JPH10282098A - 蛍光免疫測定法 - Google Patents
蛍光免疫測定法Info
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- JPH10282098A JPH10282098A JP9093496A JP9349697A JPH10282098A JP H10282098 A JPH10282098 A JP H10282098A JP 9093496 A JP9093496 A JP 9093496A JP 9349697 A JP9349697 A JP 9349697A JP H10282098 A JPH10282098 A JP H10282098A
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Abstract
(57)【要約】
【課題】 蛍光強度の変化（蛍光消光法、蛍光消光阻害
法）により高分子量の物質、特に蛋白質を容易に測定す
るキットを提供する。 【解決手段】 蛍光物質で標識した抗体を用いて、測定
対象物を測定することにおいて標識抗体と測定対象物が
凝集することにより起こる蛍光強度の減少を測定するこ
とを特徴とする蛍光免疫測定法、蛍光物質で標識した抗
体と蛍光消光物質で標識した測定対象物質を用いて、検
体中に測定対象物が存在することにより標識抗体と標識
測定対象物の凝集を阻害する結果起こる蛍光強度の増加
を測定することを特徴とする蛍光免疫測定法である。
法）により高分子量の物質、特に蛋白質を容易に測定す
るキットを提供する。 【解決手段】 蛍光物質で標識した抗体を用いて、測定
対象物を測定することにおいて標識抗体と測定対象物が
凝集することにより起こる蛍光強度の減少を測定するこ
とを特徴とする蛍光免疫測定法、蛍光物質で標識した抗
体と蛍光消光物質で標識した測定対象物質を用いて、検
体中に測定対象物が存在することにより標識抗体と標識
測定対象物の凝集を阻害する結果起こる蛍光強度の増加
を測定することを特徴とする蛍光免疫測定法である。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、溶液中の測定対象
物を測定あるいは検出する手段として利用することがで
き、特に環境、食品及び医療の分野に有用である。
物を測定あるいは検出する手段として利用することがで
き、特に環境、食品及び医療の分野に有用である。
【０００２】
【従来の技術】従来の蛍光免疫を利用した測定方法にお
いて、蛍光増強法、蛍光消光法、蛍光増強阻害法および
蛍光消光阻害法が知られている。
いて、蛍光増強法、蛍光消光法、蛍光増強阻害法および
蛍光消光阻害法が知られている。
【０００３】これらの方法は、抗体と蛍光色素標識され
た抗原が免疫反応することにより標識蛍光色素の蛍光強
度が変化することを利用したものである。また、これら
の方法は、ハプテン（低分子量物質）を検出する手段と
してよく利用されている。
た抗原が免疫反応することにより標識蛍光色素の蛍光強
度が変化することを利用したものである。また、これら
の方法は、ハプテン（低分子量物質）を検出する手段と
してよく利用されている。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】上記の従来法を利用し
た場合、蛋白質のような高分子量の物質に利用すること
は困難であった。その理由の一つとして、抗原抗体反応
による蛍光強度の変化は、抗体の抗原結合部位に標識蛍
光物質の一部あるいは全部が取り込まれることにより起
ることが知られており、蛋白質の場合には標識すること
により抗原性が変化し、抗原抗体反応が起らない可能性
が高いからである。
た場合、蛋白質のような高分子量の物質に利用すること
は困難であった。その理由の一つとして、抗原抗体反応
による蛍光強度の変化は、抗体の抗原結合部位に標識蛍
光物質の一部あるいは全部が取り込まれることにより起
ることが知られており、蛋白質の場合には標識すること
により抗原性が変化し、抗原抗体反応が起らない可能性
が高いからである。
【０００５】
【課題を解決するための手段】上記課題を解決するため
の一つの手段として、蛍光物質で標識した抗体を用い
て、測定対象物を測定することにおいて標識抗体と測定
対象物が凝集することにより起こる蛍光強度の減少を測
定することを特徴とする蛍光免疫測定法を利用した。こ
の方法では、凝集隗に取り込まれた蛍光物質は、凝集前
のものと比較して蛍光物質同士が近傍に集まっているた
め自己消光作用を起こす。この方法では抗体を標識する
ため抗原性を変えることなく、つまり抗原抗体反応性を
変化させることなく測定することができる。
の一つの手段として、蛍光物質で標識した抗体を用い
て、測定対象物を測定することにおいて標識抗体と測定
対象物が凝集することにより起こる蛍光強度の減少を測
定することを特徴とする蛍光免疫測定法を利用した。こ
の方法では、凝集隗に取り込まれた蛍光物質は、凝集前
のものと比較して蛍光物質同士が近傍に集まっているた
め自己消光作用を起こす。この方法では抗体を標識する
ため抗原性を変えることなく、つまり抗原抗体反応性を
変化させることなく測定することができる。
【０００６】また、もう一つの手段として、蛍光物質で
標識した抗体と蛍光消光物質で標識した測定対象物質を
用いて、検体中の測定対象物を測定することにおいて、
検体中に測定対象物が存在することにより標識抗体と標
識抗原の凝集を阻害する結果起こる蛍光強度の増加を測
定することを特徴とする蛍光免疫測定法あるいは、標識
物質を抗体側と抗原側を入れ替えた方法を利用した。こ
の方法では、検体中に測定対象物がない場合には、蛍光
標識した抗体と蛍光消光物質標識した抗原とが凝集して
蛍光物質と蛍光消光物質が近傍になるため消光作用を起
こす。一方、検体中に測定対象物がある場合には、蛍光
標識した抗体と測定対象物とが凝集し、蛍光標識抗原が
単体で存在し、蛍光物質と蛍光消光物質が近傍にないた
め消光作用を起こさない。この方法では、抗体としてポ
リクローナル抗体あるいは数種類のモノクローナル抗体
を使用した。この方法により抗原性を著しく変えること
なく、つまり抗原抗体反応性を変化させることなく測定
することができる。
標識した抗体と蛍光消光物質で標識した測定対象物質を
用いて、検体中の測定対象物を測定することにおいて、
検体中に測定対象物が存在することにより標識抗体と標
識抗原の凝集を阻害する結果起こる蛍光強度の増加を測
定することを特徴とする蛍光免疫測定法あるいは、標識
物質を抗体側と抗原側を入れ替えた方法を利用した。こ
の方法では、検体中に測定対象物がない場合には、蛍光
標識した抗体と蛍光消光物質標識した抗原とが凝集して
蛍光物質と蛍光消光物質が近傍になるため消光作用を起
こす。一方、検体中に測定対象物がある場合には、蛍光
標識した抗体と測定対象物とが凝集し、蛍光標識抗原が
単体で存在し、蛍光物質と蛍光消光物質が近傍にないた
め消光作用を起こさない。この方法では、抗体としてポ
リクローナル抗体あるいは数種類のモノクローナル抗体
を使用した。この方法により抗原性を著しく変えること
なく、つまり抗原抗体反応性を変化させることなく測定
することができる。
【０００７】本発明の蛍光免疫測定法を利用することに
より、高分子量を有する物質、特に蛋白質の測定キット
を容易に提供することができる。
より、高分子量を有する物質、特に蛋白質の測定キット
を容易に提供することができる。
【０００８】
【発明の実施の形態】本発明では、抗体あるいは抗原の
アミノ基と結合できる官能基を有している蛍光色素を利
用する。タンパク質との結合効率の面から官能基として
は、サクシミドあるいはイソチオシアネート基が望まし
い。
アミノ基と結合できる官能基を有している蛍光色素を利
用する。タンパク質との結合効率の面から官能基として
は、サクシミドあるいはイソチオシアネート基が望まし
い。
【０００９】抗体あるいは抗原１分子に対する蛍光色素
の結合数は、任意に変えることが可能であり、なるべく
多く結合させることができる。しかし、多く結合させる
と抗体あるいは抗原の性能（親和性、溶解性等）を低下
させる恐れがあるため、結合数は１〜２０までが望まし
い。色素を抗体あるいは抗原に結合する際、上記官能基
を有する場合には室温で数時間で結合することができ
る。その後、未反応色素をゲル濾過あるいは透析により
容易に取り除くことができる。
の結合数は、任意に変えることが可能であり、なるべく
多く結合させることができる。しかし、多く結合させる
と抗体あるいは抗原の性能（親和性、溶解性等）を低下
させる恐れがあるため、結合数は１〜２０までが望まし
い。色素を抗体あるいは抗原に結合する際、上記官能基
を有する場合には室温で数時間で結合することができ
る。その後、未反応色素をゲル濾過あるいは透析により
容易に取り除くことができる。
【００１０】また、蛍光消光物質を標識する場合におい
ても、抗体あるいは抗原のアミノ基と結合できる官能基
を有している蛍光消光物質を利用する。タンパク質との
結合効率の面から官能基としては、サクシミドあるいは
イソチオシアネート基が望ましい。
ても、抗体あるいは抗原のアミノ基と結合できる官能基
を有している蛍光消光物質を利用する。タンパク質との
結合効率の面から官能基としては、サクシミドあるいは
イソチオシアネート基が望ましい。
【００１１】抗体あるいは抗原１分子に対する蛍光消光
物質の結合数は、任意に変えることが可能であり、なる
べく多く結合させることができる。しかし、多く結合さ
せると抗体あるいは抗原の性能（親和性、溶解性等）を
低下させる恐れがあるため、結合数は１〜２０までが望
ましい。色素を抗体あるいは抗原に結合する際、上記官
能基を有する場合には室温で数時間で結合することがで
きる。その後、未反応色素をゲル濾過あるいは透析によ
り容易に取り除くことができる。
物質の結合数は、任意に変えることが可能であり、なる
べく多く結合させることができる。しかし、多く結合さ
せると抗体あるいは抗原の性能（親和性、溶解性等）を
低下させる恐れがあるため、結合数は１〜２０までが望
ましい。色素を抗体あるいは抗原に結合する際、上記官
能基を有する場合には室温で数時間で結合することがで
きる。その後、未反応色素をゲル濾過あるいは透析によ
り容易に取り除くことができる。
【００１２】今回発明した蛍光免疫測定法を導入するこ
とにより多くの測定対象物を測定することができる。特
に、免疫測定項目の大多数を占めているタンパク質を定
量的に測定するには、本発明の蛍光免疫測定法を利用す
ることが最も容易な方法であると考えられる。
とにより多くの測定対象物を測定することができる。特
に、免疫測定項目の大多数を占めているタンパク質を定
量的に測定するには、本発明の蛍光免疫測定法を利用す
ることが最も容易な方法であると考えられる。
【００１３】今回発明した蛍光免疫測定法は、蛍光物質
の局所的高濃度による自己消光現象あるいは、蛍光消光
剤を利用した蛍光消光現象を抗原抗体反応による凝集作
用に導入することにより測定対象物測定法を提供する。
の局所的高濃度による自己消光現象あるいは、蛍光消光
剤を利用した蛍光消光現象を抗原抗体反応による凝集作
用に導入することにより測定対象物測定法を提供する。
【００１４】以下に、具体的に上記発明の一例として、
蛍光色素としてフルオレセイン、蛍光消光物質としてニ
ッケル錯体、抗体として抗ＣＲＰポリクローナル抗体を
用いて測定対象物としてＣＲＰを測定した方法について
記述する。
蛍光色素としてフルオレセイン、蛍光消光物質としてニ
ッケル錯体、抗体として抗ＣＲＰポリクローナル抗体を
用いて測定対象物としてＣＲＰを測定した方法について
記述する。
【００１５】（フルオレセイン標識抗ＣＲＰ抗体の作
製）FLUORESCEIN-ISOTHIOCYANATE（FITC、Mw=389、吸収
極大：約490nm）1.30mgを100μｌのDMFに溶解した（3.3
3*10-6モル、抗体比50倍当量）。
製）FLUORESCEIN-ISOTHIOCYANATE（FITC、Mw=389、吸収
極大：約490nm）1.30mgを100μｌのDMFに溶解した（3.3
3*10-6モル、抗体比50倍当量）。
【００１６】この液を10mg/ml抗CRP抗体液（6.67*10-8モ
ル）に添加し、室温で一晩撹拌しながら反応した。
ル）に添加し、室温で一晩撹拌しながら反応した。
【００１７】反応後、SephadexG-25カラム（サイズ：40
0*20ｍｍ、平衡バッファ：PBS、流速：2ml/分）にか
け、タンパク質分画のみを集めた。
0*20ｍｍ、平衡バッファ：PBS、流速：2ml/分）にか
け、タンパク質分画のみを集めた。
【００１８】この分画を紫外線・可視光線スペクル分析
を行った結果、抗体１個あたりに10.5個のFITCが結合し
ていた（抗CRP-FITC）。
を行った結果、抗体１個あたりに10.5個のFITCが結合し
ていた（抗CRP-FITC）。
【００１９】（フルオレセイン標識ＣＲＰの作製）FLUO
RESCEIN-ISOTHIOCYANATE（FITC、Mw=389、吸収極大：約
490nm）1.30mgを100μｌのDMFに溶解した（3.33*10-6モ
ル、抗体比50倍当量）。
RESCEIN-ISOTHIOCYANATE（FITC、Mw=389、吸収極大：約
490nm）1.30mgを100μｌのDMFに溶解した（3.33*10-6モ
ル、抗体比50倍当量）。
【００２０】この液を7.14mg/mlCRP液（6.67*10-8モル）
に添加し、室温で一晩撹拌しながら反応した。
に添加し、室温で一晩撹拌しながら反応した。
【００２１】反応後、SephadexG-25カラム（サイズ：40
0*20ｍｍ、平衡バッファ：PBS、流速：2ml/分）にか
け、タンパク質分画のみを集めた。
0*20ｍｍ、平衡バッファ：PBS、流速：2ml/分）にか
け、タンパク質分画のみを集めた。
【００２２】この分画を紫外線・可視光線スペクル分析
を行った結果、抗体１個あたりに9.5個のFITCが結合し
ていた（CRP-FITC）。
を行った結果、抗体１個あたりに9.5個のFITCが結合し
ていた（CRP-FITC）。
【００２３】（ニッケル錯体標識抗ＣＲＰ抗体の作製）
BIS（trichlorBenzenedithol）Nickel-ISOTHIOCYANATE
（NiITC、Mw=４８１）1.60mgを100μｌのDMFに溶解した
（3.33*10-6モル、抗体比50倍当量）。
BIS（trichlorBenzenedithol）Nickel-ISOTHIOCYANATE
（NiITC、Mw=４８１）1.60mgを100μｌのDMFに溶解した
（3.33*10-6モル、抗体比50倍当量）。
【００２４】この液を10mg/ml抗CRP抗体液（6.67*10-8モ
ル）に添加し、室温で一晩撹拌しながら反応した。
ル）に添加し、室温で一晩撹拌しながら反応した。
【００２５】反応後、SephadexG-25カラム（サイズ：40
0*20ｍｍ、平衡バッファ：PBS、流速：2ml/分）にか
け、タンパク質分画のみを集めた。
0*20ｍｍ、平衡バッファ：PBS、流速：2ml/分）にか
け、タンパク質分画のみを集めた。
【００２６】この分画を紫外線・可視光線スペクル分析
を行った結果、抗体１個あたりに6.2個のNiITCが結合し
ていた（抗CRP- NiITC）。
を行った結果、抗体１個あたりに6.2個のNiITCが結合し
ていた（抗CRP- NiITC）。
【００２７】（ニッケル錯体標識ＣＲＰの作製）BIS（t
richlorBenzenedithol）Nickel-ISOTHIOCYANATE（ NiIT
C 、Mw=４８１）1.60mgを100μｌのDMFに溶解した（3.3
3*10-6モル、抗体比50倍当量）。
richlorBenzenedithol）Nickel-ISOTHIOCYANATE（ NiIT
C 、Mw=４８１）1.60mgを100μｌのDMFに溶解した（3.3
3*10-6モル、抗体比50倍当量）。
【００２８】この液を7.14mg/mlCRP液（6.67*10-8モル）
に添加し、室温で一晩撹拌しながら反応した。
に添加し、室温で一晩撹拌しながら反応した。
【００２９】反応後、SephadexG-25カラム（サイズ：40
0*20ｍｍ、平衡バッファ：PBS、流速：2ml/分）にか
け、タンパク質分画のみを集めた。
0*20ｍｍ、平衡バッファ：PBS、流速：2ml/分）にか
け、タンパク質分画のみを集めた。
【００３０】この分画を紫外線・可視光線スペクル分析
を行った結果、抗体１個あたりに7.2個のNiITCが結合し
ていた（CRP- NiITC）。
を行った結果、抗体１個あたりに7.2個のNiITCが結合し
ていた（CRP- NiITC）。
【００３１】（FITC-抗CRPの自己消光によるCRP測定）
上記で作製した抗CRP-FITC溶液700μlの蛍光測定を行っ
た（温度：20度、励起波長：490nm、蛍光波長：520n
m）。測定後、この溶液に各濃度のCRP（最終濃度：0か
ら20mg/dl）10μlを混合し、2分後再度蛍光を測定し
た。その結果、添加したCRP量の増加とともに蛍光強度
が減少した（図1）。
上記で作製した抗CRP-FITC溶液700μlの蛍光測定を行っ
た（温度：20度、励起波長：490nm、蛍光波長：520n
m）。測定後、この溶液に各濃度のCRP（最終濃度：0か
ら20mg/dl）10μlを混合し、2分後再度蛍光を測定し
た。その結果、添加したCRP量の増加とともに蛍光強度
が減少した（図1）。
【００３２】（FITC-抗CRPとニッケル錯体標識CRPを用
いたCRP測定）上記で作製した抗CRP-FITC溶液500μlと
ニッケル錯体標識CRP溶液500μlを混合し、2分後の蛍光
測定を行った（温度：20度、励起波長：490nm、蛍光波
長：520nm）。次に、抗CRP-FITC溶液500μlに各濃度のC
RP（最終濃度：0から20mg/dl）10μlを混合し、2分後さ
らにニッケル錯体標識CRP溶液500μlを混合し、その２
分後に再度蛍光強度を測定した。その結果、添加したCR
P量の増加とともに蛍光強度が増加した（図２）。
いたCRP測定）上記で作製した抗CRP-FITC溶液500μlと
ニッケル錯体標識CRP溶液500μlを混合し、2分後の蛍光
測定を行った（温度：20度、励起波長：490nm、蛍光波
長：520nm）。次に、抗CRP-FITC溶液500μlに各濃度のC
RP（最終濃度：0から20mg/dl）10μlを混合し、2分後さ
らにニッケル錯体標識CRP溶液500μlを混合し、その２
分後に再度蛍光強度を測定した。その結果、添加したCR
P量の増加とともに蛍光強度が増加した（図２）。
【００３３】（ニッケル錯体標識抗CRPとFITC-CRPを用
いたCRP測定）上記で作製したニッケル錯体標識抗CRP溶
液500μlとFITC-CRP溶液500μlを混合し、2分後の蛍光
測定を行った（温度：20度、励起波長：490nm、蛍光波
長：520nm）。次に、ニッケル錯体標識抗CRP溶液500μl
に各濃度のCRP（最終濃度：0から20mg/dl）10μlを混合
し、2分後さらにFITC-CRP溶液500μlを混合し、その２
分後に再度蛍光強度を測定した。その結果、添加したCR
P量の増加とともに蛍光強度が増加した（図２）。
いたCRP測定）上記で作製したニッケル錯体標識抗CRP溶
液500μlとFITC-CRP溶液500μlを混合し、2分後の蛍光
測定を行った（温度：20度、励起波長：490nm、蛍光波
長：520nm）。次に、ニッケル錯体標識抗CRP溶液500μl
に各濃度のCRP（最終濃度：0から20mg/dl）10μlを混合
し、2分後さらにFITC-CRP溶液500μlを混合し、その２
分後に再度蛍光強度を測定した。その結果、添加したCR
P量の増加とともに蛍光強度が増加した（図２）。
【００３４】
【発明の効果】以上のように本発明は、蛋白質を始めと
する高分子量の物質を容易に測定できる方法を得ること
ができた。
する高分子量の物質を容易に測定できる方法を得ること
ができた。
【００３５】また、本発明の蛍光免疫測定法を利用する
ことにより高性能な環境測定キット、食品管理測定キッ
ト及び医療診断キットを提供することができる。
ことにより高性能な環境測定キット、食品管理測定キッ
ト及び医療診断キットを提供することができる。
【図１】図は本発明の蛍光免疫測定法を用いて、ＣＲＰ
を測定した結果を示す図
を測定した結果を示す図
【図２】図は本発明の蛍光免疫測定法を用いて、ＣＲＰ
を測定した結果を示す図
を測定した結果を示す図
Claims (7)
- 【請求項１】蛍光物質で標識した抗体を用いて、測定対
象物を測定することにおいて標識抗体と測定対象物が凝
集することにより起こる蛍光強度の減少を測定すること
を特徴とする蛍光免疫測定法。 - 【請求項２】蛍光物質で標識した抗体と蛍光消光物質で
標識した測定対象物質を用いて、検体中の測定対象物を
測定することにおいて、検体中に測定対象物が存在する
ことにより標識抗体と標識測定対象物の凝集を阻害する
結果起こる蛍光強度の増加を測定することを特徴とする
蛍光免疫測定法。 - 【請求項３】蛍光消光物質で標識した抗体と蛍光物質で
標識した測定対象物質を用いて、検体中の測定対象物を
測定することにおいて、検体中に測定対象物が存在する
ことにより標識抗体と標識測定対象物の凝集を阻害する
結果起こる蛍光強度の増加を測定することを特徴とする
蛍光免疫測定法。 - 【請求項４】ポリクローナル抗体あるいはモノクローナ
ル抗体の混合物であることを特徴とする請求項１、２ま
たは３に記載の蛍光免疫測定法。 - 【請求項５】測定対象物が、多抗原性を有する物質であ
ることを特徴とする請求項１、２または３記載の蛍光免
疫測定法。 - 【請求項６】多抗原性物質がウイルス、細菌、器官、ペ
プチド、蛋白質、オリゴ糖、あるいは多糖であることを
特徴とする請求項５記載の蛍光免疫測定法。 - 【請求項７】蛋白質が、ＨＣＧ、ＬＨ，ＦＳＨ，ＴＳＨ
あるいはＣＲＰであることを特徴とする請求項５記載の
蛍光免疫測定法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP9093496A JPH10282098A (ja) | 1997-04-11 | 1997-04-11 | 蛍光免疫測定法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP9093496A JPH10282098A (ja) | 1997-04-11 | 1997-04-11 | 蛍光免疫測定法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH10282098A true JPH10282098A (ja) | 1998-10-23 |
Family
ID=14083965
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP9093496A Pending JPH10282098A (ja) | 1997-04-11 | 1997-04-11 | 蛍光免疫測定法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH10282098A (ja) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2002040024A (ja) * | 2000-03-31 | 2002-02-06 | Ortho-Clinical Diagnostics Inc | Ｃ反応性蛋白についての免疫測定 |
| WO2003060519A1 (fr) * | 2001-12-27 | 2003-07-24 | Techno Network Shikoku Co., Ltd. | Procede permettant de tester une reaction d'agglutination |
| WO2011061944A1 (ja) | 2009-11-19 | 2011-05-26 | 株式会社プロテイン・エクスプレス | 蛍光免疫測定方法 |
| WO2013065314A1 (ja) | 2011-11-02 | 2013-05-10 | ウシオ電機株式会社 | 蛍光標識抗体可変領域含有ポリペプチド複合体を用いた蛍光免疫測定方法 |
-
1997
- 1997-04-11 JP JP9093496A patent/JPH10282098A/ja active Pending
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2002040024A (ja) * | 2000-03-31 | 2002-02-06 | Ortho-Clinical Diagnostics Inc | Ｃ反応性蛋白についての免疫測定 |
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| WO2013065314A1 (ja) | 2011-11-02 | 2013-05-10 | ウシオ電機株式会社 | 蛍光標識抗体可変領域含有ポリペプチド複合体を用いた蛍光免疫測定方法 |
| KR20140084266A (ko) | 2011-11-02 | 2014-07-04 | 우시오덴키 가부시키가이샤 | 형광 표지 항체 가변 영역 함유 폴리펩티드 복합체를 이용한 형광 면역 측정 방법 |
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