JPH09508614A - 哺乳動物に対する抗原類および／またはワクチン類の粘膜を介した局所投与のための医薬調製物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 哺乳動物に対する粘膜を介した抗原類および／またはワクチン類の局所投与のための新規な型の剤型であって、（ａ）ポリオキシエチレンソルビタンモノエステル類、（ｂ）ポリオキシエチレンカスターオイル、（ｃ）カプリル／カプリン酸グリセリド類および（ｄ）ガングリオシド類から選択される１種以上のアジュバント／担体を、調製物の全体積に基づいて計算して０．０１〜１５％（ｖ／ｖ）の量をもって含むことを特徴とする剤型。この剤型は、哺乳動物において粘膜への投与、例えば鼻部、口部、直腸または膣内投与により、免疫学的応答を増強する。

Description

【発明の詳細な説明】 哺乳動物に対する抗原類および／またはワクチン類の 粘膜を介した局所投与のための医薬調製物 本発明は、ヒトを含む哺乳動物に対する抗原類および／またはワクチン類の粘 膜を介した局所投与のための医薬調製物に関するものである。また、この発明は 、このような調製物におけるアジュバントまたは担体としてのある種の化合物（ 下記により詳細に定義される）の使用に関するものである。 抗原類および／またはワクチン類の非経口的（筋内的および皮下的）投与は、 通常は最も都合の良い投与方法と考えられている。しかしながら、注射による投 与は、一連の不都合を生じる。例えば、それは滅菌シリンジの使用を必要とし、 また特に反復して注射する場合にそうであるが、感染の危険性を含め、痛みおよ び刺激の原因となりうる。更に重要なことに、筋内注射の場合には、感染の危険 性も高い。注射部位において、硬変（組織の硬化）、出血（放血）、および／ま たは壊死（組織の局所的死）も起こりうる。そのうえ、注射は、訓練を受けてい ない者では満足ゆくようには行えない。 弱毒化したウイルス、細菌または寄生生物の投与については、他の粘膜表面を 介する場合に加えて、経鼻的投与が試みられている。ワクチンに含まれる修飾さ れた生きた病原は、野生型病原の自然な感染経路に従って、準臨床的感染を通じ て免疫を生じさせるものであるから、粘膜表面を通った抗原によって免疫応答が 誘導できることは、予期されると考えられる。免疫のための修飾された生きた病 原の使用は、ある種の危険性を伴うものである。しかしながら、より精製された 抗原は極めて弱い免疫原であるために、臨床的に見て有効な保護を生み出す免疫 応答を生じさせるためには、効果的な剤型およびアジュバントが必要とされる。 粘膜投与は、最近特に興味が持たれ、抗体の局所的生成（ＩｇＡ抗体の分泌） を刺激し、また非局所的投与による生体内への直接的介入により生じる不都合を 回避することが試みられている。加えて、この投与経路は、訓練を受けていない 者によっても充分に実施しうるであろうことから、非経口的注射に代わるものと して都合良く使用しうるであろう。さらには、小さい子供に対しては、注射（ワ クチン接種）における心理的な刺激を回避することができる。 非経口投与に対して魅力ある代替方法であるためには、経鼻投与は、全身（主 にＩｇＧアイソタイプ）、そして、分泌ＩｇＡ（ＩｇＡｓ）アイソタイプの局所 的に産生される抗体によるが、多くの病原が宿主に侵入する粘膜表面のいずれに おいても、液性および細胞性免疫因子を刺激することができなければならない。 いくつかの経口ワクチンは、唾液、涙液並びに鼻内および胃内洗浄にて得られる 液体を含む間接的分泌物において適切なＩｇＡｓ応答を誘導することが示された 。このような経鼻的に投与されるワクチンおよび／または抗原は、患者に対して 何等のひどい痛みや刺激も、あるいは粘膜表面に対して何等の不可逆的損傷また は炎症をも生じないであろう。 経鼻的投与においては、抗原および／またはワクチンは粘膜に浸透し得、また は吸収されるような条件において粘膜に投与されなければならない。粘膜に浸透 するためには、担体が粘膜と生物学的に適合し、従って、ある程度の親水性を有 するものでなければならない。 ワクチン類および／または抗原類は、純粋な形態では投与され得ない。それら は、直ぐに使用可能な調製物を得るために他の成分と調合する必要がある。抗原 およびまたはワクチンの化学的性質に依存して、ヒトまたは動物用の医薬調製物 が製造され得るためには、種々の考慮が必要とされる。 ここおいて、驚くべきことに、哺乳動物に対する粘膜を介した抗原類および／ またはワクチン類の局所投与が、新規な剤型を使用することにより、新規でしか も顕著に改善された態様にて行われ得ることを見い出した。ここで、その調製物 は、 （ａ）一般式 式中、Ｒは、ラウレート(laurate)、パルミテート(palmitate)、ステアレ ート(stearate)およびオレエ-ト(oleate)のうちから選択され、ｗ、ｘ，ｙおよ びｚの和が４、５または２０である、 で表されるポリオキシエチレンソルビタンモノエステル類と、 （ｂ）１モルのカスターオイルまたは水素添加カスターオイルを、１０〜４５モ ルのエチレンオキシドと反応させることにより得られるポリオキシエチレンカス ターオイルと、 （ｃ）一般式 式中、Ｒ¹は、独立してＨ、または１〜６％の遊離のグリセロール、４５ 〜５０％のモノグリセリド類、３０〜４０％のジグリセリド類および５〜９％の トリグリセリド類を含むＣ₈−Ｃ₁₀アシル基である、 で表されるカプリル／カプリン酸グリセリド類と、 （ｄ）一般式 式中、Ｇａｌはガラクトース、Ｇｌｃはグルコース、Ｃｅｒはセラミド（ Ｎ−脂肪族アシルスフィンゴシン）およびＮｅｕＡｃはＮ−アセチルノイラミン 酸（シアル酸）であり、Ｒ²はＮ−アセチルガラクトサミン、ガラクトース、Ｎ −アセチルノイラミン酸またはそれらの組合せの内から選択される１種以上の物 質であり、Ｒ³はＨまたはＮ−アセチルノイラミン酸である、 で表されるガングリオシド類と、 から選択される１種以上のアジュバント／担体を、調製物の全体積に基づいて計 算して０．０１〜１５％（ｖ／ｖ）の量をもって含むことを特徴とする。 鼻部上皮膜は、実際的には一層の上皮細胞（擬似的層形成上皮）からなり、従 って、それは口部、膣部等の鱗状の上皮層を有する他の粘膜表面よりも抗原およ び／またはワクチン投与に適している。しかしながら、これらの他の表面も本発 明による送達系を用いた抗原類および／またはワクチン類の適用に充分に適して いる。鼻部粘膜下の毛細血管の広い網目は、ＴおよびＢ細胞の高い密度と共に、 抗原および／またはワクチンの迅速な認識を得るのに適しており、これにより早 い免疫応答が得られることにもなる。 液体組成物については、有効量の抗原および／またはワクチンがヒト患者に対 しては約３００μｌ未満の体積で投与され得ることが不可欠である。より大きい 体積では患者には受け入れ難いであろうし、また明らかに鼻腔を通して前方に、 あるいは咽頭に向けて後方に流出するであろう。結果として抗原および／または ワクチンの一部が、吸収部位から失われる。 体積は、好ましくは約２０μｌ〜約１２５μｌであり、また好ましくは両方の 鼻腔に投与される。 抗原および／またはワクチンの送達（デリバリー）のための種々の担体系が開 発されている。今日までの文献には、鼻部粘膜からの抗原類および／またはワク チン類の取り込みが、ある量の吸収促進剤またはある量のアジュバントを添加し て特定の担体を剤型中に組み込むことによりしばしば可能となることが報告され ている。 鼻腔内投与のための薬剤送達系として、種々の担体の有望な利用に関しては多 くが記述されている。そのような担体系においては、薬剤は迅速に血流中に吸収 される。そのような担体系の使用において直面する問題の一つは、抗原および／ またはワクチンが吸収され、かつ認識されることなく、従って免疫応答を刺激す ることなく分解されてしまうことである。本発明による系は、鼻腔内での短い接 触時間にも関わらず明らかに免疫応答を与えるワクチン／抗原送達系である。 抗原またはワクチンに伴うポリオキシエチル−３５−カスターオイル(polyoxy ethyl-35-castor oil)、カプリル／カプリン酸グリセリド類(caprylic/capric a cid glycerides)および／またはガングリオシド類(gangliosides)の粘膜投与の 後の可能性ある免疫応答の増強は、先行技術のいずれにも示唆されていない。 米国特許第4,610,868号は、薬剤の非経口投与のための脂質担体を記述してい る。この系は、疎水性化合物、両親媒性化合物および生物学的活性物質を含み50 0ないし100,000nmの直径の小球構造をもった脂質担体を必要とする。ここで、疎 水性化合物はグリセリドを含み、また両親媒性化合物はスフィンゴ脂質(sphingo lipid)を含んでよい。更に、この剤型は、鼻腔領域に投与することができる。し かしながら、この系では鼻部内での迅速な浄化（クリアランス）および大型の小 球構造のために、鼻部用剤型としては好ましくない。従って、この系は生物活性 物質が放出される前に線毛によって胃に運ばれるであろう。 米国特許第4,985,242号には、生理学的活性を有するポリペプチド、４級アン モニウム化合物、およびセルロースの低級アルキルエーテルを含む鼻腔内的に適 用可能な粉末医薬組成物が記載されている。この組成物における典型的な界面活 性剤は、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル類である。この粉末医薬 組成物は、ポリペプチドの優れた保存可能性および化学的安定性を有することが 述べられている。更に、該組成物がスプレーの形態で鼻腔内に投与された場合に 、ポリペプチド類は、鼻部粘膜を通して効果的に吸収される。しかしながら、界 面活性剤は、一方において高濃度であると粉末的特性を有さない粘着性調製物と なることから、その濃度は重要である。また他方において、低濃度では、免疫応 答を誘導することができないであろう。実際はそうではないのであるが、もし米 国特許第4,985,242号の目的が免疫応答を誘導することにあったならば、このこ とは蛋白質およびペプチド性薬剤が投与されるべき場合には深刻な欠点となるで あろう。従って、これらの界面活性剤は、本発明の目的のためには使用できない 。 鼻部調製物におけるソルビタンエステルのポリオキシエチレン誘導体の使用に 関連するいくつかの他の文献が知られている。しかしながら、アジュバントとし て、または免疫調節剤として、本発明による物質を記述する文献はない。この効 果は実に驚くべきものであり、また予期されないものである。天然の女性ホルモ ン１７β−エストラジオールおよびプロゲステロンを、１％〜２％のトゥイーン ８０を含む溶液、懸濁物、ゲルおよび軟膏として投与する新規な方法が、米国特 許第4,315,925号に記述されている。ヨーロッパ特許第246,625号からは、プロピ レングリコール、ポリエチレングリコール４００および１％〜４％のトゥイーン ２０を含む抗炎症性ステロイド調製物の経鼻投与のための水性ステロイド剤型が 知られる。ヨーロッパ特許第242,643号には、他の吸収促進剤による鼻部の刺激 を低減するために例えば０．０１％〜０．５％のトゥイーン８０を使用する、薬 剤、特にインシュリンの鼻部内投与が記述されている。最後にＰＣＴ／ＡＴ８７ ／０００１５には、例えばベンゾジアゼピン類のためのトゥイーン含有剤型が記 述されている。しかしながら、この剤型は、発射ガスの使用を必要とする。 本発明は、上記の新規な型の剤型を使用する抗原／ワクチン投与のための新規 な、かつ顕著に改良された方法を提供する。この方法にって、鼻部内的免疫処理 を行った後に、全身的および局所的に、抗原および／またはワクチンの受容者に 保護的免疫応答を引き起こすことができる。 本発明の第１の目的は、粘膜表面においてＩｇＡアイソタイプの分泌による局 所的に産生される抗体に加え、高度の全身的免疫応答（主としてＩｇＧアイソタ イプの液性および細胞性）を、許容されない損傷を鼻部上皮膜に生じることなく 産生することができる鼻部内的組成物を提供することにある。 本発明の別の目的は、粘膜に対して生物学的に適合性であり、かつ小体積中に 必要量の抗原類および／またはワクチン類を溶解することができる鼻部内適用の ための制御された送達系を提供することである。 本発明の一側面に従えば、本送達系は膣、目、口、肺、耳、生殖器領域、胃腸 領域、直腸、皮膚等の他の哺乳動物表面に対しても使用可能である。 前述したように、本発明の医薬組成物は、 （ａ）ポリオキシエチレンソルビタンモノエステル類(polyoxyethylene sorbita n monoesters)、（ｂ）ポリオキシエチレングリセロールトリエステル類(polyox yethylene glycerol triesters)、（ｃ）カプリル／カプリン酸グリセリド類(ca pril/capric acid glycerides)、および（ｄ）ガングリオシド類(gangliosides) から選択される１種以上の物質を含むことを特徴とする。 好ましいポリオキシエチレンソルビタンモノエステル（ａ）は、ソルビトール およびソルビトール無水物の１モルに対して約２０モルのエチレンオキシドが共 重合したソルビトールのラウリン酸エステルであるポリソルベート２０(Polysor bate 20)およびその無水物である。 ポリオキシエチレングリセロールトリエステル（ｂ）は、好ましくはポリオキ シル−３５−カスターオイル(Polyoxy-35-castor oil)である。この化合物は、 エトキシ化（約３５モル）グリセロールのトリリシノール酸エステルであり、少 量のポリエチレングリコールリシノーレート(polyethylene glycol ricinoleate )および対応する遊離したグリコールを伴う。ポリオキシル−３５−カスターオ イルは、一般にクレモフォアＥＬ(Cremophor EL)として知られている。 カプリル／カプリン酸グリセリド類（ｃ）は、原則としてモノ−、ジ−および トリグリセリドの混合物であり、ここおいて酸基は、カプリル酸およびカプリン 酸基のみである。それらは、一般にインウィトール（Imwitor）の商品名で知ら れている。 上記式IVのガングリオシド（ｄ）は、原則としてアシアロ(asialo)−、モノシ アロ−、ジシアロ−およびトリシアロガングリオシド類の混合物である。 本発明による組成物は、ポリオキシエチレンアルコールエーテル類、胆汁酸塩 類およびその誘導体、フシジン酸およびその誘導体、オレイン酸、レシチン、リ ゾレシチン、トゥイーン２１〜８５等の界面活性剤および吸収促進剤、グリコフ ロール、ポリエチレングリコール２００〜７５００、ポリビニルピロリドン、プ ロピレングリコールまたはポリアクリル酸、ゼラチン、セルロースおよび誘導体 等の水吸収性ポリマー類；アプロチニン等の酵素的分解を阻害する物質；エタノ ール、グリセロール、ベンジルアルコール等のアルコール類；酢酸エチル、ベン ジルアルコール等の有機溶媒類；植物油、ダイズ油、ピーナツ油、ココナツ油、 トウモロコシ油、オリーブ油、ひまわり油、“ミグリオール類(Miglyols)”また はそれらの混合物等の疎水性物質；硝酸、リン酸、酢酸、クエン酸塩等のｐＨ調 節剤；グリセロール、塩化ナトリウム、メチルパラオキシベンゾエート、安息香 酸等の保存剤および浸透圧調節剤；レクチン等のリポゾームおよび／またはエマ ルジョン形成剤；マイクロカプセル化剤；ブタン等の推進剤；水等から選択され る１種以上の付加的な医薬用賦形剤を含んでもよい。推進剤の使用は、本発明に よる調製物においては必須ではない。 本発明の医薬組成物は、任意の抗原類および／またはワクチン類を含んでよい 。ワクチン類は、ヒトまたは動物において疾患の原因となる全てのワクチンのう ちから選択される。これらは、クラミジア、コレラ、ジフテリア、インフルエン ザ菌、らい、髄膜炎、百日咳、肺炎、赤痢菌、破傷風、結核等の細菌性ワクチン ；肝炎ウイルス、ヘルペスウイルス、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）、インフ ルエンザウイルス、麻疹ウイルス、耳下腺炎ウイルス、パラインフルエンザウイ ルス、パラミクソウイルス、ポリオウイルス、狂犬病ウイルス、呼吸器性合胞体 ウイルス、ライノウイルス型、ロタウイルス、風疹ウイルス等のウイルス性ワク チン；並びにリーシュマニア症、住血吸虫症およびトリパノソーマ症等のための 寄生生物ワクチンなど、局所的および／または全身性抗体を生成させるために使 用され得るワクチンを含む。 本発明を、以下の例より更に詳細に説明する。例Ｉ 破傷風ワクチン剤型は、（ａ）破傷風トキソイド（２２．５μｌ）、ガングリ オシド（１０．０μｌ）およびトゥイーン２０（７．５μｌ）；（ｂ）破傷風ト キソイド（２２．５μｌ）およびインウィトール／クレモフォア混合物（１：１ ）溶液（１７．５μｌ）；（ｃ）破傷風トキソイド（２２．５μｌ）および等張 食塩水（１７．５μｌ）からなる。剤型ａ、ｂおよびｃを、腹腔内的なネンブタ ール麻酔のもとにマウスに鼻腔内的に（２．５μｌ／外鼻孔）投与した。各マウ スを、１．５Ｌｆの破傷風トキソイドを投与した。３週間後に、マウスは同じ剤 型を用いてブーストされ、１週間後に犠牲とされて、血清および鼻部洗浄抗体が 測定された。過剰の血清試料は、生の破傷風トキソイドを受けた生存する動物に おける中和試験に供された。下記の結果が得られた。 例II ジフテリアワクチン剤型は、（ａ）ジフテリアトキソイド（７．５μｌ）、ガ ングリオシド（１２．５μｌ）およびトゥイーン２０（２０．０μｌ）；（ｂ） ジフテリアトキソイド（７．５μｌ）、ＰＢＳ食塩水（１２．５μｌ）およびイ ンウィトール／クレモフォア混合物（１：１）溶液（２０．０μｌ）；（ｃ）ジ フテリアトキソイド（７．５μｌ）および等張食塩水（３２．５μｌ）からなる 。剤型ａ、ｂおよびｃは、腹腔内的なネンブタール麻酔のもとにマウスに鼻腔内 的に（２．５μｌ／外鼻孔）投与された。各マウスに、１．５Ｌｆのジフテリア トキソイドを投与した。３週間後に、マウスは同じ剤型を用いてブーストされ、 １週間後に犠牲とされて血清および鼻部洗浄抗体が測定された。過剰の血清試料 を、更に中和試験に供した。下記の結果が得られた。 例III インフルエンザワクチン剤型は、（ａ）インフルエンザウイルスワクチン（５ ． ０μｌ）、ガングリオシド（１０．０μｌ）、インウィトール／クレモフォア混 合物（１：１）溶液（６．０μｌ）、蒸留水（１６．５μｌ）およびＰＢＳ溶液 （２．５μｌ）；（ｂ）インフルエンザウイルスワクチン（５．０μｌ）および 等張食塩水（３５．０μｌ）からなる。該剤型を、腹腔内的なネンブタール麻酔 のもとにマウスに鼻腔内的に（２．５μｌ／外鼻孔）投与した。各マウスに、０ ．２μｇのインフルエンザＨＡを投与した。４週間後に、マウスは犠牲とされて 血清ＨＩ力価が測定された。下記の結果が得られた。 剤型 ＨＩ試験 対照(s.c.)^a) １／８０ 剤型ａ １／１６０ 剤型ｂ １／２０ ａ）商業的に入手可能な化合物。例IV 破傷風およびジフテリアワクチン剤型は、（ａ）破傷風トキソイド（５１０μ ｌ）、ジフテリアトキソイド（１６９μｌ）、ガングリオシド（７５μｌ）およ びトゥイーン２０（７５０μｌ）；（ｂ）破傷風トキソイド（５１０μｌ）、ジ フテリアトキソイド（１６９μｌ）およびインウィトール／クレモフォア混合物 （１：１）溶液（２２０μｌ）からなる。６羽のウサギをそれぞれ２羽のウサギ からなる３群に分けた（各群に４個の外鼻孔）。剤型ａおよびｂを麻酔条件下に 鼻腔内的に投与した（各外鼻孔毎に５０μｌ）。各ウサギは１８Ｌｆの破傷風ト キソイドおよび１８Ｌｆのジフテリアトキソイドを受けた。最後の群は対照とし て供され、等張食塩水の単一回の鼻腔内投与のみを受けた。ウサギは、投与後３ ・１／２時間後にペントバルビタールの静脈注射により犠牲にされた。各鼻腔を 切開し、それぞれ顕微鏡的に評価した。評価者は、投与計画については知らされ ていない。データは、観察される組織障害が対照および試験群にほとんど均等に 分布していることを示した。小さい病巣的なものおよび損傷の前部位置が、投与 ピペットのチップの擦り傷に対応して得られた。等張食塩水と剤型ａおよびｂと の間で、何等の顕微鏡的差異も観察されなかった。例Ｖ ３種類の溶媒、リン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）、カプリル／カプリン酸グリセリ ド（ＣＣＧ）およびポリオキシエチレンソルビタンモノエステル（ＰＳ）を、そ れらの相互関係（相ダイアグラム）を見るために、種々の濃度で互いに混合した 。図は、ある濃度領域においてエマルジョンまたは半固体が達成されることを示 している。ＣＣＧおよびＰＢＳは、系内にＰＳがほとんどまたは全く存在しない 場合に、混合により混成溶液を示した。各物質の濃度に依存して、粘度、生物的 付着性、噴霧可能性および均質性（エマルジョン送達系の場合）を調節できる。例VI 破傷風ワクチン剤型は、（ａ）破傷風トキソイド（５１０μｌ）、ガングリオ シド（７５μｌ）、ポリオキシエチレンソルビタンモノエステル（７５０μｌ） および食塩水（１６９μｌ）；（ｂ）水酸化アルミニウムに吸着された商業的に 入手可能な破傷風／ジフテリアワクチンからなる。剤型ａは、麻酔および鎮静剤 を使用せすにウサギに鼻腔内的に投与され（５０μｌ／外鼻孔）、また剤型ｂは 、皮下的に投与された。各ウサギに、１８Ｌｆの破傷風トキソイドおよび１８Ｌ ｆのジフテリアトキソイドを投与した。３週間後に、ウサギは同じ剤型を用いて ブーストされた。１週間毎に耳周辺の静脈から血清試料を採取し、この試料をＴ ｏＢｉ技術を使用して測定した。下記の結果が得られた。 例VII カプリル／カプリン酸グリセリド（ＣＣＧ）およびポリオキシエチレンソルビ タンモノエステル（ＰＳ）の間の相乗効果を以下のように測定した。 次の６種類のジフテリア（１．５Ｌｆ）ワクチン剤型を調製した。（ａ）リン 酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）中；（ｂ）皮下注射のための商業的に入手可能なＡｌ( ＯＨ)₃吸着ワクチン；（ｃ）４０％のポリソルベート２０を含有するＰＢＳ溶液 中；（ｄ）４０％のポリソルベート２０および２５％のポリオキシエチレンカス ターオイルを含有するＰＢＳ溶液中；（ｅ）４０％のポリソルベート２０および １０％のカプリル／カプリン酸グリセリド（モノ−およびジ−グリセリド）中； （ｆ）４０％のポリソルベート２０、２５％ポリオキシエチレンカスターオイル および１０％のカプリル／カプリン酸グリセリド（モノ−およびジ−グリセリド ）中。該剤型を、腹腔内的なネンブタール麻酔のもとにマウスに鼻腔内的に（２ ．５μｌ／外鼻孔）投与した。各マウスに、１．５Ｌｆの破傷風トキソイドを投 与した。３週間後に、マウスは同じ剤型を用いてブーストされ、１週間後に犠牲 とされて、血清抗体が測定された。下記の結果が得られた。 剤型 ジフテリアＩｇＧ ａ ０．０００４ ｂ ０．３５４ ｃ ０．４４８ ｄ ０．１２７ ｅ ７．３ ｆ ０．１１５ ＰＳまたはＣＣＧ単独の場合には満足ゆく効果が与えられないものと思われる 。ＰＳおよびＣＣＧの組合せの場合のみである例VIII この例においては、カプリル／カプリン酸グリセリド（ＣＣＧ）およびポリオ キシエチレンソルビタンモノエステル（ＰＳ）の間の相乗効果を更に評価した。 次の７種類のインフルエンザＡワクチン剤型を調製した。（ａ）リン酸緩衝食 塩水（ＰＢＳ）中；（ｂ）２５％のポリオキシエチレンカスターオイルを含有す るＰＢＳ溶液中；（ｃ）２５％のポリオキシエチレンカスターオイルおよび１０ ％のカプリル／カプリン酸グリセリド（モノ−およびジ−グリセリド）を含有す るＰＢＳ溶液中；（ｄ）４０％のポリソルベート２０を含有するＰＢＳ溶液中； （ｅ）４０％のポリソルベート２０および２５％のポリオキシエチレンカスター オイルを含有するＰＢＳ溶液中；（ｆ）４０％のポリソルベート２０および１０ ％のカプリル／カプリン酸グリセリド（モノ−およびジ−グリセリド）中；（ｇ ）４０％のポリソルベート２０、２５％ポリオキシエチレンカスターオイルおよ び１０％のカプリル／カプリン酸グリセリド（モノ−およびジ−グリセリド）中 。該剤型を、腹腔内的なネンブタール麻酔のもとにマウスに鼻腔内的に（２．５ μｌ／外鼻孔）投与した。３週間後に、マウスは同じ剤型を含むブースターを受 け、更に１週間後に犠牲とされて、血清抗体が測定された。下記の結果が得られ た。 剤型 ＩｇＧ ａ ０．０７２ ｂ ０．０５３ ｃ ０．０７３ ｄ ０．１１４ ｅ ０．０３８ ｆ ０．３５４ ｇ ０．０３７ カプリル／カプリン酸グリセリドは、水に不溶性であるため、それらの単独で の試験は行わなかった。例IX この例は、至適ＣＣＧおよびＰＳ濃度の選択を例示する。 次の７種類のジフテリアワクチン剤型を調製した。（ａ）リン酸緩衝食塩水（ ＰＢＳ）中；（ｂ）３５％のポリソルベート２０を含有するＰＢＳ溶液中；（ｃ ）５７．５％のポリソルベート２０を含有するＰＢＳ溶液中；（ｄ）３５％のポ リソルベート２０および１０％のカプリル／カプリン酸グリセリド（モノ−およ びジ−グリセリド）を含有するＰＢＳ溶液中；（ｅ）５７．５％のポリソルベー ト２０および１０％のカプリル／カプリン酸グリセリド（モノ−およびジ−グリ セリド）を含有するＰＢＳ溶液中；（ｆ）３５％のポリソルベート２０および２ ４％のカプリル／カプリン酸グリセリド（モノ−およびジ−グリセリド）を含有 するＰＢＳ溶液中；（ｇ）５７．５％のポリソルベート２０および２４％のカプ リル／カプリン酸グリセリド（モノ−およびジ−グリセリド）中。該剤型を、腹 腔内的なネンブタール麻酔のもとにマウスに鼻腔内的に（２．５μｌ／外鼻孔） 投与した。３週間後に、マウスは同じ剤型を含むブースターを受け、更に１週間 後に犠牲とされて血清抗体が測定された。下記の結果が得られた。 剤型 ＩｇＧ ａ ０．３６５ ｂ １．２２ ｃ ０．０９２ ｄ ９．６５ ｅ ２．３３ ｆ １．３１ ｇ ２６．６ カプリル／カプリン酸グリセリドは、水に不溶性であるため、それらの単独で の試験は行わなかった。例Ｘ この例においては、至適ＣＣＧおよびＰＳ濃度の選択を更に例示する。 ７種類のジフテリアおよび破傷風ワクチン剤型を、カプリル／カプリン酸グリ セリド（モノ−およびジ−グリセリド）の濃度（１０％）を固定し、ポリソルベ ート２０（モノ−エステル）の濃度を２８％（ａ）から２％づつ増加して４０％ （ｇ）までの範囲に亘って変化させることにより調製した。該剤型を、腹腔内的 なネンブタール麻酔のもとにマウスに鼻腔内的に（２．５μｌ／外鼻孔）投与し た。３週間後に、マウスは同じ剤型を含むブースターを受け、更に１週間後に犠 牲とされて血清抗体が測定された。下記の結果が得られた。 例ＸＩ この例は、ポリオキシエチレン脂肪酸エステルの選択に関するものである。こ のようなポリオキシエチレン脂肪酸エステルは、モノ−およびトリ−エステルと して見い出されている。ジフテリアトキソイドは、以下の異なる組成物中に製剤 化された：（ａ）等張リン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）中；（ｂ）４７％のポリソル ベート８０（トリ−エステル）を含有するＰＢＳ溶液中；（ｃ）４７％のポリソ ルベート２０（モノ−エステル）を含有するＰＢＳ溶液中。該剤型を、腹腔内的 なネンブタール麻酔のもとにマウスに鼻腔内的に（２．５μｌ／外鼻孔）投与し た。マウスは、４週間後に犠牲とされて血清抗体が測定された。下記の結果が得 られた。 剤型 ＩｇＧ ａ ０．００１ ｂ ０．００２ ｃ ０．００６ 例ＸII グリセリドエステルの選択を以下のように行った：６種類の破傷風（１．５Ｌ ｆ）およびジフテリア（１．５Ｌｆ）ワクチン剤型を調製した。該剤型を、腹腔 内的なネンブタール麻酔のもとで、マウスに鼻腔内的に（２．５μｌ／外鼻孔） 投与した。マウスは、４週間後に犠牲とされて血清および鼻部洗浄抗体が測定さ れた。下記の結果が得られた。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ， ＤＫ，ＥＳ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，Ｍ Ｃ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ， ＴＤ，ＴＧ)，ＡＴ，ＡＵ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ， ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，Ｇ Ｂ，ＧＥ，ＨＵ，ＪＰ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＫ，ＬＵ ，ＬＶ，ＭＧ，ＭＮ，ＭＷ，ＮＬ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ， ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＫ，ＵＡ，ＵＳ，Ｕ Ｚ，ＶＮ (72)発明者 ヘロン，イヴェル デンマーク国、ディーケイ‐4450 イデル ップ、デンネルップヴァイ 19

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １．哺乳動物に対する抗原類および／またはワクチン類の粘膜を介した局所投与 のための医薬調製物であって、 （ａ）一般式 式中、Ｒは、ラウレート、パルミテート、ステアレートおよびオレエート のうちから選択され、ｗ、ｘ、ｙおよびｚの和が４、５または２０である、で表 されるポリオキシエチレンソルビタンモノエステル類と、 （ｂ）１モルのカスターオイルまたは水素添加カスターオイルを、１０〜４５モ ルのエチレンオキシドと反応させることにより得られるポリオキシエチレンカス ターオイルと、 （ｃ）一般式 式中、Ｒ¹は、独立してＨ、または１〜６％の遊離のグリセロール、４５ 〜５０％のモノグリセリド類、３０〜４０％のジグリセリド類および５〜９％の トリグリセリド類を含むＣ₈−Ｃ₁₀アシル基である、 で表されるカプリル／カプリン酸グリセリド類と、 （ｄ）一般式 式中、Ｇａｌはガラクトース、Ｇｌｃはグルコース、Ｃｅｒはセラミド（ Ｎ−脂肪族アシルスフィンゴシン）およびＮｅｕＡｃはＮ−アセチルノイラミン 酸（シアル酸）であり、Ｒ²はＮ−アセチルガラクトサミン、ガラクトース、Ｎ −アセチルノイラミン酸またはそれらの組合せの内から選択される１種以上の物 質であり、Ｒ³はＨまたはＮ−アセチルノイラミン酸である、 で表されるガングリオシド類と、 から選択される１種以上のアジュバント／担体を、調製物の全体積に基づいて計 算して０．０１〜１５％（ｖ／ｖ）の量をもって含むことを特徴とする局所投与 用医薬調製物。 ２．該抗原類および／またはワクチン類が、局所的および／または全身性抗体を 生成させるために使用され得るクラミジア、コレラ、ジフテリア、インフルエン ザ菌、らい、髄膜炎、百日咳、肺炎、赤痢菌、破傷風、結核等の細菌性ワクチン ；肝炎ウイルス、ヘルペスウイルス、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）、インフ ルエンザウイルス、麻疹ウイルス、耳下腺炎ウイルス、パラインフルエンザウイ ルス、パラミクソウイルス、ポリオウイルス、狂犬病ウイルス、呼吸器性合胞体 ウイルス、ライノウイルス型、ロタウイルス、風疹ウイルス等のウイルス性ワク チン；並びにリーシュマニア症、住血吸虫症およびトリパノソーマ症等のための 寄生生物ワクチン等、またはそれらの混合物から選択される請求の範囲第１項に 記 載の医薬調製物。 ３．界面活性剤および／または吸収促進剤、水吸収性ポリマー類、油状物質、エ マルジョン、リポゾーム、酵素的分解を阻害する物質、アルコール類、有機溶媒 類、水、疎水性物質、ｐＨ調節剤、保存剤および浸透圧調節剤、シクロデキスト リン類並びに推進剤またはそれらの混合物からなる群から選択される１種以上の 化合物を更に含有する請求の範囲第１項または第２項に記載の医薬調製物。 ４．鼻、口、目、耳、膣または直腸の粘膜に直接に適用される請求の範囲第１項 から第３項のいずれかに記載の医薬調製物。 ５．鼻の粘膜に直接に適用される請求の範囲第４項に記載の医薬調製物。 ６．剤型１００ｍｌが、 ０．０１から９０ｍｌまでの活性ワクチン／抗原成分と、 ０．０１から７５ｍｌまでのカプリル／カプリン酸グリセリドと、 ０．１から９５ｍｌまでのポリオキシエチレンソルビタンモノエステル類と、 場合により１種以上のアジュバントまたは賦形剤と、 を含有するワクチンまたは抗原剤型。 ７．剤型１００ｍｌが、 ０．０１から９０ｍｌまでの活性ワクチン／抗原成分と、 ０．０１から９０ｍｌまでのガングリオシド類と、 ０．１から９５ｍｌまでのポリオキシエチレンカスターオイルまたはポリオキ シエチレンソルビタンモノエステル類と、 ０．１から７５ｍｌまでのカプリル／カプリン酸グリセリド類と、 場合により１種以上のアジュバントまたは賦形剤と、 を含有するワクチンまたは抗原剤型。 ８．剤型１００ｍｌが、 ０．０１から９０ｍｌまでの活性ワクチン／抗原成分と、 ０．０１から９０ｍｌまでのガングリオシド類および／またはポリオキシエチ レンカスターオイルと、 ０．１から９５ｍｌまでのポリオキシエチレンソルビタンモノエステル類と、 ０．１から７５ｍｌまでのカプリル／カプリン酸グリセリド類と、 ０．０１から９９ｍｌまでのＰＢＳ／食塩水と、 ０．０１から９０ｍｌまでの蒸留水と、 場合により１種以上のアジュバントまたは賦形剤と、 を含有するワクチンまたは抗原剤型。 ９．哺乳動物に対する抗原類および／またはワクチン類の局所投与のための医薬 調製物中のアジュバント／担体としての、 （ａ）一般式 式中、Ｒは、ラウレート、パルミテート、ステアレートおよびオレエート のうちから選択され、ｗ、ｘ、ｙおよびｚの和が４、５または２０である、 で表されるポリオキシエチレンソルビタンモノエステル類と、 （ｂ）１モルのカスターオイルまたは水素添加カスターオイルを、１０〜４５モ ルのエチレンオキシドと反応させることにより得られるポリオキシエチレンカス ターオイルと、 （ｃ）一般式 式中、Ｒ¹は、独立してＨ、または１〜６％の遊離のグリセロール、４５ 〜５０％のモノグリセリド類、３０〜４０％のジグリセリド類および５〜９％の トリグリセリド類を含むＣ₈−Ｃ₁₀アシル基である、 で表されるカプリル／カプリン酸グリセリド類と、 （ｄ）一般式 式中、Ｇａｌはガラクトース、Ｇｌｃはグルコース、Ｃｅｒはセラミド（ Ｎ−脂肪族アシル スフィンゴシン）およびＮｅｕＡｃはＮ−アセチルノイラミ ン酸（シアル酸）であり、Ｒ²はＮ−アセチルガラクトサミン、ガラクトース、 Ｎ−アセチルノイラミン酸またはそれらの組合せの内から選択される１種以上の 物質であり、Ｒ³はＨまたはＮ−アセチルノイラミン酸である、 で表されるガングリオシド類と、 から選択される１種以上の化合物の、調製物の全体積に基づいて計算して０．０ １〜１５％（ｖ／ｖ）の量における使用。