施例５中間体Boc-Tbg-CH₂-(R)-CH(CH₂C(O)CMe₃)C(O)OH（Ｗ¹がBoc である式14の化合物）の調製 EtOH(1.4 L)中の実施例４の標題化合物(171g、0.36モル)の溶液に、10％のPd/ C(10g)を添加した。得られた混合物を５時間にわたって１気圧の水素のもとに激しく攪拌した。その後、その反応混合物をケイソウ土による濾過にかけた。濾液を減圧で濃縮した。残渣をNa₂CO₃の飽和水溶液に溶解した。その水溶液をヘキサン−Et₂O(8:2)で洗浄し、クエン酸で酸性にし、EtOAc で抽出した。抽出物を乾燥させ（MgSO₄）、濃縮した。オレンジ色の残渣をEt₂Oに溶解し、得られた溶液をシリカゲルパッド(12 x 12 cm)に通した。濃縮してこの実施例の標題化合物を融点62〜65℃を有する固体(117g、収率84％)として得た。¹ H NMR(CDCl₃)δ5.18(d，J=8.8 Hz，1H)，4.09(d，J=8.8 Hz，1H)，3.35-3.29(m ，1H)，3.09(dd，J=18.8，6.3 Hz)，2.94(dd，J=18.4，6.3 Hz，1H)，2.83(dd， J=18.4，6.3 Hz，1H)，2.78(dd，18.8，6.3 Hz，1H)，1.43(s，9H)，1.14(s，9H )，0.96(s，9H)．実施例６中間体 Boc-Tbg-CH₂-(R)-CH(CH₂C(O)CMe₃)C(O)-Asp(cyPn)(Bzl)-NH-(R)-CH(Et)CMe₃（Ｒ⁵ がBoc であり、かつＷ³がBzl である式15の化合物）の調製実施例１のカップリング操作に従い、かつ実施例３の標題化合物を第一反応体として使用し、実施例５の標題化合物を第二反応体として使用することにより、この実施例の標題化合物を得る。¹ H NMR（CDCl₃）δ7.43-7.26(m，6H)，6.76(d，J=10.0 Hz，1H)，5.16(s，2H)， 5.06(d，J=8.9 Hz，1H)，4.62(d，J=8.9 Hz，1H)，4.07(d，J=8.9 Hz，1H)，3.60(ddd，J=10.0，10.0，2.5 Hz，1H)，3.18-2.83(m，3H)，2.70(dd ，J=16.9，4.1 Hz，1H)，2.68-2.54（m，1H），1.90-1.52（m，9H），1.42(s，9 H)，1.11(s，9H)，0.94(s，9H)，0.88(s，9H)，0.78(t，J：7.3 Hz，3H). 実施例７中間体Boc-(N-Me)Val-Tbg-CH₂-(R)-CH(CH₂C(O)CMe₃)C(O)-Asp(cyPn)-(Bzl)-NH-( R)-CH(Et)CMe₃（Ｒ⁵がBoc であり、かつＷ³がBzl である式18の化合物）の調製実施例６の標題化合物(18.00g、24.8ミリモル)を4MのHCl/ジオキサン(125mL) に溶解した。その混合物を室温で45分間攪拌し、次いで減圧で濃縮してH-Tbg-CH₂ -(R)-CH(CH₂C(O)CMe₃)C(O)-Asp(cyPn)-(Bzl)-NH-(R)-CH(Et)CMe₃をその塩酸付加塩の形態で得た。この塩をCH₂Cl₂（300 mL）に溶解した。その溶液を10％のNa₂CO₃水溶液及び食塩水で連続して洗浄した。有機相を濃縮して相当する遊離塩基を透明な油(約17g )として得た。その透明な油をCH₂Cl₂(200mL)に溶解した。Ｎ−メチルモルホリン（７mL、70ミリモル）及びBoc-(N-Me)Val-OH（6.93g、30ミリモル）をその溶液に添加した。この時点で、その遊離塩基を実施例１の操作に従ってBoc-(N-Me)Va l-OHとカップリングして標題化合物(18.8g、収率89％)を得た。¹ H NMR(CDCl₃)δ7.40-7.29(m，6H)，6.83(d，J=8.5 Hz，1H)，6.77(d，J=10 Hz ，1H)，5.17(s，2H)，4.62(d，J=9.5 Hz，1H)，4.55(d，J=10 Hz，1H)，4.28(d ，J=8 Hz，1H)，3.64-3.56(m，1H)，2.97(s，3H)，3.05-2.50(m，7H)，2.33-2.2 3(m，1H)，1.91-1.56(m，15H)，1.34-1.14(m，7H)，1.11(s，9H)，1.05(d，J=7 Hz，3H)，0.95(d，J=8.5 Hz，3H)，0.90(s，9H)，0.77(t，J=7 Hz，3H)．実施例８式１の化合物のＮ末端の仕上げのための幾つかの代表的な中間体の調製 (a) α（Ｒ）−メチルシクロヘキサンプロピオン酸クロリド：アルゴン雰囲気下で、ブチルリチウムの1.6Mのヘキサン溶液(100mL、160 ミリモル)を乾燥THF(2 00mL)中の４（Ｓ）−（１−メチルエチル）−２−オキサゾリジノン(20.7g、160 ミリモル)(L.N.Pridgenら，J.Org.Chem.，54，3231(1989)を参照のこと)の冷却溶液(-30 ℃〜-40 ℃)に添加した。15分後に、その混合物を-78 ℃に冷却し、塩化プロピオニル(14.2 mL、163 ミリモル）を添加した。-78 ℃で５分後に、その反応混合物を０℃に温めた。次いでその混合物をNaHCO₃の飽和水溶液(500mL)で処理した。得られた混合物をEtOAc(2X)で抽出した。合わせた有機抽出物を乾燥させ（MgSO₄）、濃縮して黄色の液体を得た。この物質をフラッシュクロマトグラフィー［SiO₂、溶離剤：EtOAc-ヘキサン(1:10〜1:4)］により精製して（４Ｓ）−（１−メチルエチル）−３−（１−オキソプロピル）−２−オキサゾリジノンを透明な液体(10.9g、収率74％)として得た。¹ H NMR（400 MHz，CDCl₃）δ4.46-4.41(m，1H)，4.29-4.19(m，2H)，3.03-2.86( m，2H)，2.43-2.33(m，1H)，1.17(t，J=7.3 Hz，3H)，0.92(d，J=7 Hz，3H)，0. 88(d，J=7 Hz，3H)．リチウムヘキサメチル−ジシラザン(LiHMDS、THF中1.0 M、120 mL、120 ミリモル)の溶液を乾燥THF（300mL）に添加した。得られた溶液を０℃に冷却した。しばらくして、乾燥THF（200mL）中の（４Ｓ）−（１−メチルエチル）−３−（１−オキソプロピル）−２−オキサゾリジノン(20.9g、113 ミリモル)の溶液を０℃に冷却し、次いでLiHMDS溶液にカニューレで入れた。０℃で30分後に、臭化ベンジル(13.4 mL、113 ミリモル)を添加した。得られた混合物を０℃で２時間攪拌し、次いで室温に温めた。その混合物を10％のクエン酸水溶液で処理し、次いでEtOAc(2X)で抽出した。合わせた有機抽出物を食塩水で洗浄し、乾燥させ（M gSO₄）、濃縮して固体と混合した黄色の油を得た。この物質をフラッシュクロマトグラフィー［SiO₂、溶離剤：EtOAc-ヘキサン(1:10〜1:3)］により精製して（４Ｓ）−（１−メチルエチル）−３−（２（Ｒ）−メチル−１−オキソ−３−フェニルプロピル）−２−オキサゾリジノンを透明な淡黄色の液体(26.8g、収率86 ％)として得た。¹ H NMR(CDCl₃)δ7.29-7.24(m，4H)，7.22-7.16(m，1H)，4.45-4.41(m，1H)，4.2 6-4.13(m，3H)，3.13(dd，J=13，7.5 Hz，1H)，2.64(dd，J=13，7.5 Hz，1H)，2.22-2.12(m，1H)，1.16(d，J=6.5 Hz，3H)，0.84(d，J=7 Hz，3H)，0 .61(d，J=7 Hz，3H)． THF（9500 mL）及びH₂O(1.5 L)中のこのオキサゾリジン誘導体(26.7g、97.0 ミリモル)の冷却溶液（０℃）に、過酸化水素の30％水溶液(55 mL、0.5 モル）を添加し、続いてH₂O（15 mL）中のLiOH・H₂O（8.67g、200ミリモル）の溶液を添加した。得られた混合物を０℃で１時間にわたって激しく攪拌した。H₂O（700 mL）中のNa₂SO₃（100g）の溶液及び固体NaHCO₃(20g)を連続して添加した。５分後に、THF を減圧で除去した。残留水溶液をCH₂Cl₂(3 X)で洗浄した。その水相を10％のHCl 水溶液で酸性にし、Et₂O(3 X)で抽出した。合わせたEt₂O抽出液を食塩水で洗浄し、乾燥させ（MgSO₄）、濃縮してα（Ｒ）−メチルベンゼンプロピオン酸を透明な液体(12.8g、収率81％)として得た。¹ H NMR(CDCl₃)δ7.33-7.19(m，5H)，3.10(dd，J=13.5，6.5，1H)，2.83-2.74(m ，1H)，2.79(dd，J=13.5，8 Hz，1H)，1.20(d，J=7 Hz，3H)．メタノール(100mL)中のα（Ｒ）−メチルベンゼンプロピオン酸(3.0g、18ミリモル)及び５％のロジウム／アルミナ(800mg)の混合物をパール水素化装置で40 p .s.i．のH₂のもとに振とうした。15時間後に、その混合物をケイソウ土で濾過し、濃縮してα（Ｒ）−メチルシクロヘキサンプロピオン酸を透明な液体(2.4g、収率77％)として得た。¹ H NMR(CDCl₃)δ2.62-2.53(m，1H)，1.79-1.59(m，6H)，1.38-1.16(m，5H)，1.1 7(d，J=7 Hz，3H)，0.95-0.83(m，2H)．乾燥CH₂Cl₂（30mL）中のα（Ｒ）−メチルシクロヘキサンプロピオン酸(2.4g 、14ミリモル)の溶液に、DMF（１滴）及び塩化オキサリル(2g、15ミリモル)を添加した。室温で２時間後に、その混合物を濃縮した。残渣をEt₂O（10mL）に溶解した。この溶液を濾過した。濾液を濃縮してα（Ｒ）−メチルシクロヘキサンプロピオン酸クロリドを透明な黄色の液体(2.6g、収率98％)として得た。¹ H NMR（400 MHz，CDCl₃）3.02-2.91(m，1H)，1.80-1.63(m，6H)，1.39-1.10 (m，5H)，1.28(d，J=7 Hz，3H)，0.99-0.85(m，2H)．この物質を更に精製しないで下記の実施例に記載されたカップリング反応に使用した。 (b) α（Ｓ）−（１−メチルエチル）シクロヘキサンプロピオン酸クロリド：この実施例の操作(a)に従ったが、塩化プロピオニルを３−メチルブタノイルクロリドで置換することにより、α（Ｓ）−（１−メチルエチル）シクロヘキサンプロピオン酸を得る。¹ H NMR(CDCl₃)δ2.27(ddd，J=10.5，7，3.5 Hz，1H)，1.91-1.80(m，2H)，1.73- 1.55(m，5H)，1.35-1.08(m，5H)，0.98-0.77(m，2H)，0.97(d，J=7 Hz，3H)，0. 96(d，J=7 Hz，3H)．その後、この化合物をこの実施例の(a)節に記載されたのと同じ方法でその相当する酸クロリドに変換した。 (c) α（Ｒ），β（Ｒ）−ジメチルシクロヘキサンプロピオン酸：塩化オキサリル(2.9mL、33.3ミリモル）次にジメチルホルムアミド２滴をβ（Ｒ）−メチルベンゼンプロピオン酸(4.0mL、26.1ミリモル）の溶液に添加した。その混合物を室温で２時間攪拌し、次いで減圧で蒸発、乾燥させて相当する酸塩化物（即ち、第一反応体）を得、以下これを使用した。別の調製において、乾燥THF（30 mL）中の４（Ｒ）−（１−メチルエチル）− ２−オキサゾリジノン(3.06g、23.7ミリモル）の溶液を-50 ℃に冷却した。アルゴン雰囲気下で、ブチルリチウムの1.6Mのヘキサン溶液(14.8mL、23.7ミリモル) をそのオキサゾリジノン誘導体の冷却溶液に滴下して添加した。-78 ℃で15分後に、乾燥THF（10 mL）中の第一反応体の溶液を添加した。その反応混合物を-70 ℃で30分間攪拌し、次いで45分間の期間にわたって室温に温めた。その混合物を過剰の10％のNH₄Cl 水溶液で反応停止した。その後、THF を減圧で除去し、得られた濃縮物をEtOAc に溶解した。その溶液を５％のNaHCO₃水溶液(2 X)及び食塩水(2 X)で洗浄し、乾燥させ（MgSO₄）、濃縮して油を得た。その油をフラッシュクロマトグラフィー［SiO₂、ヘキサン−EtOAc(43:7)］により精製して(４Ｒ)− （１−メチルエチル）−３−（３（Ｒ）−メチル−１−オキソ−３−フェニルプロピル）−２−オキサゾリジノン(6.1g、収率93％)を得た。カリウムヘキサメチルジシラザン(KHMDS、THF 中0.692 M、23.3mL、16.1ミリモル)を乾燥THF（50 mL）に添加し、その混合物を-78 ℃に冷却した。乾燥THF（ 40 mL）中の先のオキサゾリジン誘導体(4.03g、14.7ミリモル)の溶液を-78 ℃に冷却した。次いでこの溶液をそのKHMDS溶液にカニューレで入れた。その混合物を-78 ℃で１時間攪拌した。ヨウ化メチル(1.75 mL、28.1ミリモル)を添加した。-78 ℃で2.5 時間以上攪拌した後、その反応混合物を室温に温めた。その混合物を10％のクエン酸水溶液で反応停止した。THF を減圧で除去した後、得られた濃縮物をEtOAc に溶解した。その溶液を10％のクエン酸水溶液(2 X)、５％のNaH SO₃水溶液及び食塩水で洗浄し、乾燥させ（MgSO₄）、濃縮、乾燥させた。残渣をフラッシュクロマトグラフィー［SiO₂、ヘキサン−EtOAc(42:8)］により精製して４（Ｒ）−（１−メチルエチル）−３−（２（Ｒ），３（Ｒ）−ジメチル−１ −オキソ−３−フェニルプロピル）−２−オキサゾリジノン(2.84g、収率67％) を得た。このオキサゾリジノン誘導体(2.80g、9.69ミリモル)をLiOH・H₂O（0.81g、19. 3ミリモル）の存在下で30％の過酸化水素水溶液(5.5mL、48.5ミリモル)と反応させ、続いて得られたα（Ｒ），β（Ｒ）−ジメチルベンゼンプロピオン酸をこの実施例の(a)節の操作に従ってMeOH中で５％のロジウム／アルミナ(1.76g)で還元して、α（Ｒ），β（Ｒ）−ジメチルシクロヘキサンプロピオン酸(1.74g、このオキサゾリジノン誘導体からの収率96％)を得た。¹ H NMR（CDCl₃）2.63(qd，J=6.5，6.5 Hz，1H)，1.80-1.71(m，4H)，1.68-1.63( m，2H)，1.29-0.91(m，6H)，1.08(d，J=7 Hz，3H)，0.84(d，J=6.5 Hz，3H)．その後、この化合物をこの実施例の(a)節に記載されたのと同じ方法でその相当する酸塩化物に変換した。実施例９（３−シクロヘキシル−２（Ｒ）−メチル−１−オキソプロピル）-(N-Me)Val -Tbg-CH₂-(R)-CH(CH₂C(O)CMe₃)-C(O)-Asp(cyPn)-NH-(R)-CH(Et)CMe₃（Ｒ¹がＨであり、かつＲ²がMeである式１の化合物）の調製実施例７の標題化合物(18.8g、21.98 ミリモル)を4MのHCl/ジオキサン(200mL) に溶解した。その溶液を室温で７時間攪拌し、次いで濃縮した。得られた残渣を CH₂Cl₂（350 mL）に溶解した。その溶液を10％のNa₂CO₃水溶液、次いで食塩水で洗浄した。その溶液を濃縮してH-(N-CH₃)Val-Tbg-CH₂-(R)-CH(CH₂C(O)CMe₃)-C(O )-Asp(cyPn)-NH-(R)-CH(Et)CMe₃(約17g)を得た。この化合物をCH₂Cl₂（200 mL）に溶解した。Ｎ−メチルモルホリン(2.5mL、25ミリモル）及びα（Ｒ）−メチルシクロヘキサン−プロピオン酸クロリドの添加後に、その混合物を室温で1.5 時間撹拌した。その後、その混合物を10％のNa₂CO₃水溶液、10％のクエン酸水溶液及び食塩水で洗浄し、乾燥させ（MgSO₄）、濃縮してこの実施例の標題化合物の相当する保護されたカルボニル誘導体、即ち、Ｒ¹が水素であり、Ｒ²がメチルであり、かつＷ³がBzl である式21の化合物を得た。この誘導体(12.2g、13.5ミリモル)を水添分解［10％のPd(OH)₂/C(1.3g)、１気圧のH₂、MeOH（150 mL）、１時間］にかけた。その後、木炭をその反応混合物に添加し、得られた懸濁液をガラス微小繊維フィルター及びケイソウ土で濾過した。濾液を減圧で濃縮して標題化合物を白色の微粉末(10.7g、収率97％)として得た。融点115〜116 ℃。¹ H NMR(d₆−DMSO)δ8.31(d，J=7 Hz，0.25H)，8.23(ブロード，J=10 Hz，1H)，7 .86(d，J=8.5 Hz，0.75H)，6.93(重なり，d，J=10 Hz，1H)，4.91(重なり，d，J =10 Hz，1H)，4.70(d，J=10 Hz，0.75H)，4.22(d，J=10.5 Hz，0.25H)，4.16(重なり，d，J=8.5Hz，1H)，3.45-3.37(m，1H)，3.24-3.15(m，1H)，2.96(s，2.25H )，2.88(s，0.75H)，2.88-2.50(m，5H)，2.19-2.00(m，2H)，1.70-1.44(m，14H) ，1.44-0.62(m，47H，1.04，0.88及び0.87に特徴的な一重線); FAB MS(m/z): 81 7.6(M＋H)⁺．この実施例の操作に従ったが、α（Ｒ）−メチルシクロヘキサンプロピオン酸クロリドをα（Ｓ）−（１−メチルエチル）−シクロヘキサンプロピオン酸クロリドで置換することにより、｛３−シクロヘキシル−２（Ｓ）−（１−メチルエチル）−１−オキソプロピル｝-(N-Me)Val-Tbg-CH₂-(R)-CH(CH₂C(O)CMe₃)C(O)-A sp(cyPn)-NH-(R)-CH(Et)CMe₃を得た。¹ H NMR(d₆−DMSO)δ8.23(d，J=10 Hz，1H)，8.01(d，J=8Hz，1H)，6.93 (d，J=10 Hz，1H)，4.92(d，J=10 Hz，1H)，4.80(d，J=11 Hz，1H)，4.13(d，J= 8.5 Hz，1H)，3.40-3.37(m，1H)，3.23-3.16(m，1H)，3.00(s，3H)，2.84-2.56( m，4H)，2.53-2.48(m，1H，DMSOのMeとの重なり)，2.18-2.08(m，1H)，2.06-2.0 2(m，1H)，1.73-1.42(m，15H)，1.39-1.28(m，1H)，1.24-1.00(m，4H)，1.04(s ，9H)，0.92-0.77(m，15H)，0.90(s，9H)，0.87(s，9H)，0.64(t，J=7 Hz，3H) ；FAB MS(m/z)：845（M＋H）⁺．再度、この実施例の操作に従ったが、α（Ｒ）−メチルシクロヘキサンプロピオン酸クロリドをα（Ｒ），β（Ｒ）−ジメチル−シクロヘキサンプロピオン酸クロリドで置換することにより、（３−シクロヘキシル−２（Ｒ），３（Ｒ）− ジメチル−１−オキソプロピル）-(N-Me)Val-Tbg-CH₂-(R)-CH(CH₂C(O)CMe₃)C(O) -Asp(cyPn)-NH-(R)-CH(Et)CMe₃を得た。¹ H NMR(d₆-DMSO)δ8.23(d，J=9.5Hz，0.9H)，8.16(d，J=5Hz，0.1H)，7.84(d，J =8.5 Hz，1H)，6.98(ブロード，0.1H)，6.94(d，J=10 Hz，0.9H)，4.96(ブロード，0.1H)，4.91(d，J=10 Hz，0.9H)，4.70(d，J=11.5 Hz，0.9H)，4.23(d，J=1 0 Hz，0.1H)，4.16(d，J=8.5 Hz，0.9H)，3.96(d，J=5 Hz，0.1H)，3.42-3.37(m ，1H)，3.24-3.16(m，1H)，2.96(s，2.7H)，2.90(s，0.3H)，2.83-2.50(m，5H) ，2.19-2.02(m，2H)，1.73-1.35(m，15H)，1.20-0.96(m，6H)，1.04(s，9H)，0. 91-0.87(m，6H)，0.89(s，9H)，0.87(s，9H)，0.79(d，J=7 Hz，3H)，0.77(d，J =7 Hz，3H)，0.65(t，J=7Hz，3H); FABMS(m/z): 831(M＋H)⁺．実施例10 単純ヘルペスウイルス(HSV-1)リボヌクレオチド還元酵素の抑制 a)酵素の調製 HSV-1 リボヌクレオチド還元酵素（部分精製したもの）をE.A.Cohen ら，J．G en.Virol.，66，733(1985)により記載されたようにして10プラーク形成単位／細胞で株F HSV-1 ウイルスで感染された静止BHK-21/C13細胞から得た。 b)アッセイ P.Gaudreauら，J.Biol，Chem.，262，12413(1987)により記載されたアッセイを使用して、HSV-1 リボヌクレオチド還元酵素活性を抑制する式１の化合物の能力を評価する。そのアッセイ結果を酵素活性の最大抑制の50％を生じる化合物の濃度(IC₅₀)として表す。夫々のアッセイに使用した酵素製剤の単位の数は、酵素製剤の比活性に基いて一定であった。これらの結果は試験化合物を用いない対照実験で得られた活性に対するものであり、互いに10％未満で変化した４回のアッセイの平均を表す。下記の表Ｉは式１の例示化合物について得られたアッセイ結果を示す。表Ｉ式式中、Ｒ¹及びＲ²は IC₅₀ 下記のとおりである μM Ｒ¹＝ＨかつＲ²＝Me 0.147 Ｒ¹＝ＨかつＲ²＝CHMe₂ 0.123 Ｒ¹及びＲ²＝Me 0.191 実施例11 細胞培養中の単純ヘルペスウイルス(HSV-1)複製の抑制アッセイ BHK-21細胞クローン13（ATCC CCL10）を８％(v/v)ウシ胎児血清(FBS、ギブコカナダ社)を補給したα−MEM 培地（カナダ、オンタリオ、バーリントンにあるギブコカナダ社）を含む850 cm²のローラーびん中で２日間にわたって培養した( 2x10⁷細胞／びん)。細胞をトリプシン処理し、次いで100 μl 中ウェル当たり50 ,000の細胞の密度で96ウェルミクロタイタプレート中の新鮮培地に移した。細胞を６時間の期間にわたって37℃でインキュベートしてプレートに付着させた。次いで細胞を0.5 ％のFBS（v/v）を補給したα−MEM 100 μLで１回洗浄し、３日間にわたって同培地100 μLとともにインキュベートした。血清飢餓のこの期間後に、低血清培地を除去した。細胞をBBMT 100μL で１回洗浄し、２時間にわたって同培地100 μL 中でインキュベートした｛注：BBMT培地はP.Brazeau ら，Pr oc.Natl.Acad．Sci.USA，79，7909(1980)により記載されている｝。その後、細胞をBBMT培地50μL 中でHSV-1 株ＦまたはKOS（感染多重度=0.05 P FU/細胞）で感染させた。37℃で１時間のウイルス吸収後に、培地を除去し、細胞をBBMT(2x100 μL)で洗浄した。細胞をBBMT培地中の適当な濃度の試験試薬100 μLとともに、またはそれを用いないでインキュベートした。37℃で24時間のインキュベーション後に、ウイルス複製の程度をELISA アッセイ、例えば、HSV-1 の後期糖タンパク質Ｃを検出する下記のアッセイにより測定した。細胞を30分間にわたって室温で食塩加リン酸緩衝液中0.063 ％のグルタルアルデヒド100 μL を含むミクロタイタプレート中で固定した。次いでミクロタイタプレートをカゼインブロッキング溶液で１回洗浄し、１時間にわたって室温で同溶液200 μL でブロックした。その後、HSV-1 gCエンベロープタンパク質を認識するmAb C11［E.Trybala ら，Journal of General Virology，75，743（1994）を参照のこと］100 μL を２時間にわたって室温で夫々のウェルに添加した。そのプレートを0.05％のポリオキシエチレン(20)ソルビタンモノオレエートを含む食塩加リン酸緩衝液で３回洗浄した。細胞を暗所で１時間にわたって室温でヒツジ抗マウスIgC ホースラディッシュペルオキシダーゼ100 μL とともにインキュベートした。次いでそのプレートを上記食塩加リン酸緩衝液製剤200 μL で３回洗浄し、次いで0.1Mのクエン酸ナトリウム(pH4.5)で１回洗浄した。その後、オルトフェニレンジアミンニ塩酸塩(OPD、ギブコカナダ社)100 μL を夫々のウェルに添加した。そのプレートを30分間にわたって暗所でミクロプレートシェーカーで攪拌した。ミクロプレート分光測光計を使用して発色を450 nmで監視した。 SAS を使用してウイルス複製の抑制率（％）を計算し、EC₅₀値を生じた。結果下記の表IIは、式１の化合物をこの実施例の細胞培養アッセイ(HSV-1株Ｆ)に従って評価した時に得られた結果の例を与える。表II 式の化合物式中、Ｒ¹及びＲ²は EC₅₀ 下記のとおりである μM Ｒ¹＝ＨかつＲ²＝Me 0.4 Ｒ¹＝ＨかつＲ²＝CHMe₂ 0.2 Ｒ¹及びＲ²＝Me 0.2 実施例12 相乗的組み合わせ HSV-1 に対する実施例９の標題化合物とアシクロビル(ACV)の相乗作用を、HSV -1 の株KOS を使用して、その２種の薬剤を夫々単独で評価し、次いで細胞培養アッセイで種々の組み合わせで評価し、イソボール方法をこれらの研究で得られた結果に適用することにより実証した。イソボール方法の説明について、J. Suhnel，J.Antiviral Research，13，23（1990）を参照のこと。これらの結果を図１に示す。イソボール方法に関して更に詳しくは、この方法は２種の試験化合物、夫々単独及び異なる組み合わせについて生じた実験データを必要とする。この方法では、選択された濃度(EC₅、EC₁₀、EC₂₀及びEC₃₀)の実施例９の標題化合物を所定の濃度のACV に添加し、EC₅₀を前記のようにして評価した。これらの実験について、実施例９の標題化合物（即ち、試験化合物）のEC₅、EC₁₀、EC₂₀及びEC₃₀を先に得られた抑制曲線から誘導した。Ｙ軸についてFEC₆₀(ACV)と称される値（これは試験化合物の不在下で必要とされる濃度に対し一定濃度の試験化合物の存在下でHSV 複製を60％抑制するのに必要とされるACV の濃度の比である）を使用して、イソボログラムを生じる。これをACV の不在下でHSV 複製の抑制を60％低下した試験化合物の濃度に対する試験化合物の一定濃度の比を表す用語（Ｘ軸）に対しプロットする。等式：Ｘ軸：［添加した試験化合物の一定濃度］試験化合物単独のEC₆₀ Ｙ軸： FEC₆₀(ACV)＝EC₆₀ （ACV＋試験化合物のＸμM］ EC₆₀（ACV 単独）下記の表III はACV と実施例９の標題化合物(TC)の組み合わせをHSV-1 に対するそれらの抗ヘルペス活性について評価した時に得られた結果を示す。使用したウイルス株及び感染多重度(MOI)はHSV-1 KOS 株（MOI=0.05 PFU/ 細胞）であった。 (1) 実施例９の標題化合物の原液を0.22μM の膜で濾過し、次いで濾液中の化合物の濃度をHPLCにより測定した。 (2) アシクロビルをカナダ、ケベック、カークランドにあるブラフ・ウェルカム社から入手した。注：表III の先の研究において、HSV 複製の抑制をF.Denizot 及びR.Lang，J. Immunol.Methods，89，271（1986）の細胞毒性アッセイにより測定した試験化合物に関する細胞毒性レベルよりかなり下の濃度で観察した。表III の結果は、実施例９の標題化合物をアシクロビルと組み合わせると、実施例９の標題化合物の濃度の比が増大されるにつれて、アシクロビルのEC₅₀の比例した低下が起こることを示す。それ故、これらの相乗効果の研究は、式１の化合物がHSV-1 に対するアシクロビルの抗ヘルペス活性を強化することができることを実証する。

Claims

【特許請求の範囲】１．式１（式中、Ｒ¹は水素または(1-4C)アルキルであり、かつＲ²は(1-4C)アルキルである）、の化合物、またはその治療上許される塩。２．Ｒ¹が水素またはメチルであり、かつＲ²がメチル、エチル、１−メチルエチルまたはプロピルである請求の範囲第１項に記載の化合物、またはその治療上許される塩。３．Ｒ¹が水素であり、かつＲ²がメチル、エチルまたは１−エチルメチルである請求の範囲第２項に記載の化合物、またはその治療上許される塩。４．抗ヘルペスウイルス有効量の請求の範囲第１項に記載の化合物、またはその治療上許される塩、及び医薬上許される担体を含むことを特徴とする医薬組成物。５．請求の範囲第１項に記載の化合物、またはその治療上許される塩、及び局所適用に適した生理学上許される担体を含むことを特徴とする化粧用組成物。６．哺乳類のヘルペスウイルス感染症を治療するための請求の範囲第１項に記載の化合物、またはその治療上許される塩の使用。７．ヘルペスウイルスの複製を抑制するための請求の範囲第１項に記載の化合物、またはその治療上許される塩の使用。８．（３−シクロヘキシル−２（Ｒ）−メチル−１−オキソプロピル）-(N-Me)V al-Tbg-CH₂-(R)-CH(CH₂-C(O)CMe₃)C(O)-Asp(cyPn)-NH-(R)-CH(Et)CMe₃、｛３− シクロヘキシル−２（Ｓ）−（１−メチルエチル）−１−オキソプロピル｝-(N- Me)Val-Tbg-CH₂-(R)-CH(CH₂C(O)CMe₃)C(O)-Asp(cyPn)-NH-(R)-CH(Et)CMe₃、及び（３−シクロヘキシル−２（Ｒ），３（Ｒ）−ジメチル−１−オキソプロピル)-(N-Me)Val-Tbg-CH₂-(R)-CH(CH₂C(O)CMe₃)C(O)-Asp(cyPn)-NH-(R)-CH(Et)C Me₃からなる群から選ばれた請求の範囲第３項に記載の化合物。９．抗ヘルペスウイルス有効量の請求の範囲第８項に記載の化合物、またはその治療上許される塩、及び医薬上許される担体を含むことを特徴とする医薬組成物。 10．請求の範囲第８項に記載の化合物、またはその化粧上許される塩、及び局所適用に適した生理学上許される担体を含むことを特徴とする化粧用組成物。 11．哺乳類のヘルペスウイルス感染症を治療するための請求の範囲第８項に記載の化合物、またはその治療上許される塩の使用。 12．ヘルペスウイルスの複製を抑制するための請求の範囲第８項に記載の化合物、またはその治療上許される塩の使用。 13．医薬または獣医薬上許される担体、及び有効量の抗ウイルスヌクレオシド類似体またはその治療上許される塩と、請求の範囲第１項に記載のリボヌクレオチド還元酵素抑制化合物、またはその治療上許される塩の組み合わせを含むことを特徴とする医薬組成物。 14．ヌクレオシド類似体が式22 （式中、Ｒ⁶は水素、ヒドロキシまたはアミノである）の化合物、またはその治療上許される塩である請求の範囲第13項に記載の医薬組成物。 15．抗ウイルスヌクレオシド類似体がペンシクロビル、ファムシクロビル及びバラシクロビルからなる群から選ばれる請求の範囲第13項に記載の医薬組成物。 16．哺乳類のヘルペスウイルス感染症を治療するための抗ウイルスヌクレオシド類似体、またはその治療上許される塩と、請求の範囲第１項に記載の式１の化合物、またはその治療上許される塩の組み合わせの使用。 17．ヌクレオシド類似体及び式１の化合物が逐次または同時に投与される請求の範囲第16項に記載の使用。 18．組み合わせが局所投与される請求の範囲第16項に記載の使用。 19．抗ウイルスヌクレオシド類似体がアシクロビル、６−デオキシアシクロビル、２，６−ジアミノ−９−｛（２−ヒドロキシエトキシ）メチル｝プリン、ペンシクロビル、ファムシクロビル及びバラシクロビルからなる群から選ばれる請求の範囲第16項に記載の使用。 20．哺乳類の単純ヘルペスウイルス型１または型２を治療するための請求の範囲第９項に記載の医薬組成物の使用。 21．(i) 式19 （式中、Ｗ³はカルボキシル保護基である）の遊離Ｎ末端化合物を式20 （式中、Ｒ¹及びＲ²は請求の範囲第１項に記載のとおりである）の酸塩化物と反応させて式21 （式中、Ｒ¹、Ｒ²及びＷ³はこの請求の範囲に記載のとおりである）の相当する保護されたカルボキシル誘導体を得、そして (ii) 式21のこの誘導体を脱保護して式１の相当する化合物を得、そして (iii) 所望により式１の化合物をその治療上許される塩に変換することを特徴とする請求の範囲第１項に記載の式１の化合物、またはその治療上許される塩の調製方法。