JPH11158018A - 有益な線虫を保持した環境適合性多孔物質を調製する方法及び前記物質から製造した生物製剤 - Google Patents

有益な線虫を保持した環境適合性多孔物質を調製する方法及び前記物質から製造した生物製剤

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JPH11158018A
JPH11158018A JP9325113A JP32511397A JPH11158018A JP H11158018 A JPH11158018 A JP H11158018A JP 9325113 A JP9325113 A JP 9325113A JP 32511397 A JP32511397 A JP 32511397A JP H11158018 A JPH11158018 A JP H11158018A
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チエン−ミン・シー
Yuee Lee Tsuae
ツアエ・ユエー・リー
Suun Tai-Sen
タイ−セン・スーン
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Abstract

(57)【要約】 （修正有） 【解決手段】殺有害生物剤活性を有する有益な線虫を保
持した環境適合性多孔性材料を含む昆虫駆除のための生
物製剤であって、前記線虫が、生産培地を含む多孔性材
料中で共生細菌と線虫源をインキュベートすることによ
って得られる、前記生物製剤。 【効果】環境適合性多孔性材料を所期の場所に直接使用
することが可能であり、従って、従来技術の線虫回収手
順と調合段階を省略することが可能である。

Description

【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、殺有害生物剤活性
（pesticidal activity）を有する有益な線虫を保持し
た環境適合性多孔性材料を調製するための方法、この材
料によって生産する生物製剤、及び、有害生物駆除（co
ntrolling pests）のためのこの生物製剤の使用に係わ
る。
【０００２】
【従来の技術及び発明が解決しようとする課題】線虫を
ベースとする殺有害生物剤は、殺線虫剤ではなく、一種
の新規殺有害生物剤であって、共生細菌を伴う有益な線
虫を含有する有害生物駆除用の生物製剤（biotic prepa
ration）である。
【０００３】線虫をベースとする殺有害生物剤は化学殺
有害生物剤とは異なっている。例えば、一般的な化学殺
有害生物剤は極めて毒性が高い有毒の殺有害生物剤であ
り、環境汚染を生じさせ易い。こうした化学殺有害生物
剤は、自然の有害生物捕食生物に悪影響を与え、環境上
のバランスを破壊し、標的とする有害生物に耐性を生じ
させる場合が多い。
【０００４】線虫ベースの殺有害生物剤で使用されるこ
とが多い有益な線虫は、カンセンチュウ目（Ｒｈａｂｄ
ｉｔｉｄａ）、特にＲｈａｂｄｉｔｉｄａｅ、Ｓｔｅｉ
ｎｅｒｎｅｍａｔｉｄａｅ、及び、Ｈｅｔｅｒｏｒｈａ
ｂｄｉｔｉｄａｅを含む。大半の線虫と同様に、これら
の線虫は、卵、４つの幼生期、及び、成体を含む単純な
生活環を有する。感染段階は「第３齢感染性幼虫(stage
3 infective juvenile)（Ｊ３）」又はいわゆる「感染
性幼虫(infective juvenile)（ＩＪ）」である。ＩＪは
特に環境条件に対して抵抗力があり、宿主の体に本来的
に存在する開口部（例えば、口、肛門、又は、気門(res
piration pores）を通って宿主内に入り込む。殺虫剤と
して作用する過程は次の通りである。感染性線虫が消化
管壁又は気管に能動的に侵入して血体腔に入り込み、そ
の後で、線虫内の共生細菌（例えば、Ｘｅ ｎｏｒｈａｂ
ｄｕｓ）を宿主に対して放出する。この共生細菌は宿主
体内で急速に増殖する。宿主は約４８時間以内に敗血症
で死亡する。細菌細胞と宿主組織を取り込んだ後に、未
成熟線虫は成体（１）に成長する。
【０００５】こうした有益な線虫は植物に対して無害で
あり、人類と家畜動物に対して安全である。１９８７年
には、合衆国環境保護庁が、Ｓｔｅｉｎｅｒｎｅｍａ及
びＨｅｔｅｒｏｒｈａｂｄｉｔｉｓとその共生細菌を含
む生物製剤がＦＩＦＲＡ Ｓｅｃｔｉｏｎ ２５（ｂ）
（１）の法定要件に必要でなくてよいことを確認してい
る。こうした生物製剤は市販入手可能であり、多くの国
々では登録されていない。こうした生物製剤は、駆除の
標的ではない土壌中の他の節足動物に対しては作用せ
ず、有害生物の抵抗性の発達を示す証拠はない。
【０００６】米国特許第４，３３４，４９８号（１９８
２）（２）は、線虫を飼養するための方法を開示してい
る。しかし、この特許は、線虫を飼養するための方法
と、線虫を回収する手順とを提供するが、線虫の回収後
の処置、貯蔵、及び、使用の方法は全く提供しない。従
って、この方法を有害生物駆除のために田畑に対して適
用することは不可能である。
【０００７】世界中で現在までに開示されている線虫飼
養方法の殆どは、固体培養と液体培養とに基づいてい
る。線虫ベースの殺有害生物剤の最も重要な技術は、依
然として製剤の大量生産及び調合の技術である。線虫が
多細胞動物であるので、他の微生物製剤と同様に長期貯
蔵（例えば、１年以上の貯蔵）を実現するのは困難であ
る。例えば、ＷＯ ８９／０４６０２（３）と米国特許
第４，６１５，８８３号（１９８６）（４）（Ｂｉｏｓ
ｙｓ Ｃｏｒｐ．，Ｕ．Ｓ．Ａ．）（図１参照）に開示
されている方法では、線虫の埋め込みにアルギナートを
使用し、その製剤を３ヶ月間から６ヶ月間貯蔵すること
が可能である。しかし、この方法では、作物上に散布す
る前に、クエン酸ナトリウムを使用することによって線
虫を溶解し（約３０分間を要する）、その後で水で希釈
しなければならない。従って、こうした方法は実際の使
用には適していない。
【０００８】米国特許第４，３３４，４９８号とＷＯ
８８／０８６６８（５）とに開示されている方法（図１
参照）は、段階的に相対湿度を低下させるための条件下
で線虫の脱水を行って線虫を粘土状物にするために、線
虫陰蔽生活の原理を使用した。得られる粘土状物の貯蔵
は、冷蔵条件下で３ヶ月から６ヶ月であることが可能で
ある。しかし、上記方法は脱水手順に過剰に多大な時間
とエネルギーを要し、その結果として、必要とされるコ
ストは比較的高いだろう。これに加えて、上記粘土状物
は人間の肺に損傷を与え易く、翌日に線虫を再水和する
ために一晩高湿度（相対湿度９５％）で処理しなければ
ならない。従って、上記方法は、利便性が高い形で使用
するには複雑すぎる。
【０００９】線虫をベースとする殺虫剤を生産するため
の方法は、無菌線虫源を培養するためのより複雑な追加
の手順と、線虫をその共生細菌と共に混合培養すること
とを除いて、微生物一般を発酵させるための方法に類似
している。線虫が多細胞動物であるので、培養期間は他
の微生物の培養期間よりも長い（例えば、液体培養の場
合には１１日間を要し、固体培養の場合には２１日間を
要する）。図１に示すように、従来のプロセスで使用さ
れる方法は、貯蔵からの回収に至る追加の諸段階を必要
とする。特に、この回収段階は複雑で多大な労力を要
し、しかも線虫の損失を生じさせる。更に、この回収段
階は廃水の問題を常に引き起こす。これは、製剤の製造
時においても同じ状況を生じさせる。これに加えて、線
虫の培養期間は非常に長く、回収手順には多大な労力を
要し、その結果、生産コストは相対的に高くなる可能性
が高い。従って、線虫をベースとする殺有害生物剤生物
製剤のコストは高価である傾向があり、製品の価格も高
価である。更に、従来の培養で使用する線虫ベース殺虫
剤の製造方法は、回収手順の前に、共生細菌を培養する
段階と線虫を培地中に接種する段階という２つの別個の
段階を必要とする。固体培養の場合は特に、共生細菌の
培養と培地中への線虫接種の両方を単一の段階で行う方
法に比較して、上記２つの段階を行うためには多大な労
力が必要である。
【００１０】Ｔ．Ｎ．Ｗａｎｇ他は、Ｓｕｇａｒ Ｒｅ
ｓｅａｒｃｈ ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ（１９９２）（６）
において、線虫液を吸収して田畑に散布するために砂糖
くず（sugar dregs）を利用することを報告していた。
（線虫を室温で約１ヶ月貯蔵することが可能である。）
しかし、線虫を培養するためのマトリックスとして（培
地を加えて）バガス（bagasse）を使用することは、こ
の論文には開示されていない。これに加えて、バガス
は、その砂糖残留分のために菌類による侵入を被り易い
だろう。
【００１１】Ｇｅｏｒｇｉｓ．Ｒ．は、Ｆｏｒｍｕｌａ
ｔｉｏｎ ａｎｄ ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｔｅｃｈ
ｎｏ ｌｏｇｙ ｉｎ “Ｅｎｔｏｍｏｐａｔｈｏｇｅｎ
ｉｃＮ ｅｍａｔｏｄｅｓ ｉｎ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ
Ｃｏｎｔｒｏｌ”，ｐ．１７８（７）において、線虫
の輸送と貯蔵のための湿潤担体としてバーミキュライト
と泥炭を使用することが可能であることだけに言及して
いる。しかし、バーミキュライトと泥炭に線虫を適用す
る前に線虫を培養させて回収しなければならない。上記
のように、こうした回収段階は高コストを要し、線虫の
損失の原因となり、廃水の問題を生じさせる。これに加
えて、Ｇｅｏｒｇｉｓは、線虫を培養するための支持培
地としてバーミキュライト又は泥炭を使用しなかった。
【００１２】こうした従来技術の欠点を本発明によって
最小限にすることが可能である。
【００１３】
【課題を解決するための手段】本発明の目的は、生産培
地を含む多孔性材料中で共生細菌と線虫源をインキュベ
ートすることによって得られる殺有害生物剤活性を有す
る有益な線虫を保持した、環境適合性多孔性材料を含む
昆虫駆除のための生物製剤を提供することである。
【００１４】本発明の別の目的は、生産培地を含む多孔
性材料中に共生細菌と線虫源を接種することを含む、殺
有害生物剤活性を有する有益な虫生の線虫を保持した環
境適合性多孔性材料を調製するための方法を提供するこ
とである。
【００１５】本発明の更に別の目的は、有害生物による
被害から保護しなければならない所期の対象物を、殺有
害生物剤活性を有する有益な線虫を保持した環境適合性
多孔性材料で処置することを含む、有害生物を駆除する
ための方法を提供することである。
【００１６】本発明の説明、実施例、及び、クレームを
記述する際に、次の術語を使用する。
【００１７】術語「有益な線虫」は、共生細菌と連携し
て宿主を殺害する、Ｒｈ ａｂｄｉｔｉｄａ、特にＲｈａ
ｂｄｉｔｉｄａｅ、Ｓｔｅｉｎｅｒｎｅｍａｔｉｄａ
ｅ、及び、Ｈｅｔｅｒｏｒｈａｂｄｉｔｉｄａｅ等の線
虫を意味する。
【００１８】術語「環境適合性の」は、「環境汚染又は
環境毒の原因とならず、且つ、関連の環境保全法規に合
致している」ことを意味する。
【００１９】術語「生物分解性の」は、「自然界に生息
する微生物又は生物によって分解又は破壊可能である」
ことを意味する。
【００２０】術語「多孔性材料」は、多数の孔を有する
材料を意味する。本発明で使用する多孔性材料は、環境
適合性多孔性材料（例えば、バーミキュライト）、又
は、生物分解性多孔性材料（例えば、スポンジ、ヘチマ
等）を包含し、これらの多孔性材料は両方とも虫生線虫
の大量生産に使用可能であり、且つ、環境汚染を全く生
じさせないだろう。
【００２１】術語「有害生物駆除」は撃退と殺生を含
む。「撃退」は、殺生的作用を生じさせることなしに昆
虫又はナメクジを所期の場所から排除して遠ざける処置
を意味する。「殺生」は、線虫が共生細菌と連携して昆
虫宿主又はナメクジを殺す処置を意味する。
【００２２】
【発明の実施の形態】本発明の方法と特徴を更に詳細に
説明するために、下記の実施例によって本発明を説明す
る。
【００２３】材料と方法 試験した線虫：Ｓｔｅｉｎｅｒｎｅｍａ ｃａｒｐｏｃ
ａｐｓａｅ（ＳＣ）系統Ａ１１（ＳＣＡ）。［カイコ又
はハスモンヨトウ（tobacco cutworm）中でのインビボ
培養後に単離して１０℃で貯蔵した。］Ｅｄｗａｒｄ
Ｊ．及びＩｒｅｎｅ ＰｏｐｉｅｌがＪｏｕｒｎａｌ
ｏｆ Ｎｅｍａｔｏｌｏｇｙ ２１（４）：５００−５
０４，１９８９（８）において説明している方法で、モ
ノゼニックな線虫を得た。
【００２４】試験した細菌：ＳＣＡの腸管から単離さ
れ、Ｆｏｏｄ Ｓｃｉｅｎｃｅ ＆Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇ
ｙ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｉｎ Ｔ
ａｉｗａｎによってＸｅｎｏｒｈａｂｄｕｓ ｎｅｍａ
ｔｏｐｈｉｌｕｓとして同定された共生細菌。この細菌
を−７０℃で保存した。
【００２５】ＴＳＡ（トリプシン大豆寒天）の組成は次
の通りである。
【００２６】 ＴＳＡ（Ｄｉｆｃｏ） ４０ｇ 蒸留水 １Ｌ ＹＳの組成は次の通りである。
【００２７】 Ｋ2ＨＰＯ4（Ｍｅｒｃｋ） ０．５ｇ ＮＨ4・Ｈ2ＰＯ4（Ｓｉｇｍａ） ０．５ｇ ＭｇＳＯ4・７Ｈ2Ｏ（Ｍｅｒｃｋ） ０．２ｇ ＮａＣｌ（Ｍｅｒｃｋ） ５．０ｇ 酵母エキス（Ｍｅｒｃｋ） ５．０ｇ 蒸留水 １．０Ｌ 生産培地（ＰＭ）の組成は次の通りである。
【００２８】 鶏卵（通常のスーパーマーケットで入手） ５００ｇ 粉末酵母（Ｔａｉｗａｎ Ｓｕｇａｒ Ｃｏｒｐ．） １２ｇ サラダ油（Ｔａｉｗａｎ Ｓｕｇａｒ Ｃｏｒｐ．） ６０ｇ 蒸留水 １Ｌ 共生細菌を培養する連続手順は次の通りだった。
【００２９】ＴＳＡ中で−７０℃で細菌をインキュベー
トし、次に２８℃で２４時間インキュベートし、更に、
ＹＳ液体培地内で１６時間インキュベートした（３０ｍ
Ｌ／１２５ｍＬフラスコ中、１５０ｒｐｍ、２５℃）。
この培養をモノゼニック線虫源と十分に混合して均一な
混合物を形成する。その後で、密封可能容器中の１２１
℃で３０分間高圧滅菌した生産培地を含む環境適合性多
孔性材料中に上記混合物を接種し、その材料中に移植し
た線虫を保持する環境適合性多孔性材料を生成するのに
十分な時間（例えば１５日間から２１日間）に亙って、
多孔性材料中に移植した線虫を２５℃に保った。
【００３０】線虫を含む環境適合性多孔性材料を、有害
生物を駆除するために所期の場所（例えば、田畑、草地
等）に直接施用することが可能である。
【００３１】生物検定用の昆虫： 第４齢ハスモンヨト
ウ（Ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａ ｌｉｔｕｒａ）。
【００３２】生物検定方法： Ｊｅｎｎｉｆｅｒ Ｌ．
Ｗｏｏｄｒｉｎｇ他，１９８８（１）に開示されている
ペトリ皿及び濾紙方法。線虫の昆虫に対する比率＝２
５：１。
【００３３】試験に使用したプラスチックスポンジ（２
×２×２ｃｍ3）はポリエーテルポリウレタン製であ
り、高圧滅菌が可能であり、Ｊｉｈ−Ｈｕｎｇ Ｓｐｏ
ｎｇｅＩｎｃ．から市販入手可能だった。
【００３４】試験に使用したバーミキュライト（Ｎｏ．
２）とパーライト（Ｎｏ．２）は全て、Ｎａｎ−Ｈｅｉ
Ｖｅｒｍｉｃｕｌｉｔｅ Ｃｏｒｐ．から購入した。
【００３５】線虫と共生細菌の同時培養段階で使用した
ガラス容器は、スポンジ又は２ｇから５ｇの上記多孔性
材料を含む１２５ｍＬフラスコ（Ｐｙｒｅｘ）だった。
【００３６】
【実施例】実施例１ 様々な材料中におけるＳＣＡの固体培養 この実施例では、バーミキュライト、パーライト、及
び、フォームスポンジ（即ち、いわゆるスポンジ）を使
用した。その添加比率を次の表１に示す。１０％（即
ち、２ｍｌ）の共生細菌と１０4匹のモノゼニックＳＣ
Ａを接種した。１４日後（２５℃）に、収量と殺虫剤活
性を定量した。その結果を次の表１に示す。
【００３７】
【表１】
【００３８】実施例２ 環境適合性多孔性材料（例えば、バーミキュライト）中
での有益な線虫の培養 バーミキュライト６００ｇとＰＭ ３０００ｍＬを装入
した１４Ｌ容器を３０分間高圧滅菌し、その後で、共生
細菌３００ｍＬと２００万匹のモノゼニックＳＣＡを接
種した。２５℃で２０日間培養した後で、収量と殺有害
生物剤活性を定量した。その結果を次の表２に示す。
【００３９】
【表２】
【００４０】実施例３ ポット試験におけるバーミキュライト製剤中に含まれる
ＳＣＡによるハスモンヨトウ幼虫 に対する生物学的防除
の評価 試験期間： １９９４年５月２４日から同年６月１０日
まで。
【００４１】試験場所： Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌ
Ｃｅｎｔｅｒ ｏｆ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ
（ＤＣＢ，所在地： ８１ Ｃｈａｎｇ Ｈｓｉｎｇ
Ｓｔｒｅｅｔ，Ｔａｉｐｅｉ，Ｔａｉｗａｎ）の６階バ
ルコニー。
【００４２】試験線虫： バーミキュライト及びＰＭ培
地中で培養したＳＣＡ1 試験昆虫： Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｂｏｔａｎ
ｉｃａｌ Ｂｌｉｇｈｔ ｏｆ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｔ
ａｉｗａｎ ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙのＳｈｉｈＣｈｅｎ
ｇ−ｊｅｎ教授によって提供された第４齢ハスモンヨト
ウ（Ｓｐｏｄｏｐ ｔｅｒａ ｌｉｔｕｒａ Ｆａｂｒｉ
ｃｉｕｓ）。
【００４３】試験植物： Ｌｕｎｇ Ｔ′ａｎ ａｎｄ
Ｙａｎｇ−Ｓｎｅｎｇゴルフコース（Ｙａｎｇ Ｍｅ
ｉ）内のグリーンの建設現場から採取した、Ｃｙｎｏｄ
ｏｎｓｐｐ．Ｄ．Ｗ．，系統４１９及び系統３２８。
【００４４】ポット： ２０．５ｘ１３．５ｘ７．５ｃ
ｍ3、面積２７６．７５ｃｍ2。
【００４５】試験デザイン： 完全ランダムデザイン
（ＣＲＤ）を採用し、４回反復した。
【００４６】処理用量： １ヘクタール当たり２４億匹
の線虫、１ヘクタール当たり１２億匹の線虫、１ヘクタ
ール当たり６億匹の線虫。
【００４７】ハスモンヨトウを適用する２日前に各々の
ポットの草を刈り込んだ。各々のポット毎に２０本の幼
植物を試験した。各幼植物の最上部の６枚の葉の咬み痕
の数を、被害を受けた草及び葉の数として計算した。
【００４８】殺有害生物剤とハスモンヨトウを適用する
前に、各ポットの植物に水道水４００ｍＬを注ぎ、更
に、バーミキュライトからの線虫ＳＣＡの放出を容易に
するために、殺有害生物剤の投与後に水道水１５０ｍＬ
を注いだ。その結果を次の表３に示す。
【００４９】
【表３】
【００５０】Ｏｎｅ Ｗａｙ ＡＮＯＶＡでデータを解
析し、Ｄｕｎｃａｎ’ｓ Ｍｕｌｔｉｐｌｅ Ｒａｎｇ
ｅテストによって試験した。平均値の後に記載された異
なる数値は、処理間に有意差が存在することを表す（ｐ
＝０．０５）。
【００５１】損傷を受けた葉と草の数を、２０個の幼植
物と各幼植物の最上部の６枚の葉とのランダムな選択に
よって計算し、その結果、計算した葉の合計数はポット
１個当たり１２０枚だった。
【００５２】結果 （１）表１に示すように、多孔性材料を使用する場合に
高収量の線虫を得ることが可能である。培養材料として
スポンジを使用して得られた収量が最も高かった。
【００５３】（２）表２に示すように、共生細菌の添加
によって、線虫ＳＣＡの大量飼養が容易化された。培養
の収量は容器１個当たり１２億匹だった。５日目の殺有
害生物剤活性は９５％だった。
【００５４】（３）バーミキュライト中で培養したＳＣ
Ａによる、ポット試験におけるハスモンヨトウに対する
生物学的抑制作用は、次の通りだった。
【００５５】表３に示すように、２．４×１０9匹／ｈ
ａと１．２×１０9匹／ｈａによる処理は、６×１０8匹
／ｈａによる処理及び対照よりも著しく優れていた。草
の損傷に関しては、その抑制作用は、２．４×１０9匹
／ｈａ＞１．２×１０9匹／ｈａ＞６×１０8匹／ｈａだ
った。バーミキュライト製剤の形で与えた線虫ＳＣＡ
は、ハスモンヨトウが芝を破壊することを防止する作用
を示した。従って、本発明の線虫培養方法は高い収量を
もたらし、この方法によって調製する殺有害生物剤は、
高レベルの殺虫剤活性と予防効果を有する。
【００５６】更に、本発明の生物製剤の貯蔵は冷蔵条件
下では６ヶ月を越えることが可能だった。
【００５７】本発明の実施様態を説明し添付図面に示し
てきたが、こうした実施様態の全てが本発明の着想と特
徴の例示にすぎず、本発明とクレームの範囲を限定する
ものではないということを理解しなければならない。
【図面の簡単な説明】
【図１】殺有害生物剤製剤を調製するための従来の液体
培養方法と従来の固体培養方法と本発明の方法とを示す
スキーム。
─────────────────────────────────────────────────────
【手続補正書】
【提出日】平成１０年１月２２日
【手続補正１】
【補正対象書類名】図面
【補正対象項目名】図１
【補正方法】変更
【補正内容】
【図１】
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 チエン−ミン・シー 台湾、タイペイ、シー−チー、カン−ニ ン・ストリート、レイン・169、102 (72)発明者 ツアエ・ユエー・リー 台湾、タイペイ、シー−チー、カン−ニ ン・ストリート、レイン・169、102 (72)発明者 タイ−セン・スーン 台湾、タイペイ、シー−チー、カン−ニ ン・ストリート、レイン・169、102

Claims (18)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項１】 殺有害生物剤活性を有する有益な線虫を
    保持した環境適合性多孔性材料を含む昆虫駆除のための
    生物製剤であって、前記線虫が、生産培地を含む多孔性
    材料中で共生細菌と線虫源をインキュベートすることに
    よって得られる、前記生物製剤。
  2. 【請求項２】 前記環境適合性多孔性材料が、バーミキ
    ュライト、泥炭、又は、パーライトである請求項１に記
    載の生物製剤。
  3. 【請求項３】 前記環境適合性多孔性材料が生物分解性
    である請求項１に記載の生物製剤。
  4. 【請求項４】 前記環境適合性多孔性材料が顆粒形態で
    ある請求項１に記載の生物製剤。
  5. 【請求項５】 前記共生細菌がＸｅｎｏｒｈａｂｄｕｓ
    又はＰｈｏｔｏｒｈａｂｄｕｓである請求項１に記載の
    生物製剤。
  6. 【請求項６】 前記線虫源がモノゼニックであるか又は
    無菌化されている請求項１に記載の生物製剤。
  7. 【請求項７】 前記線虫源がＳｔｅｉｎｅｒｎｅ ｍａ
    ｃａｒｐｏｃａｐｓａｅである請求項１に記載の生物製
    剤。
  8. 【請求項８】 生産培地を含む多孔性材料中に共生細菌
    と線虫源を接種することを含む、殺有害生物剤活性を有
    する虫生線虫を保持した環境適合性多孔性材料を調製す
    るための方法。
  9. 【請求項９】 前記環境適合性多孔性材料が、バーミキ
    ュライト又はパーライトである請求項８に記載の方法。
  10. 【請求項１０】 前記環境適合性多孔性材料が生物分解
    性である請求項８に記載の方法。
  11. 【請求項１１】 更に、前記共生細菌と前記線虫を混合
    して接種のための混合物を形成する段階も含む請求項８
    に記載の方法。
  12. 【請求項１２】 前記共生細菌がＸｅｎｏｒｈａｂｄｕ
    ｓ又はＰｈｏｔｏｒｈａｂｄ ｕｓである請求項８に記載
    の方法。
  13. 【請求項１３】 前記Ｘｅｎｏｒｈａｂｄｕ ｓがＸｅｎ
    ｏｒｈａｂｄｕｓｎｅｍａｔｏｐｈｉｌｕｓである請求
    項１２に記載の方法。
  14. 【請求項１４】 前記線虫源がモノゼニックであるか又
    は無菌化されている請求項８に記載の方法。
  15. 【請求項１５】 前記線虫源がＳｔｅｉｎｅｒｎｅｍａ
    ｃａｒｐｏｃａｐｓａ ｅである請求項８に記載の方
    法。
  16. 【請求項１６】 有害生物による被害から保護すること
    が望ましい所期の対象物を、殺有害生物剤活性を有する
    有益な線虫を保持した環境適合性多孔性材料で処理する
    ことを含む、有害生物を駆除するための方法。
  17. 【請求項１７】 前記環境適合性多孔性材料が顆粒形態
    である請求項１６に記載の方法。
  18. 【請求項１８】 前記対象物を、草地、田畑、植木鉢、
    及び、芝生から成るグループから選択する請求項１６に
    記載の方法。
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