JPH10137569A - ゲルの混合方法及び該方法に用いるカラム振とう装置 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】 ゲルをカラムから取り出したり攪拌すること
なく混合し、偏りや亀裂のない状態にゲルを安定化させ
るゲルの混合方法及び該方法に用いるカラム振とう装置
を提供する。 【解決手段】 ゲル１１を充填したカラム１０を載置す
るターンテーブル３と、ターンテーブル３を駆動してカ
ラム１０を振とうさせるモータ２とを備えるカラム振と
う装置１によって、ゲル１１に偏りや亀裂が発生した場
合に、カラム１０を振とうさせてカラム１０内のゲル１
１を混合し、偏りや亀裂を迅速かつ簡便に修復する。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、ゲルの混合方法及
び該方法に用いるカラム振とう装置に関し、詳細には、
蛋白質の精製などに用いられるカラムを振とうすること
によって、カラム内に充填されたゲルを混合するゲルの
混合方法及び該方法に用いるカラム振とう装置に関す
る。

【０００２】

【従来の技術】従来より、蛋白質の精製などにカラムク
ロマトグラフィーと呼ばれる技術が用いられている。カ
ラムクロマトグラフィーとは、カラムを用いて目的物質
の分離・精製を行う技術であり、一般には、固定相とな
るゲルをカラムに充填し、これに目的物質を含む溶液
（移動相）を流す方法が採られている。そして、固定相
と移動相との間の溶質の分配の差を利用して目的物質の
分離・精製を行っている。つまり、この技術では、固定
相であるゲルに吸着する度合いの相違により、目的物質
とその他の物質である不純物とを分離している。

【０００３】例えば、カラムクロマトグラフィーを用い
たインターフェロン−αの精製では、目的物質であるイ
ンターフェロン−αをゲルに吸着させるために、目的物
質に対する抗体（即ち、抗インターフェロン−α抗体）
を表面に固定化したゲルをカラムに充填する。そして、
インターフェロン−αを含む溶液をカラムに通液し、抗
原−抗体間の特異性を利用してインターフェロン−αを
分離・精製する。この例のように、抗原と抗体といった
互いに特異的な相互作用を及ぼし合う物質対を用いて目
的物質を分離・精製する方法は、特にアフィニティクロ
マトグラフィーと呼ばれている。カラムクロマトグラフ
ィーには、他にも、ゲルろ過クロマトグラフィーやイオ
ン交換クロマトグラフィー等の種々の方法が知られてい
る。

【０００４】ところで、カラムクロマトグラフィーで
は、カラムに通液中、ゲルに偏りや亀裂が発生すること
がある（ゲルに亀裂が発生した様子については、例えば
図３（ｂ）参照）。このような偏りや亀裂は、カラムに
通液した際の圧力変動や偏った流れ等の物理的な要因、
若しくは、カラムに通液する液質の違いによるｐＨやイ
オン強度の変化によって発生するものと考えられてい
る。

【０００５】上記のように、カラムに通液中ゲルに偏り
や亀裂が生じた場合には、ゲルを混合し、偏りや亀裂を
修復する必要がある。従来のゲルの混合方法では、カラ
ムからゲルを取り出し充填し直す方法や、カラム上部を
開放しその開口部から専用器具を使ってゲルを攪拌する
方法が採られていた。

【０００６】

【発明が解決しようとする課題】しかしながら、上記従
来のゲルの混合方法は、以下の問題点を有している。 (1)従来の方法では、作業が煩雑であり、定常外の作業
を多大に費やしてしまうことになる。特に、ゲルを取り
出し再充填する作業では、取付位置からのカラムの脱着
及びゲルの取り出し再充填といった煩雑な作業が必要に
なる。 (2)上記のように作業が煩雑である結果、作業に伴い分
離・精製工程を停止することによる生産的損失が大き
い。 (3)従来の方法では、いずれも、作業時にゲルの無菌状
態を損なう危険性が高い。 (4)ゲルを攪拌する作業では、専用器具によっては、ゲ
ルを傷めることがある。

【０００７】本発明は、上記問題点に鑑みなされたもの
であり、その目的は、ゲルをカラムから取り出したり攪
拌することなく混合し、偏りや亀裂のない状態にゲルを
安定化させるゲルの混合方法及び該方法に用いるカラム
振とう装置を提供することにある。

【０００８】

【課題を解決するための手段】請求項１の発明に係るゲ
ルの混合方法は、上記の課題を解決するために、ゲルを
充填したカラムに対し外部から動力を加え該カラムを振
とうすることにより、カラム内のゲルを混合することを
特徴としている。

【０００９】上記の方法によれば、カラムに対し外部か
ら動力を加え、カラムごと振とうすることによって、カ
ラム内のゲルに慣性力を生じさせゲルを混合する。ここ
で、「振とう」とは、ゲルに慣性力を生じさせ得るカラ
ムの運動のすべてをいい、「動力」とは、カラムがその
ような運動をするのに必要な動力をいう。また、「カラ
ム」とは、カラムクロマトグラフィーに用いられ、ゲル
を収容するための形状が概ね円柱状の容器を意味し、大
きさ、容量、材質等は特に限定されるものではない。
「ゲル」とは、上記カラムに充填される固定相であり、
ゲルろ過クロマトグラフィーに使用されるゲル粒子や、
アフィニティークロマトグラフィーに使用され、酵素、
抗原、抗体、ホルモン若しくは阻害剤などと結合した支
持体を含む意味である。

【００１０】上記のようにゲルを混合することで、ゲル
に生じていた偏りや亀裂を迅速かつ簡便に修復できる。
即ち、カラムからゲルを取り出し再充填したり、器具な
どでゲルを直接攪拌することを要しない。従って、作業
性が良好なものとなり、作業の効率化が図られる。併せ
て、ゲルの再充填やカラムを開放しての攪拌が不要とな
ることから、ゲルの無菌状態を損なうおそれがなくな
り、ゲルの無菌性が維持できる。

【００１１】そして、カラムクロマトグラフィーを用い
て目的物質を分離・精製する工程において、ゲルに偏り
や亀裂が発生した場合に、上記のように迅速かつ簡便に
ゲルを混合し、工程中ゲルを偏りや亀裂のない状態に安
定化させることができるので、目的物質の分離を安定化
できると共に、目的物質の回収率を安定化できる。つま
り、上記の方法により、目的物質の分離及び回収率の良
好な恒常性が達成される。

【００１２】請求項２の発明に係るゲルの混合方法は、
上記の課題を解決するために、請求項１の方法におい
て、上記カラムに往復運動または回転を伴う往復運動を
させるように動力を加え、カラムを振とうすることを特
徴としている。

【００１３】上記の方法によれば、より効率的にゲルが
混合される。特に、カラムに回転を伴う往復運動をさせ
るように動力を加えることで、短時間で良好なゲルの混
合が可能になることが後述の実験結果から認められた。
回転を伴う往復運動とは、カラムの軌跡が円弧を描く往
復運動のことをいい、回転の中心はいずれにあってもよ
い。例えば、カラムが自らの中心軸を中心に回転するよ
うな往復運動であってもよいし、カラムの中心軸と運動
の回転軸とが異なるように偏心させた往復運動であって
もよい。

【００１４】請求項３の発明に係るカラム振とう装置
は、上記の課題を解決するために、ゲルを充填したカラ
ムを載置する載置手段と、上記カラム内のゲルを混合す
るべく、上記載置手段を駆動して上記カラムを振とうさ
せる駆動手段とを備えることを特徴としている。

【００１５】上記の構成によれば、カラム内のゲルに偏
りや亀裂が生じた場合その他必要な場合に、載置手段を
駆動してゲルを充填したカラムを振とうさせる。これに
より、カラム内のゲルに慣性力が生じゲルが混合され
る。

【００１６】上記のようにゲルを混合することで、ゲル
に生じていた偏りや亀裂を迅速かつ簡便に修復できる。
即ち、カラムからゲルを取り出し再充填したり、器具な
どでゲルを直接攪拌することを要しない。従って、作業
性が良好なものとなり、作業の効率化が図られる。併せ
て、ゲルの再充填やカラムを開放しての攪拌が不要とな
ることから、ゲルの無菌状態を損なうおそれがなくな
り、ゲルの無菌性が維持できる。

【００１７】そして、カラムクロマトグラフィーを用い
て目的物質を分離・精製する工程において、ゲルに偏り
や亀裂が発生した場合に、上記のように迅速かつ簡便に
ゲルを混合し、工程中ゲルを偏りや亀裂のない状態に安
定化させることができるので、目的物質の分離を安定化
できると共に、目的物質の回収率を安定化できる。つま
り、上記の装置により、目的物質の分離及び回収率の良
好な恒常性が達成される。

【００１８】尚、本請求項における各用語の意味につい
ては、請求項１と同様である。

【００１９】請求項４の発明に係るカラム振とう装置
は、上記の課題を解決するために、請求項３の構成にお
いて、上記駆動手段は、上記カラムに往復運動または回
転を伴う往復運動をさせるように、上記載置手段を駆動
することを特徴としている。

【００２０】上記の構成によれば、より効率的にゲルが
混合される。特に、カラムに回転を伴う往復運動をさせ
るように載置手段を駆動することで、短時間で良好なゲ
ルの混合が可能になることが後述の実験結果から認めら
れた。

【００２１】回転を伴う往復運動とは、カラムの軌跡が
円弧を描く往復運動のことをいい、カラムにそのような
往復運動をさせるには、例えば、次のように載置手段を
駆動すればよい。即ち、カラムの載置面（部）がある１
つの軸を回転軸として回転するように載置手段を設け、
この回転軸が所定の角度内で連続的に往復回転されるよ
うに、駆動手段から回転軸に回転駆動力を伝達する構成
とする。カラムの中心軸がこの回転軸と一致するように
カラムを載置した上で往復運動をさせてもよいし、カラ
ムの中心軸と回転軸とが異なるようにカラムを載置した
上で往復運動をさせてもよい。但し、大容量のカラムを
回転軸からずらして載置する場合には、装置の高い剛性
が必要となることから、装置の剛性を高くすることが好
ましい。

【００２２】上記の構成に加えて、カラムの往復運動の
運動距離（片道距離）を調整するための距離調整手段を
設けることは好ましい。例えば、載置手段を上記の構成
とし駆動手段を電動モータとし、このモータの出力軸と
載置手段の回転軸との間に設けるロッドやアームの長さ
を調節できる構成とすれば、この長さを調節することに
より、簡単に運動距離を調整できる。また、カラムの往
復運動の運動速度を調整するための速度調整手段を設け
ることも好ましい。例えば、駆動手段が電動モータの場
合、このモータに供給される電流の周波数をインバータ
を用いて変化させることで、簡単に運動速度を調整でき
る。このように、運動距離及び運動速度を簡単に調整で
きる構成とすることで、カラムの大きさ・容量やゲルの
種類が変わっても、簡単に最適な混合条件に調整できる
という効果がある。

【００２３】さらに、上記の構成に加えて、動作設定タ
イマーを設けて、タイマーにより設定された所定時間カ
ラムに上記の往復運動をさせる構成とすることは好まし
い。同一のカラム及びゲルに対して、カラムが所定条件
の往復運動をどの程度の時間行えばゲルが混合できるか
は実験的または経験的に見出されるので、ゲルの混合に
必要な時間をタイマーにて設定し、その時間カラムに往
復運動をさせることにより、ゲルをより簡便かつ確実に
混合できる。

【００２４】

【発明の実施の形態】本発明の実施の一形態について図
１〜図４に基づいて説明すれば、以下の通りである。

【００２５】図１は、本実施形態のカラム振とう装置１
の外観を概略的に示す側面図であり、図２は、図１のＡ
−Ａ線に沿った断面図である。

【００２６】本カラム振とう装置１は、モータ２及びタ
ーンテーブル３を備えている。ターンテーブル３は、そ
の載置面上にゲル１１を充填したカラム１０を載置・固
定する載置手段であり、モータ２は、ゲル１１に偏りや
亀裂が生じた場合などに、カラム１０内のゲル１１を混
合するべく、ターンテーブル３を駆動してカラム１０を
振とうさせる駆動手段である。

【００２７】モータ２は、図示していない電源から供給
される電力によりその出力軸２ａを回転させるサイクロ
減速機付きの電動モータであり、インバータを用いて周
波数を可変し出力軸２ａの回転速度を制御することがで
きる。前記インバータは制御盤９によって制御され、従
って、インバータにより周波数をどの程度変化させるか
を制御盤９を介して制御することで、モータ２の回転速
度が簡単に変更・調整できる。

【００２８】ターンテーブル３は、その円周部下面に配
された突部３ｂが溝部によって摺動可能に支持されると
共に、中央部において回転軸３ａに固着されており、回
転軸３ａを中心に回転可能な構成となっている。回転軸
３ａには、アーム４が取付けられており、アーム４は、
ピン７を介してロッド６の一端に係止されている。一
方、モータ２の出力軸２ａには、アーム５が取付けられ
ており、アーム５は、ピン８を介してロッド６の他端に
係止されている。

【００２９】即ち、アーム４とアーム５とはロッド６に
よって連結されており、モータ２の出力軸２ａの回転に
よって、ターンテーブル３は、図２に示すように、ロッ
ド６の長さ等の条件により定まる所定角度θ内を、回転
軸３ａを中心に連続的に往復回転することになる。つま
り、モータ２が一回転すると、ターンテーブル３が所定
の回転角度θ内を一往復するように回転駆動されること
になる。これにより、ターンテーブル３上のカラム１０
も回転を伴った往復運動を行うことになり、カラム１０
内のゲル１１に慣性力が生じてゲル１１が混合され、ゲ
ル１１に生じていた偏りや亀裂を迅速かつ簡便に修復す
ることができる。

【００３０】また、上記のロッド６は、周知の態様に従
いその長さを変更・調節できるようになっている。ロッ
ド６の長さを変更することで、ターンテーブル３の回転
角度θが変更される。換言すれば、ロッド６の長さを変
更することで、ターンテーブル３並びにその上に載置さ
れるカラム１０の往復運動の片道距離ｄが変更される。
従って、ロッド６の長さを調節することにより、カラム
１０の大きさやゲル１１の種類等に合わせて、簡単にカ
ラム１０の往復運動の片道距離ｄを調整できる。

【００３１】さらに、上記のように、インバータを用い
て電流の周波数を可変し出力軸２ａの回転速度を制御で
きるので、カラム１０の大きさやゲル１１の種類等に合
わせて、カラム１０の運動速度を簡単に変更・調整でき
る。

【００３２】加えて、動作設定タイマーを設けて、タイ
マーにより設定された所定時間カラム１０に上記の往復
運動をさせる構成とすれば、ゲル１１の混合をより簡便
かつ確実に行うことができる。つまり、同一のカラム１
０及びゲル１１に対して、カラム１０が所定条件の往復
運動をどの程度の時間行えばゲル１１が混合できるかは
実験的または経験的に見出されるので、ゲル１１の混合
に必要な時間をタイマーにて設定し、その時間カラム１
０に往復運動をさせればよい。これにより、ゲル１１の
混合が十分でないままカラムクロマトグラフィーによる
精製工程を再開してしまう等の不所望の事態を回避でき
る。

【００３３】上記の方法によりゲル１１を混合する際に
は、カラム１０の中心軸が回転軸３ａと一致するように
カラム１０を載置した上で往復運動をさせてもよいし、
カラム１０の中心軸と回転軸３ａとが異なるようにカラ
ム１０を載置した上で往復運動をさせてもよい。但し、
大容量のカラム１０を回転軸３ａからずらして載置する
場合には、カラム振とう装置１の剛性を高くする必要が
ある。

【００３４】上記のカラム１０は、蛋白質の精製などに
用いられるカラムクロマトグラフィーに使用されるカラ
ムであり、固定相であるゲル１１を内部に充填する円柱
状の容器である。上記のようにカラム振とう装置１の剛
性を高くすることで、大容量のカラム１０に対してもカ
ラム振とう装置１を用いて上記のゲル１１の混合方法を
行うことができる。カラム１０に充填されるゲル１１
は、ゲルろ過クロマトグラフィーに用いられるゲル粒子
でもよいし、アフィニティークロマトグラフィーに用い
られる抗体などと結合した支持体でもよい。

【００３５】次に、インターフェロン−α（以下、「Ｉ
ＦＮ」と略称する）を精製するための一工程であるカラ
ムクロマトグラフィーの工程において用いられるカラム
及びゲルに対し、カラム振とう装置１を適用した例につ
いて説明する。

【００３６】抗ＩＦＮ抗体を有するゲル１１が充填され
たカラム１０をターンテーブル３上に載置・固定した
後、カラムクロマトグラフィーの工程を行う。まず、Ｉ
ＦＮを含む溶液をカラム１０に通液して、ＩＦＮをゲル
１１に吸着させる。

【００３７】次いで、ゲル１１に吸着したＩＦＮ以外の
異種蛋白等の不純物をカラム１０内から取り除くため
に、所定濃度のバッファー溶液をカラム１０に通液し
洗浄する。洗浄後、所定濃度のバッファー溶液をカラ
ム１０に通液して、ゲル１１に吸着したＩＦＮを溶出し
回収する。

【００３８】ところが、上記の工程中にゲル１１の偏り
や亀裂が生じた場合には、ＩＦＮと不純物との分離が不
十分になったり、ＩＦＮの回収率が低下してしまうおそ
れがある。

【００３９】即ち、ＩＦＮを含む溶液をカラム１０に通
液する工程では、ゲル１１に偏りや亀裂がある場合、そ
の溶液の流れがバイパスされ、ゲル１１へのＩＦＮの吸
着率が低下する。

【００４０】また、バッファー溶液にて洗浄する工程
では、ゲル１１に偏りや亀裂がある場合、異種蛋白等の
不純物を十分に除去することができず、ＩＦＮの純度が
低下する。

【００４１】さらに、バッファー溶液でＩＦＮを溶出
する工程では、ゲル１１に偏りや亀裂がある場合、ＩＦ
Ｎの回収率が低下する。

【００４２】本実施形態では、各工程中にゲル１１の偏
りや亀裂が生じた場合、カラム振とう装置１を使用し
て、カラム１０に外的な力を加え、カラム１０を所定の
回転角度θ内で往復回転させる。これにより、カラム１
０内のゲル１１に慣性力を生じさせてゲル１１を混合
し、ゲル１１の偏りや亀裂を修復している。

【００４３】例えば、図３（ａ）に示す通液中、つま
り、カラム１０に通液しているいずれかの工程中に、図
３（ｂ）に示すようなゲル１１の亀裂１５が発生した場
合には、まず、通液を停止する。次いで、モータ２の出
力軸２ａを回転させ、ロッド６を介してターンテーブル
３に駆動力を伝達する。これにより、ターンテーブル３
上に載置されたカラム１０が、図３（ｃ）に示すよう
に、回転を伴った往復運動を行う。このとき、カラム１
０内に充填されたゲル１１に慣性力が作用しゲル１１が
混合されるため、ゲル１１に発生した亀裂１５が修復さ
れることになる。修復後は、図３（ｄ）に示すように、
通液を再開することができる。

【００４４】次に、カラム振とう装置１を用いて、イン
バータにより周波数を可変し、異なる運動速度の条件に
てそれぞれゲル１１を混合した実験結果を表１に示す。
尚、カラム１０の回転角度θは６０度とした。また、ゲ
ル１１の表面とカラム１０の上部メッシュとの間隔を２
０ｍｍとし、シール水にてゲル１１の表面を覆った。そ
して、カラム１０をターンテーブル３の中心に載置した
場合と中心から５０ｍｍ偏心させて載置した場合との２
通りについて実験を行った。

【００４５】

【表１】

【００４６】表１の最右欄の「評価」欄では、ゲル混合
の効果がなく、従って偏りや亀裂が修復されないものに
は「×」を、ゲル混合の効果はあるが低いものには
「△」を、ゲル混合の効果が大きく、偏りや亀裂が修復
されたものには「○」を付している。尚、今回のゲル混
合効果の確認方法は、熟練者の目視によるものである。

【００４７】実験結果より、偏心幅０ｍｍのものも５０
ｍｍのものも共に短時間でゲルを混合できることが確認
された。また、偏心幅５０ｍｍのほうが比較的ゲル混合
の効果が大きいことが認められた。インバータを制御し
て運動速度を高くする程、つまり、単位時間当たりの往
復数（スイング数）を大きくする程、効率良くゲルを混
合できた。

【００４８】以上のように、カラム振とう装置１では、
カラム１０内のゲル１１に偏りや亀裂が生じた場合その
他必要な場合に、ターンテーブル３を駆動してゲル１１
を充填したカラム１０を振とうさせることによってゲル
１１を混合する。これにより、カラム１０からゲル１１
を取り出し再充填したり、器具などでゲル１１を直接攪
拌したりすることなく、ゲル１１に生じていた偏りや亀
裂を迅速かつ簡便に修復できる。併せて、ゲル１１の再
充填やカラム１０を開放しての攪拌が不要となるため、
ゲル１１の無菌性が維持できる。

【００４９】また、カラムクロマトグラフィーを用いて
例えばＩＦＮを精製する工程において、ゲル１１に偏り
や亀裂が発生した場合に、上記のようにカラム振とう装
置１を用いて迅速かつ簡便にゲルを混合し、工程中ゲル
１１を偏りや亀裂のない状態に安定化させることができ
るので、ＩＦＮの分離及び回収率の良好な恒常性が達成
される。

【００５０】さらに、カラム振とう装置１では、ロッド
６の長さの調整により運動距離を変更したり、インバー
タによるモータ２の回転数の変更により運動速度を簡単
に調整できるため、カラム１０の大きさ・容量やゲル１
１の種類が変わっても、最適な混合条件に調整できる。

【００５１】ところで、カラム振とう装置１では、上記
のように、カラム１０に回転を伴う往復運動をさせるよ
うにモータ２からターンテーブル３に駆動力を伝え、カ
ラム１０を振とうさせているが、これ以外の振とう運動
によってもゲルが混合できるか否か、即ち、カラム振と
う運動の違いによるゲルの混合状態の違いを確認するた
めに、さらに以下の実験を行った。

【００５２】カラム振とう運動が、図４の（ａ）〜
（ｄ）にそれぞれ示すパターンＡ〜Ｄの４通りについて
複数回ずつ行われた。パターンＡは、回転を伴う往復運
動であり、回転角度が３０度６０度９０度の３通
りについて行った。パターンＢは、直線往復運動であ
り、直線距離が１０ｃｍ５０ｃｍ１００ｃｍの３
通りについて行った。パターンＣは、いわゆる８の字運
動であり、直径５０ｃｍの２円上を運動する場合と
直径１００ｃｍの２円上を運動する場合との２通りにつ
いて行った。パターンＤは、角のある８の字運動であ
り、３０＊４５ｃｍの対角線上を運動する場合と５
０＊７５ｃｍの対角線上を運動する場合との２通りにつ
いて行った。

【００５３】各実験には、ゲルを約１５リットル充填し
た直径３５０ｍｍのアクリル製カラムを使用した。そし
て、カラム振とう装置１を使用せずに、人力によるカラ
ム振とう運動を行い、ゲルを混合できるか確認した。ま
た、このようにカラム振とう運動を人力で行うことか
ら、実験結果の誤差を極力少なくするため床にマーキン
グを施し、マーキングの線に沿ってカラム振とう運動を
行った。

【００５４】また、各実験では、カラム振とう運動時間
を１分間とし、運動開始後ゲルが浮き上がるまでの時間
を測定すると共に、運動終了後ゲルが約何％混合できて
いるかを調べ、それぞれのゲル混合の効果を上記と同様
に評価した。パターンＡ〜Ｄの各カラム振とう運動の実
験結果を、それぞれ表２〜表５に示す。

【００５５】

【表２】

【００５６】

【表３】

【００５７】

【表４】

【００５８】

【表５】

【００５９】上記の結果より、カラム振とう運動が回転
を伴う往復運動の場合にゲル混合の効果が最も大きいこ
とが確認された。対照的に、８の字運動の場合には、ゲ
ル混合の効果は殆ど認められなかった。直線往復運動の
場合にもゲル混合の効果はあまり認められなかったが、
振とう速度を高め、機械的にカラムを振とうさせること
により、直線往復運動の場合であっても偏りや亀裂を修
復できる程度にゲルを混合できる可能性がある。例え
ば、カラム振とう装置１におけるターンテーブル３の代
わりにスライドテーブルを設け、さらにアーム及びロッ
ド等の組み合わせによってカラム１０を水平方向に直線
往復運動させる構成とすることで、ゲルに慣性力を生じ
させ、偏りや亀裂を修復できる程度にゲルを混合するこ
とが可能である。同様に、カラム１０を垂直方向に直線
往復運動させる構成とすることでも、偏りや亀裂を修復
できる程度にゲルを混合することが可能と考えられる。

【００６０】

【発明の効果】請求項１の発明に係るゲルの混合方法
は、以上のように、ゲルを充填したカラムに対し外部か
ら動力を加え該カラムを振とうすることにより、カラム
内のゲルを混合する方法である。

【００６１】これにより、ゲルに生じていた偏りや亀裂
を迅速かつ簡便に修復できるという効果を奏する。即
ち、カラムからゲルを取り出し再充填したり、器具など
でゲルを直接攪拌することを要しないので、作業性が良
好なものとなり、作業の効率化が図られる。併せて、ゲ
ルの無菌状態を損なうおそれがなくなり、ゲルの無菌性
が維持できる。

【００６２】そして、カラムクロマトグラフィーを用い
て目的物質を分離・精製する工程において、ゲルに偏り
や亀裂が発生した場合に、上記のように迅速かつ簡便に
ゲルを混合し、工程中ゲルを偏りや亀裂のない状態に安
定化させることができるので、目的物質の分離及び回収
率の良好な恒常性が達成される。

【００６３】請求項２の発明に係るゲルの混合方法は、
以上のように、請求項１の方法において、上記カラムに
往復運動または回転を伴う往復運動をさせるように動力
を加え、カラムを振とうする方法である。

【００６４】これにより、より効率的にゲルを混合でき
る。特に、カラムに回転を伴う往復運動をさせるように
動力を加えることで、短時間で良好なゲルの混合が可能
になる。

【００６５】請求項３の発明に係るカラム振とう装置
は、以上のように、ゲルを充填したカラムを載置する載
置手段と、上記カラム内のゲルを混合するべく、上記載
置手段を駆動して上記カラムを振とうさせる駆動手段と
を備える構成である。

【００６６】これにより、ゲルに生じていた偏りや亀裂
を迅速かつ簡便に修復できるという効果を奏する。即
ち、カラムからゲルを取り出し再充填したり、器具など
でゲルを直接攪拌することを要しないので、作業性が良
好なものとなり、作業の効率化が図られる。併せて、ゲ
ルの無菌状態を損なうおそれがなくなり、ゲルの無菌性
が維持できる。

【００６７】そして、カラムクロマトグラフィーを用い
て目的物質を分離・精製する工程において、ゲルに偏り
や亀裂が発生した場合に、上記のように迅速かつ簡便に
ゲルを混合し、工程中ゲルを偏りや亀裂のない状態に安
定化させることができるので、目的物質の分離及び回収
率の良好な恒常性が達成される。

【００６８】請求項４の発明に係るカラム振とう装置
は、以上のように、請求項３の構成において、上記駆動
手段は、上記カラムに往復運動または回転を伴う往復運
動をさせるように、上記載置手段を駆動する構成であ
る。

【００６９】これにより、より効率的にゲルを混合でき
る。特に、カラムに回転を伴う往復運動をさせるように
載置手段を駆動することで、短時間で良好なゲルの混合
が可能になる。

【図面の簡単な説明】

【図１】本発明の実施の一形態に係るカラム振とう装置
の外観を概略的に示す側面図である。

【図２】図１のＡ−Ａ線に沿った断面図である。

【図３】カラム内のゲルに亀裂が発生した場合に、この
亀裂の修復の手順を示す説明図である。

【図４】実験において行われたカラム振とう運動の各運
動パターンを示す説明図である。

【符号の説明】

１ カラム振とう装置 ２ モータ（駆動手段） ３ ターンテーブル（載置手段） ４・５ アーム ６ ロッド ７・８ ピン ９ 制御盤 １０ カラム １１ ゲル

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 伊東 誠二 愛媛県新居浜市惣開町５番１号 住友製薬 株式会社内 (72)発明者 岡田 晃典 愛媛県新居浜市新田町３丁目１番39号 住 友ケミカルエンジニアリング株式会社内 (72)発明者 石川 善久 愛媛県新居浜市新田町３丁目１番39号 住 友ケミカルエンジニアリング株式会社内

Claims (4)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】ゲルを充填したカラムに対し外部から動力
   を加え該カラムを振とうすることにより、カラム内のゲ
   ルを混合することを特徴とするゲルの混合方法。
2. 【請求項２】上記カラムに往復運動または回転を伴う往
   復運動をさせるように動力を加え、カラムを振とうする
   ことを特徴とする請求項１記載のゲルの混合方法。
3. 【請求項３】ゲルを充填したカラムを載置する載置手段
   と、 上記カラム内のゲルを混合するべく、上記載置手段を駆
   動して上記カラムを振とうさせる駆動手段とを備えるこ
   とを特徴とするカラム振とう装置。
4. 【請求項４】上記駆動手段は、上記カラムに往復運動ま
   たは回転を伴う往復運動をさせるように、上記載置手段
   を駆動することを特徴とする請求項３記載のカラム振と
   う装置。