JPH09271384A - ヒト遺伝子 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】各種組織での遺伝子発現の検出、その構造及び
機能の解析、これによりコードされるヒト蛋白の遺伝子
工学的製造、その発現物の解析等による関与疾患、例え
ば遺伝子病、癌等の病態解明や診断、治療等を可能とす
るヒト遺伝子を提供する。 【解決手段】配列番号：１に示されるアミノ酸配列をコ
ードする塩基配列を含む新規なヒトＡＤＤＬ遺伝子（ヒ
ト・アデューシン様７０遺伝子）が提供される。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、ヒトの疾患の予
防、診断及び治療の指針として有用な遺伝子、より詳し
くはラット、マウス、酵母、線虫及びヒト遺伝子等と類
似性を有する新規なヒト遺伝子に関し、該遺伝子のｃＤ
ＮＡ解析、ｃＤＮＡ染色体へのマッピング、及びｃＤＮ
Ａの機能解析により、該遺伝子を用いた遺伝子診断並び
に新しい治療法の開発に利用可能な遺伝子に関する。

【０００２】

【従来技術とその課題】生物の遺伝情報は、細胞の核内
に存在するＡ、Ｃ、Ｇ、及びＴの４種の塩基の並び(Ｄ
ＮＡ)として蓄積され、この遺伝情報は個々の生物の系
統維持と個体発生ため保存されている。

【０００３】ヒトの場合、その塩基数は約３０億(３ｘ
１０⁹)といわれ、その中に５−１０万の遺伝子があると
推測されている。これらの遺伝情報は遺伝子(ＤＮＡ)か
らｍＲＮＡが転写され、次に蛋白質に翻訳されるという
流れに沿い、調節蛋白質、構造蛋白質あるいは酵素が作
られ生命現象を維持している。上記遺伝子から蛋白質翻
訳までの流れの異常は、細胞の増殖・分化などの生命維
持システムの異常を惹起し、各種疾患の原因となるとさ
れている。

【０００４】これまでの遺伝子解析の結果からインスリ
ン受容体やＬＤＬ受容体などの各種受容体や細胞の増殖
・分化に関わるもの、プロテアーゼ、ＡＴＰａｓｅ、ス
ーパーオキシドディスムターゼのような代謝酵素などの
医薬品開発にとって有用な素材となると思われる遺伝子
が多く見つかっている。

【０００５】しかしながら、ヒト遺伝子の解析とそれら
解析された遺伝子の機能及び解析遺伝子と各種疾患との
係わりについての研究はまだ始まったばかりであり、不
明な点が多く、更なる新しい遺伝子の解析とそれらの遺
伝子の機能解析と解析された遺伝子と疾患の係わりの研
究、惹いては解析された遺伝子の利用による遺伝子診
断、該遺伝子の医薬用途への応用研究が当業界で望まれ
ている。

【０００６】

【発明が解決しようとする課題】上記新たなヒト遺伝子
が提供できれば、各細胞での発現レベルやその構造及び
機能を解析でき、またその発現物の解析等により、之等
の関与する疾患、例えば遺伝子病、癌等の病態解明や診
断、治療等が可能となると考えられる。本発明は、かか
る新たなヒトの遺伝子の提供を目的としている。

【０００７】本発明者らは、上記目的より鋭意研究を重
ね、以下の知見を得、ここに本発明を完成するに至っ
た。即ち、本発明者らは、ヒト胎児脳、成人血管、胎盤
などの各種組織より抽出したｍＲＮＡよりｃＤＮＡを合
成し、これをベクターに組込んでライブラリーを構築
し、該ライブラリーでトランスフォームした大腸菌コロ
ニーを寒天培地上に形成させ、該コロニーをランダムに
ピックアップして９６ウェルマイクロプレートに移し、
ヒト遺伝子を含む多数の大腸菌クローンを登録した。

【０００８】登録した各クローンは、少量培養後ＤＮＡ
を抽出精製し、抽出したｃＤＮＡを鋳型としてデオキシ
ターミネーター法により４種の塩基特異的に停止する伸
長反応を行ない、自動ＤＮＡシークエンサーにより、遺
伝子の５’末端から約４００塩基配列を決定した。かく
して得られた塩基配列情報について、公知のバクテリア
から酵母、線虫、マウス及びヒト等、動植物種に類似性
を有する新規なファミリー遺伝子を検索した。

【０００９】上記ｃＤＮＡ解析方法については、本発明
者のひとりである藤原らによって細述されている（藤原
力, 細胞工学, 14, 645-654(1995)）。このグループ
の中には新しいレセプター、ＤＮＡ結合ドメインを有す
る転写調節因子やシグナル伝達系因子、代謝酵素などが
あり、遺伝子解析によって得られた本発明の新規な遺伝
子と類似性ある遺伝子との相同性から、およそのその遺
伝子産物、即ち蛋白質がどのような機能を有するかを類
推することが可能である。更にその候補遺伝子を発現ベ
クターに組込み、リコンビナントを作製し、酵素活性や
結合活性等の機能を調べることができる。

【００１０】

【課題を解決するための手段】本発明によれば、配列番
号：１で示されるアミノ酸配列をコードする塩基配列を
含むことを特徴とする新規なヒト・アデューシン様７０
遺伝子（ＡＤＤＬ）、該アミノ酸配列の各アミノ酸をコ
ードする配列番号：２で示される塩基配列を含むことを
特徴とするヒト・アデューシン様７０遺伝子、並びに配
列番号：３で示される塩基配列であることを特徴とする
新規なヒト・アデューシン様７０遺伝子が提供される。

【００１１】以下、本明細書におけるアミノ酸、ペプチ
ド、塩基配列、核酸等の略号による表示は、ＩＵＰＡ
Ｃ、ＩＵＢの規定、「塩基配列又はアミノ酸配列を含む
明細書等の作成のためのガイドライン」（特許庁編）及
び当該分野における慣用記号に従うものとする。

【００１２】かかる本発明遺伝子の一具体例としては、
後述する実施例１に示される「ＧＥＮ−０２８Ｆ０７」
と名付けられたクローンの有するＤＮＡ配列から演繹さ
れるものを挙げることができる。その塩基配列は、配列
番号：３に示される通りである。これは配列番号：１に
示すアミノ酸でコードされるヌクレオチド（核酸）のオ
ープンリーディングフレームを有しており、後記実施例
に示される分子量を有していると計算される。従って、
本発明のヒト遺伝子を以下実施例１に示されるとおり
「ヒト・アデューシン様７０遺伝子」ということがあ
る。

【００１３】

【発明の実施の形態】上記本発明ヒト遺伝子につき詳述
すれば次の通りである。

【００１４】即ち、上述の如く、本発明ヒト遺伝子は、
ラット、マウス、酵母、線虫及び公知のヒト遺伝子等と
類似性を有し、それら類似性ある遺伝子の情報に基づく
ヒト遺伝子の解析とそれら解析された遺伝子の機能及び
解析遺伝子と各種疾患との係わりについての研究に利用
でき、遺伝子と関係ある疾患への遺伝子診断並びに該遺
伝子の医薬用途への応用研究に用いることが可能であ
る。

【００１５】本発明遺伝子は、例えば配列番号：２に示
されるように、一本鎖ＤＮＡ配列で表されるが、本発明
はかかる一本鎖ＤＮＡ配列に相補的なＤＮＡ配列やこれ
らの両者を含むコンポーネントもまた包含する。尚、上
記配列番号：２に示す配列は、本発明遺伝子によりコー
ドされる各アミノ酸残基を示すコドンの一つの組合わせ
例であり、本発明遺伝子はこれに限らず、各アミノ酸残
基に対して任意のコドンを組合わせ選択したＤＮＡ塩基
配列を有することも勿論可能である。該コドンの選択は
常法に従うことができ、例えば利用する宿主のコドン使
用頻度を考慮することができる〔Ncl.Acids Res., 9, 4
3-74 (1981) 〕。

【００１６】更に本発明遺伝子には、配列番号：１で示
されるアミノ酸配列の一部のアミノ酸乃至アミノ酸配列
を置換、欠失、付加等により改変してなり、同様の機能
を有する同効物をコードするＤＮＡ配列もまた包含され
る。これらポリペプチドの製造、改変（変異）等は天然
に生じることもあり、また翻訳後の修飾により、或は遺
伝子工学的手法により天然の遺伝子（本発明遺伝子）
を、例えばサイトスペシフィック・ミュータゲネシス
〔Methods in Enzymology, 154, p350, 367-382 (198
7)；同 100, p468 (1983) ；Nucleic Acids Research,
12, p9441 (1984)；続生化学実験講座１「遺伝子研究法
II」、日本生化学会編, p105 (1986) 〕等の方法により
改変したり、リン酸トリエステル法やリン酸アミダイト
法等の化学合成手段〔J. Am. Chem. Soc., 89, p4801
(1967)；同91, p3350 (1969)；Science,150, p178 (196
8) ；Tetrahedron Lett., 22, p1859 (1981)；同24, p2
45 (1983) 〕により変異させたＤＮＡを合成したり、そ
れらの組合せにより収得することができる。

【００１７】本発明遺伝子は、これを用いて、即ち例え
ばこれを微生物のベクターに組込み、形質転換された微
生物を培養することによって、上記各遺伝子でコードさ
れるタンパクを容易にかつ安定して発現できる。

【００１８】また本発明の遺伝子を利用して得られる各
蛋白は、これを用いて、特異抗体を作成することもでき
る。ここで抗原として用いられるコンポーネントは、上
記遺伝子工学的手法に従って大量に産生される蛋白を用
いることができ、得られる抗体はポリクローナル抗体及
びモノクローナル抗体のいずれでもよく、之等抗体はそ
れぞれの蛋白の精製、測定、識別等に有利に利用でき
る。

【００１９】本発明遺伝子の製造は、本発明によって開
示された本発明遺伝子についての配列情報によれば、一
般的遺伝子工学的手法により容易に実施できる〔Molecu
larCloning 2nd Ed, Cold Spring Harbor Laboratory P
ress (1989)；続生化学実験講座「遺伝子研究法I、II、
III」、日本生化学会編 (1986) 等参照〕。

【００２０】これは例えばヒトｃＤＮＡライブラリー
（各遺伝子の発現される適当な起源細胞より常法に従い
調製されたもの）から、本発明遺伝子に特有の適当なプ
ローブや抗体を用いて所望クローンを選択することによ
り実施できる〔Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 78, 6613
(1981) ; Science, 222, 778 (1983)等〕。

【００２１】上記方法において、起源細胞としては、目
的の遺伝子を発現する各種の細胞、組織や之等に由来す
る培養細胞等が例示され、これからの全ＲＮＡの分離、
ｍＲＮＡの分離や精製、ｃＤＮＡへの変換（合成）とそ
のクローニング等はいずれも常法に従い実施できる。ま
た、ｃＤＮＡライブラリーは市販されてもおり、本発明
においてはそれらｃＤＮＡライブラリー、例えばクロー
ンテック社（ClontechLab. Inc.）より市販の各種ｃＤ
ＮＡライブラリー等を用いることもできる。

【００２２】ｃＤＮＡライブラリーからの本発明遺伝子
のスクリーニングは、前記通常の方法に従い実施するこ
とができる。該スクリーニング方法としては、例えばｃ
ＤＮＡの産生する蛋白質に対して、該蛋白質特異抗体を
使用した免疫的スクリーニングにより、対応するｃＤＮ
Ａクローンを選択する方法、目的のＤＮＡ配列に選択的
に結合するプローブを用いたプラークハイブリダイゼー
ション、コロニーハイブリダイゼーション等や之等の組
合せを例示できる。ここで用いられるプローブとして
は、本発明遺伝子のＤＮＡ配列に関する情報をもとにし
て化学合成されたＤＮＡ配列等を用いるのが一般的であ
り、勿論既に取得された本発明遺伝子やその断片もかか
るプローブとして利用できる。

【００２３】更に各細胞、組織より抽出、単離精製され
た天然抽出物の部分アミノ酸配列情報に基づき、センス
・プライマー、アンチセンス・プライマーをスクリーニ
ング用プローブとして用いることもできる。

【００２４】また、本発明遺伝子の取得に際しては、Ｐ
ＣＲ法〔Science, 230, 1350-1354(1985)〕によるＤＮ
Ａ／ＲＮＡ増幅法が好適に利用できる。殊にライブラリ
ーから全長のｃＤＮＡが得られ難いような場合に、レー
ス法（ＲＡＣＥ：Rapid amplification of cDNA ends；
実験医学、12(6), 35-38 (1994))、殊に５′−レース
（ＲＡＣＥ）法（Frohman,M.A., et al., Proc. Natl.
Acad. Sci., USA., 8, 8998-9002(1988)）の採用が好適
である。かかるＰＣＲ法の採用に際して使用されるプラ
イマーは、既に本発明によって明らかにされた本発明遺
伝子の配列情報に基づいて適宜設定することができ、こ
れは常法に従い合成することができる。

【００２５】尚、増幅させたＤＮＡ／ＲＮＡ断片の単離
精製は前記の通り常法に従うことができ、例えばゲル電
気泳動法等によればよい。

【００２６】上記で得られる本発明遺伝子或は各種ＤＮ
Ａ断片等の塩基配列の決定も、常法に従うことができ、
例えばジデオキシ法〔Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 7
4, 5463-5467 (1977)〕やマキサム−ギルバート法〔Met
hod in Enzymology, 65, 499(1980)〕等により行なうこ
とができる。かかる塩基配列の決定は、市販のシークエ
ンスキット等を用いても容易に行ない得る。

【００２７】本発明遺伝子の利用によれば、通常の遺伝
子組換え技術〔例えば、Science, 224, p1431 (1984) ;
Biochem. Biophys. Res. Comm., 130, p692 (1985) ；
Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 80, p5990 (1983)及び前
記引用文献等参照〕に従うことにより、各組換え体蛋白
を得ることができる。該蛋白の製造は、より詳細には、
本発明遺伝子が宿主細胞中で発現できる組換えＤＮＡを
作成し、これを宿主細胞に導入して形質転換し、該形質
転換体を培養することにより行なわれる。

【００２８】ここで宿主細胞としては、真核生物及び原
核生物のいずれも用いることができる。該真核生物の細
胞には、脊椎動物、酵母等の細胞が含まれ、脊椎動物細
胞としては、例えばサルの細胞であるＣＯＳ細胞〔Cel
l, 23, 175-182 (1981)〕やチャイニーズ・ハムスター
卵巣細胞及びそのジヒドロ葉酸レダクターゼ欠損株〔Pr
oc. Natl. Acad. Sci. USA, 7 7, 4216-4220 (1980)〕等
がよく用いられているが、之等に限定される訳ではな
い。

【００２９】脊椎動物の発現ベクターとしては、通常発
現しようとする遺伝子の上流に位置するプロモーター、
ＲＮＡのスプライス部位、ポリアデニル化部位及び転写
終了配列等を保有するものを使用でき、これは更に必要
により複製起点を有していてもよい。該発現ベクターの
例としては、例えば、ＳＶ４０の初期プロモーターを保
有するｐＳＶ２dhfr〔Mol. Cell. Biol., 1, 854 (198
1）〕等を例示できる。また、真核微生物としては、酵
母が一般によく用いられ、中でもサッカロミセス属酵母
を有利に利用できる。該酵母等の真核微生物の発現ベク
ターとしては、例えば酸性ホスフアターゼ遺伝子に対す
るプロモーターを有するｐＡＭ８２〔Proc. Natl. Aca
d. Sci. USA, 80, 1-5 (1983)〕等を利用できる。

【００３０】また、本発明遺伝子の発現ベクターとして
は、原核生物遺伝子融合ベクターを好ましく利用するこ
とができ、該ベクターの具体例としては、例えば分子量
２６０００のＧＳＴドメイン（S.japonicum 由来）を有
するｐＧＥＸ−２ＴＫやｐＧＥＸ−４Ｔ−２等を例示す
ることができる。

【００３１】原核生物の宿主としては、大腸菌や枯草菌
が一般によく用いられる。之等を宿主とする場合、本発
明では、例えば該宿主菌中で複製可能なプラスミドベク
ターを用い、このベクター中に本発明遺伝子が発現でき
るように該遺伝子の上流にプロモーター及びＳＤ（シヤ
イン・アンド・ダルガーノ）塩基配列、更に蛋白合成開
始に必要な開始コドン（例えばＡＴＧ）を付与した発現
プラスミドを利用するのが好ましい。上記宿主としての
大腸菌としては、エシエリヒア・コリ（Escherichia co
li）Ｋ１２株等がよく用いられ、ベクターとしては一般
にｐＢＲ３２２及びその改良ベクターがよく用いられる
が、之等に限定されず公知の各種の菌株及びベクターを
も利用できる。プロモーターとしては、例えばトリプト
ファン(trp) プロモーター、lpp プロモーター、lac プ
ロモーター、PL/PR プロモーター等を使用できる。

【００３２】かくして得られる所望の組換えＤＮＡの宿
主細胞への導入方法及びこれによる形質転換方法として
は、一般的な各種方法を採用できる。また得られる形質
転換体は、常法に従い培養でき、該培養により本発明遺
伝子によりコードされる目的の蛋白が生産、発現され
る。該培養に用いられる培地としては、採用した宿主細
胞に応じて慣用される各種のものを適宜選択利用でき、
その培養も宿主細胞の生育に適した条件下で実施でき
る。

【００３３】上記により、形質転換体の細胞内、細胞外
乃至は細胞膜上に目的とする組換え蛋白が発現、生産、
蓄積乃至分泌される。

【００３４】各組換え蛋白は、所望により、その物理的
性質、化学的性質等を利用した各種の分離操作〔「生化
学データーブックII」、1175-1259 頁、第１版第１刷、
1980年 6月23日株式会社東京化学同人発行；Biochemist
ry, 25(25), 8274-8277 (1986); Eur. J. Biochem., 16
3, 313-321 (1987) 等参照〕により分離、精製できる。
該方法としては、具体的には例えば通常の再構成処理、
蛋白沈澱剤による処理（塩析法）、遠心分離、浸透圧シ
ョック法、超音波破砕、限外濾過、分子篩クロマトグラ
フィー（ゲル濾過）、吸着クロマトグラフィー、イオン
交換クロマトグラフィー、アフィニティクロマトグラフ
ィー、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）等の各
種液体クロマトグラフィー、透析法、之等の組合せ等を
例示でき、特に好ましい上記方法としては所望の蛋白を
結合させたカラムを利用したアフィニティクロマトグラ
フィーを例示できる。

【００３５】また、本発明によって明らかにされた本発
明遺伝子の配列情報を基にすれば、例えば該遺伝子の一
部又は全部の塩基配列を利用することにより、各種ヒト
組織における本発明遺伝子の発現の検出を行なうことが
できる。これは常法に従って行なうことができ、例えば
ＲＴ−ＰＣＲ（Reverse transcribed-Polymerase chain
reaction ）（Kawasaki, E.S., et al., Amplificatio
n of RNA. In PCR Protocol, A Guide to methods and
applications, Academic Press, Inc., SanDiego, 21-2
7(1991) ）によるＲＮＡ増幅により、またノーザンブロ
ッティング解析（Molecular Cloning, Cold Spring Har
bor Laboratory (1989)）等により、いずれも良好に実
施し得る。

【００３６】尚、前記ＰＣＲ法を採用する場合におい
て、用いられるプライマーは、本発明遺伝子のみを特異
的に増幅できる本発明遺伝子に特有のものである限り何
等限定はなく、本発明遺伝情報に基いてその配列を適宜
設定することができる。通常これは常法に従って２０〜
３０ヌクレオチド程度の部分配列を有するものとするこ
とができる。その好適な例は、後記実施例１に示すとお
りである。

【００３７】しかして、本発明はかかる新規なヒト遺伝
子に特有の検出に有用なプライマー及び／又はプローブ
をも提供するものである。

【００３８】

【発明の効果】本発明によれば、新規なヒト遺伝子が提
供され、該遺伝子を用いれば、該遺伝子の各種組織での
発現の検出や、その構造及び機能を解析でき、また、該
遺伝子でコードされるヒト蛋白の遺伝子工学的製造が可
能となり、これらにより、その発現物の解析等により、
之等の関与する疾患、例えば遺伝子病、癌等の病態解明
や診断、治療等が可能となる。

【００３９】

【実施例】以下、本発明を更に詳しく説明するため、実
施例を挙げる。

【００４０】

【実施例１】ヒト・アデューシン様７０遺伝子 （１）ヒト・アデューシン様７０遺伝子のクローニング
及びＤＮＡシークエンシング ヒト胎児脳、成人血管、胎盤の各組織より抽出したｍＲ
ＮＡをクローンテック社より購入し、出発材料とした。
常法に従ってｍＲＮＡよりｃＤＮＡを合成し、ベクター
λＺＡＰII（ストラタジーン社製）に挿入し、ｃＤＮＡ
ライブラリーを構築した（大塚ＧＥＮリサーチ・インス
ティチュート、大塚製薬株式会社）。

【００４１】インビボ・エキシジョン法(in vivo excis
ion : Short, J. M., et al., Nucleic Acids Res., 1
6, 7583-7600 (1988))によって寒天培地上にヒト遺伝子
を含む大腸菌コロニーを形成させ、ランダムにそのコロ
ニーをピックアップし、９６ウエルマイクロプレートに
ヒト遺伝子を含む大腸菌クローンを登録した。登録され
たクローンは、−８０℃にて保存した。

【００４２】次に登録した各クローンを１．５ｍｌのＬ
Ｂ培地で一昼夜培養し、プラスミド自動抽出装置ＰＩ−
１００（クラボウ社製）を用いてＤＮＡを抽出精製し
た。尚、コンタミした大腸菌のＲＮＡはＲＮase処理に
より分解除去した。最終的に３０μｌに溶解し、２μｌ
は、ミニゲルによりおおまかにＤＮＡのサイズ、量をチ
ェックし、７μｌをシークエンス反応用に用い、残りの
２１μｌは、プラスミドＤＮＡとして４℃に保存した。
また、この方法は若干のプログラム変更によって後記実
施例で示されるＦＩＳＨ(fluoresence in situ hybridi
zation)のプローブ用としても使用可能なコスミド抽出
法である。

【００４３】続いてＴ３、Ｔ７或は合成オリゴヌクレオ
チド・プライマーを用いるサンガーらのジデオキシター
ミネーター法〔Sanger, F., et al., Proc. Natl. Aca
d. Sci. U.S.A., 74, 5463-5467 (1977)〕或は、ジデオ
キシターミネーター法にＰＣＲ法を加味した方法である
サイクルシークエンス法〔Carothers, A.M., et al.,Bi
o. Techniques, 7, 494-499 (1989)〕で抽出した少量の
プラスミドＤＮＡ(およそ０．１−０．５μｇ)をテンプ
レート(鋳型)として４種の塩基特異的に停止する伸長反
応させた。シークエンスプライマーは、ＦＩＴＣ(fluor
escein isothiocyanate)の蛍光標識したものを使用し、
Ｔａｑポリメラーゼにより通常約２５サイクル反応させ
た。そのＰＣＲ産物はポリアクリルアミド・尿素ゲルで
分離し、蛍光標識したＤＮＡ断片を自動ＤＮＡシークエ
ンサー、ＡＬＦ^TMＤＮＡシークエンサー(ファルマシア
社製)によりｃＤＮＡの５’末端側から約４００塩基の
配列を決定した。

【００４４】また、３’非翻訳領域は各遺伝子のヘテロ
ジェナイティ(heterogeneity)が高く、個々の遺伝子を
区別するには適しているので、場合によっては、３’側
のシークエンスも行なった。

【００４５】ＤＮＡシークエンサーで得られた膨大な塩
基配列情報は、６４ビットのコンピューターＤＥＣ３４
００に転送し、コンピュターによるホモロジー解析に用
いた。ホモロジー解析には、ＵＷＧＣＧのＦＡＳＴＡプ
ログラム〔Pearson, W.R. and Lipman, D. J., Proc.Na
tl.Acad.Sci., USA., 85, 2444-2448 (1988)〕によるデ
ーターベース（GenBank, EMBL ）検索により行なった。

【００４６】上記方法によって任意に選択し、ｃＤＮＡ
の配列解析により、ＧＥＮ−０２８Ｆ０７と名前付けた
０．７キロベースの挿入を持つ一つのクローンがヒト赤
血球アデューシン(Joshi, R., et al., J. Cell Biol.,
115, 665-675 (1991))及びラット・アデューシン６３
(Tripodi, G., et al., Biochem. Biophys. Res. Commu
n., 177, 939-947 (1991))と高い相同性を示した。

【００４７】ところで、アデューシン(adducin)は、２
００キロ・ダルトンの二量体からなる赤血球膜の骨格蛋
白であり、該アデューシンはスペクトリン(spectrin)の
アクチン(actin)への結合を促進し、該結合は、カルシ
ウム／カルモデュリン(calmodulin)により調節される。
アデューシンはまた、プロテイン・キナーゼＣによりリ
ン酸化される。

【００４８】近年、上記のようにラット脾臓のアデュー
シン及びヒト赤血球アデューシンの両者の一次構造がｃ
ＤＮＡクローニングにより推定された。これらの研究に
より、アデューシン及びその異性体が、例えば脳、腎
臓、肝臓等に由来する組織及び培養細胞株から、新しい
蛋白ファミリーとして確立された。

【００４９】上記アデューシンは、上皮組織及び培養細
胞における細胞−細胞接触の部位に局在しており(Kaise
r, H. W., et al., J. Cell Biol., 109, 557-569 (198
9))、スペクトリン−アクチン複合体の形成を促進させ
る能力は、スペクトリンに基づく細胞骨格(spectrin-ba
sed cytoskelton)の凝集に重要な役割を演じていること
を示唆している(Gardner, K. and Bennett, V., Natur
e, 328, 359-362 (1987); Kaiser, H. W., et al., J.
Cell Biol., 10 9, 557-569 (1989))。

【００５０】アデューシン分子の機能的機構は、いまだ
解明されていないが、アデューシンの限定的蛋白分解よ
り、各サブユニットは、２つの領域からなることが明ら
かとなった(Joshi,Joshi, R., et al., J. Cell Biol.,
115, 665-675 (1991))。

【００５１】そのＮ−末端３９キロ・ダルトン領域は、
プロテアーゼ耐性であり、球状をしており、その配列か
ら上記サブユニットのアクチン結合領域の存在が示唆さ
れる。一方、そのＣ−末端領域は、非常にプロテアーゼ
感受性であり、カルモデュリン結合領域を含んでいる(J
oshi,Joshi, R., et al., J. Cell Biol., 115, 665-67
5 (1991))。

【００５２】上記ヒト赤血球アデューシン遺伝子及びラ
ット・アデューシン６３遺伝子と比較した時、このクロ
ーンはその５’側が欠けていたので、その欠けているセ
グメントを単離するために５’レースの技術を用いた(F
rohman M.A., et al., Proc.Natl. Acad. Sci. U.S.A.,
8, 8998-9002 (1988))。

【００５３】（２）５′レース法（５’ＲＡＣＥ：5'ra
pid amplification of cDNA ends） 本発明遺伝子の５′部分を含むｃＤＮＡクローンの単離
・解析は、製品使用プロトコールの一部修飾させ、市販
キット（5'-Rapid AmpliFinder RACE Kit, クローンテ
ック社製）を用いた５′レース法により、以下のとおり
実施した。

【００５４】即ち、ヒト胎児脳ポリ（Ａ）＋ＲＮＡの
０．１μｇを逆転写酵素（Superscript TMII RNase H R
everse Transcriptase,Life Technologies社）を用いた
ランダムヘキサマー(ランダムプライマーｐ（ｄＮ）
６：ファルマシア社製)により逆転写してｃＤＮＡを
得、これを上記実施例１−（１）から得られたｃＤＮＡ
配列（ＧＥＮ−０２８Ｆ０７クローンの５’端末）由来
のプライマー及び市販のキットに付属のアンカープライ
マーを用いたＰＣＲにより増幅させた。

【００５５】即ち、上記ポリ（Ａ）＋ＲＮＡの０．１μ
ｇに２．５ｍＭ ｄＮＴＰ／１ｘＴａｑ緩衝液(宝酒造
社製)／０．２μＭ プライマー、０．２μＭ アダプ
ター・プライマー／ＥｘＴａｑ酵素(宝酒造社製)０．２
５単位を併せて全量を５０μｌとし、これにアンカー・
プライマーを加えて室温で反応させた後、ＰＣＲに供し
た。該ＰＣＲは、９４℃１分間、次いで９４℃４５秒、
５８℃４５秒、７２℃２分のサイクルを３５サイクル行
ない、７２℃で７分間反応させた。

【００５６】その後、ＰＣＲ反応物５０μｌ中の１μｌ
を遺伝子特異的ネスティッドＰ２プライマーとアンカー
・プライマーを用いる第２のＰＣＲ反応において増幅さ
せた。増幅された５’ｃＤＮＡ断片をベクター（ｐＴ７
Ｂｌｕｅ（Ｒ）Ｔ−Ｖｅｃｔｏｒ，ノバゲン(Novagen)
社）中でサブクローン化し、核酸配列を決定した。

【００５７】ＧＥＮ−０２８Ｆ０７クローンの配列と増
幅された５’ｃＤＮＡの２つの重なっているｃＤＮＡク
ローンをシークェンシングすることによって、全体のコ
ードしている配列と、５’と３’フランキング配列を決
定し、該遺伝子をヒト・アデューシン様７０遺伝子と命
名した。

【００５８】配列番号：３にヒト・アデューシン様７０
の核酸配列を、配列番号：２にそのコードディング領域
の核酸配列を、また配列番号：１に上記核酸配列によっ
てコードされる推定アミノ酸配列を示す。

【００５９】ヒト・アデューシン様７０遺伝子は、配列
番号：１で示される６７４アミノ酸をコードする配列番
号：２で示される２０２２塩基長の核酸配列のオープン
・リーディング・フレームからなり、これを含む配列と
５’非コード領域及び３’非コード領域からなる全長配
列は、配列番号：３で示される２９２０核酸配列からな
っていた。

【００６０】配列番号：３の塩基配列番号１８４−１８
６番目の塩基の位置が推定されたスタート・コドンであ
ることは、このコドンがｃＤＮＡクローンの最初のＡＴ
Ｇでしかも上流にイン−フレームでストップ・コドンが
ある、また、このＡＴＧが翻訳開始のためのコザック配
列とよく似た配列に囲まれていることから示唆される(K
ozak M., J. Biol. Chem., 266, 19867-19870 (199
1))。

【００６１】また、停止コドンは、配列番号：３の２２
０６−２２０８番目に位置しており、ポリアデニレーシ
ョン・シグナルＡＡＴＡＡＡは、ポリアデニレーション
部位の１０６塩基上流(２６２６−２６３１番目)に位置
していた。

【００６２】（２）ヒト・アデューシン様７０とアデュ
ーシン・ファミリーとのアミノ酸配列の比較 本発明ヒト・アデューシン様７０遺伝子によりコードさ
れる蛋白のアミノ酸配列は、ヒト赤血球αアデューシン
と５４％、ヒト赤血球βアデューシンと５３％及びラッ
ト・アデューシン６３蛋白と５９％相同した。

【００６３】また、該ヒト・アデューシン様７０蛋白の
カルボキシル末端（６４０−６７３残基）は、２６の親
水性残基（１２のリジン残基）を有していた。更に、こ
の領域は、プロティン・キナーゼＣリン酸化部位を有
し、またカルモデュリン結合が存在するヒト赤血球アデ
ューシン蛋白との間で特に強く保存されていた。一方、
Ｎ末端部分は、親水性残基と疎水性残基とからなってい
た。

【００６４】本発明ヒト・アデューシン様７０蛋白のア
ミノ酸配列と、スペクトリン・スーパーファミリーのヒ
トαアクチニン(Youssoufian, H.,et al., Am. J. Hum.
Genet., 47, 62-71 (1990))、ヒト赤血球βスペクトリ
ン(Winklelmann, J., et al., J. Biol. Chem., 265, 1
1827-11832 (1990))、ヒト・ジストロフィン(dystrophi
n; Koenig, M., et al., Cell, 53, 219-228 (1987))及
びＡＢＰ−１２０(Dictyostelim; Bresnick, A.R., et
al., J. Biol. Chem., 265, 9236-9240 (1990))のＮ末
端Ｆ−アクチン領域との比較を行なった結果、これらの
蛋白のうちで２７アミノ酸領域は６０−８０％保存され
ており、ＡＢＰ−１２０によるアクチン結合に必須であ
ることが示された。

【００６５】本発明ヒト・アデューシン様７０蛋白は、
上記２７アミノ酸領域内に７つの同一残基と５つの置換
可能なアミノ酸を有していた。

【００６６】（３）ノーザンブロット分析 正常ヒト組織におけるヒト・アデューシン様７０ｍＲＮ
Ａの発現をランダム・オリゴヌクレオチド・プライミン
グ法によって標識したヒトｃＤＮＡクローンをプローブ
とするノーザンブロットにより評価した。

【００６７】ノーザンブロット分析は、製品使用法に従
い、ヒトＭＴＮブロット（HumanMultiple Tissue Nothe
rn blot ; クローンテック社製、パロ・アルト、カリフ
ォルニア、米国）を用いて実施した。

【００６８】即ち、上記ＧＥＮ−０２８Ｆ０７ｃＤＮＡ
クローンのＰＣＲ増幅産物を〔³²Ｐ〕−ｄＣＴＰ（ラン
ダムプライムドＤＮＡラベリングキット、ベーリンガー
マンハイム社）により標識してプローブとした。 ブロ
ッティングは、４時間プレハイブリダイズ後、４２℃で
１８時間、５０％ホルムアミド／６×ＳＳＣ／１０×デ
ンハルツ溶液／２％ＳＤＳ溶液（１００μｇ／ｍｌ変性
サケ精子ＤＮＡ含有）の溶液中でハイブリダイズした。

【００６９】２×ＳＳＣ／０．０５％ＳＤＳにて室温下
にて４０分洗浄後、次いで０．１×ＳＳＣ／０．０１％
ＳＤＳにて５５℃下に２０分間で２回洗浄した。フィル
ターは−８０℃下に６０時間、Ｘ線フィルム(コダック
社製)に対して露光した。

【００７０】その結果、試験したヒト心臓、脳、胎盤、
肺、肝臓、骨格筋、腎臓、膵臓、脾臓、甲状腺、前立
腺、精巣、卵巣、小腸、大腸、末梢血白血球の１６の組
織にサイズが４キロ塩基の転写体が発現していたが、そ
のうち、心臓及び膵臓において最も高かった。しかしな
がら、前立腺においては、非常にわずかなヒト・アデュ
ーシン様７０ｍＲＮＡの発現しか認められなかった。

【００７１】（４）ＦＩＳＨによるコスミド・クローン
と染色体の局在 ヒト・アデューシン様７０ｃＤＮＡに対応するコスミド
を得た。上記によって得られたコスミドクローンを、複
製プロメタフェーズＲ−バンドと組合わせたＦＩＳＨに
基づく技術であるダイレクトＲ−バィンディング・フル
オレッセン・インサイチュー・ハイブリダイゼーション
(ＦＩＳＨ)によるマッピングのためのプローブとして使
用した(Takahashi E., et al, Hum. Genet., 86, 14-16
(1990):Takahashi E., et al, Hum. Genet., 88, 119-1
21(1991))。

【００７２】尚、これらのクローンに供されている反復
配列によるバックグラウンドの抑制のために、リヒター
(Lichter P. et al., Proc. Natl. Sci. U.S.A., 87, 6
634-6638(1990))によって記載された方法を少し修飾し
て１０倍過剰のヒトＣｏｔ−１ＤＮＡ(ＢＲＬ社製)を加
えた。

【００７３】標識、ハイブリダイゼーション、洗浄、検
出は、通常の方法に従い実施した。プロビア１００フィ
ルム(フジＩＳＯ１００；フジ・フィルム社製)を顕微鏡
写真撮影のために用いた(フィルター・コンビネーショ
ン、ニコンＢ−２Ａ)。

【００７４】観察の結果の１００の典型的なＲ−バンド
分染染色体プレートの第１０染色体のバンドｑ２４．２
−ｑ２４．３で両ホモログの１つ或は２つの明瞭の明確
なスポットが認められた。

【００７５】従って、ヒト・アデューシン様７０は、染
色体バンド１０ｑ２４．２−１０ｑ２４．３に局在して
いることが確認された。

【００７６】上記のようにヒト・アデューシン様７０遺
伝子は、様々な組織において広く発現し、その遺伝子産
物が、ヒト赤血球アデューシンと同様にスペクトリン−
アクチン・ネットワークの構築を促進すると考えられ、
そして上皮組織において細胞−細胞間接着部位に局在す
ることから、細胞骨格系の構築に重要であると考えられ
る。従って、該ヒト・アデューシン様７０遺伝子は、細
胞骨格系形成に重要な役割を演じ、細胞の生存に必須の
機能を持ち、生命維持のために必須であると考えられ
る。本発明によれば、新規なヒト・アデューシン様７０
遺伝子が提供され、該遺伝子を用いれば、該遺伝子の各
種組織での発現の検出や、ヒト・アデューシン様７０蛋
白の遺伝子工学的製造が可能となり、これらにより、発
現蛋白の機能解析の研究並びに細胞骨格系形成に関する
研究等が可能となり、これらの機能に関与する疾患、例
えば、細胞間接着の異常や細胞骨格系の異常による上皮
細胞の脆弱性のために起こる水疱症や天疱瘡、または癌
の転移、浸潤には多くのステップの関与が考えられるが
細胞間の接着性がこのシステムに関与しているかもしれ
ない。従って、これらの疾病等の病態解明や診断、治療
等が可能となると考えられるほか、本発明遺伝子の染色
体の座位を同じくするチトクロームＰ−４５０、レチノ
ール結合タンパク４(Retinol-binding protein-4)、亜
鉛フィンガー蛋白３２(Zinc finger protein-32)、ホメ
オボックス１１(Homeo box 11)、ウロキナーゼ(Urokina
se)、リパーゼＡ(lipase A)、アドレナリン・レセプタ
ー(Adrenergic receptor)、アポトーシス抗原１、キネ
シン様１(Kinesin-like-1)等が関る疾患の発生と進展と
の係わりを研究することが可能となる。

【００７７】

【配列表】

【００７８】配列番号：１ 配列の長さ：６７４ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直線状 配列の種類：蛋白 配列： Met Ser Ser Asp Ala Ser Gln Gly Val Ile Thr Thr Pro Pro Pro Pro 1 5 10 15 Ser Met Pro His Lys Glu Arg Tyr Phe Asp Arg Ile Asn Glu Asn Asp 20 25 30 Pro Glu Tyr Ile Arg Glu Arg Asn Met Ser Pro Asp Leu Arg Gln Asp 35 40 45 Ser Ser Met Met Glu Gln Arg Lys Arg Val Thr Arg Ile Leu Gln Ser 50 55 60 Pro Ala Phe Arg Glu Asp Leu Glu Cys Leu Ile Gln Glu Gln Met Lys 65 70 75 80 Lys Gly His Asn Pro Thr Gly Leu Leu Ala Leu Gln Gln Ile Ala Asp 85 90 95 Tyr Ile Met Ala Asn Ser Phe Ser Gly Phe Ser Ser Pro Pro Leu Ser 100 105 110 Leu Gly Met Val Thr Pro Ile Asn Asp Leu Pro Gly Ala Asp Thr Ser 115 120 125 Ser Tyr Val Lys Gly Glu Lys Leu Thr Arg Cys Lys Leu Ala Ser Leu 130 135 140 Tyr Arg Leu Val Asp Leu Phe Gly Trp Ala His Leu Ala Asn Thr Tyr 145 150 155 160 Ile Ser Val Arg Ile Ser Lys Glu Gln Asp His Ile Ile Ile Ile Pro 165 170 175 Arg Gly Leu Ser Phe Ser Glu Ala Thr Ala Ser Asn Leu Val Lys Val 180 185 190 Asn Ile Ile Gly Glu Val Val Asp Gln Gly Ser Thr Asn Leu Lys Ile 195 200 205 Asp His Thr Gly Phe Ser Pro His Ala Ala Ile Tyr Ser Thr Arg Pro 210 215 220 Asp Val Lys Cys Val Ile His Ile His Thr Leu Ala Thr Ala Ala Val 225 230 235 240 Ser Ser Met Lys Cys Gly Ile Leu Pro Ile Ser Gln Glu Ser Leu Leu 245 250 255 Leu Gly Asp Val Ala Tyr Tyr Asp Tyr Gln Gly Ser Leu Glu Glu Gln 260 265 270 Glu Glu Arg Ile Gln Leu Gln Lys Val Leu Gly Pro Ser Cys Lys Val 275 280 285 Leu Val Leu Arg Asn His Gly Val Val Ala Leu Gly Glu Thr Leu Glu 290 295 300 Glu Ala Phe His Tyr Ile Phe Asn Val Gln Leu Ala Cys Glu Ile Gln 305 310 315 320 Val Gln Ala Leu Ala Gly Ala Gly Gly Val Asp Asn Leu His Val Leu 325 330 335 Asp Phe Gln Lys Tyr Lys Ala Phe Thr Tyr Thr Val Ala Ala Ser Gly 340 345 350 Gly Gly Gly Val Asn Met Gly Ser His Gln Lys Trp Lys Val Gly Glu 355 360 365 Ile Glu Phe Glu Gly Leu Met Arg Thr Leu Asp Asn Leu Gly Tyr Arg 370 375 380 Thr Gly Tyr Ala Tyr Arg His Pro Leu Ile Arg Glu Lys Pro Arg His 385 390 395 400 Lys Ser Asp Val Glu Ile Pro Ala Thr Val Thr Ala Phe Ser Phe Glu 405 410 415 Asp Asp Thr Val Leu Leu Ser Pro Leu Lys Tyr Met Ala Gln Arg Gln 420 425 430 Gln Arg Glu Lys Thr Arg Trp Leu Asn Ser Pro Asn Thr Tyr Met Lys 435 440 445 Val Asn Val Pro Glu Glu Ser Arg Asn Gly Glu Thr Ser Pro Arg Thr 450 455 460 Lys Ile Thr Trp Met Lys Ala Glu Asp Ser Ser Lys Val Ser Gly Gly 465 470 475 480 Thr Pro Ile Lys Ile Glu Asp Pro Asn Gln Phe Val Pro Leu Asn Thr 485 490 495 Asn Pro Asn Glu Val Leu Glu Lys Arg Asn Lys Ile Arg Glu Gln Asn 500 505 510 Arg Tyr Asp Leu Lys Thr Ala Gly Pro Gln Ser Gln Leu Leu Ala Gly 515 520 525 Ile Val Val Asp Lys Pro Pro Ser Thr Met Gln Phe Glu Asp Asp Asp 530 535 540 His Gly Pro Pro Ala Pro Pro Asn Pro Phe Ser His Leu Thr Glu Gly 545 550 555 560 Glu Leu Glu Glu Tyr Lys Arg Thr Ile Glu Arg Lys Gln Gln Gly Leu 565 570 575 Glu Glu Asn His Glu Leu Phe Ser Lys Ser Phe Ile Ser Met Glu Val 580 585 590 Pro Val Met Val Val Asn Gly Lys Asp Asp Met His Asp Val Glu Asp 595 600 605 Glu Leu Ala Lys Arg Val Ser Arg Leu Ser Thr Ser Thr Thr Ile Glu 610 615 620 Asn Ile Glu Ile Thr Ile Lys Ser Pro Glu Lys Ile Glu Glu Val Leu 625 630 635 640 Ser Pro Glu Gly Ser Pro Ser Lys Ser Pro Ser Lys Lys Lys Lys Lys 645 650 655 Phe Arg Thr Pro Ser Phe Leu Lys Lys Asn Lys Lys Lys Glu Lys Val 660 665 670 Glu Ala

【００７９】配列番号：２ 配列の長さ：２０２２ 配列の型：核酸 鎖の数：一本鎖 トポロジー：直線状 配列の種類：DNA (genomic) 配列： ATGAGCTCAG ATGCCAGCCA AGGCGTGATT ACCACTCCTC CTCCTCCCAG CATGCCTCAC 60 AAAGAGAGAT ATTTTGACCG CATCAATGAA AATGACCCAG AATACATTAG GGAGAGGAAC 120 ATGTCTCCTG ATCTACGACA AGACTCCAGC ATGATGGAGC AGAGGAAACG AGTTACTCGG 180 ATCCTGCAAA GTCCTGCCTT TCGGGAAGAC TTGGAATGCC TTATTCAAGA ACAGATGAAG 240 AAAGGCCACA ACCCAACTGG ATTACTAGCA TTACAGCAGA TTGCAGATTA CATCATGGCC 300 AATTCTTTCT CGGGTTTTTC TTCACCTCCT CTCAGTCTTG GCATGGTCAC ACCTATCAAT 360 GACCTTCCTG GTGCAGATAC ATCCTCATAT GTGAAGGGAG AAAAACTTAC TCGCTGTAAA 420 CTTGCCAGCC TGTACAGACT TGTAGACTTG TTTGGATGGG CACACCTGGC AAATACCTAT 480 ATCTCAGTAA GAATAAGTAA GGAGCAAGAC CACATTATAA TAATTCCCAG AGGCCTATCT 540 TTTTCTGAAG CTACAGCCTC CAATTTGGTG AAAGTCAATA TAATAGGAGA AGTGGTTGAC 600 CAGGGAAGTA CCAATTTGAA AATTGACCAT ACAGGATTCA GTCCCCATGC TGCAATCTAT 660 TCAACACGTC CTGATGTTAA GTGTGTGATA CACATCCATA CCCTTGCAAC AGCAGCTGTA 720 TCCTCCATGA AATGTGGGAT CCTTCCAATT TCTCAAGAGT CTCTTCTTCT GGGAGATGTT 780 GCCTATTATG ACTACCAAGG GTCACTTGAA GAACAGGAGG AGAGAATTCA ACTGCAGAAG 840 GTTCTGGGAC CAAGTTGTAA AGTGCTGGTA CTCAGGAATC ATGGTGTGGT TGCACTTGGA 900 GAAACATTAG AGGAGGCTTT TCATTATATT TTTAATGTGC AACTAGCCTG TGAGATTCAG 960 GTGCAGGCCC TAGCAGGTGC AGGTGGAGTA GACAATCTCC ATGTACTGGA CTTTCAGAAG 1020 TATAAAGCTT TCACTTACAC TGTAGCAGCG TCTGGTGGAG GAGGTGTGAA TATGGGTTCC 1080 CATCAAAAAT GGAAGGTTGG CGAAATTGAG TTTGAAGGGC TTATGAGGAC TCTGGACAAC 1140 TTGGGGTATA GAACAGGCTA TGCTTACAGG CATCCTCTCA TTCGAGAGAA GCCTAGGCAC 1200 AAGAGTGATG TGGAAATCCC AGCAACTGTG ACTGCTTTTT CCTTTGAAGA CGATACAGTG 1260 CTACTCTCTC CTCTCAAATA CATGGCACAG AGGCAACAGC GTGAAAAAAC AAGATGGCTG 1320 AACTCACCAA ATACTTACAT GAAAGTGAAT GTGCCTGAGG AGTCTCGGAA CGGAGAAACC 1380 AGTCCCCGAA CCAAAATCAC GTGGATGAAA GCAGAAGACT CATCTAAAGT TAGTGGTGGA 1440 ACACCTATCA AAATTGAAGA TCCAAATCAG TTTGTTCCTT TAAACACAAA CCCGAATGAG 1500 GTACTAGAAA AGAGAAATAA GATTCGGGAA CAAAATCGAT ATGACTTGAA AACAGCAGGA 1560 CCACAATCTC AGTTGCTTGC TGGAATTGTT GTGGATAAGC CACCTTCTAC TATGCAATTT 1620 GAAGATGATG ATCATGGCCC ACCAGCTCCT CCTAACCCAT TTAGTCATCT CACAGAAGGA 1680 GAACTTGAAG AGTATAAGAG GACAATCGAA CGTAAACAAC AAGGCCTAGA AGAAAACCAT 1740 GAGCTGTTTT CCAAGAGCTT CATCTCCATG GAAGTGCCTG TCATGGTAGT AAATGGCAAG 1800 GATGATATGC ATGATGTTGA AGATGAGCTT GCTAAGCGAG TGAGTAGGTT AAGCACAAGT 1860 ACAACCATAG AAAACATCGA GATTACTATT AAGTCTCCAG AGAAAATCGA AGAAGTCCTG 1920 TCACCTGAAG GCTCCCCTTC AAAATCGCCA TCCAAGAAAA AGAAGAAATT CCGCACTCCT 1980 TCTTTTCTGA AAAAGAACAA AAAAAAGGAG AAAGTTGAGG CC 2022

【００８０】配列番号：３ 配列の長さ：２９２０ 配列の型：核酸 鎖の数：一本鎖 トポロジー：直線状 配列の種類：DNA (cDNA) 配列の特徴： 特徴を表わす記号：CDS 存在位置：１８４．．２２０５ 特徴を決定した方法：Ｅ 配列： ＴＣＴＧＧＴＴＣＧＧ ＣＣＣＡＣＣＴＣＴＧ ＡＡＧＧＴＴＣＣＡＧ ＡＡＴ
ＣＧＡＴＡＧＴ ＧＡＡＴＴＣＧＴＧＧ ＡＧＴＡＧＧＴＴＴＣ ６０ ＴＧＴＧＣＡＧＣＡＴ ＴＧＣＡＧＡＡＴＣＣ ＡＣＡＣＣＴＡＧＡＧ ＡＡＣ
ＡＧＡＡＧＡＣ ＡＣＡＧＡＣＡＣＧＴ ＡＣＧＴＣＴＡＣＴＡ １２０ ＣＣＣＴＴＧＴＴＡＧ ＡＡＧＧＡＡＧＣＴＴ ＴＧＧＡＴＣＴＴＣＧ ＧＴＧ
ＧＡＴＡＡＣＡ ＡＧＡＧＴＡＡＴＣＣ ＡＣＡＧＡＣＴＴＡＡ １８０ ＡＡＣ ＡＴＧ ＡＧＣ ＴＣＡ ＧＡＴ ＧＣＣ ＡＧＣ ＣＡＡ ＧＧＣ
ＧＴＧ ＡＴＴ ＡＣＣ ＡＣＴ ＣＣＴ ＣＣＴ ＣＣＴ ２２８ Ｍｅｔ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ａｓｐ Ａｌａ Ｓｅｒ Ｇｌｎ Ｇｌｙ
Ｖａｌ Ｉｌｅ Ｔｈｒ Ｔｈｒ Ｐｒｏ Ｐｒｏ Ｐｒｏ １ ５
１０ １５ ＣＣＣ ＡＧＣ ＡＴＧ ＣＣＴ ＣＡＣ ＡＡＡ ＧＡＧ ＡＧＡ ＴＡＴ
ＴＴＴ ＧＡＣ ＣＧＣ ＡＴＣ ＡＡＴ ＧＡＡ ＡＡＴ ２７６ Ｐｒｏ Ｓｅｒ Ｍｅｔ Ｐｒｏ Ｈｉｓ Ｌｙｓ Ｇｌｕ Ａｒｇ Ｔｙｒ
Ｐｈｅ Ａｓｐ Ａｒｇ Ｉｌｅ Ａｓｎ Ｇｌｕ Ａｓｎ ２０
２５ ３０ ＧＡＣ ＣＣＡ ＧＡＡ ＴＡＣ ＡＴＴ ＡＧＧ ＧＡＧ ＡＧＧ ＡＡＣ
ＡＴＧ ＴＣＴ ＣＣＴ ＧＡＴ ＣＴＡ ＣＧＡ ＣＡＡ ３２４ Ａｓｐ Ｐｒｏ Ｇｌｕ Ｔｙｒ Ｉｌｅ Ａｒｇ Ｇｌｕ Ａｒｇ Ａｓｎ
Ｍｅｔ Ｓｅｒ Ｐｒｏ Ａｓｐ Ｌｅｕ Ａｒｇ Ｇｌｎ ３５ ４０
４５ ＧＡＣ ＴＣＣ ＡＧＣ ＡＴＧ ＡＴＧ ＧＡＧ ＣＡＧ ＡＧＧ ＡＡＡ
ＣＧＡ ＧＴＴ ＡＣＴ ＣＧＧ ＡＴＣ ＣＴＧ ＣＡＡ ３７２ Ａｓｐ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｍｅｔ Ｍｅｔ Ｇｌｕ Ｇｌｎ Ａｒｇ Ｌｙｓ
Ａｒｇ Ｖａｌ Ｔｈｒ Ａｒｇ Ｉｌｅ Ｌｅｕ Ｇｌｎ ５０ ５５
６０ ＡＧＴ ＣＣＴ ＧＣＣ ＴＴＴ ＣＧＧ ＧＡＡ ＧＡＣ ＴＴＧ ＧＡＡ
ＴＧＣ ＣＴＴ ＡＴＴ ＣＡＡ ＧＡＡ ＣＡＧ ＡＴＧ ４２０ Ｓｅｒ Ｐｒｏ Ａｌａ Ｐｈｅ Ａｒｇ Ｇｌｕ Ａｓｐ Ｌｅｕ Ｇｌｕ
Ｃｙｓ Ｌｅｕ Ｉｌｅ Ｇｌｎ Ｇｌｕ Ｇｌｎ Ｍｅｔ ６５ ７０
７５ ＡＡＧ ＡＡＡ ＧＧＣ ＣＡＣ ＡＡＣ ＣＣＡ ＡＣＴ ＧＧＡ ＴＴＡ
ＣＴＡ ＧＣＡ ＴＴＡ ＣＡＧ ＣＡＧ ＡＴＴ ＧＣＡ ４６８ Ｌｙｓ Ｌｙｓ Ｇｌｙ Ｈｉｓ Ａｓｎ Ｐｒｏ Ｔｈｒ Ｇｌｙ Ｌｅｕ
Ｌｅｕ Ａｌａ Ｌｅｕ Ｇｌｎ Ｇｌｎ Ｉｌｅ Ａｌａ ８０ ８５
９０ ９５ ＧＡＴ ＴＡＣ ＡＴＣ ＡＴＧ ＧＣＣ ＡＡＴ ＴＣＴ ＴＴＣ ＴＣＧ
ＧＧＴ ＴＴＴ ＴＣＴ ＴＣＡ ＣＣＴ ＣＣＴ ＣＴＣ ５１６ Ａｓｐ Ｔｙｒ Ｉｌｅ Ｍｅｔ Ａｌａ Ａｓｎ Ｓｅｒ Ｐｈｅ Ｓｅｒ
Ｇｌｙ Ｐｈｅ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｐｒｏ Ｐｒｏ Ｌｅｕ １００
１０５ １１０ ＡＧＴ ＣＴＴ ＧＧＣ ＡＴＧ ＧＴＣ ＡＣＡ ＣＣＴ ＡＴＣ ＡＡＴ
ＧＡＣ ＣＴＴ ＣＣＴ ＧＧＴ ＧＣＡ ＧＡＴ ＡＣＡ ５６４ Ｓｅｒ Ｌｅｕ Ｇｌｙ Ｍｅｔ Ｖａｌ Ｔｈｒ Ｐｒｏ Ｉｌｅ Ａｓｎ
Ａｓｐ Ｌｅｕ Ｐｒｏ Ｇｌｙ Ａｌａ Ａｓｐ Ｔｈｒ １１５ １２０
１２５ ＴＣＣ ＴＣＡ ＴＡＴ ＧＴＧ ＡＡＧ ＧＧＡ ＧＡＡ ＡＡＡ ＣＴＴ
ＡＣＴ ＣＧＣ ＴＧＴ ＡＡＡ ＣＴＴ ＧＣＣ ＡＧＣ ６１２ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｔｙｒ Ｖａｌ Ｌｙｓ Ｇｌｙ Ｇｌｕ Ｌｙｓ Ｌｅｕ
Ｔｈｒ Ａｒｇ Ｃｙｓ Ｌｙｓ Ｌｅｕ Ａｌａ Ｓｅｒ １３０ １３５
１４０ ＣＴＧ ＴＡＣ ＡＧＡ ＣＴＴ ＧＴＡ ＧＡＣ ＴＴＧ ＴＴＴ ＧＧＡ
ＴＧＧ ＧＣＡ ＣＡＣ ＣＴＧ ＧＣＡ ＡＡＴ ＡＣＣ ６６０ Ｌｅｕ Ｔｙｒ Ａｒｇ Ｌｅｕ Ｖａｌ Ａｓｐ Ｌｅｕ Ｐｈｅ Ｇｌｙ
Ｔｒｐ Ａｌａ Ｈｉｓ Ｌｅｕ Ａｌａ Ａｓｎ Ｔｈｒ １４５ １５０
１５５ ＴＡＴ ＡＴＣ ＴＣＡ ＧＴＡ ＡＧＡ ＡＴＡ ＡＧＴ ＡＡＧ ＧＡＧ
ＣＡＡ ＧＡＣ ＣＡＣ ＡＴＴ ＡＴＡ ＡＴＡ ＡＴＴ ７０８ Ｔｙｒ Ｉｌｅ Ｓｅｒ Ｖａｌ Ａｒｇ Ｉｌｅ Ｓｅｒ Ｌｙｓ Ｇｌｕ
Ｇｌｎ Ａｓｐ Ｈｉｓ Ｉｌｅ Ｉｌｅ Ｉｌｅ Ｉｌｅ １６０ １６５
１７０ １７５ ＣＣＣ ＡＧＡ ＧＧＣ ＣＴＡ ＴＣＴ ＴＴＴ ＴＣＴ ＧＡＡ ＧＣＴ
ＡＣＡ ＧＣＣ ＴＣＣ ＡＡＴ ＴＴＧ ＧＴＧ ＡＡＡ ７５６ Ｐｒｏ Ａｒｇ Ｇｌｙ Ｌｅｕ Ｓｅｒ Ｐｈｅ Ｓｅｒ Ｇｌｕ Ａｌａ
Ｔｈｒ Ａｌａ Ｓｅｒ Ａｓｎ Ｌｅｕ Ｖａｌ Ｌｙｓ １８０
１８５ １９０ ＧＴＣ ＡＡＴ ＡＴＡ ＡＴＡ ＧＧＡ ＧＡＡ ＧＴＧ ＧＴＴ ＧＡＣ
ＣＡＧ ＧＧＡ ＡＧＴ ＡＣＣ ＡＡＴ ＴＴＧ ＡＡＡ ８０４ Ｖａｌ Ａｓｎ Ｉｌｅ Ｉｌｅ Ｇｌｙ Ｇｌｕ Ｖａｌ Ｖａｌ Ａｓｐ
Ｇｌｎ Ｇｌｙ Ｓｅｒ Ｔｈｒ Ａｓｎ Ｌｅｕ Ｌｙｓ １９５ ２００
２０５ ＡＴＴ ＧＡＣ ＣＡＴ ＡＣＡ ＧＧＡ ＴＴＣ ＡＧＴ ＣＣＣ ＣＡＴ
ＧＣＴ ＧＣＡ ＡＴＣ ＴＡＴ ＴＣＡ ＡＣＡ ＣＧＴ ８５２ Ｉｌｅ Ａｓｐ Ｈｉｓ Ｔｈｒ Ｇｌｙ Ｐｈｅ Ｓｅｒ Ｐｒｏ Ｈｉｓ
Ａｌａ Ａｌａ Ｉｌｅ Ｔｙｒ Ｓｅｒ Ｔｈｒ Ａｒｇ ２１０ ２１５
２２０ ＣＣＴ ＧＡＴ ＧＴＴ ＡＡＧ ＴＧＴ ＧＴＧ ＡＴＡ ＣＡＣ ＡＴＣ
ＣＡＴ ＡＣＣ ＣＴＴ ＧＣＡ ＡＣＡ ＧＣＡ ＧＣＴ ９００ Ｐｒｏ Ａｓｐ Ｖａｌ Ｌｙｓ Ｃｙｓ Ｖａｌ Ｉｌｅ Ｈｉｓ Ｉｌｅ
Ｈｉｓ Ｔｈｒ Ｌｅｕ Ａｌａ Ｔｈｒ Ａｌａ Ａｌａ ２２５ ２３０
２３５ ＧＴＡ ＴＣＣ ＴＣＣ ＡＴＧ ＡＡＡ ＴＧＴ ＧＧＧ ＡＴＣ ＣＴＴ
ＣＣＡ ＡＴＴ ＴＣＴ ＣＡＡ ＧＡＧ ＴＣＴ ＣＴＴ ９４８ Ｖａｌ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｍｅｔ Ｌｙｓ Ｃｙｓ Ｇｌｙ Ｉｌｅ Ｌｅｕ
Ｐｒｏ Ｉｌｅ Ｓｅｒ Ｇｌｎ Ｇｌｕ Ｓｅｒ Ｌｅｕ ２４０ ２４５
２５０ ２５５ ＣＴＴ ＣＴＧ ＧＧＡ ＧＡＴ ＧＴＴ ＧＣＣ ＴＡＴ ＴＡＴ ＧＡＣ
ＴＡＣ ＣＡＡ ＧＧＧ ＴＣＡ ＣＴＴ ＧＡＡ ＧＡＡ ９９６ Ｌｅｕ Ｌｅｕ Ｇｌｙ Ａｓｐ Ｖａｌ Ａｌａ Ｔｙｒ Ｔｙｒ Ａｓｐ
Ｔｙｒ Ｇｌｎ Ｇｌｙ Ｓｅｒ Ｌｅｕ Ｇｌｕ Ｇｌｕ ２６０
２６５ ２７０ ＣＡＧ ＧＡＧ ＧＡＧ ＡＧＡ ＡＴＴ ＣＡＡ ＣＴＧ ＣＡＧ ＡＡＧ
ＧＴＴ ＣＴＧ ＧＧＡ ＣＣＡ ＡＧＴ ＴＧＴ ＡＡＡ １０４４ Ｇｌｎ Ｇｌｕ Ｇｌｕ Ａｒｇ Ｉｌｅ Ｇｌｎ Ｌｅｕ Ｇｌｎ Ｌｙｓ
Ｖａｌ Ｌｅｕ Ｇｌｙ Ｐｒｏ Ｓｅｒ Ｃｙｓ Ｌｙｓ ２７５ ２８０
２８５ ＧＴＧ ＣＴＧ ＧＴＡ ＣＴＣ ＡＧＧ ＡＡＴ ＣＡＴ ＧＧＴ ＧＴＧ
ＧＴＴ ＧＣＡ ＣＴＴ ＧＧＡ ＧＡＡ ＡＣＡ ＴＴＡ １０９２ Ｖａｌ Ｌｅｕ Ｖａｌ Ｌｅｕ Ａｒｇ Ａｓｎ Ｈｉｓ Ｇｌｙ Ｖａｌ
Ｖａｌ Ａｌａ Ｌｅｕ Ｇｌｙ Ｇｌｕ Ｔｈｒ Ｌｅｕ ２９０ ２９５
３００ ＧＡＧ ＧＡＧ ＧＣＴ ＴＴＴ ＣＡＴ ＴＡＴ ＡＴＴ ＴＴＴ ＡＡＴ
ＧＴＧ ＣＡＡ ＣＴＡ ＧＣＣ ＴＧＴ ＧＡＧ ＡＴＴ １１４０ Ｇｌｕ Ｇｌｕ Ａｌａ Ｐｈｅ Ｈｉｓ Ｔｙｒ Ｉｌｅ Ｐｈｅ Ａｓｎ
Ｖａｌ Ｇｌｎ Ｌｅｕ Ａｌａ Ｃｙｓ Ｇｌｕ Ｉｌｅ ３０５ ３１０
３１５ ＣＡＧ ＧＴＧ ＣＡＧ ＧＣＣ ＣＴＡ ＧＣＡ ＧＧＴ ＧＣＡ ＧＧＴ
ＧＧＡ ＧＴＡ ＧＡＣ ＡＡＴ ＣＴＣ ＣＡＴ ＧＴＡ １１８８ Ｇｌｎ Ｖａｌ Ｇｌｎ Ａｌａ Ｌｅｕ Ａｌａ Ｇｌｙ Ａｌａ Ｇｌｙ
Ｇｌｙ Ｖａｌ Ａｓｐ Ａｓｎ Ｌｅｕ Ｈｉｓ Ｖａｌ ３２０ ３２５
３３０ ３３５ ＣＴＧ ＧＡＣ ＴＴＴ ＣＡＧ ＡＡＧ ＴＡＴ ＡＡＡ ＧＣＴ ＴＴＣ
ＡＣＴ ＴＡＣ ＡＣＴ ＧＴＡ ＧＣＡ ＧＣＧ ＴＣＴ １２３６ Ｌｅｕ Ａｓｐ Ｐｈｅ Ｇｌｎ Ｌｙｓ Ｔｙｒ Ｌｙｓ Ａｌａ Ｐｈｅ
Ｔｈｒ Ｔｙｒ Ｔｈｒ Ｖａｌ Ａｌａ Ａｌａ Ｓｅｒ ３４０
３４５ ３５０ ＧＧＴ ＧＧＡ ＧＧＡ ＧＧＴ ＧＴＧ ＡＡＴ ＡＴＧ ＧＧＴ ＴＣＣ
ＣＡＴ ＣＡＡ ＡＡＡ ＴＧＧ ＡＡＧ ＧＴＴ ＧＧＣ １２８４ Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｖａｌ Ａｓｎ Ｍｅｔ Ｇｌｙ Ｓｅｒ
Ｈｉｓ Ｇｌｎ Ｌｙｓ Ｔｒｐ Ｌｙｓ Ｖａｌ Ｇｌｙ ３５５ ３６０
３６５ ＧＡＡ ＡＴＴ ＧＡＧ ＴＴＴ ＧＡＡ ＧＧＧ ＣＴＴ ＡＴＧ ＡＧＧ
ＡＣＴ ＣＴＧ ＧＡＣ ＡＡＣ ＴＴＧ ＧＧＧ ＴＡＴ １３３２ Ｇｌｕ Ｉｌｅ Ｇｌｕ Ｐｈｅ Ｇｌｕ Ｇｌｙ Ｌｅｕ Ｍｅｔ Ａｒｇ
Ｔｈｒ Ｌｅｕ Ａｓｐ Ａｓｎ Ｌｅｕ Ｇｌｙ Ｔｙｒ ３７０ ３７５
３８０ ＡＧＡ ＡＣＡ ＧＧＣ ＴＡＴ ＧＣＴ ＴＡＣ ＡＧＧ ＣＡＴ ＣＣＴ
ＣＴＣ ＡＴＴ ＣＧＡ ＧＡＧ ＡＡＧ ＣＣＴ ＡＧＧ １３８０ Ａｒｇ Ｔｈｒ Ｇｌｙ Ｔｙｒ Ａｌａ Ｔｙｒ Ａｒｇ Ｈｉｓ Ｐｒｏ
Ｌｅｕ Ｉｌｅ Ａｒｇ Ｇｌｕ Ｌｙｓ Ｐｒｏ Ａｒｇ ３８５ ３９０
３９５ ＣＡＣ ＡＡＧ ＡＧＴ ＧＡＴ ＧＴＧ ＧＡＡ ＡＴＣ ＣＣＡ ＧＣＡ
ＡＣＴ ＧＴＧ ＡＣＴ ＧＣＴ ＴＴＴ ＴＣＣ ＴＴＴ １４２８ Ｈｉｓ Ｌｙｓ Ｓｅｒ Ａｓｐ Ｖａｌ Ｇｌｕ Ｉｌｅ Ｐｒｏ Ａｌａ
Ｔｈｒ Ｖａｌ Ｔｈｒ Ａｌａ Ｐｈｅ Ｓｅｒ Ｐｈｅ ４００ ４０５
４１０ ４１５ ＧＡＡ ＧＡＣ ＧＡＴ ＡＣＡ ＧＴＧ ＣＴＡ ＣＴＣ ＴＣＴ ＣＣＴ
ＣＴＣ ＡＡＡ ＴＡＣ ＡＴＧ ＧＣＡ ＣＡＧ ＡＧＧ １４７６ Ｇｌｕ Ａｓｐ Ａｓｐ Ｔｈｒ Ｖａｌ Ｌｅｕ Ｌｅｕ Ｓｅｒ Ｐｒｏ
Ｌｅｕ Ｌｙｓ Ｔｙｒ Ｍｅｔ Ａｌａ Ｇｌｎ Ａｒｇ ４２０
４２５ ４３０ ＣＡＡ ＣＡＧ ＣＧＴ ＧＡＡ ＡＡＡ ＡＣＡ ＡＧＡ ＴＧＧ ＣＴＧ
ＡＡＣ ＴＣＡ ＣＣＡ ＡＡＴ ＡＣＴ ＴＡＣ ＡＴＧ １５２４ Ｇｌｎ Ｇｌｎ Ａｒｇ Ｇｌｕ Ｌｙｓ Ｔｈｒ Ａｒｇ Ｔｒｐ Ｌｅｕ
Ａｓｎ Ｓｅｒ Ｐｒｏ Ａｓｎ Ｔｈｒ Ｔｙｒ Ｍｅｔ ４３５ ４４０
４４５ ＡＡＡ ＧＴＧ ＡＡＴ ＧＴＧ ＣＣＴ ＧＡＧ ＧＡＧ ＴＣＴ ＣＧＧ
ＡＡＣ ＧＧＡ ＧＡＡ ＡＣＣ ＡＧＴ ＣＣＣ ＣＧＡ １５７２ Ｌｙｓ Ｖａｌ Ａｓｎ Ｖａｌ Ｐｒｏ Ｇｌｕ Ｇｌｕ Ｓｅｒ Ａｒｇ
Ａｓｎ Ｇｌｙ Ｇｌｕ Ｔｈｒ Ｓｅｒ Ｐｒｏ Ａｒｇ ４５０ ４５５
４６０ ＡＣＣ ＡＡＡ ＡＴＣ ＡＣＧ ＴＧＧ ＡＴＧ ＡＡＡ ＧＣＡ ＧＡＡ
ＧＡＣ ＴＣＡ ＴＣＴ ＡＡＡ ＧＴＴ ＡＧＴ ＧＧＴ １６２０ Ｔｈｒ Ｌｙｓ Ｉｌｅ Ｔｈｒ Ｔｒｐ Ｍｅｔ Ｌｙｓ Ａｌａ Ｇｌｕ
Ａｓｐ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｌｙｓ Ｖａｌ Ｓｅｒ Ｇｌｙ ４６５ ４７０
４７５ ＧＧＡ ＡＣＡ ＣＣＴ ＡＴＣ ＡＡＡ ＡＴＴ ＧＡＡ ＧＡＴ ＣＣＡ
ＡＡＴ ＣＡＧ ＴＴＴ ＧＴＴ ＣＣＴ ＴＴＡ ＡＡＣ １６６８ Ｇｌｙ Ｔｈｒ Ｐｒｏ Ｉｌｅ Ｌｙｓ Ｉｌｅ Ｇｌｕ Ａｓｐ Ｐｒｏ
Ａｓｎ Ｇｌｎ Ｐｈｅ Ｖａｌ Ｐｒｏ Ｌｅｕ Ａｓｎ ４８０ ４８５
４９０ ４９５ ＡＣＡ ＡＡＣ ＣＣＧ ＡＡＴ ＧＡＧ ＧＴＡ ＣＴＡ ＧＡＡ ＡＡＧ
ＡＧＡ ＡＡＴ ＡＡＧ ＡＴＴ ＣＧＧ ＧＡＡ ＣＡＡ １７１６ Ｔｈｒ Ａｓｎ Ｐｒｏ Ａｓｎ Ｇｌｕ Ｖａｌ Ｌｅｕ Ｇｌｕ Ｌｙｓ
Ａｒｇ Ａｓｎ Ｌｙｓ Ｉｌｅ Ａｒｇ Ｇｌｕ Ｇｌｎ ５００
５０５ ５１０ ＡＡＴ ＣＧＡ ＴＡＴ ＧＡＣ ＴＴＧ ＡＡＡ ＡＣＡ ＧＣＡ ＧＧＡ
ＣＣＡ ＣＡＡ ＴＣＴ ＣＡＧ ＴＴＧ ＣＴＴ ＧＣＴ １７６４ Ａｓｎ Ａｒｇ Ｔｙｒ Ａｓｐ Ｌｅｕ Ｌｙｓ Ｔｈｒ Ａｌａ Ｇｌｙ
Ｐｒｏ Ｇｌｎ Ｓｅｒ Ｇｌｎ Ｌｅｕ Ｌｅｕ Ａｌａ ５１５ ５２０
５２５ ＧＧＡ ＡＴＴ ＧＴＴ ＧＴＧ ＧＡＴ ＡＡＧ ＣＣＡ ＣＣＴ ＴＣＴ
ＡＣＴ ＡＴＧ ＣＡＡ ＴＴＴ ＧＡＡ ＧＡＴ ＧＡＴ １８１２ Ｇｌｙ Ｉｌｅ Ｖａｌ Ｖａｌ Ａｓｐ Ｌｙｓ Ｐｒｏ Ｐｒｏ Ｓｅｒ
Ｔｈｒ Ｍｅｔ Ｇｌｎ Ｐｈｅ Ｇｌｕ Ａｓｐ Ａｓｐ ５３０ ５３５
５４０ ＧＡＴ ＣＡＴ ＧＧＣ ＣＣＡ ＣＣＡ ＧＣＴ ＣＣＴ ＣＣＴ ＡＡＣ
ＣＣＡ ＴＴＴ ＡＧＴ ＣＡＴ ＣＴＣ ＡＣＡ ＧＡＡ １８６０ Ａｓｐ Ｈｉｓ Ｇｌｙ Ｐｒｏ Ｐｒｏ Ａｌａ Ｐｒｏ Ｐｒｏ Ａｓｎ
Ｐｒｏ Ｐｈｅ Ｓｅｒ Ｈｉｓ Ｌｅｕ Ｔｈｒ Ｇｌｕ ５４５ ５５０
５５５ ＧＧＡ ＧＡＡ ＣＴＴ ＧＡＡ ＧＡＧ ＴＡＴ ＡＡＧ ＡＧＧ ＡＣＡ
ＡＴＣ ＧＡＡ ＣＧＴ ＡＡＡ ＣＡＡ ＣＡＡ ＧＧＣ １９０８ Ｇｌｙ Ｇｌｕ Ｌｅｕ Ｇｌｕ Ｇｌｕ Ｔｙｒ Ｌｙｓ Ａｒｇ Ｔｈｒ
Ｉｌｅ Ｇｌｕ Ａｒｇ Ｌｙｓ Ｇｌｎ Ｇｌｎ Ｇｌｙ ５６０ ５６５
５７０ ５７５ ＣＴＡ ＧＡＡ ＧＡＡ ＡＡＣ ＣＡＴ ＧＡＧ ＣＴＧ ＴＴＴ ＴＣＣ
ＡＡＧ ＡＧＣ ＴＴＣ ＡＴＣ ＴＣＣ ＡＴＧ ＧＡＡ １９５６ Ｌｅｕ Ｇｌｕ Ｇｌｕ Ａｓｎ Ｈｉｓ Ｇｌｕ Ｌｅｕ Ｐｈｅ Ｓｅｒ
Ｌｙｓ Ｓｅｒ Ｐｈｅ Ｉｌｅ Ｓｅｒ Ｍｅｔ Ｇｌｕ ５８０
５８５ ５９０ ＧＴＧ ＣＣＴ ＧＴＣ ＡＴＧ ＧＴＡ ＧＴＡ ＡＡＴ ＧＧＣ ＡＡＧ
ＧＡＴ ＧＡＴ ＡＴＧ ＣＡＴ ＧＡＴ ＧＴＴ ＧＡＡ ２００４ Ｖａｌ Ｐｒｏ Ｖａｌ Ｍｅｔ Ｖａｌ Ｖａｌ Ａｓｎ Ｇｌｙ Ｌｙｓ
Ａｓｐ Ａｓｐ Ｍｅｔ Ｈｉｓ Ａｓｐ Ｖａｌ Ｇｌｕ ５９５ ６００
６０５ ＧＡＴ ＧＡＧ ＣＴＴ ＧＣＴ ＡＡＧ ＣＧＡ ＧＴＧ ＡＧＴ ＡＧＧ
ＴＴＡ ＡＧＣ ＡＣＡ ＡＧＴ ＡＣＡ ＡＣＣ ＡＴＡ ２０５２ Ａｓｐ Ｇｌｕ Ｌｅｕ Ａｌａ Ｌｙｓ Ａｒｇ Ｖａｌ Ｓｅｒ Ａｒｇ
Ｌｅｕ Ｓｅｒ Ｔｈｒ Ｓｅｒ Ｔｈｒ Ｔｈｒ Ｉｌｅ ６１０ ６１５
６２０ ＧＡＡ ＡＡＣ ＡＴＣ ＧＡＧ ＡＴＴ ＡＣＴ ＡＴＴ ＡＡＧ ＴＣＴ
ＣＣＡ ＧＡＧ ＡＡＡ ＡＴＣ ＧＡＡ ＧＡＡ ＧＴＣ ２１００ Ｇｌｕ Ａｓｎ Ｉｌｅ Ｇｌｕ Ｉｌｅ Ｔｈｒ Ｉｌｅ Ｌｙｓ Ｓｅｒ
Ｐｒｏ Ｇｌｕ Ｌｙｓ Ｉｌｅ Ｇｌｕ Ｇｌｕ Ｖａｌ ６２５ ６３０
６３５ ＣＴＧ ＴＣＡ ＣＣＴ ＧＡＡ ＧＧＣ ＴＣＣ ＣＣＴ ＴＣＡ ＡＡＡ
ＴＣＧ ＣＣＡ ＴＣＣ ＡＡＧ ＡＡＡ ＡＡＧ ＡＡＧ ２１４８ Ｌｅｕ Ｓｅｒ Ｐｒｏ Ｇｌｕ Ｇｌｙ Ｓｅｒ Ｐｒｏ Ｓｅｒ Ｌｙｓ
Ｓｅｒ Ｐｒｏ Ｓｅｒ Ｌｙｓ Ｌｙｓ Ｌｙｓ Ｌｙｓ ６４０ ６４５
６５０ ６５５ ＡＡＡ ＴＴＣ ＣＧＣ ＡＣＴ ＣＣＴ ＴＣＴ ＴＴＴ ＣＴＧ ＡＡＡ
ＡＡＧ ＡＡＣ ＡＡＡ ＡＡＡ ＡＡＧ ＧＡＧ ＡＡＡ ２１９６ Ｌｙｓ Ｐｈｅ Ａｒｇ Ｔｈｒ Ｐｒｏ Ｓｅｒ Ｐｈｅ Ｌｅｕ Ｌｙｓ
Ｌｙｓ Ａｓｎ Ｌｙｓ Ｌｙｓ Ｌｙｓ Ｇｌｕ Ｌｙｓ ６６０
６６５ ６７０ ＧＴＴ ＧＡＧ ＧＣＣ ＴＡＡＡＴＡＡＡＧＴ ＣＴＴＴＴＴＡＴＡＡ ＴＴ
ＡＴＴＡＴＴＡＴ ＡＡＣＡＡＴＧＴＧＡ ２２４５ Ｖａｌ Ｇｌｕ Ａｌａ
ＣＡＴＴＧＣＡＣＡＴ ＣＴＡＡＡＴＡＣＣＡ ＣＡＴＴＴＡＡＧＴＴ ＧＡＴ
ＣＡＴＴＡＡＴ ＡＴＧＣＡＡＴＧＧＴ ＡＧＡＴＣＡＧＡＴＴ ２３０５ ＧＧＧＧＧＡＴＧＴＡ ＧＣＡＡＡＣＴＧＧＡ ＣＴＴＴＡＡＧＡＡＣ ＴＧＧ
ＡＡＡＧＡＧＧ ＴＴＴＴＡＣＡＡＡＡ ＧＡＡＡＡＡＣＴＴＴ ２３６５ ＣＡＧＡＴＴＣＡＴＣ ＴＣＴＣＡＴＴＴＴＡ ＴＡＴＧＴＣＣＡＧＡ ＡＡＴ
ＧＧＣＴＴＴＧ ＡＡＴＴＴＴＡＡＧＣ ＡＡＴＴＡＣＴＡＧＴ ２４２５ ＴＴＴＡＡＴＴＡＧＣ ＴＣＴＧＣＣＣＴＣＡ ＴＧＡＡＧＴＡＴＴＡ ＴＴＡ
ＴＡＡＴＴＣＡ ＣＣＡＴＡＡＡＣＡＧ ＣＴＡＴＣＴＧＴＣＴ ２４８５ ＧＡＡＴＴＡＣＴＴＣ ＡＧＧＣＣＴＴＣＴＣ ＣＡＴＡＡＴＡＴＣＴ ＧＴＴ
ＡＧＡＡＡＧＡ ＡＡＴＴＧＣＣＡＧＴ ＧＡＧＣＡＡＧＴＧＡ ２５４５ ＧＡＡＴＴＴＴＴＡＴ ＴＴＣＴＣＡＡＴＡＣ ＣＴＧＣＴＴＣＡＣＴ ＴＧＡ
ＴＡＡＴＣＡＴ ＡＴＴＡＴＡＡＴＴＴ ＴＴＴＡＴＣＡＴＧＡ ２６０５ ＴＴＡＴＴＧＡＣＴＡ ＴＡＴＴＴＴＴＧＧＡ ＧＴＣＣＣＡＴＴＧＴ ＴＴＣ
ＡＧＴＧＧＧＣ ＡＴＴＡＡＣＡＧＡＡ ＴＧＣＴＴＴＡＡＡＡ ２６６５ ＡＣＴＴＣＴＡＡＧＡ ＣＡＡＧＡＡＴＣＴＡ ＴＡＧＣＡＴＴＡＧＴ ＡＴＡ
ＣＡＣＴＧＧＣ ＡＣＡＴＡＡＴＴＴＴ ＴＴＡＡＡＡＡＧＴＴ ２７２５ ＴＴＡＡＧＡＡＡＡＧ ＡＴＴＣＡＴＴＴＧＧ ＡＡＴＴＴＴＡＴＴＣ ＡＣＡ
ＧＴＡＴＡＡＡ ＡＴＴＴＣＣＴＣＡＣ ＣＴＧＡＡＧＴＡＡＣ ２７８５ ＴＴＴＧＴＴＴＧＣＣ ＡＡＡＡＡＡＧＴＴＧ ＴＴＴＴＡＡＴＡＡＡ ＣＴＡ
ＴＡＡＴＴＴＴ ＴＧＡＡＡＡＣＴＴＣ ＣＴＴＴＴＴＴＡＴＴ ２８４５ ＡＧＴＴＴＡＧＡＡＡ ＧＣＣＣＣＴＴＡＴＴ ＴＴＴＣＡＡＣＡＡＡ ＧＧＧ
ＧＡＴＴＴＴＧ ＴＡＣＡＣＡＴＡＡＣ ＡＴＧＧＧＴＴＡＴＴ ２９０５ ＴＡＧＴＴＴＡＡＣＴ ＣＴＧＧＣ
２９２０

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 // Ｃ０７Ｋ 14/47 Ｃ０７Ｋ 14/47 (Ｃ１２Ｎ 15/09 ＺＮＡ Ｃ１２Ｒ 1:91） (Ｃ１２Ｐ 21/02 Ｃ１２Ｒ 1:91） (72)発明者 川井 篤 徳島県板野郡松茂町広島字南川向52−17 (72)発明者 奥野 史郎 徳島県徳島市川内町金岡64−１−701 (72)発明者 中村 祐輔 神奈川県横浜市緑区あざみ野３−４−１− 401 (72)発明者 高橋 永一 徳島県徳島市南矢三町２−５−22 (72)発明者 平井 嘉勝 大阪府吹田市清水６丁目１番302号

Claims (3)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】配列番号：１で示されるアミノ酸配列をコ
   ードする塩基配列を含むことを特徴とするヒト・アデュ
   ーシン様７０遺伝子。
2. 【請求項２】配列番号：２で示される塩基配列を含むこ
   とを特徴とするヒト・アデューシン様７０遺伝子。
3. 【請求項３】配列番号：３で示される塩基配列である請
   求項２に記載のヒト・アデューシン様７０遺伝子。