JPH10508872A

JPH10508872A - 活性酸素阻害剤の制御送達を用いる癒着の低減

Info

Publication number: JPH10508872A
Application number: JP8529500A
Authority: JP
Inventors: キースベーカー，; アーサージェイ．コウリー，
Original assignee: フォーカル，インコーポレイテッド
Priority date: 1995-03-24
Filing date: 1996-03-20
Publication date: 1998-09-02
Anticipated expiration: 2016-03-20
Also published as: EP0814774B1; EP0814774A1; CA2215317C; DE69635301D1; JP3145409B2; ATE306903T1; US20010046503A1; US5785993A; AU704222B2; WO1996029987A1; AU5257596A; US6780427B2; CA2215317A1; DE69635301T2

Abstract

(57)【要約】 SODおよび他の活性酸素阻害剤が、バリア物質と組み合わせて、癒着の形成および所望ではない細胞の増殖を防止または減少させるために、組織傷害の局部に直接適用される。好ましいバリア物質は、疾患組織に直接適用される、AOIの制御放出を提供する重合ヒドロゲルである。実施例は、腹腔内(I.P.)へのボーラスにより、および局部に適用されたヒドロゲル系からの局部持続的放出により投与されたときの、ラットにおける骨盤癒着におよぼすSODの効果を示す。

Description

【発明の詳細な説明】活性酸素阻害剤の制御送達を用いる癒着の低減発明の背景本発明は、一般に、手術上の癒着の防止および低減の領域にある。癒着は、手術の共通の合併症である。それらは、体内の種々の領域で進行し得、そして手術前に別々であった組織が、治癒の過程で、共に接着するようになることにより特徴付けられる。癒着により引き起こされる損傷の型および程度は、変化し得、その範囲は、閉塞に起因する腸内におけるような生命を脅かすものから、腱および脊髄におけるような、慢性的痛みおよび骨盤腔における不妊、心膜におけるさらなる外科的処置の妨害物となるものまで及ぶ。骨盤癒着の手術後の形成は、婦人科手術を受けた患者に重大な問題を残し、そして不妊症の主な原因である。一般に、女性における骨盤癒着の最も共通の原因は、手術前の子宮内膜炎および骨盤炎症性疾患である。手術上の傷害または感染の結果としてのインタクトな腹膜に対する損傷は、病態生理学的事象のカスケードを起こす。手術的傷害および感染の３時間以内には、虚血および再潅流損傷による、血管透過性の増大をもたらす血管系への損傷、およびさらなる血管損傷をもたらす炎症応答がある。漿液血液流体およびフィブリンマトリックスの浸出液は、さらなる虚血を誘導し、これはフィブリンマトリックスの耐久性およびコラーゲン性癒着、ならびにフィブリン分解産物を得るためのフィブリン溶解、フィブリンマトリックスの吸収、および正常な修復をもたらす。このカスケードは、好中球およびマクロファージ両方の炎症部位への移動を含む、炎症に関連する予期される事象を包含する。この細胞移動との関連しているのは、炎症部位での酸素ラジカルの産生を誘導する迅速なレスピラトリーバーストである。十分なフリーラジカル捕捉剤の非存在下では、高濃度の酸素ラジカルは、脈管の完全性を担う細胞を含む周囲のインタクトな細胞を損傷し得る。この増大した血管の透過性は、フィブリン癒着のためのマトリックスとして働くタンパク質様の漿液血液状液体の浸出を誘導し得る。さらに、増大した血管透過性は、血流の局所的な妨害、および結果として血管供給を含む管内の細胞死を導く。この虚血事象後の組織の再潅流は、さらなる酸素ラジカルの産生を誘導し、そして最終的に、フィブリン癒着形成の程度をさらに悪化させる。通常の環境下において、プラスミノゲンアクチベーター活性(PAA)のフィブリン溶解能力は、このようなフィブリン沈殿の吸収および従来の腹膜治癒を誘導する。しかし、重篤な組織損傷の存在下では（例えば、手術的外傷後）、PAAの減少は、異常な持続的フィブリン沈殿、および最終的には、成熟したコラーゲン性癒着を誘導する。細心の切開（すなわち、癒着溶解）は、相変わらず存在する癒着に対する最も広範に受け入れられる処置である。従って、手術の実質的な部分は、癒着の効果を修復するために引き続く手術を必要とする。この手順は、一般に、「癒着溶解」と呼ばれる；いくつかの器官系においては、この手順は、例えば腱の除去においては、特定の名称、「腱癒着剥離」を有する。癒着の形成および再形成の防止において用いられる可能性のある治療条件は広範囲であり、そして手術時の骨盤腔内への液体の浸出、２つの対向する表面間の機械的バリア、および静脈内注射された薬理学的薬剤または局所的に塗布された薬理学的薬剤を含む(Tulandi、「手術後の癒着におけるリンガーラクテート(Rin ger's Lactate)の効果」、Diamonら編、第381巻、Progress in Clinical and Bi ological Research（NY、Wiley-Liss 1993）59-63;Schwartzら、Sem ．in Repro. Endocrin. 9：89-99(1991)；Pjilmanら、Eur ．J．Ost & Gyn．Repro．Biol. 53 ：155-163(1994)；およびMonkら、Am ．J．Obstet．Gynecol. 170:1396-1403(199 4))。しかし、徴候的な癒着形成の発生率は高いままで、そして癒着防止に対する臨床的必要性がなおも存在する。種々の種類の療法が、最初の癒着形成(「一次」癒着)を防止するために用いられている。これらは、水溶性ポリマーおよび／または生物学的に活性な分子(「薬物」)を用いる洗浄を包含し、これは通常あまり効果的ではない。しかし、カタラーゼと組み合わせたスーパーオキシドジスムターゼ(SOD)の使用は、Poretz ら、(Int ．J．Fertil. 36：39-42、1991)による研究において、ウサギの子宮内膜炎誘導癒着を防止または低減した。恒久的な機械的バリア(例えば、Teflon^TM シート)は、効果的であり得るが除去するのが困難である；そして酸化セルロース(InterCeed^TM，Johnson & Johnson)のような分解性バリア、および分解性重合ゲル(Sawhneyら、1993；Hill-Westら、1994)は、一次癒着の防止において顕著な有用性を有し得る。Tsimoyiannisら(Acta Chir ．Scand. 155：171-174、1989)は、手術前の静脈内ボーラスでSOD、カタラーゼ、DMSO(ジメチルスルホキシド)、またはアロプリノールの投与後に、ラットにおける一次癒着の発生率が約50％低減し、そして虚血関連のラットにおける一次癒着の誘導の重篤度が50〜70％低減することを報告した。PCT WO 93/16687は、水溶性または実質的に水溶性のマクロマー(さらなる重合を可能にする重合性基を有するポリマー)が、１つの細胞または組織と、１つの細胞または組織との相互作用を最小にするバリアとして適用され得ると教示する。これらの薬物の共通の性質は、組織への酸化的損傷を導く経路をそれらが阻害することであると仮定される。SOD、カタラーゼ、およびDMSOは、それぞれ活性酸素種(例えば、スーパーオキシド、過酸化物、またはヒドロキシルラジカル)を直接破壊し；アロプリノールは、過酸化水素を産生する、酵素キサンチンオキシダーゼを阻害することが知られている。組織における活性酸素種の効果を直接または間接的に阻害するこれらの化合物は、本明細書中において「活性酸素阻害剤」、またはAOIという。スーパーオキシドジスムターゼ(SOD、二量体分子量＝31.5kDa、四量体＝67kDa )は、脳、腎臓、および心臓を含む広範な種々の組織における虚血／再潅流事象の処置において効果的であった(Schneiderら、Fr ．Rad．Biol．& Med. 3：21-26 （1987）；Zimmermanら、Am ．J．Med．Sci. 307：284-292（1994）；Voogdら、F r. Rad ．Biol．& Med. 11：71-75(1991)；Fridovich 、Arch．Bioch．& Biophys. 247：1-11（1986）；Kontosら、CNS Trauma 3：257-263(1986))。SODが、骨盤癒着の防止に効果的であり得るという証拠もある(Tsimoyiannisら、Acta Chir ． Scand. 155：171-174（1989）；Portzら、Int ．J．Fert. 36：39-42（1991）；O 'Learyら、Ann ．Surg. June：693-698(1987))。しかし、血流からのその迅速な排出のために、SODを用いる効力は限られている(Petkauら、Res ．Commun．Chem ．Pathol．Pharmacol. 15：641-654（1976）；Odlundら、Pharmacol ．Toxic 62 ：95-100 (1988))。効力の改善は、排出の速度を低減するための化学的改変を包含する血流中のSOD含有率を増加するためのストラテジー(Pyatakら、Res ．Comm．Chem．P ath.Pharm. 29:113-127（1980）；Hill-Ｗestら、Obstet ．Gynecol. 83:59-64(1 994))、および高頻度の反復の注射からもたらされた(O'Learyら、1987)。一度形成された癒着の除去は、癒着形成の防御より実質的により困難である。不運なことに、一次癒着を効果的に防止する製剤(例えば、Hill-Westら、1994) は、癒着溶解後の再癒着(「二次」癒着)を防止するには実質的効果はより少ないものであり得る。一次癒着と二次癒着間の正確な生物学的相違は公知ではないが、一次癒着の形成が、他の細胞によってその後移植され、そして恒久的な血管化組織中へ発達する、非接合部の間のフィブリンブリッジの耐久性に依存している可能性がある。最初のフィブリンブリッジの形成または安定化を破壊することは少しは、一次癒着形成を防止する傾向がある。しかし、二次癒着は、先在する損傷組織(すなわち溶解した一次癒着)に適用した通常の治癒プロセスの結果であり得る。詳細にはまだ理解されていないが、治癒プロセスは、いくつかの細胞型の動員および新しいコラーゲンの形成を包含し、そして代表的には完全な修復を得るために、２週間まで続く最初の段階それに続く成熟の数カ月を有する。これらの相違のために、一次癒着防止に効果的な処置は、癒着溶解後の癒着の再形成を防止するための増強を必要とする。要約すると、多数の手術を受けた患者の場合のように、損傷が繰り返される患者においては特に、癒着除去において、効果的な組成物の報告は全くない。それゆえ、手術後または感染後の癒着を防止するための方法および組成物を提供することが、本発明の目的の一つである。発明の要旨 SODおよび他の活性酸素阻害剤が、バリア物質と組み合わされて、癒着の形成および所望ではない細胞の増殖を防止または低減させるために、直接的に組織損傷の局部において適用される。好ましいバリア物質は、疾患組織に直接適用される、AOIの制御放出を提供する重合ヒドロゲルである。実施例は、腹腔内(I.P.)へのボーラスにより、および局所的に適用されたヒドロゲル系からの局部持続的放出により投与されたときの、ラットにおける骨盤癒着におよぼすSODの効果を示す。図面の簡単な説明図１は、2000U SOD/ml対10,000U SOD/mlの投与量において、未処置の動物(黒棒)と比較しての、ヒドロゲル(‖‖‖)、SODのみ(≡)、およびヒドロゲルを介して局所的に送達されたSOD(白棒)での処置の、一次癒着のラット子宮角モデルにおける効力％の棒グラフである。図２は、2000U SOD/ml、5,000U SOD/ml，および10,000U SOD/mlの投与量において、未処置の動物(黒棒)と比較しての、ヒドロゲル(‖‖‖)、SODのみ(≡)、およびヒドロゲルを介して局所的に送達されたSOD(白棒)での処置の、二次癒着のラット子宮角モデルにおける効力％の棒グラフである。図３は、一次癒着モデル(白棒)および二次癒着モデル(黒棒)の両方について、未処置の動物(黒棒)と比較しての、ヒドロゲル(‖‖‖)、SODのみ(≡)、およびヒドロゲルを介して局所的に送達されたSOD(白棒)の効力％の棒グラフである。発明の詳細な説明本明細書中に記載のように、組織癒着（特に、二次組織癒着）の防止または最小化を提供する方法および組成物が記載される。この方法および組成物では、活性酸素阻害剤（例えば、SOD）が、ヒドロゲル処方物において、損傷領域に局所適用される。好ましい実施態様では、ヒドロゲルは、ポリエチレングリコールジラクチドジアクリレートのような生体適合性生分解性マクロマー溶液の光重合によってインサイチュで重合される。あるいは、またはさらに、バリア材が、活性酸素阻害剤、および活性酸素阻害剤（「AOI」）の制御送達手段と併用して用いられ得る。これらの材料（ヒドロゲルを包含する）は、他に特定されない限り、一般に「バリア材」と呼ばれる。バリア材：一次バリア材：バリア材は、液体、ペースト、または他の流動形態として投与され得、そして適用部位またはその周辺で適合するバリアを形成するように体内で局所的に変化され得るか、または固体バリアとして投与され得る。バリア材は、生体に温和であるべきであり、そして特に重篤な局所炎症応答を誘発してはならない。本質的に全ての移植片は、移植後に一時的に局所反応をもたらす。温和または生体適合性の材料は、延長されたまたは漸増する炎症応答を誘発しない。好ましいバリア材は分解性であるか、または生体液に曝されることにより合理的な時間内で消散するはずである。好ましいバリア材はまた、直接損傷組織に局所的に送達され得るように、数時間から数週間にわたるAOIの制御送達のデポ剤としても働くはずである。好ましいバリア材はゲルである。最も好ましいのは、溶液中への漸次消散、自然加水分解、酵素分解、またはこれらの組み合わせにより、インビボで吸収されル系、ポリアルキレンオキシド（それらのいくつかのメンバーは、体温でゲルを形成するが、室温では液状である）；およびHubbellら(WO 93/17669)およびSawh neyら，J ．Biomed．Mats．Res. 28，831-838(1994)により記載の光重合性ゲルである。プルロニックゲル系は、引用されたHubbellの材料と同様に、抗癒着バリア（Henryらの米国特許第4,911,926号および第5,135,751号；Henryの米国特許第 5,366,735号）および薬物送達ビヒクル（Viegasらの米国特許第5,292,516号）として知られる。多数の他の処方物が、薬物送達能を有するバリア材として潜在的に作用し得る。これらは、Dunnらの米国特許第4,938,763号、Danielsらの米国特許第5,108,75 5号、Sudmannらの米国特許第4,913,903号、Cohnらの米国特許第5,100,992号および第4,826,945号、Zalipskyらの米国特許第5,219,564号、De Lucaらの米国特許第4,741,872号および第5,160,745号、Churchillらの米国特許第4,526,938号および第4,942,035号、Dombの米国特許第4,888,413号、Nowinskiらの米国特許第4,51 1,478号、della Valleeらの米国特許第4,957,744号、Feigenの米国特許第4,925, 677号、Hinghamらの米国特許第4,994,277号、Franzらの米国特許第5,364,622号、およびEnglishらの米国特許第4,804,691号の重合体を包含する。ヒアルロン酸材（ヒアルロン酸ゲルおよび膜を包含する）もまた、損傷組織へのAOIの局所送達に適切である。ファブリックとして投与された酸化セルロースは、体液中でゲルを形成し、そして薬物を送達し得る（Sheffieldらの米国特許第4,889,722号）。しかし、それは幾分か炎症性であると考えられており、従って好ましくない。純粋に機械的な分解性材料）はあまり好ましくないが、薬物を直接損傷組織に局所制御送達するための他の手段と併用すれば適切であり得る。あまり好ましくはないが、容易に分解できないゲルバリアが用いられ得る。これらは、アガロース、架橋ポリアクリルアミド、ゲル化ポリビニルアルコール、ゲル化または架橋HEMA（ポリヒドロキシメチルアクリレート）、架橋デキストラン、および他の公知のゲル化材のような材料を包含する。これらは、非常に生体適合性であり得、そして薬物送達に適切である。ヒドロゲル中のゲル形成ポリマーの濃度は、周知のように可変である。適切なポリマー濃度は、少なくとも所望の処置期間の間（典型的には、数日から数週間である）、適用部位で持続するために十分な機械的特性を有するゲルを与える濃度である。種々のポリマーの最小有効ゲル化濃度は、超純アガロースについて0. 1％(w/w)程度の低さから、Hubbellらのポリマーについては３〜５％の間まで、での範囲である。上限は、溶解度、粘度、ゲルの脆性の開始、形成後の過剰膨潤、組織上の適用モノマーの浸透効果、および処置において適用されるポリマーの量を最小化する必要性により課される。これらの要因およびそれらの操作は当該分野で公知であり、そしてポリマーによって変化する。濃度の上限は、アガロースについては２％程度の低さから、Hubbellらのポリマーについては25〜30％の間まで、ポロキサマーについては50％またはそれ以上の濃度までで変化し得る。バリアおよび送達手段について好ましい材料は、特定の重要な特性によって特徴づけられる。これらの特性としては、生体適合性；１日から数週間にわたる送達時間；送達されるAOIとの適合性；およびより好ましい実施態様では、生分解性が挙げられる。好ましい材料は、少なくともいくらかの水を含有し、生理学的に受容可能な塩および緩衝液をさらに含有する；別の方法で材料の機械的特性および拡散特性と適合する場合には、より高いレベルの水が好ましい。単独の材料において、バリア機能と制御送達機能とを組み合わせることが好ましい。このような材料としては、ヒドロゲルが好ましい。以下の実施例に示すように、好ましい態様は、AOI（好ましくはSOD）の溶液中への取り込みである。この溶液はまた、生体適合性で生分解性のゲル形成光重合性モノマー、および適切な光開始剤、緩衝液、および安定剤を含有する；混合溶液を癒着溶解が行われた部位に送達して、そして罹患領域を保護する；そして組成物を光重合し、数日から１週間を超える間にわたってAOIを緩慢に放出するバリアゲルを創出する。上述のように、光重合性材料の濃度は可変である。実施例において用いられた特定の材料については、モノマーの好ましい濃度は、緩衝等張生理食塩水中で10 ％から約25％ w/wの範囲である。濃度がより高ければ、AOIの放出はより緩慢にかつより長くなり、そしてバリアとしてより長く持続するが、対応してより粘性になり、腹壁鏡またカテーテルを通して行われる場合、適用がより困難になり得る。他の材料は、前述のように、異なる好ましい濃度を有する。薬物送達手段。制御送達手段は、ゲルに加えて、またはゲルの代わりに用いられ得る。以下の特性を有する、当該分野で公知の多数の生理学的に受容可能な薬物送達材料が存在する：１．送達手段は、局所性または少なくとも潜在的に局所性でなければならない。それにより、内容物を主に特定の標的器官または領域に送達し得る。適切な手段は、ヒト用途のためには好ましくないが、浸透ポンプ（例えば、アルゼット(A lz ２．送達手段は、生体適合性でなければならず、そして特に、体内で実質的に炎症性であってはならない。例示的な制御送達手段は、生体腐食性ポリマー中に捕捉された薬物の小粒子を包含する。この生体腐食性ポリマーとしては、ポリグリコリド、ポリラクチド、またはポリ無水物が挙げられ、例えば、Mathiowitzらの米国特許第4,898,734号；Dombの米国特許第5,175,235号；Gerhartらの米国特許第5,286,763号；およびSaudekらの米国特許第4,745,161号に記載される。この小粒子は、必要に応じて放出遅延シェルで被覆されている。この小粒子は、次いで、癒着が防止されるべき部位に送達される。好ましくは、小粒子を、バリア膜またはゲルのような部位の周辺にとどめるさらなる手段を伴う。制御送達手段は、送達されるべき薬物が高い水溶解度を有し、かつ低分子量である場合に、特に重要である。３．好ましくは、送達手段は、薬物の送達と同時にまたはその後に引き続いて体内で分解する。可能なヒドロゲル材料として上述したポリマーのほとんどは、前段落中に列挙したポリマーと同様に生分解性である。ポリ（ヒドロキシ酸）のような正統な腐食性ポリマー（例えば、ポリグリコリド、ポリラクチド、およびポリカプロラクトン）は、いくつかの新規のポリマーよりやや炎症性であるが、多くの状況において適切である。薬学的に活性な化合物活性酸素阻害剤。本明細書中に使用されるように、AOIは、活性酸素種を破壊するか、またはその形成を防止する化合物として定義される。活性酸素種は、超酸化物、過酸化物（一般には過酸化水素）、およびヒドロキシルラジカル(OH)を包含する。活性酸素から誘導された他の活性種もまた包含され、これらとしては、例えば、次亜塩素酸イオン(OCl^-)、炭水化物上のヒドロキシルフリーラジカル、「一重項酸素」、またはオゾンが挙げられる。活性酸素種は、組織を直接損傷する。さらに、活性酸素種は、損傷部位に細胞を誘引することにより、または他の方法で炎症応答を刺激することにより、間接的な損傷を引き起こし得る。好ましい抗酸化剤は、スーパーオキシドジスムターゼ(SOD)である。SODは、超酸化物ラジカルを破壊することにより、組織傷害および炎症を防止すると考えられている。SODの形態のいずれもが適切である。供給源はヒト（免疫原性の最小化のために好ましい）を包含し、そして他の公知の供給源（ウシおよび細菌を包含する）；種々の組織（例えば、肝臓、赤血球など）由来のSOD；任意の機能的金属イオン（例えば、マンガン、鉄、銅、および亜鉛）を有するSODもまた包含する。組換えヒトSODの一形態（マンガン）はHecklらの米国特許第5,260,204号に記載されている。これは、組換えヒト銅／亜鉛SODの供給源としてChironの欧州特許出願第138111号を援用している。ペンダントポリマー（例えば、ポリエチレングリコールまたはポリビニルアルコール）で修飾されたSOD；組換えまたはトランスジェニックプロセスにより生成された天然SOD；および変異またはプロテインエンジニアリングにより生成されたSODの変異形態もまた包含される。これらのプロセスの全てが当該分野で公知である。部位へのSODまたは抗酸化剤クラスの他のタンパク質ベース薬物の送達の別の方法は、部位に注入された形質転換細胞による発現、および哺乳動物プロモーターを含む組換えDNA（例えば、プラスミド、発現カセット、またはウイルスベクター）によるその部位での細胞の一過性形質転換を包含する。これらは、任意の適切な手段（これらの手段としては、カテーテルおよび他の類似のデバイスを介するエレクトロポレーションまたはイオントホレシスを介する、溶液中のリポソーム、重合性複合物(polymeric composite)を含む）、および当該分野で公知の他の技術により局所的に送達され得る。抗酸化活性を有する（すなわち、活性酸素を破壊するかまたはその形成を防止する）他の薬物は、SODと併用して、互いに併用して、または単独のいずれかで癒着の防止において用いられ得る。タンパク質薬物は、カタラーゼ、ペルオキシダーゼ、および一般的なオキシダーゼまたは酸化酵素（例えば、シトクロームP450、グルタチオンペルオキシダーゼ、および他の天然または変性ヘムタンパク質）を包含する。ほとんどのこのような分子は、検出可能なペルオキシダーゼ活性を有する。小分子薬物は、活性酸素種を直接吸収するかまたは不活化することにより作用し得る。これらは、ビタミンＣ（アスコルビン酸）およびビタミンＥ（トコフェロール）、食物添加酸化防止剤（例えば、BHTおよびBHA；ブチル化ヒドロキシトルエン、ブチル化ヒドロキシアニソール）、フェノール性化合物およびキノン、および高遮蔽(highly hindered) 窒素フリーラジカルスカベンジャー（例えば、2,2,6,6-テトラメチルピペリジン）を包含する。他の薬物は、酵素活性を変化させることにより作用し、そしてこれらは非常に有効であり得る。アロプリノールは、酵素キサンチンオキシダーゼを阻害し、超酸化物の生成を実質的に妨害し、そして非常に有効であることが見出された。他のキサンチンオキシダーゼ阻害剤もまた有効であると予想される。ベラパミルはカルシウムチャンネルブロッカーとして知られ、そして血管拡張剤として使用される。これは、実施例に記載のモデルにおける一次癒着の防止に非常に有効である。その作用機構は不明であるが、刺激されたときに活性酸素を分泌すると考えられる細胞（例えば、マクロファージ）の刺激を妨害し得る。本明細書中で定義するように、ベラパミルは、活性酸素の阻害剤である。癒着処方物の防止において有効な材料が、すべてではないが、活性酸素に対して作用する。線維素溶解剤(fibrinolytics)のような他の材料もまた用いられ得る。これらの材料としては、ウロキナーゼ、組織プラスミノーゲンアクチベーター、およびアンクロドが挙げられる。これらの材料は、例えば、Dunnら、Am ．J. Obstet．Gynecol. 164:1327-1330(1991)により記載されるように、単独で有効であり得るが、AOIと併用されたとき増強され得る。処方物部位に投与されるAOIの量は、特定の部位、および用いられる制御送達手段の性質に対して調整される。適切な出発量は単回用量である；次いで、これは、量を最適化するためにより多量または少量に調整され得る。以下の実施例に示される結果は、広い至適範囲またはプラトーがSODについて存在することを示す；他の研究では、多くの適切なAOIもまた広い有効領域を示す。損傷部位に低レベルの阻害剤を長期で存在させることは、手術の直後の影響における保護を提供するだけでなく、治癒過程の少なくとも初期の間における傷害および炎症もまた最小にとどめ、そして一般に、より低い有効用量での使用を可能にする。 AOIおよびバリア材の処方物は、インビボ条件下で約0.5日から約20日までの期間にわたって損傷組織に直接AOIを送達するはずである。これは、好ましくは、A OIを取り込むゲルによって制御されるが、また、膜またはファブリックのような機械的バリアによっても提供され得る。処方物はまた、阻害剤の放出を制御するための付加手段を含有し得る。このような手段としては、例えば、マイクロスフェア、マイクロカプセル、マイクロ粒子、またはリポソームが挙げられる（本明細書中ではまとめて「マイクロスフェア」と称する）。特にAOIが約20,000ダルトン未満の小粒子であるとき、ここでは、AOIがマイクロスフェアからゲルに放出され、処方物は、そこから単独またはゲルからのAOIの放出と組み合わされて組織に拡散する。他の制御送達手段は、インタクトなまたは細分化したゲル、ポリマーに放出可能に結合したAOIを有するポリマー、およびAOIまたはAOIと不活性塩または有機分子との複合体の緩慢に溶解する粒子を含有し得る。例えば、遊離塩基としてのベラパミルは事実上水に不溶性であり、一方その塩酸塩は非常に可溶性である。従来の経時放出マイクロカプセルに液状の遊離塩基形態を包括することは、重合バリアにマイクロカプセルを取り込むことにより、より長期の送達を提供するために用いられ得る。処方物は、薬学的処方物の分野で公知の賦形剤、緩衝液、保存剤、および他の一般添加剤をさらに含有し得る。処方物はまた、バリアの形成に必要とされる成分を含有し得る。このような成分としては、例えば、重合誘導剤または重合賦与剤が挙げられる。これらは、光開始剤、連鎖移動剤、およびコモノマーを包含し得る。処方物は、使用直前に混合するため、１つより多くの容器中で調製され得、そして凍結乾燥、凍結、乾燥、冷蔵、または他の一般に用いられる手段により安定化され得る。処方物は滅菌されなければならない；処方物の成分が不安定である場合、濾過滅菌および無菌充填が好ましい。処置方法組織への処方物の適用処方物は、任意の適切な手段によって罹患組織に適用され得る。これらは、噴霧、医薬含有液での洗浄、器具を用いるかまたは手による塗布、および予備形成された阻害剤含有バリアの直接移植を包含する。バリアがゲルまたは他の固体形態である場合、ゲルは移植され得る；しかし好ましくは、ゲル前駆体と送達されるべき阻害剤との混合物の溶液が適用部位に送達され、そして適切な手段によって直接組織上でゲル化される。好ましいゲル化手段は、それらの簡易性のため、温度変化または剪断の停止による物理的ゲル化；および光反応性ゲル化モノマーの光重合である。化学酸化還元反応、イオン架橋、および他のゲル生成法もまた用いられ得る。送達およびゲル化機能を行うための器具は、当該分野で公知の原理および器具を用いて、特定の適用のために選択される。これらは、典型的には、身体の内部部位に最小限に侵襲するアクセスのためのカテーテルまたは腹壁鏡；腱または創傷修復におけるように表面または外科的に曝された部位のための注射器；および重合反応が必要とされるときの適切な光源を含む。いくつかの適切な器具は、米国特許第5,328,471号、米国特許第5,213,580号、および米国特許出願第08/054,3 85号（WO 94/24962）、第08/036,128号（WO 94/21324）、および第08/265,448号に詳細に記載される。これらは、本明細書中に参照として援用される。医療適用本明細書中に記載の組成物、医薬、および方法での処置は、癒着が形成し、そして潜在的または実際に有害な影響を有する任意の部位に対して意図される。これらは、以下における、一次癒着、および特に二次癒着を包含する：腹腔（腸− 腸、および腸−腹膜を包含する）；骨盤腔（尿管、卵巣、またはファロピウス管の他の構造体（互いおよび骨盤壁を包含する）への癒着を包含する）；腱およびその支持構造体（腱−滑車または腱−滑膜を包含する）；神経鞘の修復；脊柱または脊髄板の修復；心膜；炎症およびパンヌス形成を防止するための関節の処置；および機能を損傷するかまたは痛みを引き起こす癒着が形成される任意の状況。さらに、この組成物は、望ましくない組織増殖が起こっている他の状態において用いられ得る。これらは、動脈の再狭窄、ケロイドまたは過形成性瘢痕の修復、管を閉塞する肥大（例えば、良性前立腺肥大）、および子宮内膜症を包含し得る。本発明は、以下の非限定的な実施例を参照することによってさらに理解される。以下の研究は、（1）局所的に送達されたスーパーオキシドジスムターゼを用いる可能性を実証し、そして（２）手術後癒着の防止においてヒドロゲル送達SO Dの効力をヒドロゲル単独またはSOD単独と比較するように設計した。実施例１：モデル化合物の放出 SODタンパク質とFocalGelシステムの成分との適合性を、インビトロで検討した。SODとヒドロゲル(hydrogel)システムの各成分との適合性を、ゲル電気泳動、逆相HPLC、キャピラリー電気泳動、および酵素活性アッセイ（チトクロームＣ）により、SODの任意の効果についての試験を段階的に検討した。ゲルの光重合体化はUV光線を必要とするので、UV照射（340〜400nm）のSOD安定性に対する効果もまた評価した。ヒドロゲルマクロマー（プレポリマー）調製これまでに行われた全ての研究において、ヒドロゲルを以下の方法を用いて同コール（PEG）8000を加えた。滅菌濾過の後、バイアルを満たし、そして水およびt-ブタノールを凍結乾燥により除去した。これらの研究に使用する前に、ヒド成した。Ａ．処方物適合性研究ヒドロゲル処方物中のSOD適合性を、段階研究設計を用いて検討した。各処方物成分のSOD安定性を、紫外線照射（365nm）の存在下および非存在下で検討した。これらの研究において、タンパク質の安定性を、ゲル電気泳動（SDS-PAGEおよびネイティブPAGE）、HPLC、キャピラリー電気泳動、およびチトクロームＣの還元による酵素的活性によって評価した。コントロールサンプルは、１つのバイアルのSOD（15,000U、５mg）を1.5mLのP BSで最終[SOD]＝10KU/mLになるように希釈することにより調製した。さらに、40 w）を１つのバイアルのSOD（最終[SOD]＝10KU/mL）に加えることにより調製した。全ての紫外線処理サンプルについては、300μLのサンプル溶液を、20秒間または60秒間のいずれかで照射した。ヒドロゲル処理サンプルを、1.0mLのヒドロゲル溶液をSODのバイアルに最終[SOD]＝15KU/mLになるように加えることにより調製した。1.5mLのPBSをヒドロゲルに加えた後に、200μLのこの溶液を、20秒間または60秒間のいずれかで光重合した。サンプルを、分析の前に、37℃のインキュベーター中に24時間置いた。電気泳動のためのサンプルは、100μLのサンプルを300μLのサンプル緩衝液（Bio-Rad techinical manual LIT-188 REV C）で希釈することにより調製した。サンプルは分析の前には加熱しなかった。SODがヒドロゲルから遊離した場合（これらの場合には、20μLを使用した）サンプルを除いて、10μLのサンプルをゲルに載せた。スタンダードを、販売業者のプロトコルに従って泳動した。電気泳動ゲル中の分子量バンドを、画像解析により積分した。四量体構造で存在するタンパク質のバルクとともに、同一ではない２つの低分子量サブユニット形態が存在するように思われる。相対的な適合性比較のためのベースラインを得るために、最初に、生理食塩溶液（照射していない）コントロールを用いてSODのSDS-PAGEを行った。このデータは、92％のタンパク質が高分子量形態（67kDa）で存在し、残りの８％のタンパク質が低分子量モノマー種（1 5.5kDa）のままであることを示唆する。12.7kDaのピークもまた存在したが、バンドの強度は非常に弱く、従って定量できなかった。開始剤およびマクロマー処方物成分を添加しても、相対的なバンド強度はほぼ一定のままであり、そしてUV 照射を加えても明らかな変化は観察されなかった。 SODコントロール溶液（PBS pH7.4中のSOD、[SOD]＝1.33および3.33mg/mL）のネイティブPAGE分析は、タンパク質含量に直接比例するバンド強度を有する単一コントロールにより示されたものに類似するSODバンド移動および強度を示す。 SODを含有する１つのバイアルに２mLの開始剤溶液をピペッティングすること（最終[SOD]＝7.5KU/mL）。SOD/開始剤の300μLのアリコートを、ブラックレイ（Black Ray）ランプ（出力＝10mW/cm²、1max＝365nm）下で照射した。分析の結果を、SODピークの全面積、計算されたSOD量、予想されるSOD量、およびパーセそしてSOD/開始剤サンプルにおいて観察されたレベルと比較した。２分および５分の照射時間を用いたバルクゲル重合によってSODをまたヒドロゲル中に組み込んだ。重合の後、SODを、200μLのバルクゲル（8mm×10mm）から PBS中に２日間にわたって抽出した。各抽出サンプルをSOD量について分析し、そーク面積は、UV照射後（照射時間５分まで）、非照射コントロールと比較して一ドロゲルからのSOD抽出は、86.4であり、そして予想されたレベルの78.2％を回収した。抽出は完全ではなさそうである。なぜなら、SODは49時間で部分的にしか放出されないことがインビトロで示されたからである。ヒドロゲルから抽出したSODに関するクロマトグラムは、ピーク分布がコントロール溶液のものと同様のままであったことを示す。キャピラリー試験を行った。この実験の準備において、水中のSODの標準曲線を作製した（1.48〜11.84KU/mL）。SOD適合性サンプルを、1.2、1.6、および11. 9KU/mLに調製した。CEによる分離は、３つの鋭いピーク（3.15、3.20、および3. 27分）の存在を示す。第３のピークは、第４のピークである可能性がある肩を有する。各ピークをそれぞれ積分し、そして第３のピークは、肩のピーク領域を含むように積分した。SOD濃度に対する全ピーク面積の標準曲線は、[SOD]＝1.48〜 /F127（未照射）で検出されたSODのレベルが130であり、そして予想されたレベルの82％であったことを示す。SOD/開始剤サンプルが照射された場合、SODレベルは、SOD濃度に関わらず高いままであった。低い[SOD]サンプル（1.2KU/mL）由来の結果は、より高い濃度（11.9KU/mL）で調製されたものよりも、応答可変性であることを示した。バルク光重合されたヒドロゲルから抽出したSODは、予想されるSODレベルの89〜108％が回収されたことを示し、そしてピーク分布がSOD コントロールと同様に保たれたことを示した。標準的なアッセイ条件下で、0.1mM EDTAを含有する50mMリン酸カリウム緩衝液（pH 7.8）中の5×10^-5Mキサンチンオキシダーゼ（XOD）を用いて25℃でチトクロームＣ（10^-5M）還元を測定した。50％のチトクロームＣ還元の阻害を、１ユニットのSOD活性として定義した。連続的な分光光度率測定を、Hitachi UV/Vis 分光光度計を用いて550nmで５分間行った。適合性溶液を調製し、そして[SOD]＝ 5000U/mLに処理し、次いで通常の生理食塩溶液で最終[SOD]＝10U/mLに希釈した。相対的な比活性を、処理溶液の活性とコントロール溶液の活性（[コントロール] ＝10U/mL、チトクロームＣ還元活性の50％の阻害を有する）とを比較することにより決定した。通常の生理食塩溶液中のSOD（10U/mL、照射なし）を、相対的な適合性比較のためのコントロールサンプルとして使用した。アッセイにより定義された理論的な酵素活性は50％の阻害活性であり、そしてコントロール溶液は予想される応答（51.5％の阻害）を示した。開始剤および／またはマクロマー成分を加えても、 SOD活性における劇的な変化は観察されなかった。さらに、SOD/ヒドロゲル処方物をUV照射に１分間曝した場合も、SOD活性のレベル（50.9％の阻害）が保持された。インビトロの放出特性続いて、４つのレベルのSOD（１、３、５、および10KU/mK）を含有するバルク光重合されたヒドロゲルデバイスを調製し、そしてSODのインビトロの放出キネティックスについて評価した。紫外線（10mW/cm²）の存在下または非存在下で、ヒドロゲルプレポリマー溶液の個々の成分の各々にSODを溶解した。次いで、SOD を、ゲル電気泳動（SDS PAGEおよびネイティブPAGE）、逆相HPLC、キャピラリー電気泳動、および酵素活性アッセイ（チトクロームＣ還元阻害として）により特徴づけた。これらの技術を用いても、タンパク質の特性または酵素活性には変化が見られなかった。バルクヒドロゲルからのSOD放出のキネティックスを、1,000 〜10,000U/mLの範囲のヒドロゲル充填で、インビトロで決定した。 10％マクロマー溶液を、通常の生理食塩溶液中の1200ppmのIrgacureおよび３％のF127を用いて調製した。インビボ研究設計を平行させ、SODの４つの用量（１、３、５、および10KU/mL）をマクロマー溶液に混合し、そして200μLのアリコート（365nm、10mW/cm²）中でバルク光重合した。PBS中のSOD放出を、ミクロB CA法を用いて長時間モニターした；放出されたSODの活性もまた、チトクロームＣ阻害分析を用いて特徴づけた。ヒドロゲル架橋密度および効果的な分子種サイズは、ヒドロゲルからの薬物放出キネティックスの２つの主要な決定因子である。この場合、SODの３つの分子量種（67kDaオリゴマー、15.5および12.7kDaモノマー）が存在する。デキストランモデル成分を用いたデータにもとづいて、低分子量種が最初の12時間にゲルから完全に溶出され、そして中程度の分子量種（67kDa）が最初の48時間に、最初に一気に放出され、表面上の拡散領域が奪われたことの証拠として延長された放出を伴うことを示す。インビトロでの生理食塩溶液中のヒドロゲルからのSOD放出は二相性であった。10％マクロマー溶液から形成されたヒドロゲルは、取り込まれたSODの90％を4 8時間で（t_1/2＝４時間）放出し、残りの10％をゼロ次キネティックスによって以後７日間（t₁₀₀＝８日間）にわたって放出した。デキストランで得られたデータと比較すると、大分子量種の妨げられた拡散率を有して結合した薬物拡散経路の長さの増大は、放出の持続時間を８日間に拡大することをもたらす。サンプル溶出培地の比活性分析は、拡大した処方物の安定性を示す。実施例２：ラットモデルにおける一次癒着の阻害動物モデルインビボの効力実験を、一次および二次ラット子宮角癒着モデル（RUHAM）で行い、IP巨丸剤により送達された場合と制御されたヒドロゲル送達とでSODの相対的な効力を比較した。コントロールグループは、未処置の（傷害された）動物およびヒドロゲル（SODなし）動物を含む。最終的なインビボの効力実験は、一次および二次RUHAMモデルにおいて用量範囲実験設計（１、３、５、および10KU/ mL）を用いた。インビボの評価実験のために用いた終点は、処置後１週間であった。実験は２つのラット子宮角モデルを用いて行い、これは、最初の虚血性の発作に応答して癒着を発生する。第１のモデルは、７日間の期間で新規の癒着を生じる（一次モデル）。第２のモデルは、再形成（二次）モデルであり、これにより一次モデルで発生したフィブリンの癒着が分離し、そして癒着の再形成が癒着分離の７日後に観察される。40匹の性的に成熟した雄性Sprague-Dawleyラット（22 5〜250グラム）を一次癒着モデルに用いた。動物を、ケタミン（25mg/mL）、キシラジン（1.3mg/mL）、およびアセプロマジン（0.33mg/mL）の混合物４ml/Kgの筋肉内注射後に麻酔した。外科手術中、無菌技術を使用した。腹部を準備した後、３センチメートルの下部正中線切開を行い、骨盤腔を曝した。子宮角を、血管弧を曝すように配置した。子宮角の中心部分に対する虚血を、二極性の電気メスを用いて血管弧を焼灼することにより誘導した。最小の血流を維持し、器官の生存を確実にするために、角に血液を供給するほとんどの前方および後方の血管を焼灼するようには処置を行わなかった。２つのさらなる外傷を、電気メスを用いて角の対腸管粘膜の表面に約2.5cm間隔で形成した。外科手術による傷害の後、動物を、無秩序な様式で４つの処置グループのうちの１つに割り当てた。筋肉腹膜層および覆っている腹膜を、4−0のビクリル（vicryl）吸収可能縫合で閉じ、そして皮膚切開を、7mmのステンレス鋼針を用いて閉じた。動物を、１週間の終わりに癒着形成について評価した。子宮角の「癒着パーセント」は、癒着に携わる子宮角の測定された長さを子宮角の全体の長さで割り、 100をかけることにより計算される。「パーセント効果」は、100−「癒着パーセント」である。第２の実験において、一次癒着モデルの開始の７日後、動物（n＝40）を開腹し、もう一度子宮角を曝した。顕微的な外科技術を用いて、子宮角と他の器官との間の癒着を注意深く切り開き、分離した。二極性の電気メスを用いて血流遮断を維持した。癒着分離の完成において、動物を異なるグループに割り当て、プロトコルに従って処置し、そして腹膜腔を閉じた。動物を、１週間の期間の終わりに癒着再形成について評価し、そして癒着スコアを上記のように計算した。一次および二次癒着モデルの両方において、動物を、以下の実験設計に従って４つのグループの１つに無秩序に割り当てた：グループ１：さらなる処置を伴わないコントロール傷害グループ２：ヒドロゲルバリアのみグループ３：SODのみグループ４：ヒドロゲル含有SOD グループ２およびグループ４を処置する（ヒドロゲルが必要とされる場合）ために、処方物を上記のように調製し、そして0.25mLの溶液を、動物当たり１mLの全容量で子宮角の中央および側方表面に載せた。調製物を、20秒間、20mW/cm²の名目上の照射を誘導する長波紫外線に曝することにより実質的に光重合した。グループ３においては、通常の生理食塩溶液で再構成された凍結乾燥したSOD を、上記のように0.25mLのアリコート中の各子宮角の表面に滴下した。一次および二次癒着形成における用量の効果を決定するために、４回の実験を行った。2, 000〜10,000U/mLの範囲の用量を、直接腹膜組織に適用された場合とヒドロゲル処方物の補充物として加えられた場合とで比較した。一次癒着モデルにおける結果結果を図11に示す。全ての「未処置の」コントロール動物（グループ１）において、93％またはそれより多い子宮角表面が近隣の子宮間膜および／または器官と癒着し、７％またはそれより少ない効力スコアがもたらされた。癒着形成にバリアとして適用されたヒドロゲル（グループ２）は、11〜46％効力の範囲の効力スコアの広い範囲を示した。SOD溶液の適用（グループ３）は、86〜93％の効力スコアをもたらした。ヒドロゲル含有SODが適用された（グループ４）場合、効力スコアは79〜85％の範囲であった。SODまたはヒドロゲル内に取り込まれたSOD のボーラス用量はそれぞれ2,000（10000U/kg）または10,000U/mL（50,000U/kg）であったが、効力における有意な効果は観察されなかった。実施例３：ラットモデルにおける癒着再形成の防止二次癒着モデルにおける結果結果を図２に示す。全ての「未処置の」コントロール動物（グループ１）において、94％またはそれより多い子宮角表面が近隣の子宮間膜または他の器官と癒着し、６％またはそれより少ない効力スコアがもたらされた。癒着再形成にバリアとして適用されたヒドロゲル（グループ２）は、20〜40％の効力スコアをもたらした。SOD溶液が適用された場合（グループ３）は、スコアは０〜29％の範囲の数であった。最後に、ヒドロゲルへの組み込み後のSODの適用（グループ４）は、67〜94％の間の範囲の効力スコアをもたらした。SODのボーラス用量またはヒドロゲル内に取り込まれたSODの用量がそれぞれ2,000、5,000、または10,000U /mLであった場合、効力における有意な効果は観察されなかった。用量の関数として有意な相違が見出されなかったので、個々の実験から得られたデータを組み合わせ、一次と二次の両方のモデルについて処置グループ間の相違を図３に示すように要約した。 Diamondら、Fert ．and Ster. 47:864(1987)；Petersら、Br ．J．Obstet．Gyn. 99:59(1992)；Lucianら、Obstet ．& Gyn. 74:220(1989)；Lucianoら、Fert ．and Ster. 48:1025(1987)；およびSurreyら、J ．Repro．Med. 27:658（1982）は、動物モデルにおける二次癒着の縮小が、一次癒着もより困難であることを示した。本明細書に示されたデータに基づけば、ラットにおける一次および二次癒着が、異なる病理学的順序を通じて形成されるようである。損傷部位における癒着形成についての組織学的評価および傾向が比較される場合、２つのモデル間の相違が明らかになる。フィブリンの分離に続く癒着の再吸収は、一次モデルにおいて７日目から28日間起こった。対照的に、二次癒着モデルは、８週間にわたって再吸収されない持続的なコラーゲン様癒着をもたらす。これらのデータは、単回のボーラスが提供し得るよりも二次癒着を防止するためにより長い期間持続する薬理学的な介入が必要であることを示す。この二次モデルで形成される癒着は、臨床的な状態において経験されたものに質的に類似する。ヒドロゲルの他の処方物が癒着モデルにおいて効力を産生していたが、本研究に用いられた特定の処方物および適用方法は、バリアとして辺縁性の効力を提供した。しかし、同じ処方物中に充填されたSOD、またはSOD溶液の子宮角への直接の適用は、一次モデルにおいてはるかにより高い効力を示した。これは、この一次癒着モデルにおいて、効力が病理学的順序における早期の介入によりSODによって産生されることを示し、これは、炎症の開始段階中の酸素誘導ラジカルの産生と一致する。さらに、血液からのSODの除去速度が迅速であるために、ボーラス用量により示される効力は短時間の構成において起こったことが推測され得る。二次モデルにおいては、バリア単独またはSODのボーラスが適用された場合に効力が劇的に減退した。しかし、治療の２つの様式が組み合わされた（すなわち、バリアがSODと充填された）場合、有意なレベルの効力が達成された。これは、SODに対するより延長された曝露が、一次モデルにおいて形成される短命フィブリンの癒着よりもむしろ、臨床的な集団において形成される癒着に類似する、分離した、成熟コラーゲン様癒着を処置する場合に必要とされるという仮説を支持する。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号ＦＩＡ６１Ｋ 47/32 Ａ６１Ｋ 37/50 ＡＥＤ

Claims

【特許請求の範囲】１．組織部位における細胞増殖を阻害する組成物であって、該組織部位で重合バリアを形成するために重合し得る物質、ならびに活性酸素種の阻害剤、不活性塩と該阻害剤の複合体、および有機分子と該阻害剤との複合体からなる群から選択される、有効量の１つまたはそれ以上の化合物を含み、ここで該阻害剤がカタラーゼではない、組成物。２．薬学的に受容可能なキャリアをさらに含む、請求項１に記載の組成物。３．活性酸素種の阻害剤以外の生物学的に活性な化合物をさらに含む、請求項１に記載の組成物。４．前記阻害剤が、ポリマーに放出可能に結合される、請求項１に記載の組成物。５．前記阻害剤が、リポソーム、マイクロ粒子、またはマイクロカプセルにカプセル化される、請求項１に記載の組成物。６．前記阻害剤が、インタクトなまたは粉末化したゲル中に存在する、請求項１に記載の組成物。７．重合したとき、前記物質がヒドロゲルを形成する、請求項１に記載の組成物。８．重合したとき、前記物質がインビボで生分解性である、請求項１に記載の組成物。９．前記物質が、光重合性である、請求項１に記載の組成物。１０．前記阻害剤が、スーパーオキシドジスムターゼ、アロプリノール、ベラパミル、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項１に記載の組成物。１１．前記阻害剤が、スーパーオキシドジスムターゼである、請求項１０に記載の組成物。１２．患者の組織部位における細胞増殖と関連した医学的条件を防止または緩和する方法であって、該組織部位で重合バリア形成するように重合し得る物質、ならびに活性酸素種の阻害剤、該阻害剤と不活性塩との複合体、および該阻害剤と有機分子との複合体からなる群から選択された１つまたはそれ以上の有効量の化合物を含む組成物を、その処置を必要とする患者に投与する工程を包含する、方法。１３．前記組成物が、薬学的に受容可能なキャリアをさらに含む、請求項１２に記載の方法。１４．前記組成物が、活性酸素種の阻害剤以外の生物学的に活性な化合物をさらに含む、請求項１２に記載の方法。１５．前記阻害剤が、放出可能にポリマーに結合する、請求項１２に記載の方法。１６．前記阻害剤が、リポソーム、マイクロ粒子、またはマイクロカプセル中にカプセル化される、請求項１２に記載の方法。１７．前記阻害剤が、インタクトなまたは粉末化したゲル中に存在する、請求項１２に記載の方法。１８．重合したとき、前記物質がヒドロゲルを形成する、請求項１２に記載の方法。１９．重合したとき、前記物質がインビボで生分解性である、請求項１２に記載の方法。２０．前記物質が、光重合性である、請求項１２に記載の方法。２１．前記阻害剤が、スーパーオキシドジスムターゼ、アロプリノール、ベラパミル、カタラーゼ、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項１２に記載の方法。２２．前記阻害剤が、スーパーオキシドジスムターゼである、請求項１２に記載の方法。２３．前記医学的条件が、手術後癒着、再狭窄、ケロイド瘢痕化、肥大性瘢痕化、肥大性管閉塞、良性前立腺肥大、および子宮内膜症からなる群から選択される、請求項１２に記載の方法。２４．組織部位での細胞増殖と関連した医学的条件を処置することにおける使用のための薬物を調製するための、請求項１２〜２３のいずれかに記載の組成物の使用。