JPH111416A - 頭部用組成物 - Google Patents
頭部用組成物Info
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- JPH111416A JPH111416A JP9168012A JP16801297A JPH111416A JP H111416 A JPH111416 A JP H111416A JP 9168012 A JP9168012 A JP 9168012A JP 16801297 A JP16801297 A JP 16801297A JP H111416 A JPH111416 A JP H111416A
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Abstract
(57)【要約】
【課題】 優れた脱毛防止効果、発毛促進効果等の
養毛作用及びフケ、痒み抑制作用を有するとともに、毛
乳頭細胞あるいは毛包上皮系細胞を活性化することによ
って、毛髪伸長の促進をする等の養毛料を提供する。 【解決手段】 フウセンアカメガシワ(学名:Kleinhov
ia hospita)のようなアオギリ科(Sterculiaceae )フ
ウセンアカメガシワ属(Kleinhovia)植物の抽出物を配
合する。
養毛作用及びフケ、痒み抑制作用を有するとともに、毛
乳頭細胞あるいは毛包上皮系細胞を活性化することによ
って、毛髪伸長の促進をする等の養毛料を提供する。 【解決手段】 フウセンアカメガシワ(学名:Kleinhov
ia hospita)のようなアオギリ科(Sterculiaceae )フ
ウセンアカメガシワ属(Kleinhovia)植物の抽出物を配
合する。
Description
【0001】
【発明の属する技術分野】本発明は、特定の生薬抽出物
を有効成分として含んでなる頭部用組成物に関する。具
体的には、アオギリ科(Sterculiaceae )フウセンアカ
メガシワ属(Kleinhovia)植物の抽出物を配合すること
により、優れた脱毛防止、ふけ・痒み抑制作用効果を有
するとともに、毛乳頭細胞あるいは毛包上皮系細胞を活
性化することによって、毛髪伸長の促進をする等の養毛
効果を有する頭部用組成物に関する。
を有効成分として含んでなる頭部用組成物に関する。具
体的には、アオギリ科(Sterculiaceae )フウセンアカ
メガシワ属(Kleinhovia)植物の抽出物を配合すること
により、優れた脱毛防止、ふけ・痒み抑制作用効果を有
するとともに、毛乳頭細胞あるいは毛包上皮系細胞を活
性化することによって、毛髪伸長の促進をする等の養毛
効果を有する頭部用組成物に関する。
【0002】
【従来の技術】高齢化社会、ストレス社会といわれる現
代社会では、頭部毛髪が様々な原因により脱毛の危機に
さらされる機会がますます多くなってきている。これに
対応して、より優れた「養毛料」を提供すべく様々な試
みがなされている。養毛料が毛髪に与える効果として主
なものに、発毛誘導効果(発毛促進効果,成長期誘導効
果)、毛髪を太くする効果、毛髪成長期延長効果、5α
−レダクターゼ阻害効果、血行促進効果、殺菌効果、フ
ケ防止効果、保湿効果、抗酸化効果等の効果が挙げられ
る。
代社会では、頭部毛髪が様々な原因により脱毛の危機に
さらされる機会がますます多くなってきている。これに
対応して、より優れた「養毛料」を提供すべく様々な試
みがなされている。養毛料が毛髪に与える効果として主
なものに、発毛誘導効果(発毛促進効果,成長期誘導効
果)、毛髪を太くする効果、毛髪成長期延長効果、5α
−レダクターゼ阻害効果、血行促進効果、殺菌効果、フ
ケ防止効果、保湿効果、抗酸化効果等の効果が挙げられ
る。
【0003】しかしながら、前記のように種々の試みが
なされているにもかかわらず、従来の養毛料では、その
脱毛防止,発毛効果等の養毛作用は必ずしも十分なもの
ではなかった。これはおそらく脱毛の原因がさまざまで
あり、また発毛の機構も非常に複雑であるためと考えら
れている。従って、毛髪のより具体的構造に着目して養
毛料を作出することは極めて有用であり、そのような薬
剤の提供が望まれている。
なされているにもかかわらず、従来の養毛料では、その
脱毛防止,発毛効果等の養毛作用は必ずしも十分なもの
ではなかった。これはおそらく脱毛の原因がさまざまで
あり、また発毛の機構も非常に複雑であるためと考えら
れている。従って、毛髪のより具体的構造に着目して養
毛料を作出することは極めて有用であり、そのような薬
剤の提供が望まれている。
【0004】
【発明が解決しようとする課題】そこで、本発明者は従
来の試験方法として用いられていきた脱毛防止、発毛効
果あるいはふけ、痒み抑制作用に加え、毛髪のより具体
的構造に着目した毛乳頭細胞あるいは毛包上皮系細胞に
直接働きかける成分を有効成分とする頭部用組成物を見
出すことを目指した。すなわち、本発明の目的は、前記
多様な脱毛の原因に対処すべく、優れた脱毛防止効果、
発毛促進効果等の養毛作用及びフケ、痒み抑制作用なら
びに、乳頭細胞あるいは毛包上皮系細胞を活性化するこ
とによって、毛髪伸長の促進をする等の養毛効果を有す
る頭部用組成物を提供することにある。
来の試験方法として用いられていきた脱毛防止、発毛効
果あるいはふけ、痒み抑制作用に加え、毛髪のより具体
的構造に着目した毛乳頭細胞あるいは毛包上皮系細胞に
直接働きかける成分を有効成分とする頭部用組成物を見
出すことを目指した。すなわち、本発明の目的は、前記
多様な脱毛の原因に対処すべく、優れた脱毛防止効果、
発毛促進効果等の養毛作用及びフケ、痒み抑制作用なら
びに、乳頭細胞あるいは毛包上皮系細胞を活性化するこ
とによって、毛髪伸長の促進をする等の養毛効果を有す
る頭部用組成物を提供することにある。
【0005】
【課題を解決するための手段】本発明者らは、有用物質
の探索対象を脱毛防止効果及び発毛促進効果等の養毛作
用を示すことが示唆されていない植物体抽出物に広げ、
上記目的を達成すべく検討してきた。その結果、アオギ
リ科(Sterculiaceae )フウセンアカメガシワ属(Klei
nhovia)に属する民間薬または生薬として使用されるこ
とのある植物の抽出物が、優れた脱毛防止効果、発毛促
進効果等の養毛作用及びフケ、痒み抑制作用を示すこと
を見い出した。さらに、毛乳頭に直接働きかける成分及
び毛髪成長期延長効果を有する成分について、本発明者
が見出した育毛薬剤検定方法を用いて鋭意検討したとこ
ろ、所望する毛乳頭活性化能及び毛髪成長期延長効果が
認められることを見出し、本発明を完成するに至った。
の探索対象を脱毛防止効果及び発毛促進効果等の養毛作
用を示すことが示唆されていない植物体抽出物に広げ、
上記目的を達成すべく検討してきた。その結果、アオギ
リ科(Sterculiaceae )フウセンアカメガシワ属(Klei
nhovia)に属する民間薬または生薬として使用されるこ
とのある植物の抽出物が、優れた脱毛防止効果、発毛促
進効果等の養毛作用及びフケ、痒み抑制作用を示すこと
を見い出した。さらに、毛乳頭に直接働きかける成分及
び毛髪成長期延長効果を有する成分について、本発明者
が見出した育毛薬剤検定方法を用いて鋭意検討したとこ
ろ、所望する毛乳頭活性化能及び毛髪成長期延長効果が
認められることを見出し、本発明を完成するに至った。
【0006】すなわち本発明は、アオギリ科(Sterculi
aceae )フウセンアカメガシワ属(Kleinhovia)植物の
抽出物を配合することを特徴とする頭部用組成物であ
る。本発明の頭部用組成物は、養毛料であることを好適
とする。
aceae )フウセンアカメガシワ属(Kleinhovia)植物の
抽出物を配合することを特徴とする頭部用組成物であ
る。本発明の頭部用組成物は、養毛料であることを好適
とする。
【0007】また本発明は、アオギリ科(Sterculiacea
e )フウセンアカメガシワ属(Kleinhovia)植物の抽出
物を有効成分とする毛乳頭活性化剤を提供する発明であ
る。
e )フウセンアカメガシワ属(Kleinhovia)植物の抽出
物を有効成分とする毛乳頭活性化剤を提供する発明であ
る。
【0008】前記したように、本発明において「毛乳頭
活性化剤」は、主に後述する育毛検定方法によって毛乳
頭を刺激することによって、毛周期における成長期を延
長させる作用と同休止期から成長期への移行を促進する
作用を有する成分を有効成分として配合した、特に「毛
乳頭」という作用点に着目した毛髪関連薬剤であり、い
わば「個別効能育毛剤」としての特徴を有する。
活性化剤」は、主に後述する育毛検定方法によって毛乳
頭を刺激することによって、毛周期における成長期を延
長させる作用と同休止期から成長期への移行を促進する
作用を有する成分を有効成分として配合した、特に「毛
乳頭」という作用点に着目した毛髪関連薬剤であり、い
わば「個別効能育毛剤」としての特徴を有する。
【0009】また本発明は、アオギリ科(Sterculiacea
e )フウセンアカメガシワ属(Kleinhovia)植物の抽出
物を有効成分とする毛髪成長期延長剤を提供する発明で
ある。
e )フウセンアカメガシワ属(Kleinhovia)植物の抽出
物を有効成分とする毛髪成長期延長剤を提供する発明で
ある。
【0010】前記したように、本発明において「毛髪成
長期延長剤」は、主に後述する育毛薬剤検定方法によっ
て少なくとも毛包上皮系細胞の増殖活性を維持又は促進
することで毛髪の成長期を維持又は延長する効果を有す
る成分を有効成分として配合した、特に上記の毛髪成長
期延長効果に着目した毛髪関連薬剤であり、いわば「個
別効能育毛料」としての特徴を有する。
長期延長剤」は、主に後述する育毛薬剤検定方法によっ
て少なくとも毛包上皮系細胞の増殖活性を維持又は促進
することで毛髪の成長期を維持又は延長する効果を有す
る成分を有効成分として配合した、特に上記の毛髪成長
期延長効果に着目した毛髪関連薬剤であり、いわば「個
別効能育毛料」としての特徴を有する。
【0011】この「毛髪成長期延長剤」は、例えば毛根
近傍における毛包上皮系細胞の増殖が緩徐であること等
により成長期が短くなって、相対的に成長期毛よりも休
止期毛の割合が多くなってしまうことに起因する脱毛症
に特に有効な薬剤である。
近傍における毛包上皮系細胞の増殖が緩徐であること等
により成長期が短くなって、相対的に成長期毛よりも休
止期毛の割合が多くなってしまうことに起因する脱毛症
に特に有効な薬剤である。
【0012】本発明のアオギリ科(Sterculiaceae )フ
ウセンアカメガシワ属(Kleinhovia)植物の抽出物を有
効成分とする頭部用組成物は、上記の2つの作用点を合
わせ持った養毛料である。すなわち、この「養毛料」
は、漫然とした育毛効果をうたう一般的な養毛料用途と
は一線を画する用途を有するものである。
ウセンアカメガシワ属(Kleinhovia)植物の抽出物を有
効成分とする頭部用組成物は、上記の2つの作用点を合
わせ持った養毛料である。すなわち、この「養毛料」
は、漫然とした育毛効果をうたう一般的な養毛料用途と
は一線を画する用途を有するものである。
【0013】
【発明の実施の形態】以下、本発明の実施の形態につい
て説明する。はじめに、本発明の「養毛」とは、発毛促
進、脱毛防止、さらにふけ、痒み抑制作用等ならびに、
乳頭細胞あるいは毛包上皮系細胞の活性化作用を包含す
る概念で使用する。
て説明する。はじめに、本発明の「養毛」とは、発毛促
進、脱毛防止、さらにふけ、痒み抑制作用等ならびに、
乳頭細胞あるいは毛包上皮系細胞の活性化作用を包含す
る概念で使用する。
【0014】本発明の頭部用組成物は、アオギリ科(St
erculiaceae )フウセンアカメガシワ属(Kleinhovia)
植物の抽出物を有効成分とする毛髪関連薬剤である。
erculiaceae )フウセンアカメガシワ属(Kleinhovia)
植物の抽出物を有効成分とする毛髪関連薬剤である。
【0015】本発明に用いられるアオギリ科(Sterculi
aceae )フウセンアカメガシワ属(Kleinhovia)植物の
抽出物としては、フウセンアカメガシワ(学名:Kleinh
oviahospitaまたはKleinhovia hospida)が好適であ
る。これは、東南アジアを中心に分布する植物であり、
タイ国ではハッサクーン(HASKHUN )、中国では鷓鴣麻
(シャコマ)と呼ばれている。これらを総じて、日本で
はフウセンアカメガシワと呼んでいる。
aceae )フウセンアカメガシワ属(Kleinhovia)植物の
抽出物としては、フウセンアカメガシワ(学名:Kleinh
oviahospitaまたはKleinhovia hospida)が好適であ
る。これは、東南アジアを中心に分布する植物であり、
タイ国ではハッサクーン(HASKHUN )、中国では鷓鴣麻
(シャコマ)と呼ばれている。これらを総じて、日本で
はフウセンアカメガシワと呼んでいる。
【0016】アオギリ科(Sterculiaceae )フウセンア
カメガシワ属(Kleinhovia)植物の抽出物に関する報告
はこれまでにないばかりか、頭部用組成物への応用は全
くない。
カメガシワ属(Kleinhovia)植物の抽出物に関する報告
はこれまでにないばかりか、頭部用組成物への応用は全
くない。
【0017】本発明に用いられる抽出物は、上記植物の
葉、地下茎を含む茎、根、果実、樹皮等、植物全草を抽
出溶媒と共に浸漬または加熱還流した後、濾過し、濃縮
して得られる。本発明に用いられる抽出溶媒は、通常抽
出に用いられる溶媒であれば何でもよく、特に熱水やメ
タノール、エタノール、イソプロパノール、n−ブタノ
ール等の低級アルコールあるいはプロピレングリコー
ル、1,3−ブチレングリコール等の多価アルコール、
あるいはこれらの含水アルコール類、アセトン、酢酸エ
チルエステル等の有機溶媒を単独あるいは組み合わせて
用いることができる。低級アルコールを使用する場合、
得られる抽出液をそのまま用いることもできるが、抽出
溶媒を留去し、必要により乾燥した後、本発明の頭部用
組成物に含ませてもよい。
葉、地下茎を含む茎、根、果実、樹皮等、植物全草を抽
出溶媒と共に浸漬または加熱還流した後、濾過し、濃縮
して得られる。本発明に用いられる抽出溶媒は、通常抽
出に用いられる溶媒であれば何でもよく、特に熱水やメ
タノール、エタノール、イソプロパノール、n−ブタノ
ール等の低級アルコールあるいはプロピレングリコー
ル、1,3−ブチレングリコール等の多価アルコール、
あるいはこれらの含水アルコール類、アセトン、酢酸エ
チルエステル等の有機溶媒を単独あるいは組み合わせて
用いることができる。低級アルコールを使用する場合、
得られる抽出液をそのまま用いることもできるが、抽出
溶媒を留去し、必要により乾燥した後、本発明の頭部用
組成物に含ませてもよい。
【0018】本発明におけるアオギリ科(Sterculiacea
e )フウセンアカメガシワ属(Kleinhovia)植物の抽出
物の配合量は、組成物の形態または施用方法に応じて変
動しうるので特定されるものでない。しかし、後述の実
施例に記載の方法に従って得られる抽出物を使用する場
合、組成物全重量中、一般に抽出物(乾燥物基準)が0.
0005〜20.0重量%、好ましくは 0.001〜10.0重量%であ
る。0.0005重量%未満であると、本発明でいう効果が十
分に発揮されず、20.0重量%を超えると製剤化が困難で
あるので好ましくない。また、10.0重量%以上配合して
もさほど大きな効果の向上は得られない。
e )フウセンアカメガシワ属(Kleinhovia)植物の抽出
物の配合量は、組成物の形態または施用方法に応じて変
動しうるので特定されるものでない。しかし、後述の実
施例に記載の方法に従って得られる抽出物を使用する場
合、組成物全重量中、一般に抽出物(乾燥物基準)が0.
0005〜20.0重量%、好ましくは 0.001〜10.0重量%であ
る。0.0005重量%未満であると、本発明でいう効果が十
分に発揮されず、20.0重量%を超えると製剤化が困難で
あるので好ましくない。また、10.0重量%以上配合して
もさほど大きな効果の向上は得られない。
【0019】本発明の頭部用組成物には、上記必須成分
以外に、通常化粧品、医薬部外品や医薬品等の頭部用組
成物に用いられる成分、例えば、油性成分、保湿剤、増
粘剤、金属封鎖剤、その他の活性成分、酸化防止剤、紫
外線吸収剤、界面活性剤、アルコール類、粉末成分、色
剤、水性成分、水、各種皮膚栄養剤等を必要に応じて適
宜配合することができる。
以外に、通常化粧品、医薬部外品や医薬品等の頭部用組
成物に用いられる成分、例えば、油性成分、保湿剤、増
粘剤、金属封鎖剤、その他の活性成分、酸化防止剤、紫
外線吸収剤、界面活性剤、アルコール類、粉末成分、色
剤、水性成分、水、各種皮膚栄養剤等を必要に応じて適
宜配合することができる。
【0020】具体的には、油分として、例えば高級脂肪
酸、固形パラフィン、流動パラフィン、シリコーン油、
スクワラン等;保湿剤として、例えばヒアルロン酸、プ
ロピレングリコール、マルチトール、アテロコラーゲ
ン、乳酸ナトリウム等;増粘剤、マルメロ粘質物、カル
ボキシビニ−ルポリマー、キサンタンガム等;金属封鎖
剤として、例えばエデト酸二ナトリウム、エデト酸三ナ
トリウム、クエン酸ナトリウム、ポリリン酸ナトリウ
ム、メタリン酸ナトリウム、グルコン酸;その他の活性
成分として、例えばカフェイン、タンニン、ベラパミ
ル、トラネキサム酸およびその誘導体、甘草抽出物、グ
ラブリジン、火棘の果実の熱水抽出物、各種生薬、酢酸
トコフェロール、グリチルリチン酸およびその誘導体ま
たはその塩等の薬剤、ビタミンC、アスコルビン酸リン
酸マグネシウム、アスコルビン酸グルコシド、アルブチ
ン、コウジ酸等の他の美白剤、グルコース、フルクトー
ス、マンノース、ショ糖、トレハロース等の糖類などが
挙げられる。
酸、固形パラフィン、流動パラフィン、シリコーン油、
スクワラン等;保湿剤として、例えばヒアルロン酸、プ
ロピレングリコール、マルチトール、アテロコラーゲ
ン、乳酸ナトリウム等;増粘剤、マルメロ粘質物、カル
ボキシビニ−ルポリマー、キサンタンガム等;金属封鎖
剤として、例えばエデト酸二ナトリウム、エデト酸三ナ
トリウム、クエン酸ナトリウム、ポリリン酸ナトリウ
ム、メタリン酸ナトリウム、グルコン酸;その他の活性
成分として、例えばカフェイン、タンニン、ベラパミ
ル、トラネキサム酸およびその誘導体、甘草抽出物、グ
ラブリジン、火棘の果実の熱水抽出物、各種生薬、酢酸
トコフェロール、グリチルリチン酸およびその誘導体ま
たはその塩等の薬剤、ビタミンC、アスコルビン酸リン
酸マグネシウム、アスコルビン酸グルコシド、アルブチ
ン、コウジ酸等の他の美白剤、グルコース、フルクトー
ス、マンノース、ショ糖、トレハロース等の糖類などが
挙げられる。
【0021】また、養毛料の補助成分として、これらの
製剤を調製する上で上記油性成分、保湿剤、増粘剤に加
えて、その他の活性成分として、例えばモノオレイン酸
グリセリル等の油分、ニコチン酸アミド、ニコチン酸ベ
ンジル、ビタミンE アセテート、センブリ抽出物、塩化
カルプロニウム、センブリエキス、アセチルコリン誘導
体等の血管拡張剤、セリン、メチオニン等のアミノ酸
類、ビタミンB6、ビタミンE 及びその誘導体、ビオチン
等のビタミン類、パントテン酸及びその誘導体グリチル
レチン酸及びその誘導体、ニコチン酸、ニコチン酸メチ
ル、ニコチン酸トコフェロールなどのニコチン酸エステ
ル類、セファランチン等の皮膚機能亢進剤、エストラジ
オ−ル等の女性ホルモン剤等を同時に配合してもよい。
さらに、通常、養毛料に用いられる添加剤、例えばヒノ
キチオ−ル、ヘキサクロロフェン、ベンザルコニウムク
ロリド、セチルピリジニウムクロリド、ウンデシレン
酸、トリクロロカルバニリドおよびビチオノール等の抗
菌剤、メントール等の清涼剤、サリチル酸、亜鉛および
その誘導体、乳酸およびそのアルキルエステルなどの薬
剤、クエン酸等の有機酸類、アルギニン等のアミノ酸類
等が本発明の効果を損なわない範囲で適宜配合すること
ができる。
製剤を調製する上で上記油性成分、保湿剤、増粘剤に加
えて、その他の活性成分として、例えばモノオレイン酸
グリセリル等の油分、ニコチン酸アミド、ニコチン酸ベ
ンジル、ビタミンE アセテート、センブリ抽出物、塩化
カルプロニウム、センブリエキス、アセチルコリン誘導
体等の血管拡張剤、セリン、メチオニン等のアミノ酸
類、ビタミンB6、ビタミンE 及びその誘導体、ビオチン
等のビタミン類、パントテン酸及びその誘導体グリチル
レチン酸及びその誘導体、ニコチン酸、ニコチン酸メチ
ル、ニコチン酸トコフェロールなどのニコチン酸エステ
ル類、セファランチン等の皮膚機能亢進剤、エストラジ
オ−ル等の女性ホルモン剤等を同時に配合してもよい。
さらに、通常、養毛料に用いられる添加剤、例えばヒノ
キチオ−ル、ヘキサクロロフェン、ベンザルコニウムク
ロリド、セチルピリジニウムクロリド、ウンデシレン
酸、トリクロロカルバニリドおよびビチオノール等の抗
菌剤、メントール等の清涼剤、サリチル酸、亜鉛および
その誘導体、乳酸およびそのアルキルエステルなどの薬
剤、クエン酸等の有機酸類、アルギニン等のアミノ酸類
等が本発明の効果を損なわない範囲で適宜配合すること
ができる。
【0022】本発明の頭部用組成物の性状は、例えばト
ニック、ヘアークリーム、ムース、シャンプー、リンス
等の剤型をとることもできる。
ニック、ヘアークリーム、ムース、シャンプー、リンス
等の剤型をとることもできる。
【0023】
【実施例】次に実施例をあげて本発明をさらに具体的に
説明するが、本発明はこれらにより限定されるものでな
い。なお、配合量は特記しない限り重量%である。ま
ず、発毛効果、育毛効果、培養毛乳頭細胞を用い
た細胞増殖、ヒト培養毛包上皮系細胞活性化に関する
試験方法とその結果について順に説明する。
説明するが、本発明はこれらにより限定されるものでな
い。なお、配合量は特記しない限り重量%である。ま
ず、発毛効果、育毛効果、培養毛乳頭細胞を用い
た細胞増殖、ヒト培養毛包上皮系細胞活性化に関する
試験方法とその結果について順に説明する。
【0024】発毛試験 1.抽出物の調製(調製例1) 市販のフウセンアカメガシワ(乾燥物)484gを、
5.0リットルのメタノールに室温で5日間浸漬した。
抽出液から溶媒を留去し、次いで乾燥してフウセンアカ
メガシワのメタノールエキス乾燥物18.4gを得た。
5.0リットルのメタノールに室温で5日間浸漬した。
抽出液から溶媒を留去し、次いで乾燥してフウセンアカ
メガシワのメタノールエキス乾燥物18.4gを得た。
【0025】2.試料の調製 上記で得られたメタノールエキス乾燥物 0.5%、1%、
2%を、それぞれ75%エタノール溶液に溶解して試料1
〜3を得た。
2%を、それぞれ75%エタノール溶液に溶解して試料1
〜3を得た。
【0026】3.発毛試験方法及びその結果 対照試料として 0.1%クロトン油の75%エタール溶液を
用い、本発明の液状の試料1〜3について下記の発毛試
験行った。実験動物として毛周期の休止期にあるC3H
/HeNCrJマウスを使用し、小川らの方法(ノーマ
ルアンドアブノーマル、エピダーマル、ディファレンシ
エ−ション[Normal and Abnormal Epidermal Differen
tiation ]、M .Seiji およびI .A .Bernstein 編
集、第159 〜170 ページ、1982年、東大出版)により行
なった。
用い、本発明の液状の試料1〜3について下記の発毛試
験行った。実験動物として毛周期の休止期にあるC3H
/HeNCrJマウスを使用し、小川らの方法(ノーマ
ルアンドアブノーマル、エピダーマル、ディファレンシ
エ−ション[Normal and Abnormal Epidermal Differen
tiation ]、M .Seiji およびI .A .Bernstein 編
集、第159 〜170 ページ、1982年、東大出版)により行
なった。
【0027】すなわち、マウスを1群10匹とし、それぞ
れ被検試料1〜3と対照試料用の4群に分け、バリカン
およびシェ−バーでマウスの背部を剃毛し、それぞれの
試料を1日1回、 0.1mlずつ塗布した。18日、24日後に
毛の再生面積を測定した。結果は再生面積の平均値で表
した。その結果を表1に示す。
れ被検試料1〜3と対照試料用の4群に分け、バリカン
およびシェ−バーでマウスの背部を剃毛し、それぞれの
試料を1日1回、 0.1mlずつ塗布した。18日、24日後に
毛の再生面積を測定した。結果は再生面積の平均値で表
した。その結果を表1に示す。
【0028】
【表1】 ─────────────────────────────────── 試 料 毛再生面積(%) 18日後 24日後 ─────────────────────────────────── 試料1(フウセンアカメガシワ抽出物 0.5%) 75 97 試料2(フウセンアカメガシワ抽出物 1%) 86 100 試料3(フウセンアカメガシワ抽出物 2%) 90 100 対照試料 37 66 ───────────────────────────────────
【0029】表1より、本発明のフウセンアカメガシワ
抽出物は、マウスの発毛試験において優れた発毛効果を
示した。
抽出物は、マウスの発毛試験において優れた発毛効果を
示した。
【0030】育毛試験(トリコグラム試験) 1.抽出物の調製 上記発毛試験例で調製した調製例1の方法で抽出物を調
製した。
製した。
【0031】2.試料の調製 上記方法で得られたメタノールエキス乾燥物 0.5、1お
よび2%を、70%エタノール溶液(90%)、オレイン酸
ナトリウム(0.01%)、ドデシルベンゼンスルホン酸
(0.49%)、硬化ヒマシ油エチレンオキシド(40モル)
付加物( 0.5%)及びイオン交換水(8%)と混合撹拌
して溶解させた。さらにイオン交換水(残余)を添加混
合して、液状の試料4、5および6を得た。
よび2%を、70%エタノール溶液(90%)、オレイン酸
ナトリウム(0.01%)、ドデシルベンゼンスルホン酸
(0.49%)、硬化ヒマシ油エチレンオキシド(40モル)
付加物( 0.5%)及びイオン交換水(8%)と混合撹拌
して溶解させた。さらにイオン交換水(残余)を添加混
合して、液状の試料4、5および6を得た。
【0032】3.育毛試験方法及びその結果 本発明の頭部用組成物の脱毛防止、発毛効果等の養毛作
用を調べるために、ヒトに対して、以下の方法でトリコ
グラム試験を実施した。試料の使用前と使用後の抜去毛
髪の毛根を顕徴鏡下で観察し、毛根の形態から休止期毛
根数を計数し、その割合の増減によって養毛作用を比較
した。尚、休止期毛根とは成長の止まった毛の毛根であ
り、脱毛を訴える人は正常な人よりもこの休止期毛根の
割合が多いことが認められている。
用を調べるために、ヒトに対して、以下の方法でトリコ
グラム試験を実施した。試料の使用前と使用後の抜去毛
髪の毛根を顕徴鏡下で観察し、毛根の形態から休止期毛
根数を計数し、その割合の増減によって養毛作用を比較
した。尚、休止期毛根とは成長の止まった毛の毛根であ
り、脱毛を訴える人は正常な人よりもこの休止期毛根の
割合が多いことが認められている。
【0033】被験試料及び対照試料の各試料をそれぞれ
男性被験者10名の頭皮に1日2回、1回2mlずつ6ケ月
間連続して塗布し、塗布直前および6ケ月間塗布終了直
後に被験者1名につき 100本ずつ毛髪を抜去し、それぞ
れの毛根を調ベ、実使用テストを行った。結果を表2に
示す。
男性被験者10名の頭皮に1日2回、1回2mlずつ6ケ月
間連続して塗布し、塗布直前および6ケ月間塗布終了直
後に被験者1名につき 100本ずつ毛髪を抜去し、それぞ
れの毛根を調ベ、実使用テストを行った。結果を表2に
示す。
【0034】
【表2】 ──────────────────────────────────── 試 料 休止期毛根の割合 養毛効果 ─────────────────── の評価 20%以上減少 ±20% 20%以上増加 ──────────────────────────────────── 試料4(0.5%) 58 32 10 有効 試料5( 1%) 70 28 2 著効 試料6( 2%) 80 20 0 著効 対照試料 9 33 58 無効 ────────────────────────────────────
【0035】表2より明らかなように、本発明のフウセ
ンアカメガシワ抽出物は、ヒトのトリコグラム試験にお
いて有意な育毛効果を示した。
ンアカメガシワ抽出物は、ヒトのトリコグラム試験にお
いて有意な育毛効果を示した。
【0036】培養毛乳頭細胞を用いた細胞増殖試験 3.抽出物の調製 上記抽出物の調製は、上記発毛試験例で調製した調製例
1の方法で抽出物を調製した。さらに、メタノールエキ
ス乾燥物をDMSOで0.2重量%の溶液に調製して、
これを無血清培地(MEM)に希釈してフウセンアカメ
ガシワ抽出物をそれぞれ1.0×10-9〜1.0×10
-6%を含む溶液を調製した(調製例2〜5)。
1の方法で抽出物を調製した。さらに、メタノールエキ
ス乾燥物をDMSOで0.2重量%の溶液に調製して、
これを無血清培地(MEM)に希釈してフウセンアカメ
ガシワ抽出物をそれぞれ1.0×10-9〜1.0×10
-6%を含む溶液を調製した(調製例2〜5)。
【0037】2.毛乳頭細胞の採取 整形外科手術によって摘出された32歳男性の後頭部皮
膚(5mm×1.5cm)から、脂肪組織を分離して、そこ
から毛包を摘出し、毛球部より毛乳頭細胞を単離した。
単離した毛乳頭細胞を20%FBSを含むMEMで2週
間培養した〔37℃,5%CO2 〕。毛乳頭細胞から細
胞のアウトグロースが確認された時点で、培地を10%
FBSを含むMEM(MEM+10%FBS)に交換し
て同様の条件で培養した。以降、1週間に2回の割合で
培養液(MEM+10%FBS)を交換して細胞を維持
した。培養開始より4週間後に継代培養を行い、以後細
胞が十分増殖した時点で再度継代して、この継代を繰り
返した。
膚(5mm×1.5cm)から、脂肪組織を分離して、そこ
から毛包を摘出し、毛球部より毛乳頭細胞を単離した。
単離した毛乳頭細胞を20%FBSを含むMEMで2週
間培養した〔37℃,5%CO2 〕。毛乳頭細胞から細
胞のアウトグロースが確認された時点で、培地を10%
FBSを含むMEM(MEM+10%FBS)に交換し
て同様の条件で培養した。以降、1週間に2回の割合で
培養液(MEM+10%FBS)を交換して細胞を維持
した。培養開始より4週間後に継代培養を行い、以後細
胞が十分増殖した時点で再度継代して、この継代を繰り
返した。
【0038】3.試験方法 継代数3代目の毛乳頭細胞を用い、MEM+10%FB
S培地で,10000及び細胞/mlの細胞密度の細胞懸
濁液を調製した。この細胞懸濁液を200μlずつ、9
6ウエルのマイクロプレートに分注し(つまり,200
0細胞/ウエル)、37℃,5%CO2 で3日間インキ
ュベートを行い細胞を付着させた。培養開始72時間
後、対照は培養液を無血清のMEMに交換した。被検体
系は対象物質であるフウセンアカメガシワ抽出物を含む
無血清培地(MEM)(調製例2〜5)に交換した(各
試料7〜10)。対照および被検体系をいずれもさらに
4日間培養した。
S培地で,10000及び細胞/mlの細胞密度の細胞懸
濁液を調製した。この細胞懸濁液を200μlずつ、9
6ウエルのマイクロプレートに分注し(つまり,200
0細胞/ウエル)、37℃,5%CO2 で3日間インキ
ュベートを行い細胞を付着させた。培養開始72時間
後、対照は培養液を無血清のMEMに交換した。被検体
系は対象物質であるフウセンアカメガシワ抽出物を含む
無血清培地(MEM)(調製例2〜5)に交換した(各
試料7〜10)。対照および被検体系をいずれもさらに
4日間培養した。
【0039】培養終了後、それぞれの系にアラマーブル
ー(alamar blue)(BIOSOURSE社製)を20μl 添加後、
さらに8時間培養し、マイクロプレートリーダー(Micr
o plate reader:Bio RAD社製) で570nmと595nmの
吸光度を測定した。添付の使用説明書に従って、吸光度
の測定結果によりアラマーブルーの還元率を算出した。
この還元率は細胞数と相関することから対照および被検
体系での細胞増殖率を比較した。
ー(alamar blue)(BIOSOURSE社製)を20μl 添加後、
さらに8時間培養し、マイクロプレートリーダー(Micr
o plate reader:Bio RAD社製) で570nmと595nmの
吸光度を測定した。添付の使用説明書に従って、吸光度
の測定結果によりアラマーブルーの還元率を算出した。
この還元率は細胞数と相関することから対照および被検
体系での細胞増殖率を比較した。
【0040】4.結果:測定したフウセンアカメガシワ
抽出物(試料7〜10)における、上記細胞増殖促進指
標を下記第3表に示す。
抽出物(試料7〜10)における、上記細胞増殖促進指
標を下記第3表に示す。
【0041】
【表3】 ──────────────────────────────────── 試 料 増殖促進率(%) 効果 ──────────────────────────────────── 試料7 (1.0×10-9%) 4.7±3.6* あり 試料8 (1.0×10-8%) 19.0±6.0** あり 試料9 (1.0×10-7%) 13.3±5.5** あり 試料10(1.0×10-6%) 6.2±3.3 なし 対照試料 2.1±3.1 なし ──────────────────────────────────── *;有意差p<0.05 **;有意差p<0.01
【0042】表3より明らかなように、本発明のフウセ
ンアカメガシワ抽出物は、培養毛乳頭細胞活性化試験に
おいて有意な毛乳頭細胞増殖促進効果を示した。
ンアカメガシワ抽出物は、培養毛乳頭細胞活性化試験に
おいて有意な毛乳頭細胞増殖促進効果を示した。
【0043】ヒト培養毛包上皮系細胞活性化試験 1.ヒト培養毛包上皮系細胞の採取 外科手術の副産物として得られたヒト男性頭皮から毛周
期における成長期の毛包を実体顕微鏡下で機械的に採取
した。この成長期の毛包を1000 U/ml dispase・0.2 %
コラゲナーゼを含むダルベッコの改変MEM(DME
M)で30分間、37℃で処理し、注射針の先を用いて
dermal sheath やdermal papilla、毛球部上皮組織を除
去して、0.05%トリプシン・0.02%EDTAを含むリン
酸緩衝液〔PBS(−):(−)とはカルシウムイオン
やマグネシウムイオンを含まない意味である〕で5分
間,37℃で処理した。次にコラーゲン(Type I)コー
ティングした培養皿に毛包を静置し、外殖片培養を行っ
た。なおこの際の培地は、無血清培地〔Keratinocyte G
rowth Medium(KGM)〕を用いた(Keratinocyte Ser
um Free Mediumを用いることもできる)。
期における成長期の毛包を実体顕微鏡下で機械的に採取
した。この成長期の毛包を1000 U/ml dispase・0.2 %
コラゲナーゼを含むダルベッコの改変MEM(DME
M)で30分間、37℃で処理し、注射針の先を用いて
dermal sheath やdermal papilla、毛球部上皮組織を除
去して、0.05%トリプシン・0.02%EDTAを含むリン
酸緩衝液〔PBS(−):(−)とはカルシウムイオン
やマグネシウムイオンを含まない意味である〕で5分
間,37℃で処理した。次にコラーゲン(Type I)コー
ティングした培養皿に毛包を静置し、外殖片培養を行っ
た。なおこの際の培地は、無血清培地〔Keratinocyte G
rowth Medium(KGM)〕を用いた(Keratinocyte Ser
um Free Mediumを用いることもできる)。
【0044】この培養の4〜5日後に、毛包の培養皿へ
の接着及び細胞の増殖が確認できた時点で培地を交換
し、これ以降2日おきに培地交換を行った。このように
して増殖させた細胞を、0.05wt%トリプシン-0.02 %E
DTAで37℃で5分間処理した後、等量の0.1 %トリ
プシンインヒビターで反応を停止させ、遠心処理(800×
g,5 分間) を施して細胞を回収した。
の接着及び細胞の増殖が確認できた時点で培地を交換
し、これ以降2日おきに培地交換を行った。このように
して増殖させた細胞を、0.05wt%トリプシン-0.02 %E
DTAで37℃で5分間処理した後、等量の0.1 %トリ
プシンインヒビターで反応を停止させ、遠心処理(800×
g,5 分間) を施して細胞を回収した。
【0045】次に、細胞を上記の無血清培地に浮遊させ
て、5000 cells/cm2 の密度でコラーゲンコーティング
(Type I)した培養皿に播種し、細胞がsubconfluentに
なるまで2日おきに培地交換を行い、再び0.05wt%トリ
プシン-0.02 %EDTAで37℃で5分間処理した後、
等量の0.1 %トリプシンインヒビターで反応を停止さ
せ、遠心処理(800×g,5 分間) を施して、これにより得
られたヒト毛包上皮系細胞に細胞凍結液(セルバンカ
ー:ダイヤトロン製)を添加し、1.0×106 cell/m
l の濃度に調整して、各凍結チューブに1.0×106
cellずつ入れ、これを凍結保存した。なお、これらの細
胞数は、血球算定板で算出した。
て、5000 cells/cm2 の密度でコラーゲンコーティング
(Type I)した培養皿に播種し、細胞がsubconfluentに
なるまで2日おきに培地交換を行い、再び0.05wt%トリ
プシン-0.02 %EDTAで37℃で5分間処理した後、
等量の0.1 %トリプシンインヒビターで反応を停止さ
せ、遠心処理(800×g,5 分間) を施して、これにより得
られたヒト毛包上皮系細胞に細胞凍結液(セルバンカ
ー:ダイヤトロン製)を添加し、1.0×106 cell/m
l の濃度に調整して、各凍結チューブに1.0×106
cellずつ入れ、これを凍結保存した。なお、これらの細
胞数は、血球算定板で算出した。
【0046】上記工程により得た毛包上皮系細胞の線維
芽細胞混入率(FB混入率)を測定(3000倍,5視
野)し、その結果FB混入率が3%以上のものは、アッ
セイの対象から除外した。そして、この毛包上皮系細胞
を培養フラスコ中に播種後、これを0.05%トリプシ
ンと0.02%EDTAで処理した後、0.1%トリプ
シンインヒビターで反応を停止後、系を1500rpm で
5分間遠心処理を施し、上清を除去し、残渣にKGM培
地20mlを添加して、細胞懸濁液を調製した。
芽細胞混入率(FB混入率)を測定(3000倍,5視
野)し、その結果FB混入率が3%以上のものは、アッ
セイの対象から除外した。そして、この毛包上皮系細胞
を培養フラスコ中に播種後、これを0.05%トリプシ
ンと0.02%EDTAで処理した後、0.1%トリプ
シンインヒビターで反応を停止後、系を1500rpm で
5分間遠心処理を施し、上清を除去し、残渣にKGM培
地20mlを添加して、細胞懸濁液を調製した。
【0047】0.2ml/well の割合で、96well-plate
(I型コラーゲンコーティングプレート:ファルコン社
製)に播種し(1.0×104 cell/well )、細胞がウ
エルの底に沈むまで約20分間室温下で放置した。その
後、37℃,5%CO2 で1日間培養を行い、所望する
ヒト毛包上皮系培養細胞を得た。
(I型コラーゲンコーティングプレート:ファルコン社
製)に播種し(1.0×104 cell/well )、細胞がウ
エルの底に沈むまで約20分間室温下で放置した。その
後、37℃,5%CO2 で1日間培養を行い、所望する
ヒト毛包上皮系培養細胞を得た。
【0048】上記操作により得られた毛包に、0.25
%トリプシン含有PBS(−)を5ml添加して、細胞懸
濁液を37℃で5分間インキュベートした。インキュベ
ート終了後、5mlの等量の牛胎児血清(FBS)とHa
m' s F12培地を添加して、細胞懸濁液をセルスト
レーナー(100 μm Nalgene 社製)で濾過後、50ml遠
沈管に入れて、この細胞懸濁液に遠心処理を施した(4
℃,1500rpm ,5分間)。この系から上清を除去し
て、残渣として所望する毛包上皮系細胞を得た。
%トリプシン含有PBS(−)を5ml添加して、細胞懸
濁液を37℃で5分間インキュベートした。インキュベ
ート終了後、5mlの等量の牛胎児血清(FBS)とHa
m' s F12培地を添加して、細胞懸濁液をセルスト
レーナー(100 μm Nalgene 社製)で濾過後、50ml遠
沈管に入れて、この細胞懸濁液に遠心処理を施した(4
℃,1500rpm ,5分間)。この系から上清を除去し
て、残渣として所望する毛包上皮系細胞を得た。
【0049】2.毛包上皮系細胞の前培養 系に混入している線維芽細胞を可能な限り系から除去す
るために、上記工程により得られた毛包上皮系細胞の前
培養を行った。以下、その手順について説明する。37
℃の恒温槽で、上記工程により得た凍結細胞を融解し
た。次いでFAD培地〔Ham' s F12培地(後
述)とMEN培地を容量比で3対1で混合したものに、
インシュリン(5.0μg/ml),ハイドロコルチゾン(0.45
μg/ml),エピダーマルグロウスファクター(EGF)(10.0
ng/ml),コレラトキシン(10-9M)及びウシ胎児血清(1
0 %) を含有させた培地、以下同様である〕を10ml添
加し、細胞溶液を希釈して系に遠心処理を施した(10
℃以下,1500rpm ,5分間)。遠心後、上清を除去
し、系にFAD培地を10ml添加して、細胞塊が認めら
れなくなるまでピペッティングを繰り返した。
るために、上記工程により得られた毛包上皮系細胞の前
培養を行った。以下、その手順について説明する。37
℃の恒温槽で、上記工程により得た凍結細胞を融解し
た。次いでFAD培地〔Ham' s F12培地(後
述)とMEN培地を容量比で3対1で混合したものに、
インシュリン(5.0μg/ml),ハイドロコルチゾン(0.45
μg/ml),エピダーマルグロウスファクター(EGF)(10.0
ng/ml),コレラトキシン(10-9M)及びウシ胎児血清(1
0 %) を含有させた培地、以下同様である〕を10ml添
加し、細胞溶液を希釈して系に遠心処理を施した(10
℃以下,1500rpm ,5分間)。遠心後、上清を除去
し、系にFAD培地を10ml添加して、細胞塊が認めら
れなくなるまでピペッティングを繰り返した。
【0050】得られた細胞数を血球算定板で算出し、F
AD培地で2.5×105 cell/mlの濃度になるように
調製した。I型コラーゲンでコーティングした75cm3
のフラスコに細胞を播種して、これを37℃,5%CO
2 で一晩培養した。培養後、系をPBS(−)10mlで
2回洗浄し、0.25%トリプシン含有PBS(−)を
2ml添加して、これを37℃,5%CO2 で4分間イン
キュベートした。次に、系に牛胎児血清(FBS)を2
ml添加して、1回軽くゆすった後で上清を除去して、系
に混入している線維芽細胞を除去した。
AD培地で2.5×105 cell/mlの濃度になるように
調製した。I型コラーゲンでコーティングした75cm3
のフラスコに細胞を播種して、これを37℃,5%CO
2 で一晩培養した。培養後、系をPBS(−)10mlで
2回洗浄し、0.25%トリプシン含有PBS(−)を
2ml添加して、これを37℃,5%CO2 で4分間イン
キュベートした。次に、系に牛胎児血清(FBS)を2
ml添加して、1回軽くゆすった後で上清を除去して、系
に混入している線維芽細胞を除去した。
【0051】さらに、系にKGM培地〔表皮角化細胞基
礎培地(Keratinocyto growth medium):Keratinocyto b
asal medium (KBM培地(改変MCDB153培地
(クローネティックス社製)))に,ウシ脳下垂体エキ
ス(BPE)(0.4vol%),インシュリン(0.5μm/ml),ハイドロ
コルチゾン(0.5μm/ml),h-EGF(0.1 ng/ml)を添加した培
地、以下同様である〕を15ml添加し、37℃,5%C
O2 で3日間培養した。上記工程により得た毛包上皮系
細胞を播種した培養フラスコの線維芽細胞混入率(FB
混入率)を測定(3000倍,5視野)し、その結果F
B混入率が3%以上のものは、アッセイの対象から除外
した。系をPBS(−)10mlで2回洗浄し、0.25
%トリプシン含有PBS(−)を2ml添加して、これを
37℃で3分間インキュベートした。次いで上皮系細胞
と線維芽細胞とのトリプシンに対する反応性の違いを利
用して,系から線維芽細胞を除去するために、トリプシ
ンを除去し、再び0.25%トリプシン含有PBS
(−)を2ml添加して、37℃,20rpm で5分間振盪
した。
礎培地(Keratinocyto growth medium):Keratinocyto b
asal medium (KBM培地(改変MCDB153培地
(クローネティックス社製)))に,ウシ脳下垂体エキ
ス(BPE)(0.4vol%),インシュリン(0.5μm/ml),ハイドロ
コルチゾン(0.5μm/ml),h-EGF(0.1 ng/ml)を添加した培
地、以下同様である〕を15ml添加し、37℃,5%C
O2 で3日間培養した。上記工程により得た毛包上皮系
細胞を播種した培養フラスコの線維芽細胞混入率(FB
混入率)を測定(3000倍,5視野)し、その結果F
B混入率が3%以上のものは、アッセイの対象から除外
した。系をPBS(−)10mlで2回洗浄し、0.25
%トリプシン含有PBS(−)を2ml添加して、これを
37℃で3分間インキュベートした。次いで上皮系細胞
と線維芽細胞とのトリプシンに対する反応性の違いを利
用して,系から線維芽細胞を除去するために、トリプシ
ンを除去し、再び0.25%トリプシン含有PBS
(−)を2ml添加して、37℃,20rpm で5分間振盪
した。
【0052】次いで、細胞のはがれを顕微鏡下で確認し
た後、10%FBS含有DMEM培地を10ml添加し
て、50ml遠心チューブ中でピペッティングを行い、系
を1500rpm で5分間遠心処理を施した。上清を除去
し、KGM培地20mlを添加して、細胞塊がなくなるま
でピペッティングを行った。
た後、10%FBS含有DMEM培地を10ml添加し
て、50ml遠心チューブ中でピペッティングを行い、系
を1500rpm で5分間遠心処理を施した。上清を除去
し、KGM培地20mlを添加して、細胞塊がなくなるま
でピペッティングを行った。
【0053】懸濁液をセルストレーナー(100 μm Nalg
ene 社製)で濾過後、50ml遠沈管に入れて、懸濁液中
の生細胞数を血球算定板で算出し、系にKGM培地を添
加して、系の中の細胞濃度が5.0×104 cell/ml に
なるように調整した。次いで、0.2ml/well の割合
で、96well-plate(I型コラーゲンコーティングプレ
ート:ファルコン社製)に播種し(1.0×104 cell
/well )、細胞がウエルの底に沈むまで約20分間室温
下で放置した。その後、37℃,5%CO2 で1日間培
養を行い、所望するヒト毛包上皮系培養細胞を得た。
ene 社製)で濾過後、50ml遠沈管に入れて、懸濁液中
の生細胞数を血球算定板で算出し、系にKGM培地を添
加して、系の中の細胞濃度が5.0×104 cell/ml に
なるように調整した。次いで、0.2ml/well の割合
で、96well-plate(I型コラーゲンコーティングプレ
ート:ファルコン社製)に播種し(1.0×104 cell
/well )、細胞がウエルの底に沈むまで約20分間室温
下で放置した。その後、37℃,5%CO2 で1日間培
養を行い、所望するヒト毛包上皮系培養細胞を得た。
【0054】3.試験培地の調製 上記調製例1で得たフウセンアカメガシワ抽出物のメタ
ノールエキス乾燥物の0.2%DMSO溶液を、100
0倍量の改変MCDB153培地(クローネティックス
社製)に添加した〔抽出物濃度:2.0×10-4%(D
MSO 0.1%)〕。
ノールエキス乾燥物の0.2%DMSO溶液を、100
0倍量の改変MCDB153培地(クローネティックス
社製)に添加した〔抽出物濃度:2.0×10-4%(D
MSO 0.1%)〕。
【0055】これらの対象物質添加培地を0.1%DM
SO含有KBM培地に添加し、対象物質の濃度を1.0
×10-8〜1.0×10-5%(試料11〜14)になる
ように希釈した。同様に対象物質添加培地を含まない対
照試料を調製した。
SO含有KBM培地に添加し、対象物質の濃度を1.0
×10-8〜1.0×10-5%(試料11〜14)になる
ように希釈した。同様に対象物質添加培地を含まない対
照試料を調製した。
【0056】4.対象物質培地交換 上記A,Bにおいてヒト毛包上皮系培養細胞及びラット
毛包上皮系培養細胞を調製した96well-plate中のKG
M培地を上記Cにおいて調製した、対象物質添加培地及
びコントロール培地(200μl/well)と交換して、交
換後37℃,5%CO2 で2日間培養した。
毛包上皮系培養細胞を調製した96well-plate中のKG
M培地を上記Cにおいて調製した、対象物質添加培地及
びコントロール培地(200μl/well)と交換して、交
換後37℃,5%CO2 で2日間培養した。
【0057】なお、この培地の交換はウエル内のKGM
培地を,底面に付着している細胞を傷つけないように留
意しつつアスピレーターで抜いて、その後速やかに対象
物質添加培地等をウエルの両端から添加することにより
行った。
培地を,底面に付着している細胞を傷つけないように留
意しつつアスピレーターで抜いて、その後速やかに対象
物質添加培地等をウエルの両端から添加することにより
行った。
【0058】5.細胞増殖の測定:アラマーブルー(ala
mar blue:アラマーバイオサイエンス社製) を培地量
(容量)に対して、1/10量を添加して、37℃(5
%CO2 )で6時間インキュベートした。インキュベー
ト後、マイクロプレートリーダー(Micro plate reade
r:Bio RAD社製) で570nmと595nmの吸光度を測定
した。添付の使用説明書に従って、吸光度の測定結果に
よりアラマーブルーの還元率を算出した。この還元率は
細胞数と相関することから対照および被検体系での細胞
増殖率を比較した。
mar blue:アラマーバイオサイエンス社製) を培地量
(容量)に対して、1/10量を添加して、37℃(5
%CO2 )で6時間インキュベートした。インキュベー
ト後、マイクロプレートリーダー(Micro plate reade
r:Bio RAD社製) で570nmと595nmの吸光度を測定
した。添付の使用説明書に従って、吸光度の測定結果に
よりアラマーブルーの還元率を算出した。この還元率は
細胞数と相関することから対照および被検体系での細胞
増殖率を比較した。
【0059】6.結果:測定したフウセンアカメガシワ
抽出物(試料11〜14)における、上記細胞増殖促進
指標を下記第4表に示す。
抽出物(試料11〜14)における、上記細胞増殖促進
指標を下記第4表に示す。
【0060】
【表4】 ──────────────────────────────────── 試 料 増殖促進率(%) 効果 ──────────────────────────────────── 試料11(1.0×10-8%) 5.0±6.5* あり 試料12(1.0×10-7%) 13.3±5.1** あり 試料13(1.0×10-6%) 15.7±3.0** あり 試料14(1.0×10-5%) 25.8±5.1** あり 対照試料 1 .2±2.7 なし ──────────────────────────────────── *;有意差p<0.05 **;有意差p<0.01
【0061】表4より明らかなように、本発明のフウセ
ンアカメガシワ抽出物は、ヒト培養毛包上皮系細胞活性
化試験において有意な毛包上皮系細胞増殖促進効果を示
した。
ンアカメガシワ抽出物は、ヒト培養毛包上皮系細胞活性
化試験において有意な毛包上皮系細胞増殖促進効果を示
した。
【0062】 実使用試験 本発明試料例15 ヘアートニック (1) フウセンアカメガシワ抽出物(調製例1) 1.0 (2) プロピレングリコール 5.0 (3) ヒアルロン酸ナトリウム 0.01 (4) 75%エタノール 残余
【0063】上記処方にて製造したヘアートニックにつ
いて実使用でフケ、発毛、脱毛等の症状に対する効果を
検討した。フケ、発毛、脱毛等の症状を呈する10名の
男性(年齢25才〜55才) に1日1〜2回、1〜3mlずつ
4ヵ月にわたって投与し、以下に述べる評価基準で、フ
ケ防止効果、発毛促進効果および脱毛防止効果を試験し
た。その結果を表3に示す。の結果を得た。表-1から明
らかなように、このヘアートニックは発毛促進並びにフ
ケ及び脱毛の防止に対して優れた効果を奏する。
いて実使用でフケ、発毛、脱毛等の症状に対する効果を
検討した。フケ、発毛、脱毛等の症状を呈する10名の
男性(年齢25才〜55才) に1日1〜2回、1〜3mlずつ
4ヵ月にわたって投与し、以下に述べる評価基準で、フ
ケ防止効果、発毛促進効果および脱毛防止効果を試験し
た。その結果を表3に示す。の結果を得た。表-1から明
らかなように、このヘアートニックは発毛促進並びにフ
ケ及び脱毛の防止に対して優れた効果を奏する。
【0064】評価基準 (1)フケ防止効果テスト 無効:治療にもかかわらず、何らの改善もみられないも
の。 有効:フケの発生が減少したもの。 著効:フケの発生が止まったもの。
の。 有効:フケの発生が減少したもの。 著効:フケの発生が止まったもの。
【0065】(2)発毛効果テスト 無効:治療にもかかわらず、何らの改善もみられないも
の。 有効:脱毛部の2/3以上に毛の新生が認められるも
の。 著効:脱毛部に毛が生えそろったもの。
の。 有効:脱毛部の2/3以上に毛の新生が認められるも
の。 著効:脱毛部に毛が生えそろったもの。
【0066】(3)脱毛効果テスト 無効:治療にもかかわらず、何らの改善もみられないも
の。 有効:脱毛の進行が減少したもの。 著効:脱毛が止まったもの。
の。 有効:脱毛の進行が減少したもの。 著効:脱毛が止まったもの。
【0067】
【表3】 ─────────────────────────────────── 被験者 年齢 フケ 発毛 脱毛 ─────────────────────────────────── 1 40 著効 有効 有効 2 31 著効 有効 有効 3 48 著効 有効 有効 4 38 有効 有効 無効 5 42 無効 有効 有効 6 28 有効 著効 著効 7 25 無効 有効 有効 8 55 有効 無効 有効 9 35 有効 有効 有効 10 30 無効 有効 著効 ───────────────────────────────────
【0068】表3から明らかなように、このヘアートニ
ックは、発毛促進、フケ防止および脱毛防止に対して優
れた効果を奏する。
ックは、発毛促進、フケ防止および脱毛防止に対して優
れた効果を奏する。
【0069】以下に、種々の剤型の本発明による頭部用
組成物の処方例を実施例として説明する。
組成物の処方例を実施例として説明する。
【0070】 実施例1 シャンプー ココイルメチルタウリンナトリウム 2.0 ポリオキシエチレン(8モル)オレイルアルコール 2.0 ラウリン酸ジエタノールアミド 4.0 エチレングリコール脂肪酸エステル 1.0 グリセリン 0.2 メントール 0.1 フウセンアカメガシワ抽出物(調製例1) 1.0 香料 適量 プロピレングリコール 2.0 精製水 残部
【0071】 実施例2 ヘアトリートメント 流動パラフィン 25.0 ステアリン酸 5.0 セタノール 5.0 ソルビタンモノオレエート 2.0 ポリオキシエチレンソルビタンモノオレエート 3.0 フウセンアカメガシワ抽出物(調製例1) 0.5 1,3−ブチレングリコール 5.0 防腐剤 適量 精製水 残部
【0072】 実施例3 フウセンアカメガシワ抽出物(調製例1) 1.0 ステアリルジメチルアミンオキシド 0.5 硬化ヒマシ油エチレンオキシド(40モル)付加物 1.0 95%エタノール 54.0 イオン交換水 残部 (製造法)95%エタノールにイオン交換水を加え、こ
れに硬化ヒマシ油エチレンオキシド(40モル)付加物お
よびステアリルジメチルアミンオキシドを加えた後エキ
ス乾燥物を加え、撹拌溶解した。
れに硬化ヒマシ油エチレンオキシド(40モル)付加物お
よびステアリルジメチルアミンオキシドを加えた後エキ
ス乾燥物を加え、撹拌溶解した。
【0073】 実施例4 ヘアートニック グリセリン 2.0 L−メントール 0.1 フウセンアカメガシワ抽出物(調製例1) 2.0 95%エタノール 54.0 香料 0.5 イオン交換水 残部 (製造法)95%エタノールにグリセリン、L−メント
ール、香料及びエキス乾燥物を加え、撹拌溶解した後、
イオン交換水を加えた。
ール、香料及びエキス乾燥物を加え、撹拌溶解した後、
イオン交換水を加えた。
【0074】 実施例5 N−ヤシラウリル−β−アミノプロピオン酸ソーダ 0.2 フウセンアカメガシワ抽出物(調製例1) 0.001 ドデシルベンゼンスルホン酸ナトリウム 0.5 硬化ヒマシ油エチレンオキシド(40モル)付加物 1.0 95%エタノール 54.0 イオン交換水 残部 (製造法)95%エタノールにイオン交換水を加え、こ
れに硬化ヒマシ油エチレンオキシド(40モル)付加物お
よびステアリルジメチルアミンオキシド及びN−ヤシラ
ウリル−β−アミノプロピオン酸ソーダを加えた後エキ
ス乾燥物を加え、撹拌溶解した。
れに硬化ヒマシ油エチレンオキシド(40モル)付加物お
よびステアリルジメチルアミンオキシド及びN−ヤシラ
ウリル−β−アミノプロピオン酸ソーダを加えた後エキ
ス乾燥物を加え、撹拌溶解した。
【0075】
【発明の効果】以上説明したように、本発明の頭部用組
成物は、優れた脱毛防止効果、発毛促進効果等の養毛作
用及びフケ、痒み抑制作用を有するとともに、毛乳頭細
胞あるいは毛包上皮系細胞を活性化することによって、
毛髪伸長の促進をする等の優れた養毛効果を有するもの
である。
成物は、優れた脱毛防止効果、発毛促進効果等の養毛作
用及びフケ、痒み抑制作用を有するとともに、毛乳頭細
胞あるいは毛包上皮系細胞を活性化することによって、
毛髪伸長の促進をする等の優れた養毛効果を有するもの
である。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 大田 正弘 神奈川県横浜市港北区新羽町1050番地 株 式会社資生堂第一リサーチセンター内 (72)発明者 田島 正裕 神奈川県横浜市港北区新羽町1050番地 株 式会社資生堂第一リサーチセンター内
Claims (5)
- 【請求項1】 アオギリ科(Sterculiaceae )フウセン
アカメガシワ属(Kleinhovia)植物の抽出物を配合する
ことを特徴とする頭部用組成物。 - 【請求項2】 アオギリ科(Sterculiaceae )フウセン
アカメガシワ属(Kleinhovia)植物がフウセンアカメガ
シワ(学名:Kleinhovia hospita)である請求項1記載
の頭部用組成物。 - 【請求項3】 養毛料である請求項1または2のいずれ
かに記載の頭部用組成物。 - 【請求項4】 毛乳頭活性化剤である請求項1または2
のいずれかに記載の頭部用組成物。 - 【請求項5】 毛髪成長期延長剤である請求項1または
2のいずれかに記載の頭部用組成物。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP9168012A JPH111416A (ja) | 1997-06-10 | 1997-06-10 | 頭部用組成物 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP9168012A JPH111416A (ja) | 1997-06-10 | 1997-06-10 | 頭部用組成物 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPH111416A true JPH111416A (ja) | 1999-01-06 |
Family
ID=15860177
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP9168012A Pending JPH111416A (ja) | 1997-06-10 | 1997-06-10 | 頭部用組成物 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JPH111416A (ja) |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US9310195B2 (en) | 2010-08-24 | 2016-04-12 | Rotork Controls Limited | Apparatus adapted to provide an indication of an angular position of an input member over multiple turns |
WO2020066818A1 (ja) * | 2018-09-26 | 2020-04-02 | 株式会社オーガンテクノロジーズ | 毛包上皮性幹細胞の生体外増殖方法 |
-
1997
- 1997-06-10 JP JP9168012A patent/JPH111416A/ja active Pending
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US9310195B2 (en) | 2010-08-24 | 2016-04-12 | Rotork Controls Limited | Apparatus adapted to provide an indication of an angular position of an input member over multiple turns |
WO2020066818A1 (ja) * | 2018-09-26 | 2020-04-02 | 株式会社オーガンテクノロジーズ | 毛包上皮性幹細胞の生体外増殖方法 |
JPWO2020066818A1 (ja) * | 2018-09-26 | 2021-11-25 | 株式会社オーガンテクノロジーズ | 毛包上皮性幹細胞の生体外増殖方法 |
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