JPH1087634A - 核酸結合オリゴマー - Google Patents
核酸結合オリゴマーInfo
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- JPH1087634A JPH1087634A JP9181890A JP18189097A JPH1087634A JP H1087634 A JPH1087634 A JP H1087634A JP 9181890 A JP9181890 A JP 9181890A JP 18189097 A JP18189097 A JP 18189097A JP H1087634 A JPH1087634 A JP H1087634A
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- JP
- Japan
- Prior art keywords
- methyl
- group
- benzyl
- chr
- naphthylmethyl
- Prior art date
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- Pending
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-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/001—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof by chemical synthesis
- C07K14/003—Peptide-nucleic acids (PNAs)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
- Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
- Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
- Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups
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- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Pyridine Compounds (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【課題】 医薬用途をもつ核酸置換ポリアミドの提供。
【解決手段】 一般式（Ｉ）
【化１】
式中、個々の基は特定の基である、の化合物、及びこれ
らの医薬としての使用。
らの医薬としての使用。
Description
【０００１】
【発明の背景】ペプチド核酸は、側鎖にプリンまたはピ
リミジンを保有するポリアミドの化合物である。従っ
て、これらは、デオキシリボースリン酸の骨格構造をペ
プチドバックボーンで置き換えた形式上ＤＮＡ類似化合
物である。
リミジンを保有するポリアミドの化合物である。従っ
て、これらは、デオキシリボースリン酸の骨格構造をペ
プチドバックボーンで置き換えた形式上ＤＮＡ類似化合
物である。
【０００２】相補的な核酸、いわゆるアンチセンスオリ
ゴヌクレオチドで特異的に遺伝子発現のスイッチを切る
ことは、治療の新規の方法を示す。可能な応用は、ウイ
ルス感染の治療から癌の治療までに及ぶ（Ｓ．Ａｇｒａ
ｗａｌ、Ｔｉｂｔｅｃｈ １０、１５２（１９９２）；
Ｗ．Ｊａｍｅｓ、Ａｎｔｉｖｉｒａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔ
ｒｙ ＆ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ ２、１９１（１
９９１）；Ｂ．Ｃａｌａｂｒｅｔｔａ、Ｃａｎｃｅｒ
Ｒｅｓｅａｒｃｈ ５１、４５０４（１９９１））。遺
伝子発現はＤＮＡ及びＲＮＡのレベルで制御され、そし
て非修飾のオリゴヌクレオチドを用いてさえ達成される
ことができる（Ｃ．Ｈｅｌｅｎｅ、Ａｎｔｉ−Ｃａｎｃ
ｅｒ Ｄｒｕｇ Ｄｅｓｉｇｎ ６、５６９（１９９
１）；Ｅ．Ｕｈｌｍａｎｎ、Ａ．Ｐｅｙｍａｎｎ、Ｃｈ
ｅｍｉｃａｌ Ｒｅｖｉｅｗｓ ９０、５４３（１９９
０））。しかしながら、そのようなオリゴヌクレオチド
は酵素に対して不十分に安定であり、そしてセルロース
系への取り込みが非常に低いので、これらは治療用途に
は適さない。治療用途には、化学的に修飾したアンチセ
ンスオリゴヌクレオチドが必要である。
ゴヌクレオチドで特異的に遺伝子発現のスイッチを切る
ことは、治療の新規の方法を示す。可能な応用は、ウイ
ルス感染の治療から癌の治療までに及ぶ（Ｓ．Ａｇｒａ
ｗａｌ、Ｔｉｂｔｅｃｈ １０、１５２（１９９２）；
Ｗ．Ｊａｍｅｓ、Ａｎｔｉｖｉｒａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔ
ｒｙ ＆ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ ２、１９１（１
９９１）；Ｂ．Ｃａｌａｂｒｅｔｔａ、Ｃａｎｃｅｒ
Ｒｅｓｅａｒｃｈ ５１、４５０４（１９９１））。遺
伝子発現はＤＮＡ及びＲＮＡのレベルで制御され、そし
て非修飾のオリゴヌクレオチドを用いてさえ達成される
ことができる（Ｃ．Ｈｅｌｅｎｅ、Ａｎｔｉ−Ｃａｎｃ
ｅｒ Ｄｒｕｇ Ｄｅｓｉｇｎ ６、５６９（１９９
１）；Ｅ．Ｕｈｌｍａｎｎ、Ａ．Ｐｅｙｍａｎｎ、Ｃｈ
ｅｍｉｃａｌ Ｒｅｖｉｅｗｓ ９０、５４３（１９９
０））。しかしながら、そのようなオリゴヌクレオチド
は酵素に対して不十分に安定であり、そしてセルロース
系への取り込みが非常に低いので、これらは治療用途に
は適さない。治療用途には、化学的に修飾したアンチセ
ンスオリゴヌクレオチドが必要である。
【０００３】アンチセンス法に加えて、センス法によっ
ても遺伝子発現を抑制することができる。この場合、セ
ンスオリゴヌクレオチドは、転写因子のようなＤＮＡ結
合タンパク質と特異的に競合する（Ｍ．Ｂｌｕｍｅｎｇ
ｅｌｄ、Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓｅａｒｃ
ｈ ２１、３４０５（１９９３））。
ても遺伝子発現を抑制することができる。この場合、セ
ンスオリゴヌクレオチドは、転写因子のようなＤＮＡ結
合タンパク質と特異的に競合する（Ｍ．Ｂｌｕｍｅｎｇ
ｅｌｄ、Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓｅａｒｃ
ｈ ２１、３４０５（１９９３））。
【０００４】修飾したヌクレオチド間リン酸またはリン
酸なしのヌクレオチド間結合を有するオリゴヌクレオチ
ドは、多数の研究において体系的に調べられてきている
が、しかしながら、これらを合成することは非常に費用
がかかり、そして観察される治療効果は不十分であるこ
とが見いだされた（Ｅ．Ｕｈｌｍａｎｎ、Ａ．Ｐｅｙｍ
ａｎ、Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｒｅｖｉｅｗｓ ９０、５４
３（１９９０））。
酸なしのヌクレオチド間結合を有するオリゴヌクレオチ
ドは、多数の研究において体系的に調べられてきている
が、しかしながら、これらを合成することは非常に費用
がかかり、そして観察される治療効果は不十分であるこ
とが見いだされた（Ｅ．Ｕｈｌｍａｎｎ、Ａ．Ｐｅｙｍ
ａｎ、Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｒｅｖｉｅｗｓ ９０、５４
３（１９９０））。
【０００５】核酸中のリン酸基を修飾または置換するこ
との代案は、リボース及びリン酸を他のバックボーンで
完全に置き換えることである。この概念は、Ｐｉｔｈａ
等により初めて実現され、彼らは、リボースリン酸をポ
リ−Ｎ−ビニル誘導体で置き換え、それによりいわゆる
「作り物の」ＤＮＡを生じた（Ｊ．Ｐｉｔｈａ、Ｐ．
Ｏ．Ｐ．Ｔｓ’Ｏ、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．３３、１３
４１（１９６８）；Ｊ．Ｐｉｔｈａ、Ｊ．Ａｄｖ．Ｐｏ
ｌｙｍ．Ｓｃｉ．５０、１（１９８３））。しかしなが
ら、それははっきり限定して合成される特定の配列を与
えない。
との代案は、リボース及びリン酸を他のバックボーンで
完全に置き換えることである。この概念は、Ｐｉｔｈａ
等により初めて実現され、彼らは、リボースリン酸をポ
リ−Ｎ−ビニル誘導体で置き換え、それによりいわゆる
「作り物の」ＤＮＡを生じた（Ｊ．Ｐｉｔｈａ、Ｐ．
Ｏ．Ｐ．Ｔｓ’Ｏ、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．３３、１３
４１（１９６８）；Ｊ．Ｐｉｔｈａ、Ｊ．Ａｄｖ．Ｐｏ
ｌｙｍ．Ｓｃｉ．５０、１（１９８３））。しかしなが
ら、それははっきり限定して合成される特定の配列を与
えない。
【０００６】特定の配列の合成は、例えば、従来のペプ
チド合成（Ｍ．Ｂｏｄａｎｓｚｋｙ、Ｐｒｉｎｃｉｐｌ
ｅｓ ｏｆ Ｐｅｐｔｉｄｅ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ、Ｓ
ｐｒｉｎｇｅｒ、Ｂｅｒｌｉｎ １９８４）の類推で徐
々に作られるポリアミドのバックボーンを糖リン酸の代
わりに用いるなら、達成される。この概念は、様々な研
究グループにより異なる方法で実現されている（Ｊ．
Ｅ．Ｓｕｍｍｅｒｔｏｎ等、ＷＯ第８６／０５５１８
号；Ｒ．Ｓ．Ｖａｒｍａ等、ＷＯ第９２／１８５１８
号；Ｏ．Ｂｕｃｈａｒｄｔ等、ＷＯ第９２／２０７０２
号；Ｈ．Ｗａｎｇ、Ｄ．Ｄ．Ｗｅｌｌｅｒ、Ｔｅｔｒａ
ｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔｅｒｓ ３２、７３８５（１９
９１）；Ｐ．Ｇａｒｎｅｒ、Ｊ．Ｕ．Ｙｏｏ、Ｔｅｔｒ
ａｈｅｄｒｏｎＬｅｔｔｅｒｓ ３４、１２７５（１９
９３）；Ｓ．−Ｂ．Ｈｕａｎｇ、Ｊ．Ｓ．Ｎｅｌｓｏ
ｎ、Ｄ．Ｄ．Ｗｅｌｌｅｒ、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．５
６、６００７（１９９１）；ＥＰ第６４６ ５９５Ａ１
号、ＥＰ第６４６ ５９６Ａ１号、及びＥＰ第７００ ９
２８Ａ１号；ＥＰ第６７２ ６６１Ａ１号、ＥＰ第６７
２６７７Ａ２号、及びＥＰ第６７２ ７００Ａ１号）。
チド合成（Ｍ．Ｂｏｄａｎｓｚｋｙ、Ｐｒｉｎｃｉｐｌ
ｅｓ ｏｆ Ｐｅｐｔｉｄｅ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ、Ｓ
ｐｒｉｎｇｅｒ、Ｂｅｒｌｉｎ １９８４）の類推で徐
々に作られるポリアミドのバックボーンを糖リン酸の代
わりに用いるなら、達成される。この概念は、様々な研
究グループにより異なる方法で実現されている（Ｊ．
Ｅ．Ｓｕｍｍｅｒｔｏｎ等、ＷＯ第８６／０５５１８
号；Ｒ．Ｓ．Ｖａｒｍａ等、ＷＯ第９２／１８５１８
号；Ｏ．Ｂｕｃｈａｒｄｔ等、ＷＯ第９２／２０７０２
号；Ｈ．Ｗａｎｇ、Ｄ．Ｄ．Ｗｅｌｌｅｒ、Ｔｅｔｒａ
ｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔｅｒｓ ３２、７３８５（１９
９１）；Ｐ．Ｇａｒｎｅｒ、Ｊ．Ｕ．Ｙｏｏ、Ｔｅｔｒ
ａｈｅｄｒｏｎＬｅｔｔｅｒｓ ３４、１２７５（１９
９３）；Ｓ．−Ｂ．Ｈｕａｎｇ、Ｊ．Ｓ．Ｎｅｌｓｏ
ｎ、Ｄ．Ｄ．Ｗｅｌｌｅｒ、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．５
６、６００７（１９９１）；ＥＰ第６４６ ５９５Ａ１
号、ＥＰ第６４６ ５９６Ａ１号、及びＥＰ第７００ ９
２８Ａ１号；ＥＰ第６７２ ６６１Ａ１号、ＥＰ第６７
２６７７Ａ２号、及びＥＰ第６７２ ７００Ａ１号）。
【０００７】ポリアミド核酸はまた、診断及び分子生物
学の用途にも適する（Ｂｕｃｈａｒｄｔ等、ＷＯ第９２
／２０７０３号及びＧｌａｘｏ Ｉｎｃ．ＷＯ第９３／
１２１２９号）。
学の用途にも適する（Ｂｕｃｈａｒｄｔ等、ＷＯ第９２
／２０７０３号及びＧｌａｘｏ Ｉｎｃ．ＷＯ第９３／
１２１２９号）。
【０００８】
【発明の構成】そのような構造に関する研究の間に、新
規のＣ分岐及びＮ分岐したオリゴマーの核酸を合成する
ことに成功した。これらの核酸は、ＤＮＡ及びＲＮＡに
意外にもよく結合することが見いだされた。これらの物
質は遺伝子発現を制御するのに適し、そして抗ウイルス
特性を示す。さらに、この特質を有する物質は、核酸を
単離、同定、及び定量するために、診断及び分子生物学
において用いられることができる。
規のＣ分岐及びＮ分岐したオリゴマーの核酸を合成する
ことに成功した。これらの核酸は、ＤＮＡ及びＲＮＡに
意外にもよく結合することが見いだされた。これらの物
質は遺伝子発現を制御するのに適し、そして抗ウイルス
特性を示す。さらに、この特質を有する物質は、核酸を
単離、同定、及び定量するために、診断及び分子生物学
において用いられることができる。
【０００９】本発明は、一般式（Ｉ）
【００１０】
【化２】
【００１１】式中、Ａは、−ＣＯ−、−ＣＨＲまたはＣ
ＲＲ’−を表し、Ｂは、チミン、ウラシル、シトシン、
アデニン、グアニンもしくはヒポキサンチン、または化
学修飾によりこれらから誘導される誘導体のような全て
の天然もしくは非天然の核酸塩基、あるいはアセチル、
トリフルオロアセチル、トリクロロアセチル、ベンゾイ
ル、フェニルアセチル、ベンジルオキシカルボニル
（Ｚ）、ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル（Ｂｏ
ｃ）、アリルオキシカルボニル、（９−フルオレニル）
メトキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）のような保護基、また
はペプチド化学及び核酸化学において通例である他の保
護基により、場合よってはアミノ基において置換された
これらのハロゲン化前駆体を表し、Ｃは、Ｃが一様にＳ
またはＲ配置にあることができる−ＣＨ−または−ＣＲ
−を表し、Ｄは、−ＮＨ−、−ＮＲ−、−ＣＨ2−、−
ＣＨＲ−または−ＣＲＲ’−を表し、Ｅは、−ＮＨ−、
−ＮＲ−、−ＣＨ2−、−ＣＨＲ−、−ＣＲＲ’−、−
Ｏ−または−Ｓ−を表し、Ａ及びＥは、アルキル鎖
［（−ＣＨ2）n−、式中、ｎは０、１または２である］
を介して互いに連結されることができ、Ｆは、−ＣＨ2
−、−ＣＯ−、−ＳＯ2−、−ＳＯ−または−ＣＳ−を
表し、Ｇは、−ＮＨ−、−ＮＲ−、−Ｏ−または−Ｓ−
を表し、Ｈは、結合−ＣＨ2−ＣＨ2−または−ＣＲ1Ｒ2
−、式中、Ｒ1は、水素またはメチルを表し、そしてＲ2
は、水素または場合によってはアミノもしくはヒドロキ
シルにより置換されるＣ1−Ｃ4−アルキルを表し、ある
いはメルカプトメチル、メチルチオエチル、カルボキシ
メチル、カルボキシエチル、カルバモイルメチル、カル
バモイルエチルまたはグアニジノプロピルを表し、ある
いは場合によってはアミノ、ニトロ、ハロゲン、ヒドロ
キシルまたはメトキシにより置換されるフェニルまたは
ベンジルを表し、あるいはナフチルメチル、インドリル
メチル、イミダゾリルメチル、トリアゾリルメチルまた
はピリジルメチルを表し、その際に官能基が場合によっ
ては保護され、そして基−ＣＲ1Ｒ2−が立体化学的にＬ
形またはＤ形に一様に配置されることができる、を表
し、Ｇ及びＨは、アルキル鎖［（−ＣＨ2）n−、式中、
ｎは３または４である］を介して互いに連結されること
ができ、Ｌは、ｐが０、１もしくは２である（−Ｃ
Ｈ2）p−、−ＣＨＲ−または−ＣＲＲ’−を表し、Ｍ
は、−ＣＨ2−、−ＣＯ−、−ＳＯ2−、−ＳＯ−または
−ＣＳ−を表し、Ｑは、ＮＨ、Ｏ、ＳまたはＲ3がＣ1−
Ｃ8−アルキル、Ｃ2−Ｃ8−アルケニル、フェニル、ピ
リジル、ベンジルもしくはナフチルメチルを表すＮＲ3
を表し、Ｋは、水素、キャリヤー系、可溶性を媒介する
基または天然もしくは非天然のアミノ酸（Ｃ−連結した
アミノ酸）のアシル基を表し、Ｔは、ヒドロキシル、キ
ャリヤー系、可溶性を媒介する基またはアミドで（Ｎ
−）連結した天然もしくは非天然のアミノ酸を表し、Ｒ
及びＲ’は、各場合において、互いに独立して、ＯＨ、
メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブ
チル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチルもしくはｔｅｒｔ−
ブチル、ベンジル、α−ナフチルメチルもしくはβ−ナ
フチルメチルのようなアラルキルまたは場合によっては
メチル、ハロゲンもしくはＮＯ2により置換される、フ
ェニル、２−ピリジルもしくは４−ピリジルのようなア
リールもしくはヘタリールを表し、ｒは、０または１を
表し、そしてｓは、１から３０までの値を表す、の化合
物に関する。
ＲＲ’−を表し、Ｂは、チミン、ウラシル、シトシン、
アデニン、グアニンもしくはヒポキサンチン、または化
学修飾によりこれらから誘導される誘導体のような全て
の天然もしくは非天然の核酸塩基、あるいはアセチル、
トリフルオロアセチル、トリクロロアセチル、ベンゾイ
ル、フェニルアセチル、ベンジルオキシカルボニル
（Ｚ）、ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル（Ｂｏ
ｃ）、アリルオキシカルボニル、（９−フルオレニル）
メトキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）のような保護基、また
はペプチド化学及び核酸化学において通例である他の保
護基により、場合よってはアミノ基において置換された
これらのハロゲン化前駆体を表し、Ｃは、Ｃが一様にＳ
またはＲ配置にあることができる−ＣＨ−または−ＣＲ
−を表し、Ｄは、−ＮＨ−、−ＮＲ−、−ＣＨ2−、−
ＣＨＲ−または−ＣＲＲ’−を表し、Ｅは、−ＮＨ−、
−ＮＲ−、−ＣＨ2−、−ＣＨＲ−、−ＣＲＲ’−、−
Ｏ−または−Ｓ−を表し、Ａ及びＥは、アルキル鎖
［（−ＣＨ2）n−、式中、ｎは０、１または２である］
を介して互いに連結されることができ、Ｆは、−ＣＨ2
−、−ＣＯ−、−ＳＯ2−、−ＳＯ−または−ＣＳ−を
表し、Ｇは、−ＮＨ−、−ＮＲ−、−Ｏ−または−Ｓ−
を表し、Ｈは、結合−ＣＨ2−ＣＨ2−または−ＣＲ1Ｒ2
−、式中、Ｒ1は、水素またはメチルを表し、そしてＲ2
は、水素または場合によってはアミノもしくはヒドロキ
シルにより置換されるＣ1−Ｃ4−アルキルを表し、ある
いはメルカプトメチル、メチルチオエチル、カルボキシ
メチル、カルボキシエチル、カルバモイルメチル、カル
バモイルエチルまたはグアニジノプロピルを表し、ある
いは場合によってはアミノ、ニトロ、ハロゲン、ヒドロ
キシルまたはメトキシにより置換されるフェニルまたは
ベンジルを表し、あるいはナフチルメチル、インドリル
メチル、イミダゾリルメチル、トリアゾリルメチルまた
はピリジルメチルを表し、その際に官能基が場合によっ
ては保護され、そして基−ＣＲ1Ｒ2−が立体化学的にＬ
形またはＤ形に一様に配置されることができる、を表
し、Ｇ及びＨは、アルキル鎖［（−ＣＨ2）n−、式中、
ｎは３または４である］を介して互いに連結されること
ができ、Ｌは、ｐが０、１もしくは２である（−Ｃ
Ｈ2）p−、−ＣＨＲ−または−ＣＲＲ’−を表し、Ｍ
は、−ＣＨ2−、−ＣＯ−、−ＳＯ2−、−ＳＯ−または
−ＣＳ−を表し、Ｑは、ＮＨ、Ｏ、ＳまたはＲ3がＣ1−
Ｃ8−アルキル、Ｃ2−Ｃ8−アルケニル、フェニル、ピ
リジル、ベンジルもしくはナフチルメチルを表すＮＲ3
を表し、Ｋは、水素、キャリヤー系、可溶性を媒介する
基または天然もしくは非天然のアミノ酸（Ｃ−連結した
アミノ酸）のアシル基を表し、Ｔは、ヒドロキシル、キ
ャリヤー系、可溶性を媒介する基またはアミドで（Ｎ
−）連結した天然もしくは非天然のアミノ酸を表し、Ｒ
及びＲ’は、各場合において、互いに独立して、ＯＨ、
メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブ
チル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチルもしくはｔｅｒｔ−
ブチル、ベンジル、α−ナフチルメチルもしくはβ−ナ
フチルメチルのようなアラルキルまたは場合によっては
メチル、ハロゲンもしくはＮＯ2により置換される、フ
ェニル、２−ピリジルもしくは４−ピリジルのようなア
リールもしくはヘタリールを表し、ｒは、０または１を
表し、そしてｓは、１から３０までの値を表す、の化合
物に関する。
【００１２】ｒが全てのモノマーにおいて１である場
合、この構成要素は交互に現れ、完全な分子の５０％を
表す。ｒが個別のモノマーにおいて０である場合、この
構成要素の割合は、付随して、例えば４０、３０または
２０％まで減少される。この構成要素は、完全な分子中
に少なくとも１回現れなければならない。
合、この構成要素は交互に現れ、完全な分子の５０％を
表す。ｒが個別のモノマーにおいて０である場合、この
構成要素の割合は、付随して、例えば４０、３０または
２０％まで減少される。この構成要素は、完全な分子中
に少なくとも１回現れなければならない。
【００１３】新規の化合物は、式（Ｉ）により一般的に
定義される。
定義される。
【００１４】Ａが、好ましくは、−ＣＯ−、−ＣＨＲ−
または−ＣＲＲ’−を表す。
または−ＣＲＲ’−を表す。
【００１５】Ｂが、好ましくは、チミン、ウラシル、シ
トシン、アデニン、グアニンもしくはヒポキサンチンの
ような全ての天然の核酸塩基、またはアセチル、トリフ
ルオロアセチル、トリクロロアセチル、ベンゾイル、フ
ェニルアセチル、ベンジルオキシカルボニル、ｔｅｒｔ
−ブチルオキシカルボニル、アリルオキシカルボニル、
（９−フルオレニル）メトキシカルボニルのような保護
基もしくはペプチド化学及び核酸化学において通例であ
る他の保護基により、場合によってはアミノ基において
置換されるこれらのハロゲン化前駆物質を表す。
トシン、アデニン、グアニンもしくはヒポキサンチンの
ような全ての天然の核酸塩基、またはアセチル、トリフ
ルオロアセチル、トリクロロアセチル、ベンゾイル、フ
ェニルアセチル、ベンジルオキシカルボニル、ｔｅｒｔ
−ブチルオキシカルボニル、アリルオキシカルボニル、
（９−フルオレニル）メトキシカルボニルのような保護
基もしくはペプチド化学及び核酸化学において通例であ
る他の保護基により、場合によってはアミノ基において
置換されるこれらのハロゲン化前駆物質を表す。
【００１６】Ｃが、好ましくは、Ｃが一様にＳまたはＲ
配置にあることができる−ＣＨ−または−ＣＲ−を表
す。
配置にあることができる−ＣＨ−または−ＣＲ−を表
す。
【００１７】Ｄが、好ましくは、−ＮＨ−、−ＮＲ−、
−ＣＨ2−、−ＣＨＲ−または−ＣＲＲ’−を表す。
−ＣＨ2−、−ＣＨＲ−または−ＣＲＲ’−を表す。
【００１８】Ｅが、好ましくは、−ＮＨ−、−ＮＲ−、
−ＣＨ2−、−ＣＨＲ−、−ＣＲＲ’−または−Ｏ−を
表す。
−ＣＨ2−、−ＣＨＲ−、−ＣＲＲ’−または−Ｏ−を
表す。
【００１９】Ａ及びＥが、好ましくは、アルキル鎖
［（−ＣＨ2）n−、式中、ｎが０、１または２である］
を介して互いに連結されることができる。
［（−ＣＨ2）n−、式中、ｎが０、１または２である］
を介して互いに連結されることができる。
【００２０】Ｆが、好ましくは、−ＣＨ2−、−ＣＯ−
または−ＣＳ−を表す。
または−ＣＳ−を表す。
【００２１】Ｇが、好ましくは、−ＮＨ−、−ＮＲ−ま
たは−Ｏ−を表す。
たは−Ｏ−を表す。
【００２２】Ｈが、好ましくは、結合−ＣＨ2−ＣＨ2−
または−ＣＲ1Ｒ2−、式中、Ｒ1が、水素またはメチル
を表し、そしてＲ2が、水素、メチル、イソプロピル、
イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ヒドロキシメチル、１−
ヒドロキシエチル、メルカプトメチル、２−メチルチオ
エチル、３−アミノプロピル、４−アミノブチル、カル
ボキシメチル、２−カルボキシエチル、カルバモイルメ
チル、２−カルバモイルエチル、３−グアニジノプロピ
ル、フェニル、ベンジル、４−ヒドロキシベンジル、４
−メトキシベンジル、２−ニトロベンジル、３−ニトロ
ベンジル、４−ニトロベンジル、２−アミノベンジル、
３−アミノベンジル、４−アミノベンジル、３，４−ジ
クロロベンジル、４−ヨードベンジル、α−ナフチルメ
チル、β−ナフチルメチル、３−インドリルメチル、４
−イミダゾリルメチル、１，２，３−トリアゾール−１
−イル−メチル、１，２，４−トリアゾール−１−イル
ーメチル、２−ピリジルメチルまたは４−ピリジルメチ
ルを表し、その際に官能基が場合によっては保護され、
そして基−ＣＲ1Ｒ2−が立体化学的にＬ形またはＤ形に
一様に配置される、を表す。
または−ＣＲ1Ｒ2−、式中、Ｒ1が、水素またはメチル
を表し、そしてＲ2が、水素、メチル、イソプロピル、
イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ヒドロキシメチル、１−
ヒドロキシエチル、メルカプトメチル、２−メチルチオ
エチル、３−アミノプロピル、４−アミノブチル、カル
ボキシメチル、２−カルボキシエチル、カルバモイルメ
チル、２−カルバモイルエチル、３−グアニジノプロピ
ル、フェニル、ベンジル、４−ヒドロキシベンジル、４
−メトキシベンジル、２−ニトロベンジル、３−ニトロ
ベンジル、４−ニトロベンジル、２−アミノベンジル、
３−アミノベンジル、４−アミノベンジル、３，４−ジ
クロロベンジル、４−ヨードベンジル、α−ナフチルメ
チル、β−ナフチルメチル、３−インドリルメチル、４
−イミダゾリルメチル、１，２，３−トリアゾール−１
−イル−メチル、１，２，４−トリアゾール−１−イル
ーメチル、２−ピリジルメチルまたは４−ピリジルメチ
ルを表し、その際に官能基が場合によっては保護され、
そして基−ＣＲ1Ｒ2−が立体化学的にＬ形またはＤ形に
一様に配置される、を表す。
【００２３】Ｇ及びＨが、好ましくは、アルキル鎖
［（−ＣＨ2）n−、式中、ｎが３または４である］を介
して互いに連結されることができる。
［（−ＣＨ2）n−、式中、ｎが３または４である］を介
して互いに連結されることができる。
【００２４】Ｌが、好ましくは、ｐが０、１もしくは２
である（−ＣＨ2）p−、−ＣＨＲ−または−ＣＲＲ’−
を表す。
である（−ＣＨ2）p−、−ＣＨＲ−または−ＣＲＲ’−
を表す。
【００２５】Ｍが、好ましくは、−ＣＨ2−、−ＣＯ−
または−ＣＳ−を表す。
または−ＣＳ−を表す。
【００２６】Ｑが、好ましくは、ＮＨ、ＯまたはＲ3が
Ｃ1−Ｃ4−アルキル、Ｃ2−Ｃ4−アルケニル、フェニ
ル、２−ピリジル、４−ピリジル、ベンジル、α−ナフ
チルメチルもしくはβ−ナフチルメチルを表すＮＲ3を
表す。
Ｃ1−Ｃ4−アルキル、Ｃ2−Ｃ4−アルケニル、フェニ
ル、２−ピリジル、４−ピリジル、ベンジル、α−ナフ
チルメチルもしくはβ−ナフチルメチルを表すＮＲ3を
表す。
【００２７】Ｋが、好ましくは、水素、キャリヤー系、
可溶性を媒介する基または天然もしくは非天然のアミノ
酸（Ｃ−連結したアミノ酸）のアシル基を表す。
可溶性を媒介する基または天然もしくは非天然のアミノ
酸（Ｃ−連結したアミノ酸）のアシル基を表す。
【００２８】Ｔが、好ましくは、ヒドロキシル、キャリ
ヤー系、可溶性を媒介する基またはアミドで（Ｎ−）連
結した天然もしくは非天然のアミノ酸を表す。
ヤー系、可溶性を媒介する基またはアミドで（Ｎ−）連
結した天然もしくは非天然のアミノ酸を表す。
【００２９】Ｒ及びＲ’が、好ましくは、各場合におい
て、互いに独立して、ＯＨ、メチル、エチル、ｎ−プロ
ピルもしくはｎ−ブチル、ベンジルまたは場合によって
はメチル、フッ素、塩素、臭素もしくはＮＯ2により置
換されるフェニルを表す。
て、互いに独立して、ＯＨ、メチル、エチル、ｎ−プロ
ピルもしくはｎ−ブチル、ベンジルまたは場合によって
はメチル、フッ素、塩素、臭素もしくはＮＯ2により置
換されるフェニルを表す。
【００３０】ｒが、好ましくは、０または１を表す。
【００３１】ｓが、好ましくは、１から２０までの値を
表す。
表す。
【００３２】Ａが、特に好ましくは、−ＣＯ−、−ＣＨ
Ｒ−または−ＣＲＲ’−を表す。
Ｒ−または−ＣＲＲ’−を表す。
【００３３】Ｂが、特に好ましくは、チミン、ウラシ
ル、シトシン、アデニン、グアニンもしくはヒポキサン
チンのような全ての天然の核酸塩基、またはアセチル、
トリフルオロアセチル、トリクロロアセチル、ベンゾイ
ル、フェニルアセチル、ベンジルオキシカルボニル、ｔ
ｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル、アリルオキシカルボ
ニル、（９−フルオレニル）メトキシカルボニルのよう
な保護基もしくはペプチド化学及び核酸化学において通
例である他の保護基により、場合によってはアミノ基に
おいて置換されるこれらのハロゲン化前駆物質を表す。
ル、シトシン、アデニン、グアニンもしくはヒポキサン
チンのような全ての天然の核酸塩基、またはアセチル、
トリフルオロアセチル、トリクロロアセチル、ベンゾイ
ル、フェニルアセチル、ベンジルオキシカルボニル、ｔ
ｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル、アリルオキシカルボ
ニル、（９−フルオレニル）メトキシカルボニルのよう
な保護基もしくはペプチド化学及び核酸化学において通
例である他の保護基により、場合によってはアミノ基に
おいて置換されるこれらのハロゲン化前駆物質を表す。
【００３４】Ｃが、特に好ましくは、Ｃが一様にＳまた
はＲ配置にあることができる−ＣＨ−または−ＣＲ−を
表す。
はＲ配置にあることができる−ＣＨ−または−ＣＲ−を
表す。
【００３５】Ｄが、特に好ましくは、−ＮＨ−、−Ｎ
（ＣＨ3）−、−ＣＨ2−、−ＣＨＲ−または−ＣＲＲ’
−を表す。
（ＣＨ3）−、−ＣＨ2−、−ＣＨＲ−または−ＣＲＲ’
−を表す。
【００３６】Ｅが、特に好ましくは、−ＮＨ−、−ＮＲ
−、−ＣＨ2−または−ＣＨＲ−を表す。
−、−ＣＨ2−または−ＣＨＲ−を表す。
【００３７】Ｆが、特に好ましくは、−ＣＨ2−、−Ｃ
Ｏ−または−ＣＳ−を表す。
Ｏ−または−ＣＳ−を表す。
【００３８】Ｇが、特に好ましくは、−ＮＨ−または−
Ｎ（ＣＨ3）−を表す。
Ｎ（ＣＨ3）−を表す。
【００３９】Ｈが、特に好ましくは、結合−ＣＨ2−Ｃ
Ｈ2−または−ＣＲ1Ｒ2−、式中、Ｒ1が、水素またはメ
チルを表し、そして、Ｒ2が、水素、メチル、イソプロ
ピル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ヒドロキシメチ
ル、１−ヒドロキシエチル、メルカプトメチル、２−メ
チルチオエチル、３−アミノプロピル、４−アミノブチ
ル、カルボキシメチル、２−カルボキシエチル、カルバ
モイルメチル、２−カルバモイルエチル、３−グアニジ
ノプロピル、フェニル、ベンジルまたは４−ヒドロキシ
ベンジルを表し、その際に官能基が場合によっては保護
され、そして基−ＣＲ1Ｒ2−が立体化学的にＬ形または
Ｄ形に一様に配置される、を表す。
Ｈ2−または−ＣＲ1Ｒ2−、式中、Ｒ1が、水素またはメ
チルを表し、そして、Ｒ2が、水素、メチル、イソプロ
ピル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ヒドロキシメチ
ル、１−ヒドロキシエチル、メルカプトメチル、２−メ
チルチオエチル、３−アミノプロピル、４−アミノブチ
ル、カルボキシメチル、２−カルボキシエチル、カルバ
モイルメチル、２−カルバモイルエチル、３−グアニジ
ノプロピル、フェニル、ベンジルまたは４−ヒドロキシ
ベンジルを表し、その際に官能基が場合によっては保護
され、そして基−ＣＲ1Ｒ2−が立体化学的にＬ形または
Ｄ形に一様に配置される、を表す。
【００４０】Ｌが、特に好ましくは、ｐが０、１もしく
は２である（−ＣＨ2）p−、−ＣＨＲ−または−ＣＲ
Ｒ’−を表す。
は２である（−ＣＨ2）p−、−ＣＨＲ−または−ＣＲ
Ｒ’−を表す。
【００４１】Ｍが、特に好ましくは、−ＣＨ2−、−Ｃ
Ｏ−または−ＣＳ−を表す。
Ｏ−または−ＣＳ−を表す。
【００４２】Ｑが、特に好ましくは、ＮＨ、ＯまたはＲ
3がメチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ
−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブ
チル、ビニル、アリル、フェニル、２−ピリジル、４−
ピリジル、ベンジル、α−ナフチルメチルもしくはβ−
ナフチルメチルを表すＮＲ3を表す。
3がメチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ
−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブ
チル、ビニル、アリル、フェニル、２−ピリジル、４−
ピリジル、ベンジル、α−ナフチルメチルもしくはβ−
ナフチルメチルを表すＮＲ3を表す。
【００４３】Ｋが、特に好ましくは、水素、キャリヤー
系、可溶性を媒介する基、または天然もしくは非天然の
アミノ酸（Ｃ−連結したアミノ酸）のアシル基を表す。
系、可溶性を媒介する基、または天然もしくは非天然の
アミノ酸（Ｃ−連結したアミノ酸）のアシル基を表す。
【００４４】Ｔが、特に好ましくは、ヒドロキシル、キ
ャリヤー系、可溶性を媒介する基またはアミドで（Ｎ
−）連結した天然もしくは非天然のアミノ酸を表す。
ャリヤー系、可溶性を媒介する基またはアミドで（Ｎ
−）連結した天然もしくは非天然のアミノ酸を表す。
【００４５】Ｒ及びＲ’が、特に好ましくは、各場合に
おいて、互いに独立して、ＯＨ、メチルまたはベンジル
を表す。
おいて、互いに独立して、ＯＨ、メチルまたはベンジル
を表す。
【００４６】ｒが、特に好ましくは、０または１を表
す。
す。
【００４７】ｓが、特に好ましくは、２から１５までの
値を表す。
値を表す。
【００４８】ペプチド化学から既知である保護基は、例
えば、Ｔ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ、Ｐ．Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓ、
Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａ
ｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ、第２版、Ｊｏｈｎ Ｗｉ
ｌｅｙ ＆ Ｓｏｎｓ、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ １９９１に
おいて挙げられている。
えば、Ｔ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ、Ｐ．Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓ、
Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａ
ｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ、第２版、Ｊｏｈｎ Ｗｉ
ｌｅｙ ＆ Ｓｏｎｓ、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ １９９１に
おいて挙げられている。
【００４９】キャリヤー系は、細胞表面に特異的に結合
し、そして本発明が基づく核酸結合オリゴマーのインタ
ーナリゼーションをもたらす細胞特異的結合及び認識因
子を意味する。インターナリゼーションは、様々な方法
で、例えば、エンドサイトーシスまたは能動輸送作用に
よりもたらされることができる。
し、そして本発明が基づく核酸結合オリゴマーのインタ
ーナリゼーションをもたらす細胞特異的結合及び認識因
子を意味する。インターナリゼーションは、様々な方法
で、例えば、エンドサイトーシスまたは能動輸送作用に
よりもたらされることができる。
【００５０】細胞表面の構造は、タンパク質、ポリペプ
チド、炭水化物、脂質またはこれらの組み合わせである
ことができる。典型的には、細胞への取り込みは表面レ
セプターによりもたらされる。こういう理由で、結合及
び認識因子は、レセプターの天然または合成のリガンド
であることができる。
チド、炭水化物、脂質またはこれらの組み合わせである
ことができる。典型的には、細胞への取り込みは表面レ
セプターによりもたらされる。こういう理由で、結合及
び認識因子は、レセプターの天然または合成のリガンド
であることができる。
【００５１】リガンドは、細胞表面構造により認識され
ることのできるように配置される官能基を備えた、タン
パク質、ポリペプチド、炭水化物もしくは脂質またはこ
れらの組み合わせであることができる。リガンドはま
た、生物学的有機体、例えば、ウイルスもしくは細胞の
構成要素もしくは全体でもあることができ、またはリポ
ソームのような人工の輸送系でもあることができる。加
えて、リガンドは抗体または抗体の類似体であることが
できる。
ることのできるように配置される官能基を備えた、タン
パク質、ポリペプチド、炭水化物もしくは脂質またはこ
れらの組み合わせであることができる。リガンドはま
た、生物学的有機体、例えば、ウイルスもしくは細胞の
構成要素もしくは全体でもあることができ、またはリポ
ソームのような人工の輸送系でもあることができる。加
えて、リガンドは抗体または抗体の類似体であることが
できる。
【００５２】化合物を異なる細胞に導くためには、異な
るリガンドを用いなければならない。
るリガンドを用いなければならない。
【００５３】化合物をマクロファージに導くための好ま
しいリガンドは、マンノースのような炭水化物、ポリリ
ジン、ポリアルギニンまたはポリオルニチンのようなポ
リカチオン、アビジンのような塩基性タンパク質、及び
糖ペプチド、ペプチドまたはリポペプチドでもある
（Ｇ．Ｙ．Ｃｈｕ等、ＷＯ第９３０４７０１号）。
しいリガンドは、マンノースのような炭水化物、ポリリ
ジン、ポリアルギニンまたはポリオルニチンのようなポ
リカチオン、アビジンのような塩基性タンパク質、及び
糖ペプチド、ペプチドまたはリポペプチドでもある
（Ｇ．Ｙ．Ｃｈｕ等、ＷＯ第９３０４７０１号）。
【００５４】可溶性を媒介する基は、水中の可溶性を媒
介する官能基を意味すると理解される。これに関連し
て、これらの基は、例えばアミノ酸のエステルもしくは
アミド、ヒドロキシカルボン酸、アミノスルホン酸、ヒ
ドロキシスルホン酸またはジアミンであることができ
る。オルニチン、リジンまたは２，４−ジアミノ酪酸の
ようなジアミノカルボン酸のアミドが好ましい。
介する官能基を意味すると理解される。これに関連し
て、これらの基は、例えばアミノ酸のエステルもしくは
アミド、ヒドロキシカルボン酸、アミノスルホン酸、ヒ
ドロキシスルホン酸またはジアミンであることができ
る。オルニチン、リジンまたは２，４−ジアミノ酪酸の
ようなジアミノカルボン酸のアミドが好ましい。
【００５５】キャリヤー系または可溶性を媒介する基が
基Ｋを表す場合、その結合点は、例えばペプチド化学に
おける末端基のＮ末端結合の類推において、アシル基
（すなわち、基Ｇを含んで、その結合はアミド、エステ
ルまたはチオエステル官能基を介してもたらされる）で
あり、または炭水化物基の場合、好ましくはグリコシド
のヒドロキシル基の酸素である。キャリヤー系または可
溶性を媒介する基が基Ｔを表す場合、その結合部位は、
ペプチド化学においてＣ末端で連結される末端基の類推
において、キャリヤー系または可溶性を媒介する基のア
ミノ基またはヒドロキシル基の酸素原子または窒素原子
である。
基Ｋを表す場合、その結合点は、例えばペプチド化学に
おける末端基のＮ末端結合の類推において、アシル基
（すなわち、基Ｇを含んで、その結合はアミド、エステ
ルまたはチオエステル官能基を介してもたらされる）で
あり、または炭水化物基の場合、好ましくはグリコシド
のヒドロキシル基の酸素である。キャリヤー系または可
溶性を媒介する基が基Ｔを表す場合、その結合部位は、
ペプチド化学においてＣ末端で連結される末端基の類推
において、キャリヤー系または可溶性を媒介する基のア
ミノ基またはヒドロキシル基の酸素原子または窒素原子
である。
【００５６】上に挙げた一般的な基の定義もしくは分
類、または優先範囲において挙げたものは、これらの間
で随意に組み合わせることができ、それは個々の範囲及
び優先範囲の間でもである。これらは、最終産物に並び
に前駆物質及び中間体に対応するように適用される。
類、または優先範囲において挙げたものは、これらの間
で随意に組み合わせることができ、それは個々の範囲及
び優先範囲の間でもである。これらは、最終産物に並び
に前駆物質及び中間体に対応するように適用される。
【００５７】本発明によると、式（Ｉ）の化合物は、好
ましいとして上に挙げた意義の組み合わせがあることに
おいて好ましい。
ましいとして上に挙げた意義の組み合わせがあることに
おいて好ましい。
【００５８】本発明によると、式（Ｉ）の化合物は、特
に好ましいとして上に挙げた意義の組み合わせがあるこ
とにおいて特に好ましい。
に好ましいとして上に挙げた意義の組み合わせがあるこ
とにおいて特に好ましい。
【００５９】アルキルまたはアルケニルのような飽和ま
たは不飽和の炭化水素基は、アルコキシにおけるような
ヘテロ原子と結合した場合でさえ、可能な限り各場合に
おいて直鎖または分岐鎖であることができる。
たは不飽和の炭化水素基は、アルコキシにおけるような
ヘテロ原子と結合した場合でさえ、可能な限り各場合に
おいて直鎖または分岐鎖であることができる。
【００６０】多置換の場合において、場合によっては置
換される基は、可能である場合、同一または異なる置換
基に対して一回または一回より多く置換されることがで
きる。
換される基は、可能である場合、同一または異なる置換
基に対して一回または一回より多く置換されることがで
きる。
【００６１】式（Ｉ）の新規化合物の例は、様々な割合
のα−メチル化α，ω−ジアミノカルボン酸構成要素を
有する式（Ｉ−ａ）のペプチド核酸である。
のα−メチル化α，ω−ジアミノカルボン酸構成要素を
有する式（Ｉ−ａ）のペプチド核酸である。
【００６２】
【化３】
【００６３】ｎは２、３または４であり、ｒは０または
１で少なくとも一回は１であり、ｓは１−３０である。
１で少なくとも一回は１であり、ｓは１−３０である。
【００６４】
【化４】
【００６５】など。
【００６６】この型の化合物において、天然の核酸の糖
リン酸バックボーンは、アミノエチルグリシン構成要素
に結合した、Ｎ−メチルリジン、Ｎ−メチルオルニチン
またはＮ−メチル−２，４−ジアミノ酪酸のようなαメ
チル化α，ω−ジアミノカルボン酸で置き換えられる。
核酸塩基は、アシルスペーサーを介してα−アミノ基に
結合される。
リン酸バックボーンは、アミノエチルグリシン構成要素
に結合した、Ｎ−メチルリジン、Ｎ−メチルオルニチン
またはＮ−メチル−２，４−ジアミノ酪酸のようなαメ
チル化α，ω−ジアミノカルボン酸で置き換えられる。
核酸塩基は、アシルスペーサーを介してα−アミノ基に
結合される。
【００６７】実験の記述 一般項モノマーの構成要素の合成 市販されているδ−Ｎ−Ｂｏｃ−保護したＬ−オルニチ
ンメチルエステル１で開始し、還元的アミノ化（例え
ば、シアノホウ水素化ナトリウムの存在下でベンズアル
デヒド）によりα−アミノ基上にベンジル保護基を導入
する（化合物２）。次に、（３を形成するために、例え
ば炭酸カリウムの存在下でヨウ化メチルと反応させるこ
とにより）α−Ｎ−メチル化を行い、そしてその後、Ｎ
−ベンジル保護基を水素化によりもう一度取り除く。例
えば、Ｎ’−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ−エ
チルカルボジイミド（ＥＤＣＩ）及び１−ヒドロキシ−
１Ｈ−ベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）の存在下で、化
合物４を１−カルボキシメチルチミンと反応させること
により、核酸塩基を導入する。５を加水分解することに
より、オリゴマー化に適した構築ブロック６を得る。
ンメチルエステル１で開始し、還元的アミノ化（例え
ば、シアノホウ水素化ナトリウムの存在下でベンズアル
デヒド）によりα−アミノ基上にベンジル保護基を導入
する（化合物２）。次に、（３を形成するために、例え
ば炭酸カリウムの存在下でヨウ化メチルと反応させるこ
とにより）α−Ｎ−メチル化を行い、そしてその後、Ｎ
−ベンジル保護基を水素化によりもう一度取り除く。例
えば、Ｎ’−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ−エ
チルカルボジイミド（ＥＤＣＩ）及び１−ヒドロキシ−
１Ｈ−ベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）の存在下で、化
合物４を１−カルボキシメチルチミンと反応させること
により、核酸塩基を導入する。５を加水分解することに
より、オリゴマー化に適した構築ブロック６を得る。
【００６８】
【化５】
【００６９】類似した方法で、他の核酸塩基及びリジン
または２，４−ジアミノ酪酸のような他のα，ω−ジア
ミノカルボン酸の誘導体を得ることができる。Ｄ−アミ
ノ酸誘導体をＬ−アミノ酸誘導体の代わりに用いること
もできる。２，４−ジアミノ酪酸誘導体の場合、開始化
合物としてグルタミン酸を用いて合成を行うこともでき
る。
または２，４−ジアミノ酪酸のような他のα，ω−ジア
ミノカルボン酸の誘導体を得ることができる。Ｄ−アミ
ノ酸誘導体をＬ−アミノ酸誘導体の代わりに用いること
もできる。２，４−ジアミノ酪酸誘導体の場合、開始化
合物としてグルタミン酸を用いて合成を行うこともでき
る。
【００７０】Ｆｍｏｃ保護したＬ−グルタミン酸７で開
始して、ｐ−トルエンスルホン酸の存在下でパラホルム
アルデヒドとの反応により、オキサゾリジノン８を生じ
る。次に、α−Ｆｍｏｃ−γ−Ｚ−保護したオキサゾリ
ジノン誘導体９を得るために、ベンジルアルコールの存
在下でクルチウス分解を行う。９をトリエチルシラン及
びＴＦＡと反応させることにより、α−Ｎ−メチル化
２，４−ジアミノ酪酸誘導体１０を得る。セシウム塩法
に従ってヨウ化メチルとエステル化すると、１１を生じ
る。Ｆｍｏｃ保護基をピペリジンで除き、続いて核酸塩
基（例えば、カルボキシメチルチミン）を導入した後、
化合物１２を得る。メチルエステルを加水分解し、Ｚ保
護基を除き、続いてＢｏｃ保護基を導入した後、固相合
成に適した構築ブロック１３を得る。
始して、ｐ−トルエンスルホン酸の存在下でパラホルム
アルデヒドとの反応により、オキサゾリジノン８を生じ
る。次に、α−Ｆｍｏｃ−γ−Ｚ−保護したオキサゾリ
ジノン誘導体９を得るために、ベンジルアルコールの存
在下でクルチウス分解を行う。９をトリエチルシラン及
びＴＦＡと反応させることにより、α−Ｎ−メチル化
２，４−ジアミノ酪酸誘導体１０を得る。セシウム塩法
に従ってヨウ化メチルとエステル化すると、１１を生じ
る。Ｆｍｏｃ保護基をピペリジンで除き、続いて核酸塩
基（例えば、カルボキシメチルチミン）を導入した後、
化合物１２を得る。メチルエステルを加水分解し、Ｚ保
護基を除き、続いてＢｏｃ保護基を導入した後、固相合
成に適した構築ブロック１３を得る。
【００７１】
【化６】
【００７２】オリゴマー化 オリゴマーを形成するための構築ブロックの連結を溶液
中で行うことができるが、好ましくは固相合成により行
う（Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ、Ｒ．Ｂ．、Ｊ．Ａｍ．Ｃｈ
ｅｍ．Ｓｏｃ．、８５、（１９６３、２１４９）を参
照）。好ましくは、ペプチド合成機、特にＡｐｐｌｉｅ
ｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓモデル４３１−Ａをこの目的
のために用いる。様々な市販されている樹脂をポリマー
担体として使用でき、Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔ
ｅｍｓにより供給されるＰＡＭ、ＭＢＨＡ及びＨＭＰ樹
脂を用いることが好ましい。従来のペプチド合成の類推
で、保護基法の的確な使用、好ましくはＦｍｏｃまたは
Ｂｏｃ法の使用により、構築ブロックをＮ末端で連結す
る。通例、ヒドロキシベンゾトリアゾール／ジシクロヘ
キシルカルボジイミドとの反応により、Ｎ−メチル−２
−ピロリドン（ＮＭＰ）中で、そうでなければペプチド
化学から既知である他の活性化法（例えば、ＮＭＰ、ま
たはＤＭＦ、ＤＭＳＯ、もしくはＤＣＭのような他の溶
媒中、ＴＢＴＵ、ＨＢＴＵ、ＢＯＰ、ＰｙＢＯＰ等のよ
うなｕｒｏｎｉｕｍ塩）を用いて活性化を行う。オリゴ
マー化後、ＨＦまたはトリフルオロメタンスルホン酸
（Ｂｏｃ法；ＰＡＭ樹脂またはＭＢＨＡ樹脂）のような
特別な開裂剤を用いて、またはトリフルオロ酢酸（Ｆｍ
ｏｃ法；ＨＭＰ樹脂）を用いて、固相に結合した化合物
を分離し、そして濾過によりポリマー担体から取り除
く。用いた方法の詳細な説明を含んでいるよく知られた
総説文献の例は、ａ）Ｂａｒａｎｙ、Ｇ．、Ｋｎｅｉｂ
−Ｃｏｒｄｏｎｉｅｒ、Ｎ．、Ｍｕｌｌｅｎ、Ｄ．
Ｇ．、Ｉｎｔ．Ｊ．Ｐｅｐｔ．Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｒｅ
ｓ．、３０、１９８７、７０５ｆｆ及びｂ）Ｆｉｅｌｄ
ｓ、Ｇ．Ｂ．Ｎｏｂｌｅ、Ｒ．Ｃ．、Ｉｎｔ．Ｊ．Ｐｅ
ｐｔ．ＰｒｏｔｅｉｎＲｅｓ．、３５、１９９０、１６
１−２１４である。分取ＨＰＬＣにより、特に、ＲＰ８
カラム及びアセトニトリルまたはアセトニトリル／水中
のトリフルオロ酢酸の上昇勾配のような溶媒混合物を用
いた逆相法を用いて、反応生成物を単離する。これらの
化合物を特に質量分光学により特徴づける。
中で行うことができるが、好ましくは固相合成により行
う（Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ、Ｒ．Ｂ．、Ｊ．Ａｍ．Ｃｈ
ｅｍ．Ｓｏｃ．、８５、（１９６３、２１４９）を参
照）。好ましくは、ペプチド合成機、特にＡｐｐｌｉｅ
ｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓモデル４３１−Ａをこの目的
のために用いる。様々な市販されている樹脂をポリマー
担体として使用でき、Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔ
ｅｍｓにより供給されるＰＡＭ、ＭＢＨＡ及びＨＭＰ樹
脂を用いることが好ましい。従来のペプチド合成の類推
で、保護基法の的確な使用、好ましくはＦｍｏｃまたは
Ｂｏｃ法の使用により、構築ブロックをＮ末端で連結す
る。通例、ヒドロキシベンゾトリアゾール／ジシクロヘ
キシルカルボジイミドとの反応により、Ｎ−メチル−２
−ピロリドン（ＮＭＰ）中で、そうでなければペプチド
化学から既知である他の活性化法（例えば、ＮＭＰ、ま
たはＤＭＦ、ＤＭＳＯ、もしくはＤＣＭのような他の溶
媒中、ＴＢＴＵ、ＨＢＴＵ、ＢＯＰ、ＰｙＢＯＰ等のよ
うなｕｒｏｎｉｕｍ塩）を用いて活性化を行う。オリゴ
マー化後、ＨＦまたはトリフルオロメタンスルホン酸
（Ｂｏｃ法；ＰＡＭ樹脂またはＭＢＨＡ樹脂）のような
特別な開裂剤を用いて、またはトリフルオロ酢酸（Ｆｍ
ｏｃ法；ＨＭＰ樹脂）を用いて、固相に結合した化合物
を分離し、そして濾過によりポリマー担体から取り除
く。用いた方法の詳細な説明を含んでいるよく知られた
総説文献の例は、ａ）Ｂａｒａｎｙ、Ｇ．、Ｋｎｅｉｂ
−Ｃｏｒｄｏｎｉｅｒ、Ｎ．、Ｍｕｌｌｅｎ、Ｄ．
Ｇ．、Ｉｎｔ．Ｊ．Ｐｅｐｔ．Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｒｅ
ｓ．、３０、１９８７、７０５ｆｆ及びｂ）Ｆｉｅｌｄ
ｓ、Ｇ．Ｂ．Ｎｏｂｌｅ、Ｒ．Ｃ．、Ｉｎｔ．Ｊ．Ｐｅ
ｐｔ．ＰｒｏｔｅｉｎＲｅｓ．、３５、１９９０、１６
１−２１４である。分取ＨＰＬＣにより、特に、ＲＰ８
カラム及びアセトニトリルまたはアセトニトリル／水中
のトリフルオロ酢酸の上昇勾配のような溶媒混合物を用
いた逆相法を用いて、反応生成物を単離する。これらの
化合物を特に質量分光学により特徴づける。
【００７３】ハイブリダイゼーション特性 ハイブリダイゼーション特性、並びにヌクレアーゼ及び
プロテアーゼに対する安定性の研究を、ＥＰ第６４６
５９５Ａ１号における実験の類推で行った。
プロテアーゼに対する安定性の研究を、ＥＰ第６４６
５９５Ａ１号における実験の類推で行った。
【００７４】実験項モノマー
【００７５】
実施例１：δ−Ｎ−Ｂｏｃ−α−Ｎ−ベンジル−Ｌ−オ
ルニチンメチルエステル１３．０３ｇのω−Ｎ−Ｂｏｃ
−Ｌ−オルニチンメチルエステル塩酸塩を５０ｍｌのメ
タノールに溶解する。この溶液にモレキュラーシーブ
（３Å）及びトリエチルアミン（６．９ｍｌ）を加え、
その全部を室温で３０分間撹拌する。次に、ベンズアル
デヒド（４．９３ｍｌ）、続いてＮａＢＨ3ＣＮ（３．
１９ｇ）を加え、この混合物を室温で一晩撹拌する。反
応が終了した後、混合物を乾燥状態まで蒸発させ、そし
て残留物を酢酸エチルに溶解し、この溶液をＮａＨＣＯ
3の飽和溶液及びＮａＣｌの飽和溶液で数回連続して洗
浄する。有機相をＮａ2ＳＯ4上で乾燥させる。その後、
乾燥状態まで蒸発させ、そして残留物をシリカゲル上で
クロマトグラフィー（移動相：酢酸エチル／ｎ−ヘキサ
ン １：１）により分離する。
ルニチンメチルエステル１３．０３ｇのω−Ｎ−Ｂｏｃ
−Ｌ−オルニチンメチルエステル塩酸塩を５０ｍｌのメ
タノールに溶解する。この溶液にモレキュラーシーブ
（３Å）及びトリエチルアミン（６．９ｍｌ）を加え、
その全部を室温で３０分間撹拌する。次に、ベンズアル
デヒド（４．９３ｍｌ）、続いてＮａＢＨ3ＣＮ（３．
１９ｇ）を加え、この混合物を室温で一晩撹拌する。反
応が終了した後、混合物を乾燥状態まで蒸発させ、そし
て残留物を酢酸エチルに溶解し、この溶液をＮａＨＣＯ
3の飽和溶液及びＮａＣｌの飽和溶液で数回連続して洗
浄する。有機相をＮａ2ＳＯ4上で乾燥させる。その後、
乾燥状態まで蒸発させ、そして残留物をシリカゲル上で
クロマトグラフィー（移動相：酢酸エチル／ｎ−ヘキサ
ン １：１）により分離する。
【００７６】収量：９．１３ｇ Ｒf：０．４７ 移動相：酢酸エチル／ｎ−ヘキサン
１：１ 実施例２：δ−Ｎ−Ｂｏｃ−α−Ｎ−ベンジル−α−Ｎ
−メチル−Ｌ−オルニチンメチルエステル ５ｇのδ−Ｎ−Ｂｏｃ−α−Ｎ−ベンジル−Ｌ−オルニ
チンメチルエステルを５０ｍｌのＤＭＦに溶解する。次
に、２．０５ｇのＫ2ＣＯ3を加える。最後に、得られた
懸濁液にヨウ化メチル（０．９２ｍｌ）をゆっくりと一
滴ずつ加え、その全部を室温で一晩撹拌する。その後、
ＤＭＦを蒸留して除き、そして残留物を酢酸エチルに溶
解する。有機相をチオ硫酸ナトリウムの１０％溶液及び
ＮａＣｌ溶液で連続して洗浄する。続いて、有機相をＮ
ａ2ＳＯ4上で乾燥させ、次に乾燥状態まで蒸発させる。
収量：４．７７ｇ Ｒf：０．４９ 移動相：酢酸エチル／ｎ−ヘキサン
１：２ 実施例３：δ−Ｎ−Ｂｏｃ−α−Ｎ−Ｌ−オルニチンメ
チルエステル ４．７７ｇのδ−Ｎ−Ｂｏｃ−α−Ｎ−ベンジル−α−
Ｎ−メチル−Ｌ−オルニチンメチルエステルを１５０ｍ
ｌのメタノールに溶解する。この溶液に木炭上パラジウ
ム（１０％、１ｇ）を加え、水素化を一晩行う。次に、
触媒を吸引で濾過して除き、濾過液を乾燥状態まで蒸発
させる。
１：１ 実施例２：δ−Ｎ−Ｂｏｃ−α−Ｎ−ベンジル−α−Ｎ
−メチル−Ｌ−オルニチンメチルエステル ５ｇのδ−Ｎ−Ｂｏｃ−α−Ｎ−ベンジル−Ｌ−オルニ
チンメチルエステルを５０ｍｌのＤＭＦに溶解する。次
に、２．０５ｇのＫ2ＣＯ3を加える。最後に、得られた
懸濁液にヨウ化メチル（０．９２ｍｌ）をゆっくりと一
滴ずつ加え、その全部を室温で一晩撹拌する。その後、
ＤＭＦを蒸留して除き、そして残留物を酢酸エチルに溶
解する。有機相をチオ硫酸ナトリウムの１０％溶液及び
ＮａＣｌ溶液で連続して洗浄する。続いて、有機相をＮ
ａ2ＳＯ4上で乾燥させ、次に乾燥状態まで蒸発させる。
収量：４．７７ｇ Ｒf：０．４９ 移動相：酢酸エチル／ｎ−ヘキサン
１：２ 実施例３：δ−Ｎ−Ｂｏｃ−α−Ｎ−Ｌ−オルニチンメ
チルエステル ４．７７ｇのδ−Ｎ−Ｂｏｃ−α−Ｎ−ベンジル−α−
Ｎ−メチル−Ｌ−オルニチンメチルエステルを１５０ｍ
ｌのメタノールに溶解する。この溶液に木炭上パラジウ
ム（１０％、１ｇ）を加え、水素化を一晩行う。次に、
触媒を吸引で濾過して除き、濾過液を乾燥状態まで蒸発
させる。
【００７７】収量：３．３７ｇ Ｒf：０．５５ 移動相：ＣＨ2Ｃｌ2／ＣＨ3ＯＨ
９：１ 実施例４：δ−Ｎ−Ｂｏｃ−α−Ｎ−メチル−α−Ｎ−
（チミン−１−イル）−アセチル−Ｌ−オルニチンメチ
ルエステル ６．２３ｇの１−カルボキシメチルチミンを１００ｍｌ
のＤＭＦに溶解し、この溶液をー３０℃まで冷却する。
次に、６．９ｇの１−ヒドロキシ−１Ｈ−ベンゾトリア
ゾール（ＨＯＢｔ）、続いて８．５ｇのＮ’−（３−ジ
メチルアミノプロピル）−Ｎ−エチルカルボジイミド
（ＥＤＣＩ）を加える。この混合物を−３０℃でさらに
１５分間撹拌したままにする。その後、ＤＭＦに溶解し
た３．３７ｇのδ−Ｎ−Ｂｏｃ−α−Ｎ−メチル−Ｌ−
オルニチンメチルエステルを一滴ずつ加える。添加を終
了した後、この混合物をトリエチルアミンで９のｐＨに
調整し、そして−３０℃でさらに６０分間撹拌する。反
応を完了するために室温で一晩撹拌したままにする。こ
の後、混合物を乾燥状態まで蒸発させ、そして残留物を
酢酸エチルに溶解し、次に、その有機相をＨＣｌの１Ｎ
溶液、ＮａＨＣＯ3の飽和溶液、及びＮａＣｌの飽和溶
液で連続して洗浄する。続いて、有機相をＮａ2ＳＯ4上
で乾燥させ、次に乾燥状態まで蒸発させる。
９：１ 実施例４：δ−Ｎ−Ｂｏｃ−α−Ｎ−メチル−α−Ｎ−
（チミン−１−イル）−アセチル−Ｌ−オルニチンメチ
ルエステル ６．２３ｇの１−カルボキシメチルチミンを１００ｍｌ
のＤＭＦに溶解し、この溶液をー３０℃まで冷却する。
次に、６．９ｇの１−ヒドロキシ−１Ｈ−ベンゾトリア
ゾール（ＨＯＢｔ）、続いて８．５ｇのＮ’−（３−ジ
メチルアミノプロピル）−Ｎ−エチルカルボジイミド
（ＥＤＣＩ）を加える。この混合物を−３０℃でさらに
１５分間撹拌したままにする。その後、ＤＭＦに溶解し
た３．３７ｇのδ−Ｎ−Ｂｏｃ−α−Ｎ−メチル−Ｌ−
オルニチンメチルエステルを一滴ずつ加える。添加を終
了した後、この混合物をトリエチルアミンで９のｐＨに
調整し、そして−３０℃でさらに６０分間撹拌する。反
応を完了するために室温で一晩撹拌したままにする。こ
の後、混合物を乾燥状態まで蒸発させ、そして残留物を
酢酸エチルに溶解し、次に、その有機相をＨＣｌの１Ｎ
溶液、ＮａＨＣＯ3の飽和溶液、及びＮａＣｌの飽和溶
液で連続して洗浄する。続いて、有機相をＮａ2ＳＯ4上
で乾燥させ、次に乾燥状態まで蒸発させる。
【００７８】収量：３．９５ｇ Ｒf：０．８０ 移動相：ＣＨ2Ｃｌ2／ＣＨ3ＯＨ／Ｈ
ＯＡｃ ８０：２０：１ 実施例５：δ−Ｎ−Ｂｏｃ−α−Ｎ−メチル−α−Ｎ−
（チミン−１−イル）アセチル−Ｌ−オルニチン ３．９５ｇのδ−Ｎ−Ｂｏｃ−α−Ｎ−メチル−α−Ｎ
−（チミン−１−イル）アセチル−Ｌ−オルニチンメチ
ルエステルを１００ｍｌのジオキサンに溶解し、この溶
液に１０．２ｍｌの１Ｎ ＮａＯＨを加える。この混合
物を室温で２時間撹拌する。この後、さらに１０．２ｍ
ｌの１Ｎ ＮａＯＨを加え、その混合物を室温で一晩撹
拌する。次に、ジオキサンを蒸留して除き、そして残留
物に酢酸エチル及び１Ｎ ＨＣｌを加える。酸性化した
水相を酢酸エチルで数回逆抽出する。合わせた有機相を
Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥させ、最後に乾燥状態まで蒸発させ
る。
ＯＡｃ ８０：２０：１ 実施例５：δ−Ｎ−Ｂｏｃ−α−Ｎ−メチル−α−Ｎ−
（チミン−１−イル）アセチル−Ｌ−オルニチン ３．９５ｇのδ−Ｎ−Ｂｏｃ−α−Ｎ−メチル−α−Ｎ
−（チミン−１−イル）アセチル−Ｌ−オルニチンメチ
ルエステルを１００ｍｌのジオキサンに溶解し、この溶
液に１０．２ｍｌの１Ｎ ＮａＯＨを加える。この混合
物を室温で２時間撹拌する。この後、さらに１０．２ｍ
ｌの１Ｎ ＮａＯＨを加え、その混合物を室温で一晩撹
拌する。次に、ジオキサンを蒸留して除き、そして残留
物に酢酸エチル及び１Ｎ ＨＣｌを加える。酸性化した
水相を酢酸エチルで数回逆抽出する。合わせた有機相を
Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥させ、最後に乾燥状態まで蒸発させ
る。
【００７９】収量：２．９ｇ Ｒf：０．３１ 移動相：ＣＨ2Ｃｌ2／ＣＨ3ＯＨ／Ｈ
ＯＡｃ ８０：２０：１ 実施例６：δ−Ｎ−Ｂｏｃ−α−Ｎ−メチル−α−Ｎ−
（Ｎ4−Ｚ−シトシン−１−イル）アセチル−Ｌ−オル
ニチンメチルエステル ４．６９ｇのＮ4−Ｚ−１−カルボキシメチルシトシン
を１００ｍｌのＤＭＦに溶解し、そして実施例４の類推
で、この溶液を３．３６ｇのδ−Ｎ−Ｂｏｃ−α−Ｎ−
メチル−Ｌ−オルニチンメチルエステルと反応させる。
ＯＡｃ ８０：２０：１ 実施例６：δ−Ｎ−Ｂｏｃ−α−Ｎ−メチル−α−Ｎ−
（Ｎ4−Ｚ−シトシン−１−イル）アセチル−Ｌ−オル
ニチンメチルエステル ４．６９ｇのＮ4−Ｚ−１−カルボキシメチルシトシン
を１００ｍｌのＤＭＦに溶解し、そして実施例４の類推
で、この溶液を３．３６ｇのδ−Ｎ−Ｂｏｃ−α−Ｎ−
メチル−Ｌ−オルニチンメチルエステルと反応させる。
【００８０】収量：６．５ｇ Ｒf：０．５３ 移動相：ＣＨ2Ｃｌ2／ＣＨ3ＯＨ
９：１ 実施例７：δ−Ｎ−Ｂｏｃ−α−Ｎ−メチル−α−Ｎ−
（Ｎ4−Ｚ−シトシン−１−イル）アセチル−Ｌ−オル
ニチン ６．５ｇのδ−Ｎ−Ｂｏｃ−α−Ｎ−メチル−α−Ｎ−
（Ｎ4−Ｚ−シトシン−１−イル）アセチル−Ｌ−オル
ニチンメチルエステルを１００ｍｌのジオキサンに溶解
し、そして実施例５の類推で反応させる。
９：１ 実施例７：δ−Ｎ−Ｂｏｃ−α−Ｎ−メチル−α−Ｎ−
（Ｎ4−Ｚ−シトシン−１−イル）アセチル−Ｌ−オル
ニチン ６．５ｇのδ−Ｎ−Ｂｏｃ−α−Ｎ−メチル−α−Ｎ−
（Ｎ4−Ｚ−シトシン−１−イル）アセチル−Ｌ−オル
ニチンメチルエステルを１００ｍｌのジオキサンに溶解
し、そして実施例５の類推で反応させる。
【００８１】収量：５．０６ｇ Ｒf：０．４５ 移動相：ＣＨ2Ｃｌ2／ＣＨ3ＯＨ／Ｈ
ＯＡｃ ８０：２０：１ 実施例８：α−Ｎ−ベンジル−γ−Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−
２，４−ジアミノ酪酸メチル γ−Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−２，４−ジアミノ酪酸メチル
（２．３３ｇ）を４０ｍｌのＣＨ3ＯＨに溶解する。こ
の溶液に１．１５ｇのベンズアルデヒドを加え、その混
合物を室温で１５分間撹拌する。次に、６６０ｍｇのシ
アノホウ水素化ナトリウムを加え、この混合物を室温で
一晩撹拌する。最後にこれを乾燥状態まで蒸発させ、そ
して残留物を酢酸エチルに溶解し、この溶液をＮａＨＣ
Ｏ3の飽和溶液及びＮａＣｌの飽和溶液で数回洗浄す
る。洗浄後、有機相をＮａ2ＳＯ4上で乾燥させ、次に乾
燥状態まで蒸発させる。残留物をシリカゲル上でクロマ
トグラフィー（移動相：酢酸エチル／ｎ−ヘキサン
１：１）により分離する。
ＯＡｃ ８０：２０：１ 実施例８：α−Ｎ−ベンジル−γ−Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−
２，４−ジアミノ酪酸メチル γ−Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−２，４−ジアミノ酪酸メチル
（２．３３ｇ）を４０ｍｌのＣＨ3ＯＨに溶解する。こ
の溶液に１．１５ｇのベンズアルデヒドを加え、その混
合物を室温で１５分間撹拌する。次に、６６０ｍｇのシ
アノホウ水素化ナトリウムを加え、この混合物を室温で
一晩撹拌する。最後にこれを乾燥状態まで蒸発させ、そ
して残留物を酢酸エチルに溶解し、この溶液をＮａＨＣ
Ｏ3の飽和溶液及びＮａＣｌの飽和溶液で数回洗浄す
る。洗浄後、有機相をＮａ2ＳＯ4上で乾燥させ、次に乾
燥状態まで蒸発させる。残留物をシリカゲル上でクロマ
トグラフィー（移動相：酢酸エチル／ｎ−ヘキサン
１：１）により分離する。
【００８２】収量：７００ｍｇ Ｒf：０．４７ 移動相：酢酸エチル／ｎ−ヘキサン
１：１ 実施例９：α−Ｎ−ベンジル−α−Ｎ−メチル−γ−Ｎ
−Ｂｏｃ−Ｌ−２，４−ジアミノ酪酸メチル α−Ｎ−ベンジル−γ−Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−２，４−ジア
ミノ酪酸メチル（１．５６ｇ）をＤＭＦに溶解し、次
に、７０１ｍｇのＫ2ＣＯ3及び３０９μｌのＣＨ3Ｉを
加える。続いて、この混合物を室温で３日間撹拌する。
この後、これを乾燥状態まで濃縮し、そして残留物を酢
酸エチルに溶解する。有機相をチオ硫酸ナトリウムの１
０％溶液及びＮａＣｌの飽和溶液で連続して洗浄する。
相の分離後、有機相をＮａ2ＳＯ4上で乾燥させ、そして
溶媒を蒸発させる。
１：１ 実施例９：α−Ｎ−ベンジル−α−Ｎ−メチル−γ−Ｎ
−Ｂｏｃ−Ｌ−２，４−ジアミノ酪酸メチル α−Ｎ−ベンジル−γ−Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−２，４−ジア
ミノ酪酸メチル（１．５６ｇ）をＤＭＦに溶解し、次
に、７０１ｍｇのＫ2ＣＯ3及び３０９μｌのＣＨ3Ｉを
加える。続いて、この混合物を室温で３日間撹拌する。
この後、これを乾燥状態まで濃縮し、そして残留物を酢
酸エチルに溶解する。有機相をチオ硫酸ナトリウムの１
０％溶液及びＮａＣｌの飽和溶液で連続して洗浄する。
相の分離後、有機相をＮａ2ＳＯ4上で乾燥させ、そして
溶媒を蒸発させる。
【００８３】収量：７．４５ｇ Ｒf：０．６５ 移動相：酢酸エチル／ｎ−ヘキサン
１：１ 実施例１０：δ−Ｎ−メチル−γ−Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−
２，４−ジアミノ酪酸メチル １．４５ｇのα−Ｎ−ベンジル−α−Ｎ−メチル−γ−
Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−２，４−ジアミノ酪酸メチルを１５０
ｍｌのＣＨ3ＯＨに溶解し、Ｐｄ／Ｃ（１０％）上で水
素化する。反応が終了した後、触媒を濾過して除き、濾
過液を乾燥状態まで蒸発させる。
１：１ 実施例１０：δ−Ｎ−メチル−γ−Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−
２，４−ジアミノ酪酸メチル １．４５ｇのα−Ｎ−ベンジル−α−Ｎ−メチル−γ−
Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−２，４−ジアミノ酪酸メチルを１５０
ｍｌのＣＨ3ＯＨに溶解し、Ｐｄ／Ｃ（１０％）上で水
素化する。反応が終了した後、触媒を濾過して除き、濾
過液を乾燥状態まで蒸発させる。
【００８４】収量：１．０ｇ Ｒf：０．５１ 移動相：ＣＨ2Ｃｌ2／ＣＨ3ＯＨ
９：１ 実施例１１：α−Ｎ−メチル−α−Ｎ−（チミン−１−
イル）アセチル−γ−Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−２，４−ジアミ
ノ酪酸メチル 実施例４の類推で、１．１ｇのα−Ｎ−メチル−γ−Ｎ
−Ｂｏｃ−Ｌ−２，４−ジアミノ酪酸メチルを２．１ｇ
の１−カルボキシメチルチミン、２．０５ｇのＨＯＢ
ｔ、及び２．９ｇのＥＤＣＩと反応させる。
９：１ 実施例１１：α−Ｎ−メチル−α−Ｎ−（チミン−１−
イル）アセチル−γ−Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−２，４−ジアミ
ノ酪酸メチル 実施例４の類推で、１．１ｇのα−Ｎ−メチル−γ−Ｎ
−Ｂｏｃ−Ｌ−２，４−ジアミノ酪酸メチルを２．１ｇ
の１−カルボキシメチルチミン、２．０５ｇのＨＯＢ
ｔ、及び２．９ｇのＥＤＣＩと反応させる。
【００８５】収量：１．５３ｇ Ｒf：０．５５ 移動相：ＣＨ2Ｃｌ2／ＣＨ3ＯＨ
９：１ 実施例１２：α−Ｎ−メチル−α−Ｎ−（チミン−１−
イル）アセチル−γ−Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−２，４−ジアミ
ノ酪酸 実施例５の類推で、１．５ｇのα−Ｎ−メチル−α−Ｎ
−（チミン−１−イル）アセチル−γ−Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ
−２，４−ジアミノ酪酸メチルを１Ｎ ＮａＯＨとの反
応により加水分解する。
９：１ 実施例１２：α−Ｎ−メチル−α−Ｎ−（チミン−１−
イル）アセチル−γ−Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−２，４−ジアミ
ノ酪酸 実施例５の類推で、１．５ｇのα−Ｎ−メチル−α−Ｎ
−（チミン−１−イル）アセチル−γ−Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ
−２，４−ジアミノ酪酸メチルを１Ｎ ＮａＯＨとの反
応により加水分解する。
【００８６】収量：３００ｍｇ Ｒf：０．２８ 移動相：ＣＨ2Ｃｌ2／ＣＨ3ＯＨ／Ｈ
ＯＡｃ ８０：２０：１ 実施例１３：α−Ｎ−Ｆｍｏｃ−４−（Ｎ−Ｚ−２−ア
ミノ−エチル）−オキサゾリジン−５−オン Ｆｍｏｃ−Ｌ−グルタミン酸（９．２２ｇ）を最初に５
００ｍｌのトルエンに添加し、次に、パラホルムアルデ
ヒド（４．８５ｇ）及びｐ−トルエンスホン酸（４８５
ｍｇ）を加える。続いて、この混合物を水分離機上、還
流下で２．５時間沸騰させる。この後、混合物を室温ま
で冷却させ、そしてベンジルアルコール（３ｇ）、トリ
エチルアミン（３．８ｍｌ）、及びアジ化ジフェニルホ
スホリル（５．９ｍｌ）を加える。最後に、この溶液を
９０から９５℃までで４時間加熱する。その後、トルエ
ン相をクエン酸溶液、ＮａＨＣＯ3の飽和溶液、水、及
びＮａＣｌの飽和溶液で数回連続して洗浄する。これを
Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥させ、次に乾燥状態まで蒸発させ
る。生成物を酢酸エチル／ｎ−ヘキサン １：１から沈
殿させる。
ＯＡｃ ８０：２０：１ 実施例１３：α−Ｎ−Ｆｍｏｃ−４−（Ｎ−Ｚ−２−ア
ミノ−エチル）−オキサゾリジン−５−オン Ｆｍｏｃ−Ｌ−グルタミン酸（９．２２ｇ）を最初に５
００ｍｌのトルエンに添加し、次に、パラホルムアルデ
ヒド（４．８５ｇ）及びｐ−トルエンスホン酸（４８５
ｍｇ）を加える。続いて、この混合物を水分離機上、還
流下で２．５時間沸騰させる。この後、混合物を室温ま
で冷却させ、そしてベンジルアルコール（３ｇ）、トリ
エチルアミン（３．８ｍｌ）、及びアジ化ジフェニルホ
スホリル（５．９ｍｌ）を加える。最後に、この溶液を
９０から９５℃までで４時間加熱する。その後、トルエ
ン相をクエン酸溶液、ＮａＨＣＯ3の飽和溶液、水、及
びＮａＣｌの飽和溶液で数回連続して洗浄する。これを
Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥させ、次に乾燥状態まで蒸発させ
る。生成物を酢酸エチル／ｎ−ヘキサン １：１から沈
殿させる。
【００８７】収量：３．６１ｇ Ｒf：０．４９ 移動相：酢酸エチル／ｎ−ヘキサン
１：１ 実施例１４：α−Ｎ−Ｆｍｏｃ−α−Ｎ−メチル−γ−
Ｎ−Ｚ−Ｌ−２，４−ジアミノ酪酸 １４．５ｇのα−Ｎ−Ｆｍｏｃ−４−（Ｎ−Ｚ−２−ア
ミノエチル）−オキサゾリジン−５−オンを１５０ｍｌ
のＣＨ2Ｃｌ2に溶解する。この溶液に１０．３ｇのトリ
エチルシラン、次いで１５０ｍｌのＴＦＡを加え、この
全部を室温で１８時間撹拌したままにする。次に、混合
物を乾燥状態まで蒸発させ、そして残留物をトルエンで
数回共蒸留する。最後に、残留物を、精製のために移動
相としてＣＨ2Ｃｌ2／ＣＨ3ＯＨ ４：１を用いてシリカ
ゲルカラム上でクロマトグラフィーにより分離する。
１：１ 実施例１４：α−Ｎ−Ｆｍｏｃ−α−Ｎ−メチル−γ−
Ｎ−Ｚ−Ｌ−２，４−ジアミノ酪酸 １４．５ｇのα−Ｎ−Ｆｍｏｃ−４−（Ｎ−Ｚ−２−ア
ミノエチル）−オキサゾリジン−５−オンを１５０ｍｌ
のＣＨ2Ｃｌ2に溶解する。この溶液に１０．３ｇのトリ
エチルシラン、次いで１５０ｍｌのＴＦＡを加え、この
全部を室温で１８時間撹拌したままにする。次に、混合
物を乾燥状態まで蒸発させ、そして残留物をトルエンで
数回共蒸留する。最後に、残留物を、精製のために移動
相としてＣＨ2Ｃｌ2／ＣＨ3ＯＨ ４：１を用いてシリカ
ゲルカラム上でクロマトグラフィーにより分離する。
【００８８】収量：８．８ｇ Ｒf：０．４１ 移動相：ＣＨ2Ｃｌ2／ＣＨ3ＯＨ
４：１ 実施例１５：α−Ｎ−Ｆｍｏｃ−α−Ｎ−メチル−γ−
Ｎ−Ｚ−Ｌ−２，４−ジアミノ酪酸メチル ５３０ｍｇのα−Ｎ−Ｆｍｏｃ−α−Ｎ−メチル−γ−
Ｎ−Ｚ−Ｌ−２，４−ジアミノ酪酸を水／エタノール
（１：１）の混合物に溶解し、そして２００ｍｇのＣｓ
2ＣＯ3を加える。次に、この全部を室温で１時間撹拌す
る。この後、混合物を乾燥状態まで蒸発させ、そして残
留物をトルエンで数回共蒸留する。次に最後にこれをＤ
ＭＦに溶解し、その後この溶液に１５５ｍｇのヨウ化メ
チルを加える。最後に、この混合物を室温で一晩撹拌す
る。反応が終了した後、混合物を乾燥状態まで蒸発さ
せ、そして残留物をトルエンで数回共蒸留する。次に、
これを酢酸エチルに溶解し、そして有機相をＮａＣｌの
飽和溶液、ＮａＨＣＯ3の飽和溶液、及びもう一度Ｎａ
Ｃｌの飽和溶液で連続して洗浄する。有機相をＮａ2Ｓ
Ｏ4上で乾燥させ、その後、乾燥状態まで蒸発させる。
精製のために、残留物をシリカゲル上でクロマトグラフ
ィー（移動相：酢酸エチル／ｎ−ヘキサン １：１）に
より分離する。
４：１ 実施例１５：α−Ｎ−Ｆｍｏｃ−α−Ｎ−メチル−γ−
Ｎ−Ｚ−Ｌ−２，４−ジアミノ酪酸メチル ５３０ｍｇのα−Ｎ−Ｆｍｏｃ−α−Ｎ−メチル−γ−
Ｎ−Ｚ−Ｌ−２，４−ジアミノ酪酸を水／エタノール
（１：１）の混合物に溶解し、そして２００ｍｇのＣｓ
2ＣＯ3を加える。次に、この全部を室温で１時間撹拌す
る。この後、混合物を乾燥状態まで蒸発させ、そして残
留物をトルエンで数回共蒸留する。次に最後にこれをＤ
ＭＦに溶解し、その後この溶液に１５５ｍｇのヨウ化メ
チルを加える。最後に、この混合物を室温で一晩撹拌す
る。反応が終了した後、混合物を乾燥状態まで蒸発さ
せ、そして残留物をトルエンで数回共蒸留する。次に、
これを酢酸エチルに溶解し、そして有機相をＮａＣｌの
飽和溶液、ＮａＨＣＯ3の飽和溶液、及びもう一度Ｎａ
Ｃｌの飽和溶液で連続して洗浄する。有機相をＮａ2Ｓ
Ｏ4上で乾燥させ、その後、乾燥状態まで蒸発させる。
精製のために、残留物をシリカゲル上でクロマトグラフ
ィー（移動相：酢酸エチル／ｎ−ヘキサン １：１）に
より分離する。
【００８９】収量：２６０ｍｇ Ｒf：０．５７ 移動相：酢酸エチル／ｎ−ヘキサン
１：１ 実施例１６：α−Ｎ−メチル−γ−Ｎ−Ｚ−Ｌ−２，４
−ジアミノ酪酸メチル ５００ｍｇのα−Ｎ−Ｆｍｏｃ−α−Ｎ−メチル−γ−
Ｎ−Ｚ−Ｌ−２，４−ジアミノ酪酸メチルをＤＭＦに溶
解し、この溶液を０．１５ｍｌのピペリジンで室温で１
０分間処理する。次に、この混合物を乾燥状態まで蒸発
させ、残留物をＣＨ2Ｃｌ2に溶解し、そして有機相を水
で洗浄する。相を分離した後、有機相をＮａ2ＳＯ4上で
乾燥させ、そして乾燥状態まで蒸発させる。精製のため
に、この残留物をシリカゲル上でクロマトグラフィー
（移動相：ＣＨ2Ｃｌ2／ＣＨ3ＯＨ１０：１）により分
離する。
１：１ 実施例１６：α−Ｎ−メチル−γ−Ｎ−Ｚ−Ｌ−２，４
−ジアミノ酪酸メチル ５００ｍｇのα−Ｎ−Ｆｍｏｃ−α−Ｎ−メチル−γ−
Ｎ−Ｚ−Ｌ−２，４−ジアミノ酪酸メチルをＤＭＦに溶
解し、この溶液を０．１５ｍｌのピペリジンで室温で１
０分間処理する。次に、この混合物を乾燥状態まで蒸発
させ、残留物をＣＨ2Ｃｌ2に溶解し、そして有機相を水
で洗浄する。相を分離した後、有機相をＮａ2ＳＯ4上で
乾燥させ、そして乾燥状態まで蒸発させる。精製のため
に、この残留物をシリカゲル上でクロマトグラフィー
（移動相：ＣＨ2Ｃｌ2／ＣＨ3ＯＨ１０：１）により分
離する。
【００９０】収量：２１６ｍｇ Ｒf：０．５８ 移動相：ＣＨ2Ｃｌ2／ＣＨ3ＯＨ １
０：１ 実施例１７：γ−Ｎ−Ｚ−α−Ｎ−メチル−α−Ｎ−
（チミン−１−イル）アセチル−Ｌ−２，４−ジアミノ
酪酸メチル 実施例４の類推で、２００ｍｇのγ−Ｚ−α−Ｎ−メチ
ル−Ｌ−２，４−ジアミノ酪酸メチルを、トリエチルア
ミンの存在下で１−カルボキシメチルチミン、ＥＤＣ
Ｉ、及びＨＯＢｔと反応させる。この操作（ｗｏｒｋｉ
ｎｇ−ｕｐ）の後得られる残留物を、精製のためにシリ
カゲル上でクロマトグラフィー（移動相：ＣＨ2Ｃｌ2／
ＣＨ3ＯＨ １０：１）により分離する。
０：１ 実施例１７：γ−Ｎ−Ｚ−α−Ｎ−メチル−α−Ｎ−
（チミン−１−イル）アセチル−Ｌ−２，４−ジアミノ
酪酸メチル 実施例４の類推で、２００ｍｇのγ−Ｚ−α−Ｎ−メチ
ル−Ｌ−２，４−ジアミノ酪酸メチルを、トリエチルア
ミンの存在下で１−カルボキシメチルチミン、ＥＤＣ
Ｉ、及びＨＯＢｔと反応させる。この操作（ｗｏｒｋｉ
ｎｇ−ｕｐ）の後得られる残留物を、精製のためにシリ
カゲル上でクロマトグラフィー（移動相：ＣＨ2Ｃｌ2／
ＣＨ3ＯＨ １０：１）により分離する。
【００９１】収量：２９０ｍｇ Ｒf：０．４９ 移動相：ＣＨ2Ｃｌ2／ＣＨ3ＯＨ １
０：１ 実施例１８：δ−Ｎ−Ｂｏｃ−α−Ｎ−メチル−α−Ｎ
−（Ｎ6−Ｚ−アデニン−９−イル）アセチル−Ｌ−オ
ルニチンメチルエステル ０．８ｇのＮ6−Ｚ−カルボキシメチルアデニンを５０
ｍｌのＤＭＦに溶解し、そして実施例４の類推で、１．
１ｇのδ−Ｎ−Ｂｏｃ−α−Ｎ−メチル−Ｌ−オルニチ
ンメチルエステルと反応させる。
０：１ 実施例１８：δ−Ｎ−Ｂｏｃ−α−Ｎ−メチル−α−Ｎ
−（Ｎ6−Ｚ−アデニン−９−イル）アセチル−Ｌ−オ
ルニチンメチルエステル ０．８ｇのＮ6−Ｚ−カルボキシメチルアデニンを５０
ｍｌのＤＭＦに溶解し、そして実施例４の類推で、１．
１ｇのδ−Ｎ−Ｂｏｃ−α−Ｎ−メチル−Ｌ−オルニチ
ンメチルエステルと反応させる。
【００９２】収量：１．５３ｇ Ｒf：０．６２ 移動相：ＣＨ2Ｃｌ2／ＣＨ3ＯＨ １
０：１ 実施例１９：δ−Ｎ−Ｂｏｃ−α−Ｎ−メチル−α−Ｎ
−（Ｎ6−Ｚ−アデニン−９−イル）アセチル−Ｌ−オ
ルニチン １．５３ｇのδ−Ｎ−Ｂｏｃ−α−Ｎ−メチル−α−Ｎ
−（Ｎ6−Ｚ−アデニン−９−イル）アセチル−Ｌ−オ
ルニチンメチルエステルを５０ｍｌのジオキサンに溶解
し、そして実施例５の類推で反応させる。
０：１ 実施例１９：δ−Ｎ−Ｂｏｃ−α−Ｎ−メチル−α−Ｎ
−（Ｎ6−Ｚ−アデニン−９−イル）アセチル−Ｌ−オ
ルニチン １．５３ｇのδ−Ｎ−Ｂｏｃ−α−Ｎ−メチル−α−Ｎ
−（Ｎ6−Ｚ−アデニン−９−イル）アセチル−Ｌ−オ
ルニチンメチルエステルを５０ｍｌのジオキサンに溶解
し、そして実施例５の類推で反応させる。
【００９３】収量：０．９６ｇ Ｒf：０．４１ 移動相：ＣＨ2Ｃｌ2／ＣＨ3ＯＨ／Ｈ
ＯＡｃ ８０：２０：１ 実施例２０：δ−Ｎ−Ｂｏｃ−α−Ｎ−メチル−α−Ｎ
−（Ｏ6−ベンジル−Ｎ2−Ｚ−グアニン−９−イル）ア
セチル−Ｌ−オルニチンメチルエステル ０．２ｇのＯ6−ベンジル−Ｎ2−Ｚ−９−カルボキシメ
チルグアニンを５ｍｌのＤＭＦに溶解し、次に１．３当
量（ｅｑ．）のδ−Ｎ−Ｂｏｃ−α−Ｎ−メチル−Ｌ−
オルニチンメチルエステル、続いて各１．２５当量（ｅ
ｑ．）の塩化ベンゾトリアゾール−１−イル−オキシ−
トリス−（ジメチルアミノ）−ホスホニウム（ＢＯＰＣ
ｌ）及びＨＯＢｔ、並びに１．３当量（ｅｑ．）のＮ−
エチルジイソプロピルアミンを加える。この混合物を室
温で３．５時間撹拌した後、溶媒を除く。残っている油
状物を酢酸エチル及び塩化ナトリウム溶液の間で分け
る。有機相を分離して除き、水相を酢酸エチルでもう数
回抽出する。合わせた有機相を０．１Ｎ ＨＣｌ、Ｎａ
ＨＣＯ3の飽和溶液、及びＮａＣｌ溶液で洗浄する。硫
酸ナトリウム上で乾燥させた後、残留物が残り、これを
シリカゲル上でクロマトグラフィー（移動相：ＣＨ2Ｃ
ｌ2／ＣＨ3ＯＨ ２０：１）により分離する。
ＯＡｃ ８０：２０：１ 実施例２０：δ−Ｎ−Ｂｏｃ−α−Ｎ−メチル−α−Ｎ
−（Ｏ6−ベンジル−Ｎ2−Ｚ−グアニン−９−イル）ア
セチル−Ｌ−オルニチンメチルエステル ０．２ｇのＯ6−ベンジル−Ｎ2−Ｚ−９−カルボキシメ
チルグアニンを５ｍｌのＤＭＦに溶解し、次に１．３当
量（ｅｑ．）のδ−Ｎ−Ｂｏｃ−α−Ｎ−メチル−Ｌ−
オルニチンメチルエステル、続いて各１．２５当量（ｅ
ｑ．）の塩化ベンゾトリアゾール−１−イル−オキシ−
トリス−（ジメチルアミノ）−ホスホニウム（ＢＯＰＣ
ｌ）及びＨＯＢｔ、並びに１．３当量（ｅｑ．）のＮ−
エチルジイソプロピルアミンを加える。この混合物を室
温で３．５時間撹拌した後、溶媒を除く。残っている油
状物を酢酸エチル及び塩化ナトリウム溶液の間で分け
る。有機相を分離して除き、水相を酢酸エチルでもう数
回抽出する。合わせた有機相を０．１Ｎ ＨＣｌ、Ｎａ
ＨＣＯ3の飽和溶液、及びＮａＣｌ溶液で洗浄する。硫
酸ナトリウム上で乾燥させた後、残留物が残り、これを
シリカゲル上でクロマトグラフィー（移動相：ＣＨ2Ｃ
ｌ2／ＣＨ3ＯＨ ２０：１）により分離する。
【００９４】収量：１９７ｍｇ Ｒf：０．６４ 移動相：ＣＨ2Ｃｌ2／ＣＨ3ＯＨ １
０：１ 実施例２１：δ−Ｎ−Ｂｏｃ−α−Ｎ−メチル−α−Ｎ
−（Ｏ6−ベンジル−Ｎ2−Ｚ−グアニン−９−イル）ア
セチル−Ｌ−オルニチン １７２ｍｇのδ−Ｎ−Ｂｏｃ−α−Ｎ−メチル−α−Ｎ
−（Ｏ6−ベンジル−Ｎ2−Ｚ−グアニン−９−イル）ア
セチル−Ｌ−オルニチンメチルエステルを１０ｍｌのジ
オキサンに溶解し、そして実施例５の類推で反応させ
る。
０：１ 実施例２１：δ−Ｎ−Ｂｏｃ−α−Ｎ−メチル−α−Ｎ
−（Ｏ6−ベンジル−Ｎ2−Ｚ−グアニン−９−イル）ア
セチル−Ｌ−オルニチン １７２ｍｇのδ−Ｎ−Ｂｏｃ−α−Ｎ−メチル−α−Ｎ
−（Ｏ6−ベンジル−Ｎ2−Ｚ−グアニン−９−イル）ア
セチル−Ｌ−オルニチンメチルエステルを１０ｍｌのジ
オキサンに溶解し、そして実施例５の類推で反応させ
る。
【００９５】収量：１４５ｍｇ Ｒf：０．７２ 移動相：ＣＨ2Ｃｌ2／ＣＨ3ＯＨ
１：１オリゴマー 実施例２２：ＮＨ２−（Ｔ１−Ｔ２）６−Ｌｙｓ−ＮＨ
２の固相合成 Ｔ１＝ＷＯ第９２／２０７０３号に従ったアミノエチル
グリシン−チミンの構築ブロック Ｔ２＝（例えば、実施例５からの）δ−Ｎ−Ｂｏｃ−α
−Ｎ−メチル−α−Ｎ−（チミン−１−イル）アセチル
−Ｌ−オルニチン ＡＢＩ ４３１−Ａペプチド合成機において利用できる
Ｂｏｃ小規模反応のためのプログラムのわずかに改変し
たものを用いてオリゴマー化を行う。
１：１オリゴマー 実施例２２：ＮＨ２−（Ｔ１−Ｔ２）６−Ｌｙｓ−ＮＨ
２の固相合成 Ｔ１＝ＷＯ第９２／２０７０３号に従ったアミノエチル
グリシン−チミンの構築ブロック Ｔ２＝（例えば、実施例５からの）δ−Ｎ−Ｂｏｃ−α
−Ｎ−メチル−α−Ｎ−（チミン−１−イル）アセチル
−Ｌ−オルニチン ＡＢＩ ４３１−Ａペプチド合成機において利用できる
Ｂｏｃ小規模反応のためのプログラムのわずかに改変し
たものを用いてオリゴマー化を行う。
【００９６】３２．５ｍｇ（０．０２５ｍｍｏｌ）のＭ
ＢＨＡ樹脂（被覆物：０．７７ｍｍｏｌ／ｇ）を最初に
反応容器に添加する。担体をジイソプロピルエチルアミ
ンで中和し、そしてＤＣＭで洗浄する。１ｍｍｏｌのＢ
ｏｃ−Ｌｙｓ（２−クロロ−Ｚ）−ＯＨ（０．４１ｇ、
Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）及び各場合に
おいて５２ｍｇのＴ２構築ブロックまたは４８ｍｇのＴ
１構築ブロックを、Ｎ−メチル−２−ピロリドン（ＮＭ
Ｐ）中１３５ｍｇ（１．０ｍｍｏｌ）のヒドロキシベン
ゾトリアゾールまたはヒドロキシベンゾトリアゾール及
びヒドロキシアザベンゾトリアゾール（Ｐｅｒｓｐｅｃ
ｔｉｖｅ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）の対応する１：１の
混合物、並びに２０６ｍｇ（１．０ｍｍｏｌ）のジシク
ロヘキシルカルボジイミドとの反応により活性化する。
これに関連して、構築ブロックの可溶性を高めるため
に、ヒドロキシ（アザ）ベンゾトリアゾールをＮＭＰと
一緒に、アミノ酸を含んでいるカートリッジに添加す
る。各結合工程の前にトリフルオロ酢酸で処理すること
により、担体に結合した中間体のｔｅｒｔ−ブチルオキ
シカルボニル保護基を除去し、次に、担体をジイソプロ
ピルエチルアミンで中和し、そしてＤＣＭで洗浄する。
次に、ポリマー担体上で順次的な結合を行う。最後の結
合後、トリフルオロ酢酸で処理することにより、Ｂｏｃ
保護基を取り除く。乾燥した担体の重さを量ると、４
２．０ｍｇの結合したペプチドを示す。ポリマーをテフ
ロンフラスコ中で４．５ｍｌのＨＦ及び０．５ｍｌのア
ニソールで０℃で２時間処理することにより、担体から
オリゴマーを切断する。ＨＦ切断後、吸着しているアニ
ソールを溶解して除くために、残留物を１５ｍｌの無水
ジエチルエーテルで４回撹拌する。各場合において１５
分後、エーテルを注意深くデカントして除く。次に、オ
リゴマーを６０ｍｌの３０％酢酸（４ ｘ １５ｍｌ、各
場合において１５分間）で抽出し、その溶液をＤ３フリ
ットに通すことによりポリマーから分離し、そして濾過
液を凍結乾燥する。
ＢＨＡ樹脂（被覆物：０．７７ｍｍｏｌ／ｇ）を最初に
反応容器に添加する。担体をジイソプロピルエチルアミ
ンで中和し、そしてＤＣＭで洗浄する。１ｍｍｏｌのＢ
ｏｃ−Ｌｙｓ（２−クロロ−Ｚ）−ＯＨ（０．４１ｇ、
Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）及び各場合に
おいて５２ｍｇのＴ２構築ブロックまたは４８ｍｇのＴ
１構築ブロックを、Ｎ−メチル−２−ピロリドン（ＮＭ
Ｐ）中１３５ｍｇ（１．０ｍｍｏｌ）のヒドロキシベン
ゾトリアゾールまたはヒドロキシベンゾトリアゾール及
びヒドロキシアザベンゾトリアゾール（Ｐｅｒｓｐｅｃ
ｔｉｖｅ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）の対応する１：１の
混合物、並びに２０６ｍｇ（１．０ｍｍｏｌ）のジシク
ロヘキシルカルボジイミドとの反応により活性化する。
これに関連して、構築ブロックの可溶性を高めるため
に、ヒドロキシ（アザ）ベンゾトリアゾールをＮＭＰと
一緒に、アミノ酸を含んでいるカートリッジに添加す
る。各結合工程の前にトリフルオロ酢酸で処理すること
により、担体に結合した中間体のｔｅｒｔ−ブチルオキ
シカルボニル保護基を除去し、次に、担体をジイソプロ
ピルエチルアミンで中和し、そしてＤＣＭで洗浄する。
次に、ポリマー担体上で順次的な結合を行う。最後の結
合後、トリフルオロ酢酸で処理することにより、Ｂｏｃ
保護基を取り除く。乾燥した担体の重さを量ると、４
２．０ｍｇの結合したペプチドを示す。ポリマーをテフ
ロンフラスコ中で４．５ｍｌのＨＦ及び０．５ｍｌのア
ニソールで０℃で２時間処理することにより、担体から
オリゴマーを切断する。ＨＦ切断後、吸着しているアニ
ソールを溶解して除くために、残留物を１５ｍｌの無水
ジエチルエーテルで４回撹拌する。各場合において１５
分後、エーテルを注意深くデカントして除く。次に、オ
リゴマーを６０ｍｌの３０％酢酸（４ ｘ １５ｍｌ、各
場合において１５分間）で抽出し、その溶液をＤ３フリ
ットに通すことによりポリマーから分離し、そして濾過
液を凍結乾燥する。
【００９７】３８．０ｍｇの粗生成物を得、この生成物
をＲＰ−ＨＰＬＣによる純粋な状態の調製のために準備
する。以下の用いる溶出系、 溶離剤Ａ：水中０．１％のＴＦＡ 溶離剤Ｂ：水／アセトニトリル（３／７）中０．１％の
ＴＦＡ での固定分離媒質として、「Ｅｕｒｏｓｉｌ Ｂｉｏｓ
ｅｌｅｃｔ ３００Ａ（５μｍ）」カラムを用いる。
をＲＰ−ＨＰＬＣによる純粋な状態の調製のために準備
する。以下の用いる溶出系、 溶離剤Ａ：水中０．１％のＴＦＡ 溶離剤Ｂ：水／アセトニトリル（３／７）中０．１％の
ＴＦＡ での固定分離媒質として、「Ｅｕｒｏｓｉｌ Ｂｉｏｓ
ｅｌｅｃｔ ３００Ａ（５μｍ）」カラムを用いる。
【００９８】勾配を以下のように設定する。
【００９９】 勾配（分） 溶離剤Ａ（％） 溶離剤Ｂ（％） ０．００ ９５ ０５ ３０．００ ４０ ６０ ４０．００ ２０ ８０ ４５．００ ２０ ８０ ５０．００ ９５ ０５ 検出は、ＵＶ検出器を用いて２６０ｎｍである。標的物
質の保持時間は２１．５分である。
質の保持時間は２１．５分である。
【０１００】ＨＰＬＣ後、精製したＰＮＡを凍結乾燥す
る。８．２ｍｇ（０．００２３ｍｍｏｌ；理論的に可能
な量に基づくと９．２％；樹脂に実際に結合した量に基
づくと１９．５％）の非常に純粋な生成物の収量を得
る。このＰＮＡを質量分光学（ＬＤＩ法）により特徴づ
ける。理論上の分子量は３５０９．５ｇ／ｍｏｌであ
り、３５０８．６ｇ／ｍｏｌが測定される。
る。８．２ｍｇ（０．００２３ｍｍｏｌ；理論的に可能
な量に基づくと９．２％；樹脂に実際に結合した量に基
づくと１９．５％）の非常に純粋な生成物の収量を得
る。このＰＮＡを質量分光学（ＬＤＩ法）により特徴づ
ける。理論上の分子量は３５０９．５ｇ／ｍｏｌであ
り、３５０８．６ｇ／ｍｏｌが測定される。
【０１０１】アニーリング温度の測定 製造業者のＡｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓの小
規模サイクルを用いて、ＡＢＩ ３８０Ｂ ＤＮＡ合成機
でホスホルアミダイト法により、対応する相補的なＤＮ
Ａ鎖（Ａ１２）を調製する。
規模サイクルを用いて、ＡＢＩ ３８０Ｂ ＤＮＡ合成機
でホスホルアミダイト法により、対応する相補的なＤＮ
Ａ鎖（Ａ１２）を調製する。
【０１０２】Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ「Ｌａｍｂｄａ
Ｂｉｏ」ＵＶ／Ｖｉｓ分光光度計で、製造業者により
特定された「ＰＥ−ＴＥＭＰ」法を用いて、アニーリン
グ温度を測定した。
Ｂｉｏ」ＵＶ／Ｖｉｓ分光光度計で、製造業者により
特定された「ＰＥ−ＴＥＭＰ」法を用いて、アニーリン
グ温度を測定した。
【０１０３】この目的のために、上記の実施例からの十
分なＰＮＡを７００μｌの水に溶解し、０．３の吸収を
与える。対応するＡ１２ＤＮＡ鎖で同じことを行う。次
に、これらの２本の鎖を合わせ、そして水の容量を１．
５ｍｌに増やす。次に、Ｓｔｙｒｏｐｏｒｅ容器中で合
わせた鎖を９５℃で５分間加熱し、次に一晩ゆっくりと
冷却する。続いて、２０℃−８０℃の温度範囲における
二本鎖の吸収を「ＰＥ−ＴＥＭＰ」法を用いて調べる。
そして、得られた吸収曲線の変曲点（一次導関数の最
大）が温度基準で測定されたアニーリング温度に対応す
る。
分なＰＮＡを７００μｌの水に溶解し、０．３の吸収を
与える。対応するＡ１２ＤＮＡ鎖で同じことを行う。次
に、これらの２本の鎖を合わせ、そして水の容量を１．
５ｍｌに増やす。次に、Ｓｔｙｒｏｐｏｒｅ容器中で合
わせた鎖を９５℃で５分間加熱し、次に一晩ゆっくりと
冷却する。続いて、２０℃−８０℃の温度範囲における
二本鎖の吸収を「ＰＥ−ＴＥＭＰ」法を用いて調べる。
そして、得られた吸収曲線の変曲点（一次導関数の最
大）が温度基準で測定されたアニーリング温度に対応す
る。
【０１０４】この方法を用いる場合、上記の実施例にお
けるＤＮＡ−ＰＮＡハイブリダイゼーションに対して、
４１℃のアニーリング温度を確認することができる。
けるＤＮＡ−ＰＮＡハイブリダイゼーションに対して、
４１℃のアニーリング温度を確認することができる。
【０１０５】ＤＮＡ一本鎖結合のゲルシフト分析による
例示 実施例２３ ポリヌクレオチドキナーゼ及びγ−ＡＴＰを用いて１０
μｌの容量で、１μｇの適当な塩基配列のオリゴヌクレ
オチドを既知の方法で５’末端で標識する（Ｓａｍｂｒ
ｏｏｋ、Ｆｒｉｔｓｃｈ、Ｍａｎｉａｔｉｓ：Ｍｏｌｅ
ｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ、Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒ
ｙ Ｍａｎｕａｌ、Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂ
ｏｒ、１９８９）。標識後、酵素を変性するためにサン
プルを７０℃で１０分間加熱し、次に、９μｇの非標識
オリゴマーと混合する。所望する量の試験する核酸結合
オリゴマー（１−１０μｇ）を１μｌのこの混合物に加
え、そして全部を２０μｌの容量で２２℃（室温）で３
０分間インキュベート（ハイブリダイゼーション）す
る。その後、サンプルを氷上に３０分間置く。ハイブリ
ダイズしない標識オリゴマーを同じように処理し、コン
トロールとして用いる。これらのサンプルを１ ｘ トリ
ス／ホウ酸塩／ＥＤＴＡバッファーを用いた１５％ポリ
アクリルアミドゲル上に添加する。ゲル及びバッファー
を冷蔵庫（８℃）で前もって冷やし、そして電気泳動を
５５Ｖで冷蔵庫中で一晩泳動したままにした。電気泳動
後、ＡＧＦＡフィルムにオートラジオグラフを調製した
（露出時間１６時間、図１）。
例示 実施例２３ ポリヌクレオチドキナーゼ及びγ−ＡＴＰを用いて１０
μｌの容量で、１μｇの適当な塩基配列のオリゴヌクレ
オチドを既知の方法で５’末端で標識する（Ｓａｍｂｒ
ｏｏｋ、Ｆｒｉｔｓｃｈ、Ｍａｎｉａｔｉｓ：Ｍｏｌｅ
ｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ、Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒ
ｙ Ｍａｎｕａｌ、Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂ
ｏｒ、１９８９）。標識後、酵素を変性するためにサン
プルを７０℃で１０分間加熱し、次に、９μｇの非標識
オリゴマーと混合する。所望する量の試験する核酸結合
オリゴマー（１−１０μｇ）を１μｌのこの混合物に加
え、そして全部を２０μｌの容量で２２℃（室温）で３
０分間インキュベート（ハイブリダイゼーション）す
る。その後、サンプルを氷上に３０分間置く。ハイブリ
ダイズしない標識オリゴマーを同じように処理し、コン
トロールとして用いる。これらのサンプルを１ ｘ トリ
ス／ホウ酸塩／ＥＤＴＡバッファーを用いた１５％ポリ
アクリルアミドゲル上に添加する。ゲル及びバッファー
を冷蔵庫（８℃）で前もって冷やし、そして電気泳動を
５５Ｖで冷蔵庫中で一晩泳動したままにした。電気泳動
後、ＡＧＦＡフィルムにオートラジオグラフを調製した
（露出時間１６時間、図１）。
【０１０６】図１の説明 １：１μｇのＰ−３３標識したポリＡ、１２−ｍｅｒ ２：１μｇのＰ−３３標識したポリＡ、１２−ｍｅｒ
＋ １μｇ（Ｉ） ３：１μｇのＰ−３３標識したポリ
Ａ、１２−ｍｅｒ ＋ ５μｇ（Ｉ） ４：１μｇのＰ−
３３標識したポリＡ、１２−ｍｅｒ ＋ １μｇ（II）
５：１μｇのＰ−３３標識したポリＡ、１２−ｍｅｒ
＋ ５μｇ（II） ６：１μｇのＰ−３３標識したポリ
Ａ、１２−ｍｅｒ ＋ １０μｇ（II） ７：１μｇのＰ−３３標識したポリＡ、１２−ｍｅｒ
＋ 実施例１８からの１μｇ ８：１μｇのＰ−３３標識したポリＡ、１２−ｍｅｒ
＋ 実施例１８からの５μｇ ９：１μｇのＰ−３３標識したポリＡ、１２−ｍｅｒ
＋ 実施例１８からの１０μｇ （Ｉ）＝以下の組成の陽性コントロール物質（１２−ｍ
ｅｒ）：ＴE＝アミノエチルグリシン−チミジン型、Ｔp
＝４−Ｒ−アミノ−Ｌ−プロリン−チミジン型、及びＴ
Y＝Ｄ−トランス−ピロリジンカルボン酸−チミジン型
であるＮＨ2−（ＴE−ＴP−ＴE−ＴP−ＴE−グリシン−
ＴY）2−Ｌ−リジン−ＮＨ2 （II） 以下の組成の陰性コントロール物質（１２−ｍ
ｅｒ）：ＴB＝Ｌ−アミノ酪酸−チミジン型であるＮＨ2
−（ＴE−ＴE−グリシン−ＴB）4−Ｌ−リジン−ＮＨ2 結果 図１におけるレーン１は、移動していない誘導体の位置
を示す。レーン２及び３は、確かに移動する化合物での
滴定を示す。レーン４−６は、移動しない化合物での滴
定である。レーン７−９は、実施例１８からの新規化合
物の明らかな移動を示す。
＋ １μｇ（Ｉ） ３：１μｇのＰ−３３標識したポリ
Ａ、１２−ｍｅｒ ＋ ５μｇ（Ｉ） ４：１μｇのＰ−
３３標識したポリＡ、１２−ｍｅｒ ＋ １μｇ（II）
５：１μｇのＰ−３３標識したポリＡ、１２−ｍｅｒ
＋ ５μｇ（II） ６：１μｇのＰ−３３標識したポリ
Ａ、１２−ｍｅｒ ＋ １０μｇ（II） ７：１μｇのＰ−３３標識したポリＡ、１２−ｍｅｒ
＋ 実施例１８からの１μｇ ８：１μｇのＰ−３３標識したポリＡ、１２−ｍｅｒ
＋ 実施例１８からの５μｇ ９：１μｇのＰ−３３標識したポリＡ、１２−ｍｅｒ
＋ 実施例１８からの１０μｇ （Ｉ）＝以下の組成の陽性コントロール物質（１２−ｍ
ｅｒ）：ＴE＝アミノエチルグリシン−チミジン型、Ｔp
＝４−Ｒ−アミノ−Ｌ−プロリン−チミジン型、及びＴ
Y＝Ｄ−トランス−ピロリジンカルボン酸−チミジン型
であるＮＨ2−（ＴE−ＴP−ＴE−ＴP−ＴE−グリシン−
ＴY）2−Ｌ−リジン−ＮＨ2 （II） 以下の組成の陰性コントロール物質（１２−ｍ
ｅｒ）：ＴB＝Ｌ−アミノ酪酸−チミジン型であるＮＨ2
−（ＴE−ＴE−グリシン−ＴB）4−Ｌ−リジン−ＮＨ2 結果 図１におけるレーン１は、移動していない誘導体の位置
を示す。レーン２及び３は、確かに移動する化合物での
滴定を示す。レーン４−６は、移動しない化合物での滴
定である。レーン７−９は、実施例１８からの新規化合
物の明らかな移動を示す。
【０１０７】二本鎖プラスミドＤＮＡにおける鎖置換の
例示 実施例２４ 実施例１８からのＰＮＡ型によるＤＮＡ二本鎖置換を実
験的に例示するための試験を以下に記述する。ＤＮＡ二
本鎖置換のこの特性は、核酸塩基のリボースリン酸結
合、リボースメチルホスホン酸塩結合、及びリボースモ
ノチオリン酸塩結合、並びに他の核酸様バックボーン型
で達成されることはできず、従って、実施例１８からの
ＰＮＡ型の特異的な生物学的活性を構成する。
例示 実施例２４ 実施例１８からのＰＮＡ型によるＤＮＡ二本鎖置換を実
験的に例示するための試験を以下に記述する。ＤＮＡ二
本鎖置換のこの特性は、核酸塩基のリボースリン酸結
合、リボースメチルホスホン酸塩結合、及びリボースモ
ノチオリン酸塩結合、並びに他の核酸様バックボーン型
で達成されることはできず、従って、実施例１８からの
ＰＮＡ型の特異的な生物学的活性を構成する。
【０１０８】この実施例において用いるプラスミドＤＮ
Ａは、ＤＮＡ二本鎖置換を例示するためのモデル基質で
ある。調べる実施例１８からのＰＮＡに相補的な核酸塩
基配列を有する適当な標的配列を含む他のプラスミド
を、同じようにこの試験のために用いることができる。
このことは、実施例１８からのＰＮＡ型に相補的な、疾
病を決定する遺伝子からの核酸塩基配列にこのＰＮＡ型
が結合し、それによりその遺伝子を不活性化することが
できると結論することを可能にする。
Ａは、ＤＮＡ二本鎖置換を例示するためのモデル基質で
ある。調べる実施例１８からのＰＮＡに相補的な核酸塩
基配列を有する適当な標的配列を含む他のプラスミド
を、同じようにこの試験のために用いることができる。
このことは、実施例１８からのＰＮＡ型に相補的な、疾
病を決定する遺伝子からの核酸塩基配列にこのＰＮＡ型
が結合し、それによりその遺伝子を不活性化することが
できると結論することを可能にする。
【０１０９】この実施例において、４８８０塩基対の長
さで、そして１１５０塩基対離れた間隔で少なくとも９
個の連続するアデニンヌクレオチドを有する２つのポリ
アデニン配列領域を含む二本鎖の環状プラスミドＤＮＡ
を、ここに記述する試験において用いる。
さで、そして１１５０塩基対離れた間隔で少なくとも９
個の連続するアデニンヌクレオチドを有する２つのポリ
アデニン配列領域を含む二本鎖の環状プラスミドＤＮＡ
を、ここに記述する試験において用いる。
【０１１０】平行して調製し、（１−８）と示す８個の
サンプルは、各々、１４μｌのＨ2Ｏ中０．５μｇの非
切断プラスミドＤＮＡを含んだ。各場合において１．０
μｇの試験物質を含んでいる１．０μｌの溶液を、サン
プル２−８の各々に加えた。サンプル２（図２参照）
は、１．０μｇの実施例１８からのＰＮＡ型を含んだ。
サンプル８は、陽性コントロールとして１０ｍｅｒの２
−アミノエチルグリシン−チミンＰＮＡ型を含んだ。図
２に示す試験設定の全ての他のサンプル（１、３−７）
は、他の試験物質を含んだ。サンプル１は、陰性コント
ロールとして使用した。
サンプルは、各々、１４μｌのＨ2Ｏ中０．５μｇの非
切断プラスミドＤＮＡを含んだ。各場合において１．０
μｇの試験物質を含んでいる１．０μｌの溶液を、サン
プル２−８の各々に加えた。サンプル２（図２参照）
は、１．０μｇの実施例１８からのＰＮＡ型を含んだ。
サンプル８は、陽性コントロールとして１０ｍｅｒの２
−アミノエチルグリシン−チミンＰＮＡ型を含んだ。図
２に示す試験設定の全ての他のサンプル（１、３−７）
は、他の試験物質を含んだ。サンプル１は、陰性コント
ロールとして使用した。
【０１１１】きつく閉じたエッペンドルフ反応チューブ
中で、これらのサンプルを３７℃で４５分間インキュベ
ートした。次に、全てのサンプルに４μｌのバッファー
（２５０ｍＭ酢酸Ｎａ、１Ｍ ＮａＣｌ、２．５％グリ
セロール、５ｍＭ ＺｎＣｌ2、ｐＨ ４．４）、及び各
場合において１０Ｕ／ｍｌの活性を有する１．０μｌの
（Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｍａｎｎｈｅｉｍからの）ア
スペルギルス・オリザエ（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｏ
ｒｙｚａｅ）Ｓ１ヌクレアーゼを加えた。３０℃で１５
分のインキュベーション後、これらのサンプルを氷上に
置き、そして１μｌの０．５Ｍ ＥＤＴＡ及び３μｌの
ローディングバッファー（５０％グリセロール、４０ｍ
Ｍトリス−ＨＣｌ中０．２５％のブロモフェノールブル
ー、２０ｍＭ酢酸ナトリウム、１ｍＭ ＥＤＴＡ、ｐＨ
＝７．２）を加え、次に、これらのサンプルを遅滞する
ことなく１．２％アガロースゲル上で電気泳動的に分
け、そして臭化エチジウムで染色後、トランスイルミネ
ーター上で２５４ｎｍのＵＶ光で、分子量標準（ＧＩＢ
ＣＯ−ＢＲＬからの１ｋｂラダー。Ｄ−７６３３９Ｅｇ
ｇｅｎｓｔｅｉｎ、図２におけるサンプル９）との比較
により、ゲル中に得られたプラスミドフラグメントの大
きさを決定する。
中で、これらのサンプルを３７℃で４５分間インキュベ
ートした。次に、全てのサンプルに４μｌのバッファー
（２５０ｍＭ酢酸Ｎａ、１Ｍ ＮａＣｌ、２．５％グリ
セロール、５ｍＭ ＺｎＣｌ2、ｐＨ ４．４）、及び各
場合において１０Ｕ／ｍｌの活性を有する１．０μｌの
（Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｍａｎｎｈｅｉｍからの）ア
スペルギルス・オリザエ（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｏ
ｒｙｚａｅ）Ｓ１ヌクレアーゼを加えた。３０℃で１５
分のインキュベーション後、これらのサンプルを氷上に
置き、そして１μｌの０．５Ｍ ＥＤＴＡ及び３μｌの
ローディングバッファー（５０％グリセロール、４０ｍ
Ｍトリス−ＨＣｌ中０．２５％のブロモフェノールブル
ー、２０ｍＭ酢酸ナトリウム、１ｍＭ ＥＤＴＡ、ｐＨ
＝７．２）を加え、次に、これらのサンプルを遅滞する
ことなく１．２％アガロースゲル上で電気泳動的に分
け、そして臭化エチジウムで染色後、トランスイルミネ
ーター上で２５４ｎｍのＵＶ光で、分子量標準（ＧＩＢ
ＣＯ−ＢＲＬからの１ｋｂラダー。Ｄ−７６３３９Ｅｇ
ｇｅｎｓｔｅｉｎ、図２におけるサンプル９）との比較
により、ゲル中に得られたプラスミドフラグメントの大
きさを決定する。
【０１１２】これらの条件下で、１．３ ｘ １０5Ｍの
濃度を有するサンプル２中の実施例１８からのＰＮＡ型
が、４８８０塩基対より大きい見かけの分子量を有する
コイル状の環状プラスミドに結合し（図２における上の
バンドを参照）、二本鎖置換をもたらすことが見いださ
れた。大きさ４８８０塩基対（直鎖状化）、３７３０塩
基対、及び１１５０塩基対（これらの条件下で、後者の
フラグメントは図２においてほどんど見えない）のＤＮ
Ａフラグメントが、Ｓ１ヌクレアーゼ反応により形成さ
れる。これらの特異的に形成されたＤＮＡフラグメント
は、実施例１８からのＰＮＡ型の二本鎖ＤＮＡに対する
配列選択的結合を示す。類似した反応結果が、陽性コン
トロール、２−アミノエチルグリシル−ＰＮＡ型を有す
るサンプル８において得られた（図２）。２−アミノエ
チルグリシル−ＰＮＡは、配列選択的なＤＮＡ二本鎖置
換をもたらすことが文献において示されている（Ｖａｎ
ｄｉｍ Ｄｅｍｉｄｏｖ等、Ｎｕｃｅｌｉｃ Ａｃｉｄ
ｓ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ２１、２１０３（１９９
３））。
濃度を有するサンプル２中の実施例１８からのＰＮＡ型
が、４８８０塩基対より大きい見かけの分子量を有する
コイル状の環状プラスミドに結合し（図２における上の
バンドを参照）、二本鎖置換をもたらすことが見いださ
れた。大きさ４８８０塩基対（直鎖状化）、３７３０塩
基対、及び１１５０塩基対（これらの条件下で、後者の
フラグメントは図２においてほどんど見えない）のＤＮ
Ａフラグメントが、Ｓ１ヌクレアーゼ反応により形成さ
れる。これらの特異的に形成されたＤＮＡフラグメント
は、実施例１８からのＰＮＡ型の二本鎖ＤＮＡに対する
配列選択的結合を示す。類似した反応結果が、陽性コン
トロール、２−アミノエチルグリシル−ＰＮＡ型を有す
るサンプル８において得られた（図２）。２−アミノエ
チルグリシル−ＰＮＡは、配列選択的なＤＮＡ二本鎖置
換をもたらすことが文献において示されている（Ｖａｎ
ｄｉｍ Ｄｅｍｉｄｏｖ等、Ｎｕｃｅｌｉｃ Ａｃｉｄ
ｓ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ２１、２１０３（１９９
３））。
【０１１３】（Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｍａｎｎｈｅｉ
ｍからの）酵素ＸｂａＩでの制限酵素消化により直鎖状
にしたプラスミドＤＮＡを環状の未消化プラスミドＤＮ
Ａの代わりにサンプルに加える、修正した試験設定を用
いてもまた、長さ３７３０及び１１５０のＤＮＡフラグ
メントを試験混合物２及び８において生じ、用いたＰＮ
Ａ型の配列特異的結合によりこの現象を説明することが
できる。
ｍからの）酵素ＸｂａＩでの制限酵素消化により直鎖状
にしたプラスミドＤＮＡを環状の未消化プラスミドＤＮ
Ａの代わりにサンプルに加える、修正した試験設定を用
いてもまた、長さ３７３０及び１１５０のＤＮＡフラグ
メントを試験混合物２及び８において生じ、用いたＰＮ
Ａ型の配列特異的結合によりこの現象を説明することが
できる。
【０１１４】実施例１８からのＰＮＡ型によるＤＮＡ二
本鎖置換をさらに、水の代わりに５ｍＭトリスＨＣｌ、
１ｍＭ ＭｇＣｌ2、１０ｍＭ ＮａＣｌ、ｐＨ ７．０を
用いて、比較的高塩濃度の存在下での二本鎖プラスミド
ＤＮＡについても示した。
本鎖置換をさらに、水の代わりに５ｍＭトリスＨＣｌ、
１ｍＭ ＭｇＣｌ2、１０ｍＭ ＮａＣｌ、ｐＨ ７．０を
用いて、比較的高塩濃度の存在下での二本鎖プラスミド
ＤＮＡについても示した。
【０１１５】この一連の試験により、実施例１８からの
ＰＮＡ型の二本鎖ＤＮＡに対する配列選択的な結合、及
びそれから生じる一本鎖ＤＮＡのＳ１ヌクレアーゼ消化
による検出を示すことが可能であった。
ＰＮＡ型の二本鎖ＤＮＡに対する配列選択的な結合、及
びそれから生じる一本鎖ＤＮＡのＳ１ヌクレアーゼ消化
による検出を示すことが可能であった。
【０１１６】図２の説明 臭化エチジウムで染色し、試験混合物（上を参照）を含
むアガロースゲルの写真。この電気泳動ゲルにより、Ｓ
１ヌクレアーゼの存在下で、プラスミドＤＮＡ上に実施
例１８からのＰＮＡ型によりもたらされた二本鎖置換か
ら生じたＤＮＡフラグメントを示す。電気泳動レーン１
−９は、以下のサンプル及び試験混合物を含む。
むアガロースゲルの写真。この電気泳動ゲルにより、Ｓ
１ヌクレアーゼの存在下で、プラスミドＤＮＡ上に実施
例１８からのＰＮＡ型によりもたらされた二本鎖置換か
ら生じたＤＮＡフラグメントを示す。電気泳動レーン１
−９は、以下のサンプル及び試験混合物を含む。
【０１１７】１−８：０．５μｇの未消化プラスミドＤ
ＮＡ（各試験混合物に対して同一である基質）及び１０
ＵのＳ１ヌクレアーゼ。
ＮＡ（各試験混合物に対して同一である基質）及び１０
ＵのＳ１ヌクレアーゼ。
【０１１８】１： 陰性コントロール；加えた試験物
質はいかなる二本鎖置換ももたらさない。
質はいかなる二本鎖置換ももたらさない。
【０１１９】２： １．０μｇの実施例１８からのＰ
ＮＡ型の添加。
ＮＡ型の添加。
【０１２０】３−７：実施例１８からのＰＮＡ型に対応
せず、そしていかなる二本鎖置換も生じない他の試験物
質の添加。
せず、そしていかなる二本鎖置換も生じない他の試験物
質の添加。
【０１２１】８： 陽性コントロールとしての１．０
μｇの２−アミノエチルグリシル−ＰＮＡの添加は、実
施例１８からのＰＮＡ型を含んでいる混合物２における
試験物質と同じように、３７３０塩基対でのフラグメン
トの出現により二本鎖置換の例示をもたらす。
μｇの２−アミノエチルグリシル−ＰＮＡの添加は、実
施例１８からのＰＮＡ型を含んでいる混合物２における
試験物質と同じように、３７３０塩基対でのフラグメン
トの出現により二本鎖置換の例示をもたらす。
【０１２２】９： 分子量標準（ＧＩＢＣＯ−ＢＲＬ
からの１ｋｂラダー） 本発明の主要な態様を以下に挙げる。
からの１ｋｂラダー） 本発明の主要な態様を以下に挙げる。
【０１２３】１．一般式（Ｉ）
【０１２４】
【化７】
【０１２５】式中、Ａは、−ＣＯ−、−ＣＨＲ−または
−ＣＲＲ’−を表し、Ｂは、チミン、ウラシル、シトシ
ン、アデニン、グアニンもしくはヒポキサンチン、また
は化学修飾によりこれらから誘導される誘導体のような
全ての天然または非天然の核酸塩基、あるいはアセチ
ル、トリフルオロアセチル、トリクロロアセチル、ベン
ゾイル、フェニルアセチル、ベンジルオキシカルボニ
ル、ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル、アリルオキシ
カルボニル、（９−フルオレニル）メトキシカルボニル
のような保護基、またはペプチド化学及び核酸化学にお
いて通例である他の保護基により、場合によってはアミ
ノ基において置換されたこれらのハロゲン化前駆物質を
表し、Ｃは、Ｃが一様にＳまたはＲ配置にあることがで
きる−ＣＨ−または−ＣＲ−を表し、Ｄは、−ＮＨ−、
−ＮＲ−、−ＣＨ2−、−ＣＨＲ−または−ＣＲＲ’−
を表し、Ｅは、−ＮＨ−、−ＮＲ−、−ＣＨ2−、−Ｃ
ＨＲ−、−ＣＲＲ’−、−Ｏ−または−Ｓ−を表し、Ａ
及びＥは、アルキル鎖［（−ＣＨ2）n−、式中、ｎは
０、１または２である］を介して互いに連結されること
ができ、Ｆは、−ＣＨ2−、−ＣＯ−、−ＳＯ2−、−Ｓ
Ｏ−または−ＣＳ−を表し、Ｇは、−ＮＨ−、−ＮＲ
−、−Ｏ−または−Ｓ−を表し、Ｈは、結合−ＣＨ2−
ＣＨ2−または−ＣＲ1Ｒ2−、式中、Ｒ1は、水素または
メチルを表し、そしてＲ2は、水素または場合によって
はアミノもしくはヒドロキシルにより置換されるＣ1−
Ｃ4−アルキルを表し、あるいはメルカプトメチル、メ
チルチオエチル、カルボキシメチル、カルボキシエチ
ル、カルバモイルメチル、カルバモイルエチルまたはグ
アニジノプロピルを表し、あるいは場合によってはアミ
ノ、ニトロ、ハロゲン、ヒドロキシルまたはメトキシに
より置換されるフェニルまたはベンジルを表し、あるい
はナフチルメチル、インドリルメチル、イミダゾリルメ
チル、トリアゾリルメチルまたはピリジルメチルを表
し、その際に官能基が場合によっては保護され、そして
基−ＣＲ1Ｒ2−が立体化学的にＬ形またはＤ形に一様に
配置されることができる、を表し、Ｇ及びＨは、アルキ
ル鎖［（−ＣＨ2）n−、式中、ｎは３または４である］
を介して互いに連結されることができ、Ｌは、ｐが０、
１もしくは２である（−ＣＨ2）p−、−ＣＨＲ−または
−ＣＲＲ’−を表し、Ｍは、−ＣＨ2−、−ＣＯ−、−
ＳＯ2−、−ＳＯ−または−ＣＳ−を表し、Ｑは、Ｎ
Ｈ、Ｏ、ＳまたはＲ3がＣ1−Ｃ8−アルキル、Ｃ2−Ｃ8
−アルケニル、フェニル、ピリジル、ベンジルもしくは
ナフチルメチルを表すＮＲ3を表し、Ｋは、水素、キャ
リヤー系、可溶性を媒介する基または天然もしくは非天
然のアミノ酸（Ｃ−連結したアミノ酸）のアシル基を表
し、Ｔは、ヒドロキシル、キャリヤー系、可溶性を媒介
する基またはアミドで（Ｎ−）連結した天然もしくは非
天然のアミノ酸を表し、Ｒ及びＲ’は、各場合において
互いに独立して、ＯＨ、メチル、エチル、ｎ−プロピ
ル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−
ブチルもしくはｔｅｒｔ−ブチル、ベンジル、α−ナフ
チルメチル、もしくはβ−ナフチルメチルのようなアラ
ルキル、または場合によってはメチル、ハロゲンもしく
はＮＯ2により置換される、フェニル、２−ピリジルも
しくは４−ピリジルのようなアリールもしくはヘタリー
ルを表し、ｒは、０または１を表し、そしてｓは、１か
ら３０までの値を表す、の化合物。
−ＣＲＲ’−を表し、Ｂは、チミン、ウラシル、シトシ
ン、アデニン、グアニンもしくはヒポキサンチン、また
は化学修飾によりこれらから誘導される誘導体のような
全ての天然または非天然の核酸塩基、あるいはアセチ
ル、トリフルオロアセチル、トリクロロアセチル、ベン
ゾイル、フェニルアセチル、ベンジルオキシカルボニ
ル、ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル、アリルオキシ
カルボニル、（９−フルオレニル）メトキシカルボニル
のような保護基、またはペプチド化学及び核酸化学にお
いて通例である他の保護基により、場合によってはアミ
ノ基において置換されたこれらのハロゲン化前駆物質を
表し、Ｃは、Ｃが一様にＳまたはＲ配置にあることがで
きる−ＣＨ−または−ＣＲ−を表し、Ｄは、−ＮＨ−、
−ＮＲ−、−ＣＨ2−、−ＣＨＲ−または−ＣＲＲ’−
を表し、Ｅは、−ＮＨ−、−ＮＲ−、−ＣＨ2−、−Ｃ
ＨＲ−、−ＣＲＲ’−、−Ｏ−または−Ｓ−を表し、Ａ
及びＥは、アルキル鎖［（−ＣＨ2）n−、式中、ｎは
０、１または２である］を介して互いに連結されること
ができ、Ｆは、−ＣＨ2−、−ＣＯ−、−ＳＯ2−、−Ｓ
Ｏ−または−ＣＳ−を表し、Ｇは、−ＮＨ−、−ＮＲ
−、−Ｏ−または−Ｓ−を表し、Ｈは、結合−ＣＨ2−
ＣＨ2−または−ＣＲ1Ｒ2−、式中、Ｒ1は、水素または
メチルを表し、そしてＲ2は、水素または場合によって
はアミノもしくはヒドロキシルにより置換されるＣ1−
Ｃ4−アルキルを表し、あるいはメルカプトメチル、メ
チルチオエチル、カルボキシメチル、カルボキシエチ
ル、カルバモイルメチル、カルバモイルエチルまたはグ
アニジノプロピルを表し、あるいは場合によってはアミ
ノ、ニトロ、ハロゲン、ヒドロキシルまたはメトキシに
より置換されるフェニルまたはベンジルを表し、あるい
はナフチルメチル、インドリルメチル、イミダゾリルメ
チル、トリアゾリルメチルまたはピリジルメチルを表
し、その際に官能基が場合によっては保護され、そして
基−ＣＲ1Ｒ2−が立体化学的にＬ形またはＤ形に一様に
配置されることができる、を表し、Ｇ及びＨは、アルキ
ル鎖［（−ＣＨ2）n−、式中、ｎは３または４である］
を介して互いに連結されることができ、Ｌは、ｐが０、
１もしくは２である（−ＣＨ2）p−、−ＣＨＲ−または
−ＣＲＲ’−を表し、Ｍは、−ＣＨ2−、−ＣＯ−、−
ＳＯ2−、−ＳＯ−または−ＣＳ−を表し、Ｑは、Ｎ
Ｈ、Ｏ、ＳまたはＲ3がＣ1−Ｃ8−アルキル、Ｃ2−Ｃ8
−アルケニル、フェニル、ピリジル、ベンジルもしくは
ナフチルメチルを表すＮＲ3を表し、Ｋは、水素、キャ
リヤー系、可溶性を媒介する基または天然もしくは非天
然のアミノ酸（Ｃ−連結したアミノ酸）のアシル基を表
し、Ｔは、ヒドロキシル、キャリヤー系、可溶性を媒介
する基またはアミドで（Ｎ−）連結した天然もしくは非
天然のアミノ酸を表し、Ｒ及びＲ’は、各場合において
互いに独立して、ＯＨ、メチル、エチル、ｎ−プロピ
ル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−
ブチルもしくはｔｅｒｔ−ブチル、ベンジル、α−ナフ
チルメチル、もしくはβ−ナフチルメチルのようなアラ
ルキル、または場合によってはメチル、ハロゲンもしく
はＮＯ2により置換される、フェニル、２−ピリジルも
しくは４−ピリジルのようなアリールもしくはヘタリー
ルを表し、ｒは、０または１を表し、そしてｓは、１か
ら３０までの値を表す、の化合物。
【０１２６】２．式中、Ａが、−ＣＯ−、−ＣＨＲ−ま
たは−ＣＲＲ’−を表し、Ｂが、チミン、ウラシル、シ
トシン、アデニン、グアニンもしくはヒポキサンチンの
ような全ての天然の核酸塩基、またはアセチル、トリフ
ルオロアセチル、トリクロロアセチル、ベンゾイル、フ
ェニルアセチル、ベンジルオキシカルボニル、ｔｅｒｔ
−ブチルオキシカルボニル、アリルオキシカルボニル、
（９−フルオレニル）メトキシカルボニルのような保護
基、またはペプチド化学及び核酸化学において通例であ
る他の保護基により、場合によってはアミノ基において
置換されるこれらのハロゲン化前駆物質を表し、Ｃが、
Ｃが一様にＳまたはＲ配置にあることができる−ＣＨ−
または−ＣＲ−を表し、Ｄが、−ＮＨ−、−ＮＲ−、−
ＣＨ2−、−ＣＨＲ−または−ＣＲＲ’−を表し、Ｅ
が、−ＮＨ−、−ＮＲ−、−ＣＨ2−、−ＣＨＲ−、−
ＣＲＲ’−または−Ｏ−を表し、Ａ及びＥが、アルキル
鎖［（−ＣＨ2）n−、式中、ｎが０、１または２であ
る］を介して互いに連結されることができ、Ｆが、−Ｃ
Ｈ2−、−ＣＯ−または−ＣＳ−を表し、Ｇが、−ＮＨ
−、−ＮＲ−または−Ｏ−を表し、Ｈが、結合−ＣＨ2
−ＣＨ2−または−ＣＲ1Ｒ2−、式中、Ｒ1が、水素また
はメチルを表し、そしてＲ2が、水素、メチル、イソプ
ロピル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ヒドロキシメチ
ル、１−ヒドロキシエチル、メルカプトメチル、２−メ
チルチオエチル、３−アミノプロピル、４−アミノブチ
ル、カルボキシメチル、２−カルボキシエチル、カルバ
モイルメチル、２−カルバモイルエチル、３−グアニジ
ノプロピル、フェニル、ベンジル、４−ヒドロキシベン
ジル、４−メトキシベンジル、２−ニトロベンジル、３
−ニトロベンジル、４−ニトロベンジル、２−アミノベ
ンジル、３−アミノベンジル、４−アミノベンジル、
３，４−ジクロロベンジル、４−ヨードベンジル、α−
ナフチルメチル、β−ナフチルメチル、３−インドリル
メチル、４−イミダゾリルメチル、１，２，３−トリア
ゾール−１−イル−メチル、１，２，４−トリアゾール
−１−イル−メチル、２−ピリジルメチルまたは４−ピ
リジルメチルを表し、その際に官能基が場合によっては
保護され、そして基−ＣＲ1Ｒ2−が立体化学的にＬ形ま
たはＤ形に一様に配置される、を表し、Ｇ及びＨが、ア
ルキル鎖［（−ＣＨ2）n−、式中、ｎが３または４であ
る］を介して互いに連結されることができ、Ｌが、ｐが
０、１もしくは２である（−ＣＨ2）p−、−ＣＨＲ−ま
たは−ＣＲＲ’−を表し、Ｍが、−ＣＨ2−、−ＣＯ−
または−ＣＳ−を表し、Ｑが、ＮＨ、ＯまたはＲ3がＣ1
−Ｃ4−アルキル、Ｃ2−Ｃ4−アルケニル、フェニル、
２−ピリジル、４−ピリジル、ベンジル、α−ナフチル
メチルもしくはβ−ナフチルメチルを表すＮＲ3を表
し、Ｋが、水素、キャリヤー系、可溶性を媒介する基ま
たは天然もしくは非天然のアミノ酸（Ｃ−連結したアミ
ノ酸）のアシル基を表し、Ｔが、ヒドロキシル、キャリ
ヤー系、可溶性を媒介する基またはアミドで（Ｎ−）連
結した天然もしくは非天然のアミノ酸を表し、Ｒ及び
Ｒ’が、各場合において互いに独立して、ＯＨ、メチ
ル、エチル、ｎ−プロピルもしくはｎ−ブチル、ベンジ
ルまたは場合によってはメチル、フッ素、塩素、臭素も
しくはＮＯ2により置換されるフェニルを表し、ｒが、
０または１を表し、そしてｓが、１から２０までの値を
表す、前記１に記載の一般式（Ｉ）の化合物。
たは−ＣＲＲ’−を表し、Ｂが、チミン、ウラシル、シ
トシン、アデニン、グアニンもしくはヒポキサンチンの
ような全ての天然の核酸塩基、またはアセチル、トリフ
ルオロアセチル、トリクロロアセチル、ベンゾイル、フ
ェニルアセチル、ベンジルオキシカルボニル、ｔｅｒｔ
−ブチルオキシカルボニル、アリルオキシカルボニル、
（９−フルオレニル）メトキシカルボニルのような保護
基、またはペプチド化学及び核酸化学において通例であ
る他の保護基により、場合によってはアミノ基において
置換されるこれらのハロゲン化前駆物質を表し、Ｃが、
Ｃが一様にＳまたはＲ配置にあることができる−ＣＨ−
または−ＣＲ−を表し、Ｄが、−ＮＨ−、−ＮＲ−、−
ＣＨ2−、−ＣＨＲ−または−ＣＲＲ’−を表し、Ｅ
が、−ＮＨ−、−ＮＲ−、−ＣＨ2−、−ＣＨＲ−、−
ＣＲＲ’−または−Ｏ−を表し、Ａ及びＥが、アルキル
鎖［（−ＣＨ2）n−、式中、ｎが０、１または２であ
る］を介して互いに連結されることができ、Ｆが、−Ｃ
Ｈ2−、−ＣＯ−または−ＣＳ−を表し、Ｇが、−ＮＨ
−、−ＮＲ−または−Ｏ−を表し、Ｈが、結合−ＣＨ2
−ＣＨ2−または−ＣＲ1Ｒ2−、式中、Ｒ1が、水素また
はメチルを表し、そしてＲ2が、水素、メチル、イソプ
ロピル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ヒドロキシメチ
ル、１−ヒドロキシエチル、メルカプトメチル、２−メ
チルチオエチル、３−アミノプロピル、４−アミノブチ
ル、カルボキシメチル、２−カルボキシエチル、カルバ
モイルメチル、２−カルバモイルエチル、３−グアニジ
ノプロピル、フェニル、ベンジル、４−ヒドロキシベン
ジル、４−メトキシベンジル、２−ニトロベンジル、３
−ニトロベンジル、４−ニトロベンジル、２−アミノベ
ンジル、３−アミノベンジル、４−アミノベンジル、
３，４−ジクロロベンジル、４−ヨードベンジル、α−
ナフチルメチル、β−ナフチルメチル、３−インドリル
メチル、４−イミダゾリルメチル、１，２，３−トリア
ゾール−１−イル−メチル、１，２，４−トリアゾール
−１−イル−メチル、２−ピリジルメチルまたは４−ピ
リジルメチルを表し、その際に官能基が場合によっては
保護され、そして基−ＣＲ1Ｒ2−が立体化学的にＬ形ま
たはＤ形に一様に配置される、を表し、Ｇ及びＨが、ア
ルキル鎖［（−ＣＨ2）n−、式中、ｎが３または４であ
る］を介して互いに連結されることができ、Ｌが、ｐが
０、１もしくは２である（−ＣＨ2）p−、−ＣＨＲ−ま
たは−ＣＲＲ’−を表し、Ｍが、−ＣＨ2−、−ＣＯ−
または−ＣＳ−を表し、Ｑが、ＮＨ、ＯまたはＲ3がＣ1
−Ｃ4−アルキル、Ｃ2−Ｃ4−アルケニル、フェニル、
２−ピリジル、４−ピリジル、ベンジル、α−ナフチル
メチルもしくはβ−ナフチルメチルを表すＮＲ3を表
し、Ｋが、水素、キャリヤー系、可溶性を媒介する基ま
たは天然もしくは非天然のアミノ酸（Ｃ−連結したアミ
ノ酸）のアシル基を表し、Ｔが、ヒドロキシル、キャリ
ヤー系、可溶性を媒介する基またはアミドで（Ｎ−）連
結した天然もしくは非天然のアミノ酸を表し、Ｒ及び
Ｒ’が、各場合において互いに独立して、ＯＨ、メチ
ル、エチル、ｎ−プロピルもしくはｎ−ブチル、ベンジ
ルまたは場合によってはメチル、フッ素、塩素、臭素も
しくはＮＯ2により置換されるフェニルを表し、ｒが、
０または１を表し、そしてｓが、１から２０までの値を
表す、前記１に記載の一般式（Ｉ）の化合物。
【０１２７】３．式中、Ａが、−ＣＯ−、−ＣＨＲ−ま
たは−ＣＲＲ’−を表し、Ｂが、チミン、ウラシル、シ
トシン、アデニン、グアニンもしくはヒポキサンチンの
ような全ての天然の核酸塩基、またはアセチル、トリフ
ルオロアセチル、トリクロロアセチル、ベンゾイル、フ
ェニルアセチル、ベンジルオキシカルボニル、ｔｅｒｔ
−ブチルオキシカルボニル、アリルオキシカルボニル、
（９−フルオレニル）メトキシカルボニルのような保護
基、もしくはペプチド化学及び核酸化学において通例で
ある他の保護基により、場合によってはアミノ基におい
て置換されるこれらのハロゲン化前駆物質を表し、Ｃ
が、Ｃが一様にＳまたはＲ配置にあることができる−Ｃ
Ｈ−または−ＣＲ−を表し、Ｄが、−ＮＨ−、−Ｎ（Ｃ
Ｈ3）−、−ＣＨ2−、−ＣＨＲ−または−ＣＲＲ’−を
表し、Ｅが、−ＮＨ−、−ＮＲ−、−ＣＨ2−または−
ＣＨＲ−を表し、Ｆが、−ＣＨ2−、−ＣＯ−または−
ＣＳ−を表し、Ｇが、−ＮＨ−または−Ｎ（ＣＨ3）−
を表し、Ｈが、結合−ＣＨ2−ＣＨ2−または−ＣＲ1Ｒ2
−、式中、Ｒ1が、水素またはメチルを表し、そしてＲ2
が、水素、メチル、イソプロピル、イソブチル、ｓｅｃ
−ブチル、ヒドロキシメチル、１−ヒドロキシエチル、
メルカプトメチル、２−メチルチオエチル、３−アミノ
プロピル、４−アミノブチル、カルボキシメチル、２−
カルボキシエチル、カルバモイルメチル、２−カルバモ
イルエチル、３−グアニジノプロピル、フェニル、ベン
ジルまたは４−ヒドロキシベンジルを表し、その際に官
能基が場合によっては保護され、そして基−ＣＲ1Ｒ2−
が立体化学的にＬ形またはＤ形に一様に配置される、を
表し、Ｌが、ｐが０、１もしくは２である（−ＣＨ2）p
−、−ＣＨＲ−または−ＣＲＲ’−を表し、Ｍが、−Ｃ
Ｈ2−、−ＣＯ−または−ＣＳ−を表し、Ｑが、ＮＨ、
ＯまたはＲ3がメチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプ
ロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔ
ｅｒｔ−ブチル、ビニル、アリル、フェニル、２−ピリ
ジル、４−ピリジル、ベンジル、α−ナフチルメチルも
しくはβ−ナフチルメチルを表すＮＲ3を表し、Ｋが、
水素、キャリヤー系、可溶性を媒介する基または天然も
しくは非天然のアミノ酸（Ｃ−連結したアミノ酸）のア
シル基を表し、Ｔが、ヒドロキシル、キャリヤー系、可
溶性を媒介する基またはアミドで（Ｎ−）連結した天然
もしくは非天然のアミノ酸を表し、Ｒ及びＲ’が、各場
合において互いに独立して、ＯＨ、メチルまたはベンジ
ルを表し、ｒが、０または１を表し、そしてｓが、２か
ら１５までの値を表す、前記１に記載の一般式（Ｉ）の
化合物。
たは−ＣＲＲ’−を表し、Ｂが、チミン、ウラシル、シ
トシン、アデニン、グアニンもしくはヒポキサンチンの
ような全ての天然の核酸塩基、またはアセチル、トリフ
ルオロアセチル、トリクロロアセチル、ベンゾイル、フ
ェニルアセチル、ベンジルオキシカルボニル、ｔｅｒｔ
−ブチルオキシカルボニル、アリルオキシカルボニル、
（９−フルオレニル）メトキシカルボニルのような保護
基、もしくはペプチド化学及び核酸化学において通例で
ある他の保護基により、場合によってはアミノ基におい
て置換されるこれらのハロゲン化前駆物質を表し、Ｃ
が、Ｃが一様にＳまたはＲ配置にあることができる−Ｃ
Ｈ−または−ＣＲ−を表し、Ｄが、−ＮＨ−、−Ｎ（Ｃ
Ｈ3）−、−ＣＨ2−、−ＣＨＲ−または−ＣＲＲ’−を
表し、Ｅが、−ＮＨ−、−ＮＲ−、−ＣＨ2−または−
ＣＨＲ−を表し、Ｆが、−ＣＨ2−、−ＣＯ−または−
ＣＳ−を表し、Ｇが、−ＮＨ−または−Ｎ（ＣＨ3）−
を表し、Ｈが、結合−ＣＨ2−ＣＨ2−または−ＣＲ1Ｒ2
−、式中、Ｒ1が、水素またはメチルを表し、そしてＲ2
が、水素、メチル、イソプロピル、イソブチル、ｓｅｃ
−ブチル、ヒドロキシメチル、１−ヒドロキシエチル、
メルカプトメチル、２−メチルチオエチル、３−アミノ
プロピル、４−アミノブチル、カルボキシメチル、２−
カルボキシエチル、カルバモイルメチル、２−カルバモ
イルエチル、３−グアニジノプロピル、フェニル、ベン
ジルまたは４−ヒドロキシベンジルを表し、その際に官
能基が場合によっては保護され、そして基−ＣＲ1Ｒ2−
が立体化学的にＬ形またはＤ形に一様に配置される、を
表し、Ｌが、ｐが０、１もしくは２である（−ＣＨ2）p
−、−ＣＨＲ−または−ＣＲＲ’−を表し、Ｍが、−Ｃ
Ｈ2−、−ＣＯ−または−ＣＳ−を表し、Ｑが、ＮＨ、
ＯまたはＲ3がメチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプ
ロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔ
ｅｒｔ−ブチル、ビニル、アリル、フェニル、２−ピリ
ジル、４−ピリジル、ベンジル、α−ナフチルメチルも
しくはβ−ナフチルメチルを表すＮＲ3を表し、Ｋが、
水素、キャリヤー系、可溶性を媒介する基または天然も
しくは非天然のアミノ酸（Ｃ−連結したアミノ酸）のア
シル基を表し、Ｔが、ヒドロキシル、キャリヤー系、可
溶性を媒介する基またはアミドで（Ｎ−）連結した天然
もしくは非天然のアミノ酸を表し、Ｒ及びＲ’が、各場
合において互いに独立して、ＯＨ、メチルまたはベンジ
ルを表し、ｒが、０または１を表し、そしてｓが、２か
ら１５までの値を表す、前記１に記載の一般式（Ｉ）の
化合物。
【０１２８】４．前記１ないし３に記載の一つまたはそ
れより多い化合物を含んでいる医薬。
れより多い化合物を含んでいる医薬。
【図１】実施例２３で行ったポリアクリルアミドゲル電
気泳動の結果を表すオートラジオグラフを示す図に代わ
る写真である。
気泳動の結果を表すオートラジオグラフを示す図に代わ
る写真である。
【図２】実施例２４で行った電気泳動（臭化エチジウム
染色）の結果を示す図に代わる写真である。
染色）の結果を示す図に代わる写真である。
フロントページの続き (51)Int.Cl.6 識別記号 ＦＩ Ｃ０７Ｄ 473/32 Ｃ０７Ｋ 1/00 Ｃ０７Ｋ 1/00 Ａ６１Ｋ 37/02 Ｃ１２Ｎ 15/09 ＺＮＡ Ｃ１２Ｎ 15/00 ＺＮＡＡ (72)発明者 アクセル・クレチユマー ドイツ51429ベルギツシユグラートバツ ハ・リヒヤルト−ツエルナー−シユトラー セ32 (72)発明者 クリストフ・シユベムラー ドイツ42799ライヒリンゲン・アムクロス ター59 (72)発明者 ウド・シユトロプ ドイツ42781ハーン・ズイトベルトウスベ ーク８
Claims (2)
- 【請求項１】 一般式（Ｉ） 【化１】 式中、 Ａは、−ＣＯ−、−ＣＨＲ−または−ＣＲＲ’−を表
し、 Ｂは、チミン、ウラシル、シトシン、アデニン、グアニ
ンもしくはヒポキサンチン、または化学修飾によりこれ
らから誘導される誘導体のような全ての天然または非天
然の核酸塩基、あるいはアセチル、トリフルオロアセチ
ル、トリクロロアセチル、ベンゾイル、フェニルアセチ
ル、ベンジルオキシカルボニル、ｔｅｒｔ−ブチルオキ
シカルボニル、アリルオキシカルボニル、（９−フルオ
レニル）メトキシカルボニルのような保護基またはペプ
チド化学及び核酸化学において通例である他の保護基に
より、場合によってはアミノ基において置換されたこれ
らのハロゲン化前駆体を表し、 Ｃは、Ｃが一様にＳまたはＲ配置にあることができる−
ＣＨ−または−ＣＲ−を表し、 Ｄは、−ＮＨ−、−ＮＲ−、−ＣＨ2−、−ＣＨＲ−ま
たは−ＣＲＲ’−を表し、 Ｅは、−ＮＨ−、−ＮＲ−、−ＣＨ2−、−ＣＨＲ−、
−ＣＲＲ’−、−Ｏ−または−Ｓ−を表し、 Ａ及びＥは、アルキル鎖［（−ＣＨ2）n−、式中、ｎは
０、１または２である］を介して互いに連結されること
ができ、 Ｆは、−ＣＨ2−、−ＣＯ−、−ＳＯ2−、−ＳＯ−また
は−ＣＳ−を表し、 Ｇは、−ＮＨ−、−ＮＲ−、−Ｏ−または−Ｓ−を表
し、 Ｈは、結合−ＣＨ2−ＣＨ2−または−ＣＲ1Ｒ2−、式
中、 Ｒ1は、水素またはメチルを表し、そして、 Ｒ2は、水素または場合によってはアミノもしくはヒド
ロキシルにより置換されるＣ1−Ｃ4−アルキルを表し、
あるいはメルカプトメチル、メチルチオエチル、カルボ
キシメチル、カルボキシエチル、カルバモイルメチル、
カルバモイルエチルまたはグアニジノプロピルを表し、
あるいは場合によってアミノ、ニトロ、ハロゲン、ヒド
ロキシルまたはメトキシにより置換されるフェニルまた
はベンジルを表し、あるいはナフチルメチル、インドリ
ルメチル、イミダゾリルメチル、トリアゾリルメチルま
たはピリジルメチルを表し、 その際に官能基が場合によっては保護され、そして基−
ＣＲ1Ｒ2−が立体化学的にＬ形またはＤ形に一様に配置
されることができる、を表し、 Ｇ及びＨは、アルキル鎖［（−ＣＨ2）n−、式中、ｎは
３または４である］を介して互いに連結されることがで
き、 Ｌは、ｐが０、１もしくは２である（−ＣＨ2）p−、−
ＣＨＲ−または−ＣＲＲ’−を表し、 Ｍは、−ＣＨ2−、−ＣＯ−、−ＳＯ2−、−ＳＯ−また
は−ＣＳ−を表し、 Ｑは、ＮＨ、Ｏ、ＳまたはＲ3がＣ1−Ｃ8−アルキル、
Ｃ2−Ｃ8−アルケニル、フェニル、ピリジル、ベンジル
もしくはナフチルメチルを表すＮＲ3を表し、 Ｋは、水素、キャリヤー系、可溶性を媒介する基または
天然もしくは非天然のアミノ酸（Ｃ−連結したアミノ
酸）のアシル基を表し、 Ｔは、ヒドロキシル、キャリヤー系、可溶性を媒介する
基またはアミドで（Ｎ−）連結した天然もしくは非天然
のアミノ酸を表し、 Ｒ及びＲ’は、各場合において、互いに独立して、Ｏ
Ｈ、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ
−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、もしくはｔｅ
ｒｔ−ブチル、ベンジル、α−ナフチルメチルもしくは
β−ナフチルメチルのようなアラルキル、または場合に
よってはメチル、ハロゲンもしくはＮＯ2により置換さ
れる、フェニル、２−ピリジルもしくは４−ピリジルの
ようなアリールもしくはヘタリールを表し、 ｒは、０または１を表し、そしてｓは、１から３０まで
の値を表す、の化合物。 - 【請求項２】 請求項１記載の１種以上の化合物を含有
する医薬。
Applications Claiming Priority (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE19625782 | 1996-06-27 | ||
| DE19635064.6 | 1996-08-30 | ||
| DE19625782.4 | 1996-08-30 | ||
| DE19635064A DE19635064A1 (de) | 1996-06-27 | 1996-08-30 | Nukleinsäure-bindende Oligomere |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH1087634A true JPH1087634A (ja) | 1998-04-07 |
Family
ID=26026992
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP9181890A Pending JPH1087634A (ja) | 1996-06-27 | 1997-06-24 | 核酸結合オリゴマー |
Country Status (2)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0816379A3 (ja) |
| JP (1) | JPH1087634A (ja) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6054568A (en) * | 1998-01-16 | 2000-04-25 | The Perkin-Elmer Corporation | Nucleobase oligomers |
| ITMI991516A1 (it) | 1999-07-09 | 2001-01-09 | Ausimont Spa | Sintesi dei copolimeri peralogenati termoprocesabili del clorotrifluoroetilene |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1992012129A1 (en) * | 1991-01-10 | 1992-07-23 | Santen Pharmaceutical Co., Ltd. | Cyclic compound |
| DE4427980A1 (de) * | 1994-08-08 | 1996-02-15 | Bayer Ag | Nukleinsäuren-bindende Oligomere für Therapie und Diagnostik |
-
1997
- 1997-06-16 EP EP97109741A patent/EP0816379A3/de not_active Withdrawn
- 1997-06-24 JP JP9181890A patent/JPH1087634A/ja active Pending
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP0816379A2 (de) | 1998-01-07 |
| EP0816379A3 (de) | 1998-04-01 |
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